Abstract
जल्दी मस्तिष्क की चोट और देरी मस्तिष्क vasospasm दोनों subarachnoid नकसीर (एसएएच) के बाद प्रतिकूल परिणामों के लिए योगदान करते हैं. दोनों स्थितियों अनुकरण कि प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और चलाया पशु मॉडल वर्तमान में असामान्य हैं. इसलिए, नए मॉडल एसएएच से उत्पन्न मानव pathophysiological शर्तों की नकल करने के क्रम में की जरूरत है.
यह रिपोर्ट intracerebral दबाव (आईसीपी) के नियंत्रण में सक्षम बनाता है कि एक खरगोश खून से अलग धकेलना एसएएच मॉडल की तकनीकी बारीकियों का वर्णन है. एक बाह्य अलग धकेलना धमनी प्रणाली और एक बंद कपाल में परीक्षक स्वतंत्र एसएएच सक्षम बनाता है जो subarachnoid अंतरिक्ष, के बीच रखा गया है. कदम दर कदम प्रक्रिया संबंधी निर्देश और आवश्यक उपकरण वर्णित हैं, साथ ही तकनीकी कारणों से कम से कम मृत्यु दर और रुग्णता के साथ मॉडल का उत्पादन करने के लिए. यह मजबूत सरल और सुसंगत आईसीपी नियंत्रित एसएएच खरगोश मॉडल की सफल शल्य चिकित्सा के निर्माण के लिए आवश्यक महत्वपूर्ण जानकारी वर्णित हैं.
Introduction
एन्यूरिज़्म संबंधी subarachnoid नकसीर (एसएएच) अक्सर स्थायी मस्तिष्क संबंधी क्षति या मृत्यु 1 के लिए अग्रणी नयूरोपथोलोगिकल शर्तों धमकी सबसे जीवन में से एक है. पिछले अनुसंधान एसएएच 2 के साथ जुड़े मस्तिष्क संबंधी घाटे के प्राथमिक एटियलजि के रूप में देरी मस्तिष्क vasospasm (DCVS) पर ध्यान केंद्रित किया है. हालांकि, vasospasm के उपचार के बाद एसएएच से पीड़ित रोगियों की आम तौर पर गरीब नैदानिक परिणामों एसएएच 3 के बाद जल्दी मस्तिष्क चोट (EBI) के प्रभाव को शामिल करने के लिए अनुसंधान ध्यान देने का एक विस्तार करने के लिए प्रेरित किया है. एसएएच के बाद गरीब नैदानिक परिणामों में योगदान करने में EBI और DCVS दोनों के महत्व के ग्रेटर समझ अधिक प्रभावी चिकित्सीय रणनीतियों के विकास के लिए आवश्यक है.
अब तक, महाकुण्ड में सिंगल और डबल ऑटोलॉगस रक्त इंजेक्शन DCVS 2-6 के अध्ययन के लिए एसएएच शामिल करने के लिए मानक पद्धति से किया गया है. आमतौर पर पिछले अध्ययनों में इस्तेमाल किया हालांकि,इस मॉडल को सबसे अधिक संभावना एसएएच साथ जुड़े नयूरोपथोलोगिकल महत्वपूर्ण परिवर्तन पुन: पेश नहीं करता EBI 7 प्रेरित किया. इसके विपरीत, ENDOVASCULAR वेध आंशिक रूप से EBI 7 के लक्षण नकल कि गंभीर तीव्र pathophysiological परिवर्तन के उत्पादन के लिए जाना जाता है.
यह रिपोर्ट एसएएच के एक उपन्यास खरगोश मॉडल वर्णित तकनीक के साथ, मानक महाकुण्ड मॉडल धमनी प्रणाली को जोड़ने के द्वारा अनुकूलित है. जिससे एसएएच प्रेरित पैथोलॉजी 8-10 से और अधिक सटीक लक्षण वर्णन की अनुमति, EBI और DCVS दोनों की जांच के लिए सक्षम बनाया का वर्णन एक बाह्य अलग धकेलना के माध्यम से अवजत्रुकी धमनी और महाकुण्ड की. रक्त प्रवाह जिससे खरगोश के शरीर क्रिया विज्ञान से जुड़ा हुआ है और धमनियों से रक्त और intracranial दबाव के बीच दबाव ढाल से प्रेरित है. intracerebral दबाव (आईसीपी) डायस्टोलिक रक्तचाप के बराबर होती है और अलग धकेलना प्रणाली में रक्त coagulates जब रक्तस्राव बंद हो जाता है. मेजबान & # का उपयोग8217 की फिजियोलॉजी मज़बूती EBI और DCVS phenotypes 3,8-10 दोनों पैदा करता है कि एसएएच की एक अधिक सुसंगत मॉडल के लिए अग्रणी परीक्षक निर्भर एसएएच प्रेरण कम कर देता है.
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Protocol
2.5 वजन तीन महीने पुराने महिला न्यूजीलैंड खरगोश - 3.5 किलो इस प्रक्रिया के लिए इस्तेमाल किया गया. अध्ययन प्रायोगिक पशुओं की देखभाल और उपयोग के लिए स्वास्थ्य के दिशा निर्देशों के राष्ट्रीय संस्थान के अनुसार और बर्न, स्विट्जरलैंड (अनुमोदन # 105/13) के केंटन के पशु की देखभाल समिति के अनुमोदन के साथ प्रदर्शन किया था. सभी सर्जिकल प्रक्रियाओं बर्न, स्विट्जरलैंड में बर्न विश्वविद्यालय के अस्पताल में क्लीनिकल रिसर्च विभाग के प्रायोगिक सर्जिकल संस्थान में बाँझ शर्तों के तहत किया गया. एक पशु चिकित्सा सर्जरी के दौरान और वसूली के दौरान जानवरों पर नजर रखी.
1 पशु तैयारी, स्थिति और अवजत्रुकी धमनी cannulation
- इंट्रामस्क्युलर ketamine के इंजेक्शन के साथ खरगोश में सामान्य संज्ञाहरण प्रेरित (30 मिलीग्राम / किग्रा, Ketalar, 50 मिलीग्राम / एमएल) और xylazine (किलो 6 मिलीग्राम /; Xylapan 20 मिलीग्राम / एमएल) के हानिकारक खरगोश की प्रतिक्रिया की जाँच करके और संज्ञाहरण के नियंत्रण गहराई stimulatआयन (जैसे, पैर की अंगुली चुटकी). सकारात्मक प्रतिक्रिया के मामले में 1.7 देखें.
- दोनों आंखों के निचले lids के नीचे खींच और सूखापन और आगे जलन रोकने के लिए पलकें को मरहम की एक छोटी राशि लागू होते हैं.
- , एक 20 Gbutterfly venflon (20 जी संवहनी कैथेटर) के साथ पार्श्व कान नस कैथीटेराइज़ चिपकने वाला टेप के साथ तय, और 0.9% सोडियम क्लोराइड युक्त एक गुरुत्वाकर्षण बैग के लिए (500 मिलीलीटर / 24 घंटा) और ketamine कनेक्ट (40 मिलीग्राम / किग्रा / घंटा) निरंतर अंतःशिरा (चतुर्थ) संज्ञाहरण के लिए / xylazine (4 मिलीग्राम / किग्रा / घंटा). अतिरिक्त दर्दनाशक दवाओं हर 15 मिनट चतुर्थ (Fentanyl, 1 मिलीग्राम / किग्रा) प्रशासन. नोट: सीपीपी कमी आई के साथ जुड़ा हुआ है जो अस्थिर गैस एनेस्थेटिक्स, CBF बढ़ रही है और ऑक्सीजन के लिए मस्तिष्क चयापचय दर कम करने से बचें 11 अंतःशिरा निश्चेतक मस्तिष्क का अध्ययन जब ऊपरवाला महत्व का है जो CBF और मस्तिष्क वाहिकासंकीर्णन, 12 के संरक्षण द्वारा neuroanesthesia के लिए अधिक आदर्श विशेषताओं प्रदान करते हैं. vasospasm. इसके अलावा, हालांकि मृत्यु दर spont में वृद्धि हुई हैaneously जानवरों श्वास, यह बेहतर तीव्र एसएएच के मानव स्थिति की नकल कर सकता है.
- अंत ज्वार कार्बन डाइऑक्साइड की अनुमति देता है कि एक श्वसन मास्क के माध्यम से - (2 एल / मिनट 1) (ETCO 2) निगरानी ऑक्सीजन प्रदान करते हैं.
- खरगोश के उदर पक्ष पर एक त्रिकोणीय व्यवस्था में एक 3 चैनल इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी) .Place तीन चमड़े के नीचे इलेक्ट्रोड स्थापित करें; विशेष रूप से, दोनों अंगों पर वितरित पेट के निचले हिस्से में और दो इलेक्ट्रोड (अवजत्रुकी धमनी केन्युलेशन के लिए बाँझ मुंडा क्षेत्र के लिए दूरी के साथ) सही midthoracic क्षेत्र में एक इलेक्ट्रोड जगह है.
- श्वसन दर, ईसीजी संकेत से नजर रखी दिल की दर (मानव संसाधन), और हानिकारक उत्तेजना की प्रतिक्रिया का पालन करके संज्ञाहरण की गहराई सर्जरी के दौरान हर 15 मिनट पर नज़र रखें.
- हानिकारक उत्तेजना (पैर की अंगुली चुटकी) के लिए सकारात्मक प्रतिक्रिया के मामले में, Ketamine सांस (6 मिलीग्राम / किग्रा) चतुर्थ और xylazine सांस (0.05 मिलीग्राम / किग्रा) चतुर्थ और / या Fentanyl के साथ एक अतिरिक्त पीड़ानाश सांस में (1 एम सी द्वारा संज्ञाहरण की गहराई अनुकूलनग्राम / किग्रा) चतुर्थ
- नीचे सिर 20 डिग्री झुकने और अवजत्रुकी धमनी उजागर किया जाएगा, जिस पर पक्ष को थोड़ा contralaterally यह मोड़, एक शरीर वार्मिंग प्लेट पर एक लापरवाह स्थिति में खरगोश को ठीक करें.
- नेत्र मरहम लागू करते हैं और हंसली के बीच तीसरे आसपास सही कवच की पेशी पर बाल शेविंग द्वारा शल्य चिकित्सा के लिए क्षेत्र को तैयार है, और, frontal- parietal- और पश्चकपाल खोपड़ी, गर्दन पर, और सही आम ऊरु धमनी के ऊपर.
- एंटीसेप्टिक एक व्यापक स्पेक्ट्रम, उदा., Povidone आयोडीन के साथ 3 मिनट के लिए त्वचा कीटाणुरहित.
- बाँझ शीट के साथ खरगोश को कवर किया. पोत हेरफेर और स्थानीय संक्रमण से धमनी vasospasm को रोकने के लिए topically बाँझ परिस्थितियों में आगे की सभी प्रक्रियाओं का प्रदर्शन और अक्सर एचसीएल और एंटीबायोटिक समाधान (neomycin सल्फेट 5 मिलीग्राम / एमएल) papaverin 4% लागू होते हैं.
- स्थानीय anesthetics (Lidocaine 1% अधिक से अधिक 6 मिलीग्राम / किग्रा) के साथ कवच की मांसपेशियों घुसपैठ. एक parasternal त्वचा चीरा और तैयारछाती पर का कवच मांसपेशी. सूक्ष्मदर्शी का प्रयोग, अवजत्रुकी धमनी काटना और उजागर अंत के आसपास एक प्रॉक्सिमल और बाहर संयुक्ताक्षर (4-0 polyfilament टांके) के साथ सुरक्षित है. कैथेटर को सुरक्षित और distally पोत ligate जगह में समीपस्थ नियंत्रण करने के लिए करीब एक संयुक्ताक्षर रखें.
- एक घुमावदार microscissor साथ धमनी incising द्वारा अवजत्रुकी धमनी की दीवार में एक arteriotomy प्रदर्शन और एक छोटे intravasal 3 तरह पानी निकलने की टोंटी के साथ प्रतिगमनपूर्वक अवजत्रुकी धमनी cannulate. धमनी घुमा या धमनी के समीपस्थ भाग के झुकने को रोकने के लिए और फिसलन या भारी खून बह रहा से बचने के लिए बाहर का संयुक्ताक्षर की ओर डबल गाँठ संयुक्ताक्षर से कैथेटर सुरक्षित.
2 रक्तचाप और धमनियों से रक्त गैस निगरानी
- मैं करने के लिए 3 तरह रोक मुर्गा) intravasal धमनियों से रक्त गैस के लिए प्रवेशनी (एबीजी) का विश्लेषण करती है, पीएच, Paco 2, पाओ 2, बाइकार्बोनेट, आधार अतिरिक्त, और इसलिए 2 कनेक्ट, द्वितीय) आक्रामक धमनियों से रक्तदबाव माप उपकरण, और तृतीय) शंट डिवाइस.
- एबीजी की स्थिति के लिए रक्त के नमूने (Paco 2, पाओ 2) लीजिए और लगातार एक analog- को मानक हृदय और श्वसन मानकों (रक्तचाप, मानव संसाधन, ईसीजी, श्वसन दर और अंत ज्वार सीओ 2) के अनुरूप उत्पादन इंटरफ़ेस के माध्यम से और डाटा हस्तांतरण की निगरानी डिजिटल कनवर्टर / डेटा लकड़हारा और दुकान.
नोट: दबावों से पहले और प्रत्येक सत्र के बाद दिल के स्तर पर चुना जाएगा, और सीरीज शुरू होने से पहले एनालॉग / डिजिटल कनवर्टर और डेटा प्रवेश प्रणाली के दबाव अंशांकन एक बार किया जाएगा.
3 आधारभूत डिजिटल घटाव एंजियोग्राफी
- एंजियोग्राम जांच करने के क्रम में दोनों जबड़ा कोण पर एक बाहरी आकार डिवाइस (छोटे क्षेत्र) रखें.
नोट: इस आधार रेखा के पद अस्थायी माप की सही तुलना की अनुमति देता है और पोत व्यास का पालन करें. - प्रतिगामी इंट्रा एक से डिजिटल घटाव एंजियोग्राफी (डीएसए) प्रदर्शनगैर ईओण iopamidol की rterial सांस में इंजेक्शन cannulated धमनी के माध्यम से (0.6 मिलीग्राम / किलो, 2 सेकंड के लिए 5 मिलीलीटर / सेकंड) और बाद की आड़ रोकने के लिए नमक के साथ सांस में इंजेक्शन के बाद तुरंत प्रवेशनी फ्लश.
- एक 5 ° बाएँ पूर्वकाल परोक्ष स्थिति में तेजी से अनुक्रमिक एंजियोग्राफी रिकॉर्डिंग का उपयोग vertebrobasilar प्रणाली की छवियों (14 सेकंड में 7 तस्वीरें) प्राप्त करते हैं.
- स्थानीय anesthetics (Lidocaine 1%, अधिक से अधिक 6 मिलीग्राम / किग्रा) के साथ सही आम ऊरु धमनी के आसपास के क्षेत्र में घुसपैठ. एक छोटे वंक्षण त्वचा चीरा. दृश्य के लिए सूक्ष्मदर्शी का प्रयोग, आम ऊरु धमनी काटना और उजागर अंत के आसपास एक प्रॉक्सिमल और बाहर संयुक्ताक्षर (4-0 polyfilament टांके) के साथ सुरक्षित है.
- Arteriotomy के बाद, 5 एफ म्यान के साथ ऊरु धमनी cannulate. नमक के साथ म्यान की ओर बंदरगाह फ्लश.
- प्रतिदीप्तिदर्शन तहत म्यान के माध्यम से प्रगंडशीर्षी धमनी में 5 एफ कैथेटर अग्रिम. एक रोड मैप बनाएं, तो वें के लिए एक गाइड तार अग्रिमई vertebrobasilar प्रणाली. कदम 3.2 में वर्णित के रूप में डीएसए के लिए (0.6 मिलीग्राम / किलो, 2 सेकंड में 5 मिलीग्राम / सेक) गैर ईओण iopamidol की एक सांस में इंजेक्षन.
प्रवण स्थिति को 4 रोटेशन
- आधारभूत डीएसए के बाद, लापरवाह से प्रवण स्थिति को खरगोश का स्थान. हेरफेर या अंतर धमनी कैथेटर की स्थिति को स्थानांतरित करने के लिए नहीं सावधान रहना होगा.
- नीचे सिर उन्मुख, एक 30 डिग्री के कोण पर एक सिर धारक में सिर की स्थिति.
5 महाकुण्ड पंचर
- 1 मिनट प्रत्येक के लिए povidone आयोडीन 3 बार के साथ सिर और गर्दन पर त्वचा कीटाणुरहित, और बाँझ शीट के साथ शल्य चिकित्सा के क्षेत्र को कवर किया.
- किसी पूर्व त्वचा चीरा या मांसपेशी विस्थापन के बिना transcutaneously महाकुण्ड में एक 22 जी x 40 मिमी बाल चिकित्सा रीढ़ की पहुँच सुई डालें.
- जानवर पूरी तरह बोनी बाहरी पश्चकपाल उभार साथ नीचे सुई फिसलने से पहले पैर के अंगूठे चुटकी प्रतिक्रिया की कमी सुनिश्चित करने के द्वारा anesthetized है की पुष्टिएक अंतर का पता चला है, जब तक; किसी भी आगे की सुई धक्का नहीं है.
- कुछ मिनट के लिए एक 20 डिग्री के कोण पर नीचे झुका खरगोश के सिर के साथ मस्तिष्कमेरु द्रव का सहज टपकता देख कर सुई की सही स्थिति की पुष्टि करें.
Intracranial दबाव और मस्तिष्क में रक्त प्रवाह की निगरानी के 6 स्थापना
- Midline त्वचा और Galea चीरा के बाद, एक छोटी सी शल्य प्रत्याकर्षक डालें.
- एक neuromonitoring डिवाइस अगर की नियुक्ति के लिए घ्राण बल्ब और द्विपक्षीय ललाट पर तीन दौर osteotomies (2 मिमी व्यास) बाहरी खोपड़ी स्थलों के अनुसार खोपड़ी के ललाट भाग में एक उच्च गति microdrill का उपयोग (चित्रा 1) 9, यानी, बनाओ आवश्यक. निम्नानुसार गड़गड़ाहट छेद प्लेसमेंट के लिए निर्देशांक निर्धारित करने के लिए एक मिलीमीटर पैमाने शासक का उपयोग: midpupillary लाइन में intracranial दबाव (आईसीपी) की निगरानी, midsagittal लाइन से दो मिमी एक; intraparenchymal लेजर डॉपलर जांच4-5 मिमी पूर्वकाल और शीर्षस्थान के लिए पार्श्व (चित्रा 1).
- ड्यूरा कल्पना, और सावधानीपूर्वक रक्तस्तम्भन प्रदर्शन: अपने तीव्रसम्पीड़न कार्रवाई के आधार पर हड्डी hemostasis के लिए हड्डी मोम का उपयोग करें और ड्यूरा की द्विध्रुवी जमावट का उपयोग स्थानीय रक्तस्तम्भन प्रदर्शन करते हैं.
- 2 मिमी की गहराई तक सही घ्राण बल्ब में intraparenchymal intracranial दबाव (आईसीपी) की निगरानी टिप प्लेस और फिर जांचना.
- एक बाहरी दबाना प्रणाली का उपयोग करते हुए दो लेजर डॉपलर Flowmetry ठीक सुई जांच प्लेस और दाएं और बाएं ललाट गोलार्द्धों दोनों मस्तिष्कमेरु द्रव के साथ हस्तक्षेप से बचने के लिए midline में, निलय प्रणाली, यानी करने के लिए पार्श्व में इसी गड़गड़ाहट छेद में डालने. 2.5 मिमी की गहराई तक सुई जांच रखें.
- Neuromonitoring जांच की नियुक्ति के बाद, कपाल तरल पदार्थ से तंग रखने के लिए हड्डी मोम की एक मोटी प्लग के साथ सभी गड़गड़ाहट छेद सील.
- मतलब धमनी रक्तचाप की आधारभूत मापदंडों को मापने (एमएपी), आईसीपी और एक Multiparameter निगरानी और चार चैनल लेजर डॉपलर ऊतक रक्त छिड़काव मॉनिटर का उपयोग कर मस्तिष्क में रक्त प्रवाह (CBF).
7 शंट प्रेरण
- खून से भरे दबाव की निगरानी टयूबिंग के माध्यम से पहले से catheterized अवजत्रुकी धमनी को महाकुण्ड में रीढ़ की पहुँच सुई कनेक्ट करें. रक्तचाप माप के लिए और रक्त नमूने बंदरगाह के रूप में 3 तरह पानी निकलने की टोंटी का प्रयोग करें.
नोट: एसएएच की गंभीरता को रक्त की मात्रा पर निर्भर करता है, और मोटे तौर पर मस्तिष्क फसल 5,11 के समय subarachnoid थक्के के फैलाव से अनुमान लगाया जा सकता है. - लगातार एसएएच के बाद कम से कम 20 मिनट तक पहले 6 मिनट से 1 हर्ट्ज का एक नमूना दर पर एमएपी, मानव संसाधन, ईसीजी, श्वसन दर और अंत ज्वार सीओ 2 की निगरानी.
- जानवर पूरी तरह अवजत्रुकी धमनी और महाकुण्ड दबाव gradie द्वारा एसएएच प्रेरित करने के बीच अलग धकेलना कनेक्शन खोलने से पहले पैर के अंगूठे चुटकी प्रतिक्रिया की कमी सुनिश्चित करने के द्वारा anesthetized है की पुष्टिNT.
नोट: (. जैसे, आईसीपी के एक वांछित स्तर पर) एक नियंत्रित एसएएच किसी भी समय बिंदु पर अलग धकेलना बंद करके प्राप्त किया जा सकता है. - लगभग 15 मिनट की एक समय अवधि के दौरान स्थिर राज्य मूल्यों रिकार्ड.
- आईसीपी अपने चरम पर पहुँचने के बाद आईसीपी आधारभूत मूल्यों के करीब एक स्थिर राज्य को रिटर्न तक, जगह में रीढ़ की पहुँच सुई रखना. आईसीपी पठार से अधिक 10 सेकंड के लिए बनाए रखा या आईसीपी अनायास कम हो जाती है, तो अलग धकेलना करीब है.
- , (लगातार खून बह रहा है साथ कैथेटर हेरफेर उच्च रुग्णता और मृत्यु दर के साथ जुड़ा हुआ है, और संक्रमण की दर बढ़ जाती है के बाद से, अवजत्रुकी कैथेटर सहित) सभी कैथेटर को हटाने, हड्डी मोम के साथ गड़गड़ाहट छेद प्लग, CBF ठीक सुई जांच और आईसीपी जांच निकालने के साथ कठोर घाव सिंचाई प्रदर्शन Neomycin सल्फेट और त्वचा सीवन.
8 पश्चात प्रबंधन
- प्रक्रिया के बारे में 2 घंटे के लिए रहता है. कारण ketamine और xylazine, एनिमा की वसूली समय के आधा जीवन के लिएलगभग 1 घंटा - एल काफी कम है. जानवरों वसूली के दौरान एक हीटिंग दीपक के नीचे रखा जाता है. अतिरिक्त तरल पदार्थ उपलब्ध नहीं हैं. इस प्रारंभिक पश्चात की वसूली चरण के दौरान, buprenorphine 0.02 मिलीग्राम / किलो सुप्रीम कोर्ट 24 घंटे के लिए हर 8 घंटा लागू होते हैं.
- अगले 72 घंटे से अधिक प्रभावी analgesia के लिए जानवरों की मुंडा गर्दन क्षेत्र में 12.5 माइक्रोग्राम / घंटा रिहा transdermal fentanyl मैट्रिक्स पैच लागू करें.
- यह sternal अवलंबन बनाए रखने के लिए पर्याप्त होश आ गया है जब तक पहुंच के बाहर एक जानवर मत छोड़ो.
- पूरी तरह से ठीक है जब तक अन्य जानवरों की कंपनी में सर्जरी आया है कि एक जानवर वापस नहीं करते.
3 दिन में DCVS का आकलन करने के लिए डिजिटल घटाव एंजियोग्राफी का पालन करें 9
- ऊपर वर्णित के रूप में 3.6 कदम 1.1 प्रदर्शन करना.
- सोडियम thiopenthal की intraarterial सांस में इंजेक्शन (40 मिग्रा / किग्रा) द्वारा जानवरों Euthanize (Pentothal, Ospedalia एजी, Hünenberg, स्विट्जरलैंड). मामलों में जहां ऊतक विज्ञान और immunohist मेंochemistry की जरूरत है, 100 सेमी एच 2 ओ के छिड़काव दबाव में आरटी पर एक intracardiac छिड़काव निर्धारण प्रदर्शन
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Representative Results
एसएएच का खरगोश रक्त अलग धकेलना मॉडल इस रिपोर्ट में वर्णित है, बेसल प्रांतस्था (चित्रा 2A, बी), और मस्तिष्क vasculature (चित्रा -2) के रूप में जल्दी के रूप में 24 घंटा चोट के बाद (बी 2A चित्रा) हिप्पोकैम्पस में EBI पैदा करता है और एक विशेषता से पता चलता है रक्त वितरण (चित्रा 2 डी) 8. इसके अलावा, मॉडल एसएएच प्रेरण (चित्रा 3) के 10 दिन के बाद तीन पर DCVS की गंभीर डिग्री के लिए उदार हो सके. तीव्र एसएएच के समय सांस की गिरफ्तारी या गंभीर मंदनाड़ी के लिए 30% की वजह से - मृत्यु दर 20 है. लगभग सभी खरगोश दिन 1 से स्नायविक घाटे के प्रगतिशील उत्तेजना शो -. 3 10 उस समय बिंदु पर जानवरों पूरा संज्ञाहरण के तहत कर रहे हैं. देखने की एक तकनीकी बिंदु से, रक्त अलग धकेलना मॉडल दोनों परीक्षक स्वतंत्र और चलाया एसएएच प्रेरण (चित्रा 4) के लिए अनुमति देता है.
1 फिर से "के लिए: सामग्री चौड़ाई =" "चौड़ाई =" 600 "src =" / फ़ाइलें / ftp_upload / 52132 / 52132fig1highres.jpg "6in />
CBF और आईसीपी जांच के लिए चित्रा 1 आउटर खोपड़ी स्थलों (तंत्रिका विज्ञान के तरीके के जर्नल से अनुमति के साथ Reproduced 201: 322-326) 9 योजनाबद्ध ड्राइंग ललाट लोब में और सही घ्राण बल्ब में intraparenchymal CBF और आईसीपी जांच की नियुक्ति को दर्शाया गया है. . शीर्षस्थान के लिए 5 मिमी पूर्वकाल और parasagittal - CBF जांच 4 रखा जाता है. Midsagittal लाइन से 2 मिमी - आईसीपी जांच 1 की दूरी पर दुम-व्याख्यान चबूतरे वाला दिशा में midpupillary लाइन में रखा जाता है. Intraparenchymal CBF (पैनलों ए और बी) और आईसीपी (पैनलों सी और डी) जांच टी 2 भारित MRIs के बाण के समान और राज्याभिषेक विमानों में दिखाए जाते हैं. निलय के संबंध नोट. मस्तिष्क रक्त प्रवाह जांच के लिए CBFl = बाईं ललाट burrhole. मस्तिष्क रक्त प्रवाह जांच के लिए CBFr = सही ललाट गड़गड़ाहट छेद. Intracranial दबाव जांच के लिए गड़गड़ाहट छेद के आईसीपी = स्थिति. * शीर्षस्थान; ** लैम्ब्डा.च = "https://www.jove.com/files/ftp_upload/52132/52132fig1highres.jpg" लक्ष्य = "_blank"> इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
Subarachnoid नकसीर के बाद चित्रा 2 जल्दी मस्तिष्क चोट (तंत्रिका विज्ञान के तरीके 208 के जर्नल, 138 से अनुमति के साथ Reproduced - 145 8 और तंत्रिका विज्ञान के तरीके 191 के जर्नल: 227-233). 10. TUNEL के धुंधला हिप्पोकैम्पस (ए) में apoptosis और एसएएच जानवरों के बेसल प्रांतस्था (बी) से पता चला है. Neurodegeneration FJB (फ्लोरो जेड दाग) DAPI साथ colocalized सकारात्मक कोशिकाओं द्वारा विश्लेषण किया गया था. DAPI (बाएँ स्तंभ) के साथ colocalization TUNEL के सकारात्मक धुंधला (मध्य स्तंभ) नाभिक (सही स्तंभ) में स्थानीयकृत किया गया था कि पता चला. ओपन तीर DAPI सकारात्मक परमाणु धुंधला दिखा. ठोस तीर से संकेत मिलता है TUNEL के सकारात्मक या FJB-Positivई कोशिकाओं. स्केल बार = 50 माइक्रोन. (सी) apoptosis और neurodegeneration आधारी धमनी endothelial कोशिकाओं में 24 घंटे बाद एसएएच चित्रित कर रहे हैं. भरा हुआ तीर TUNEL- सकारात्मक apoptotic, सूजन, और असम्बद्ध endothelial कोशिकाओं से संकेत मिलता है. स्केल बार = 50 माइक्रोन. मस्तिष्क (डी) सकल परीक्षा मस्तिष्क के उदर और पृष्ठीय सतह और बेसल खुदे एसएएच प्रेरण के बाद 24 घंटा दिखावा संचालित जानवरों की तुलना में पर विस्तारित रक्त वितरण से पता चलता है. * = बेसल तालाब; ** = Prepontine तालाब; *** = महाकुण्ड; PeriOperative आईसीपी निगरानी टिप (**** = आईसीपी जांच घाव) से सही ललाट प्रांतस्था घाव. यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
चित्रा 3.Vertebrobasilar angiograms (A1) से पहले और (A2) एसएएच प्रेरण. बेसलाइन एंजियोग्राम (A1) वर्टिब्रल और आधारी धमनियों के सामान्य पोत व्यास से पता चलता है के बाद. तीन दिन एसएएच प्रेरण (A2) के बाद, एंजियोग्राम आधारी (तीर) और कशेरुका धमनियों की एक फैलाना संकुचन से पता चलता है. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
एसएएच के विभिन्न डिग्री के चित्रा 4 आईसीपी नियंत्रित प्रेरण. खरगोश रक्त अलग धकेलना मॉडल की एक प्रमुख तत्व खून बह रहा है की राशि, intracranial दबाव में वृद्धि (आईसीपी) सहित एसएएच गंभीरता के विभिन्न डिग्री, के लिए नियंत्रित करने की क्षमता है, या प्रमस्तिष्क छिड़काव दबाव (सीपीपी) में कमी. 4 चित्रा आईसीपी followi के समय पाठ्यक्रम दिखाता हैएसएएच की प्रेरण (तीर = अलग धकेलना के उद्घाटन) एनजी. वक्र प्रगति खरगोश के शरीर क्रिया विज्ञान, आईसीपी और मतलब धमनी रक्तचाप के बीच मुख्य रूप से दबाव ढाल पर निर्भर करता है. आईसीपी डायस्टोलिक रक्तचाप के करीब एक मूल्य तक पहुँच जाता है, अलग धकेलना में प्रवाह रुक जाता है. उस समय बिंदु पर आईसीपी या तो कम करने के लिए शुरू होता है या आईसीपी मूल्य एक पठार पर बनी हुई है. पठार 10 सेकंड से अधिक समय तक रहता है तो अलग धकेलना बंद है. नियंत्रित एसएएच सहज थ्रोम्बोसिस (शंट की एक्स = बंद करने) से पहले अलग धकेलना के बंद के माध्यम से किसी भी आईसीपी स्तर पर किया जा सकता है. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
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Discussion
अलग धकेलना मॉडल तीव्र एसएएच 3,8,10 के बाद मनुष्य में मनाया समान विकृति पैदा करता है. यह EBI, ख़राब बनाए रखने और यहां तक कि DCVS 12 ट्रिगर, और इस तरह इस मॉडल एसएएच निम्नलिखित EBI और DCVS बातचीत सहित जल्दी और देर DCVS चरणों, दोनों की जांच में सहायता कर सकते हैं के रूप में हो सकता है कि सुझाव दिया गया है. विशेष रूप से, repeatable में विवो DCVS डीएसए 13 सहित निगरानी तकनीक, 15 और readibly छोटे प्रयोगशाला पशुओं में से खरगोश में लागू कर रहे हैं गणना टोमोग्राफी एंजियोग्राफी 14, और Transcranial डॉपलर. परीक्षक स्वतंत्र सहज एसएएच सक्षम करने के अलावा, मॉडल उपयोगकर्ता अलग गंभीरता की डिग्री (रक्त या आईसीपी की राशि, और प्रमस्तिष्क छिड़काव दबाव में परिणामी परिवर्तन) के लिए नियंत्रित करने के लिए अनुमति देता है.
सबसे महत्वपूर्ण बात, तीव्र एसएएच के बाद की घटनाओं का एक बहुत, लगातार प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य, और pathophysiologically अनुकूलित पाठ्यक्रम में इस मॉडल का परिणाम है. Rebleed आईएनजी nonexistent है और मृत्यु दर में तीव्र एसएएच 16,17 के अन्य मॉडलों की तुलना में अपेक्षाकृत कम है. आगे धकेलना प्रणाली में एक प्रवाह की जांच की दखल 10 से खून बह रहा दौरान एसएएच मात्रा का वास्तविक समय मूल्यांकन की अनुमति देता है. हालांकि, बड़े जानवर प्रक्रियाओं के साथ जुड़े लागत और आमतौर पर इस्तेमाल छोटे प्रयोगशाला पशुओं की तुलना में काफी अधिक है, और खरगोश की आनुवंशिक हेरफेर एसएएच पर विशेष जीन के इस प्रकार सीमित पढ़ाई 18-20 परिणामों बेहद चुनौतीपूर्ण है.
हम निम्नलिखित सामान्य मापदंड और महत्वपूर्ण शल्य चरणों के ध्यान की सिफारिश एसएएच के वर्तमान मॉडल में स्थिरता और सटीकता सुनिश्चित करने के लिए:
मैं) एसएएच प्रेरण के बाद मृत्यु दर स्पष्ट रूप से कम हो जाता है क्योंकि पुराने खरगोश की तुलना में, और द्वितीय) vasospasm अवधि पुराने खरगोश (20 से 40 महीने) 21 में बढ़ाया है के रूप में 3-4 महीने पुराने खरगोश पर प्रयोगों प्रदर्शन.
तम्बू "> एक बाहरी आकार डिवाइस (छोटे क्षेत्र) के साथ एंजियोग्राम की कैलिब्रेशन आधारभूत कम परिवर्तनशीलता और सटीक अंशांकन साथ एक अंधा तरीके से पोत व्यास के आकलन की अनुमति देता है और angiograms पालन करें. पोत व्यास मापने एक पूर्वनिर्धारित लंबाई के साथ तीन बार (से मतलब मूल्यों (प्रोटोकॉल में चरण 3) निर्धारित करने के लिए स्वत: माप विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग आधारी धमनी की नोक) की सिफारिश की है.अवजत्रुकी धमनी की सुरक्षित संयुक्ताक्षर प्रवण स्थिति (प्रोटोकॉल में कदम 4) को लापरवाह से repositioning के दौरान घुमा या अवजत्रुकी धमनी के झुकने को रोकने के लिए.
तरल पदार्थ से तंग कपाल रखने के लिए और मुख्य स्थिर आईसीपी, सीपीपी के राज्य और एमएपी (प्रोटोकॉल में कदम 6) को हड्डी मोम पूर्व एसएएच को शामिल करने की एक मोटी प्लग के साथ सभी गड़गड़ाहट छेद सील.
आईसीपी मूल्यों आधारभूत करने के लिए रिटर्न जब तक जगह में रीढ़ की पहुँच सुई रखें. रीढ़ की हड्डी में पहुंच पूर्वोत्तर के गुमEDLE महत्वपूर्ण रुग्णता (प्रोटोकॉल में चरण 7) में परिणाम कर सकते हैं.
मोटे तौर पर एसएएच के बाद प्रतिकूल परिणाम और मृत्यु दर में योगदान जो दोनों EBI और DCVS, एसएएच के रक्त अलग धकेलना मॉडल का उपयोग कर अध्ययन किया जा सकता है. व्यक्तिगत तकनीकी जानकारी के बारे में जागरूकता के इस मॉडल के सफल कार्यान्वयन की गारंटी देता है और संभावित उपचार रूपरेखा के एसएएच sequelae और स्क्रीनिंग के मूल्यांकन के लिए अनुमति देता है.
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Acknowledgments
लेखकों बोस्टन, एमए प्रारंभिक मसौदा proofreading के लिए प्रूफरीडिंग और पांडुलिपि संपादन और Paskus यिर्मयाह, बोस्टन बच्चों के अस्पताल के लिए, लॉरी वॉन Melchner, बर्न विश्वविद्यालय अस्पताल, न्यूरोसर्जरी विभाग, बर्न, स्विट्जरलैंड धन्यवाद. हम डैनियल Mettler, DVM, मैक्स मुलर, DVM, डैनियल Zalokar, और Olgica Beslac, प्रायोगिक सर्जिकल संस्थान, क्लीनिकल रिसर्च विभाग, बर्न विश्वविद्यालय, बर्न, स्विट्जरलैंड से पशु की देखभाल, संज्ञाहरण, और ऑपरेटिव सहायता के कुशल प्रबंधन की सराहना करते हैं. हम शारीरिक मापदंड का वास्तविक समय डाटा की निगरानी और बाद के प्रसंस्करण के लिए, माइकल Lensch, हेड रिसर्च नर्स, इंटेंसिव केयर मेडिसिन विभाग, बर्न विश्वविद्यालय अस्पताल और बर्न विश्वविद्यालय, बर्न, स्विट्जरलैंड धन्यवाद. हम उनके उत्कृष्ट प्रयोगशाला तकनीकी और ऑपरेटिव सहायता के लिए, Edin Nevzati, कार्ल Muroi, और Salome Erhardt धन्यवाद.
इस काम के गहन विभाग द्वारा समर्थित किया गयाई केयर मेडिसिन, बर्न विश्वविद्यालय अस्पताल और बर्न, बर्न, स्विट्जरलैंड, क्लीनिकल रिसर्च विभाग, बर्न, बर्न, स्विट्जरलैंड के विश्वविद्यालय के विश्वविद्यालय, और Kantonsspital Aarau, Aarau, स्विट्जरलैंड से रिसर्च फंड. हम आंकड़े 1 और 2 के लिए पुनर्मुद्रण अनुमति के लिए, Elsevier धन्यवाद.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Equipment | |||
| Operation microscope | Zeiss, Jena, Germany | Zeiss, OPMI-MD surgical microscope | |
| Surgical equipment | B. Braun, Germany | Forceps medical no. 5; vessel scissors 8 cm; microclip 4 mm | |
| Respirator | Hugo Sachs | ||
| Hair clipper | 3M Surgical Clipper | Starter Kit 9667A | |
| Body warm plate | FHC | ||
| Blood gas analyzer | Radiometer, Copenhagen, Denmark | ABL 725 | |
| Cardiac monitoring | Camino Multi-Parameter Monitor, Integra, Plainsboro, NJ, US | AP-05 | |
| Software analysis | BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, USA | Biopac MP100 and acqKnowledge software,version 3.8.1 | |
| Software analysis | ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USA | Image-Pro Plus version | |
| Angiography apparatus | DFP 2000 A-Toshiba | MIIXR0001EAA | |
| ICP monitor | Camino Laboratories, San Diego, CA, USA | ICP monitor, Model 110-4B | |
| Blood flow monitor | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | CAL KIT microsphere solution | |
| Laser-Doppler flowmetry fine needle probes | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | MNP110XP, 0.48 mm diameter | |
| Pressure tube | B. Braun, Germay | PE 1.0 mm × 2.0 mm | |
| Anesthesia monitor | GE Medical Systems, Switzerland | Datex S5 Monitor | |
| Material | |||
| 20 G vascular catheter | Smiths Medical | Jelco i.v. catheter, REF 4057 | |
| 5.5 F three-lumen central venous catheter | Connectors, Tagelswangen, Switzerland | Silicone catheter STH-C040 | |
| 22 G x 40 mm needle | Emergo Group Inc., Netherlands | ||
| High-speed microdrill | Stryker, Solothurn, Switzerland | 5400-15 | |
| Bone wax | Ethicon, Johnson & Johnson,NJ, USA | ETHW31G | |
| Bipolar forceps | Aesculap, Inc., PA, US | US349SP | |
| Ketamin | Any generic product | ||
| Xylazine | Any generic product | ||
| Buprenorphine | Any generic product | ||
| Fentanyl | Any generic product | ||
| Transdermal fentanyl matrix patches | Any generic product | ||
| Lidocaine 1% | Any generic product | ||
| 4% papaverin HCl | Any generic product | ||
| Neomycin sulfate | Research Organics Inc., OH, USA | Any generic product | |
| Povidone-iodine | Any generic product | ||
| 0.9% sodium chloride | Any generic product | ||
| Iopamidol | Abott Laboratories, IL, USA | Any generic product | |
| 3-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP824G | |
| 5-0 non absorbable suture | Ethicon Inc., USA | 8618G | |
| 4-0 polyfilament sutures | Ethicon Inc., USA | VCP284G |
References
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