Introduction
Viele Tiere nutzen Lautäußerungen für intraspezifische Kommunikation. In der Maus Mus musculus, ist eine wichtige Art der Kommunikationssignal Ultraschall vocalizations (USVs), die höhere Frequenzen als 20 kHz aufweisen. USVs von Mäusen emittiert werden als eine Komponente der sozialen Anerkennung in Mann-Frau-1-4, Buchse-Buchse 1, 5, und Stecker-Stecker 1, 6-Interaktionen. USVs werden auch von Jungtieren emittiert, wenn sie von ihrer Mutter, die ihrem Welpen-Abrufen Verhalten erhöht isoliert und daher Pup Überleben 7. Obwohl viele Berichte wurden analysiert und kategorisiert Maus USVs 8, 9, die Verhaltensreaktionen und neuronalen Mechanismen des Aufnahme Tier wurden weniger gut dokumentierte 10, 11. Letzteres ist notwendig, um die biologische Bedeutung der verschiedenen Merkmale der USVs verdeutlichen. Diese Mechanismen offenbaren, ist die Wiedergabeexperiment ein effizientes Verfahren. Aktuelle Wiedergabe Studien haben ergeben, dass weiblicheMäuse werden zur USVs 12 angezogen wird, und dass sie USVs von Männchen, die von ihren Eltern 13, 14 unterschiedlich sind bevorzugen.
Dieser Artikel erklärt, die Wiedergabetest verwendet werden, um USV Präferenz bei Mäusen zu bewerten. Ein Zwei-Choice-Test Feld entwickelt, bei denen zwei unterschiedliche USVs gleichzeitig wieder in zwei Kammern eines Testgehäuse, wie in 1 gezeigt, wiedergegeben werden. Diese Art der Testbox verhindert störende Verunreinigungen durch Dividieren der Testbereich in drei Teilkammern , unter Verwendung von Blei Wänden. Die Ultraschallsender werden vor jedem Zimmer befindet. In der Wand zwischen den Zimmern und Ultraschallsender sind Löcher mit Drahtgeflecht bedeckt. Mäuse können frei in den drei Räumen bewegen und zeigen eine "Suchen Sie das Netz" Verhalten, wie um zu USVs von den Ultraschallsender abgespielt reagieren. Bei diesem Test Mäuse bleiben für Zeiträume von unterschiedlicher Dauer in der Nähe einer Schallsender oder das andere. Diese Parameter können angemeldet sein, um einen empfindlichen measu erhalten re Schall Präferenz.
Um die USVs wiedergeben, nanokristallinen Silizium thermo-akustischen Emitter (dh "nc-Si-Emitter") wurden als in früheren Studien 15-17 verwendet. Diese Geräte werden von einem Dünnschicht Heizelektrode eine nanoporöse Siliziumschicht, und einem einkristallinen Silicium-Wafer besteht. Die digitale Audiodatei in ein analoges Signal umgewandelt und dann durch den Heizer Elektrode geleitet. Das Gerät wandelt die resultierende spannungsabhängigen thermischen Signale in signifikanten Schalldruck bei geringer Verzerrung. Diese Vorrichtung ist dadurch einzigartig, dass, im Gegensatz zu gemeinsamen Schallgeneratoren, die von mechanischen Schwingungen abhängt, kann Ton, ohne die Notwendigkeit einer Membran, zu reproduzieren. Der Emitter weist eine flache Schalldruckpegel bei Frequenzen von 20 bis 160 kHz (Abbildung 2), und kann digital aufgezeichnet murine USVs sehr genau in Bezug auf die Dauer, Häufigkeit und Schalldruckpegel 15, 18, 19 zu reproduzieren.
ve_content "> In einer in Figur 3 gezeigten repräsentativen Experiment wurden C57BL / 6 (B6) Weibchen darf zwischen BALB / c (BALB) männliche USVs und Hintergrundrauschen zu wählen. Ferner zeigt 4 die Wahl B6 und BALB Frauen zwischen gleichzeitige USV Wiedergaben von einer BALB und B6 male, wie in einer früheren Studie berichteten 14. Die Eigenschaften der männlichen USVs unterscheiden zwischen B6 und BALB Stämme 20 dar. Wie gezeigt durch diesen Ergebnissen kann die Attraktivität USVs der vorliegenden Protokoll bewertet werden, in welcher Töne aus einem Live einzelnen aufgezeichnet, akustisch analysiert, und zurück zu anderen Personen gespielt.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle Verfahren wurden von der Ethikkommission der Azabu Universität genehmigt. Alle Versuche wurden in einer schalldichten Kammer durchgeführt wird.
1. Vorbereitung der Tiere
- Männliche Person für die Aufnahme
- Erhalten geschlechtsreifen männlichen Mäusen in Paarungs erlebt.
- Probandinnen
- Erhalten jungfräulichen weiblichen Mäusen, die mit 2 bis 5 Wurf pro Käfig gehalten worden sind (in der Regel 8 bis 12 Wochen alt).
- Erhalten Vaginalabstrichen täglich, um die Phase des Östruszyklus vor der Prüfung zu bestimmen, nach McLean 21. Es sollte darauf geachtet, um die vaginale Stimulation zu minimieren, um Scheinträchtigkeit vermeiden.
- Färben die Ausstriche mit Giemsa und bestimmen Phase des Östruszyklus basierend auf dem Vorhandensein oder der Abwesenheit von Leukozyten, verhornten Epithelzellen und kernhaltige Epithelzellen, nach Nelson 22.
2. Geräte (Abbildung 1)
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Abbildung 1. Schematische Darstellung des Zwei-Choice-Test-Box und Geräte. Die Mäuse können durch die kleinen Toren zwischen ihnen und der neutralen Zone zugreifen Räume A und B. Die zwei Auswahlbox und zwei Ultraschallsender sind auf dem Boden von einer schalldichten Kammer platziert. Das Mikrofon ist in der schalldichten Kammer suspendiert. Abkürzung:. PC, PC Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
- Für Recording
- Schließen Sie ein Ultraschallkondensatormikrofon an einen PC über ein USB-A / D-Wandler.
- Stellen Sie den Verstärkungspegel des A / D-Wandler auf "7".
- Nehmen akustischen Daten in 16-Bit-Format-Dateien mit einer Abtastrate von 400 kHz mittels Audio-Capture-Software.
- Für die Wiedergabe
- Schließen Sie einen D / A-Wandler mit dem PC übereine USB-Schnittstelle.
- Verbindung von zwei Verstärkern in den D / A-Wandler durch ein Dämpfungsglied. (Letzteres Einrichtung dient, um eine Überlastung zu verhindern.)
- Schließen Sie ein Ultraschallsender an jeden Verstärker.
3. USV Recording
- Legen Sie eine männliche Maus in einem kleinen (17 x 10 x 11 cm) und mittlere (21 x 14 x 13 cm) Käfig mit einer 6 cm-Durchmesser-Loch in der Seitenwand und dem Loch mit einem 0,5 cm Drahtgitter abgedeckt. Bei der Verwendung eines mittelgroßen Käfig, konstruieren Sie eine Partition auf der Mitte des Käfigs, um den Bereich zu reduzieren.
- Sie Bettwäsche in den Käfig zu verwenden nicht Rascheln Geräusche, die die Aufnahmen kontaminieren könnten.
- Legen Sie ein Mikrofon neben dem Mesh.
- Beginnen Ultraschall vocalization Überwachung mit dem Aufnahme-Setup in Schritt 2.1 dargestellt.
- Legen Sie eine geschlechtsreifen weiblichen Maus entweder Metöstrus oder Diöstrus in den Käfig mit dem männlichen Maus.
- Nehmen USVs für 3-5 min.
4. Test Box
- Erstellen Sie das Testfeld mit Acrylplatte (Abbildung 1).
Hinweis: Das Testfeld (35 x 20 und x 20 cm hoch) ist in drei Abteilungen unterteilt: eine neutrale Zone (15 x 20 cm), und die Zimmer A und B (20 x 10 cm, jeweils). Zimmer A und B jeweils eine 4 cm Durchmesser Loch, das mit einem 0,5 cm Drahtgewebe abgedeckt ist. Die Löcher und Mesh sind an jedem Ende der Zimmer A und B. Achten Tore (5 x 5 cm jeweils) zwischen der neutralen Zone und Zimmer A und B befindet, - Zu verhindern Tonverlust isolieren jedes Ultraschallsender, mit Ausnahme der Seite, die Gitterwand, mit Gummiplatten, Dichtung in die Schachtel um den Umfang jeder Masche.
- Platz Plomben auf beiden Seiten der Mauer zwischen den Räumen A und B für den Schallschutz.
5. Vorbereitung für Soundwiedergabe
- Schaffung Wiedergabe Sounds
- Nehmen Sie ein 20 sec Segment der USV aus der aufgezeichneten Datei mit digitalen Audio-Editing-Software.
- Wählen und erfassen Hintergrund keineise (0,35 sec) aus dem 20 sec USV-Segment-Datei. Erstellen Sie eine 20 Sekunden Hintergrundrauschen-Datei durch Wiederholen des Rauschsegment.
- Um die beiden Audio-Dateien gleichzeitig wiedergeben, exportieren Sie sie als eine einzelne Stereo-Sound-Datei mit einer Datei für den "linken Ohr" und die andere Datei für die "rechte Ohr."
- Filtern Sie die Sound-Dateien, wobei als Hochpassfilter mit einem Cut-off von 40 kHz.
- Verringern Sie Geräusche mit dem Rauschunterdrückungswerkzeug im Post-Processing-Software. Wählen und erfassen ein Segment der Datei, die keine USVs wie die Rauschunterdrückungs Profil enthält, und führen Sie Rauschreduktion mit Level 40.
- Kalibrierung der Wiedergabe Sounds
- Sicherzustellen, dass der Raum zwischen Ultraschallsender und Mikrofon 10 cm.
- Schalldruckpegel von den Ultraschallsender zu kalibrieren, führen Ultraschallüberwachung unter Verwendung der in Schritt 2.1 beschriebenen Konfiguration. Messen Sie den Schalldruckpegel von dem Mikrofon in Dezibel (dB).
- Using der Dämpfer und Verstärker, die Lautstärke der von den Ultraschallsender auf den gleichen Schalldruck wie die männlichen USVs in Schritt 3 aufgezeichnet erzeugt USVs.
- Bei der Verwendung der zwei Ultraschallsender und eine Audio-Datei von USVs und Hintergrundrauschen besteht, zu bestätigen, dass die beiden Ultraschallsender weisen die gleiche Schalldruckpegel unter Verwendung einer Eich Sound (zB ein 75-kHz reiner Ton) vor der Durchführung des Verhaltenstest.
- Beim Wiedergeben einer Audiodatei von zwei Strömen von USVs besteht, passen die beiden erzeugten Schalldruckpegel auf den gleichen Pegel, vor dem Test.
6. Zwei-Choice-Test
- Legen Sie die Ultraschallsender hinter den Maschen des Testfeld.
- Schließen Sie die Türen zu Räumen A und B mit einer Acrylplatte und gewöhnen die weibliche unterliegen der neutralen Zone für 30 min. Decken Sie die Box mit Acrylbrett, um zu vermeiden, dass die Maus entweichen kann.
- Starten Sie Videoaufzeichnung mit einer CCÜber der Box montiert D-Kamera. Die Kamera (in 1 nicht dargestellt) deckt den Bereich aller drei Abteilen.
- Entfernen Sie das Tor und Cover-Board und lassen Sie die weiblichen frei das Testfeld, darunter die Klangzonen zu erkunden.
- Sobald das Weibchen hat beide Netze untersucht und hat sich in die Neutralzone zurückgeführt, spielen Sie eine 20 sec Tondatei wiederholt für 5 oder 10 min.
- Zuführen Verhaltensüberwachung für 5 oder 10 min.
- Um unerwünschte olfaktorischen Signale aus dem vorherigen Thema hinterlegt reduzieren, reinigen Sie die Testkäfige zwischen den Tests mit 70% Ethanol.
- Schalten Sie den Ort der Ultraschallsender A und B nach dem Zufallsprinzip inhärenten Seiten Bias-Effekt in Richtung Zimmer A oder B zu vermeiden
7. Statistische Analysen
- Verwenden von Verhaltens Event-Scoring-Software analysiert die folgenden Parameter: Gesamtzahl der Einträge in jedem Zimmer; Gesamtdauer des Aufenthalts in jedem mittleren Zone; Gesamtdauer des Aufenthalts in jedem Ton Zone; undGesamtdauer der Suche nach jeder Masche vor der Ultraschallsender. 1 veranschaulicht, was mit "Mittelzone" und meinte "Sound-Zone."
Hinweis: In den Fällen, wo die Maus bleibt auf der Trennlinie zwischen den beiden Zonen (Abbildung 1, gestrichelte Linie) entscheiden, die Position durch die Richtung des Kopfes. Wenn der Kopf steht vor der Netzseiten, es als ein Aufenthalt in der Klangzone erzielt wird. - Für jede Verhaltensparameter, zu vergleichen, Antworten für Räume A und B mit einem Wilcoxon-Test, oder gepaarten t -Tests mit einem Signifikanzniveau von 0,05.
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Representative Results
Die USVs von einer BALB-männlich (161 Silben pro 20 sec), als auch Hintergrundgeräusche aufgenommen wurden, wie die Wiedergabe verwendet klingt in der in 3 gezeigten repräsentativen Experiment. In diesem Experiment wurden 7 weiblichen B6-Mäusen am Alter von 9 Wochen verwendet . Zur Ermittlung der besten Testdauer von weiblichen Reaktion zur Wiedergabe von Ton wurden die Verhaltensparameter getrennt für die ersten und letzten fünf Minuten der insgesamt 10 min Testzeit analysiert.
Erstens gibt es keinen signifikanten Unterschied in der Aufenthaltsdauer in den Räumen A und B während der Untersuchung, bis die Wiedergabe (3A), was zeigt, dass es keine Neben bias.The Ergebnisse zeigten auch, daß es keinen Unterschied zwischen dem Hintergrund-Rauschseiten und der männlich-USVs Seite in der Reihe von Raum Einträge, die Analyse der ersten 5 min, die letzten 5 min, und die Gesamttestzeit (3B). 3C zeigt kumulative Sekunden duratIonen des Aufenthalts in jedem Zimmer während der Wiedergabe (dh Gesamtdauer des Aufenthalts in der mittleren Zone und in der Klangzone). Die Probanden verbrachten deutlich längere Zeit im BALB männlich-USV Seite als im tergrundgeräuschpegel Seite bei der Analyse der ersten 5 Minuten (p = 0,043) oder die Gesamttestzeit (p = 0,043). Es gab keine signifikanten Unterschiede in der dieser Parameter bei der Analyse von im letzten 5 min. Es gab keine signifikanten Unterschiede zwischen dem Hintergrundrauschseite und der männlich-USVs Seite in der Mittelzone (3D). Jedoch verbracht B6 Weibchen deutlich länger im Sound-Zone und die Suche, die Maschen des BALB männlich-USV Seite, im Vergleich zu dem Hintergrundrauschseite, bei der Analyse der ersten 5 min (Hörzone, p = 0,018, 3E; Retro , p = 0,018, 3F) oder die Gesamttestzeit (Sound-Zone, p = 0,028, 3E, Mesh, p = 0,043, 3F). Die Ergebnisse zeigen deutlich, dass eine weibliche B6nähert sich mehr der wiedergegebenen männlich-USVs ist als die Hintergrundgeräusche, vor allem in den ersten 5 min.
Diese zwei Choice-Test ist nützlich, um die Eigenschaften von USVs zu vergleichen. In einer früheren Studie wurde dieser Test verwendet, um USV Bevorzugung von B6 und BALB weiblichen Mäusen für USVs von Männchen dieser Stämme 11 bestimmen. Bei der Verwendung eines Wiedergabe Kombination von USVs von einer B6 (133 Silben pro 20 sec) und einer BALB (108 Silben pro 20 sec) männlich, weiblichen Mäusen von jedem dieser Stämme zeigten längere Suchzeiten für die USVs der Männer des anderen Stammes als ihrer eigenen ein (Figur 4).
Abbildung 2. gemessene Schalldruckpegel (SPL) von der NC-Si-Emitter als Funktion der Frequenz erzeugt eine nahezu konstante Schalldruck von ca. 80 -. 90 dB wird zwischen 40 und 160 kHz beobachtet. AC-Eingangs power liegt bei 1,3 W in diesem Fall. Der Emitter wurde mit einem Abstand von 20 mm von einem Hochfrequenz-Kondensatormikrofon gelegt und mit seinem Zentrum ausgerichtet ist. Diese Zahl hat sich von Kihara 19 modifiziert worden ist. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abbildung 3. B6 Weiblich Antwort auf Hintergrundgeräusche und BALB Männlich USVs. (A) Gesamtdauer des Aufenthalts im Zimmer A oder B während der Untersuchungszeit vor der Wiedergabe. (B) Anzahl der Zimmer Einträge während der Wiedergabe. (C) Gesamtdauer des Aufenthalts in den Zimmern. (D) Gesamtdauer des Aufenthalts in der mittleren Zone . (E) Gesamtdauer des Aufenthalts in der Klangzone. (F) Gesamtdauer der Benutzer die Maschen. Messungen von jedemEinzel in Dot-Plots gegeben; horizontalen Balken in jeder Parzelle zeigen den Mittelwert; n = 7; * Zeigen signifikante Unterschiede (p <0,05) zwischen Hintergrundrauschen und männlichen USVs für die untersuchten Parameter; Wilcoxon-Tests. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abbildung 4. Weiblich Antwort auf USVs von Männern aus einem anderen Stamm gegen die gleiche Belastung. B6 (n = 6) und BALB (n = 10), Frauen in Diöstrus zu männlich-verschmutzte Bettwäsche vor dem Test ausgesetzt waren, zeigten längere Laufzeiten für die Suche anderen Stamm USVs. Die angegebenen Werte sind Mittelwert ± Standardfehler; * Zeigen signifikante Unterschiede (p <0,05); Wilcoxon-Tests. Diese Zahl hat sich von Asaba modifiziert worden
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Acknowledgments
Diese Arbeit wurde durch ein Grant-in-Aid für JSPS-Stipendiaten auf AA; von Grants-in-Aid for Scientific Research für innovative Bereiche für JSPS-Stipendiaten (No. 4501 und Nr 25132712) zu TK; und von einem Forschungsprojekt Zuschuss von Azabu University. Abbildung 2 verliehen wird aus Kihara, T., Harada, T., & Koshida, N. Wafer-kompatible Herstellung und Eigenschaften der nanokristallinen Silizium thermisch induzierte Ultraschallsender nachgedruckt. In: Sensors and Actuators A: Physical, Band 125, Elsevier, p. 426, (2006), mit Genehmigung von Elsevier.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Soundproof chamber | Muromachi Kikai | ||
| Small cage | CLEA Japan | CL-0113-1 | |
| Middle cage | CLEA Japan | CL-0103-1 | |
| Ultrasound condenser microphones | Avisoft Bioacoustics | CM16/CMPA | |
| A/D converter | Avisoft Bioacoustics | UltraSoundGate116H | |
| Audio software | Avisoft Bioacoustics | RECORDER USGH | |
| Adobe Audition 3.0 / Audio editing software | Adobe Systems | Adobe Audition 3.0 | |
| Nc-Si emitter | Original | not commercially available but it is planned to be so in near future | |
| D/A converter | National Instruments | NI USB-6251 BNC | |
| Attenuator | Original | ||
| Amplifier | Yamatake | ||
| PC | Windows 7 professional | Intel® core i7-2600K CPU @ 3.4GHz, 8GB RAM, 64-bit operating system | |
| Event recorder Excel-macro / Event-scoring software | original | Programmed by Naoto Akagawa & Takeru Yamamoto | |
| CCD Camera | |||
| Rubber plates (made of elastomer resin) | Tokyo bouon | TI-75BK B4 | Cut them to the proper size http://www.piano-bouon.jp/shopping/?pid=1329272401-447630&ca=6&p=3 |
| Giemsa's azur eosin methylene blue solution | Merck Millipore | 1.09204.0500 |
References
- Panksepp, J. B., et al. Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice. PLoS One. 2 (4), e351 (2007).
- Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N. Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T+tf/J mice during three types of social encounters. Genes Brain Behav. 10 (1), 44-56 (2010).
- Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. The structure and usage of female and male mouse ultrasonic vocalizations reveal only minor differences. PLoS One. 7 (7), e41133 (2012).
- Merten, S., Hoier, S., Pfeifle, C., Tautz, D. A role for ultrasonic vocalisation in social communication and divergence of natural populations of the house mouse (Mus musculus domesticus). PLoS One. 9 (5), e97244 (2014).
- Amato, F. R., Moles, A. Ultrasonic vocalizations as an index of social memory in female mice. Behav. Neurosci. 115 (4), 834-840 (2001).
- Chabout, J., et al. Adult male mice emit context-specific ultrasonic vocalizations that are modulated by prior isolation or group rearing environment. PLoS One. 7 (1), e29401 (2012).
- Ehret, G. Infant rodent ultrasounds–a gate to the understanding of sound communication. Behav. Genet. 35 (1), 19-29 (2005).
- Holy, T. E., Guo, Z. Ultrasonic songs of male mice. PLoS Biol. 3 (1), e386 (2005).
- Portfors, C. V. Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice. J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 46 (1), 28-34 (2007).
- Holfoth, D. P., Neilans, E. G., Dent, M. L. Discrimination of partial from whole ultrasonic vocalizations using a go/no-go task in mice. J. Acoust. Soc. Am. 136 (6), 3401 (2014).
- Neilans, E. G., Holfoth, D. P., Radziwon, K. E., Portfors, C. V., Dent, M. L. Discrimination of ultrasonic vocalizations by CBA/CaJ mice (Mus musculus) is related to spectrotemporal dissimilarity of vocalizations. PLoS One. 9 (1), e85405 (2014).
- Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. Female mice respond to male ultrasonic ‘songs’ with approach behaviour. Biol. Lett. 5 (5), 589-592 (2009).
- Musolf, K., Hoffmann, F., Penn, D. J. Ultrasonic courtship vocalizations in wild house mice, Mus musculus musculus. Anim. Behav. 79 (3), 757-764 (2010).
- Asaba, A., et al. Developmental social environment imprints female preference for male song in iice. PloS one. 9 (2), e87186 (2014).
- Uematsu, A., et al. Maternal approaches to pup ultrasonic vocalizations produced by a nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitter. Brain Res. 1163, 91-99 (2007).
- Okabe, S., et al. The effects of social experience and gonadal hormones on retrieving behavior of mice and their responses to pup ultrasonic vocalizations. Zoolog. Sci. 27 (10), 790-795 (2010).
- Okabe, S., et al. Pup odor and ultrasonic vocalizations synergistically stimulate maternal attention in mice. Behav. Neurosci. 127 (3), 432-438 (2013).
- Shinoda, H., Nakajima, T., Ueno, K., Koshida, N. Thermally induced ultrasonic emission from porous silicon. Nature. 400 (6747), 853-855 (1999).
- Kihara, T., Harada, T., Koshida, N. Wafer-compatible fabrication and characteristics of nanocrystalline silicon thermally induced ultrasound emitters. Sensor. Actuat. A-Phys. 125 (2), 422-428 (2006).
- Kikusui, T., et al. Cross fostering experiments suggest that mice songs are innate. PloS One. 6 (3), e17721 (2011).
- McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification. J. Vis. Exp. (67), e4389 (2012).
- Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology. Biol. Reprod. 27 (2), 327-339 (1982).
- Tomihara, K., et al. Effect of ER-beta gene disruption on estrogenic regulation of anxiety in female mice. Physiol. Behav. 96 (2), 300-306 (2009).
- Zheng, Q. Y., Johnson, K. R. Hearing loss associated with the modifier of deaf waddler (mdfw) locus corresponds with age-related hearing loss in 12 inbred strains of mice. Hear. Res. 154 (1-2), 45-53 (2001).
- Haga, S., et al. The male mouse pheromone ESP1 enhances female sexual receptive behaviour through a specific vomeronasal receptor. Nature. 466 (7302), 118-122 (2010).
- Grimsley, J. M., Monaghan, J. J., Wenstrup, J. J. Development of social vocalizations in mice. PLoS One. 6 (3), e17460 (2011).
- Sugimoto, H., et al. A role for strain differences in waveforms of ultrasonic vocalizations during male-female interaction. PLoS ONE. 6 (7), (2011).
- Hanson, J. L., Hurley, L. M. Female presence and estrous state influence mouse ultrasonic courtship vocalizations. PLoS One. 7 (7), e40782 (2012).
- Wang, H., Liang, S., Burgdorf, J., Wess, J., Yeomans, J. Ultrasonic vocalizations induced by sex and amphetamine in M2, M4, M5 muscarinic and D2 dopamine receptor knockout mice. PLoS One. 3 (4), (2008).
- Moles, A., Kieffer, B. L., D'Amato, F. R. Deficit in attachment behavior in mice lacking the mu-opioid receptor gene. Science. 304 (5679), 1983-1986 (2004).
- Hiramoto, T., et al. Tbx1: identification of a 22q11.2 gene as a risk factor for autism spectrum disorder in a mouse. Hum. Mol. Genet. 20 (24), 4775-4785 (2011).
- Ey, E., et al. Absence of deficits in social behaviors and ultrasonic vocalizations in later generations of mice lacking neuroligin4. Genes Brain Behav. , (2012).
- Roy, S., Watkins, N., Heck, D. Comprehensive analysis of ultrasonic vocalizations in a mouse model of fragile X syndrome reveals limited, call type specific deficits. PLoS One. 7 (9), e44816 (2012).
