Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Evaporatif Akı Yöntemi (EFM) kullanarak Işınım ve Dehidrasyon için Yaprak Hidrolik İletkenlik ve Stoma İletkenlik ve Yanıtları Ölçümü

Published: December 31, 2012 doi: 10.3791/4179

Summary

Biz yaprak hidrolik iletkenlik eş zamanlı ölçümü için (nispeten hızlı (30 dakika) ve gerçekçi bir yöntem tarif

Abstract

Su önemli bir kaynaktır ve bitki su taşıma sistemi maksimum büyüme ve kuraklık toleransı ilgili limitleri belirler. Bitkilerin fotosentez için CO 2 yakalamak için yüksek stoma iletkenlik (g ler) ulaşmak için stomalarını açtığınızda, su terleme 1,2 kaybolur. Havasahalarında gelen buharlaşan su sapları ve kökleri ksilem sırayla çizim, yaprak damarları ksilem su çizim sırayla, hücre duvarlarından değiştirilir. Su sistemi yoluyla çekilir gibi, sistem boyunca gerilim ve düşük yaprak su potansiyeli (Ψ yaprak) oluşturarak, hidrolik direnci ile karşılaşır. Yaprak kendisi tesisi hidrolik direnç 3 ortalama olarak% 30 için muhasebe, tüm bitki sisteminde önemli bir darboğaz olduğunu. Yaprak hidrolik iletkenlik (K yaprak = 1 / yaprak hidrolik direnç) yaprak üzerinde su potansiyeli degrade su debisi oranı ve özetlerKarmaşık bir sistemin davranışı:. sapı yoluyla ve damarlar, paket kılıf içine çıkar ve hava sahası içinde buharlaşırken ve stoma gelen transpired önce mezofil hücreleri aracılığıyla veya çevresinde geçer birkaç emir yoluyla su hamle K kanadı gibi güçlü ilgi olduğunu türler karşılaştırılarak önemli fizyolojik özelliği, su taşıma ve yapısındaki değişim ile ilişkisi (örneğin, Yaprak damarlanma mimarisi) ve fotosentetik gaz değişimi üzerinde yarattığı etkiyi araştırmak için bir anahtar değişken için yaprak yapısı ve fizyolojisi etkinliğini ölçülmesidir. Ayrıca, K yaprak K yaprak Aquaporinlerin, membran ile 4 su taşıma dahil proteinlerin ekspresyonu ve aktivasyonu değişiklikler nedeniyle görünüşte ışınımı önemli ölçüde artırabilir. Iç ve dış yaprak çevreye 3 güçlü tepki, ve K yaprak boyunca güçlü azalır drkavitasyon ve / veya mezofil ve paket kılıf hücre büzülme veya aquaporin etkisizleştirme 5-10 bağlı olarak ekstra-ksilem dokularda ksilem borusu, ve / ya da geçirgenlik kaybı çökme nedeniyle gerek. K yaprak iyi sulanan koşullarda türler arasında ve kuraklık sırasında g s ve fotosentetik oranı sınırlamak ve böylece tüm fabrika performansını sınırlayabilir Çünkü kuraklık sıklığı ve şiddeti 11-14 artış özellikle onlar muhtemelen tür dağılımları belirleyebilir.

Biz eksize yapraklarında K yaprağı ve g s eş zamanlı tayini için basit bir yöntem sunar. Bir transpiring yaprak bir denge üzerine bir su kaynağına çalışan tüp onun sapı ile bağlıdır. Dengesi suyun kaybı yaprak aracılığıyla akış hızı hesaplamak için kaydedilir. kararlı durum terleme (E mmol • m -2 • s -1) ulaşıldığında, g K yaprak (K yaprak = E / - Δψ yaprak, MPa) 15.

Bu yöntem farklı Irradiances ve dehidratasyon 14,16,17 K yaprak açığı K yaprak yanıtları değerlendirmek için kullanılabilir.

Protocol

1. Sönmüş Yapraklar için Ölçüm Yaprak Hidrolik iletkenlik (K max)

  1. Tercihen ksilem gerginlikler ıslak kağıt havlu ile dolu karanlık plastik torba içinde hava ve yerde kesilmiş, düşük olduğu gibi akşam ya da gece çekimleri toplayın. Laboratuarda, su altında her sürgünün sonunda en az iki düğüm yeniden keser. Saf su, veya K yaprak ölçümler için kullanılacak olan diğer solüsyon gece boyunca rehidrate çekim izin verin. Farklı çözümler etkileri bir faktör olarak araştırılması gereken sürece saf su akışı çözümü olarak tavsiye edilir.
  2. Kısmen degaze akışı çözümü altında yeni bir jilet ile sürgün gelen yaprak kesin. Farklı çözümler etkileri bir faktör olarak araştırılması gereken sürece saf su akışı çözümü olarak tavsiye edilir. Bir vakum pompası kullanılarak bir şişe içerisinde gece boyunca çözelti gazının alınması tavsiye, fakat diğer yöntemler kullanılabilecektir.
  3. Petio Sarılabilir gergin parafilmyaprak sapı ve tüp arasında iyi bir sızdırmazlık sağlamak için le. İlave parafilm sarma tüp içine sığacak şekilde sapı yuvarlak yardımcı olacaktır Bu adım, sigara yuvarlak petioles için özellikle yararlıdır. Diş yapıştırma sapı içinde oluklar doldurmak için parafilm sarma önce sapı ile uygulanabilir.
  4. Sisteme giren hava girişini önlemek için saf su altında silikon tüp için yaprak bağlayın. Yaprak su kaynağı üzerinde kaldırılmış gibi, boru içinde su subatmosferik basınçta, ve herhangi bir hava ölçüm esnasında tüp içine çekilir ise, böylece conta iyidir. OmniFIT, Cambridge, İngiltere);; Bu yaklaşım özellikle karmaşık şekillere sahip petioles için yararlıdır, veya çim bıçakları için Alternatif silikon tüp içine doğrudan sapı sızdırmazlık için kauçuk conta ile kompresyon fitting (örneğin, (omniFIT A2227 delik adaptörü kullanılabilir hangi bir cam çubuk etrafına sarılmış ve kompresyon fitting ile kapalı olabilir. Mümkünse, si doğrudan sapı mühürlemelicone tüp hızlı olmak ve şeffaf bir sapı-tüp kavşak bırakarak, kabarcıklar daha kolay görülebilir olmasını sağlayan bir avantaja sahiptir. Boru bilgisayar (; Mettler-Toledo GmbH, Greifensee, İsviçre örneğin "Denge Link" Yazılımını kullanarak) her 30 sn veri günlükleri bir denge (± 10 mg çözünürlük), bir dereceli silindire çalışan sabit hortumuna yaprak bağlanır yaprak yoluyla debisinin hesaplanması için.
  5. Yaprakları büyük bir kutu fan üzerinde misina ile ve bir ışık kaynağı (> 1.000 mmol • m 2 • s -1 yüksek ışınım ölçümler için fotosentetik aktif radyasyon), hafifçe seviyesinden altında sinirli ahşap çerçeveler adaxial yüzey yukarı tutulmalıdır mezun silindir menisküs. Yaprak gibi olur, yaprak hareketli suyun transpirasyon tarafından yönlendirilen, ve yerçekimi nedeniyle baskı altında yaprak girerek değil sağlamak için mezun silindir su üstünde olmalıdıryaprak silindir içinde su menisküs altına yerleştirildi durumunda da aynı olabilir. Islak kağıt havlu ile doldurulmuş küçük kaplar ve böylece denge içinde atmosfere su kaynağından buharlaşma kaçınarak, dengede hava suya doygun olmasını sağlamak için denge haznesi içine yerleştirilir. Bu olasılık tüp bir dört yollu musluk vanası kullanarak yaprak akmasını durdurmak ve denge su silindirin kütlesi azalmaya olmadığını kontrol ederek kontrol edilebilir.
  6. Lamba ısı absorbe yaprağı yukarıdaki su ile dolu bir açık Pyrex kap yerleştirin.
  7. ° C deney boyunca ısı lambası altında yaprak etrafında havayı ısıtmak için yeterince Pyrex kabın ısı etmez, öyle ki Pyrex kabın daha soğuk su ilave edilerek 23 ° C ile 28 arasında yaprak sıcaklığı muhafaza edin.
  8. Böylece yüksek parlama gelmesini için yeterli bir zaman veren ve Bununla, en azından 30 dakika için cihaz üzerinde sızmak için yaprak izinonally kadar akış hızı hiçbir yukarı veya aşağı doğru bir eğilim ile birlikte, stabilize edilmiş, ve varyasyon katsayısı <30 sn akış aralıklarla yapılan ölçümler, en azından 5-10 için% 5 ile gelmiştir. Bu yöntem, istikrarlı bir Ψ yaprak varsayar çünkü akış hızı kararlı bir duruma ulaşması için esastır. Önceki çalışmalarda bu kriterleri akış hızı (E), Ψ yaprak ve K yaprak stabilizasyonu için yeterli buldum; kararlı bir akış sonra uzun ölçüm süreleri ile testlerin geniş bir yedi türlerinin her biri için ölçüm zaman K yaprak arasında herhangi bir ilişki gösterdi kuruldu yaprak kapasitans 17,18 aralığı. Stabilizasyon genellikle 30 dakika veya daha kısa sürer, ancak bazı türler bazı türler için bir saatten fazla gerektirebilir.

Not: debi (<8 mg s -1) çok düşük olduğunda, istikrar son beş 30 sn aralıklarla çalışan ortalama kullanılarak tespit edilebilir.

  • Aniden akımı değişiklikleri, ya bağlı ani stomaların kapanmasına veya parçacıkları veya hava kabarcıkları ile sistemde mühür veya tıkanıklığı belirgin sızıntı varsa ölçümler atın.
  • Akışını stabilize, bir termokupl ile yaprak sıcaklığı kaydedin.
  • Hızla borudan yaprağı kaldırmak, dab sapı kuru ve terleme durdurmak için, daha önce ekshale edilmiş bir yapışmalı torbaya yaprağı koyun.
  • Kanadın en az 20 dakika boyunca onun çantasında muvazene edelim.
  • Son 10 debi ölçümleri ortalama. Bu E ölçümü olacaktır.
  • Yaprak dengelenmiş olduğunda, bir basınç bölmesi ile nihai yaprak su potansiyeline (Ψ nihai) ölçün.
  • Bir flatbed tarayıcı ve görüntü işleme yazılımı ile ya da bir yaprak alanı ölçer ile yaprak alanı ölçün.
  • K yaprak E /-ΔΨ yaprak (burada ΔΨ yaprak = Ψ nihai olarak hesaplanır -2 s -1 MPa -1 vardır. Yaprak sadece ölçülü silindir içinde su seviyesinin üstünde konumlanmış olduğu için, yaprak giren suyun basıncı azaltma yerçekiminin etkisi, her zaman> -0.1 MPa olduğu, Ψ nihai için özellikle göreceli önemsiz olacaktır.
  • Suyun viskozitesi 15,19,20 sıcaklığa bağımlılığı ile indüklenen K yaprak değişiklikleri düzeltmek için, aşağıdaki denklem kullanılarak 25 ° C K yaprak değerleri standardize:
  • Denklem 1

    1. E buhar pressu eşdeğer yaprak hava-buhar basınç farkı ile bölünmüş olarak Stomatal iletkenlik (g ler) i tespit edilebiliryaprak bitişik bir sıcaklık ve bağıl nem sensörü kullanılarak belirlenen yeniden açığı (VPD). VPD, aşağıdaki denklem kullanılarak hesaplanır 21

    Denklem 2
    (; Arden Buck Denklem 22'ye göre bir sıcaklık fonksiyonu olarak kPa) ve AP atmosferik basınç (kPa) RH bağıl nem olduğu, VP hava doymuş buhar basıncıdır.

    2. Kurutulmuş Yapraklar için Yaprak Hidrolik İletkenlik Ölçüm

    1. Tercihen ksilem gerginlikler ıslak kağıt havlu ile dolu karanlık plastik torbalarda hava ve yerde kesilmiş, düşük olduğu gibi akşam ya da gece çekimleri toplayın. Laboratuarda, su altında her sürgünün sonunda en az iki düğüm yeniden keser. K le için kullanılmak üzere saf su ya da başka bir solüsyon içinde gece boyunca rehidrate çekim Letaf ölçümleri. Farklı çözümler etkileri bir faktör olarak araştırılması gereken sürece saf su akışı çözümü olarak tavsiye edilir.
    2. Saf su altında en az üç yaprakları ile segmente sürgünler kesin ve Ψ yaprak değerleri bir dizi farklı zaman aralıklarında için bir fan ile sürgünler kurutmak.
    3. Çekimlerin her yaprak çevresinde daha önce ekshale edilmiştir), ve sonra ıslak kağıt ile büyük yapışmalı torbaya bütün sürgün yerleştirmek; sonra sürgünler susuz, yapışmalı çanta (Nasco, Fort Atkinson, WI, ABD Whirl-Pak) yerleştirin havlu.
    4. Ateş en az 30 dakika (kesinlikle susuz çekimleri için uzun dengeleme kez gerekli olabilir) için muvazene edelim.
    5. Dengelenme sonra, ÖTV üst ve alt yaprak ve ölçü başlangıç ​​Ψ yaprağı (= Ψ o) bir basınç odalarını kullanarak.
    6. Bu iki yaprak Ψ yaprak arasındaki fark 0.1 den daha büyük MPa (stron için ise, sürgün silGly kurutulmuş yaprakları, bu aralık) 0,3 MPa kadar uzatılabilir.
    7. Üçüncü yaprak sonra yukarıdaki adım 1.2 -1.18 takiben, EFM K yaprak ve g s belirlemek için kullanılır. Özellikle, sürekli hal E stoma hala açık ve kütiküler iletkenlik 17 önemli ölçüde daha yüksek g s değerleri oluşturmak gibi, ileri derecede dehidrate yaprakları olmuştur yaprakları için bile elde edilebilir.
    8. Hidrolik açığı eğrileri oluşturmak için, adım 1.16 olarak Ψ nihai kullanarak K yaprak hesaplamak ve sonra düşük hangisi karşı komplo K yaprak değerleri, Ψ o veya Ψ nihai, yani deney sırasında yaprak yaşadığı güçlü dehidratasyon (= Ψ düşük). Benzer şekilde, yaprak dehidrasyon cevaben g s düşüş düşük Ψ karşı g s grafiğini çizerek belirlenir. Önceki çalışmalar sh vardır kendi dehidratasyon K yaprak ve g s 14,16 en azından kısmen geri dönüşümsüz düşüşler indükler.
    9. Biz Ψ düşük 0,5 MPa aralığı başına en az 6 K yaprak değerleri elde tavsiye (Çalıştığınız türler dehidratasyon gerçekten korumasız olması durumunda bu aralık 0.25 MPa azaltılabilir).
    10. Güvenlik açığı eğrisi 23 outliers kaldırmak için düşük Ψ her 0,5 MPa su potansiyeli aralığında K yaprak değerlere Dixon Aykırı testi yapın.
    11. Türler dehidratasyon 14,16 K yaprağı ve g s verdikleri yanıtlar farklılık olduğundan, her tür için farklı işlevler uygun ve maksimum olabilirlik (düşük AIC değeri; ayrıntılar için 14) seçin. Biz daha önce literatürde kullanılan uydurma en az dört fonksiyonları tavsiye: Doğrusal (pg "fo: content-width =" 1.4in "fo: src =" / files/ftp_upload/4179/4179eq3highres.jpg "/>), sigmoid ( Denklem 4 ), Lojistik ( Denklem 5 ) Ve üstel ( Denklem 6 ).

    3. Temsilcisi Sonuçlar

    Dehidrasyon ile yaprak hidrolik iletkenlik düşüş türler (Şekil 1) arasında kuvvetli bir şekilde değişmektedir. Yüksek ışınım altında ölçüldüğünde Kuraklık duyarlı türler, daha kuraklığa dayanıklı türler daha az negatif su potansiyellerine de güçlü bir düşüş yaşayabilir (PAR> 1.000 mmol • m -2 • s -1). Sumesic ot Helianthus annuus için hidrolik iletkenlik% 80 kaybı (P 80), potansiyel California chaparral yerli Heteromeles arbutifolia göre daha az olumsuz 3 MPa, oldu. Helianthus annuus olmayan gösterdi oysa Heteromeles arbutifolia, su potansiyelinin düşmesine doğrusal yanıtladı düşüş doğrusal.

    Stoma iletkenlik (g ler) ve yaprak hidrolik iletkenlik (K yaprak) Her ikisi de (Şekil 2) parlama dramatik yanıt verebilirsiniz. Raphiolepis indica için, stoma iletkenliği yüksek ışınım altında ölçülen yaprakları için dehidrasyon ile ciddi şekilde düşmüştür (PAR> 1.000 mmol • m -2 • s -1) ve laboratuvar ışık altında (PAR <6 mmol • m -2 • s -1). Yüksek ışınım altında, iyi aydınlatılmış lea için tipik bir su potansiyeline susuz olmuştu EFM ölçülen yaprakgün ortası sağlam bitkilere ves bir porometer (Şekil yıldız. 2) ile sağlam bitkiler üzerinde ölçülen yaprakları gibi benzer g s gösterdi. Özellikle, yüksek hidrasyon de yaprakları için, K yaprak düşük ışınım (11 vs 2.8 mmol m -2 s -1 MPa -1) daha yüksek sıcaklıklara maruz yaprakları için dört kat daha yüksek olduğu ve bu nedenle K yaprak iyi bir güçlü ışık tepki gösterdi Aram daha sulu yaprakları. Ayrıca, yüksek ışınım altında, K yaprak dehidratasyon daha ciddi şekilde düşmüştür. P 80 düşük parlama daha yüksek basınçta 0.93 MPa daha az negatif idi.

    Şekil 1
    Şekil 1. Duyarlı bir kuraklık (üstte) ve bir kuraklığa toleranslı (alt) türleri (14,24) olup olmadığını Yaprak hidrolik açığı eğrileri. Her nokta bir günah temsilevaporatif akı yöntemi (EFM) kullanarak müstakil bir yaprak üzerine yaprak hidrolik iletkenlik (K yaprak) ve gle ölçümü. Dikey çubuklar türün ilk yaprak hidrolik iletkenlik (P 80)% 80 kaybetti hangi su potansiyeli temsil etmektedir. Maksimum olabilirlik kullanarak En uygun fonksiyonlar hem türler için çizilir.

    Denklem 7

    Şekil 2,
    Şekil 2. Raphiolepis indica için düşen yaprak su potansiyeli stoma iletkenlik (g ler) ve yaprak hidrolik iletkenlik (K yaprak) ve tepkisi yüksek ve düşük parlama (16) altında ölçülür. (PAR> 1.000 ve <6 mmol • m -2 • s-1). Her nokta, sırasıyla yüksek ve düşük parlama altında ölçülen yaprakları temsil beyaz ve siyah noktalarla, evaporatif akı yöntemi (EFM) kullanarak müstakil bir yaprak tek bir ölçüm temsil eder. Yüksek ve düşük parlama içinde stoma iletkenlik eğrileri için denklemler: Denklem 8 ve Denklem 9 . Yüksek vs Düşük parlama güvenlik açığı eğrileri için denklemler: Denklemi 10 ve Denklemi 11 . Üst panelinde gri yıldızı ortalama ± sta temsilAram ve porometer ile gün ortası sağlam bitkilerin yaprakları üzerinde ölçülen yaprak su potansiyeli için ndard hatası. Gri ve alt panel siyah dikey çubuklar türleri sırasıyla yüksek ve düşük parlama altında ilk yaprak hidrolik iletkenlik (P 80)% 80 kaybetti hangi su potansiyeli temsil etmektedir.

    Discussion

    Burada sunulan evaporatif akı yöntemi stoma iletkenlik eşzamanlı ölçümleri ile laboratuvar yaprak hidrolik iletkenlik nispeten hızlı (30 dakika) belirlenmesini sağlar.

    EFM göz önüne alındığında, şimdiye kadar en yakın yaprak su doğal bir yol takip eden yöntem ki stoma 15 yaprak havasahalarında ve tümör su buharlaşır. K yaprak tayini için diğer deneysel yöntemler bir dizi özellikle üç ortak olmak, 25 var. (1) yüksek basınç akış yöntemi (HPFM), su yüksek basınç altında 15,26 yaprak ile itilir. Ancak, güvenlik açığı eğrileri bu yöntemle elde edilemez uygulanan pozitif basınç dolum embolisi olabilir ve mezofil dokusunda rehidrate çünkü. (2) rehidrasyon kinetiği yöntemi (RKM), K yaprak kanal ile susuz Yaprakları ve rehidrasyon arasındaki benzerlik kullanılarak hesaplanırBir dirençleri 27,28 ile seri bir kondansatör arging. Bu yöntem, hızlı, ancak yaprak içinde doğal transpirational yollarının tüm sistemi üretmez ve kolay bir şekilde yüksek parlama acclimated yaprak ölçüm izin vermek için değiştirilmez. Değişik şiddetlerde vakumlar Yaprak 15,26 gelen yaprak sürüş su kaybı uygulanır iken (3) Vakum pompası yöntemi (VPM) ise yaprak odasına yerleştirilir, onun sapı, bir denge üzerine bir su kaynağına bağlı. Bu yöntem, zaman alıcı olabilir. Üç yöntem kullanılarak Ölçümler tutarlı sonuçlar 15,28,29 vermek için bulunmuştur, ve bu nedenle sık sık kendi EFM transpirational su hareketine dayalı olarak verilmiş kullanılmış, ve onun nispi hız, ve farklı koşullar altında K yaprak ölçülmesi için kendi değişiklik edilir.

    K yaprak belirlemek için kullanılan tipik yöntemleri tüm acc rakamlarla belirsizlik düzeyi içerirtranspirasyon 25 karşılık urately itici güçtür. EFM yılında ΔΨ yaprak yaprak basınç bombayı dengelenmiş sonra bu toplu Ψ yaprak esas olarak K yaprak, gerçek itici güç daha düşük hesaplamak için kullanılır. Bu noktada, yaprak dökme Ψ zorunlu olarak hidrolik yolun, sonunda hücreler su potansiyelini temsil etmediği su buharlaşır değil, daha ziyade su, düşük su potansiyeline nispeten az hücreleri için bir hacim ağırlıklı ortalama hareketli ve buharlaştırılır, ve terleme akım izole edilebilir, yüksek su potansiyeli daha fazla sayıda hücre için. Ψ yaprak gerçek itici güç farkı ne kadar bu sayede su yaprak buharlaşan yere bağlıdır. Eğer yaprak boyunca su buharlaşır, toplu Ψ yaprak gerçek itici güç yakın olabilir ve su sadece çok az c buharlaşır eğerstoma yakın arşın, toplu Ψ yaprak ölçüde gerçek itici güç, yani, aslında çok daha düşük olabilir, bu hücrelerin su potansiyeli hafife olabilir, ve böylece gerçek K yaprak EFM ile belirlenen daha düşük olurdu. Böylece, EFM tarafından belirlenen K yaprak gerçek K yaprağı temsil ettiği ölçüde hala iyi anlaşılmış değildir su akış yolları, duyarlıdır. EFM K yaprağı (yukarıya bakınız) ölçmek için kullanılan diğer yöntemler ile eşleşmesi ve karşılaştırmalı kullanım için mükemmel veri, tür değişimi mezofil su akışı yollar daha ileri araştırmalara ihtiyaç olasılığı sağlar iken. Gerçekten de, hatta verilen türlerin yaprakları için, bu su yollarının farklı Irradiances ve ısı yükleri 4,30 altında veya farklı su durumu (doku küçülmesi verilen) 31, farklı koşullarda, örneğin altında değişebilir. Ayrıntılı bilgisu taşıma yollarının dolayısıyla EFM genel yaprak hidrolik taşıma değişen yollarının etkilerini gidermek için kullanılmasına izin istiyorum.

    EFM içinde stoma iletkenlik ölçümü ışınım ve dehidratasyon yanıtların belirlenmesine olanak tanımaktadır ve K yaprak g s eşleşen yanıtları sağlama avantajı vardır. Ek olarak, tekrar nemlendirme üzerine g s, ardından önceki yaprak kurutma etkisi bu yöntem ile tespit edilebilir. Bununla birlikte, bu yöntem, iki olası sakıncaları vardır. İlk olarak, bu g s ölçme yerine sağlam bir bitki değil, bir eksize yaprak üzerinde yapılan ve ikincisi de stoma iletkenlik tayini iklim yaprak ölçümü bazı mesafe, yerine porometer odası gibi yaprak yakın dayanmaktadır , fan ile yaprak havalandırma hava çevreleyen yaprak yüzeyinde equilibrates olsa. Bazı türler için, eksizeyaprakları bozulmamış bir bitki 16,32 yaprakları için farklı stoma tepkiler gösterebilir. Bununla birlikte, birçok türün g s EFM kullanılarak gün ortası Ψ yaprak 16 (Şekil 2) yaprak için bir porometer ile dokunulmamış bitkileri üzerinde ölçülen değerlere benzer tahmin edilmektedir.

    EFM K yaprak, yapısı ve anatomisi yılında temeli ve çevresel faktörlerle yanıtların dinamiklerin incelenmesi, fizyolojik içgörü, yani için uygulanabilir. Ayrıca, yöntem, farklı koşullar altında yetiştirilen belirli türdeki bitkiler karşılaştırmak ya da farklı yaşlardaki ya da farklı ortamlar için uyarlanmış farklı türdeki bitkiler ile karşılaştırmak için kullanılabilir.

    Yaprak açığı eğrileri inşa ederek, bir kuraklık türlerin tolerans mekanizmaları içgörü kazanabilirler. Kuraklık sırasında, kavitasyon ve hücre çökme bazı yaprak ksilem oluştuğu görülmüştür türler, ve dehidratasyon sırasında mezofil hücre küçülmesi de (14 yorum) su hareketinin etkileyebilir. Gelecekteki çalışmalar K yaprak ve stoma kapanması düşüş sürüş bu süreçlerin her birinin göreli önemini belirlemek için gerekli olacaktır.

    Işınım Ayrıca K yaprak ve EFM oldukça yüksek ışınım altında ölçümler için uygundur etkileyen güçlü bir faktördür. Işınım ve kuraklığa Aquaporinlerin kombine yanıt çok ilgi kazanmak gerekir. Azaltılmış ifade ve / veya Aquaporinlerin de-activatation dehidratasyon yol açar, K yaprağı azaltılması ise Yüksek Işınım, K yaprak artan artmış ekspresyonu ve / veya canlı hücreler aracılığıyla hızlı su akışına izin Aquaporinlerin aktivasyonuna yol açar. K yaprak üzerinde ışınım ve su temini kombine etkilerinin daha fazla araştırma 4,10,16,33 gerektirir.

    çadır "> Ayrıca, türler arasında, K yaprak ve güvenlik açığı. hafif su ve diğer kaynakların 3,13,24 arzı ile ilgili türlerin dağılımı ile ilgili olmuştur Türlerin kuru bölgelerden gelen bakan, hidrolik düşüş büyük bir direnç gösterme eğilimindedir daha olumsuz toprak su potansiyeli ve daha negatif su potansiyellerine yüksek bir K yaprak koruyarak, yüksek g s korumak ve fotosentez 13,14 için CO 2 çekmeye devam. Böylece, yaprak hidrolik özelliklerinin çalışma düzeyinde anlayışlar sağlar edebilirsiniz hücresi, yaprak ve tüm bitki ve çevreye karşı tepkileri, ve tüm ölçeklerde çok sayıda önemli yeni keşifler vermesi muhtemeldir.

    Disclosures

    Çıkar çatışması ilan etti.

    Acknowledgments

    Biz el yazması iyileştirilmesi için dört anonim değerlendirenler minnettarız ve Ulusal Bilim Vakfı (Hibe IOS-0546784) destek için.

    References

    1. Tyree, M. T., Zimmermann, M. H. Xylem Structure and the Ascent of Sap. , Springer. (2002).
    2. Lawlor, D. W., Cornic, G. Photosynthetic carbon assimilation and associated metabolism in relation to water deficits in higher plants. Plant Cell Environ. 25, 275-294 (2002).
    3. Sack, L., Holbrook, N. M. Leaf hydraulics. Annual Review of Plant Biology. 57, 361-381 (2006).
    4. Cochard, H., et al. Putative role of aquaporins in variable hydraulic conductance of leaves in response to light. Plant Physiol. 143, 122-133 (2007).
    5. Johnson, D. M., Meinzer, F. C., Woodruff, D. R., McCulloh, K. A. Leaf xylem embolism, detected acoustically and by cryo-SEM, corresponds to decreases in leaf hydraulic conductance in four evergreen species. Plant Cell Environ. 32, 828-836 (2009).
    6. Cochard, H., Froux, F., Mayr, F. F. S., Coutand, C. Xylem wall collapse in water-stressed pine needles. Plant Physiol. 134, 401-408 (2004).
    7. Blackman, C. J., Brodribb, T. J., Jordan, G. J. Leaf hydraulic vulnerability is related to conduit dimensions and drought resistance across a diverse range of woody angiosperms. New Phytol. 188, 1113-1123 (2010).
    8. Nardini, A., Salleo, S., Raimondo, F. Changes in leaf hydraulic conductance correlate with leaf vein embolism in Cercis siliquastrum L. Trees-- Structure and Function. 17, 529-534 (2003).
    9. Trifilo, P., Nardini, A., Lo Gullo, H. A., Salleo, S. Vein cavitation and stomatal behaviour of sunflower (Helianthus annuus) leaves under water limitation. Physiol. Plant. 119, 409-417 (2003).
    10. Shatil-Cohen, A., Attia, Z., Moshelion, M. Bundle-sheath cell regulation of xylem-mesophyll water transport via aquaporins under drought stress: a target of xylem-borne ABA. Plant J. 67, 72-80 (2011).
    11. Engelbrecht, B. M. J., Velez, V., Tyree, M. T. Hydraulic conductance of two co-occuring neotropical understory shrubs with different habitat preferences. Ann. For. Sci. 57, 201-208 (2000).
    12. Sheffield, J., Wood, E. F. Projected changes in drought occurrence under future global warming from multi-model multi-scenario, IPCC AR4 simulations. Climate Dynamics. 31, 79-105 (2008).
    13. Blackman, C. J., Brodribb, T. J., Jordan, G. J. Leaf hydraulic vulnerability influences species' bioclimatic limits in a diverse group of woody angiosperms. Oecologia. 168, 1-10 (2012).
    14. Scoffoni, C., McKown, A. D., Rawls, M., Sack, L. Dynamics of leaf hydraulic conductance with water status: quantification and analysis of species differences under steady-state. J. Exp. Bot. 63, 643-658 (2012).
    15. Sack, L., Melcher, P. J., Zwieniecki, M. A., Holbrook, N. M. The hydraulic conductance of the angiosperm leaf lamina: a comparison of three measurement methods. J. Exp. Bot. 53, 2177-2184 (2002).
    16. Guyot, G., Scoffoni, C., Sack, L. Combined impacts of irradiance and dehydration on leaf hydraulic conductance: insights into vulnerability and stomatal control. Plant, Cell & Environment. 35, 857-871 (2012).
    17. Scoffoni, C., Pou, A., Aasamaa, K., Sack, L. The rapid light response of leaf hydraulic conductance: new evidence from two experimental methods. Plant Cell Environ. 31, 1803-1812 (2008).
    18. Pasquet-Kok, J., Creese, C. Turning over a new "leaf": multiple functional significances of leaves versus phyllodes in Hawaiian Acacia koa. Plant, Cell & Environment. 33, 2084-2100 (2010).
    19. Weast, R. C. Handbook of Chemistry and Physics. , 54th, CRC Press. (1974).
    20. Yang, S. D., Tyree, M. T. Hydraulic resistance in Acer saccharum shoots and its influence on leaf water potential and transpiration. Tree Physiol. 12, 231-242 (1993).
    21. Pearcy, R. W., Schulze, E. -D., Zimmermann, R. Plant Physiological Ecology: Field Methods and Instrumentation. Pearcy, R. W., Ehleringer, J. R., Mooney, H. A., Rundel, P. W. , Kluwer Academic. 137-160 (2000).
    22. Buck, A. L. New equations for computing vapor-pressure and enhancement factor. Journal of Applied Meteorology. 20, 1527-1532 (1981).
    23. Biometry. Sokal, R. R., Rohlf, F. J. , 3rd, Freeman, W.H. (1995).
    24. Scoffoni, C., Rawls, M., McKown, A., Cochard, H., Sack, L. Decline of leaf hydraulic conductance with dehydration: relationship to leaf size and venation architecture. Plant Physiol. 156, 832-843 (2011).
    25. Sack, L., Tyree, M. T. Vascular Transport in Plants. Holbrook, N. M., Zweiniecki, M. A. , Elsevier/Academic Press. (2005).
    26. Nardini, A., Tyree, M. T., Salleo, S. Xylem cavitation in the leaf of Prunus laurocerasus and its impact on leaf hydraulics. Plant Physiol. 125, 1700-1709 (2001).
    27. Brodribb, T. J., Holbrook, N. M. Stomatal closure during leaf dehydration, correlation with other leaf physiological traits. Plant Physiol. 132, 2166-2173 (2003).
    28. Blackman, C. J., Brodribb, T. J. Two measures of leaf capacitance: insights into the water transport pathway and hydraulic conductance in leaves. Funct. Plant Biol. 38, 118-126 (2011).
    29. Nardini, A., Raimondo, F., Lo Gullo, M. A., Salleo, S. Leafminers help us understand leaf hydraulic design. Plant Cell Environ. 33, 1091-1100 (2010).
    30. Sheriff, D. W. Evaporation sites and distillation in leaves. Ann. Bot. 41, 1081-1082 (1977).
    31. Canny, M. J., Huang, C. X. Leaf water content and palisade cell size. New Phytol. 170, 75-85 (2006).
    32. Santiago, L. S., Mulkey, S. S. A test of gas exchange measurements on excised canopy branches of ten tropical tree species. Photosynthetica. 41, 343-347 (2003).
    33. Sack, L., Cowan, P. D., Jaikumar, N., Holbrook, N. M. The 'hydrology' of leaves: co-ordination of structure and function in temperate woody species. Plant Cell Environ. 26, 1343-1356 (2003).

    Tags

    Bitki Biyolojisi Sayı 70 Moleküler Biyoloji Fizyoloji Ekoloji Biyoloji Botanik Yaprak özellikleri hidrolik stoma terleme ksilem iletkenlik yaprak hidrolik iletkenlik direnç evaporatif akı yöntemi tüm bitki
    Evaporatif Akı Yöntemi (EFM) kullanarak Işınım ve Dehidrasyon için Yaprak Hidrolik İletkenlik ve Stoma İletkenlik ve Yanıtları Ölçümü
    Play Video
    PDF DOI

    Cite this Article

    Sack, L., Scoffoni, C. MeasurementMore

    Sack, L., Scoffoni, C. Measurement of Leaf Hydraulic Conductance and Stomatal Conductance and Their Responses to Irradiance and Dehydration Using the Evaporative Flux Method (EFM). J. Vis. Exp. (70), e4179, doi:10.3791/4179 (2012).

    Less
    Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
    View Video

    Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

    Waiting X
    Simple Hit Counter