من خلال الجمع بين ومصقول المقوى رقيقة الجمجمة (منافذ) الجمجمة وورم أرومي دبقي إطار حقن الخلايا (GBM)، يمكننا أن نلاحظ بدء دبقي والنمو من خلايا GBM حقن في دماغ فأر حي طوليا.
دبقي هي واحدة من أكثر أشكال السرطان فتكا من الإنسان. العلاج الأكثر فعالية لدبقي جراحة حديثة تليها الاشعاع المعاملة يقدم المرضى فوائد متواضعة، حيث أن معظم المرضى لا البقاء على قيد الحياة أكثر من خمس سنوات بعد التشخيص بسبب الانتكاس 1،2 دبقي. اكتشاف الخلايا الجذعية السرطانية في أورام الدماغ البشري يحمل وعدا عن وجود تأثير هائل على وضع استراتيجيات علاجية جديدة لدبقي 3. وتعرف الخلايا الجذعية السرطانية بقدرتها على حد سواء في تقرير المصير، وتفرق لتجديد، ويعتقد أن تكون الخلايا السرطانية فقط في أن لديها القدرة على الشروع في أورام جديدة 4. ويعتقد دبقي الانتكاس العلاج الإشعاعي التالي لتنشأ من مقاومة الخلايا الجذعية دبقي (GSCs) للعلاج 5-10. في الجسم الحي، وترد GSCs للإقامة في محراب حول الوعاء وهذا أمر مهم للحفاظ على الخلايا الجذعية من خصائص شبيهة 11-14 . المركزية إلى املنظماتzation من مكانة GSC هي خلايا بطانة الأوعية الدموية 12. الأدلة الموجودة تشير إلى أن GSCs وتفاعلها مع خلايا بطانة الأوعية الدموية هي مهمة للتنمية الورم، وتحديد GSCs وتفاعلها مع الخلايا البطانية كأهداف العلاجية الهامة لدبقي. يتم تحديد وجود GSCs تجريبيا من قدرتها على بدء أورام جديدة على زرع مثلي 15. ويتحقق هذا عادة عن طريق حقن عدد محدد من الخلايا المعزولة من الأورام GBM الإنسان في أدمغة الفئران التي تعاني من نقص المناعة الشديد، أو من الخلايا GBM الماوس في أدمغة الفئران مسانج مشترك المضيف. ثم يتم إجراء فحوصات لنمو الورم بعد الوقت الكافي للسماح GSCs بين خلايا GBM حقن تثير أسابيع الأورام عادة جديدة، أو عدة أشهر. وبالتالي، المقايسات القائمة لا تسمح دراسة العملية المرضية من المهم بدء الورم من GSCs واحدة في الجسم الحي. ونتيجة لذلك، من الضروري طnsights في أدوار معينة من GSCs وتفاعلها مع خلايا بطانة الأوعية الدموية في المراحل الأولى من بدء الورم غير متوفرة. رؤى مثل هذه العناصر الهامة لتطوير استراتيجيات علاجية جديدة لدبقي، وسيكون لها آثار كبيرة على منع الانتكاس في المرضى الذين دبقي. هنا تكيفنا المنافذ الجمجمة إجراء إطار 16 و في الجسم الحي ثنائي الفوتون المجهري للسماح التصور من بدء الورم من الخلايا المحقونة GBM في دماغ فأر حي. سوف أسلوبنا تمهيد الطريق لمستقبل الجهود لتوضيح الآليات الرئيسية عصبي بين خلايا بطانية GSCs والأوعية الدموية أثناء بدء دبقي.
المفتاح لنجاح الموانئ نافذة الجمجمة هو رقيق والتلميع. في حين لا يمكن أن يؤديها الأولية ترقق بسرعة، ينبغي توخي الحذر لضمان متجانسة ترقق في الجمجمة على مساحة واسعة. عادة نطبق طبقة رقيقة من المياه المالحة في الجمجمة، والجمجمة رقيقة ثم مرور واحد في وقت واحد، على ان يكون ?…
The authors have nothing to disclose.
ويدعم هذا العمل من قبل مختبر جاكسون سرطان المنح الرائدة ومركز للسرطان مؤسسة ولاية ماين.
Name of reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
DMEM/F12(1:1) with Sodium Pyruvate | Thermo Sci Hyclone | SH3026101 | |
B-27 Serum Free Supplement (50x) | Invitrogen | 17504-044 | |
GlutaMax-1 Supplement | Invitrogen | 35050061 | |
Penicillin-Streptomycin Solution | Thermo Sci Hyclone | SV30010 | |
Accutase-Enzyme Cell Detachment Medium | eBiosciences | 00-4555-56 | |
T25 flasks-vent cap green | SARSTEDT | 83.1810.502 | |
70% alcohol | JAX LAHS | ||
10% povidone-iodine topical solution | JAX LAHS | ||
Ketamine HCl | Butler Animal Health Supply | NDC# 11695-0550-1 | |
Xylazine | Akorn, Inc. | NADA# 139-236 | |
Carprofen | JAX LAHS | ||
Ophthalmic ointment | Dechra Veterinary Products | 17033-211-38 | |
0.5% Lidocaine HCl | REGENT, Inc. | NDC 0517-0625-25 | |
Cyanoacrylate glue | Henkel Corp. | 46551 | |
Sterile Swabs | Fisher Scientific | 23-400-114 | |
Diamond paste | Widget Supply | BBE60 | |
Tin oxide | LORTONE, Inc. | 591-038 | |
Liner Bond 2V | KURARAY Medical Inc. | 1921-KA | |
Clearfil AP-X | KURARAY Medical Inc. | 1721-KA | |
Saline | JAX LAHS | ||
Cover glass | Warner Instruments | 64-0720 | |
Hex Nut | Small Parts, Inc. | HNX-0090-C | |
Syringe Pump | Syringepump.com | NE-1000 | |
Two-Photon imaging system | Custom built (Any commercial system would work) |