Summary
Мы сообщаем о методах micropattern нанопористых золото тонких пленок с помощью трафаретной печати и фотолитографии, а также методов культуры клеток на микроизготовленном узоров. Кроме того, мы опишем методы анализа изображений, чтобы охарактеризовать морфологию материала и культивируемые клетки с помощью сканирующей электронной и флуоресцентной микроскопии.
Abstract
Наноструктурированных материалов с функцией размеров в десятки нанометров повысили производительность нескольких технологий, включая топливные элементы, биосенсоры, биомедицинские устройства покрытий, а также инструменты для доставки лекарств. Нанопористых золота (NP-Au) производства нано-процесса самосборки, является относительно новым материалом, который обладает большой эффективной площадью поверхности, высокой электропроводностью и каталитической активностью. Эти свойства сделали NP-Au привлекательным материалом для научного сообщества. Большинство исследований по NP-Au использовать макро-масштабе образцы и сосредоточить внимание на фундаментальную науку материала и его каталитические и датчик приложений. Макромасштабе образцов ограничить потенциальные NP-Au в миниатюрных систем, в том числе биомедицинских устройств. Для того, чтобы решить эти вопросы, мы изначально описывают два различных метода micropattern NP-Au тонких пленок на жестких носителях. Первый метод использует вручную производства трафаретов для создания масок миллиметрового масштаба NP-Au узоры, Whilе второе метод использует взрывной фотолитографии для формирования рисунка суб-миллиметрового масштаба модели. Как NP-Au тонкой пленки получаются методом распыления процесса осаждения, они совместимы с обычными методами микротехнологий, тем самым поддается легкому интеграции в Microsystems. Эти системы включают электрически адресацией биосенсоров платформ, благодаря высоким эффективная площадь поверхности, электропроводность, и золото-тиольными основе биоконъюгации поверхности. Опишем культуры клеток, иммунных и методы обработки изображений для количественной взаимодействие пр-Au с клетками млекопитающих, который является важным параметром производительность для некоторых биосенсоров. Мы ожидаем, что методы иллюстрируются здесь будет способствовать интеграции НП-Au в платформах на различных масштабах длины и в различных приложениях, в том числе биосенсоров, системы хранения энергии, и катализаторов.
Introduction
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Нанопористых Изготовление золота
- Чистый субстратов в Piranha решение
- Добавить 25 мл перекиси водорода (30%) в 100 мл серной кислоты (96%) в чашке кристаллизации и смесь нагревают до 65 ° С на плите. ВНИМАНИЕ: жидкость чрезвычайно коррозии и должны быть обработаны с осторожностью. Отработанный раствор не следует хранить в плотно закрытой таре, так как она может взорваться.
- Место 1-дюймовый 3-дюймовые предметные стекла в смеси с использованием кислотостойких щипцов и очистить их в течение 10 мин. Использовать лодку фарфора иммуноокрашивания для пакетного очистки небольших покровные. Лечение небольшой покровные стекла с воздушной плазмы при 10 Вт в течение 30 с перед погружением в раствор.
- Промыть очищены образцов при кристаллизации блюда под проточной деионизированной (DI) воде в течение 3 мин. Сушить образцы с азотом пистолет над тканью без полотенца.
- Подготовить трафарет маски (Метод 1: Использование этого для создания миллиметрового масштаба моделей)
- Удар 250 мкм толщиной силиконового эластомера листов с биопсией удары и / или надрезать из регионов со скальпелем над полутвердых пластиковой поверхности. Очистите обрабатываемых листов эластомера в 70% изопропанола и сухим азотом пистолет.
- Поместите перфорированный лист на безворсовой полотенце чистое помещение и выровняйте пираньи очисткой покровные по трафарету с образцом поверхности, обращенной к трафарет.
- Pattern старт фоторезиста (Способ 2: Используйте это для создания суб-миллиметрового масштаба моделей)
- Наведите пираньи очисткой стекло микроскопа на спиннинг Чаком и сдуйте частицы азотом пистолет. Распределить 1,5 мл промотор адгезии (гексаметилдисилазана) на предметное стекло с помощью пластиковой пипетки. Распространение промоутер, крутя слайд последовательно при 500 оборотах в течение 5 секунд, 1500 оборотов в минуту в течение 30 сек. Выпекать слайда на плите при температуре 115 ° С в течение 7 мин и дайте ему остыть в течение 5 мин.
- Внесите 4 мл фоторезиста на стекле (3-дюймовый Bу 1-дюйм). Распространение фоторезиста, крутя слайд с тем же протоколом, для адгезии. Выпекать фоторезиста на плите при температуре 115 ° С в течение 1,5 мин и дайте ему остыть в течение 10 мин.
- Expose фоторезиста покрытием слайд с ультрафиолетовым светом (интенсивностью: 22 мВт / см 2) через маску прозрачности на 15 сек. Выпекать фоторезиста на плите при температуре 115 ° С в течение 1,5 мин и ждать в течение 45 мин. Растворите фоторезиста подвергается в проявитель, по крайней мере 3,5 мин. Тщательно промыть водой DI. Проверьте разработана модель под оптическим микроскопом.
- Депозит предшественников металлов для производства NP-Au тонких пленок
- Загрузите образцы в распылении машина, которая может независимо месторождения золота, серебра и хрома. Распылением очистить образцы в течение 90 сек при 50 Вт до 25 мторр атмосфере аргона обработки перед началом осаждения металла.
- Металлизированные хром течение 10 мин при 300 Вт при 10 мТорр аргона. Sputter золота в течение 90 сек при 400 Вт ООНдер 10 мторр аргона. Co-напылением золота и серебра в течение 10 мин с серебром на 200 Вт и Au мощности на 100 Вт Отключите источник золотого напыления около 10 секунд перед выключением серебра распылением источника.
- Получить micropatterns предшественника металла
- Обрабатывают ультразвуком фоторезиста покрытием образцов в ~ 180 мл фоторезиста зачистки в течение 10 циклов по 20 сек ультразвуком и 2 мин пауза между циклами. Промыть образцов с деионизированной водой и сушат с азотом пистолета. Проверьте металл шаблонов под микроскопом.
- Пил эластомера трафарета от не-фоторезиста покрытых образцов с помощью двух пинцетов выявить осажденного металла.
- Dealloy предшественника металла и модифицировать наноструктуры с помощью термической обработки
- Наполните 200 мл химический стакан на 170 мл азотной кислоты (70%) и поддерживают температуру раствора при 55 ° С на плите. ВНИМАНИЕ: азотной кислоты чрезвычайно коррозионных и должны быть обработаны соответствующими средствами защиты. Лечения небольших покровные воздушной плазмой на 10 Вт в течение 30 секунд перед погружением в азотную кислоту. Место 1 дюйм на 3 дюйма предметные стекла в стакан использованием кислотоупорной щипцов и dealloy их в течение 15 мин. Использовать лодку фарфора иммуноокрашивания для пакетной dealloying небольшой покровные.
- Промойте dealloyed образцы последовательно погружая их в два стакана с пресной водой DI три раза. Хранить образцов в деионизованной воде и заменить воду со свежей деионизированной воды каждый день в течение по крайней мере недели. Сушить образцы с азотом пистолет на безворсовой полотенца перед использованием.
- Загрузите образцы на чистую кремниевых пластин в быстрой термической обработки оборудования. Регулировка температуры в диапазоне от 200 ° C до 450 ° C и скорости нагрева 10 ° С / сек. Проэкспонируйте образцов заданной температуре в течение 10 мин в атмосфере азота в окружающую среду. Пусть камера прохладном (<100 ° C) и снимите образцов. Кроме того, медленно поместить образцы на конфорке для тепловой TreatmЛОР.
2. Культура клеток
- Подготовьте NP-Au образцы для клеточной культуры
- Место NP-Au образцов полистирола блюда и обработать воздушной плазмы на 10 Вт в течение 30 сек и передачу образцов до 24-луночных культуральных планшетах.
- Добавить 500 мкл полной культуральной среде (модифицированная Дульбекко среда Игла с 10% фетальной бычьей сыворотки и 1% пенициллина / стрептомицина) в каждую лунку. Хранить в увлажненном инкубаторе при температуре 37 ° С и 5% СО 2 до посева клеток (<1 час).
- Поддерживать, прохождение, и семенной клетки
- Поддерживать интерес клетки (в данном случае 3T3-фибробласты NIH или мышиный астроциты) T75 в колбы с питательной среды и прохождения когда клетки 70% вырожденная.
- Для пассирования соты, удалить носитель из колбы, мыть дважды 10 мл забуференного фосфатом физиологического раствора (PBS), добавляют 2 мл 1x трипсин / ЭДТА и инкубировать пока клетки отсоединения (~ 5 мин). Добавьте 3 мл свежей среды ицентрифуге при 1200 оборотов в минуту в течение 3 минут. Супернатант и приостановить гранул в 2 мл среды.
- Удалить истощенных средах из лунок и семена клеток на покровных стеклах, при плотности 25000 клеток / см 2 с до конечного объема 1 мл. Встряхнуть культуральный планшет вперед-назад и вправо-влево, чтобы гарантировать однородное нанесение клеток на образцах. Инкубируйте клетки до анализа при осмотре ежедневно.
3. Сотовые и Анализ материала
- Пятно клетки для визуализации цитоскелета и ядра
- Удаления отработанного носителя из лунок и промыть клетки дважды с PBS. Fix клеток в 4% параформальдегид в PBS в течение 15 мин.
- Подготовка окрашивание раствора 300 нМ Alexa Fluor 488 фаллоидин в PBS с 1% бычьего сывороточного альбумина.
- Мытье клетки дважды с PBS, и проницаемыми их в 500 мкл 0,1% Тритон Х-100 в PBS в течение 5 мин.
- Вымойте клетки дважды с PBS и передавать их для очистки скважин. Клякса 50 - 200 мкл окрашивающего раствора на образцах и хранить в темноте в течение 20 мин.
- Мытье клеток с PBS и контр-пятна с 3 нМ DAPI в PBS в течение 5 мин.
- Вымойте клеток с PBS, и опустите в деионизированной воде перед установкой на слайдах стеклянная крышка с монтажными средствами массовой информации и уплотнение с четкими лак для ногтей.
- Получение изображений НП-Au образцов и клеточных культур на NP-Au поверхностей
- Изображение пр-Au поверхности с помощью сканирующего электронного микроскопа (СЭМ) с 50000-кратным увеличением на 10 кВ энергии электронов использованием детектора вторичных электронов.
- Захват композитные изображения ячейки в разных местах на образцах с использованием перевернутой флуоресцентного микроскопа при 10-кратным увеличением с соответствующими светофильтрами.
- Обработать изображения, чтобы определить пору и морфологии клеток
- Открытие изображений в ImageJ и разделяются на несколько отдельных каналов, если это применимо. Преобразовать образы в 8-битных, вычитания фона и сгладить их средний filteriнг. Отрегулируйте порог либо вручную, либо с помощью встроенного пороговых алгоритмов для выделения пор (пустот) и клеточных тел / ядер.
- Использование водоразделе команду для разделения объединенного поры или клеток. Установите параметры анализа частиц и выполнить команду для извлечения числа частиц, средняя площадь, и процент охвата частиц. Используйте DAPI-окрашенные изображения ячейку для подсчета клеток и фаллоидином окрашенные изображения клетки для количественного Процент охвата ячейки.
- Изменить включаемых файлов макросов выполнять пакетную анализ нескольких изображений.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Рисунок 1 очерчиваются основные процедурные шаги, включая создание NP-Au узоры, культивирования клеток, количественной наноструктуры, и характеризующие морфологию клетки. Эластомер трафарета показано на рис 2а (вверху) используется для создания NP-Au моделей показано на рисунках внизу. Рис. 2b представляет собой фотографию фарфоровую лодочку для образцов пакетной обработки. Фиг.2с отображает изменение цвета металла на хранение моделей до и после dealloying. Серебристой отделкой (до dealloying) связано с серебряным сплавом богатым содержанием. После dealloying, пленка приобретает заметно оранжево-коричневый оттенок. Рисунок 2d показывает тонкие особенности производства фотолитографическая паттерна металла. Различные пор морфологии может быть получена путем термической обработки в пр-Au фильмов 9, как показано на рисунке 3. Поперечного сечения изображения (фиг.Юр 3) показывает, является ли пленок dealloyed равномерно по толщине пленки. SEM изображения может быть сегментирован (пороговых) в бинарных изображений (рис. 3 нижний ряд) для определения размера и процентов охвата пустотами (Код 1). Представитель флуоресценции образ приверженца мышиный астроцитов клеток, культивируемых на NP-Au поверхности показано на рисунке 4. Отдельные каналы изображения могут быть разделены и сегментированные для получения бинарных изображений для анализа клеточного материала взаимодействия. Сегментированный изображения цитоскелета может быть использована для количественного площадь ячейки и покрытие поверхности (Код 2), в то время как сегментированные изображения клеток ядра являются полезными для подсчета клеток (код 3). Фиг.5 представляет собой визуальный резюме общие сбои при изготовлении пр-Au структуры , в том числе плохой адгезии пленка, отсутствие пористости и чрезмерной тепловой обработке.
Рисунок 1. Схематическое изображение основных этапов обработки. Промыты кислотой подложках с оклеить вручную вырезать маску или трафарет с рисунком фотолитографически слой фоторезиста. Золото и серебро цели одновременно распыленных создать серебра богатых сплава золота, где маски передачи моделей на стеклянные подложки. Сплав шаблоны dealloyed в азотной кислоте для создания нанопористые золота (NP-Au) узоров. Интерес клетки культивируют на образцах и они изображены с флуоресценции и сканирующие электронные микроскопы, чтобы извлечь как биологические и морфологические особенности. Нажмите здесь, чтобы увеличить рисунок .
Рисунок 2. Оптические изображения () силиконовые трафарет (верхняя), используемый для формирования паттерна предшественником золото-серебряного сплава, который производит NP-Au массива (снизу);. (B) фарфоровую лодочку для образцов пакетной обработки, (в) типичный цвет распыленного AuAg Сплав (вверху) и dealloyed пленка (внизу), и (г) с более высоким разрешением NP-Au моделей производства фотолитографическая маскирование при золота и серебра осаждения.
Рисунок 3. Np-Au SEM изображения (верхний ряд) и соответствующие сегментированных изображений (нижний ряд), которые используются для извлечения средний размер пустотыго процента пустот покрытия. SEM изображение (вверху справа) из расщепленной NP-Au примера отображается однородной пористой структурой через пленку толщиной. Нажмите здесь, чтобы увеличить рисунок .
Рисунок 4. Композитный F-актин (зеленый) и ядра (синий) окрашенные изображения клетки, которая сегментирован для извлечения Процент охвата клетку из зеленого канала и количество элементов среди ясного неба.
Рисунок 5. Образы обычных неудач. (А) расслоениепри dealloying из-за недостаточного клейкий слой хрома, (б) отсутствие пористости после dealloying из-за недостаточного содержание серебра в сплаве, и (с) полное спекание пр-Au пленки из-за температуры термообработки слишком высокой.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Мы демонстрируем двух различных методов, чтобы micropattern NP-Au фильмов для расширения использования этих фильмов в Microsystems и биологических исследований. Распылением покрытие золото и серебро является универсальным методом для создания пр-Au узоров, как распыление, совместимый с обычными процессами микротехнологий и состава сплава и толщина может быть легко регулировать путем изменения отдельных распыление полномочий пистолета (на золото и серебро целей) и времени осаждения соответственно. Типичные NP-Au толщиной пленки диапазоне от 200 нм до 2 мкм. Трафарет метод (метод 1, 2а) с помощью биопсии пуансонов и скальпель позволяет создавать миллиметрового масштаба модели обход необходимости фотолитографии. Более сложные узоры могут быть получены путем программируемый резак лазера. Совместимый трафарета силиконового эластомера самостоятельно придерживается на стеклянных поверхностях, тем самым предотвращая осаждения металла под маской и увеличение шаблона разрешение. Тем не менее, меньше Fнкции (<1 мм), как правило, трудно изготовить с помощью этого метода, как толщина трафарета предотвращает равномерное осаждение металла через отверстия в маске. Приложения, которые требуют более высокую функцию разрешение может быть достигнуто с фотолитографическая структурирование (метод 2, рис 2d). Масок прозрачности для передачи шаблонов с помощью фотолитографии могут быть получены из нескольких компаний (например, выходной Сити, Бэндон, OR) и экономичны альтернативы хром стекло маски при минимальном желаемых размеров особенность более ~ 20 мкм. Осаждение металла на совместимый трафарета иногда приводит к отделению трафарета от подложки за счет неоднородного напряженного поколения. Как правило, мы смягчить эту проблему путем обеспечения трафарет к основной подложке с использованием полиимидной лентой по краям.
При меньших образцов, таких как круглые покровные стекла (12 мм в диаметре), обычно используемых в нашем исследовании, фарфор лодки показано на
Термическая обработка NP-Au фильмов является удобным и управляемым способ модификации морфологией пор (рис. 3). В то время как быстрый термический отжиг инструмент является желательным для термообработки, печи и плитой также получить приемлемые результаты. Tон тепловой дозы и температуру следует тщательно контролировать, поскольку высокие температуры (> 500 ° C), может привести к полному спеканию пр-Au и исчезновение пористость (рис. 5в). Ваше содержание серебра в сплаве на хранение (менее 60% серебра, ат.%) Также предотвращает образование пористости (рис. 5б).
Для того чтобы установить жизнеспособной культуры клеток на вышеупомянутых пр-Au покрытых поверхностей, важно, чтобы впитать образцов в деионизованной воде, с некоторыми изменениями воды, чтобы полностью удалить остатки азотной кислоты из пористой сети. Хотя это не было необходимости обрабатывать поверхности со специфическими внеклеточного матрикса (ЕСМ) белки перед посевом клеток, мы обнаружили, что плазменная обработка и выдержки образцов в среде клеточной культуры перед посевом клеток существенно улучшить адгезию и жизнеспособность клеток. Это улучшение, скорее всего, в связи с неспецифической адсорбции адгезии белков из сыворотки в СЕLL питательных сред на NP-Au поверхности. Для культуры клеток условий, которые требуют бессывороточной среде, может быть необходимо предварительно обработать пр-Au поверхности с молекулами ЕСМ (например, фибронектин).
Для определения поры / размер пустот и охвата, а также количество клеток и их охват, изображения должны быть преобразованы в двойные черные и белые изображения (см. рисунки 3 и 4) - процесс также известен как сегментация. Это требует выбора порога серого, склонной к пользователю предвзятости. Таким образом, абсолютные значения определяются обработки изображения должны быть представлены с осторожностью. Большинство исследований требует сравнение различных морфологии клеток и наноструктуры, поэтому тех пор, пока анализ параметров (например, пороговый размер частиц окне) хранятся последовательно через образцы статистической значимости может быть достигнуто при относительно небольшом количестве образцов. До сегментации изображений, это также полезнодля сглаживания изображения и вычитать фон с помощью встроенных команд в ImageJ (или более специализированные версии, Фиджи). Мы настроить параметры включены в макрос (дополнительные файлы код 1-3) пакетной обработки нескольких изображений.
Мы ожидаем, что методы продемонстрировали здесь поможет научному сообществу в интеграции NP-Au в Microsystems, в том числе нескольких массивов электрод для электрофизиологии, биосенсоров, и миниатюрные схемы хранения энергии. Кроме того, мы считаем, что полу-количественные методы обработки изображений будет ценно для широкого спектра исследований по взаимодействию материалов и прилипшие клетки.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют противоречивые финансовых интересов.
Acknowledgments
Kurtulus О. и Д. Dimlioglu поддерживаются Калифорнийского университета Лаборатория Сборы Программа исследований премию 12-LR-237197. П. Daggumati поддерживается Университетом Калифорнии Дэвис Инвестиции исследований в науке и инженерии (RISE) Award. CA Чепмен поддерживается Департаментом образования Высшей помощи области национальных стипендий нужде. Эта работа была поддержана UC Лаборатория Сборы программы исследований, UC Davis расти, и UC Davis инженерного колледжа запуска средства.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Gold target | Lesker | EJTAUXX403A2 | Precursor to alloy for producing np-Au |
| Chrome target | Lesker | EJTCRXX353A2 | Adhesive layer |
| Silver target | Lesker | EJTAGXX403A2 | Precursor to alloy for producing np-Au |
| Porcelain boat | Thomas Scientific | 8542E40 | Used for processing small samples |
| Nitric acid | Sigma-Aldrich | 43873 | Used at 70% for dealloying |
| Sulfuric acid | J.T Baker | 7664-93-9 | Used at 96% for piranha cleaning |
| Hydrogen peroxide | J.T Baker | 7722-84-1 | Used at 30% for piranha cleaning |
| Biopsy punches | Ted Pella | 150xx | Available in several sizes |
| Silicone elastomer sheets | Rogers Corporation | HT 6240 | Available in several thicknesses |
| Hexamethyldisilazane | Sigma-Aldrich | 440191-100ML | Used as adhesion promoter for positive resist |
| Microposit MF CD26 | Shipley | 38490 | Positive photoresist developer |
| PRS 3000 | J.T Baker | JT6403-5 | Positive photoresist stripper |
| Circular glass coverslips (12 mm) | Ted Pella | 26023 | Used as substrate for metal patterns and cell culture |
| Glass slides (1 x 3 inch) | Ted Pella | 26007 | Used as substrate for metal patterns |
| Kapton polyimide tape | VWR | 82030-950 | Used for securing elastomer |
| Transparency masks | Output City | Used in photolithography http://www.outputcity.com/ | |
| Plasma cleaner | Harrick Plasma | PDC-32G | Used for activating glass surfaces |
| Sputtering machine | Kurt J. Lesker | LAB18 | Used for depositing metals |
References
- Arico, A. S., Bruce, P., Scrosati, B., Tarascon, J. M., Van Schalkwijk, W. Nanostructured materials for advanced energy conversion and storage devices. Nature Materials. 4, 366-377 (2005).
- Roy, S., Gao, Z. Nanostructure-based electrical biosensors. Nano Today. 4, 318-334 (2009).
- Chen, C. L., et al. DNA-decorated carbon-nanotube-based chemical sensors on complementary metal oxide semiconductor circuitry. Nanotechnology. 21, 095504 (2010).
- Lu, J., Rao, M. P., MacDonald, N. C., Khang, D., Webster, T. J. Improved endothelial cell adhesion and proliferation on patterned titanium surfaces with rationally designed, micrometer to nanometer features. Acta Biomaterialia. 4, 192-201 (2008).
- Wagner, V., Dullaart, A., Bock, A. K., Zweck, A. The emerging nanomedicine landscape. Nat. Biotechnol. 24, 1211-1218 (2006).
- Weissmüller, J., Newman, R., Jin, H., Hodge, A., Kysar, J. Theme Article - Nanoporous Metals by Alloy Corrosion: Formation and Mechanical Properties. Materials Research Society Bulletin. 34, 577-586 (2009).
- Erlebacher, J., Aziz, M., Karma, A., Dimitrov, N., Sieradzki, K. Evolution of nanoporosity in dealloying. Nature. 410, 450-453 (2001).
- Okman, O., Lee, D., Kysar, J. W. Fabrication of crack-free nanoporous gold blanket thin films by potentiostatic dealloying. Scripta Mater. 63, 1005-1008 (2010).
- Seker, E., Reed, M., Begley, M. Nanoporous Gold: Fabrication, Characterization, and Applications. Materials. 2, 2188-2215 (2009).
- Biener, J., et al. Size effects on the mechanical behavior of nanoporous Au. Nano Lett. 6, 2379-2382 (2006).
- Senior, N., Newman, R. Synthesis of tough nanoporous metals by controlled electrolytic dealloying. Nanotechnology. 17, 2311-2316 (2006).
- Zielasek, V., et al. Gold catalysts: Nanoporous gold foams. Angew. Chem. Int. Ed. 45, 8241-8244 (2006).
- Wittstock, A., Biener, J., Bäumer, M. Nanoporous gold: a new material for catalytic and sensor applications. PCCP. 12, 12919-12930 (2010).
- Shulga, O., et al. Preparation and characterization of porous gold and its application as a platform for immobilization of acetylcholine esterase. Chem. Mater. 19, 3902 (2007).
- Shulga, O., Zhou, D., Demchenko, A., Stine, K. Detection of free prostate specific antigen (fPSA) on a nanoporous gold platform. The Analyst. 133, 319-322 (2008).
- Seker, E., et al. The fabrication of low-impedance nanoporous gold multiple-electrode arrays for neural electrophysiology studies. Nanotechnology. 21, 125504 (2010).
- Seker, E., Berdichevsky, Y., Staley, K. J., Yarmush, M. L. Microfabrication-Compatible Nanoporous Gold Foams as Biomaterials for Drug Delivery. Advanced Healthcare Materials. 1, 172-176 (2012).
- Okman, O., Kysar, J. W. Microfabrication of Nanoporous Gold. Nanoporous Gold: From an Ancient Technology to a High-Tech Material. 22, 69 (2012).
- Lee, D., et al. Microfabrication and mechanical properties of nanoporous gold at the nanoscale. Scripta Mater. 56, 437-440 (2007).
- Seker, E., et al. The effects of post-fabrication annealing on the mechanical properties of freestanding nanoporous gold structures. Acta Mater. 55, 4593-4602 (2007).
- Parida, S., et al. Volume change during the formation of nanoporous gold by dealloying. Phys. Rev. Lett. 97, 35504-35506 (2006).
