الكشف عن شذوذ في الأوعية الدموية في غلاف العين المشيمي في نموذج الفأر من السن المتصلة تحلل البقعة الصفراء عن طريق التوقيت بالطبع الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية
Summary
الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية (أو ICGA) التي يؤديها حقن الوريد الذيل يوفر جودة عالية الصور ICGA بالطبع الوقت لتميز شذوذ في الماوس المشيمية.
Abstract
الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية (أو ICGA) هي تقنية التي يقوم بها أطباء العيون لتشخيص تشوهات في الأوعية الدموية المشيمية والشبكية من أمراض العيون المختلفة مثل الضمور البقعي المرتبط بالعمر (AMD). ICGA يكون مفيدا بشكل خاص لصورة الأوعية الدموية المشيمية الخلفي من العين نظرا لقدرتها على اختراق من خلال طبقة مصطبغة مع الطيف بالأشعة تحت الحمراء. ويمكن تقسيم ICGA بالطبع الوقت في وقت مبكر، والمتوسطة، والمراحل المتأخرة. تقدم المراحل الثلاث معلومات قيمة عن علم الأمراض من مشاكل في العين. على الرغم من أن الوقت بالطبع ICGA بواسطة الوريد (IV) ويستخدم على نطاق واسع الحقن في عيادة لتشخيص وإدارة المشاكل المشيمية، ICGA طريق الحقن داخل الصفاق (IP) يشيع استخدامها في البحوث الحيوانية. نحن هنا أثبتت هذه التقنية للحصول على صور عالية الدقة ICGA الوقت بالطبع في الفئران عن طريق الحقن الوريد الذيل ومتحد البؤر المسح تنظير العين بالليزر. استخدمنا هذه التقنية لصورة المشيمية جنيهالتوترات في نموذج الفأر من سن المتصلة تحلل البقعة الصفراء. على الرغم من أنه من الأسهل بكثير أن أعرض ICG إلى الأوعية الدموية الماوس عن طريق IP، البيانات المتوفرة لدينا تشير إلى أنه من الصعب الحصول على استنساخه ICGA الصور بالطبع الوقت عن طريق IP-ICGA. في المقابل، ICGA عبر حقن الوريد الذيل يوفر جودة عالية ICGA الوقت بالطبع الصور مماثلة لدراسات الإنسان. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت لنا أن ICGA أجريت على الفئران البيضاء يعطي صورة أكثر وضوحا من الأوعية المشيمية من ذلك أجريت على الفئران المصطبغة. نقترح ينبغي أن يصبح ذلك الوقت بالطبع IV-ICGA من الممارسات المعتادة في البحث AMD بناء على النماذج الحيوانية.
Introduction
تصوير الأوعية الخضراء الإندوسيانين (ICGA) هو اختبار تشخيصي للمشاكل المتعلقة صورة الأوعية الدموية في العين. الامتصاص من ICG يتراوح 790-805 نانومتر بينما يتراوح الطيف الانبعاثات 770-880 نانومتر مع الانبعاثات ذروتها في 835 نانومتر 1. هذا يختلف عن الصبغة الشعبية الأخرى، فلوريسئين الصوديوم، الذي يقع في المدى المرئي الطيف. الطيف بالأشعة تحت الحمراء يمكن ICG لاختراق من خلال الشبكية ظهارة الصباغ (RPE)، والسوائل مصلي دموي، والإفرازات الدهنية، والتي يمكن أن تسد بسهولة عن طريق التصور الصوديوم فلوريسئين مقرها فلوريسئين تصوير الأوعية (FA). ICG في الأوعية الدموية مما يؤدي إلى تسرب أقل 98٪ من البروتين ملزمة، مما يتيح تعزيز تصوير الأوعية المشيمية والآفات المشيمية 1،2. ICGA يكاد يكون الخيار الوحيد لتصور الأوعية الدموية المشيمية، وهو الخلفي لRPE. الشكل 1 يبين المقارنة بين ICGA وFA في الأوعية الدموية في العينين التصوير الماوس. FA يمكن به استخدامها لصورة الأوعية الدموية في شبكية العين بشكل جيد ولكن ليس الأوعية الدموية المشيمية. في المقابل، ICGA يمكن استخدامها لصورة كل من شبكية العين والأوعية الدموية المشيمية. يتم تنفيذ ICGA مع أنظمة التصوير الرقمية عالية الدقة أو ناظور العيون المسح الضوئي ليزر (سلوفاكيا) جنبا إلى جنب مع كاميرات الفيديو الحساسة الأشعة تحت الحمراء، والتي سوف نستخدم في هذه الدراسة.
في العيادة، وقد أوصى ICGA في تشخيص عدد من الاضطرابات المشيمية و الشبكية التي تنطوي على الأوعية الدموية المشيمية بما في ذلك Polypoidal غلاف العين المشيمي وعائي (PCV)، الشبكية الورم الوعائي انتشار (RAP)، والشرائط شبيه الأوعية، المحي الشكل البقعي الضمور، اعتلال المشيمية و الشبكية المصلي المركزي، ورم وعائي المشيمية، نزيف في شبكية العين macroaneurysms تصلب والأورام المشيمية، وأشكال معينة من التهاب القزحية الخلفي 1،3. مزيج من ICGA مع الاتحاد الانجليزي والبصرية بالاتساق التصوير المقطعي (أكتوبر) توفير أدوات قوية لالأطباء في تشخيص وإدارة نضحي البقعي المرتبط بالعمرالضمور (AMD) 4-10. ICGA مفيد خاصة لتشخيص الظروف التي تنطوي على المشيمية. في الواقع، يعتبر ICGA المعيار الذهبي لتشخيص PCV، وهو البديل من نضحي AMD 11-13. يتميز PCV من خلال شبكة من الأوعية المتفرعة مع التوسعات polypoidal محطة في الأوعية الدموية المشيمية 11-13. كثيرا ما يرتبط PCV مع مفارز مصلي دموي المتكررة من RPE والشبكية مع التسرب ونزيف من مكونات polypoidal 11،14،15. نحن ذكرت مؤخرا توليد أول نموذج حيواني PCV بالإعراب عن transgenically HTRA1 الإنسان، وهو الأنزيم البروتيني سيرين متعددة الوظائف، في شبكية العين الماوس الظهارة الصبغية (RPE) 16. أظهرنا أن زيادة HTRA1 يسببها السمات المميزة لPCV، مثل الآفات polypoidal.
نحن هنا أثبتت الاستفادة من الوقت بالطبع ICGA بواسطة ذيل حقن الوريد في مجال البحوث AMD باستخدام لدينا HTRA1 نموذج الفأر. وتشير البيانات المتوفرة لدينا أنIV-ICGA متفوقة على الملكية الفكرية (أو تحت الجلد (SC)) ICGA التي يتم استخدامها حاليا في مجال 17،18 لوصف الآفات في المشيمية.
بيان للبحوث الحيوان
وأجريت التجارب على الحيوانات وفقا لبروتوكولات المعتمدة من قبل المؤسسات ورعاية الحيوان اللجنة استخدم (IACUC)، وأجريت وفقا للبيان ARVO لاستخدام الحيوانات في العيون والبحوث الرؤية.
Protocol
Representative Results
Discussion
في هذه الدراسة، أثبتنا استخدام ICGA لصورة الآفات المشيمية في HTRA1 الفئران المعدلة وراثيا. خصائص في وقت مبكر، المتوسطة، والمراحل المتأخرة من ICGA في نموذج الفأر لدينا تطابق بالطبع الوقت جيدا في الدراسات الإنسانية 1. هذا مهم لإجراء مقارنات أفضل بين أمراض الحيوان والظ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح 1R01EY022901، وجائزة التطوير المهني من البحوث للوقاية من العمى (RPB)، CMReeves & MA مؤسسة ريفز، ومؤسسة E. ماتيلدا زيغلر للمكفوفين، ومؤسسة فرسان الهيكل العين، ومنحة غير المقيد إلى إدارة طب العيون في جامعة ولاية يوتا من RPB. نشكر Balamurali Ambati للحصول على المساعدة التقنية على نظام متعدد القيد التصوير Spectralis وتشانغ تاو للمناقشات وتعليقات على المخطوطة.
Materials
| Spectralis Multi-Modality Imaging System | Heidelberg Engineering, Germany | SPECTRALIS HRA+OCT | |
| Tropicamide ophthalmic solution (1%) | Bausch & Lomb | NDC 24208-585-64 | for dilation of pupils |
| GenTeal Gel | Genteal | NDC 58768-791-15 | clear lubricant eye gel |
| Ketamine | Vedco Inc | NDC 50989-996-06 | |
| Xylazine | Lloyd Laboratories | NADA 139-236 | |
| Acepromazine | Vedco Inc | NDC 50989-160-11 | |
| 32-G Needle | Steriject | PRE-32013 | |
| 1-ml syringe | BD | 309659 | |
| Indocyanine Green | Pfaltz & Bauer | I01250 |
References
- Duane, T. D., Tasman, W., Jaeger, E. A. . Chapter 4a, Indocyanine Green Angiography. Duane’s clinical ophthalmology on CD-ROM. , (2002).
- Alfaro, D. V. . Age-related macular degeneration : a comprehensive textbook. , (2006).
- Yannuzzi, L. A. Indocyanine green angiography: a perspective on use in the clinical setting. Am. J. Ophthalmol. 151, 745-751 (2011).
- Destro, M., Puliafito, C. A. Indocyanine green videoangiography of choroidal neovascularization. Ophthalmology. 96, 846-853 (1989).
- Scheider, A., Schroedel, C. High resolution indocyanine green angiography with a scanning laser ophthalmoscope. Am. J. Ophthalmol. 108, 458-459 (1989).
- Guyer, D. R., et al. Digital indocyanine-green angiography in chorioretinal disorders. Ophthalmology. 99, 287-291 (1992).
- Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J. A., Guyer, D. R., Orlock, D. A. Digital indocyanine green videoangiography and choroidal neovascularization. Retina. 12, 191-223 (1992).
- Regillo, C. D., Benson, W. E., Maguire, J. I., Annesley, W. H. Indocyanine green angiography and occult choroidal neovascularization. Ophthalmology. 101, 280-288 (1994).
- Scheider, A., Kaboth, A., Neuhauser, L. Detection of subretinal neovascular membranes with indocyanine green and an infrared scanning laser ophthalmoscope. Am. J. Ophthalmol. 113, 45-51 (1992).
- Kuck, H., Inhoffen, W., Schneider, U., Kreissig, I. Diagnosis of occult subretinal neovascularization in age-related macular degeneration by infrared scanning laser videoangiography. Retina. 13, 36-39 (1993).
- Imamura, Y., Engelbert, M., Iida, T., Freund, K. B., Yannuzzi, L. A. Polypoidal choroidal vasculopathy: a review. Surv. Ophthalmol. 55, 501-515 (2010).
- Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Yannuzzi, L. A. Polypoidal choroidal vasculopathy. Ophthalmol. Clin. N. Am. 15, 537-554 (2002).
- Spaide, R. F., Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J., Orlach, D. A. Indocyanine green videoangiography of idiopathic polypoidal choroidal vasculopathy. Retina. 15, 100-110 (1995).
- Coppens, G., Spielberg, L., Leys, A. Polypoidal choroidal vasculopathy, diagnosis and management. Bull. Soc. belge d’Ophtalmol.. , 39-44 (2011).
- Tsujikawa, A., et al. Pigment epithelial detachment in polypoidal choroidal vasculopathy. Am. J. Ophthalmol. 143, 102-111 (2007).
- Jones, A., et al. Increased expression of multifunctional serine protease, HTRA1, in retinal pigment epithelium induces polypoidal choroidal vasculopathy in mice. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 14578-14583 (2011).
- Alex, A. F., Heiduschka, P., Eter, N. Retinal fundus imaging in mouse models of retinal diseases. Methods Mol. Biol. 935, 41-67 (2013).
- Seeliger, M. W., et al. In vivo confocal imaging of the retina in animal models using scanning laser ophthalmoscopy. Vision Res. 45, 3512-3519 (2005).
- Fischer, M. D., Zhour, A., Kernstock, C. J. Phenotyping of mouse models with OCT. Methods Mol. Biol. 935, 79-85 (2013).
- Jian, Y., Zawadzki, R. J., Sarunic, M. V. Adaptive optics optical coherence tomography for in vivo mouse retinal imaging. J. Biomed. Opt. 18, 56007 (2013).
- Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Huang, S. J., Costa, D. L., Yannuzzi, L. A. Polypoidal choroidal vasculopathy. Surv. Ophthalmol. 49, 25-37 (2004).
- Sasahara, M., et al. Polypoidal choroidal vasculopathy with choroidal vascular hyperpermeability. Am. J. Ophthalmol. 142, 601-607 (2006).
- Silva, R. M., et al. Polypoidal choroidal vasculopathy and photodynamic therapy with verteporfin. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 243, 973-979 (2005).
- Yannuzzi, L. A., et al. Polypoidal choroidal vasculopathy masquerading as central serous chorioretinopathy. Ophthalmology. 107, 767-777 (2000).
- Janssen, A., et al. Abnormal vessel formation in the choroid of mice lacking tissue inhibitor of metalloprotease-3. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 2812-2822 (2008).
- Ding, X., Patel, M., Chan, C. C. Molecular pathology of age-related macular degeneration. Prog. Retin. Eye Res. 28, 1-18 (2009).
- Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. Animal models of choroidal and retinal neovascularization. Prog. Retin. Eye Res. 29, 500-519 (2010).
- Pennesi, M. E., Neuringer, M., Courtney, R. J. Animal models of age related macular degeneration. Mol. Aspects Med. 33, 487-509 (2012).
- Elizabeth Rakoczy, P., Yu, M. J., Nusinowitz, S., Chang, B., Heckenlively, J. R. Mouse models of age-related macular degeneration. Exp. Eye Res. 82, 741-752 (2006).
