Introduction
Ända sedan dess utveckling i mitten av 1990-talet SOD1-G93A transgen musmodell har varit den mest använda djurmodell av amyotrofisk lateralskleros (ALS) 1. Denna transgen musmodell genetiskt för att överuttrycka en mutant form av den humana Cu / Zn-superoxiddismutas 1 (SOD1) -genen härbärgerar ALS-associerade glycin till alaninmutation vid aminosyra 93 (G93A). Den G93A mutationen är en av många mutationer i SOD1-genen som tillsammans smink ungefär en femtedel av familjär ALS-fallen 2.
Den SOD1-G93A modellen har blivit en arbetshäst i ALS läkemedelsutveckling forskning eftersom utöver dess uppenbara genetisk koppling till ALS, rekapitulerar många av de patologiska egenskaperna hos ALS hos människa såsom motorneuron förlust, progressiv muskelsvaghet och atrofi, med eventuell förlamning och död 3. Men som ofta är fallet med transgena djurmodeller, det finns en inneboende biologisk variabilitet associerad med SOD1-G93A möss. Scott et al., har fastställt att kohorter av minst 24 kull matchade könsbalanserade möss behövs läkemedelseffektstudiedesign för att övervinna det buller som skapats av den biologiska variabilitet 4. Det stora antalet djur som krävs i dessa studier i kombination med den aggressiva sjukdomsutveckling och behovet av daglig övervakning förbjuder användning av komplicerade och tidskrävande och potentiellt stressande metoder för att mäta neuromuskulär styrka och funktion (t.ex. elektromyografi, greppstyrka, rotorod , etc). I stället understryker det behovet av ett in vivo screening verktyg som på ett tillförlitligt sätt bedömer den neuromuskulära funktionen hos SOD1-G93A möss på ett snabbt sätt.
Vid ALS TDI har ett protokoll som utvecklats som gör det möjligt för en tillförlitlig bedömning av den neuromuskulära funktionen hos SOD1-G93A möss på mindre än 30 sekunder per mus i genomsnitt. Detta protokoll encompaSSES daglig bedömning av bakdelen funktion med ett enkelt neurologisk poängsystem (NeuroScore) som beskrivs i denna rapport i press och video. NeuroScore fokuserar på bakdelen funktion eftersom bakdelen underskott är den tidigaste rapporterade neurologiska sjukdomstecken i SOD1-G93A möss 5,6. Vidare protokoll som utvecklats av ALS TDI ger en objektiv bedömning av uppkomsten av pares (lätt eller partiell förlamning), progression och svårighetsgraden av förlamning och det är tillräckligt känslig för att identifiera läkemedels inducerade förändringar i sjukdomsförloppet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla experiment genomförs i enlighet med de protokoll som beskrivs av National Institutes of Health Guide för skötsel och användning av djur och har godkänts av ALS TDI institutionella djuromsorg och använda kommitté (IACUC).
1. Djur, bostäder och studiedesign
Obs: SOD1-G93A muskolonin härrör från den höga kopian B6SJLTgN (SOD1G93A) 1Gur stam ursprungligen producerad av Gurney et al 7.. Kolonin är för närvarande upprätthålls genom att korsa transgena C57BL / 6-SJL män med vildtyp C57BL / 6-SJL F1 honor. F1 djuren genereras genom att korsa SJL män med B6 honor. Möss levereras till ALS TDI vecka vid 35-45 dagars ålder.
- Tillåt möss åtminstone en vecka för att acklimatisera till djuret faciliteten (ljus / mörker-cykel 12-h vid en temperatur av 18-23 ° C och 40-60% luftfuktighet) innan att tilldela till en studie.
- Hus manlig SOD1-G93A mice en mus per bur, eftersom gruppen inrymt män tenderar att slåss. Hus kvinnliga SOD1-G93A möss upp till två per bur. Ge miljöberikning, i form av plast hyddor. Ge mat och vatten efter behag, om mössen är en del av en studie som kräver läkemedelsadministrering i dricksvatten / mat. I dessa fall, ranson och spela in mat och vatten.
- Börja ett läkemedelseffektstudie kring ålder dag 50 och innefattar 64 kull matchade könsbalanserade möss (32 per kohort). Slutligen, se till att forskarna utför studierna blinda för de experimentella betingelser.
Obs: Det rekommenderas att en typisk läkemedelseffektstudie börjar i åldern dag 50 men beroende på vilken typ av terapeutisk intervention kan det vara att föredra att starta studien tidigare eller senare.
Obs: En studie med 32 möss per årskull drivs för att upptäcka könsspecifika läkemedelseffekter. Om inga könsspecifika jämförelser krävs bör 24 möss per kohort räcka för att upptäcka övergripande läkemedelseffekter.
2. Kroppsvikt
- Spela kroppsvikter för alla möss i studier dagligen med en precision på en tiondels gram. Obs: Kroppsvikten är en känslig indikator på sjukdomsprogression och eventuella obehag som kan bli följden av kronisk läkemedelsbehandling.
- Mus kroppsvikter varierar avsevärt under loppet av en dag, är högre i morgon, alltså spela in dem ungefär samma tid varje dag.
3. Neurologisk Scoring System (NeuroScore)
- Bedöm neurologiska poäng (NS) för varje mus dagligen genom att observera musen under följande tre villkor utförs sekventiellt: a) musen är upphängd svansen, b) musen tillåtet att gå, och efter debuten av förlamningar c) mus placeras på dess sida.
- För svansen suspensionsprov, håll musen cirka 1,5 "från basen av svansen över tråd toppen av sin hembur under 1-2 sek, borta från maten bassäng, medan obsErving bakbenen. Upprepa suspensionsprov 3 gånger och registrera den jämnaste resultatet.
- För gångtest, placera musen på en ren yta som ger viss dragkraft och en gångavstånd från 25 cm (t.ex.., Tejpade en pappershandduk för att förebygga halka). Låt musen att gå totalt 75 cm (3X längden av pappershandduk) samtidigt observera dess gång.
- För "rätande reflex" test, placera musen på vänster eller höger sida och använder en stop-watch mäta den tid det tar att räta upp sig upp utan hjälp från båda sidor. Obs: Endast en studie av detta test krävs.
- Bestäm NS varje bakben (vänster eller höger) självständigt på en skala från 0 till 4. Obs: Till exempel en poäng på 0, 1 indikerar att den vänstra bakben NS är 0, medan den högra bakben NS är en.
- Tilldela neurologiska poäng (0-4) som motsvarar följande uppsättning av observationer (sammanfattande i tabell 1):
- Tilldela NS 0 (Pre-symptomatisk) om följande observeras: När musen är upphängd i svansen, presenterar bakben en normal splay dvs det är helt utsträckt bort från den laterala mittlinjen och det stannar i detta läge för 2 sek eller längre. När musen är tillåtet att gå, är normal gång observerats.
- Tilldela NS 1 (första symtom) om följande observeras: När musen är upphängd i svansen, presenterar bakben en onormal splay, det vill säga, är det kollapsat eller delvis kollapsade mot lateral mittlinje eller hon bävar under svansen suspension eller det dras tillbaka / knäppt. När musen är tillåtet att gå, är normal eller något långsam gång observerats.
- Tilldela NS 2 (Uppkomsten av pares) om följande observeras: När musen är upphängd i svansen, är bakben helt eller delvis kollapsat, inte sträcker sig mycket. (Det kan fortfarande finnas ledrörlighet). När musen är tillåtet att gå, är bakben används för framåt MOTion men tårna curl nedåt minst två gånger under en 90 cm promenad eller någon del av foten drar längs burbottnen / bord. När musen är placerad på vänster och höger sida, är det möjligt att räta upp sig inom 10 sekunder från båda sidor.
- Tilldela NS 3 (förlamning) om följande observeras: När musen är upphängd i svansen, det är stel förlamning i bakbenen eller minimal gemensam rörelse. När musen är tillåtet att gå det finns rörelse framåt men bakdelen inte används för rörelse framåt. När musen är placerad på vänster och höger sida, är det möjligt att räta upp sig inom 10 sekunder från båda sidor. Obs: Sällan, efter debuten av förlamning, kan urin fukt visas på bakbenen. Vänster obehandlad urin fukt kan leda till urin "bränna" och hudskador. Behandla urin fukt genom att klippa håret, ska varmt vatten suger att ta bort urinen, och försiktigt torka. Om hudskador förekomma antibiotic salva.
- Tilldela NS 4 (Humane slutpunkt) om följande observeras: När musen är upphängd i svansen, det är stel förlamning i bakbenen. När musen tillåtet att gå, det finns ingen rörelse framåt. När musen är placerad på vänster och höger sida är det inte i stånd att rätta sig inom 10 sekunder från båda sidor. Dvs frånvaro av rätande reflex.
4. Data Entry och analys
- Under loppet av en läkemedelseffektstudie, mata in data som samlats in för varje mus i en Laboratory Information Management System (LIMS) eller in i en kommersiellt tillgänglig kalkylprogram.
Obs! ALS TDI utvecklade LIMS programvara är en central lagringsplats för alla uppgifter som samlats in från interna undersökningar, vilket gör dessa uppgifter lätt tillgängligt över tiden för ALS TDI utredare. LIMS spårar varje enskild mus, med sin unika ID, tillbaka till sin härstamning, kroppsvikt eller neurologisk poäng på alla studiedagarna,och inkluderar alla andra iakttagelser under sin livstid. LIMS i slutändan genererar ett kalkylblad som används för efterföljande analyser. - Efter slutförandet av en läkemedelseffektstudie, det vill säga när alla möss når humana slutpunkten, använda kalkylprogram (se tabell of Materials) för att beräkna den kombinerade NS för varje mus, för varje dag som genomsnittet av de vänstra och högra bakbenen NS . Sedan beräknar medianåldern vid varje NS för varje mus och antalet dagar varje mus tillbringar vid en viss NS.
- Analysera övergripande förändringar i NS över tid genom att importera data från kalkylprogram till statistisk programvara (se tabell of Materials). Montera dessa data med hjälp av en modell av ordinal logistisk regression som uppskattar den förväntade NS, med Medianåldern vid NS och drogbehandling som effekter i regression. Använda log-rank chi kvadrattest uppskatta effekten sannolikheten sannolikhet och avgöra om läkemedelsbehandlingseffekt på NS progression är statistiskly signifikant (se Kompletterande Kod File steg-för-steg-instruktioner).
Obs: Ett p-värde <0,05 anses statistiskt signifikant.
Obs: Denna metod för statistisk analys respekterar ordnings karaktär NS uppgifter och den rörliga typ av NS banor för enskilda möss. Det föredrages därför att individuella NS banor kan skilja sig betydligt vilket resulterar i NS tids associerad gruppmedelvärden som inte är tillräckligt reflekterande av NS-svar. Dessutom, i vissa fall NS kan fluktuera, i synnerhet när den är i noll till ett intervall. - Slutligen använda grafiska program (se tabell of Materials) för att generera "Ordinal Förväntad NS vs Median Ålder vid NS" diagram för läkemedelsbehandlade och kontrolldjur (Figur 2, se Kompletterande koden filen för steg-för-steg-instruktioner). Använd dessa diagram för att bekvämt uppskatta förskjutningar mellan läkemedelsbehandlade och kontrollgrupperna genom att interpolera från y-axeln medianåldern för sjukdomsdebut (i.e., NS 2) på x-axeln.
Anmärkning: skillnaden i medianålder mellan de två grupperna representerar en läkemedelsinducerad skift och behandlas som en praktisk åtgärd av storleken av effekt.
Obs: höger förändringar i den förväntade NS vs. medianålder kurva indikerar saktade symptomatisk sjukdomsprogression. Omvänt, åt vänster förändringar i den förväntade NS vs. medianålder kurva indikerar snabbare symptomatisk sjukdomsprogression.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
De neurologiska uppgifter betyget för 90 manliga och 94 kvinnliga obehandlade SOD1-G93A möss studerade vid ALS TDI under 2014 utvärderades. Resultaten visar att hanmöss har normalt en mer aggressiv sjukdomsprogression än honmöss, vilket framgår av en större andel av sin livslängd på NS 1 jämfört med kvinnor. NS 2 och NS 3 uppträder med nästan samma frekvens över könen. NS 0 uteslöts från analysen eftersom det anses vara en "normal" fenotyp. NS 4 undantogs också eftersom per definition endast kan förekomma en gång i ett SOD1-G93A mus livstid (tabell 2 och figur 1).
NS data presenteras från en ALS sjukdomsprogression effekt farmakologisk studie av testförening TDI173 i SOD1-G93A möss (n = 16 per kön / behandling, 64 totalt möss). I figur 2, är hastigheten av neurologiska sjukdomsprogression presenteras som fångas av ordinal regressionsanalys av data captured använda NeuroScore protokoll beskrivs häri. TDI173-behandlade möss jämfördes med vehikel behandlad kontroll. Inga statistiskt signifikanta skillnader observerades när könen var analyseras separat men statistisk signifikans uppnåddes när könen slogs samman. Kaplan-Meier-analys av överlevnad, trots att visa liknande trender som ordnings logistiska statistisk analys, var inte tillräckligt känsliga för att avslöja signifikanta skillnader även när könen slogs samman (Figur 3).
| NS 1 | Den bakben presenterar en onormal splay, det vill säga, det kollapsat eller delvis kollapsade mot lateral mittlinje eller hon bävar under svansen suspension eller det dras tillbaka / knäppta. | Normal eller något långsammare gång. | NA |
| NS 2 | Den bakben är helt eller delvis kollapsat, inte sträcker sig mycket. Det kanske stsjuka vara gemensam rörelse. | Den bakben används för rörelse framåt men tårna curl nedåt minst två gånger under en 75 cm promenad eller någon del av foten drar längs burbottnen / bord. | Musen kan räta upp sig inom 10 sekunder från båda sidor. |
| NS 3 | Styv förlamning i bakbenen eller minimal gemensam rörelse. | Rörelse framåt men är bakbenen inte används för rörelse framåt. | Musen kan räta upp sig inom 10 sekunder från båda sidor. |
| NS 4 | Styv förlamning i bakbenen. | Ingen rörelse framåt. | Musen är inte i stånd att rätta sig inom 10 sekunder från båda sidor. |
Tabell 1: Sammanfattning av fenotypiska observationer som används för att tilldela neurologiska poäng.
| Frekvens av NS1 | Frekvens av NS2 | Frekvens av NS3 | ||||
| Man | Kvinna | Man | Kvinna | Man | Kvinna | |
| Antal möss | 90 | 94 | 90 | 94 | 90 | 94 |
| Minsta | 12 | 5 | 1 | 1 | 0 | 0 |
| 25% | 29 | 16 | 4 | 4 | 0 | 0 |
| Median | 37 | 27,5 | 5 | 5 | 1 | 1 |
| 75% | 44 | 37,5 | 7,5 | 6,5 | 2,5 | 3 |
| Maximal | 61 | 60 | 28 | 11 | 8 | 9 |
Tabell 2: En frekvensanalys av NS uppgifter från icke-behandlade SOD1-G93A möss görs dagligen från ålders dag 50 fram till döden. Distributioner beräknades för NS 1, 2, och 3.
Figur 1. Grafisk representation av antalet dagar till varje onormal NeuroScore för varje mus från populationen av obehandlade SOD1-G93A möss i vår koloni under 2014 (manliga n = 90, kvinnligt n = 94). De poäng frekvenser för samma möss representeras för varje tänkbar NS. NS 4 utelämnades eftersom händelsen bara kan förekomma en gång i varje mus livstid per definition. Klicka här för att se en större versio n av denna siffra.
Figur 2 En typisk ordinal logistisk statistisk analys diagram som jämför neurologisk sjukdom progression av TDI173-behandlade möss (röd linje) och strö matchade vehikelbehandlade kontrollmöss.. (Blå linje, Redovisat p-värden representerar log-rank chi square test) Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Fig. 3 En typisk Kaplan-Meier-analys diagram som jämför livslängd TDI173-behandlade möss (röd linje) och strö matchade vehikelbehandlade kontrollmöss (blå linje, Redovisade p-värden representerar log-rank test).jove.com/files/ftp_upload/53257/53257fig3large.jpg "target =" _ blank "> Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
I denna rapport beskriver vi en snabb och enkel video protokoll som, om det tillämpas på rätt sätt, är i stånd att på ett tillförlitligt sätt att bedöma sjukdomsförloppet i SOD1-G93A möss och identifiera läkemedelsinducerade förändringar. Även om olika grupper har utvecklat fenotypiska poängsystem för SOD1-G93A möss 8-10, de ofta inte tillräckliga uppgifter om förfarandet och är otillräckliga för replikering. Som ett resultat, är poängsystem används sällan utanför den särskilda grupp som utvecklar dem. I denna rapport, minimerar kombinationen av en detaljerad manuskript med video scoring tvetydigheter och mellan försöks variabilitet vilket möjliggör protokollet antas av andra laboratorier och möjliggör jämförelser mellan studier som äger rum vid olika inställningar.
Neurologiska poängsystem beskrivs i denna rapport, kallad NeuroScore genererar ordning uppgifter där de exakta numeriska värden tillskrivs uppsättningarna av skyltar och symptoms har ingen betydelse utöver upprättandet rankat sjukdomens svårighetsgrad. I det här fallet, NS 0 är den minst allvarliga sjukdomstillstånd och innebär en mus med normal bakdelen funktion medan NS 4 är den allvarligaste sjukdomstillståndet med möss vid eller närmar sjuklighet sekundärt till neuromuskulär sjukdom. Även om det poängsystem utnyttjar symptomatiska trösklar omfattar varje ordnings NS värde ett brett spektrum av eventuella kliniska presentationer av vilka många fångades på video och som ingår i denna rapport.
NS 1 omfattar spektrum av tidiga symtom på sjukdom i SOD1-G93A möss, som kan variera kraftigt från mus till mus. Vissa möss uppvisar en onormal splay med bakbenen kollapsar mot mittlinjen medan andra visar bakdelen darrningar och en del även visa bakdelen indragning eller spännan. Vidare i de tidiga stadierna av sjukdomen NS vissa möss kan fluktuera i flera dagar mellan IK 1 och 0. Alltid dock i SOD1-G93A möss frekvensav NS 1 ökar med tiden och det finns fler och fler av de olika fenotyper beskrivna. I genomsnitt, manliga och kvinnliga SOD1-G93A möss spenderar vanligtvis 37 och 28 dagar respektive i det här skedet.
NS 2 representerar uppkomsten av pares (lätt eller partiell förlamning) och ger obestridliga bevis för närvaron av patologin. Medan det är inte ovanligt att en vildtyp mus för att ibland närvarande som NS 1, NS 2 förekommer endast i SOD1-G93A möss. I likhet med NS 1, NS 2 fångar ett spektrum av tecken och symtom. I ett tidigt skede presentation av NS 2 musen är ambulatorisk och energisk. En mer avancerad presentation av NS 2 visar en mus med en starkt begränsad rörelseförmåga. Avancerad pares i bakbenen kan hindra möss från att nå mat och vatten på toppen av buren, så mat pellets ska placeras längst ner i buren eller hydrerad livsmedel bör ges. Dessutom bör längre sipper rören placeras på vattenflaskor. SOD1-G93A möss typically spendera 5 dagar i detta skede.
NS 3 innebär fullständig bakbenen förlamning, och av allt att döma är det enklaste fenotypen att identifiera och poäng. De förlamning omfattas av NS 3 kan vara antingen slapp eller spastisk, men är typiskt spastisk. Genom denna punkt, mössen är mycket sjuk och bör kontrolleras ofta. I genomsnitt, SOD1-G93A möss spenderar 1 till 2 dagar i detta skede.
NS 4 betecknar frånvaron av "righting reflex", som inte uteslutande är beroende av bakbensfunktionen som NS 0-3 men i stället den återspeglar hela kroppen wellness på musen. Förmågan hos en mus för att visa en normal "rätande reflex" kräver motivation, energi, men också funktionen av flera muskelgrupper inklusive bakben, framben och mage. Det är viktigt att notera att sjukdomsprogression i dessa möss är ofta inte symmetrisk och en mus som framgångsrikt kan slutföra rätande reflex när de placeras på en sida may vara oförmögen att göra det när de placeras på den andra sidan. Därför är det viktigt, för human behandling av djur och för integriteten av studien, att utföra tester på båda sidor och avliva musen om det inte räta upp sig på båda sidor.
NS 4 definierar tidpunkten för eutanasi och som standard direkt i linje med överlevnadsdata. Men den totala sjukdomsprogression, enligt definitionen i ordningregressionsanalys av NS, kanske inte helt överlappar med Kaplan-Meier överlevnadskurvor och kroppsvikt uppgifter. Vissa terapeutiska ingrepp kan påverka sjukdomsdebut eller symptom, men misslyckas med att påverka den totala livslängd.
Även om det inte diskuteras på djupet i denna rapport, kan kroppsvikt vara en annan åtgärd som kan användas i kombination med NS för att bedöma sjukdoms uppkomsten och utvecklingen i SOD1-G93A men det kan vara sned av skillnader i kost och therapeutics som orsakar ödem eller inflytande fettmetabolismen 11,12.
13 och inte bakbenen motoriken, en fenotyp som inte fångas upp av NeuroScore. En annan begränsning av detta protokoll är det faktum att den var avsedd för och gäller endast för hög kopierings SOD1-G93A möss. I vår erfarenhet, den kliniska presentationen av sjukdom hos andra musmodeller av ALS, som med litet antal kopior SOD1-G93A mus 14 eller TDP-43 mus 15,16, är annorlunda än i stort antal kopior SOD1-G93A möss och detta NS-system kan vara illa lämpade för dessa modeller. Således är det viktigt att bestämma den transgena kopieantalet av möss före tilldela dem till studier och verifiera att det är lika med den för höga kopierings positiv-kontrollmöss. Oavsett, fördelarna med ossing denna neurologiska poängsystem uppväger sina begränsningar och den här videon protokoll kan fungera som en utmärkt träningsverktyg för ALS forskare.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| B6SJLTgN(SOD1G93A)1Gur strain | The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME | 002726 | Strain of mice used in this study |
| Breeders | Biomedical Research Models, Inc., Worcester, MA | Colony maintainance | |
| Scale | Navigator OHAUS, Parsippany, NJ | Model N14120 | Used to weigh mice |
| Nutra-GelH | Bio-Serv, Flemington, NJ | #S4798 | Wet food provided to sick mice |
| Irradiated Lab Animal Diet | Harlan, Indianapolis, IN | 2918-111914M | Chow diet |
| Lab-grade Sani-chips | Harlan Teklad, Indianapolis, IN | 7090 | Bedding |
| JMPH | SAS Institute, Inc., SAS Campus Drive, Cary, NC | v10.0.2 | Statistical software |
| Microsoft Excel | Microsoft, One Microsoft Way, Redmond, WA | Excel 2013 (v 15.0) | Spreadsheet software |
| GraphPad Prism 5 | GraphPad software Inc., La Jolla, CA | v5.4 | Graphing software |
| Mouse Huts | Bio-Serv, Flemington, NJ | K3272 | For environmental enrichment |
References
- Gurney, M. E., et al. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Rosen, D. R., et al. Mutations in Cu/Zn superoxide dismutase gene are associated with familial amyotrophic lateral sclerosis. Nature. 362 (6415), 59-62 (1993).
- Gurney, M. E. The use of transgenic mouse models of amyotrophic lateral sclerosis in preclinical drug studies. J Neurol Sci. 152, Suppl. 1 (6415), (1997).
- Scott, S., et al. Design, power, and interpretation of studies in the standard murine model of ALS. Amyotroph Lateral Scler. 9 (1), 4-15 (2008).
- Hegedus, J., Putman, C. T., Gordon, T. Time course of preferential motor unit loss in the SOD1 G93A mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurobiol. Dis. 28 (2), 154-164 (2007).
- Gordon, T., Ly, V., Hegedus, J., Tyreman, N. Early detection of denervated muscle fibers in hindlimb muscles after sciatic nerve transection in wild type mice and in the G93A mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurol. Res. 31 (1), 28-42 (2009).
- Gurney, M. E., et al. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Kim, K., Moore, D. H., Makriyannis, A., Abood, M. E. AM1241, a cannabinoid CB2 receptor selective compound, delays disease progression in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Eur. J. Pharmacol. 542 (1-3), 1-3 (2006).
- Weydt, P., Hong, S. Y., Kliot, M., Moller, T. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport. 14 (7), 1051-1054 (2003).
- Azari, M. F., et al. Behavioural and anatomical effects of systemically administered leukemia inhibitory factor in the SOD1(G93A G1H) mouse model of familial amyotrophic lateral sclerosis. Brain Res. 982 (1), 92-97 (2003).
- Guan, Y., et al. Thiazolidinediones expand body fluid volume through PPARgamma stimulation of ENaC-mediated renal salt absorption. Nat. Med. 11 (8), 861-866 (2005).
- Savcheniuk, O. A., et al. The effect of probiotic therapy on development of experimental obesity in rats caused by monosodium glutamate. Fiziol. Zh. 60 (2), 63-69 (2014).
- Smittkamp, S. E., Brown, J. W., Stanford, J. A. Time-course and characterization of orolingual motor deficits in B6SJL-Tg(SOD1-G93A)1Gur/J mice. Neuroscience. 151 (2), 613-621 (2008).
- C, M., Gurney, M. E. A low expressor line of transgenic mice carrying a mutant human Cu,Zn superoxide dismutase (SOD1) gene develops pathological changes that most closely resemble those in human amyotrophic lateral sclerosis. Acta Neuropathol. 93 (6), 537-550 (1997).
- Wegorzewska, I., Baloh, R. H. TDP-43-based animal models of neurodegeneration: new insights into ALS pathology and pathophysiology. Neurodegener. Dis. 8 (4), 262-274 (2011).
- Hatzipetros, T., et al. C57BL/6J congenic Prp-TDP43A315T mice develop progressive neurodegeneration in the myenteric plexus of the colon without exhibiting key features of ALS. Brain Res. 1584, 59-72 (2014).
