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Environment

विभिन्न खरपतवार प्रजाति में मजबूत शाक प्रतिरोध परीक्षण के लिए प्रोटोकॉल

Published: July 2, 2015 doi: 10.3791/52923

Introduction

Herbicides वैश्विक पौध संरक्षण बाजार 1 के ऊपर से 50% के लिए लेखांकन, सबसे बड़े पैमाने पर इस्तेमाल खरपतवार नियंत्रण के उपाय कर रहे हैं। वे श्रम प्रधान और समय लेने वाली मिट्टी की खेती प्रथाओं से बचने के लिए, और अंततः लागत प्रभावी, सुरक्षित और लाभदायक खाद्य उत्पादन 2 में परिणाम, अपेक्षाकृत सस्ते उपकरण हैं। हालांकि, एक साथ शाक उपयोग पर एक से अधिक निर्भरता के साथ कई खरपतवार प्रजातियों में महान फलाद्गमिकी और आनुवंशिक परिवर्तनशीलता वर्तमान, अक्सर शाक प्रतिरोधी खरपतवार आबादी के चयन में यह परिणाम है। एक बहुत ही विशिष्ट चयापचय लक्ष्य के साथ चयनात्मक herbicides के शुरूआत में 3-5 साल से अधिक प्रतिरोध के मामलों की संख्या में वृद्धि हुई है नाटकीय रूप से किया गया है। तिथि करने के लिए दुनिया भर में 240 खरपतवार प्रजातियों (140 डाइकोटों और 100 monocots) एक्शन (SOA) 4 के विभिन्न शाक ब्लॉग करने के लिए प्रतिरोध विकसित किया है। यह स्थायी फसल उत्पादन के लिए एक प्रमुख खरपतवार प्रबंधन के लिए चिंता का विषय है और सामान्य रूप से अधिक है।

अक्सर एक ग्रीन हाउस में प्रदर्शन विश्वसनीय परीक्षण पर आधारित e_content "> प्रतिरोध का जल्दी पता लगाने, शाक प्रतिरोधी मातम का प्रबंधन करने के लिए एक महत्वपूर्ण कदम है। अलग-अलग दृष्टिकोण के रूप में, उद्देश्य, शुद्धता, समय और उपलब्ध संसाधनों के अपेक्षित स्तर के हिसाब से विकसित किया गया है अच्छी तरह से 6-12 माना खरपतवार प्रजाति के रूप में। हालांकि, एक नया खरपतवार बायोटाइप के प्रतिरोध की स्थिति की पुष्टि (आवश्यक है जब यानी, एक से संबंधित एक या एक से अधिक herbicides के जीवित रहने की क्षमता सहित कई शारीरिक विशेषताओं का हिस्सा है कि व्यक्तियों का एक समूह है, सामान्य रूप से उन पर नियंत्रण होता है कि एक खुराक में इस्तेमाल किया विशेष समूह), एक मजबूत पूरे संयंत्र bioassay एक नियंत्रित वातावरण में 4, 11 में प्रदर्शन करने की जरूरत है।

एक बायोटाइप सिर्फ एक शाक को शायद ही कभी प्रतिरोधी है। प्रत्येक बायोटाइप इसलिए इसे करने के लिए प्रतिरोधी है herbicides के एक निश्चित प्रतिरोध पैटर्न, SOA के यानी, संख्या और प्रकार की विशेषता है, और किसी प्रतिरोध के द्वारा किया जाता हैप्रत्येक शाक से 13 के स्तर पर। पार या एकाधिक प्रतिरोध 5 के पैटर्न के प्रारंभिक और विश्वसनीय दृढ़ संकल्प, 14 क्षेत्र प्रतिरोध प्रबंधन के लिए महत्वपूर्ण है।

ऐसा लगता है कि शाक प्रतिरोध प्राकृतिक सहिष्णुता के साथ कुछ नहीं करना है उल्लेख के लायक है कि कुछ herbicides, जैसे, ACCase बाधा herbicides, एकबीजपत्री प्रजातियों बनाम 2,4-डी बनाम डाईकौट प्रजातियों, Equisetum arvense बनाम दिशा में कुछ घास प्रजाति प्रदर्शनी ग्लाइफोसेट।

इस पत्र में शाक (एस) द्वारा गरीब नियंत्रण सूचित किया गया था, जहां खेतों में नमूना ख्यात शाक प्रतिरोधी biotypes के परीक्षण के लिए एक मजबूत दृष्टिकोण प्रस्तुत करता है। शामिल खरपतवार प्रजातियों के संबंध में मानक प्रोटोकॉल के लिए संगत विकल्प प्रस्तुत कर रहे हैं। पेट्री डिश 8 में केवल एक ही शाक खुराक 15, या इलाज के बीज का उपयोग कर या तो पूरे संयंत्र bioassays पर आधारित वैकल्पिक तकनीकों / प्रोटोकॉल पर लाभ उच्च reliab के लिए संबंधित हैंility और क्योंकि प्रयोगों में दो शाक खुराक के शामिल किए जाने के प्रतिरोध स्तर inferring की संभावना है। हालांकि, नियमित प्रतिरोध परीक्षण के लिए, एक ही तरीके ताकि लागत को कम करने, केवल एक शाक खुराक पर लागू किया जा सकता है।

के रूप में अच्छी तरह से प्रतिरोध की स्थिति की पुष्टि के लिए अनुमति देता है, के रूप में प्राप्त जानकारी के दोनों निम्न अनुसंधान चरणों के अनुकूलन और / या ध्वनि प्रतिरोध प्रबंधन रणनीति तैयार करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।

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Protocol

1. बीज का नमूना लेना है और संग्रहण

  1. प्रतिकूल जलवायु परिस्थितियों या कम गुणवत्ता शाक उपचार की वजह से नहीं यानी अनुचित गरीब शाक प्रदर्शन के लिए खेती क्षेत्रों, मॉनिटर।
  2. एक समय में एक प्रजाति से एक बीज का नमूना इकट्ठा करने और एक अद्वितीय कोड आवंटित। परिपक्व बीज आमतौर पर शाक उपचार (ओं) बच गया था कि पौधों से फसल कटाई से पहले एकत्र कर रहे हैं। बीज जब माँ संयंत्र से परिपक्व बहा रहे हैं, अगर समय पर निगरानी के निरीक्षण करने के लिए।
  3. प्रजातियों, संग्रह तारीख, जीपीएस निर्देशांक, नगर पालिका, किसान का नाम, क्षेत्र आकार, infestation के स्तर, फसल, शाक (एस) के मौसम के दौरान इस्तेमाल किया और क्षेत्र के ऐतिहासिक अभिलेखों की सौंपा अद्वितीय कोड, नाम का संकेत प्रत्येक नमूने के लिए एक फार्म भरें ।
  4. क्षेत्र infestation के प्रतिनिधि कर रहे हैं कि कम से कम 30 बेतरतीब ढंग से चुनी पौधों से बीज ले लीजिए। बीज का नमूना कम से कम 5,000 परिपक्व बीज शामिल हैं सुनिश्चित करें। एक लाचार outcrossing खरपतवार प्रजातियों के लिए(जैसे, Lolium एसपीपी। या Amaranthus एसपीपी।), 5000 11 के आसपास के बीज की कुल संख्या रखते हुए 10-15 के लिए पौधों की संख्या कम हो।
  5. मातम के पैच (एक हेक्टेयर से अधिक) बहुत बड़े क्षेत्र में फैले हुए हैं के रूप में यदि विभिन्न शाक प्रतिरोधी biotypes चयन कर रहे हैं क्षेत्र के उप-नमूना।
  6. सौंपा अद्वितीय कोड के साथ लेबल unsealed पेपर बैग में स्टोर बीज।
  7. नमी लुप्त हो जाना है, लेकिन माध्यमिक निद्रा के शामिल होने से बचने के लिए उच्च तापमान (यानी, सूर्य के तहत एक कार में उन्हें छोड़ने बचने के लिए) करने के लिए या अत्यधिक तापमान के उतार चढ़ाव के बीज का खुलासा नहीं करते अनुमति दें।
  8. (फूस, डे-पतवार के बीज, आदि निकालने के लिए) और एक सूखी कमरे में परिवेश के तापमान पर उन्हें स्टोर साफ। पहला प्रतिरोध परीक्षण करने के बाद, निर्वात सील प्लास्टिक की थैलियों में अधिमानतः, 4 डिग्री सेल्सियस पर एक अंधेरे कमरे में समय की लंबी अवधि के लिए बीज की दुकान। इस तरह के बीज में एक काफी लंबे समय के लिए उनकी व्यवहार्यता रक्षा करता है।

नोट: बीज निद्रा अनुकूल है और कृषि पारिस्थितिकी प्रणालियों में जारी रहती है मातम सक्षम बनाता है एक लचीला और कुशल तंत्र प्रदान करता है। बीज अंकुरण निद्रा तोड़ने के लिए और अनुमति देने के लिए, अलग प्रोटोकॉल यानी खरपतवार प्रजातियों, निद्रा 16 के प्रकार के आधार पर किया जाना है।
निद्रा को दूर करने के लिए तीन मुख्य तरीके हैं:

  1. Vernalization
    नोट:। उदाहरण के लिए, Amaranthus retroflexus, Chenopodium एल्बम, Lolium एसपीपी, Avena fatua, Polygonum persicaria: एक साथ अंकुरण और अंकुर उद्भव, एक सप्ताह के लिए कुछ दिनों से लेकर बीज vernalization की अवधि प्राप्त करने के लिए कई प्रजातियों से शारीरिक निद्रा को दूर करने के लिए आवश्यक है , phalaris 17-19 paradoxa। अप करने के लिए 15 दिनों की एक लंबी अवधि Schoenoplectus mucronatus के लिए साइन अप करने के लिए 30 दिनों के Papaver rhoeas, Cyperus difformis और Ammania कोक्किनिया के लिए आवश्यक है और
  2. प्लास्टिक के बर्तन में कुछ विआयनीकृत पानी डाल दिया। किसी भी अतिरिक्त निकालने के लिए, फिल्टर पेपर की दो परतों में कटौती और उन्हें पानी में भिगो दें। कागज पर हवा सूखे बीज रखें। समय के लिए आवश्यक अवधि के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर एक फ्रिज के लिए प्लास्टिक के बर्तन स्थानांतरण।
  • प्रच्छान
    नोट: कुछ घास प्रजाति के कारण यांत्रिक निद्रा, यानी बीज कोट विशेषताओं के लिए दूसरों की तुलना में अंकुरण के लिए और अधिक अड़ियल हैं, और 21 उगना सल्फ्यूरिक एसिड का उपयोग एक रासायनिक प्रच्छान के उपयोग की जरूरत है।
    1. केंद्रित सल्फ्यूरिक एसिड (95-98%) के साथ एक बीकर तैयार करें। पानी से भरा बीकर तैयार करें। गैर बुने हुए कपड़े के एक लिफाफे में बीज डाल दिया।
    2. केंद्रित सल्फ्यूरिक एसिड में क्रमश: 20 मिनट या 5 मिनट, उदाहरण के लिए, Echinochloa एसपीपी। या चारा halepense बीज लेना।
    3. चिमटी की एक जोड़ी का उपयोग बीकर के बाहर लिफाफा ले और पानी से भरा बीकर में डाल दिया। खोलेंलिफाफा, एक छोटे से कोलंडर में बीज डाल दिया है और अच्छी तरह से पानी चलाने के अंतर्गत कुल्ला।
    संस्करण: ए Plantago-Aquatica एक अलग प्रोटोकॉल की जरूरत है 22, 23
    1. क्लोरोफॉर्म में 2 मिनट के लिए बीज लेना। विआयनीकृत पानी के साथ बीज कुल्ला और शोषक कागज के साथ उन्हें सूखी। 5 मिनट के लिए 80% सल्फ्यूरिक एसिड में बीज डुबो देना।
    2. एक छोटे से कोलंडर में बीज डाल दिया और अच्छी तरह से पानी चलाने के अंतर्गत कुल्ला।
  • पोस्ट-फसल बीज परिपक्वता
    नोट: अन्य खरपतवार प्रजाति के बीज की परवाह किए बिना निद्रा को तोड़ने के लिए इस्तेमाल किया विधि की परिपक्वता के बाद कुछ महीनों के लिए बिल्कुल भी उगना नहीं है।
    1. आर टी और कम नमी में कम से कम 3-4 महीने की अवधि के लिए बीज की दुकान और फिर निद्रा तोड़कर (जैसे, Oryza का पौधा वर। Sylvatica या पी rhoeas) के लिए ऊपर प्रोटोकॉल का पालन करें।
  • 3. बीज अंकुरण

    1. प्लेस के बीज Plas में अंकुरित होने के लिए0.1% पोटेशियम नाइट्रेट (KNO 3) के साथ 0.6% (एम / वी) अगर युक्त घरेलू बर्तन कहा:
      1. विआयनीकृत पानी का उपयोग कर 0.6% 0.1% KNO 3 पर अगर की एक समाधान तैयार है। एक माइक्रोवेव ओवन में अगर भंग।
      2. प्लास्टिक के बर्तन में अगर समाधान डालो। सब्सट्रेट और फिर शांत बीज में डाल दिया।
      संस्करण: मिट्टी भी प्लास्टिक के बर्तन में एक सब्सट्रेट के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। इस अभ्यास Echinochloa एसपीपी के लिए विशेष रूप से कुशल है।, एस halepense और Lolium एसपीपी।
    2. प्रत्येक खरपतवार प्रजातियों के लिए इष्टतम स्थितियों के आधार पर प्रकाश और तापमान की स्थिति के बारे में एक सप्ताह के लिए एक अंकुरण कैबिनेट में प्लास्टिक के बर्तन रखें। सबसे सर्दियों प्रजातियों के लिए, तापमान रेंज 15/25 डिग्री सेल्सियस रात / दिन और 15-30 μmol एम -2 सेकंड -1 के एक संश्लेषक फोटॉन प्रवाह घनत्व (PPFD) प्रदान नीयन ट्यूब के साथ 12 घंटा photoperiod है। कई गर्मियों प्रजातियों के लिए, तापमान रेंज 15/30 डिग्री सेल्सियस रात / दिन है।
      संस्करण: एसइस तरह के एस के रूप में ome प्रजातियों, halepense, एक गर्मी उपचार की जरूरत है। एस की इसलिए प्रच्छान के बाद, बीज सामान्य परिस्थितियों में तो तीन दिनों के अंकुरण के मंत्रिमंडल में तीन दिनों के लिए 24 डिग्री सेल्सियस से 45 डिग्री सेल्सियस और 20 घंटा में 4 घंटे के चक्र, और: halepense निम्नलिखित शर्तों के अधीन हैं।

    4. अंकुर रोपाई और विकास

    1. प्रत्यारोपण के लिए एक मानक potting के मिश्रण के साथ भरी प्लास्टिक की ट्रे (325 X 265 X 95 मिमी) में पंद्रह को बीस के अंकुर (60% silty दोमट मिट्टी, 15% रेत, 15% agriperlite और 10% पीट - मात्रा से)।
      नोट: रोपाई, बजाय बोवाई की, शाक उपचार के प्रदर्शन का अनुकूलन करने के लिए एक महत्वपूर्ण पूर्व शर्त है, जो एक ही विकास के चरण में पौधों की एक समान स्टैंड प्राप्त किया जा करने के लिए अनुमति देता है।
    2. संख्या और प्रगतिशील ट्रे संख्या को दोहराने, जनसंख्या कोड, शाक परीक्षण किया जा रहा <: विशिष्ट पहचान के लिए सभी जानकारी सहित एक बारकोड के साथ प्रत्येक ट्रे को पहचानें।/ ली>
    3. पर या मैदान की क्षमता के पास सब्सट्रेट बनाए रखने के लिए जरूरत के रूप में एक गर्म ग्रीनहाउस और पानी पौधों में रखें ट्रे।
      नोट: विकास तापमान खरपतवार प्रजातियों पर निर्भर करता है। अक्सर परीक्षण शरद ऋतु / सर्दियों / वसंत के दौरान किया जाता है, तो प्रकाश के बारे में 150 μmol एम -2 सेकंड के एक PPFD प्रदान जो 400 डब्ल्यू धातु halide लैंप, -1 और एक 12 घंटा photoperiod 24, 19। ग्रीष्मकालीन खरपतवार प्रजातियों के साथ प्रयोग करने के पूरक है सी 4 संश्लेषक चक्र आम तौर पर उच्च प्रकाश की तीव्रता की आवश्यकता होती है और इसलिए परीक्षण देर से वसंत गर्मियों में किया या पूरक प्रकाश की तीव्रता के बारे में 400 μmol एम -2 सेकंड -1 एक 14 घंटा photoperiod के साथ कर रहे हैं।
    4. धान चावल, जैसे, ए infesting कुछ घास प्रजाति के लिए एक अलग प्रोटोकॉल का उपयोग Plantago-Aquatica, एस mucronatus और सी 22 में वर्णित के रूप में difformis।
      1. 24 दौर कोशिकाओं (55 मिमी व्यास, 64 मिमी गहरी) fil के साथ polystyrene के ट्रे में अंकुरों प्रत्यारोपण60% silty दोमट मिट्टी, 30% रेत और (मात्रा से) 10% पीट के साथ नेतृत्व किया।
      2. 12 सेमी में ट्रे गहरी प्लास्टिक के कंटेनर पानी से भरा है और उन्हें (चित्रा 1) अस्थायी रोकने के लिए दबाव डाला स्टेनलेस स्टील की छड़ से नीचे battened सेट करें।
      3. मिट्टी की सतह के स्तर के नीचे 1-2 सेमी पर कंटेनरों में पानी के स्तर को बनाए रखने और शैवाल के प्रसार से बचने के लिए (पानी की 10-12 एल शामिल है) प्रत्येक कंटेनर के लिए तांबे सल्फेट के 1.5 ग्राम जोड़ें।

    5. शाक उपचार

    1. पूर्व उभार herbicides के साथ उपचार:
      1. अंकुरण कैबिनेट में लगभग तीन दिनों के खंड 3 में वर्णित के रूप में करने के बाद, ऊपर वर्णित सब्सट्रेट युक्त प्लास्टिक की ट्रे में अंकुरित बीज प्रत्यारोपण और मिट्टी की एक परत (लगभग 1 सेमी) के साथ कवर किया। इस अंकुरों शाक प्रभाव के बजाय एक अत्यधिक दफन गहराई की वजह से उभरने नहीं होगा कि यह सुनिश्चित करने के क्रम में एक महत्वपूर्ण कदम है।
      2. क्षेत्र उत्पादन क्षमता को सब्सट्रेट ले लोपानी से भरी तश्तरी पर, तल पर कुछ छेद है जो ट्रे, रखकर शहर।
      3. एक दिन की रोपाई के बाद, पूर्व उद्भव शाक 25 के साथ ट्रे का इलाज।
      4. तश्तरी से कपिलैरिटि से ऊपर और नीचे से दोनों की जरूरत के रूप में पानी जोड़कर पर सब्सट्रेट या निकट क्षेत्र क्षमता रखें। यह प्रक्रिया एक अच्छा उपचार प्रभावकारिता के लिए (यानी, अंकुरित बीज होते हैं जहाँ) उचित गहराई में शाक के स्थायित्व के पक्ष में है।
    2. बाद के उद्भव herbicides के साथ उपचार:
      1. वे 2-3 पत्ती मंच तक पहुँचने जब ​​पौधों स्प्रे (यानी, विकास मंच विस्तारित BBCH वृद्धि पैमाने 26 के 12-13)।
      2. उपचार के बाद दिन से शुरू, घास प्रजाति के पानी की जरूरतों और Echinochloa एसपीपी के लिए मौसम (उदाहरण के लिए, के अनुसार सिंचाई प्रणाली की स्थापना की। यह 9 को 9 बजे से नियमित अंतराल पर 3 मिनट के लिए प्रति दिन 4 बार पानी उद्धार प्रधानमंत्री)। जल जिले हैएक स्वत: फव्वारा सिंचाई प्रणाली का उपयोग कर tributed।
        संस्करण: ग्लाइफोसेट संयंत्र चरण BBCH 14-21 में लागू किया जाता है।
    3. शाक तैयारी और वितरण।
      नोट: (पूर्व और बाद के उद्भव) सभी herbicides, दो खुराक में सिफारिश की surfactants के साथ वाणिज्यिक योगों के रूप में लागू कर रहे हैं सिफारिश क्षेत्र खुराक (1x) और तीन बार (3x) है।
      1. यदि आवश्यक हो, लेबल के निर्देशों के अनुसार थोक में surfactant समाधान तैयार करते हैं; अंतिम एकाग्रता आमतौर पर अंतिम मात्रा का एक प्रतिशत (उदाहरण के लिए, 0.3%) के रूप में व्यक्त किया जाता है या मात्रा के रूप में इकाई क्षेत्र (जैसे, 1 एल हा -1) के अनुसार वितरित किया जाना है।
      2. सक्रिय संघटक का सही एकाग्रता रखने के क्रम में शाक (घुला हुआ पदार्थ) समाधान के लिए विलायक के रूप में surfactant समाधान का उपयोग करें। पहला सबसे केंद्रित शाक समाधान तैयार (3x)। वाणिज्यिक उत्पाद की मात्रा surfactant समाधान में भंग (या एक अगर विआयनीकृत पानी में होने की गणनापृष्ठसक्रियाकारक निम्न समीकरण का उपयोग) आवश्यक नहीं है:
        खुराक जड़ी बूटी = [(खुराक क्षेत्र एक्स खुराक अधिकतम) एक्स वी फिन] / वी डेल
        कहां है: खुराक जड़ी बूटी = शाक खुराक (माले), खुराक क्षेत्र = शाक क्षेत्र खुराक (हा मिलीलीटर -1), खुराक अधिकतम = अधिकतम खुराक दिया, वी पंख = समाधान (एल) के अंतिम मात्रा, वी डेल द्वारा वितरित मात्रा = बेंच स्प्रेयर (एल हा -1)।
      3. कम केंद्रित एक (1x) तैयार करने के लिए: (1, वी / वी 2) शाक समाधान 3x पतला। यह प्रक्रिया वजन या herbicides pipetting जब गलतियों को बनाने का मौका कम कर देता है। मात्रा इकाई क्षेत्र (एल हा -1) के अनुसार वितरित किया जा करने के लिए के रूप में शाक समाधान एकाग्रता व्यक्त किया है।
      4. कम शाक खुराक (1x) के साथ इलाज के अनुक्रम प्रारंभ करें। इस रास्ते में ही शाक के साथ दो उपचार के बीच छिड़काव कैबिनेट धोने के लिए कोई जरूरत नहीं है।
      5. शाक solutio वितरितएन तीन फ्लैट प्रशंसक (विस्तारित रेंज) हाइड्रोलिक नलिका से लैस एक उछाल के साथ 215 किलो पास्कल के दबाव में 300 एल हा -1 (± 1%), वितरित एक सटीक बेंच स्प्रेयर, और 0.75 मीटर सेकंड -1 की रफ्तार का उपयोग करते हुए ।
      6. शाक ब्लीच 1% का उपयोग बदल रहा है जब दो बार छिड़काव कैबिनेट वाश (वी / वी) और फिर कुल्ला।
        संस्करण: ग्लाइफोसेट 200 एल हा -1 27 की एक स्प्रे की मात्रा के साथ लागू किया जाता है।
        नोट: विशेष रूप से ध्यान अत्यधिक जैविक herbicides, ऐसे सल्फोनिलयूरिया sulfometuron या flazasulfuron, उपयोग किया जाता है जब भुगतान किया जाना है। उत्तरार्द्ध मामले में अमोनिया के साथ एक एक ब्लीच समाधान के साथ कपड़े धोने और एक अन्य करना (2.5% वी / वी), पानी के साथ एक सावधान कुल्ला द्वारा पीछा किया।

    6. संग्रह और डेटा का विश्लेषण

    1. स्वचालित रूप से प्रत्येक ट्रे को दिखाता है, जो एक बारकोड पाठक, के माध्यम से, उपचार के रूप में अच्छी तरह से दृश्य अनुमानित बायोमास (VEB) बच गया है कि पौधों की संख्या रिकॉर्ड है। पौधे गधे हैंवे चाहे रंग या अन्य उपस्थिति का कोई सक्रिय विकास दिखाने अगर मृत होने के रूप में essed।
      1. परीक्षण किया herbicides के आधार पर तीन या चार हफ्तों उपचार (वाट) के बाद मूल्यांकन करें (उदाहरण के लिए, ACCase अवरोधकों के लिए तीन वाट और ए एल एस inhibitors या ग्लाइफोसेट के लिए चार वाट)।
      2. यानी एक अतिसंवेदनशील आबादी (एस) की जाँच करें सभी प्रयोगों में, कभी नहीं या शायद ही कभी herbicides के साथ इलाज किया गया था, जो एक साइट में एकत्र आबादी के शामिल करके सामान्य उपचार प्रभावकारिता का मूल्यांकन करें।
      3. इलाज किया पौधों की संख्या के प्रतिशत के रूप में एक्सप्रेस संयंत्र अस्तित्व, (दो प्रतिकृति के मूल्य मतलब है) बस शाक इलाज से पहले गिना, और मतलब मूल्य प्रति मानक त्रुटि (एसई) की गणना।
      4. व्यवहार किया और एक ही जनसंख्या 25, 28 की जांच-इलाज नहीं के बीच VEB बायोमास संयंत्र के एक दृश्य तुलना के माध्यम से प्राप्त किया जाता है। एक स्कोर 0, (न इलाज की जांच के साथ तुलना में) शाक से प्रभावित नहीं संयंत्रों के लिए 10 से लेकर कबपौधों स्पष्ट रूप से मर चुके हैं, प्रत्येक में इलाज ट्रे को दिया जाता है।
    2. एस बचे तुलना में अधिक जब शाक खुराक 1x, अनुसंधान में 20% से 5% से लेकर जब पौधों की कम से कम 5% शाक खुराक 1x, एसआर बच गया जब: दो शाक खुराक के साथ उपचार से प्राप्त परिणामों के आधार पर चार श्रेणियों को मानो आबादी बचे शाक खुराक 1x पर 20% से अधिक और शाक खुराक 3x 17 में 10% से अधिक कर रहे हैं, जब पौधों की 20% शाक खुराक 1x और आरआर बच गई।

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    Representative Results

    एक ख्यात प्रतिरोधी आबादी के प्रतिरोध की स्थिति का आकलन करने के लिए, यह शाक प्रभावकारिता को सत्यापित करने के क्रम में परख में एक अतिसंवेदनशील की जांच में शामिल करने के लिए मौलिक है। पी पर आयोजित एक स्क्रीनिंग परीक्षा के परिणाम rhoeas आबादी, गेहूं के खेतों infesting एक घास, एक अतिसंवेदनशील जांच (09-36) पर और संदिग्ध प्रतिरोधी एक (10-91) पर चार पद के उभार herbicides के प्रभावकारिता प्रस्तुत कर रहे हैं, जहां चित्रा 2, में रिपोर्ट कर रहे हैं। जनसंख्या 09-36 पूरी तरह से केवल एक संयंत्र, florasulam और tribenuron मिथाइल (चित्रा 2) का परीक्षण अन्य दो ए एल एस herbicides के खुराक 1x बच गया, जबकि iodosulfuron अवरोध करनेवाला ए एल एस द्वारा नियंत्रित किया गया। इसके बजाय, जनसंख्या 10-91 के पौधों की लगभग 60% iodosulfuron और tribenuron मिथाइल के दोनों शाक खुराक बच गया और लगभग 50% florasulam की 1x खुराक बच गई। इन परिणामों की आबादी 10-91 iodosulfuron और tribenuron मिथाइल और प्रतिरोधी करने के लिए (आरआर) उच्च प्रतिरोधी है कि इस बात की पुष्टि(आर) florasulam करने के लिए। एक अलग प्रतिक्रिया 2,4-डी, एक अलग SOA (यानी, यह अंतर्जात auxin mimics) होने के एक शाक के साथ मनाया गया, व्यापक रूप से गेहूं में डाईकौट मातम नियंत्रित करने के लिए प्रयोग किया जाता है। एस की जांच के पौधों की केवल 33% खुराक 1x पर इस शाक के साथ मारे गए और VEB मूल्य> 20% (चित्रा 2) था। जनसंख्या 10-91 इस शाक या नहीं करने के लिए प्रतिरोधी है की जाँच की आबादी पर प्रभावकारिता की कमी की पुष्टि नहीं करता। इस मामले में यह फिर से प्रयोग करने की सिफारिश की है और परिणामों की पुष्टि कर रहे हैं, की आबादी को बदलने के लिए। अतिसंवेदनशील की जांच का अच्छा नियंत्रण का एक उदाहरण चित्रा 3 में सूचना दी है। Echinochloa एसपीपी। जनसंख्या 07-16L पूरी तरह से सिफारिश क्षेत्र खुराक (1x) में सभी herbicides के द्वारा नियंत्रित किया गया। इस मामले में, यह आबादी 08-42 यानी, azimsulfuron, bispyribac-ना, imazamox और penoxsulam, सभी परीक्षण ए एल एस अवरोधकों को अत्यधिक पार प्रतिरोधी है कि राज्य के लिए संभव है। इलाज नहीं CHदोनों आबादी के Eck छोड़ दिया पर सूचना दी है। इन पौधों को VEB गणना करने के लिए उपयोग किया जाता है; बायोमास की राशि नेत्रहीन नहीं इलाज की जांच करने के लिए 10 के स्कोर दे ट्रे द्वारा ट्रे का अनुमान है और बायोमास से इलाज नहीं के बराबर है, जब फिर 10 के लिए, किसी भी हरे पौधे ऊतक के बिना दोहराने के लिए, 0 से एक स्कोर बताए है (चित्रा 3) की जाँच करें।

    उत्पादन का एक और उदाहरण चित्रा 4, Lolium एसपीपी का जहां संयंत्र अस्तित्व में सूचना दी है। ग्लाइफोसेट करने के लिए दिखाया गया है। ग्लाइफोसेट अलग चयन दबाव है, जहां जांच की आबादी गेहूं आधारित फसल प्रणाली में एकत्र किए गए थे (यानी, प्रति वर्ष कभी-कभी या 1-2 उपचार या प्रति वर्ष 3-अधिक बार)। कि विकास सेंट पर वार्षिक मातम (यानी, therophytes) के लिए न्यूनतम और अधिकतम सिफारिश की खुराक क्षेत्र का प्रतिनिधित्व करते हैं, जो 480 और 1440 जी AE हा -1,: पौधे दो ग्लाइफोसेट की खुराक का उपयोग कर जल्दी tillering चरण में (BBCH 14-21) छिड़काव किया गयाउम्र। डाटा उपचार के बाद चार सप्ताह एकत्र किए गए थे। दोनों प्रयोगों के आधार पर जांच की आबादी का सात एक अस्तित्व लागू किया सबसे कम खुराक पर 80% या उससे अधिक (आबादी 343, 383, 384, 403, 509, 512 और 537) की दर लेकिन आबादी 403 के पौधों की केवल 50% थी और 509 उच्चतम ग्लाइफोसेट खुराक बच गई। जनसंख्या 509 की बस कुछ ही पौधों की न्यूनतम खुराक बच गया और जनसंख्या 508 पूरी तरह से किसी भी मात्रा में नियंत्रित किया गया था, जबकि एक जनसंख्या, 1x खुराक पर लगभग 40% की जीवित रहने की दर थी। सारांश में, इन प्रयोगों अक्सर शाक के उपयोग के क्षेत्र इतिहास परिलक्षित कि ग्लाइफोसेट के लिए प्रतिरोध के विभिन्न स्तरों से पता चला है। ग्लाइफोसेट प्रतिरोध का स्तर और अधिक तीव्रता से इलाज किया गया था कि आबादी के लिए अधिक था: यानी, चयन दबाव के वर्षों के लिए प्रति वर्ष क्षेत्र आवेदनों की संख्या और संख्या अधिक थी।

    एक शाक (चित्रा 4) के लिए वर्णित प्रोटोकॉल diffe के होने के कई अन्य लोगों के लिए लागू किया जा सकता हैSOA किराए; इस तरह से एक या एक से अधिक आबादी के प्रतिरोध पैटर्न निर्धारित किया जा सकता है। Echinochloa एसपीपी का प्रतिरोध पैटर्न परिवर्तनशीलता का एक उदाहरण है। आबादी 1 टेबल में सूचना दी है। शाक का उपयोग करें और किसान से प्राप्त फसल प्रबंधन के ऐतिहासिक रिकॉर्ड ए एल एस बाधा herbicides के चयन एजेंट (यानी, penoxsulam या imazamox) थे कि संकेत दिया। प्रतिरोध परीक्षण इसलिए तीन ए एल एस बाधा herbicides (azimsulfuron, penoxsulam और imazamox) विभिन्न रासायनिक परिवारों से संबंधित है, और किसी अन्य SOA, ACCase बाधा शाक profoxydim होने के एक शाक के साथ प्रदर्शन किया गया था। अतिसंवेदनशील जांच (07-16L) पूरी तरह से परीक्षण सभी herbicides (तालिका 1) के द्वारा नियंत्रित किया गया था। तीन प्रतिरोध पैटर्न का पता लगाया गया: तेरह आबादी केवल ए एल एस अवरोधकों के लिए प्रतिरोधी होने के रूप में हुई, चार आबादी केवल ACCase अवरोध करनेवाला profoxydim के लिए प्रतिरोधी होने के रूप में हुई है, और तीन आबादी एक बहु से पता चला ACCase अवरोध करनेवाला profoxydim और ए एल एस अवरोधकों दोनों के लिए प्रतिरोध पैटर्न। प्रत्येक प्रतिरोध पैटर्न के भीतर यह ए एल एस अवरोधकों के लिए प्रतिरोधी चार आबादी बहु-प्रतिरोधी आबादी के दो ए एल एस अवरोध करनेवाला azimsulfuron साथ ही इलाज से बच गया जबकि सुल्फोनीलयूरिया azimsulfuron साथ ही उपचार बच गया लेकिन काफी penoxsulam द्वारा नियंत्रित कर रहे थे और जैसे, विभिन्न biotypes, भेद करने के लिए संभव है imazamox।

    चित्र 1
    सी 1. उदाहरण चित्रा difformis, धान चावल infesting एक घास प्रजाति, प्रयोग सेट-अप। Polystyrene ट्रे प्लास्टिक के कंटेनर में डाल दिया और अस्थायी उन्हें रोकने के लिए दबाव डाला स्टेनलेस स्टील की छड़ से अवरुद्ध कर रहे हैं। जल धान चावल शर्तों को नकल करने के लिए मिट्टी की सतह के स्तर के नीचे 1-2 सेमी पर बनाए रखा है। तस्वीर उपचार के बाद चार सप्ताह लिया गया था।p_upload / 52,923 / 52923fig1large.jpg "लक्ष्य =" _blank "> इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

    चित्र 2
    दो पी चित्रा 2. रिस्पांस rhoeas आबादी पोस्ट-उद्भव के लिए herbicides। iodosulfuron, tribenuron, florasulam और 2,4-डी का प्रभाव सिफारिश क्षेत्र खुराक (1x) पर परीक्षण किया और तीन बार में है कि संयंत्र अस्तित्व (नीले सलाखों) और दृश्य आकलन बायोमास पर (3x) ( VEB; अतिसंवेदनशील जांच (09-36 के लाल बार)) और एक प्रतिरोधी जनसंख्या (10-91) के। आकलन चार सप्ताह शाक उपचार के बाद किया गया था। संयंत्र अस्तित्व और VEB इलाज किया पौधों की संख्या और न इलाज की जाँच के VEB (%) के प्रतिशत के रूप में व्यक्त कर रहे हैं। संयंत्र के अस्तित्व के 20% से कम क्षैतिज रेखा पौधों खुराक 1x पर इलाज कर रहे हैं जब प्रतिरोधी और अतिसंवेदनशील आबादी के बीच भेदभाव दहलीज प्रतिनिधित्व करता है। कार्यक्षेत्र सलाखोंदो प्रतिकृति का मतलब मूल्य पर गणना मानक त्रुटियों का प्रतिनिधित्व करते हैं। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

    चित्र तीन
    दो Echinochloa एसपीपी पर एक स्क्रीनिंग 3. दृश्य परिणाम चित्रा। आबादी। अतिसंवेदनशील की जांच करने, 07-16L (एस), और प्रतिरोधी आबादी, 08-42, नीचे (रिपोर्ट) दो खुराक, 1x और 3x, पर (सही पर रिपोर्ट) चार ए एल एस inhibitors के साथ परीक्षण किया गया। सभी पौधों को पहले से ही है कि खुराक में नियंत्रित किया गया है क्योंकि एस की जांच के लिए खुराक 1x का ही परिणाम है, रिपोर्ट कर रहे हैं। VEB स्कोर के तीन उदाहरण लाल रंग में रिपोर्ट कर रहे हैं: 10, 0 = सभी पौधों मृत = सभी पौधों बच गया और बायोमास (बाएं पर रिपोर्ट) नहीं इलाज (एनटी) चेक करने के लिए तुलनीय है, = 5 बायोमास कि के बारे में आधे में है इलाज नहीं की एक ट्रेजाँच करें। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

    चित्रा 4
    दस Lolium एसपीपी के लिए संयंत्र के अस्तित्व का 4. प्रतिशत चित्रा। आबादी (क्रमशः खर्च। मैं और द्वितीय, के लिए नीले सलाखों और नारंगी सलाखों) दो प्रयोगों में दर्ज ग्लाइफोसेट। संयंत्र अस्तित्व के साथ परीक्षण किया गया। डेटा का इलाज पौधों की संख्या का एक प्रतिशत (%) के रूप में व्यक्त कर रहे हैं। दो अतिसंवेदनशील चेकों पूरी तरह से खुराक 1x पर नियंत्रित किया गया है और इसलिए ग्राफ में रिपोर्ट नहीं कर रहे हैं। दो खुराक, उत्पाद के लेबल पर सूचना दी खुराक न्यूनतम (1x = 480 छ AE हा -1) और अधिकतम (3x = 1440 जी AE हा -1) परीक्षण किया गया। संयंत्र के अस्तित्व के 20% से कम क्षैतिज रेखा पौधों का इलाज कर रहे थे जब प्रतिरोधी और अतिसंवेदनशील आबादी के बीच भेदभाव दहलीज का प्रतिनिधित्व करता हैखुराक 1x पर एड। कार्यक्षेत्र सलाखों के दो प्रतिकृति का मतलब मूल्य पर गणना मानक त्रुटियों का प्रतिनिधित्व करते हैं। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

    चित्र तीन
    टेबल Echinochloa एसपीपी के इक्कीस आबादी के 1. प्रतिरोध की स्थिति। अतिसंवेदनशील जांच (07-16L) बोल्ड में सूचना दी है। प्रतिरोध स्तर चार श्रेणियों के अनुसार परीक्षण चार herbicides के प्रत्येक के लिए (एक ACCase अवरोध करनेवाला, profoxydim, और तीन ए एल एस निरोधक, azimsulfuron, penoxsulam और imazamox) रिपोर्ट कर रहे हैं: पौधों के एस = 5% से कम बच शाक खुराक 1x, एसआर = संयंत्र अस्तित्व में 5% से शाक खुराक 1x पर 20% तक बताया, आर पौधों की 20% से अधिक शाक खुराक 1x बच =, आरआर = संयंत्र अस्तित्व था शाक खुराक पर 20% से अधिक1x और खुराक 3x में 10% से अधिक। विभिन्न प्रतिरोध पैटर्न पर प्रकाश डाला गया है: Red = प्रतिरोध ही केवल ए एल एस अवरोध करनेवाला (एस), ACCase अवरोध करनेवाला के लिए नारंगी = प्रतिरोध करने के लिए ACCase अवरोध करनेवाला, पीले = प्रतिरोध करने के लिए और करने के लिए कम से कम एक ए एल एस अवरोध करनेवाला।

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    Discussion

    1) बीज जब परिपक्व शाक उपचार (ओं) बच गया था कि पौधों से एकत्र किया जाना चाहिए: प्रोटोकॉल के भीतर कई चरणों आबादी में शाक प्रतिरोध का एक सफल मूल्यांकन के लिए महत्वपूर्ण हैं। माँ संयंत्र पर बीज की परिपक्वता के बाद में बीज अंकुरण में कठिनाइयों से बचने के लिए महत्वपूर्ण है; 2) बीजों के उचित भंडारण अंकुरण को रोका जा सके कि नए नए साँचे के प्रसार से बचने के लिए सिफारिश की है; शाक पैकेज के लेबल पर रिपोर्ट के रूप में 3) पौध, सही विकास के चरण में इलाज किया जाना चाहिए। पौधों लगभग एक ही विकास चरण में पहुंच गया इलाज किया जाना है, ताकि ध्यान रखा जाना चाहिए; पौधों इसलिए unverifiable गलतियों से बचने के सक्रिय संघटक का सही एकाग्रता के साथ स्प्रे कर रहे हैं इतना है कि 4) शाक समाधान तैयार है और सटीकता के साथ संभाला जाना चाहिए; 5) प्रत्येक शाक उपचार के बाद यह अच्छी तरह से छिड़काव कैबिनेट साफ करने के लिए सिफारिश की है और बचने के लिए समाधान तैयार करने के लिए इस्तेमाल किया कांच के बने पदार्थअत्यधिक जैविक रूप से सक्रिय herbicides के शामिल कर रहे हैं, खासकर जब निम्नलिखित शाक उपचार में संदूषण,।

    इस के साथ साथ प्रस्तुत प्रोटोकॉल आसानी प्रजातियों और ब्याज की herbicides के अनुसार आवश्यक संशोधनों के साथ खरपतवार प्रजातियों में से एक विस्तृत श्रृंखला के लिए अनुकूलित किया जा सकता है। विशेष रूप से, विधियों बीज निद्रा को तोड़ने के लिए और अंकुरण के लिए प्रत्येक नए खरपतवार प्रजातियों के लिए फिर से विचार किया जाना चाहिए कि कदम उठाए हैं (देखें वर्गों 2 और 3)। छिड़काव उपकरण कभी कभी अलग herbicides के लिए उपयोग किया जाता है जब, जैसे, ग्लाइफोसेट (धारा 5.3 देखें) छिड़काव मंत्रिमंडल के विभिन्न सेटिंग्स की आवश्यकता है और पौधों सबसे herbicides के साथ की तुलना में एक बाद विकास के चरण में इलाज कर रहे हैं समायोजन की जरूरत है।

    इन प्रोटोकॉल प्रदर्शन करने के लिए आवश्यक समय और अंतरिक्ष एक सीमित कारक हो सकता है और नियमित परीक्षण के लिए उपयुक्त नहीं हो सकता। हालांकि, लागत को सीमित करने के लिए, केवल एक शाक खुराक में इस्तेमाल किया जा सकता है। इस तरह की जानकारी अभी भी टी पर कि क्या प्राप्त किया जा सकता हैवह आबादी प्रतिरोधी है। दृष्टिकोण का एक संभावित सीमा कोई प्रतिरोधी चेक के प्रयोगों में शामिल कर रहे हैं कि इस तथ्य से संबंधित है। वास्तव में, कारण का मूल्यांकन biotypes की बड़ी संख्या के लिए (यानी, विभिन्न प्रजातियों और इसमें शामिल herbicides), कई चेकों ताकि लागत बढ़ रही है, प्रत्येक प्रयोग में शामिल किया जाना चाहिए।

    हालांकि, केवल एक शाक खुराक 15 का उपयोग करते हुए पूरे संयंत्र bioassays पर आधारित वैकल्पिक तकनीकों / प्रोटोकॉल पर लाभ उच्च विश्वसनीयता और प्रतिरोध स्तर inferring की संभावना से संबंधित हैं। तेज और कम महंगा निदान स्क्रीनिंग टेस्ट भी vivo में या इन विट्रो में, तैयार किया गया है (उदाहरण के लिए, पेट्री डिश bioassays 8, शाक लक्ष्य एंजाइम 29 spectrophotometric परीक्षण)। हालांकि, वे केवल गुणात्मक जानकारी प्रदान करते हैं और Res के बीच भेदभाव करने के लिए शाक खुराक की पहचान करने के लिए, कभी कभी श्रमसाध्य कुछ प्रारंभिक काम की आवश्यकता होती हैistant और अतिसंवेदनशील पौधों। इन विट्रो assays में भी इस्तेमाल किया सक्रिय संघटक के अनुसार अनुकूलित किया जा करने की जरूरत है।

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    Materials

    Name Company Catalog Number Comments
    Paper bags Celcar SAS
    Plastic dishes ISI plast S.p.A. SO600 Transparent plastic
    Sulfuric acid 95-98% Sigma-Aldrich 320501
    Non-woven fabric Carretta Tessitura Art.TNT17 Weight 17 g m-2
    Chloroform >99.5% Sigma-Aldrich C2432
    Agar Sigma-Aldrich A1296
    Potassium nitrate >99.0% Sigma-Aldrich P8394
    Plastic containers Giganplast 1875/M 600 x 400 x 110 mm
    Plastic trays Piber plast G1210A 325 x 265 x 95 mm
    Polystyrene trays Plastisavio S24 537 x 328 x 72 mm, 24 round cells (6x4)
    Copper sulfate Sigma-Aldrich 451657
    Agriperlite Blu Agroingross sas AGRI100
    Peat Blu Agroingross sas TORBA250
    Germination cabinet KW W87R
    Nozzles Teejet XR11002-VK, TP11001-VH The second type of nozzles are used only for glyphosate
    Barcode generator Toshiba TEC SX4
    Labels with barcode Felga TT20200 Stick-in labels with rounded corners
    Barcode reader Cipherlab 8300-L Portable data terminal
    Bench sprayer Built in house
    Herbicides included in the results:
    Commercial product Active ingredient Company Comments
    Altorex imazamox BASF
    Azimut florasulam Dow AgroSciences
    Biopower Bayer Crop Science Surfact to be used with Hussar WG
    Dash BASF Surfact to be used with Altorex
    Granstar tribenuron-methyl Dupont
    Gulliver azimsulfuron Dupont
    Hussar WG iodosulfuron Bayer Crop Science
    Nominee bispyribac-Na Bayer Crop Science
    Roundup glyphosate Monsanto
    Trend Dupont Surfact to be used with Granstar and Gulliver
    Viper penoxsulam Dow AgroSciences
    Weedone LV4 2,4-D Isagro

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    References

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    पर्यावरण विज्ञान अंक 101 खरपतवार विज्ञान प्रतिरोधी biotypes निगरानी ​​बीज अंकुरण खरपतवार नियंत्रण शाक प्रभावकारिता शाक उपचार प्रतिरोध स्तर।
    विभिन्न खरपतवार प्रजाति में मजबूत शाक प्रतिरोध परीक्षण के लिए प्रोटोकॉल
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    Panozzo, S., Scarabel, L., Collavo,More

    Panozzo, S., Scarabel, L., Collavo, A., Sattin, M. Protocols for Robust Herbicide Resistance Testing in Different Weed Species. J. Vis. Exp. (101), e52923, doi:10.3791/52923 (2015).

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