Obliterans bronkiolitt er nøkkelen hinder for langsiktig overlevelse av lungetransplanterte mottakere og mangelen på en robust preklinisk modell utelukker undersøke obliterans bronkiolitt immunopathogenesis. I motsetning til andre faste organtransplantasjoner, har vascularized mus lungetransplantasjon bare nylig blitt utviklet. Her viser vi vår utviklet uavhengig obliterans bronkiolitt modellen etter murine orthotopic single-lungetransplantasjon.
Orthotopic lungetransplantasjon i rotter ble først rapportert av Asimacopoulos og kolleger i 1971 1. Foreløpig er denne metoden godt akseptert og standardisert ikke bare for studier av allo-avvisning, men også mellom syngeneic stammer til å undersøke mekanismer for iskemi-reperfusjon skade etter lungetransplantasjon. Selv om anvendelsen av rotter og andre store dyr modell 2 bidratt vesentlig til klarlegging av disse studiene, er omfanget av de undersøkelser begrenset av knapphet på knockout og transgene rotter. Grunnet ingen effektiv behandling for obliterans bronkiolitt, den ledende dødsårsaken i lungetransplanterte pasienter, har det vært en intensiv søk etter pre-kliniske modeller som simulerer obliterans bronkiolitt. Den tracheal allograft modellen er den mest brukte, og kan gjengi noen av de histopatologiske trekk ved obliterans bronkiolitt tre. Men mangelen på en intakt vasculature uten tilknytning til mottakerens gjennomføre luftveiene, og ufullstendige patologiske trekk ved obliterans bronkiolitt begrense nytten av denne modellen 4. I motsetning til transplantasjon av andre faste organer, har vascularized mus lunge transplantasjoner kun nylig blitt rapportert av Okazaki og kolleger for første gang i 2007 5. Anvende de grunnleggende prinsippene i rotte lungetransplantasjon, innledet vår lab på obliterans bronkiolitt modellen med mindre histoincompatible antigen murine orthotopic single-venstre lunge transplantasjoner som gjør at videre studier av obliterans bronkiolitt immunopathogenesis 6.
Orthotopic lungetransplantasjon i mus er utfordrende på grunn mikrokirurgiske krav og ekstrem skjørhet av vev. Innføring av mansjetten teknikken har åpnet for utbredt bruk av orthotopic lungetransplantasjon i rotter 8. Dette ble grunnlaget for utviklingen av orthotopic lungetransplantasjon modell hos mus i vår lab. Hos mus og rotter, i motsetning til mennesker, inneholder den venstre lungen eneste lapp og utgjør bare 25% av den totale lunge masse. Dette gjør venstre-singel lungetransplantasjon gjennomførbart i murine modellen uten behov for en sirkulasjons støttesystem.
Våre foreløpige operasjoner avslørt at ventilasjon og perfusjon av det transplanterte lungen var svært avhengig av størrelsen på PV anastomose. Spesifikk PV anastomotisk mansjettstørrelse ble utnyttet til å matche donor og mottaker, som rapportert ni. Upassende cuff dimensjonering resulterte i enten atelektase av det transplanterte lungen eller Spaltedannelse av PV anastomosis. Okazaki et al rapporterte bruk av kombinerte fartøy ligation og klipping av bronkie 5. I denne studien bruker vi en aneurisme klipp for alle hilar strukturer, som vi foreslår kan forkorte varm iskemisk tid. En begrensning av orthotopic venstre lunge transplantasjon i murine modellen er at mottaker dyr kan overleve etter alloimmune-mediert nekrose av sine allografts 5. Derfor overlevelse studier er ikke gjennomførbart og pode vurdering avhenger histologisk undersøkelse av transplanterte lungen 10.
Ved hjelp av denne teknikken, har vi utviklet en preklinisk obliterans bronkiolitt modell hos mus. Spesielt er donor musen C57BL/10 og mottaker er C57BL / 6. Dette tyder rolle mindre, og ikke store, histocompatibility antigener i obliterans bronkiolitt patogenesen 6. Videre har vi rapportert nøytralisere IL-17 forhindrer obliterans bronkiolitt i murine modellen. Denne modusenl representerer en roman forskning verktøy for undersøkelse av lungetransplantasjon og fremme av klinisk lunge transplantasjoner.
The authors have nothing to disclose.
Finansieringskilder: dette arbeidet som støttes av National Institutes of Health tilskudd HL067177 og HL096845 og P01AI084853 til DSW
Name of the equipment | Company | Catalogue number |
Zeiss Opmi 6SFC-1880 | Prescott’s Inc | PMZ014 |
Harvard Rodent Ventilator | Harvard Apparatus | 55-7058 |
20-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100510D |
22-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 081015S |
24-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100522A |
9/0 Meth Blue Virgin Silk | Ashaway Line & Twine Mfg. CO | MBVS-90 |
10-0 Alcon Surgical Suture | Alcon Laboratories, Inc | 8065-192101 |
Black Braided Silk 5-0/18inches | Henry Schein | M652630 |
Heparin Sodium 1000 units/ml | APP Pharmaceuticals | 407156 |
Betadine Solution | Purdue Product | 67618-150 |
Lactated Ringer’s injection | Hospira | NDC 0409-7953-03 |
Strain of the mice | Vendor | Age, Weight | Gender, Comments |
C57BL/10 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor |
C57BL/6 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor or recipient |
Table 2. Table of mice, specific reagents and equipment.