एकाधिक प्रकाश क्षति प्रोटोकॉल क्षति photoreceptors को बताया और फलस्वरूप वयस्क zebrafish में एक रेटिना उत्थान प्रतिक्रिया को प्रेरित किया गया है. इस प्रोटोकॉल रंजित पशुओं में इस्तेमाल किया जा सकता है कि एक बेहतर विधि का वर्णन करता है और उस छड़ी और पूरे रेटिना भर कोन photoreceptors के विशाल बहुमत को नुकसान.
प्रकाश प्रेरित रेटिना अध: पतन (LIRD) सामान्यतः कृन्तकों और नुकसान रॉड और कोन photoreceptors को zebrafish दोनों में प्रयोग किया जाता है. वयस्क zebrafish में, फोटोरिसेप्टर अध: पतन मुलर glial कोशिकाओं फिर से दर्ज सेल चक्र को चलाता है और क्षणिक-amplifying के पूर्वज उत्पादन. ये पूर्वज वे अंततः नया photoreceptors को जन्म दे जहां क्षतिग्रस्त क्षेत्र की ओर पलायन के रूप में पैदा करने के लिए जारी है. वर्तमान में, दो व्यापक रूप से इस्तेमाल LIRD मानदंड, जिनमें से प्रत्येक के उत्थान के जवाब में फोटोरिसेप्टर नुकसान और इसी मतभेद की डिग्री बदलती में परिणाम है. रहे हैं अधिक आनुवंशिक और औषधीय उपकरण उत्थान के दौरान ब्याज की व्यक्तिगत जीन की भूमिका का परीक्षण करने के लिए उपलब्ध हैं, एक मजबूत LIRD प्रतिमान विकसित करने की जरूरत है. यहाँ हम एक LIRD प्रोटोकॉल का वर्णन है कि हम दो पहले से स्थापित LIRD तकनीकों के उपयोग के संयुक्त है जिसमें रॉड और कोन फोटोरिसेप्टर दोनों के व्यापक और लगातार नुकसान में परिणाम है. और भी, इस प्रोटोकॉल LIRD पढ़ाई के लिए सूरजमुखी मनुष्य पृष्ठभूमि पर ब्याज की ट्रांसजेनिक लाइनों को बनाए रखने की आवश्यकता समाप्त जो रंजित पशुओं में उपयोग करते हैं, के लिए बढ़ाया जा सकता है.
प्रकाश प्रेरित रेटिना अध: पतन (LIRD) सामान्यतः कृन्तकों और नुकसान रॉड और कोन photoreceptors को zebrafish दोनों में प्रयोग किया जाता है. वयस्क zebrafish में, फोटोरिसेप्टर अध: पतन मुलर glial कोशिकाओं फिर से दर्ज सेल चक्र को चलाता है और क्षणिक-amplifying के पूर्वज उत्पादन. ये पूर्वज वे अंततः नया photoreceptors को जन्म दे जहां क्षतिग्रस्त क्षेत्र की ओर पलायन के रूप में पैदा करने के लिए जारी है. वर्तमान में, दो व्यापक रूप से इस्तेमाल LIRD मानदंड, जिनमें से प्रत्येक के उत्थान के जवाब में फोटोरिसेप्टर नुकसान और इसी मतभेद की डिग्री बदलती में परिणाम है. रहे हैं अधिक आनुवंशिक और औषधीय उपकरण उत्थान के दौरान ब्याज की व्यक्तिगत जीन की भूमिका का परीक्षण करने के लिए उपलब्ध हैं, एक मजबूत LIRD प्रतिमान विकसित करने की जरूरत है. यहाँ हम एक LIRD प्रोटोकॉल का वर्णन है कि हम दो पहले से स्थापित LIRD तकनीकों के उपयोग के संयुक्त है जिसमें रॉड और कोन फोटोरिसेप्टर दोनों के व्यापक और लगातार नुकसान में परिणाम है. और भी, इस प्रोटोकॉल LIRD पढ़ाई के लिए सूरजमुखी मनुष्य पृष्ठभूमि पर ब्याज की ट्रांसजेनिक लाइनों को बनाए रखने की आवश्यकता समाप्त जो रंजित पशुओं में उपयोग करते हैं, के लिए बढ़ाया जा सकता है.
यहाँ हम व्यापक फोटोरिसेप्टर नुकसान और एक मजबूत उत्थान के जवाब में एक निरंतर उज्ज्वल प्रकाश जोखिम परिणामों के साथ एक छोटी यूवी जोखिम के संयोजन दिखाओ. व्यक्तिगत LIRD तरीकों के साथ तुलना में, इस संयुक्त विध…
The authors have nothing to disclose.
लेखकों उत्कृष्ट मछली पालन और तकनीकी सहायता के लिए Xixia लुओ धन्यवाद देना चाहूंगा. इस काम के स्वास्थ्य अनुदान R21EY019401 (आरटी) और P30EY04068 (आर टी) के राष्ट्रीय संस्थान द्वारा वित्त पोषित है, और वेन स्टेट यूनिवर्सिटी, नेत्र विज्ञान विभाग को दृष्टिहीनता को रोकने के लिए अनुसंधान से एक अप्रतिबंधित अनुदान सहित आरटी के लिए धन को शुरू किया गया था. संयुक्त वेन स्टेट यूनिवर्सिटी ग्रेजुएट स्कूल द्वारा प्रदान की गई थॉमस सी. रंबल फैलोशिप द्वारा समर्थित किया गया था.
UV light source | Leica | EL600 |
Glass Petri dish (150 x 20 mm) | Sigma-Aldrich/Pyrex | CLS3160152BO |
250 ml glass beaker | Sigma-Aldrich/Pyrex | CLS1000250 |
4 L glass beaker | Sigma-Aldrich/Pyrex | CLS10004L |
Aluminum foil | Fisher | 01-213-105 |
250 W halogen lamps | Workforce | 265-669 |
1.8 L clear acrylic tanks | Aquaneering | ZT180T |
1.8 L clear acrylic tank lids | Aquaneering | ZT180LCL |
Fan | Honeywell | HT-900 |
Aerator | Tetra | 77853-900 |
Thermometer | Cole-Parmer | YO-08008-58 |
Bent forceps (5/45) | World Precision Instruments | 504155 |