Introduction
Двойные эмульсии состоят из капелек, отделенных от фазы несущей промежуточной несмешивающихся слоя жидкости, и представляют особый интерес из-за их потенциальных применений в промышленных, фармацевтических и биологических приложений 1. В некоторых случаях, способность инкапсулировать высокомолекулярных соединений значение в ядре двойной эмульсии в материал позволяет быть защищены и выпущен в контролируемым образом. Например, лекарственные средства могут быть инкапсулированы в условиях растворимости не подходит для внешнего жидкости-носителе 2. Кроме того, промежуточный слой масло можно использовать в качестве шаблона для капсулы инкапсуляции и доставки лекарств, косметики и питательных веществ 3. В биологии, двойные эмульсии полезны также при высокопроизводительного скрининга, поскольку они позволяют массовый количество суб-нанолитровых экспериментов, которые будут проводиться, то обнаруживается, и сортируются с помощью флуоресцентного активированного сортировки клеток (FACS) инструмент 4,5.
ENT "> Конструкция двойных эмульсий с желаемыми рабочими характеристиками требует точного контроля двойного размера эмульсии, состава и однородности. Несмотря на то, сыпучие процессы эмульгирования, такие как мембраны эмульгирования, используются в промышленности, в результате эмульсии обладают высокой полидисперсных, демонстрируя Широкий выбор функциональных свойств 1. Поле капель микрофлюидики естественно подходит поколение монодисперсных эмульсий с тщательно контролируемым составом 6. Микрожидкостных дважды поколение эмульсия была достигнута с двумя основными стратегиями, делая последовательный падение и потока стеклянный капилляр фокусировки. Двойные эмульсии могут генерироваться в плоских PDMS устройств, использующих двухступенчатую падение решений. Во-первых, водно-в-масле создаются с использованием типа вода-в-масле падение решений область устройства с гидрофобными стенками канала. Далее, эмульсия может быть текла или закачиваться в раскрывающемся решений регионе с гидрофильными стен подходят для масла в водепадение решений 4. Однако, гидрофильные обработка поверхности PMDS требует дополнительной стадии изготовления и часто временный 7. Наиболее управляемым и воспроизводимым способом образовывать двойные эмульсии является соосным поток фокусировки, метод впервые использованием стекл нного капилл микрофлюидики, в результате чего концентрический струи, содержащий три фазы сдвигается через небольшое отверстие, чтобы произвести монодисперсных капель 8. Этот метод позволяет для производства капель значительно меньше, чем размеры каналов, с точным размером и составом двойной эмульсии является функцией скорости потока каждой фазы. Большое различие между каплей и размера канала и защитного наружного кожуха предотвращает поток капель от контакта стенок канала, что делает ненужным обработку поверхности. Тем не менее, такие стеклянные приборы требуют специального изготовления конических советы капиллярных, наряду с тщательной сборки и герметизации. Предыдущие исследователи использовали 3D мягкую литографиюграфии для создания двойных эмульсий, используя поток фокусировки физику, но эти устройства производятся эмульсии с диаметром> 150 мкм 9,10, примерно на порядок больше, чем обычно, отсортированных объектов с FACS. Привлекательной альтернативой будет включать надежную функциональность и малой генерации капель стеклянной капиллярной коаксиального потока фокусировки с легкостью производства PDMS мягкой литографии.В этой статье мы опишем, двойной эмульсии генератор, который использует коаксиальный поток фокусировки для получения ≤ 50 мкм эмульсий и построен полностью с помощью 3D мягкую литографию 11. Наше устройство использует раскладушка подход изготовить устройства, которые включает в себя небольшой сдвига канала (рисунок 1) для аппроксимации процессов формирования эмульсии в вытащил стекло капиллярного сопла. Более того, эти устройства не требуют специального лечения поверхности, и все полимеры конструкция обеспечивает легкий и повторяемость изготовления подкожноalable к большому количеству одинаковых устройств. Здесь мы приводим дизайн, изготовление и тестирование генератора двойной эмульсии. Двухместный поколение эмульсия показано, надежный и повторяемый до диаметра капель от 14 мкм. Сочетание функциональности с легкостью изготовления делает это устройство привлекательным вариантом для развития новых двойных приложений эмульсии.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. SU8 Мастер Изготовление
- Дизайн микрожидкостных структуры для двух изготовления слоя с использованием программного обеспечения AutoCAD и имеют дизайн печатных по поставщику по плате фильма с разрешением 10 мкм. Детали конструкции прибора приведены в приложенной ссылкой 11 и канал геометрии показано на рисунке 1. Слои должны включать меток выравнивания, чтобы помочь располагать функции от каждого изготовления слоя 12.
- Поместите предварительно очищены 3-дюймовый диаметр кремниевой пластины на спин нанесения покрытий и включите вакуум, чтобы прикрепить его к патрона. Применение по 1 мл SU8-3035 в центре пластины и спина в течение 20 сек при 500 оборотах в минуту, то 30 сек при 2000 оборотов в минуту, обеспечивая толщину слоя 50 мкм.
- Удалить пластины и выпекать на 135 ° C плитке в течение 30 мин. Разрешить пластина для охлаждения до комнатной температуры, прежде чем перейти к следующему шагу.
- Expose покрытого пластины для 1-го слоя маски (рис 2А
- Поместите пластину на спин нанесения покрытий и включите вакууме, чтобы прикрепить его к патрона. Применение по 1 мл SU8-2050 в центре пластины и спина в течение 20 сек при 500 оборотах в минуту, то 30 сек при 1375 оборотах в минуту, в результате чего слой, который обеспечивает дополнительную толщину 135 мкм.
- Снимите пластину и испечь на 135 ° C плитке в течение 30 мин, затем охлаждают до комнатной температуры, прежде чем перейти к следующему шагу.
- Совместите 2-й слой-маску (рис 2B) на геометрии рисунком в 1,3 и выставить пластины с покрытием в коллимированный 190 мВт, 365 нм LED в течение 3 мин. После экспозиции, поместите на 135 ° C плитке в течение 1 мин, затем охлаждают до комнатной температуры, прежде чем приступать к следующему шагу.
- Разработка маски путем погружения в ванну с перемешиваемой пропиленгликоля ацетате монометилового эфира в течение 30 мин. Вымойте пластинув изопропаноле и выпекать на 135 ° C плитке в течение 1 мин. Поместите разработанный мастер в 100 мм чашки Петри для PDMS литья.
2. Изготовление устройства PDMS
- Подготовка 10: 1 PDMS путем объединения 50 г силиконовой базе 5 г отвердителя в пластиковую чашку. Смешайте содержимое с помощью роторного инструмента, оснащенного перемешивающим палки. Дегазации смеси внутри эксикаторе в течение 30 мин, или пока все пузырьки воздуха не будут удалены.
- Вылейте PDMS, чтобы дать толщину 3 мм над мастером и поместить обратно в эксикаторе в течение дальнейшего дегазации. После того как все пузырьки удалены, выпекать устройство при 60 ° С в течение 2 ч.
- Вырезать устройство от формы с помощью скальпеля и место на чистой поверхности с узорными стороной вверх. Вырезать форму PDMS в половине с лезвием отделить Master 1 из 2 Мастер (рис 3а). На кусок, содержащей геометрию обработки 50 мкм жидкости отпечаток Учителем 1, удар жидкостного входы и выходы с 0,75 мм биопсии удар.
- Плазменные лечения устройства в 1 мбар O 2 плазмы в течение 60 сек в 300 Вт для очистки плазмы. Влажный поверхность без отверстий кусок PDMS с каплей дистиллированной водой, чтобы временно замедлить PDMS-PDMS склеивания и служить в качестве смазки. При просмотре через стерео микроскоп, место Мастер 1 Мастер на 2 поверхности и сдвиньте поверхностей относительно пока механический замок не будет достигнута, когда углубленные рамы и выступающие кадров в рисунке 3А партнера.
- Поместите устройство в 60 ° C духовку и выпекать собранном устройстве (Фиг.3В) в течение двух дней при 60 ° С для выпаривания воды и полного сцепления.
3. Подготовка реагентов
- Заполните 1 мл шприц с дистиллированной водой для внутренней фазы.
- Заполните 1 мл шприц с HFE 7500 фторированного масла с 1 мас. % Поверхностно-активного вещества поверхностно биосовместимый 13 для средней фазы.
- Заполните 10 мл шприц с 10 мас. % Полиэтилене (ПЭГ) в воде раствора, содержащего 1 мас. % Твин 20 и 1 мас. % Додецилсульфата натрия для непрерывной фазе.
4. Подготовка системы
- Поместите микрожидкостных фишку на стадии инвертированного микроскопа в сочетании с цифровой камерой, способной <100 мкс выдержках.
- Установите все шприцы шприцевые насосы и приложите 27 г иглы. Прикрепите ~ 30 см длины ПЭ-2 трубки на иглах и вставьте концы в соответствующий ударил отверстия в устройстве.
- Вставка 10 см длины ПЭ-2 в выходное отверстие устройства и другой конец шланга в контейнер сбора отходов.
- Премьер-устройство, выполнив шприцевые насосы на высоких скоростях скоростей (2,000 мкл / мин), пока жидкость в сегментах труб достигает впускные отверстия устройства.
5. Эмульсия поколения
- Фокус микроскопа от региона, который содержит 50 мкм х 50 мкм отверстием иниже выхода канала.
- Установить шприцевые насосы, чтобы доставить жидкость в генератор двойной эмульсии при расходе 250 мкл / ч в течение внутренней фазы, 100 мкл / ч в течение средней фазы и 700 мкл / ч в течение непрерывной фазе и ждать 10 минут для уравновешивания.
- Поддержание скорости потоков внутренней и средней фазы при 250 мкл / ч и 100 мкл / ч, соответственно. Установите скорость потока внешней фазе при 1050 мкл / ч. Подождите 3-5 минут для генерации дважды эмульсии для стабилизации при этом наборе условий потока.
- Приобретать 5 сек видеоизображений при 30 Гц для автономной обработки через ручной анализ изображения.
- Повторите 5.3 и 5.4 с расходом, приведенным в таблице 1. Внутренний и средний расход фазовые остаются неизменными, а скорость потока фазы несущей изменяется путем изменения настройки в шприцевой насос.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Генератор двойной эмульсии состоит из коаксиального потока фокусировки устройства, созданного с помощью 3D PDMS изготовления (Рис. 1А) Геометрия позволяет, что формирование трехфазного коаксиального струи в быть стриженой в квадрат, 50 мкм х 50 мкм отверстие, что позволяет формирование вода / масло / вода двойного эмульсий (рис 1B, 1C Рисунок). Внутренний водную фазу и фазу со средним масла объединяются в соединении с размерами канала 10 мкм х 50 мкм (рис 1D, точка "1"). Из-за гидрофобности PDMS, фторированные масла обнимает стенках канала и внутренней фазы остается в центре канала, как жидкостей путешествовать в непрерывном струи, пока внезапное расширение канала расширение не будет достигнута (рис 1D, точка "2" ). В этом месте, внутренние две фазы вводили в центре высокой железнодорожный узел 320 мкмции, что позволяет относительно концентрическую введение водной фазы несущей. Три фазы вынуждены в х 50 мкм отверстие 50 мкм (рис 1D, точка "3"), в результате чего высокая скорость потока фазы несущей ножницы внутренние две фазы в длинной тонкой усиком, что разлагается в единых капель ( Рисунок 1E).
Изготовление 3D PDMS требует соединение двух уникальных форм PDMS в конфигурации раскладушки после формования на два слоя литографических мастеров. Высокий слой 50 мкм используется для формирования внутреннего и среднего жидкости каналов обработки, вместе с сдвига отверстия на Master 1 (2А), вместе с бесплатной выступающих и углубленных кадров на противоположных мастер. Дополнительный слой высотой 135 мкм используется для создания несущей жидкости и выходных каналов (рис 2b). Ассамблея генератора двойной эмульсии используется тон утоплен и выступающие кадров (рис 3а) для геометрической выравнивание после плазменной обработки (рис 3B).
Устройство двойной эмульсии испытывали при различных условиях потока, чтобы продемонстрировать формирование различного размера, монодисперсных двойных эмульсий. В этих экспериментах, внутренний и средний расход фазовые оставались постоянными, а скорость потока фазы несущей был изменен, чтобы воздействовать на усилие сдвига во капель поколения. Экспериментальные условия параметризуются отношением фазы несущей потока (Q в) суммы внутренних потоков двух фаз (Q) сумму. Изображения генерации капель для экспериментов, проведенных на Q C / Q сумме от 3 до 57, показаны на рисунке 4. Удлиненный участок, содержащий внутренние две фазы наблюдается выступать в 50 мкм х 50 мкм отверстием и перерывов на капли, которые convected вниз по течению. яncreasing поток фазы несущей (увеличение Вопрос с / Q сумма) приводит к внутренние фазы стригут в постепенно более тонких областей, которые производят мелкие капли. Двойные эмульсии, полученные с помощью устройства при различных скоростях потока показывают средний коэффициент вариации диаметров 5,2%. Гистограммы диаметров капель для некоторых значений Q C / Q суммы также показывают относительную однородность в размере капель, генерируемых (рисунок 5). Устройство демонстрирует способность образовывать двойные эмульсии значительно меньше ширины отверстия, и показывает четкое тенденцию к снижению с повышенной Q C / Q суммы (рисунок 6). В высокой несущей фазы потока испытания, 14 мкм двойные эмульсии были сформированы с использованием х 50 мкм отверстие 50 мкм.
Рисунок 1. Геометрия doublе эмульсии генератор. (А) 3D модель изготовленного устройства. (Б) вертикальное поперечное сечение центрального канала, показывающий введение внутренний (серый), среднего (красный), и носители (синие) фазы. (С) Сечение показывает струю, содержащий внутренние две фазы, поступающих квадратный отверстие. (D) Вид сверху поколения эмульсии в устройстве. В соединении (1) впрыск гидрофобной фазы среднего способствовало гидрофильных PDMS, что вызывает его, чтобы покрыть стенки канала. В соединении (2) канал расширяется и струя внутренних два этапа сдвигается в отверстие (3), более высокой скорости потока непрерывного жидкости в точке, где образование физика причиной капель. (Е) Микроскоп образ двойного поколения эмульсии в устройстве. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры. </ P>
Рисунок 2. литографическая производство мастеров. (А) Маска используется для приготовления 50 мкм функций. Мастер 1 используется для формования жидкостных входы, внутренний / средняя фаза перехода, отверстия поколение эмульсии и встраиваемые корыто для выравнивания. Мастер 2 содержит повышенную хребет, используемый для выравнивания. (В) Маска используется для приготовления 135 мкм функций. Мастера являются зеркальными отражениями, которые содержат каналы маршрутизации несущей жидкости и выходной канал. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 3. Ассамблея устройства PDMS. (
Рисунок 4. Изображение генерируемых двойных эмульсий при различных скоростях потока. Скорость потока внешней фазе изменяется для изменения Q C / Q сумму, которая дана в левой части каждого изображения. Повышение Q C / Q сумму сужает струя внутренних жидкостей стригут через отверстие, создавая более мелкие капельки. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 5. Гистограммы двойных эмульсионных капель размером при различных скоростях потока. Средний коэффициент вариации диаметра капель эмульсии, произведенных в данном наборе условий потока составляет 5,2%. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 6. диаметром капель против нормированной параметра расхода. Регулировка расхода непрерывной фазы позволяет получать двойные эмульсии, которые на 30% -100% от диаметра отверстия. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Таблица 1. Параметры РАСХОД, используемые для экспериментов. Внутренняя фаза и расхода средней фазе (Q, Q м) остаются неизменными, что дает постоянную скорость объединенного потока (Q сумму). Скорость потока фазы несущей (QC) изменяется для получения двойных эмульсий с различными диаметрами. Отношение Q C / Q сумма основной безразмерный параметр, описывающий экспериментальные условия.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Двойной геометрия эмульсии генерирующая описано здесь предназначен для имитации физики стекло капиллярных устройств 8. В них, стеклянные капилляры выровнены цилиндрические используются для создания трехфазного коаксиального струи, что сдвигается на одинаковые капель двойной эмульсии. Функция нашего устройства 3D PDMS зависит от центральной выравнивания небольших функций, образованных с 50 мкм высотой изготовления с измерениями фазы несущей каналов, которые 320 мкм общей высоты. Существует значительный потенциал для дезориентацию в более высоких возможностей по образцу маски слоя 2-й на этапе 1.7 по отношению к высокой геометрии 50 мкм, если маски не точно выровнены. Правильное выравнивание может быть оказана помощь по проектированию меток выравнивания, например, концентрических окружностей в масках, чтобы быть со-расположенных во фото паттерна. Плазма склеивание двух половинок PDMS устройства является второй процесс, что может привести к значительным перекосам конечного устройства. Плазменные склеиванияиз PDMS в PDMS, как правило, мгновенно, поэтому в шаге 2.4 мы опишем смачивание поверхности устройства с дистиллированной водой, чтобы замедлить соединение и позволяют манипулировать таким образом, что выравнивание кадров, показанные на рисунке 3А может быть допущен к блокировки. Если это попытка без достаточных смачивания, то PDMS поверхности будут необратимости связь до вступления в надлежащее выравнивание и устройство должно быть утилизированы и новые формы PDMS сделал.
Устройство двойной эмульсии предназначен, чтобы воспользоваться методах изготовления, что это приведет к равномерно гидрофобные свойства поверхности. Тем не менее, операция за пределами параметров, описанных в протоколе требует понимания необходимых жидкостных процессов. Стыке внутреннего и среднего фаз (рис 1D, точка "1"), относительно высокий поток внутренней фазы и низкой потока средней фазе создания двухфазной струи на, с гидрофобным среднюю фазу покрытие стенок канала. Еслипропорциональная поток средней фазе увеличивается, поколение дискретных капель вода-в-масле начнет происходить, устраняя возможность сформировать согласованную трехфазный самолет для образования капель в отверстие (рис 1D, точка "3" ). После расширения канала (рис 1D, точка "2"), значительное количество фазы несущего потока требуется для создания геометрической расстояние между средней фазе и гидрофобных стенок канала. Сокращение фазы несущей потока в конечном итоге приведет к средней фазе смачивания гидрофобных стен устройств. Значительные сокращения фазового потока носителя может создать условия потока, которые недостаточно, чтобы стричь внутренние фазы в длинной, тонкой нитью, таким образом, радикально изменить физику формирования двойной эмульсии капелек.
После того, как построен, это устройство предназначено для получения двойных эмульсий с 14 по 50 мкм, удобный размер для сортировки с использованием коммерческих FACSинструменты. Если двойной эмульсии за пределами этого диапазона размера желательно, размеры диафрагменные должны быть расширены с размером 50 мкм х 50 мкм, используемого здесь. Поскольку устройство предназначено для получения вода / масло / вода двойные эмульсии с равномерно гидрофобных свойств поверхности, масло / вода / масло двойные эмульсии не может создано, если не было поверхностная обработка применяется, чтобы сделать устройство равномерно гидрофильной.
Эта работа показывает, легко изготовить PDMS устройство, способное прочной формирования вода / масло / вода двойного эмульсий. Хотя предыдущие исследователи сообщили об образовании двойных эмульсий в устройствах, созданных с использованием 3D литографии 14,15, двойные эмульсии, образующиеся в своих устройствах имели диаметр, которые были измерены в 100s в мкм. Устройство сообщили здесь подходит для производства двойные эмульсии на порядок меньше, чем это, обеспечивая объемы подобные клетки млекопитающих и хорошо подходит для сортировки по ФАCS.
Хотя эти результаты могут также быть достигнуты с помощью стеклянного капилляра Microfluidics, изготовления стеклянных устройств является трудоемким и требует много рук-на шаги на устройство. Для всех наших PDMS устройства, изготовление в значительной степени состоит из литья, сварки, и выпечка PDMS плит, процессов, которые просты, повторяемых и легко масштабироваться до больших чисел.
Полезность литографически сфабрикованному устройства для генерации двойных эмульсий, используя Коаксиальная потока фокусировки была продемонстрирована. Мы надеемся, что просто изготовление и надежная функциональность этой двойной конструкции эмульсии генератора должно привести к его адаптации для научных и промышленных применений. Следователи ранее отпугивает специализированными навыками, необходимыми для работы в стеклянной капиллярной микрофлюидики, должны быть более комфортно, используя мягкую PDMS литографии, сейчас общий метод лабораторной. Кроме того, небольшие размеры капель, которые могут быть получены хорошо подходит для perforм клеток и биологических анализов в каплях, и количественная и сортировки, используя FACS. Для промышленных применений, это уже было показано, что эти типы устройств могут быть изготовлены в массивы и распараллеливание 10, что позволяет двойные ставки поколения эмульсии увеличится на порядок величин по сравнению с одиночными устройствами. Кроме того, способность к образованию небольших двойных эмульсий в больших коаксиальным потоком упором каналов должны сделать устройство устойчивость к загрязнению и засорению, что особенно важно при параллелизации устройства, предназначенные для работы в течение длительного времени без вмешательства.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Эта работа была поддержана премии исследований в Калифорнийском институте количественных биологических наук (QB3), в преодолении разрыва премии от Rogers Family Foundation, программы Фонда UCSF / Сандлер для прорыва биомедицинских исследований, грант от компании BASF, и NSF через Факультет раннего развития карьеры (Карьера) Программа (DBI-1253293).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Photomasks | CadArt Servcies | ||
| 3" silicon wafers, P type, virgin test grade | University Wafers | 447 | |
| SU-8 3035 | Microchem | Y311074 | |
| SU-8 2050 | Microchem | Y111072 | |
| Sylgard 184 silicone elastomer kit | Krayden | 4019862 | |
| 1 ml syringes | BD | 309628 | |
| 10 ml syringes | BD | 309604 | |
| 27 gaugue needles | BD | 305109 | |
| PE 2 polyethylene tubing | Scientific Commodities, Inc. | B31695-PE/2 | |
| Novec 7500 | Fisher Scientific | 98-0212-2928-5 | Commonly knowns as HFE 7500 |
| Biocompatable surfactant | Ran Biotechnologies | 008-FluoroSurfactant | |
| 35,000 MW PEG | Sigma Aldrich | 1546660 | |
| Tween 20 | Sigma Aldrich | P1369 | |
| Sodium dodecyl sulfate | Sigma Aldrich | L3771 |
References
- Van Der Graaf, S., Schroën, C. G. P. H., Boom, R. M. Preparation of double emulsions by membrane emulsification - A review. J. Membrane Sci. 251 (1-2), 7-15 (2005).
- Laugel, C., Baillet, A. P., Youenang Piemi, M., Marty, J., Ferrier, D. Oil-water-oil multiple emulsions for prolonged delivery of hydrocortisone after topical application: comparison with simple emulsions. Int. J. Pharm. 160 (1), 109-117 (1998).
- Kim, S. H., Kim, J. W., Cho, J. C., Weitz, D. A. Double-emulsion drops with ultra-thin shells for capsule templates. Lab Chip. 11 (18), 3162-3166 (2011).
- Lim, S. W., Abate, A. R. Ultrahigh-throughput sorting of microfluidic drops with flow cytometry. Lab Chip. 13 (23), 4563-4572 (2013).
- Bernath, K., Hai, M., Mastrobattista, E., Griffiths, A. D., Magdassi, S., Tawfik, D. S. In vitro compartmentalization by double emulsions: sorting and gene enrichment by fluorescence activated cell sorting. Anal. Biochem. 325 (1), 151-157 (2004).
- Seemann, R., Brinkmann, M., Pfohl, T., Herminghaus, S.
- Bauer, W. A. C., Fischlechner, M., Abell, C., Huck, W. T. S. Hydrophilic PDMS microchannels for high-throughput formation of oil-in-water microdroplets and water-in-oil-in-water double emulsions. Lab Chip. 10 (14), 1814-1819 (2010).
- Utada, A. S., Lorenceau, E., Link, D. R., Kaplan, P. D., Stone, H. A., Weitz, D. A. Monodisperse double emulsions generated from a microcapillary device. Science. 308 (5721), 537-541 (2005).
- Chang, F. C., Su, Y. C. Controlled double emulsification utilizing 3D PDMS microchannels. J. Micromech. Microeng. 18 (6), 065018 (2008).
- Romanowsky, M. B., Abate, A. R., Rotem, A., Holtze, C., Weitz, D. A. High throughput production of single core double emulsions in a parallelized microfluidic device. Lab Chip. 12 (4), 802-807 (2012).
- Tran, T. M., Cater, S., Abate, A. R. Coaxial flow focusing in poly(dimethylsiloxane) microfluidic devices. Biomicrofluidics. 8 (1), 016502 (2014).
- Lithography. , Available from: https://www.memsnet.org/mems/processes/lithography.html (2015).
- O'Donovan, B., Eastburn, D. J., Abate, A. R.
- Chang, F. C., Lin, H. H., Su, Y. C. Controlled W/O/W double emulsification in 3-D PDMS micro-channels. 3rd IEEE Int. Conf. Nano/Micro Eng. Mol. Syst. NEMS, , 792-795 (2008).
- Romanowsky, M. B., Abate, A. R., Rotem, A., Holtze, C., Weitz, D. A. High throughput production of single core double emulsions in a parallelized microfluidic device. Lab Chip. 12 (4), 802 (2012).
