Bronchiolite oblitérante est le principal obstacle à la survie à long terme des greffés du poumon et de l'absence d'un modèle robuste préclinique empêche l'examen immunopathogenèse bronchiolite oblitérante. Contrairement à d'autres transplantations d'organes solides, vascularisée de la souris la transplantation pulmonaire n'a été que récemment mis au point. Ici, nous montrons notre modèle développé indépendamment bronchiolite oblitérante après murin orthotopique simple transplantation pulmonaire.
Transplantation pulmonaire orthotopique chez le rat a été d'abord rapporté par Asimacopoulos et collègues en 1971 1. Actuellement, cette méthode est bien acceptée et normalisée, non seulement pour l'étude d'allo-rejet, mais aussi entre les souches syngéniques pour examiner les mécanismes de l'ischémie-reperfusion après transplantation pulmonaire. Bien que l'application du rat et un autre modèle animal de grande taille 2 a contribué de manière significative à l'élucidation de ces études, la portée de ces enquêtes est limitée par la rareté des huitièmes de finale et les rats transgéniques. En raison de plus de traitements efficaces pour la bronchiolite oblitérante, la principale cause de décès chez les patients transplantés pulmonaires, il ya eu une recherche intensive de modèles pré-cliniques qui répliquent la bronchiolite oblitérante. Le modèle d'allogreffe trachéale est la plus largement utilisée et peut la reproduire quelques-unes des caractéristiques histopathologiques de la bronchiolite oblitérante 3. Toutefois, l'absence d'un vasculat intacteure sans aucun lien avec la conduite des voies respiratoires du destinataire, et incomplètes caractéristiques pathologiques de la bronchiolite oblitérante limiter l'utilité de ce modèle 4. Contrairement à la transplantation d'autres organes solides, des greffes vascularisées poumon de souris ont récemment été signalés par Okazaki et ses collègues pour la première fois en 2007 5. Appliquant les principes de base de la transplantation pulmonaire chez le rat, notre laboratoire a lancé le modèle en utilisant la bronchiolite oblitérante mineures histoincompatible antigènes murins orthotopiques transplantations pulmonaires unique gauche, qui permet l'étude plus approfondie de l'immunopathogenèse bronchiolite oblitérante 6.
Transplantation pulmonaire orthotopique chez la souris est difficile en raison des exigences microchirurgicales et de la fragilité extrême de tissus. Introduction de la technique du brassard a permis pour l'utilisation généralisée de la transplantation pulmonaire orthotopique chez le rat 8. Cela est devenu la base pour le développement du modèle de transplantation pulmonaire orthotopique chez la souris dans notre laboratoire. Chez les souris et les rats, contrairement aux humains, le poumon gauche contient un seul lobe et ne représente que 25% de la masse pulmonaire totale. Cela rend la transplantation pulmonaire gauche seule possible dans le modèle murin, sans la nécessité d'un système d'assistance circulatoire.
Nos interventions chirurgicales préliminaires ont révélé que la ventilation et la perfusion du poumon transplanté était fortement dépendante de la taille de PV anastomose. Spécifique taille PV brassard anastomotique ont été utilisés pour correspondre à des bailleurs de fonds et les bénéficiaires tel que rapporté 9. Manchette inapproprié dimensionnement a résulté en une atélectasie du poumon transplanté ou déhiscence de la ANAST PVomosis. Okazaki et al ont rapporté l'utilisation de ligature des vaisseaux combinée et la coupure de 5 bronches. Dans l'étude actuelle, nous utilisons un clip à anévrisme de toutes les structures hilaires, que nous proposons peut raccourcir le temps d'ischémie chaude. Une limitation de la greffe du poumon gauche orthotopique dans le modèle murin est que les animaux peuvent survivre après bénéficiaires allo-immune à médiation nécrose de leurs allogreffes 5. Par conséquent, les études de survie ne sont pas réalisables et d'évaluation du greffon dépend sur l'examen histologique du poumon transplanté 10.
En utilisant cette technique, nous avons développé un modèle préclinique de bronchiolite oblitérante chez la souris. Plus précisément, la souris donneuse est C57BL/10 et le destinataire est C57BL / 6. Ceci suggère le rôle d'un mineur, et non pas les grands, les antigènes d'histocompatibilité dans la pathogenèse bronchiolite oblitérante 6. En outre, nous avons rapporté la neutralisation de l'IL-17 empêche la bronchiolite oblitérante dans le modèle murin. Ce modeL représente un outil de recherche novateur pour l'examen de la transplantation pulmonaire et à la promotion des transplantations pulmonaires cliniques.
The authors have nothing to disclose.
Sources de financement: ce travail soutenu par les National Institutes of Health des subventions, des HL067177 HL096845 et P01AI084853 à DSW
Name of the equipment | Company | Catalogue number |
Zeiss Opmi 6SFC-1880 | Prescott’s Inc | PMZ014 |
Harvard Rodent Ventilator | Harvard Apparatus | 55-7058 |
20-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100510D |
22-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 081015S |
24-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100522A |
9/0 Meth Blue Virgin Silk | Ashaway Line & Twine Mfg. CO | MBVS-90 |
10-0 Alcon Surgical Suture | Alcon Laboratories, Inc | 8065-192101 |
Black Braided Silk 5-0/18inches | Henry Schein | M652630 |
Heparin Sodium 1000 units/ml | APP Pharmaceuticals | 407156 |
Betadine Solution | Purdue Product | 67618-150 |
Lactated Ringer’s injection | Hospira | NDC 0409-7953-03 |
Strain of the mice | Vendor | Age, Weight | Gender, Comments |
C57BL/10 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor |
C57BL/6 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor or recipient |
Table 2. Table of mice, specific reagents and equipment.