Summary

시간 코스 인도시 아닌 형광 안저 혈관 조영술로 연령 관련 황반 변성의 마우스 모델에서 맥락막 혈관의 이상을 검출

Published: February 19, 2014
doi:

Summary

꼬리 정맥 주입에 의해 수행 인도시 아닌 형광 안저 혈관 조영술 (ICGA 나)는 마우스 맥락막 이상을 특성화하기 위해 고품질의 ICGA 시간 코스의 이미지를 제공합니다.

Abstract

인도시 아닌 그린 혈관 조영술 (또는 ICGA)는 맥락막 및 연령 관련 황반 변성 (AMD)과 같은 각종 눈 질환의 망막 혈관의 이상을 진단하는 안과 의사에 의해 수행되는 기술이다. ICGA는 그것의 적외선 스펙트럼과 색소 층을 관통하는 자사의 능력에 눈의 뒤쪽 맥락막 혈관 이미지에 특히 유용합니다. ICGA 시간 과정은 초, 중, 후반 단계로 나눌 수 있습니다. 3 단계 눈 문제의 병리에 대한 유용한 정보를 제공합니다. 정맥 주사에​​ 의한 시간 코스 ICGA가 (IV) 주사가 널리 맥락막 문제의 진단과 관리를 위해 병원에서 사용되지만, ICGA은 복강 내 주사 (IP)에 의해 일반적으로 동물 연구에 사용됩니다. 여기에서 우리는 꼬리 정맥 주입 및 공 초점 주사 레이저 검안경에 의해 생쥐의 고해상도 ICGA 시간 코스의 이미지를 얻기 위해 기술을 보여 주었다. 우리는 맥락막 르 이미지에이 기술을 사용연령 관련 황반 변성의 마우스 모델에서 sions. 이 IP로 마우스 혈관에 ICG을 소개하는 것이 훨씬 쉽지만, 우리의 데이터는 IP-ICGA에 의해 재현 ICGA 시간 코스의 이미지를 얻기 어렵다는 것을 나타냅니다. 대조적으로, 꼬리 정맥 주사를 통해 ICGA 인간 연구에 비해 높은 품질의 ICGA 시간 코스의 이미지를 제공합니다. 또한, 우리는 ICGA가 착색 된 생쥐에서 수행보다 맥락막 혈관의 선명한 사진을 제공 흰둥이 생쥐에서 수행 것을 보여 주었다. 우리는 그 시간 코스 IV-ICGA 동물 모델을 기반으로 AMD의 연구의 표준 관행이 있어야 좋습니다.

Introduction

인도시 아닌 형광 안저 혈관 조영술 (ICGA)는 눈에 혈관과 관련된 이미지의 문제에 대한 진단 테스트입니다. 발광 스펙트럼은 770-880 nm 내지 835 nm의 1의 발광 피크와 범위 동안 ICG의 흡수 스펙트럼은 790-805 nm의 범위. 이것은 누구의 스펙트럼 가시 범위 내에 다른 인기있는 염료, 나트륨 형광 다릅니다. 적외선 스펙트럼은 쉽게 나트륨 형광 기반의 형광 혈관 조영술 (FA)로 시각화를 차단할 수있는 모두의 망막 색소 상피 세포 (RPE), serosanguineous 유체 및 지질 분비물을 통해 침투하는 ICG 수 있습니다. ICG는 맥락막 혈관과 맥락막 병변 1,2의 향상된 영상을 허용, 98 %의 단백질 바인딩 작은 혈관 외 유출의 결과로 혈관에 있습니다. ICGA 거의 RPE에 후방입니다 맥락막 혈관을 시각화 할 수있는 유일한 선택입니다. 1도 마우스의 눈에 영상 혈관의 ICGA와 FA의 비교를 보여줍니다. FA는 B 수이미지에 망막 혈관을 잘하지만 맥락막 혈관을 사용하는 전자. 대조적으로, ICGA 망막과 맥락막 혈관 양쪽 화상에 사용될 수있다. ICGA 함께 우리는이 연구에서 사용하는 적외선에 민감한 비디오 카메라와 고해상도 디지털 영상 시스템 또는 스캐닝 레이저 검안경 (SLO)으로 수행된다.

병원에서 ICGA는 결절 맥락막 혈관 병증 (PCV), 망막 Angiomatous 확산 (RAP), angioid 줄무늬, vitelliform 황반 영양 장애, 중심 장액 맥락 망막 병증, 맥락막 혈관종, 출혈, 망막 등의 맥락막 혈관을 포함하는 맥락 망막 질환의 수를 진단하는 권장 된 세동맥 macroaneurysms, 맥락막 종양, 후방의 특정 형태는 1,3 포도막염. FA 및 빛 간섭 단층 촬영 (10 월)와 ICGA의 조합은 삼출성 연령 관련 황반의 진단 및 관리에 임상의를위한 강력한 도구를 제공합니다변성 (AMD) 4-10. ICGA은 맥락막과 관련된 조건을 진단하는 데 특히 유용합니다. 사실, ICGA는 PCV, 삼출성 AMD 11 ~ 13의 변형을 진단하기위한 황금 표준으로 간주됩니다. PCV는 맥락막 혈관 11-13 터미널 결절의 확장이 혈관 분기의 네트워크를 특징으로한다. PCV 자주 누설 결절 구성 요소 11,14,15에서 출혈과 망막 색소 상피와 망막의 재발 serosanguineous 박리와 연결되어 있습니다. 우리는 최근 transgenically 마우스의 망막 색소 상피 (RPE) (16)에서, 사람의 HTRA1, 다기능 세린 프로테아제를 발현하여 제 PCV 동물 모델의 생성을보고 하였다. 우리는 증가 HTRA1가 PCV의 특징적인 기능, 예를 들어, 결절 병변을 유도 것으로 나타났다.

여기에서 우리는 우리의 HTRA1 마우스 모델을 사용하여 AMD의 연구에 꼬리 정맥 주사 시간 코스 ICGA의 사용을 보여 주었다. 우리의 데이터가 제안하는IV-ICGA는 IP (또는 피하 (SC)) 현재 맥락막 병변의 특성에 대한 필드 (17, 18)에 사용되는-ICGA에 우수합니다.

동물 연구에 문

동물 실험 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인을 프로토콜에 따라 수행되었으며, 안과 및 비전 연구에서 동물의 사용에 대한 ARVO 정책에 따라 수행되었다.

Protocol

1. 악기의 제조 절차는 동물 시설에서 절차 룸에서 수행된다. 실험을 시작하기 전에 안면 마스크, 헤어 보닛, 수술 가운, 멸균 발 덮개, 장갑을 착용 할 것. 열판에서 비커에 ~ 40 ° C의 열 물. 촬영하는 동안 마우스의 체온을 유지하기 위해 나중에 사용되는 가열 패드 위에 멸균 블루 패드를 놓습니다. 가열 패드의 전원을 켭니다. 이미징 시스템 준비 먼지…

Representative Results

우리는 CD1의 배경에 둘 중, HTRA1 형질 전환 마우스 및 제어 WT의 한배 새끼의 ICGA 시간의 과정을 수행 하였다. 흰둥이 CD1 배경은 인도시 아닌 형광 안저 혈관 조영술 (ICGA) 영상 (설명 참조)을 용이하게하기 위해 선택되었다. 의 확장이 같은 일부 동맥류가 HTRA1 마우스의 초기 단계에서 나타나기 시작했다 (그림 2, 빨간색 화살표는 용기의 끝 부분에 팽창을 나타내며 빨간색 원이 클러스터 …

Discussion

이 연구에서, 우리는 HTRA1 형질 전환 생쥐의 이미지 맥락막 병변 ICGA의 사용을 보여 주었다. 우리의 마우스 모델에서 초, 중, ICGA의 후반 단계의 특징은 인간의 연구 1에서 잘 시간 코스와 일치합니다. 이는 AMD와 맥락막과 관련된 조건의 병태 생리 학적 기전 및 치료 전략에 대한 연구를위한 귀중한입니다 인간의 병리 및 동물 표현형 사이 좋은 비교를하는 것이 중요합니다.

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Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 작품은 실명 (RPB)을 방지하기 위해 NIH 교부금 1R01EY022901, 연구에서 경력 개발 수상에 의해 지원되었다, CMReeves & MA 리브스 재단, 시각 장애인 E. 마틸다 지글러 재단, 기사단 눈 재단, 그리고학과에 제한없이 부여 RPB 유타 대학의 안과. 우리는 원고에 대한 토론과 의견에 대한 Spectralis 멀티 양상 이미징 시스템 및 타오 장에 기술 지원을 Balamurali Ambati 감사합니다.

Materials

Spectralis Multi-Modality Imaging System Heidelberg Engineering, Germany SPECTRALIS HRA+OCT
Tropicamide ophthalmic solution (1%) Bausch & Lomb NDC 24208-585-64 for dilation of pupils
GenTeal Gel Genteal NDC 58768-791-15  clear lubricant eye gel 
Ketamine Vedco Inc NDC 50989-996-06
Xylazine Lloyd Laboratories NADA 139-236
Acepromazine Vedco Inc NDC 50989-160-11
32-G Needle Steriject PRE-32013
1-ml syringe BD 309659
Indocyanine Green Pfaltz & Bauer I01250

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Kumar, S., Berriochoa, Z., Jones, A. D., Fu, Y. Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography. J. Vis. Exp. (84), e51061, doi:10.3791/51061 (2014).

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