Summary
切向流超滤（TFU），是一个循环的生物样品的重量为基础的分离方法。 TFU适于大小选择（1-20 nm直径）和高度集中大量的多分散性的银纳米颗粒（4 L的15.2微克毫升
Abstract
如今，AGNPS被广泛用于制造消费类产品，水消毒剂，2疗法，1，3和生物医学设备由于其强大的抗菌性能。3-6这些纳米粒子的应用，我们强烈的AgNP大小和聚集状态的影响。存在许多挑战在受控制造7和未官能化的，同质的银奈米粒子从化学侵蚀性的上限/稳定剂或有机溶剂是免费的基于大小的隔离4,8 7-13摆脱限制成本高的毒性试剂，或减少的AgNP合成或分离方法（ 例如 ，离心，尺寸相关的溶解度，尺寸排阻色谱法，等）的效率。10,14-18为了克服这一点，我们最近发现，TFU允许更大的控制权的大小，浓度和（300克赖顿农业非点源污染的聚集态毫升15.3微克毫升-1 198.7微克毫升-1）下降到10毫升的19比传统的隔离方法，如超速离心。
TFU是常用的重量为基础的分离的蛋白质，病毒和细胞的再循环方法。20,21简单地说，该液体样品通过中空纤维膜的孔径范围从1,000 kD的10 kD的一系列。较小的悬浮或溶解的样品中的成分将通过多孔隔板与溶剂（滤液）一起，而较大的成分被保留（滞留）。 TFU可能被认为是“绿色”的方法，因为它既不损害样品，也不需要额外的溶剂，以消除有毒过量的试剂和副产品。此外，TFU可能被应用到了大量的各种纳米粒子，作为疏水性和亲水性两种过滤器是可用的。
本研究的两个主要目标是：1）说明实验方面的的TFU方法通过一个被邀请的视频体验和2）表现出较大的胶体纳米粒子的体积和更小的体积，截留TFU方法的可行性。首先，unfuctionalized银奈米粒子（4升，15.2微克毫升-1）的合成通过用NaBH 4还原的AgNO 3使用既定克莱顿方法22,23。 AgNP多分散性，然后最小化通过使用50纳米的过滤器（460厘米2），以除去银奈米粒子和AgNP-聚集体由两个100 kD的滤波器（200厘米2和20厘米2）大于50nm，接着的3个步骤TFU集中银奈米粒子。有代表性的样品进行了表征，利用透射电子显微镜，紫外 - 可见吸收光谱法，拉曼光谱法，电感耦合等离子体发射光谱。最终阻滞高度集中（4毫升，8,539.9微克毫升-1），但卑微的汇总和均匀银奈米粒子为1-20纳米的直径。这对应于约62％的银浓度收率。
Protocol
1。胶体银奈米粒子的合成
克莱顿法（略作修改，廉价的）22的反应机制中很详细的描述，在辅助信息的参考帕维尔et.al一起的不需要的水解侧的NaBH 4，在室温或更高温度下反应23
- 12-24小时，在10％HNO 3的浴，然后清洁所有的玻璃器皿为4-12小时，在1.25 M的NaOH在40％的乙醇浴中，最后的高压釜。玻璃器皿应彻底漂洗最低五次后，用超纯水（17MΩ或更高）的酸和碱浴步骤。
- 准备2 mM的NaBH 4溶液的300毫升和100毫升1mM的AgNO 3溶液，使用灭菌水冷却在10℃下的较低的温度下，将防止侧的NaBH 4反应。
- 加入300毫升2mM的NaBH 4溶液到500毫升锥形反应烧瓶中续癌宁搅拌棒和烧瓶用铝箔包裹，以防止银氧化。将烧瓶放置在冰浴上搅拌盘和搅拌溶液10分钟，在325 rpm的转速下。
- 总理25毫升滴定管具有列满的超纯水漂洗。浸水后，填写滴定管AgNO 3溶液和包装用铝箔。
- 在一个黑暗的房间中，添加1mM的AgNO 3溶液50毫升，在连续搅拌下（ 图1A）的NaBH 4溶液1滴秒-1的速率。量的装置与一个“箔帐篷”的中间部分，以尽量减少在AgNO 3的除了曝光。 硝酸银除了将需要30-40分钟。定期补货冰浴。
- AgNO 3的除了完成后，补充冰浴，并继续搅拌该胶体溶液中的一个额外的45-50分钟。信号形成的胶体银奈米粒子颜色的变化由无色金黄色，这是表面等离子体共振最多AGNPS（ 图1B）的特征。
- 一旦反应完成后，冷藏胶体。胶体AgNP批次可以合并在一个星期后的胶体保持一致， 即胶体溶液不会合并，和批量使用紫外-可见吸收光谱法和拉曼光谱的特点，以确定可能的聚集或污染物。
2。胶体银奈米粒子的特性
在Cary 50 UV-VIS-NIR分光光度计（Varian公司）和一个LabRamHR的800拉曼系统（HORIBA Jobin Yvon公司，公司），配有奥林巴斯BX41共焦拉曼显微镜，用于AgNP特性。 ，LabSpec的卡里WinUV软件第5节地8.0软件的数据收集和分析。
注：采集参数将必须进行优化FOR其他仪器模型。
通过紫外 - 可见分光光度法测定胶体银奈米粒子的表面等离子体共振
- 填写1厘米3的一次性反应杯与克莱顿胶体和超纯水在1:10的体积比。填写另1 cm 3的比色皿，用超纯水为空白的基线校正。擦拭与Kimwipe两个比色皿的外侧。
- 设置的分光光度计吸光度模式从-0.5 Y最小的Y的最大值为1.0。设置X到200-800纳米扫描窗口，并选择较快的扫描速度为4800 nm的基线校正分钟-1。
- 将装满水的试管中，放入仪器和运行基准扫描。如有必要，重复上述步骤，直到一个非零的基线控制的实现。
- 更换空比色皿与样品比色皿和启动的吸光度扫描收集的胶体样品的UV-Vis吸收光谱（ 图1C）。
通过拉曼光谱纯度的胶体银奈米粒子
由于视频演示（10-15分钟的视频）的时间限制和空间限制的协议文本（最多3页），这个实验的部分将不会进行录像。
- 设定仪器参数设置如下：激励源（632.8 nm波长的He-Ne），过滤器（没有过滤器，样品〜17毫瓦的激光功率），共焦孔（300微米），光谱仪（730厘米-1），全息光栅（600园/毫米），物镜（50倍长的工作距离空气物镜），曝光时间（30秒），和积累周期（5）。
- 使用干净的移液管，以填补与胶体2毫升的石英比色皿，并轻轻地插入插头。使用Kimwipe的比色皿的表面，清洁过的指纹，污迹或胶体。显着降低，在显微镜阶段。选择50倍的物镜和搬上舞台，将试管。
- 聚焦拉斯维加斯呃束上的AgNP的胶体直接的比色皿使用仪器和奥林巴斯相机的视频模式下的内壁。关闭室内灯光，并获得拉曼光谱（ 图1D）。
3。胶体银奈米粒子的大小选择和集中，通过切向流超滤（TFU）
甲KrosFlo II研究过滤系统（Rancho Dominguez的频谱实验室，CA）用于限制的AgNP的多分散性和浓缩（ 图2）。 TFU过程的三个步骤：（1）尺寸银奈米粒子和AgNP-聚集体的50-nm的直径和较大的使用50纳米MidiKros聚砜模块（460厘米2），2）大小的选择和浓度的选择银奈米粒子1-20纳米的直径，使用一个100 kD的MicroKros的聚砜过滤器（20厘米2）（ 图3），使用100 kD的MidiKros过滤器（200厘米2），和（3）进一步减容。
- 连接尺寸为17 MASTERFLEX进料管的蠕动泵，根据图2A。一个Y字路口和管交界处，将需要的设置。连接管到的50纳米MidiKros的模块。一定要确保管道过滤器采用拉链关系。选择管道尺寸17 SIZE按钮。
- 选择使用DIR“按钮逆时针泵方向。确保MODE按钮是INT。
- 前启动泵，泵的速度降低到低于300毫升分钟-1。根据所使用的管材的尺寸，应调节的泵速率。它应该是一个小的设置，以允许操作者及时反应潜在的泄漏，但足够大的起动系统的效果仍然有。为了创建需要绘制胶体从水库进入管件和过滤器的真空，剪切，导致从过滤器的底部部分的Y结的顶部部分中的中间的油管油管。
- 一旦自由流动的液体通过管子，关闭泵，加入破碎的部分管与管接头和保护带拉链的关系。再次开启泵，继续过滤。
- 检查油管回路的泄漏。如果发现泄漏，，调整装修或重新用扎带确保，修复泄漏。一旦管道系统是无泄漏，泵的流速可以增加，以不大于700毫升分钟-1。该泵的速度值，根据管道大小，以避免管道发生故障，应进行优化。继续过滤在储液瓶，直到液体被耗尽到几乎为零。
- 一旦完成过滤，收集滤液，其中包含银奈米粒子的直径为50纳米以及小型LER。滞留物可被保存根据具体AgNP应用程序以供进一步分析。
第2步
- 冲洗管与2％HNO 3和超纯水之前安装100 kD的MidiKros的过滤器使用相同的设置为50纳米的模块。
- 重复步骤3.3使用100 kD的MidiKros的模块。
- 一旦过滤完成后，收集的油管和过滤器（100-kD的滞留物）的内容。的体积应为约50毫升。
第3步
- 连接大小14 MASTERFLEX管和100 kD的MicroKros的过滤器根据图2B蠕动泵。所有路口固定带拉链的关系。选择油管尺寸14对泵使用的大小按钮，降低泵的速度分-1〜30毫升。
- 开始过滤过程。检查油管回路的泄漏。如果发现泄漏，修复泄漏，通过调整合适婷安全与扎带。
- 一旦管道系统是无泄漏，泵的流速可以增加，以不大于90毫升分钟-1。继续过滤直至剩余的液体中的储液瓶包含最小量的浓缩物。
- 通过除去从瓶泵仍在运行时的进料管，油管和过滤器的剩余的内容可以被收集到储液瓶。一旦管和过滤器的内容是在储液瓶，泵可被关闭。
4。银量的定量胶体银奈米粒子的电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-OES）
每个胶体样品化学消化和使用A 710E光谱仪（Varian公司）用ICP-OES的银的量进行定量。银（ 图4）的线性回归的校准曲线是使用八个银标准（0，3构造，7，10，15，25，50，和100微克L-1），制备了10000微克毫升-1银痕量金属分析标准，（超低科学）。
- 化学消解样品用HNO 3。的有代表性的样品是原来的胶体（步骤1），50-nm的滤液（步骤1），100-kD的滞留物（步骤2），和最后的100-kD的滞留物（步骤3）（ 图3）。
- 应是稀释后的样品用2％的HNO 3使用下面的体积比：1:1000原始胶体的1:1000的50-nm的滤液，1:25,000头100-kD的滞留物，和1:250,000为最后的100 kD的滞留物。为了防止银浸出，所有的样品应当存放在低密度的聚丙烯容器中。
- ICP-OES仪器参数设置如下：对Ag（328.068 nm）的波长，功率（1.20千瓦），血浆流量（最小15.0 L -1），辅助流量（1.50 L最小-1），雾化器压力（200千帕）。
- 每个SA复制时间为10秒，mple应在一式三份。之间的测量的稳定化时间为15秒和30秒的样品的吸收延迟应该被使用。每个样品之间应采用的方法空白，以减少潜在的交叉污染。
5。胶体银奈米粒子的粒径分布，通过透射电子显微镜（TEM）
十字EM 208S TEM用于可视化的胶体银奈米粒子。电子显微照片，使用高解析度的加坦BIOSCAN相机捕获和分析在ImageJ软件24
- 用超纯水（1:100的体积比）稀释100 kD的滞留样本。存款原始胶体和稀释的100-kD的滞留物（步骤3）对20μl的300目福尔瓦被覆金网格（电子显微学）。允许电网在干燥器中干燥。在一天之内。
- 设置在70千伏可视化农业非点源瞬变电磁仪的加速潜力。 Çapture电子显微照片（ 图5），使用高清晰度的摄像头，并保存为标签图像文件格式（TIFF）。
6。代表性的成果
胶体银奈米粒子的合成与表征
使用设置显示在图1A，成功地合成了4升的克赖顿胶体银奈米粒子。最终的胶体的特性的金黄色的颜色（ 图1B）22，23在此胶体的UV-Vis吸收光谱有一个典型的尖锐，对称的表面等离子体振子峰（SPR），在394纳米（ 图1C）。原始克莱顿胶体和最后的100-kD的滞留物的拉曼光谱中提出只有三个振动模式，即在弯曲（1640 cm -1）的对称和非对称伸缩模式的H 2 O（3245厘米-1和3390厘米-1 ，分别）（ 图1D）。/ P>
TFU胶体AGNPS
的TFU安装和3步TFU过程的示意图在图2和图3所示，分别50纳米的过滤器（460厘米2）在步骤1中，利用尺寸选择，以除去银奈米粒子和AgNP-聚集体的50-nm的直径和较大的从原来的胶体（约100毫升的50-nm的滞留物）。这一步也从原来的胶体4 L，3.9 L的50纳米滤液的体积小，减少陪同。无反洗或流量中断步骤使用。量最大的降低（ 即 ，除去水），得到在步骤2中，当通过一个100-kD的过滤器（200厘米2）的50-nm的滤液，随后运行。将所得的100-kD的滞留物的总体积为50ml。大部分的合成副产物和过量的试剂，在此步骤中，通过水溶剂（3.850毫升100 kD的滤液的）销。另外，AgNP浓度由ADDIT实现离子先前报道的方法的第三过滤工序19在该步骤3中，一个100-kD的滤波器的一个较小的表面区域（20厘米2）100-kD的滞留体积减少至4.0毫升。 TEM测量表明，这最后的100 kD的滞留物主要是由直径为1-20纳米的的弱旅汇总AGNPS的。
ICP-OES和TEM的胶体AGNPS
从八个标准（0，3，7，10，15，25，50，和100μgL-1）的线性回归校准曲线（ 图4）构建银。在每一个四个有代表性的胶体样品的银的量，然后确定从ICP-OES校准曲线通过外推法：原始胶体（15.2 ppm的， 图3A），50-nm的滤液（14.1 ppm的， 图3B），第一个100 - kD的滞留物（683.1 ppm的， 图3C）和最后的100-kD的滞留物（586.5 ppm的， 图3D）。15.2 ppm的实际产量是非常接近的克莱顿反应的典型的理论产率的15.4 ppm的。极端的银奈米粒子浓度（4毫升586.5 PPM），反映了一个戏剧性的变化，颜色从原来的胶体金黄色到深褐色的最后100 kD的滞留物（ 图3，插图的小瓶的图片）。被发现的过滤器的质量是至关重要的的TFU过程，特别是步骤1。最终阻滞浓度为446.5 ppm的9,333.3百万分之根据过滤器的条件（大量使用与全新）。如果膜毛孔成为损害，还可以具有的直径小于50纳米的银奈米粒子将保留，并随后将降低整体收集在滤液中的银奈米粒子量。过滤过程的优化，包括压力监测和适当的清洁可以提高过滤器的寿命。
代表的TEM照片原始克莱顿胶体和最后的100-kD的滞留物（步骤3）在图5A和图5C所示，分别。在他们的非聚集状态下，AGNPS的浅灰色背景显示为黑色的圆形区域。大约有800银奈米粒子中确定的每一个，两个样品的TEM显微照片，使用Image J软件进行分析。一个粒子定义的一个完整的和封闭的周边。一个面积阈值定为1.0纳米2的TEM照片的分辨率。的的AgNP数和面积数据，然后导出到Microsoft Excel的AgNP直径推算。在原来的胶体和最后的100-kD的滞留物的的平均AgNP直径测定，分别为9.3 nm和11.1纳米。的银奈米粒子的直径测量，然后将其导出到来源地8.0软件对每个样品和大小的TEM直方图构建（ 图5B和图5D）。
“SRC =”/ files/ftp_upload/4167/4167fig1.jpg“/>
图1：A）合成的设置，B）的典型色泽，C），紫外-可见吸收光谱，和D）的克赖顿胶体银奈米粒子的拉曼光谱。
图2。TFU实验装置A）步骤1和步骤2：I）水库克赖顿胶体银奈米粒子。 II）水库滤液收集。 III）Y-交界处的管道。 IV）蠕动泵头。 V）为50纳米或100 kD的南部库洛过滤器。B）步骤3：I）水库的克赖顿胶体银奈米粒子。 II）水库滤液收集。 III）100 kD的微：库洛过滤器。
图3的流程图描绘的TFU过程。蓝色阴影框马克银奈米粒子的胶体悬浮液中以供进一步分析收集。瓶photographs表明甲）原本的胶体批处理，B）的 50-nm的滤液收集处理后的原始胶体通过50纳米的过滤器（460厘米2），C）的头100-kD的滞留物后得到的体积减少使用100-kD的南比利库洛过滤器（200厘米2）， 和D）最后100-kD的滞留物从使用100 kD的微：库洛过滤器（20厘米2）的体积减小所导致。 100 kD的滤液看起来像水。
图4。ICP-OES线性的校准采用八银标准：0，3，7，10，15，25，50，和100μg·L-1。
A）原克赖顿农业非点源污染和 C的TEM照片如图5所示。）最后的100 kD的滞留物（比例尺为为100nm）。 TEM建造的规模直方图分析约800 AGNPS B）原克赖顿AGNPS，D）最后100 kD的截留的。 图5B中的插图显示了展开的的41-75纳米尺寸范围内作比较。 点击此处查看大图 。
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
胶体银奈米粒子的紫外 - 可见吸收光谱法和拉曼光谱
这是众所周知的，数量的表面等离子体共振一种胶体的吸收光谱的峰的对称性的AGNPS增加而减小。此外，AgNP聚合导致的外观更广泛或红移的峰。25,26的存在下，在394 nm处的一个单一的，尖锐的和对称的SPR峰值表示中度聚集和粒度分布的小的，球形的银奈米粒子。
前和超滤后的胶体样品的纯度，证明了原始克莱顿胶体和最后的100-kD的滞留物，其中表现出只有三个振动模式到H 2 O的特征的拉曼光谱与有机杂质或超滤污染物的大型拉曼截面的拉曼信号将通过紧靠的AgNP的增强表面（即，所谓的表面增强拉曼光谱（SERS）效应）。
ICP-OES和超滤胶体银奈米粒子TEM
先前报道的TFU程序19的三分之一，100-kD的过滤工序的添加促进了成功克莱顿胶体银奈米粒子较大体积的减少（4L一批15.2 ppm的）在1000倍的较小体积的滞留物（4毫升586.5 PPM）。这对应到TFU浓度产率的约62％，考虑到量的银奈米粒子和AgNP-聚集体的50-nm的直径和较大的已删除。集中度是显着的，因为最后的100 kD的滞留物大多是由单分散的农业非点源直径为1-20纳米和过量的试剂和副产品。第三，100 kD的过滤步骤浓度提高了45％的收益率从20％至62％。进一步的的TFU改进中的大小选择和浓度的银奈米粒子利用额外的中空纤维膜，可以通过以下方式获得。目前可用于疏水性和亲水性两种样品的孔径大小的过滤器从1,000 kD的10 kD和表面积m 2的从5.1至8厘米2不等。也可以进行缓冲液交换TFU期间，根据下游应用。当超过800倍（即，当体积减小从4 L小于5毫升）的体积减小，是由于极端的集中度的胶态悬浮液中的稳定性和货架寿命减少。这些高度浓缩，未官能化的AgNP的货架寿命是大约一到两周10℃。虽然不方便，这种限制管理，通过仔细研究规划和准备。希望这种极端的集中度在不同浓度的纳米毒性的研究正在进行。银奈米粒子的浓度较低的批次预计将有更好的稳定性和较长的货架寿命。
图5A和5C）的目测检查显示的频率增加中微创凝集银奈米粒子相比，与原来的胶体。的两个胶体样品（ 图5B和图5D）的TEM大小的直方图，进一步证实，TFU的的克莱顿胶体银奈米粒子的多分散性是有限的通过。可以实现进一步的多分散性的限制，通过采用一系列较小的孔径的过滤膜。克莱顿AGNPS的直径的范围为1nm〜75nm的（ 图5B和插图示出的扩展的41-75纳米大小桶）银奈米粒子和/或AgNP的的为50nm和更大的聚集体（0.9％满分％，而总银奈米粒子）没有在最终的100-kD的样品的TEM尺寸的直方图（ 图5D）。 100 kD的滞留物主要包括银奈米粒子，直径为1-20纳米，出现了一个小的贡献（12.4％），AGNPS在21-40大小垃圾箱图5B和5D证实，粒度分布的趋势100 kD的滞留物保留期间TFU 1-5纳米尺寸范围的异常过程。有明显减少的小银奈米粒子直径为1〜5nm的频率为100-kD的样品（从33.2％至21.3％），这是归因于AgNP到滤液中的膜过滤器的通过。其结果，原始胶体平均AgNP直径增加从9.3纳米至11.1 nm处的最后100-kD的滞留物。由于约800 AGNPS为胶体样品进行了分析，AGNPS在1-5海里（11.9％）和6-10海里（1.3％）的尺寸范围较小的频率下降是伴随着较大的农业非点源的频率相应增加在11-25纳米大小箱（ 即从原来的胶体，约12.8％至100 kD的滞留物）。
总之，TFU被证明是一种高效，“绿色”的方法为SI泽选择和集中的胶体银奈米粒子在不同体积最小的聚集尺度。消除化学腐蚀性试剂或从AgNP合成（更好的大小，形状，和聚合控制）的有机溶剂的使用，可能会显着降低，同时改善其治疗指数AgNP毒性。 AGNPS有限的多分散性，可以立即找到其他的工业和研究应用，以提高催化，光电28日，27日29或基于SERS的生物传感性能。9,19,30,3131一个非常最近的一项研究由兰德等32表明，微和选择的官能化的纳米颗粒的大小可以成功地实施了五个不同的聚合物材料（聚砜，聚醚砜，尼龙，乙酸纤维素，聚偏二氟乙烯）制成的超滤膜。这些纳米颗粒的直径为2-10纳米的银，金或Ti 2 O内核，并与有机聚合物涂层，导致官能正的或负的表面电荷。的核心和纳米粒子的表面功能的发现发挥了重要作用，NP保留或通道通过膜（0.2纳米至0.22微米）。正如预期的那样，带正电的纳米粒子被完全拒绝（> 99％）由带负电荷的膜，有较大的孔径比NP直径的20倍。从这些实验中，一个人学会应认真考虑在未来的研究与功能化纳米粒子的相互作用机制。
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
没有利益冲突的声明。
Acknowledgments
资金由美国国家科学基金会通过NUE工程和领导的联盟程序表示感谢。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Silver nitrate (AgNO3) | Acros Organics Inc. | CAS: 7761-88-8 | |
| Sodium borohydride (NaBH4) | Acros Organics Inc. | CAS: 16940-66-2 | |
| Nitric acid (HNO3, Optima) | Fisher Scientific Inc. | A467-1 | Trace metal grade for ICP analysis |
| 10,000 μg ml-1 silver standard, EnviroConcentrate | Ultra Scientific | US-IAA-047 | |
| KrosFlo Research IIi Tangential Flow Filtration System | Spectrum Laboratories Inc. | SYR2-U20-01N | |
| 0.05 μm PS (0.5 mm) 460 cm2 | Spectrum Laboratories Inc. | X30S-900-02N | |
| Midi 100 kD PS 200 cm2 | Spectrum Laboratories Inc. | X3-100S-901-02N | |
| Micro100 kD PS 20 cm2 | Spectrum Laboratories Inc. | X1AB-300-10N | |
| MasterFlex C-Flex tubing L/S Size 17 | Cole-Palmer Instrument Co. | 06424-17 | |
| MasterFlex C-Flex tubing L/S Size 14 | Cole-Palmer Instrument Co. | 06424-14 | |
| Cary 50 UV-VIS-NIR spectrophotometer | Varian Inc. | ||
| LabRam HR 800 system | Horiba Jobin Yvon Inc. | ||
| Varian 710ES ICP-–S | Varian Inc. | ||
Table 1. Specific reagents and equipment. |
|||
References
- The Project on Emerging Nanotechnologies. , Available from: http://www.nanotechproject.org/inventories/consumer/analysis_draft (2011).
- Savage, N., Diallo, M. S. Nanomaterials and Water Purification: Opportunities and Challenges. Journal of Nanoparticle Research. 7, 331-342 (2005).
- Jain, J. Silver Nanoparticles in Therapeutics: Development of an Antimicrobial Gel Formulation for Topical Use. Mol. Pharmaceutics. 6, 1388-1401 (2009).
- Dal Lago, V., Franca, dO., de, A. G., Kobarg, J., Borba Cardoso, M. Size-selective silver nanoparticles: future of biomedical devices with enhanced bactericidal properties. J. Mater. Chem. 21, 12267-12273 (2011).
- Panacek, A. Silver Colloid Nanoparticles: Synthesis, Characterization, and Their Antibacterial Activity. J. Phys. Chem. B. 110, 16248-16253 (2006).
- Elechiguerra, J. Interaction of silver nanoparticles with HIV-1. Journal of Nanobiotechnology. 3, 6 (2005).
- Jana, N. R., Sau, T. K., Pal, T. Growing Small Silver Particle as Redox Catalyst. J. Phys. Chem. B. 103, 115-121 (1999).
- Tolaymat, T. M. An evidence-based environmental perspective of manufactured silver nanoparticle in syntheses and applications: A systematic review and critical appraisal of peer-reviewed scientific papers. Sci. Total Environ. 408, 999-1006 (2010).
- Willets, K. Surface-enhanced Raman scattering (SERS) for probing internal cellular structure and dynamics. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 394, 85-94 (2009).
- Novak, J. P., Nickerson, C., Franzen, S., Feldheim, D. L. Purification of Molecularly Bridged Metal Nanoparticle Arrays by Centrifugation and Size Exclusion Chromatography. Anal. Chem. 73, 5758-5761 (2001).
- Hossain, M. K., Kitahama, Y., Huang, G. G., Han, X., Ozaki, Y. Surface-enhanced Raman scattering: realization of localized surface plasmon resonance using unique substrates and methods. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 394, 1747-1760 (2009).
- Henglein, A., Giersig, M. Formation of Colloidal Silver Nanoparticles: Capping Action of Citrate. J. Phys. Chem. B. 103, 9533-9539 (1999).
- Sapsford, K. E., Tyner, K. M., Dair, B. J., Deschamps, J. R., Medintz, I. L. Analyzing Nanomaterial Bioconjugates: A Review of Current and Emerging Purification and Characterization Techniques. Anal. Chem. 83, 4453-4488 (2011).
- Al-Somali, A., Krueger, K. M., Falkner, J. C., Colvin, V. L. Recycling Size Exclusion Chromatography for the Analysis and Separation of Nanocrystalline Gold. Anal. Chem. 76, 5903-5910 (2004).
- Hanauer, M., Pierrat, S., Zins, I., Lotz, A., Sonnichsen, C. Separation of Nanoparticles by Gel Electrophoresis According to Size and Shape. Nano Lett. 7, 2881-2885 (2007).
- Sweeney, S. F., Woehrle, G. H., Hutchison, J. E. Rapid Purification and Size Separation of Gold Nanoparticles via Diafiltration. J. Am. Chem. Soc. 128, 3190-3197 (2006).
- Clarke, N. Z., Waters, C., Johnson, K. A., Satherley, J., Schiffrin, D. J. Size-Dependent Solubility of Thiol-Derivatized Gold Nanoparticles in Supercritical Ethane. Langmuir. 17, 6048-6050 (2001).
- Schaaff, T. G. Isolation of Smaller Nanocrystal Au Molecules: Robust Quantum Effects in Optical Spectra. J Phys Chem B. 101, 7885-7891 (1997).
- Trefry, J. C. Size Selection and Concentration of Silver Nanoparticles by Tangential Flow Ultrafiltration for SERS-Based Biosensors. J. Am. Chem. Soc. 132, 10970-10972 (2010).
- Bhattacharjee, S., Bhattacharjee, C., Datta, S. Studies on the fractionation of & beta-lactoglobulin from casein whey using ultrafiltration and ion-exchange membrane chromatography. J. Membr. Sci. 275, 141-150 (2006).
- Eppler, A., Weigandt, M., Schulze, S., Hanefeld, A., Bunjes, H. Comparison of different protein concentration techniques within preformulation development. Int. J. Pharm. 421, 120-129 (2011).
- Creighton, J. A., Blatchford, C. G., Albrecht, M. G. Plasma resonance enhancement of Raman scattering by pyridine adsorbed on silver or gold sol particles of size comparable to the excitation wavelength. J. Chem. Soc. Faraday Trans. 2, 790-798 (1979).
- Pavel, I. E. Estimating the Analytical and Surface Enhancement Factors in Surface-Enhanced Raman Scattering (SERS): A Novel Physical Chemistry and Nanotechnology Laboratory Experiment. J. Chem. Educ. , (2011).
- Rasband, W. S. ImageJ. , National Institutes of Health. Bethesda, Maryland, USA. Available from: http://imagej.nih.gov/ij (1997).
- Kelly, K. L., Coronado, E., Zhao, L. L., Schatz, G. C. The Optical Properties of Metal Nanoparticles: The Influence of Size, Shape, and Dielectric Environment. J. Phys. Chem. B. 107, 668-677 (2003).
- Śileikaitċ, A., Prosyčevas, I., Puišo, J., Juraitis, A., Guobienċ, A. Analysis of Silver Nanoparticles Produced by Chemical Reduction of Silver Salt Solution. Mater. Sci. (Medziagotyra). 12, 287-291 (2006).
- Lewis, L. N. Chemical catalysis by colloids and clusters. Chem. Rev. 93, 2693-2730 (1993).
- Li, Y., Wu, Y., Ong, B. S. Facile Synthesis of Silver Nanoparticles Useful for Fabrication of High-Conductivity Elements for Printed Electronics. J. Am. Chem. Soc. 127, 3266-3267 (2005).
- Sun, Y., Xia, Y. Shape-Controlled Synthesis of Gold and Silver Nanoparticles. Science. 298, 2176-2179 (2002).
- Han, X., Zhao, B., Ozaki, Y. Surface-enhanced Raman scattering for protein detection. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 394, 1719-1727 (2009).
- Pavel, I. Label-Free SERS Detection of Small Proteins Modified to Act as Bifunctional Linkers. J. Phys. Chem. C. 112, 4880-4883 (2008).
- Ladner, D. A., Steele, M., Weir, A., Hristovski, K., Westerhoff, P. Functionalized nanoparticle interactions with polymeric membranes. J. Hazard. Mater. , (2011).
