Generierung von CAR T-Zellen für die adoptive Therapie im Kontext von Glioblastoma Standardtherapie

Katherine Riccione; Carter M. Suryadevara; David Snyder; Xiuyu Cui; John H. Sampson; Luis Sanchez-Perez

doi:10.3791/52397

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Methodenartikel

Generierung von CAR T-Zellen für die adoptive Therapie im Kontext von Glioblastoma Standardtherapie

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DOI:

10.3791/52397

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16. Februar 2015

Katherine Riccione¹^,² , Carter M. Suryadevara¹^,³ , David Snyder¹ , Xiuyu Cui¹ , John H. Sampson¹^,²^,³ , Luis Sanchez-Perez¹

¹Duke Brain Tumor Immunotherapy Program, Department of Neurosurgery, Duke University, ²Department of Biomedical Engineering, Duke University, ³Department of Pathology, Duke University

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Die lymphodepletiven und immunmodulatorischen Effekte von Chemotherapie und Bestrahlungsstandard können genutzt werden, um die Antitumorwirksamkeit der T-Zell-Immuntherapie zu verbessern. Wir skizzieren eine Methode zur Erzeugung von EGFRvIII-spezifischen chimären Antigenrezeptor (CAR) T-Zellen und deren Verabreichung im Rahmen der Glioblastom-Standardtherapie.

Zusammenfassung

Die adoptive T-Zell-Immuntherapie bietet eine vielversprechende Strategie, um maligne Gliome gezielt zu bekämpfen und zu eliminieren. T-Zellen können ex vivo so verändert werden, dass sie chimäre Antigenrezeptoren exprimieren, die spezifisch für Gliomantigene (CAR-T-Zellen) sind. Die Expansion und Funktion adoptiv übertragener CAR-T-Zellen kann durch die lymphodepletive und tumorizide Wirkung der Standard-Chemotherapie und Strahlentherapie potenziert werden. Wir beschreiben eine Methode zur Generierung von CAR-T-Zellen, die auf EGFRvIII, ein Gliom-spezifisches Antigen, abzielen, und bewerten ihre Wirksamkeit in Kombination mit einem Mausmodell der Glioblastom-Standardbehandlung. T-Zellen werden durch Transduktion mit einem retroviralen Vektor verändert, der das Anti-EGFRvIII-CAR-Gen enthält. Tumortragende Tiere werden einer Wirtskonditionierung durch eine Kur mit Temozolomid und Ganzhirnbestrahlung in Dosierungsschemata unterzogen, die dem klinischen Behandlungsstandard entsprechen. CAR-T-Zellen werden dann intravenös an geprimte Wirte abgegeben. Diese Methode kann verwendet werden, um die Antitumorwirksamkeit von CAR-T-Zellen im Rahmen der Standardtherapie zu bewerten.

Einleitung

Das Glioblastom (GBM) ist die häufigste primären bösartigen Gehirntumor und ist immer tödlich. Die chirurgische Resektion in Verbindung mit nicht-spezifischen Standardtherapie Chemotherapie und Strahlentherapie nicht vollständig zu beseitigen Krebszellen, was zu einer düstere Prognose von weniger als 15 Monaten bei Patienten mit dieser Krankheit ^ein. Im Gegensatz dazu bietet die Immuntherapie eine genaue Vorgehensweise für die gezielt Tumorzellen angreift und somit das Potenzial hat, als eine sehr effektive Behandlungsplattform mit reduzierten Risiko von Sicherheiten Toxizität ^2-4 dienen. T-Zellen entwickelt, ex vivo, um auszudrücken, c....