Abstract
Myokardieinfarkt stadig den vigtigste dødsårsag i de vestlige lande, på trods af betydelige fremskridt i stenten udviklingsområde i de seneste årtier. For afklaring af de underliggende mekanismer og udvikling af nye terapeutiske strategier, tilgængeligheden af gyldige dyremodeller er obligatoriske. Da vi har brug for nye indsigter i patomekanismer af hjertekarsygdomme under in vivo betingelser for at bekæmpe myokardieinfarkt, gyldigheden af dyremodel er et afgørende aspekt. Imidlertid beskyttelse af dyr er yderst relevante i denne sammenhæng. Derfor etablerer vi en minimalt invasiv og enkel model for myokardieinfarkt i mus, som sikrer en høj reproducerbarhed og overlevelsesraten for dyrene. Således dette modeller opfylder kravene i 3R-princippet (Replacement, raffinement og reduktion) til dyreforsøg og sikre videnskabelige oplysninger til brug for videreudvikling af terapeutiske strategier for cardiovascular sygdomme.
Introduction
Myokardieinfarkt er en af de hyppigste dødsårsager i de industrialiserede lande. Trods ubestridelige fremskridt af diagnostiske og terapeutiske metoder, kardiovaskulære sygdomme er stadig den vigtigste årsag til dødelighed. I betragtning af den forbedrede levetid og liv risici, der forventes en fortsat stigning i forekomsten af hjerte-kar-sygdomme i fremtiden. Der er derfor et stærkt behov for at etablere og validere nye tilgange til behandling af kardiovaskulær sygdom. Oplysningerne om humane undersøgelser lider sine begrænsninger, disse undersøgelser generelt er utilstrækkelige til at forklare og forstå de mekanismer på molekylært niveau, ikke er i stand til at levere løsninger på disse store sundhedsproblemer.
Desuden er grundforskning blevet begrænset på grund af kompleksiteten og vanskeligheden ved at gengive mekanismerne i kardiovaskulær sygdom i laboratoriet. Derfor, for at øge vores viden om patofysiologien af hjertevaskulære sygdomme, er det vigtigt at validere dyremodeller 1,2. Men for at identificere alle kaskader af molekylære begivenheder, der er involveret i heling efter myokardieinfarkt, analyse på forskellige tidspunkter er nødvendigt, forårsager et stort antal dyr eksperimenter.
Myokardieinfarkt eksperimenter udføres ofte ved anvendelse af dyremodeller. Inducerende myokardieinfarkt hos små dyr 3-11 er det mest egnede og effektive model anvendes til at undersøge cellulære og molekylære begivenheder end store dyremodeller. Desuden ingen andre arter viser tilgængeligheden af transgene eller knockout-stammer såsom mus 12. Disse musemodeller er meget nyttige i andre sygdomme, herunder cardiovaskulære patologier (såsom aterosklerose, i stent restenose) 13,14. Derudover lav graviditet periode og det høje antal af afkom kvalificere musemodeller som mest attraktive system til at studere molekylære mekanismer for myocardial infArction 12.
, Størrelsen af hjertet hos mus forventer alligevel høj præcision for manipulation under mikrokirurgi. Undervisning sådanne kvalificerede og dygtige kirurgi personale er en tidskrævende og arbejdskrævende proces. Derfor har vi her præsentere en detaljeret mikrokirurgi procedure, herunder tips og tricks til at guide samarbejdspartnere selv med gennemsnitlige kvalifikationer, såsom studerende eller teknikere til at udføre den komplekse myokardieinfarkt model i mus.
Indledningsvis er intubation udføres ved hjælp af en kort kanyle uden at bruge tracheotomi. Thorax indsnit er beliggende i det interkostale område, undgå skade af ribber eller / og omgivende væv. Denne sub-trin er yderst relevant for at sikre hurtig genopretning og healing 15. Ligaturen er lavet differentiale for kronisk iskæmi og iskæmi / reperfusion modeller, for en høj overlevelsesprocent samtidig opretholde en betydelig infarkt størrelse. Vores erfaring viser, that hjælp silkesutur sikrer en højere reproducerbarhed sammenlignet med kryo-skader 16.
Som konklusion her beskrevne metode kan anvendes i både kronisk iskæmi og iskæmi / reperfusion modeller i små dyr. De tips og tricks præsenteres i denne procedure er beregnet til at gøre det muligt for personale med selv lave eller gennemsnitlige kvalifikation til at anvende det i små dyremodeller.
Protocol
BEMÆRK: Forsøg præsenteret i dette papir udføres i overensstemmelse hermed til den tyske lave og til de europæiske retningslinjer dyr pleje. Dyrene opdrættes i Animal facilitet i Institute for Laboratory Animal Science, Universiy hospital Aachen, Tyskland, under tilsyn af Prof. Dr. R. Tolba og Dr. A. Teubner (dyrevelfærd officer).
1. Animal Care
- Hold musene i en specialiseret afdeling, der sikrer ordentlig adgang til mad og specialiseret veterinær kontrol og behandling. Hvis dyrene flyttes eller købes uden, bedes forsikre en uges overnatning før de undergik proceduren.
2. Intubering
- Bedøver 8-10 uger gamle C57BL / 6 vildtypemus, 25-27 g ved anvendelse intraperitoneal injektion af 100 mg / kg ketamin og 10 mg / kg xylazin. Overvåge niveauet af anæstesi ved tå knivspids reflekser. Placer dyrlæge salve på øjnene for at forhindre tørhed under proceduren.
- Sikre opretholdelse af sterile betingelser for at undgå infektioner under operation ved anvendelse af sterile materialer og instrumenter.
- Placer bedøvet mus i liggende stilling på en opvarmet kirurgi bord. Fjerne hår fra både ventrale halsområde og venstre halvdel af thorax med en lille barberkniv og desinficere med 70% alkohol før indsnit.
- Udføre en lille median incision på 0,5 cm under anvendelse af kirurgi saks i centrum af halsen. Under huden, gå gennem de 2 fedtholdige organer med sterile buede pincet og visualisere luftrøret under stereomikroskop gennem transparens af belægningen muskel.
- Indføre mundtligt intubation kanyle i luftrøret under visningen ved hjælp af stereomikroskop (figur 1A). Skelne metalkanyle through den gennemsigtige væv. Og tjek, stilling og placering under operationen på ethvert tidspunkt (figur 1B).
- Slut kanylen til den lille dyr ventilator og justere indstillinger ventilation ifølge fremstiller retningslinjer (tidalvolumen mellem 100-150 pi og en respiration på mellem 100-150 pr min).
3. myokardieinfarkt Induktion
- Udføre en hud indsnit mindre end 0,5 cm i midten af en linje mellem xyphoid og venstre axila. Brug pincet til at adskille musklen lag fra de underliggende ribben.
- Udføre et lille snit mellem ribbenene ved hjælp af en lille saks indtil brysthulen åbnes 17. For kronisk infarkt, udføre snit i det 5. interkostale mellemrum (figur 1C) og / eller for iskæmi / reperfusion model i 4. interkostale mellemrum (figur 1D): for en lettere tilgang nummer fra under 2 th og 3 th
- Placer retraktorer ind i indsnittet for at åbne brysthulen og at visualisere hjertet.
- Fjern forsigtigt hjertesækken at forhindre alt for store fibrotiske processer.
- Visualisere den venstre nedadgående kranspulsåre (LAD) som en dyb positioneret lys rød fartøj. Hvis LAD ikke kan visualiseres, overveje nogle referencepunkter for at øge reproducerbarhed.
- For kronisk infarkt model, placere ligatur i midten af den ventrale side af hjertet (mellem øremuslingen og apex), der som reference venen som vist i figur 1C. Binder begge grene af arterien hjælp 0/7 silkesutur at opnå en transmural forreste og bageste infarkt. Den grå farve indikerer positionen af ligatur og kan gentages, hvis nødvendigt (figur 1C).
- For iskæmi / reperfusion model, placere ligatur under øret, over hoveddelen af LAD (figur 1D). Det ligperaturen ligger over et silicium rør for at beskytte integriteten af fartøjet. Den grå farve indikerer infarktområdet og skal vises på hele hjertet (figur 1D). Placere tidsmæssige suturer på ribberne under iskæmi periode og fugtes ved anvendelse af en kompres at undgå væv tørring. Efter iskæmi, fjern silicium rør og skære suturen med lille saks til at visualisere reperfusion.
- Udover de bedøvelsesmidler og analgetika anvendes i begyndelsen af proceduren (trin 2.1 og 2.2), skal du bruge 0,5% isofluran under operationen for at sikre en korrekt komfort af dyret, eller følg retningslinjerne i din institution dyr pleje.
4. Sutur og Recovery
- Eliminer den resterende luft fra brystkassen ved at fylde med varmt isotonisk saltopløsning.
- Luk thorax med 3 suturer 0/6 (som vist i figur 2A og 2B). Placer de mediale suturer i en vinkel på 90 °, for at sikre somealed lukning af ribberne, som vist i figur 2 (figur 2A, B).
- Luk musklen lag med 2 suturer (Figur 2C) og huden med 3-4 suturer 0/6 (figur 2D). Udfør disse suturer separat for at opnå en ordentlig vindue for yderligere ekkokardiografisk måling.
- Afbryd intubation kanyle fra ventilatoren og tillade spontan ånde. For senere identifikation, markerer med musen ved hjælp af den lokale system (spørg dyrevelfærd officer fra din institution).
- Fastsætte musen på venstre side under den røde lampe, indtil det vågner. Lad ikke et dyr uden opsyn, indtil det har genvundet tilstrækkelig bevidsthed. Lad ikke et dyr, der har gennemgået operation for at være i selskab med andre dyr, indtil fuldt tilbagebetalt.
- Administrer smertebehandling med buprenophine 0,1 mg / kg legemsvægt, subkutant for de næste 3 dage, efter retningslinjerne i din institution dyr pleje.
5. Analyse af myokardieinfarkt
- Regelmæssigt overvåge hjertefunktionen ved hjælp af ekkokardiografi (figur 3A): uddrivningsfraktionen fraktioneret afkortning, minutvolumen og hjerte dimensioner.
- Bedøve dyr under anvendelse intraperitoneal injektion af 100 mg / kg ketamin og 10 mg / kg xylazin. Bekræft ordentlig bedøvelse før operationen på grund af manglende reflekser.
- Åbn brysthulen og udskære hjertet, placere den i sterilt PBS løsning vask udførligt den resterende blod.
- Hvis det er nødvendigt, indsamle blodet direkte fra hjertet ved at undgå skaden af infraktionsramt regioner, eller efter fjernelse af hjertet, fra brysthulen.
- Efter vask, stoppe hjertet i Diastola i mættet KCl-opløsning (steril filtreret 3M KCI i PBS). Til histologisk analyse fix hjertet i 10% formalin og fortsætte med trin 5.7.
- Om nødvendigt måler levedygtigheden af bilenDIAC celler ved Evans-Blå / triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) farvning. Efter ombygning ligaturen ved det første sted, perfundere hjerte med 200 pi 1% Evans blå opløsning under anvendelse af en aorta kanyle og fryse hjertet i en lille plastpose ved -20 ° C, uden vask.
- Efter 2 timer udfør 5 tværretningen objektglas med en skarp skalpel og inkuber dem i 10-15 min i TTC-opløsning ved 37 ° C, som beskrevet af fremstillet. Fix de slides i 10 minutter i 10% formalin og sætte dem mellem de mikroskopiske dias til yderligere analyse.
- Indlejre hjertevævet i paraffin, ved at anbringe hjertet på spidsen, til at udføre tværgående skæring. Udføre seriel sektion af 5 um. Saml de første 20 afsnit og kassér den næste 300 um. Fortsæt afsnittet protokollen indtil mitralklappen niveau er nået (figur 3A, B). Serielle snit, er 400 um afstand langs hele hjertet indsamlet og kan farves feller kvalitativ og kvantitativ analyse.
- Mål infarkt størrelse ved hjælp Gomori et-trins farvning 6-8.
- Analyser angiogenese, kollagen indhold eller inflammatoriske celler rekruttering i seriel sektion hjælp sædvanlige immunohistologisk farvning.
Representative Results
Den myokardie procedure infarkt sker inden for 25-30 min og viser en dødelighed på 10%. Efter operationen musene komme sig anæstesi inden næste 15 min. Ingen fysisk svækkelse blev observeret at det opererede musen. Men der er en større risiko for hjerte brud en uge efter post-kronisk myokardieinfarkt, hvis reparation processer forstyrres under den inflammatoriske fase. Eftersom hjertet er i stand til at ændre sig væsentligt sine dimensioner under pumpning, er det vigtigt for alle de indsamlede hjerter skal stoppes i den samme position, for eksempel i Diastola. Dette kan opnås ved perfusion af hjertet med mættet KCl-opløsning. Øget ekstracellulære K + -koncentrationen blokerer de ioniske pumper, nedsætter membranen hvilende potentiale hjerteceller, hvilket resulterer i en diastolisk standsning af hjerteaktivitet.
Infarktet område kan ses i ultralyd analyse (figur 3A, nederste panel). I sammenligning medden normale myocardium, synes iskæmiske områder tynde og hypokinetisk (figur 3A, øvre panel). Afhængigt af den model, der anvendes, vil infarkt størrelse variere. Den kroniske infarkt model inducerer cirkulær, transmural infarkt i spidsen (figur 3B), medens iskæmi / reperfusion inducerer en tynd, middle-væg og gennem hele hjertet (figur 3C). Der er mange metoder til at bestemme infarkt størrelse. Hvis formålet er at analysere den direkte effekt på kardial levedygtighed, er en Evans-Blå / TTC farvning 18 angivet at være udført mindst 2 timer efter reperfusion, at være i stand til at se eventuelle ændringer i myokardiet. Sektioner kan analyseres omgående (figur 3B, midterste panel) efter farvning eller kan holdes mellem objektglas i formalin i 2-3 dage (figur 3C, midterste panel). Det blå område repræsenterer den sunde myocardium, ikke påvirket af iskæmi. Det røde område repræsenterer den levedygtige myocardium inde the iskæmiske område (risiko myocardium), og det hvide område repræsenterer det døde væv. Sædvanligvis infarkt størrelse udtrykt som procent fra risikoområdet.
Det modne ar fremkommer efter remodeling processer kan let måles ved hjælp immunohistolgy Gomori et-trins-farvning. Blåfarvede infarkt og rød-farvede sunde ventrikulære områder (figur 3B og C, højre paneler) bestemmes i den første sektion fra hvert niveau indtil mitralklappen. At undgå variationen skyldes binding af LAD på forskellige niveauer, er infarkt fra al sektion overvejet og udtrykt som en procentdel af den samlede venstre ventrikel volumen. Kan opnås en infarkt volumen på 15-20% i kronisk infarkt model og på 10-15% efter iskæmi / reperfusion model. Yderligere vil den kroniske infarkt model inducere et accentueret dilatation, ikke observeret i den iskæmiske / reperfusion model (Figur 3B og C right panel).
Konventionelle farvningsprocedurer kan anvendes, såsom: CD31-farvning anvendes til at afsløre angiogenese (rød, figur 4A) eller glat muskel-actin-farvning til bestemmelse myofibroblaster (grøn, figur 4B). Dobbelt fluorescens-farvning kan også anvendes til at identificere forskellige målmolekyler i infarkt område, eftersom fraværet af cardiomyocytter giver ingen automatisk immunofluorescens (figur 4C).
Figur 1: Mediale incision og indsættelse af intubation s kanylen (A). Den stereomikroskopisk visualisering af metallet kanyle gennem transparens af vævet (B). De tracheale ringe (blå pile) og kanylen (sort pil) er understreget. Den intercostal snit for den kroniske infarkt model og ligatur af LAD (C). Ligaturen er placeret i midten af hjertet (mellem øremuslingen og apex, black i nederste panel), som reference enden af venen (skematiske i blå, nedre panel). Begge grene af arterien bør være bundet (rød i nederste panel). Den grå farve indikerer infarktområdet og det ser ud i den nederste halvdel af hjertet (højre nederste panel). Ligaturen for iskæmi / reperfusion modellen er fremstillet under øremuslingen, bindende hoveddelen af LAD (rød i nederste felt) over en silicium rør (højre side) (D). Den grå farve indikerer infraktionsramt område, som er til stede på hele hjerte (højre nedre panel). Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2: (A) og iskæmi / reperfusion model (B, venstre panel). In vivo-billeddannelse af ribber sutur (C, venstre panel ), muskel sutur (C, midterste panel) og hud sutur (C, højre panel). Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3: Ekkokardiografiske billeder. Billeder af normal (A, øvre panel) og infarkt områder (A, nederste panel), erhverves i den lange akse (langsgående, venstre paneler) eller i korte akse (tværgående, højre paneler) .. infarkt induceret af kronisk ligatur(B) og af en time iskæmi efterfulgt af reperfusion (C). Evans Blå / TTC Farvning tillader identifikation af perfunderet (blå) / ikke-perfunderede områder samt den levedygtige (rød) / dead (hvid) myocardium (B, C, midterste paneler). Gomori et-trins farvning muliggør identifikation af infarkt områder (blå), og adskiller dem fra de normale områder (rød) (B, C, højre paneler). Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 4: Forskellige farvninger kan udføres i infraktionsramt område, såsom CD31 til beskrevet neo-angiogenese (A, rød, enkle pile) eller glatmuskelactin for myofibroblasts (B g,Reen, enkle pile), samt dobbelt farvning (C, CD31-rød / glatmuskelactin-grøn), modfarvet med DAPI for kerner (blå). Myofibroblaster kan differentieres let fra glatte muskelceller fra små eller store arterier, som altid ledsaget af en endotel lag (C, pile). Dobbelte pile pege erytrocytter autofluorescens. Scale barer 50 um.
Discussion
Under proceduren, er der nogle kritiske punkter skal bemærkes: Den intubation, åbningen brysthulen og LAD ligatur. Den første kritiske trin er intubation af dyret før experiements. Mange grupper bruger en lodret understøtning for fastsættelse af mus og en lyskilde til at indsætte kanylen direkte ind i luftrøret. Denne metode har usikkerhed om den korrekte indføring af kanylen i luftrøret og er den mest tilbøjelige til at mislykkes af nybegyndere. At give et mindre indsnit, kan styres positionen af kanylen under hele manøvren, hvilket således formindsker defaultraten. Desuden er trakeostomi overgået, dermed reducere komplikationer og reducere den tid af drift.
Den næste kritiske trin er åbningen af brysthulen. Medianen sternotomi repræsenterer en høj risiko manøvre forsinke inddrivelsen af dyrene. Den laterale venstre indsnit indebærer opskæring af 2-3 ribber 15
Ligaturen selv repræsenterer det mest kritiske trin. Den venstre nedadgående kranspulsåre er svært at visualiseres, og ofte skal bindes uden visning. Derfor er nogle anatomiske referencepunkter påpeget at hjælpe kirurgen at udføre den korrekte ligering. Til den kroniske infarkt model er ligaturen placeret i midten af den ventrale side af hjertet, mellem øremuslingen og toppunktet, over slutningen af den større forreste vene (figur 2B). Effektiviteten kan controlled ved at visualisere udseendet af grå farve i de berørte områder. Hvis infarktområdet vises anterior og omfatter ikke den posteriore væg, kan en ny sutur placeres til venstre for den første sutur. Det vigtigste roden af LAD er altid synlig under auricle 18, og derfor ikke giver anledning til alvorlige problemer med at afsløre denne del. Imidlertid øremuslingen viser den store risiko for blødning og skal håndteres forsigtigt.
Proceduren er begrænset af tilstedeværelsen af passende udstyr. En ventilator og passende anæstesi system til små dyr er dyre og kræver forbindelser til gas og ventilationssystem af værelset. Endvidere er det nødvendigt i den første uge en nøje overvågning af dyrene efter procedure til påvisning af eventuel klinisk. For at undersøge hjertefunktionen under forsøget, er høj opløsning ultralyd, kompleks Langendorf perfusion-systemet, eller små intraventrikulære kateter målinger kræves, invOlving høje omkostninger og yderligere ekspertise.
I betragtning af den myokardieinfarkt, er der ingen alternative metoder til rådighed til at reproducere kompleksiteten af begivenhederne i vitro. Afhængig interessepunktet, ex vivo perfusion af en isoleret hjerte i Langendorff system giver oplysninger om kontraktilitet, hjertefunktion og myokardie levedygtighed som reaktion på forskellige stimuli eller narkotika. Udelukker dog alle interferenser af blodkomponenter og immunsystemet, og det er ikke indiceret til lange-studier af remodeling og helbredelse efter myokardieinfarkt.
Efter udførelse af myokardie procedure infarkt, kan alle andre funktionelle analyse skal gennemføres, ligesom intraventrikulære trykmålinger, ultralyd (små dyr ultralyd-systemer), eller isoleret hjerte Langendorff-perfusion. Desuden kan alle biologiske og molekylær analyse udføres for at identificere celler, proteiner, mRNA'er microRNA'er, geian eller andre biomarkører, der kan anvendes som terapeutiske mål at udvikle nye behandlingsstrategier for myokardieinfarkt.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Stereomicroscope | Olympus | SZ/X9 | |
| Mouse ventilator | Harvard Apparatus | 730043 | Model Minient 845 |
| Dual Anesthesia System (Tabletop Version) | Harvard Apparatus | Selfcontained isofluranebased anesthesia unit for use on lab tables, with a compact 8" x 11" footprint. | |
| Intubation cannula | Harvard Apparatus | 732737 | |
| Forceps | FST, Germany | 9119700 | standard tip curved 0.17 mm x 0.1 mm |
| Scissors | FST, Germany | 9146011 | straight |
| Vannas scissor | Aesculap, Germany | OC 498 R | |
| Retractors | FST, Germany | 1820010 | 2.5mm wide |
| Retractors | FST, Germany | 1820011 | 5 mm wide |
| Wire handles | FST, Germany | 1820005 | 10 cm |
| Wire handles | FST, Germany | 1820006 | 14 cm |
| Ketamine 10% | CEVA, Germany | ||
| Xylazine 2% | Medistar, Germany | ||
| Bepanthene eye and nose cream | Bayer, Germany | ||
| Silicon tube | IFK Isofluor, Germany | custommade product | diameter 500 µm |
| section thickness 100 µm | |||
| polytetrafluorethylene catheter | |||
| PROLENE Suture 6/0 | ETHICON | 8707H | polypropylene monofilament suture, unresorbable, needle CC1, 13 mm, 3/8 Circle |
| 7/0 Silk | Seraflex | IC 1005171Z | |
| Ultrasound | Vevo, Canada | 770 Vevo |
References
- Liehn, E. A., Postea, O., Curaj, A., Marx, N. Repair after myocardial infarction, between fantasy and reality: the role of chemokines. J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2357-2362 (2011).
- Liehn, E. A., Radu, E., Schuh, A. Chemokine contribution in stem cell engraftment into the infarcted myocardium. Curr Stem Cell Res Ther. 8 (4), 278-283 (2013).
- Alexander, S., et al. Repetitive transplantation of different cell types sequentially improves heart function after infarction. J Cell Mol Med. 16 (7), 1640-1647 (2012).
- Liehn, E. A., et al. Compartmentalized protective and detrimental effects of endogenous macrophage migration-inhibitory factor mediated by CXCR2 in a mouse model of myocardial ischemia/reperfusion. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (9), 2180-2186 (2013).
- Liehn, E. A., et al. Ccr1 deficiency reduces inflammatory remodelling and preserves left ventricular function after myocardial infarction. J Cell Mol Med. 12 (2), 496-506 (2008).
- Liehn, E. A., et al. A new monocyte chemotactic protein-1/chemokine CC motif ligand-2 competitor limiting neointima formation and myocardial ischemia/reperfusion injury in mice. J Am Coll Cardiol. 56 (22), 1847-1857 (2010).
- Liehn, E. A., et al. Double-edged role of the CXCL12/CXCR4 axis in experimental myocardial infarction. J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2415-2423 (2011).
- Oral, H., et al. CXC chemokine KC fails to induce neutrophil infiltration and neoangiogenesis in a mouse model of myocardial infarction. J Mol Cell Cardiol. 60, 1-7 (2013).
- Projahn, D., et al. Controlled intramyocardial release of engineered chemokines by biodegradable hydrogels as a treatment approach of myocardial infarction. J Cell Mol Med. 18 (5), 790-800 (2014).
- Schuh, A., et al. Novel insights into the mechanism of cell-based therapy after chronic myocardial infarction. Discoveries. 1 (2), e9 (2014).
- Schuh, A., et al. Effect of SDF-1 alpha on Endogenous Mobilized and Transplanted Stem Cells in Regeneration after Myocardial Infarction. Curr Pharm Des. 20 (12), 1964-1970 (2013).
- Zaragoza, C., et al.
- Kanzler, I., Liehn, E. A., Koenen, R. R., Weber, C. Anti-inflammatory therapeutic approaches to reduce acute atherosclerotic complications. Curr Pharm Biotechnol. 13 (1), 37-45 (2012).
- Liehn, E. A., Zernecke, A., Postea, O., Weber, C.
- Kolk, M. V. V., et al. LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction. J. Vis. Exp. (32), 1438 (2009).
- Ryu, J. H., et al. Implantation of bone marrow mononuclear cells using injectable fibrin matrix enhances neovascularization in infarcted myocardium. Biomaterials. 26 (3), 319-326 (2005).
- Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. N. Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix. J. Vis. Exp. (91), e51390 (2014).
- Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery. J. Vis. Exp. (86), e51329 (2014).
