Summary
Protokoller til effektiv fremstilling af homogene prøver af spindemider, skadedyrsangreb af eksperimentelle planter og vurdering af skader plante, som det kræves til undersøgelser af plante-skadedyr interaktion blev udviklet.
Abstract
De to bønnespindemide, Tetranychus urticae, er en allestedsnærværende polyphagous leddyr planteæder, der lever af en bemærkelsesværdig bred vifte af arter, med mere end 150 af økonomisk værdi. Det er en stor skadedyr i drivhus afgrøder, især i Solanaceae og Cucurbitaceae (f.eks tomater, auberginer, peberfrugter, agurker, squash) og drivhusgasser prydplanter (f.eks roser, krysantemum, nelliker), årlige markafgrøder (såsom majs, bomuld, sojabønner og sukkerroer), og i flerårige kulturer (lucerne, jordbær, vindruer, citruses og blommer) 1,2. Ud over den ekstreme polyphagy, der gør den til en vigtig landbrugs skadedyr, T. urticae har en tendens til at udvikle resistens over for en bred vifte af insekticider og acaricider, der bruges til dens kontrol 3-7.
T. urticae er en fremragende eksperimentel organisme, da det har en hurtig livscyklus (7 dage ved 27 ° C)og let kan holdes ved høj densitet i laboratoriet. Metoder til analyse af genekspression (herunder in situ-hybridisering og antistoffarvning) og inaktiverer ekspression af spider mite endogene gener ved hjælp af RNA-interferens er blevet udviklet 8-10. For nylig hele genomet sekvens af T. urticae er blevet rapporteret, hvilket skaber mulighed for at udvikle dette skadedyr planteæder som en model organisme med tilsvarende genomiske ressourcer, der allerede findes i nogle af sine værtsplanter (Arabidopsis thaliana og tomat Solanum lycopersicum) 11. Tilsammen kan disse modelorganismer give indsigt i molekylære grundlag for plante-skadedyr interaktioner.
Her er en effektiv metode til hurtig og nem samling af et stort antal voksne kvindelige mider, deres anvendelse på forsøgsbasis plante vært, og den vurdering af skaden anlægget på grund af edderkop mide fodring beskrevet. Den præsenterede protokol dahavender hurtig og effektiv samling af hundredvis af personer på ethvert udviklingstrin (æg, larver, nymfer, voksne mænd og kvinder), der kan bruges til efterfølgende eksperimentel anvendelse.
Introduction
Plant-skadedyr interaktion er et emne af stor videnskabelig og økonomisk betydning. Det var historisk studeret ved hjælp af både afgrøder (såsom tomat) og model plante, A. thaliana. I begge tilfælde kunne måles modtagelighed plante til planteæder enten direkte ved vurderingen af plantefænotype efter planteæder angreb eller indirekte gennem vurderingen af skadedyr ydeevne.
Direkte målinger af plante modtagelighed blev anvendt tidligere for en række insekter skadedyrsarter hjælp af en række metoder. For eksempel er herbivory af lepidoptera-larver målt som en vurdering af den del af plantevæv forbruges af enten Plutella xylostella (diamondback moth) eller Trichoplusia ni (kålmålerlarve) med det blotte øje ved hjælp af et gitter 12. Der er også metoder, der udnytter digital billedbehandling for skader blad med efterfølgende kvantitativ billedanalyse. Sådanne fremgangsmåder blev anvendt iundersøgelser af A. thaliana interaktion med Frankliniella occidentalis (vestlige blomst thrips) 13, Scaptomyza flava (blad-mining drosophila) 14, og T. ni 15..
Indirekte målinger af plante modtagelighed er almindeligt anvendt i studier af plante-skadedyr interaktion. For eksempel modtagelighed A. thaliana at ferskenbladlus Myzus persicae herbivory typisk vurderes gennem en analyse af skadedyr frugtbarhed og beskrivelse af brutto morfologi af en plante efter interaktion 16,17. Et andet typisk indirekte indikator for A. thaliana følsomhed over for et skadedyr er en tør eller våd vægt vurdering af planteæder. Denne parameter er almindeligt anvendt til at karakterisere herbivory af lepidoterans, såsom Pieris rapae (lille hvid), P. xylostella eller T. ni på deres larve eller puppe iscenesætter 15,17.
Spindemider er celle-indhold feEders. Mide-induceret skade er anerkendt som en samling af klorotiske pletter, der varierer i farve fra hvid til lys grøn. Følsomheden af en plante vært til edderkop mide herbivory var tidligere vurderet enten indirekte gennem en analyse af edderkop mide ydeevne dage efter angreb 18,19, eller direkte hjælp grov morfologi planter uger efter angrebets 18 eller ved hjælp af en digital billedbehandling blade udsat at mider i dagevis med efterfølgende automatiseret billedanalyse 19. Disse metoder blev udviklet og anvendt til studier af samspillet mellem tomatplanter og T. urticae, og anvendes typisk et lille antal spindemider (5-15 per behandling), der blev indsamlet fra den blandede mide befolkning og blev placeret på bladet overfladen med en blød børste. Men disse metoder er ikke egnet til undersøgelser, hvor der skal anvendes større antal mider. Hertil kommer, mens direkte behandling af blade billeder i billedet analyse softwaresom Adobe Photoshop (San Jose, CA) eller ImageJ 20 kan anvendes til analyse af tomat skade disse protokoller brug modifikation med henblik på at blive anvendt på blade, der har større refleksionsevne overflade eller let farvede og har meget synlige trichomer ( f.eks A. thaliana), som interfererer med automatiseret udvælgelse af klorotiske pletter, der markerer skade plante. Endvidere udviklingsstadium spindemider, der let kan anvendes med tidligere metoder er begrænset til de mest udbredte og let identificerbare voksne hunner og udelukker anvendelsen af andre udviklingstrin.
Det første afgørende skridt i retning af high-throughput analyse af plante-edderkop mide interaktion er at etablere reproducerbare, enkle og robuste protokoller til at udfordre planter med spindemider og pålideligt vurdere interaktion resultater.
I denne video en effektiv metode til hurtig og nem samling af et stort antalber af voksne kvindelige mider, er deres anvendelse på forsøgsbasis plante vært, og den vurdering af skaden anlægget på grund af edderkop mide fodring beskrevet. Den præsenterede protokol muliggør hurtig og effektiv indsamling af hundredvis af personer på ethvert udviklingstrin (æg, larver, nymfer, voksne mænd og kvinder), der kan bruges til efterfølgende eksperimentel anvendelse. Desuden kan disse protokoller anvendes på enhver mide værtsplante, men er specifikt blevet demonstreret i tilfælde af A. thaliana.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1.. Vedligeholdelse af Spider Mite Befolkning
BEMÆRK: Spider mider opdrættes på Californiens røde kidneybønner (Phaseolus vulgaris).
- Grow bønneplanter fra frø til 2-3 uger før angreb.
- Intermix disse planter med angrebne planter; voksne mider vil hurtigt kolonisere frisk plantemateriale.
- Fjern gamle angrebne bønneplanter hver 7-10 dage, og erstatte dem med friske planter.
2.. Indsamling Voksen Kvinde mider
- Mite Collection bruge Vask Metode
- At indsamle mider, placere en frisk bønne plante i kontakt med angrebne planter 1 til 2 dage før eksperimentet.
- Brug 20 til 30 friske bønneplanter at indsamle 1.000 til 2.000 voksne kvindelige mider.
- Forbered en opløsning af Tween 20 på 0,001% ved hjælp af vand fra hanen ved RT.
- Vask angrebne bønneplanter i Tween 20-opløsning ved hjælp af 2 til 3 planter ad gangen.
- Komplet trin 2.1.4 inden for 10 minutter for at undgå mide dødelighed.
- Isolering af voksen kvinde mider ved Filtrering af Mite Suspension gennem Sigter af definerede maskestørrelse
- Forbered sier i følgende maskestørrelser: 500 m (at fjerne snavs) og 300 m (til at indsamle kvindelige voksne mider) (figur 1A).
- Filtreres suspensionen gennem 500 um-sigte.
- Filtreres igen suspensionen gennem 300 um-sigte. Voksen kvindelige mider vil blive bevaret.
- Dyp en 300 um sigte med voksne kvindelige mider i rent vand fra hanen for at fjerne Tween 20.
- Spred mider i et enkelt lag i bunden af sigten.
- Brug køkkenrulle for at fjerne overskydende vand fra masken og siderne af si. BEMÆRK: Dette sker, fordi mider nødt til at tørre hurtigt for at komme sig.
- Klargør en samling som vist i figur 1B; dette vil give mider at bevæge sig frit, men vil forhindre dem i at flygte.
- Placer sigte med mider på toppen af sigten, der bruges som en støtte.
- Omgiv nederste sigte med vand for at undgå mider fra at sprede. BEMÆRK: Mider vil begynde at komme sig efter ca 5 min. Efter ca 30 minutter, antallet af bevægelige mider er tilstrækkelig til at starte samling (figur 1D). Mider skal indsamles inden for 1 time, da de producerer silke, der vil forstyrre samlingen.
3.. Plant Angreb med mider
BEMÆRK: Når voksne kvindelige mider har genvundet, kan de bruges til plante angrebets. Der er 2 metoder til at angribe forsøgsanlæg med voksne kvindelige mider: a) ved hjælp af en fin pensel (protokol afsnit 3.1) og b) ved hjælp af en pumpe eller vakuum linje (protokol afsnit 3.2).
- Mider ved hjælp af en børste
BEMÆRK: Spider mide angrebmed en pensel anvendes til anvendelse af op til 30 mider per plante.- Brug en blød hår runde kunst pensel størrelse 00 eller finere.
- Fugt børsten med RT postevand.
- Forsigtigt afhente mider fra sien ved hjælp af pensel spids og overføre dem til anlægget.
- Mideangreb ved hjælp af en pumpe
BEMÆRK: Plant angreb med mider indsamlet af en pumpe / vakuumledning bruges, når mere end 30 mider anvendes. Til denne fremgangsmåde kan anvendes en vakuumpumpe til mikroelektroniske komponenter pickup eller en vakuumledning. Det er vigtigt at holde luftstrømmen konstant og tilstrækkelig styrke (2-4 psi).- Vedhæft en 1 ml pipette spids til røret, der forbinder til pumpen eller vakuum linje ved hjælp af en 1,5 ml centrifugeglas skåret i bunden som adapter mellem pumpe / vakuumrør og spidsen.
- Læg et stykke køkkenrulle mellem pipettespidsen og adapteren (1,5 ml centrifugeglas). BEMÆRK: Formålet med dette er at fælde mider inde than pipettespids under aspiration processen, og også for at reducere luftmængden (figur 1C).
- Saml mider direkte fra sigten ved hjælp af pipettespidsen.
- Alternativt indsamler mider en efter en fra angrebne blade ved hjælp af en Stereoskopet.
- Når det krævede antal mider er blevet indsamlet, fjerne pipettespidsen fra røret, og sørg for, at det stykke papir håndklæde på bagsiden af pipettespidsen er uforstyrret.
- Saml mider ved at trykke på pipettespids og klumpe mider sammen. Derefter placere dem på bladet; inden for få sekunder, vil mider begynde at sprede på bladet.
4.. Optagelse og vurdering Plant Damage
- Recording Plant Skader
BEMÆRK: A. thaliana er skader plante vurderes efter 4 dages mide fodring. Skader registreres som det samlede overfladeareal klorotiske pletter. Til måling skader, er hele rosetten skåret og scannet.Scanning beskrevne parametre er for en Epson V30 scanner, men vil fungere som et godt udgangspunkt for enhver lignende flatbed scanner. Hold scanningsparametrene konstant for alle forsøg, der muliggør sammenligning mellem de enkelte eksperiment kører.- Dæk scanner seng med gennemsigtighed ark for at forhindre at forurene scanner overflade med plantemateriale.
- Skær en hel roset og sted på scanneren sengen så adaxial (øverste) side af blade står scanneren lyskilde og fange element. Alternativt, hvis rosetter er for tætte til at fange de enkelte blade uden overlap, dissekere rosetten i enkelte blade eller grupper af ikke-overlappende blade med fine saks før du placerer på scanneren sengen. Flere rosetter kan scannes samtidigt.
- Dæk rosetter eller blade med et stykke hvidt papir for at undgå tilslutning til og forurening af scannerlåget.
- Luk scannerlåget og udføre en scanning med følgende parametre: Opløsning: 1,200 dpi; Color mode: Adobe RGB; Lysstyrke: +25; Filtype: maksimal kvalitet JPEG.
- Gem billedfiler til efterfølgende skader analyse.
- Plant Skader Kvantificering
BEMÆRK: Det område af skaden er manuelt beregnet ved hjælp af Photoshop. På grund af store forskelle i bladform og intensiteten af farven af symptomer som følge af mide fodring, automatiske metoder var upålidelige. Således er et gitter, der anvendes til at vurdere skader plante:- Åbn billedet af anlægget med Photoshop.
- Opret et nyt lag, så overlay scannet billede med et gitter af 0,25 mm x 0,25 mm divisioner (Se eller Display - Show - Grid, tastaturgenvejen Ctrl + ').
- På en overlejret lag, markerer beskadigede blad områder ved hjælp af en prik (bruge "Pencil Tool", tastaturgenvej B). Brug en enkelt prik for hver kvadrat af nettet, under hvilken der er skader, der dækker mere end halvdelen af nettet enhed. Størrelsen af dot er defineret i pixels (dvs.
- Når alle pladser i gitteret, der viser plante skade dækker mindst halvdelen af nettet, er markeret med en prik, skal du bruge værktøjet Histogram (Window - Histogram) for at bestemme det samlede antal pixel på laget. Histogrammet værktøj tillader én at måle antallet af pixels. Da hver prik er repræsenteret ved en konstant og kendt antal pixels, vil histogrammet værktøj måle det samlede antal pixels, der repræsenterer det samlede antal prikker, og dermed det samlede antal afmærkede pladser.
- Beregne antallet af "prikker" markeret ved anvendelse af formlen:
Antallet af prikker = samlet antal pixel / antal pixel per prik. - Beregn det samlede areal af skader ved at multiplicere antallet af markerede punkter på billedet med arealet af en kvadrat af nettet, som en prik svarer til et kvadrat af nettet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Brug 20 til 30 angrebne bønneplanter, kan man samle omkring 2.000 voksne kvindelige mider hjælp sier. Den tid, der kræves til at angribe 10 planter med 20 mider per plante er ca 15 min, hvis du bruger en pensel til at overføre mider. Kombinationer af indsamlings-og anvendelsesmetoder er vist i figur 2.
Denne protokol genererer reproducerbare resultater af skader plante, der viser, at indsamlede mider er af tilsvarende fysiologiske tilstand og egnet til plante-edderkop mide interaktionsundersøgelser (Figur 3 A). For at vurdere protokol reproducerbarhed blev voksen kvindelige mider indsamlet ved hjælp af vask metode, hvor 20 mider blev placeret på roset blade af 3 uger gamle A. thaliana planter (tiltrædelse Col-0) med en våd pensel. Behandlede planter blev scannet 4 dage postinfestation og beskadigede område blev kvantificeret under anvendelse af de ovenfor beskrevne teknikker. Sammenligning af gentagne eksperimentets resultater blev gjort ved hjælp af ANOVA.
Som et eksempel på eksperimentel anvendelse vurderede vi naturlig variation i følsomheden over for edderkop mide herbivory tværs 3 A. thaliana tiltrædelser anvendelse af 20 kvindelige spindemider per plante med en våd pensel og skader optagelse 4 dage efter angreb. Typiske udseende af skader i scannede billeder er vist i figur 3B. Bagefter kan kvantificering af skader data præsenteres som et søjlediagram eller et boxplot og analyseret af den statistiske metode valg (figur 3C). I dette eksempel ANOVA efterfulgt af Tukey HSD test blev anvendt til dataanalyse.
Figur 1.. Eksperimentel oprettet for isolering af voksne kvindelige mider. (A) sæt sigter at give mulighed for adskillelse af forskellige edderkop mide udviklingsmæssigeetaper. (A. 0,5 mm åbning størrelse - fjerner snavs fra mide suspension B 0,3 mm -.. Indsamler voksen kvindelige mider c 0.2 mm -.. Samler unge kvinder, mænd, og nymfer d 0,16 mm -.. Indsamler larver og nymfer e.. C) Setup indsamler æg) (B) Setup bruges til at tillade mider at komme sig uden at flygte efter vask og filtrering (bruges til at indsamle mider hjælp pumpe (D) Sieve med bevægelige voksen kvindelige mider klar til afhentning - 0,1 mm....
Figur 2.. Mulige strategier til at isolere voksen kvindelige mider, i forhold til antallet af mider til anvendelse. Hvis det eksperimentelle design kræver brug af et stort antal voksne kvindelige spindemider, den mest effektive metode er at bruge vakuumpumpen indsamlingsmetode direkte fra bønneblade.Hvis et eksperiment kræver brug af en anden end voksne hunner eller et lille antal personer skal nøje placeret på yngre planter udviklingsstadiet, anbefales det at udføre indsamling og fraktionering af edderkop mide udviklingsstadier med vask tilgang med sier efterfulgt af angreb med en pensel.
Fig. 3. Repræsentative resultater. (A) Reproducerbarhed af forsøgsresultater. Skader område målt på tre uger gamle A. thaliana planter, tiltrædelse Col-0, 4 dage efter anvendelse af 20 kvindelige spindemider. Sammenligning af gentagne eksperimentets resultater blev gjort ved hjælp af ANOVA (n = 6, F = 0,621, P = 0,735). (B og C) Naturlig variation i følsomheden over for edderkop mide herbivory tværs 3A. thaliana tiltrædelser: Col-0 Ler-0, og WS2 (B) Udseende af planter efter edderkop mide herbivory.. Røde pile peger i retning af typiske beskadigede områder. (C) Forskelle i følsomhed over for edderkop mide herbivory som vurderet af området for skader. Modtagelighed for edderkop mide herbivory varierer betydeligt på tværs af tiltrædelse (ANOVA, n = 6, F = 13,4, p = 0,0004). Bogstaver angiver signifikante forskelle mellem genotyper ved p <0,05 (Tukey HSD test). Plottede værdier er gennemsnit ± standardfejl af middelværdien.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Denne video viser, protokoller, der bruges til at isolere og til at angribe planter med et stort antal voksne kvindelige mider. Selvom vi præsenterede denne protokol ved hjælp af A. thaliana, kan det bruges til enhver plante-edderkop mide interaktion, og er i øjeblikket ved at blive anvendt med succes også på tomat og Grapevine (Vitis vinifera) planter. Protokollen udbytter reproducerbare resultater, hvilket indikerer, at indsamlede mider er sammenlignelig fysiologiske tilstand (figur 3).
Mens disse protokoller er enkle at udføre, flere kritiske trin kræver særlig opmærksomhed, da de vil påvirke mide opsving. Vaske mider fra blade skal ske på op til tre bønneplanter samtidigt og skal være afsluttet inden for 10 min ved hjælp af vand ved RT. Derudover har mider skal spredes på en sigte for hurtig tørring. Hvis mide opsving er utilfredsstillende, er det vigtigt at kontrollere, om den anbefalede mængde af Tween 20 detergent var osed og hvis detergent var fuldt fjernet under skylletrinnet.
Der er to store begrænsninger i protokollen præsenteret: a) mide samling af pumpe fungerer godt for samlinger af mere end 30 mider, men opkrævning af et mindre antal mider kræver brug af en børste og er forholdsvis langsom; Men indsamling og koncentrere voksne mider gennem vask metode i høj grad letter deres anvendelse; b) skade analyse gennem scorer overfladen af klorotiske pletter kan være en tids-og trin indsats tidskrævende; fremtidig indsats bør fastsætte identificere markørgener, der kan bruges som et mål for mide fodring.
I forhold til tidligere offentliggjorte metoder, den præsenterede metode edderkop mide kollektionen tilbyder en fordel at indsamle et stort antal levedygtige individer og effektiv adskillelse af udviklingsstadier i én arbejdsgang. Desuden vurdering af skader plantefænotype i plante-skadedyr interaktion gennem visuel inspectipå eller digitalt billede analyse er typisk det første skridt i en kompleks analyse, der indebærer en vis form for molekylær udlæsning (såsom genekspressionsanalyse eller metabolit profilering). Aktuelle protokoller er egnede til anvendelsen af nogle få mider og samling af materiale dage efter angrebets, som er værdifulde for analyse af de langsigtede interaktioner mellem plante og skadedyr; Men denne protokol gør det muligt at anvende flere hundrede mider samtidig til effektivt at fange plante reaktioner, der opstår i løbet af en kortere periode (timer) og ved fodring site.
Sammenfattende er blevet beskrevet metoder til at anvende voksen kvindelige mider på værtsplanter og vurdering af skader plante. Disse protokoller er afgørende for eksperimenter med henblik på at forstå den genetiske og molekylære grundlag for samspillet mellem planter og to bønnespindemide.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Plant material: | |||
| California red kidney bean | Stokes, Thorold, ON, Canada | 2 week old, well infested with spider mites 2 or 3 days before use. Other cultivars of Phaseolus vulgaris can be used. | |
| Chemicals: | |||
| Tween 20 | Sigma-Aldrich | P9416 | 1% stock solution is prepared to simplify aliquoting |
| Tap water | At room temperature, heat- and cold-shock affect mite survival rate and performance | ||
| Other materials and equipment: | |||
| Plastic tray | |||
| Set of scissors | |||
| 2 L beakers | |||
| Paper towels | |||
| Sets of sieves | Manufactured in house | Detailed instructions are available | |
| Thin brush | |||
| Pipettes | |||
| Pipette tips | 0.2 and 1 ml | ||
| 1.5 ml centrifuge tubes | |||
| Air pump | Aquarium type pump with inverted air flow. Vacuum line can be used. Required pressure drop is approx. 2-4 psi | ||
| Stereoscope | |||
| Scanner | Epson | V30 | Any flatbed scanner allowing necessary degree of control over scan quality. We use Epson V30 for our experiments. |
| Computer | Windows or OS X PC which is compatible with scanner hardware and Adobe Photoshop software. | ||
| Adobe Photoshop software | Adobe Systems Inc., San Jose, CA, USA | various | Any version with Histogram tool included. |
References
- Jeppson, L. R., Keifer, H. H., Baker, E. W. Mites injurious to economic plants. , University of California Press. (1975).
- Migeon, A., Dorkeld, F. Spider Mites Web: a comprehensive database for the Tetranychidae. http://www.montpellier.inra.fr/CBGP/spmweb. , (2013).
- Croft, B. A., Vandebaan, H. E. Ecological and Genetic-Factors Influencing Evolution of Pesticide Resistance in Tetranychid and Phytoseiid Mites. Exp Appl Acarol. 4, 277-300 (1988).
- Van Leeuwen, T., et al. Mitochondrial heteroplasmy and the evolution of insecticide resistance: Non-Mendelian inheritance in action. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105, 5980-5985 (2008).
- Van Leeuwen, T., Vontas, J., Tsagkarakou, A., Dermauw, W., Tirry, L. Acaricide resistance mechanisms in the two-spotted spider mite Tetranychus urticae and other important Acari: A review. Insect Biochem Molec. 40, 563-572 (2010).
- Dermauw, W., et al. The cys-loop ligand-gated ion channel gene family of Tetranychus urticae: Implications for acaricide toxicology and a novel mutation associated with abamectin resistance. Insect Biochem Molec. 42, 455-465 (2012).
- Van Leeuwen, T., et al. Population bulk segregant mapping uncovers resistance mutations and the mode of action of a chitin synthesis inhibitor in arthropods. Proceedings of the National Academy of Sciences. 109, 4407-4412 (2012).
- Dearden, P. K., Donly, C., Grbic, M. Expression of pair-rule gene homologues in a chelicerate: early patterning of the two-spotted spider mite Tetranychus urticae. Development. 129, 5461-5472 (2002).
- Khila, A., Grbic, M. Gene silencing in the spider mite Tetranychus urticae: dsRNA and siRNA parental silencing of the Distal-less gene. Development genes and evolution. 217, 241-251 (2007).
- Grbic, M., et al. Mity model: Tetranychus urticae, a candidate for chelicerate model organism. BioEssays : news and reviews in molecular, cellular and developmental biology. 29, 489-496 (2007).
- Grbic, M., et al. The genome of Tetranychus urticae reveals herbivorous pest adaptations. Nature. 479, 487-492 (2011).
- Kliebenstein, D., Pedersen, D., Barker, B., Mitchell-Olds, T. Comparative analysis of quantitative trait loci controlling glucosinolates, myrosinase and insect resistance in Arabidopsis thaliana. Genetics. 161, 325-332 (2002).
- Abe, H., et al. Function of jasmonate in response and tolerance of Arabidopsis to thrip feeding. Plant & cell physiology. 49, 68-80 (2008).
- Whiteman, N. K., et al. Mining the plant-herbivore interface with a leafmining Drosophila of Arabidopsis. Molecular ecology. 20, 995-1014 (2011).
- Goodspeed, D., Chehab, E. W., Min-Venditti, A., Braam, J., Covington, M. F. Arabidopsis synchronizes jasmonate-mediated defense with insect circadian behavior. Proc Natl Acad Sci U S A. 109, 4674-4677 (2012).
- Kim, J. H., Lee, B. W., Schroeder, F. C., Jander, G. Identification of indole glucosinolate breakdown products with antifeedant effects on Myzus persicae (green peach aphid). The Plant journal : for cell and molecular biology. 54, 1015-1026 (2008).
- Adio, A. M., et al. Biosynthesis and defensive function of Ndelta-acetylornithine, a jasmonate-induced Arabidopsis metabolite. Plant Cell. 23, 3303-3318 (2011).
- Li, L., et al. The tomato homolog of CORONATINE-INSENSITIVE1 is required for the maternal control of seed maturation, jasmonate-signaled defense responses, and glandular trichome development. Plant Cell. 16, 126-143 (2004).
- Kant, M. R., Ament, K., Sabelis, M. W., Haring, M. A., Schuurink, R. C. Differential timing of spider mite-induced direct and indirect defenses in tomato plants. Plant Physiol. 135, 483-495 (2004).
- Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis. Nat Methods. 9, 671-675 (2012).
