Summary
يصف بروتوكول التالية طريقة جديدة لإعطاء الدواء عن طريق الفم المزمنة باستخدام الشريط حل عن طريق الفم (ODS) بدلا من طريقة أنبوب تغذية عن طريق الفم أكثر شيوعا. علينا أن نبرهن على ما قبل السريرية، عن طريق الفم تسليم المخدرات باستخدام أسلوب المواد المستنفدة للأوزون يمثل بديلا آمنة ومريحة، وإنسانية للتسمين عن طريق الفم.
Abstract
مطلوب قبل اختبار علاجات جديدة في البشر، قصيرة وطويلة المدى قبل السريرية (أي الحيوانات)، الدوائية المتكررة واختبار السمية. في معظم الحالات، وهو الطريق المفضل للإدارة هو عن طريق تسليم عن طريق الفم. في الوقت الحاضر، والتسليم عن طريق الفم ويتم إنجاز معظمها باستخدام إجراء أنبوب تغذية عن طريق الفم، في جزء منه، لأنه لا يمكن تحقيق الجرعات متسقة ودقيقة في نموذج حيواني. على الرغم من أن يتم تأسيس هذه الطريقة أيضا أنها لا تملك المضاعفات التي يمكن أن تؤدي إلى ارتفاع معدل الاستنزاف الحيوان. تحقيقا لهذه الغاية، وإجراء عرض هنا يصف بديلا للطريقة أنبوب تغذية عن طريق الفم التي تأسست الدواء المطلوب في منبهة للذوق، حل شفويا قطاع (ODS) التي يمكن ببساطة أن تقدم للحيوان الاختبار حيث يتم بعد ذلك اتخذت بسرعة هذا الامر مع التلاعب الحد الأدنى للموضوع اختبار. هنا، علينا أن نبرهن على ما قبل السريرية، عن طريق الفم تسليم المخدرات باستخدام أسلوب المواد المستنفدة للأوزون يمثل العبوة البديلة آمنة ومريحة، وإنسانيةrnative للتسمين عن طريق الفم.
Introduction
من أجل ترجمة ناجحة للدواء من قبل السريرية (التجارب على الحيوانات) إلى التطوير السريري، سلسلة من جيدا تعريف، هناك حاجة لدراسات الدوائية والسمية الحادة والمزمنة التي يتعين القيام بها في النماذج الحيوانية باستخدام الطريق السريري المقصود من إدارة (والذي هو عادة طريق الفم). لتحقيق هذا الهدف، فإن معظم الدراسات ما قبل السريرية تستخدم حاليا إجراء أنبوب تغذية عن طريق الفم نظرا إلى أن نتائج هذه الطريقة في تسليم ثابت ودقيق لمجمع اختبار للحيوان. ومع ذلك، في كثير من الحالات، أنبوب تغذية عن طريق الفم امر لا يمكن تحمله بشكل جيد من قبل الحيوان وتشير الأدلة المتراكمة التي يرتبط الأسلوب مع قدر كبير من التوتر تحريض 1.
وهذا ينطبق بشكل خاص في تطوير علاج لأمراض مدى الحياة المزمنة التي تتطلب الدراسات قبل السريرية على المدى الطويل، مثل هو الحال مع، ولكن ليس على سبيل الحصر، كل اضطراب العصبية تقريبا. لانسtance، في نموذج الفأر وراثيا لمرض الزهايمر، اقترح مؤخرا أن طريقة أنبوب تغذية نفسها يمكن أن يربك النتائج التجريبية بسبب الجرعات التوتر الناجم عن 2. وبالمثل، في نموذج الفأر من استهلاك الكحول، وقد وجدت نتائج غير منشورة من المختبرات الخاصة بنا أن الإدراج المتكرر لأنبوب أنبوب تغذية - في حد ذاته - يمكن أن تقلل بشكل كبير من مستوى تناول الكحول إلى حد يهدد سلامة التجريبية النموذج (انظر الشكل 1).
ونظرا لمحدودية المذكورة آنفا المرافقة لهذا الإجراء أنبوب تغذية عن طريق الفم، وقد بذلت جهود كبيرة من أجل تطوير طرق جديدة لتوصيل الدواء عن طريق الفم قبل السريرية. وتشمل النهج البديلة الحالية دمج مجمع الاختبار في خليط من زبدة الفول السوداني 3، وقوالب هلامية 4-5، والكريات الشوكولاته 6، 7 المياه، والمفرقعات ويفر 8 الشرب، وكلها associATED مع درجة من القضايا بما في ذلك عجز متفاوتة لاستخدامها بشكل صحيح في نموذج حيواني، وعدم اعتماد امتصاص اختبار مركب من موضوع اختبار أو تفضيل الفرد للنكهة التي تجعل من المخدرات بسرعة أقل يستهلك 9.
الإجراء قدم هنا يصف الطريقة التي يتم تضمينها الدواء المطلوب في النكهة، حل شفويا قطاع (ODS) التي يمكن أن تكون بسهولة وبسهولة أن تستخدم لإدارة شفويا مجمع اختبار للحيوان الاختبار. وتركز هذه الورقة على إثبات فعالية من الأسلوب المواد المستنفدة للأوزون باستخدام الفئران. ومع ذلك، ليس هناك سبب للاعتقاد بان نفس الأسلوب لن يكون مفيدا في مكافحة القوارض الأخرى وكذلك المواد الثدييات الكبيرة أيضا. سريريا، واستخدام المواد المستنفدة للأوزون هو بداية لاعتمادها في طب الأطفال المرضى والمسنين، باعتبارها وسيلة للتغلب على صعوبات البلع 10. نقترح أن المواد المستنفدة للأوزون ويمكن أيضا أن تستخدم بنجاح في برامج اكتشاف العقاقير قبل السريرية باعتبارها آمنة ومريحةوالبديل الإنساني للتسمين عن طريق الفم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وقد تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي وصفها اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) من جامعة جنوب كاليفورنيا.
1. التعامل مع الحيوان والتعويد
- المقدمة
- السماح الفئران ليتأقلم مع الظروف تربية الحيوانات والتعامل مع تقنية التجربة لخفض التوتر خلال إجراءات إدارة المخدرات التي تلت ذلك. خلال هذا الوقت، تسجيل وزن الجسم وتناول الطعام من كل فأر. إذا رغبت في ذلك، فإنها يمكن أن تستخدم لاحقا كنقطة غير الغازية للمقارنة لتقييم سمية الدواء (اختياري). ويمكن أيضا أن تستخدم في السابق لتحديد القائمة على الوزن المخدرات الجرعات.
ملاحظة: الروايات المتناقلة، ينبغي أن تحدد طول فترة التعود على أساس عدد من المجربون التفاعل مع الحيوانات. في تجربتنا، وقد لوحظ الفئران من سلالة / 6J C57BL لديك مشكلة في التعود على التعامل مع أكثر من ~ 5 أشخاص داخل لدينا نموذجية فترة التعود على مدى أسبوع. إذا كان ذلك ممكنا،ويتم تشجيع مجرب (ق) أيضا على الامتناع عن استخدام المستحضرات المعطرة، والصابون، والعطور قبل التعامل مع الحيوانات كما تشير التقارير السابقة محفزات جديدة، مثل الروائح، قد تعوق فترة التعود 11.
- السماح الفئران ليتأقلم مع الظروف تربية الحيوانات والتعامل مع تقنية التجربة لخفض التوتر خلال إجراءات إدارة المخدرات التي تلت ذلك. خلال هذا الوقت، تسجيل وزن الجسم وتناول الطعام من كل فأر. إذا رغبت في ذلك، فإنها يمكن أن تستخدم لاحقا كنقطة غير الغازية للمقارنة لتقييم سمية الدواء (اختياري). ويمكن أيضا أن تستخدم في السابق لتحديد القائمة على الوزن المخدرات الجرعات.
- خطوات
- بداية قبل 5 أيام على الأقل من بدء الدراسة، ونقل الحيوانات إلى الغرفة التي سوف تحدث في تجارب لاحقة.
- سجل وزن الماوس عن طريق الامساك بقوة منتصف الذيل ورفع بلطف الحيوان من القفص وفي قارب وزنه.
- ضع الماوس على نطاق وبمجرد رفعه من cagekeeping في الاعتبار لفهم صحيح الجانب الأنسي / القريبة من الذيل، لتجنب وقوع اصابات لحب، والتي يمكن أن تحدث عند استيعاب الجانب الأعلى من الذيل 12.
- تسجيل القيمة الوزن مرة واحدة على الماوس تم وضعها بأمان في وزن القارب.
- سجل وزن الطعام لRECOMأوصت 2 أيام متتالية، وذلك لتحديد مستويات استهلاك المواد الغذائية الأساسية التي من شأنها مساعدة في القبض على سمية محتملة خلال تجربة 13.
2. إعداد إبرة التغذية، السكروز الحل، والفرد المواد المستنفدة للأوزون
- استخدام الأوتوكلاف لتعقيم الإبر غير القابل للصدأ الصلب أنبوب تغذية في التحضير لهذه التجربة. إعداد 2 الإبر / مجموعة و1 إبرة إضافية لاستخدامها احتياطية إذا لزم الأمر.
ملاحظة: استخدمت هذه الدراسة 1.5 بوصة، منحنية، 18 G، الفولاذ المقاوم للصدأ تغذية إبرة مع كرة 2.25 ملم في نهاية الإبرة. - إضافة 20 مل من الماء إلى 0.85 غرام من السكروز إلى إنشاء 4.25٪ (ث / ت) حل السكروز.
ملاحظة: اعتمادا على المعلمات قيد التقييم الجرعات المنخفضة غيرها من السكروز يحتمل أن تستخدم أيضا 14. - إعداد الشريط تذويب عن طريق الفم (ODS) لكل حيوان عن طريق خفض قياسي شريط الاختبار مستطيلة في قطعة وهذا هو 0.5 سم بوصة في القطر لناجي متوفر تجاريا ربع واحد بوصة حفرة الناخس. وقد وضعت شريط الاختبار مستطيلة المستخدمة في هذه المظاهرة لاحتواء 6 ملغ من بالإيفرمكتين (IVM)، وعندما قطع لهذا الحجم، يخصص جرعة 0.21 ملغ لكل قطعة دائرية الفردي يقارب 10 ملغ / جرعة كغ لكل حيوان (لدينا المطلوب الجرعة / حيوان). هذه الجرعة يمكن تعديلها من خلال التركيز / تمييع صياغة الشاملة على قطاع مستطيلة و / أو قطع الشريط في حجم مختلف.
3. المخدرات - تسليم
- تسجيل القيم الوزن كما هو موضح سابقا في خطوات 1،1-1،2.
- بعد تسجيل الوزن، وتحريك الماوس إلى الأعلى معدن شبكة القفص. مرة واحدة هناك، وذلك باستخدام الإبهام السائد، السبابة، الإصبع و3 الثالثة، وسحب بلطف مرة أخرى على الذيل. وهذا سوف يسبب الماوس لعن غير قصد قبضة سلك القفص العلوي وتمتد من ظهرها، وتمتد الجسم بعيدا عن المجرب.
- فهم القفا من الرقبة مع عدم افعلالإبهام minant، السبابة، الإصبع و3 الثالثة لكبح مريح الحيوان مع قبضة التي هي أمنا.
ملاحظة: مجرب مع يد أصغر يمكن أيضا استخدام 4 إصبع عشر من نفس اليد، لسحب القفا من الخلف والحصول على عقد أكثر أمنا من الفأرة. بالإضافة إلى ذلك، اعتمادا على تفضيل الأفراد، البنصر، و / أو إصبع الخنصر ويمكن أيضا أن تستخدم لتأمين الذيل ولكن هذا ليس ضروريا 12. - عقد الماوس في وضع مستقيم.
- تحذير: لاحظ لون الأغشية المخاطية من الفأرة. والأرجواني / ظهور اللون الأزرق هو مؤشر على أن المجرب وتخبين القفا محكم جدا والفأر لا يستطيع التنفس.
- إذا حدث هذا، فورا الماوس تتراجع عن أعلى القفص المعدني والسماح لها للراحة ل~ 2-3 دقائق قبل reattempting لكبح جماح الحيوان.
- غمر طرف لمبة من الإبرة أنبوب تغذية في محلول السكروز 4.25٪ ليكون بمثابة منبهة للذوقلاصق على المواد المستنفدة للأوزون.
- اضغط لأسفل على ما قبل قطع المواد المستنفدة للأوزون مع طرف لمبة من الإبرة أنبوب تغذية إرفاق شريط حل عن طريق الفم.
- تقديم المواد المستنفدة للأوزون الماوس عن طريق وضعها بالقرب من الخياشيم و / أو الفم، والسماح للحيوان للاستهلاك الفيلم. بدلا من المواد المستنفدة للأوزون يمكن أن يتم تسليم موضعيا لتجويف الفم عن طريق وضع شريط رقيقة مباشرة على اللسان للفئران لابتلاع.
- استبدال إبرة منتصف المجموعة خلال الدورة جرعات الدواء لمنع انتشار العدوى.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
في التحقيقات النيابية التالية، كان على غرار الشرب الاجتماعي باستخدام 24 ساعة يومين زجاجة اختيار (الدرن) النموذج كما هو موضح سابقا (15). لفترة وجيزة، كان الفئران الوصول إلى زجاجتين من الحل، تضمن أحدها المياه، والآخر 10٪ (ت / ت) حل الإيثانول. تم توزيعهم لاحقا إلى مجموعة العلاج من تعاطي المخدرات بحيث كان متوسط 10E (10٪ من الإيثانول / 90٪ من المياه ت / ت) كمية مماثلة عبر مجموعات.
ويوضح الشكل (1) وآثار بالإيفرمكتين (IVM) على شرب تفضيل عند طريق الفم باستخدام سيارة تسمين. كانت هذه الدراسة التجريبية 3 مجموعات: N / A، وهمي، وIVM لا تمثل أنبوب تغذية أنبوب تغذية، زيت الذرة (السيارة)، والكساء (10 ملغ / كغ، مخففة في زيت الذرة) التزقيم على التوالي. تم علاج الفئران لمدة 10 أيام، 5 أيام متتالية في الأسبوع لمدة 2 أسابيع. كما يمكن أن نرى أدناه، كان IVM قادرة على الحد بشكل كبير 10E طntake عبر الدراسة بالمقارنة مع مجموعة الدواء الوهمي. مقارنة N / A، القيم كمية الإيثانول من المجموعة الثانية (~ 5 جم / كجم)، وكثيرا منخفضة جدا (أقل من 48٪ من N غير gavaged / مجموعة)، وبالتالي، قد لا يكون تمثيل دقيق ، أو "نموذج"، من شرب الكحوليات الاجتماعي (~ 10-15 جم / كجم). وهذا يعني أن عامل غير معروف المرافقة لهذا الإجراء أنبوب تغذية تمكن من تعرض للخطر سلامة نموذج الشرب.
ويوضح الشكل 2 نفس التجربة أجريت في وقت لاحق باستخدام نظام تسليم المواد المستنفدة للأوزون 15. وشملت الدراسة 3 مجموعات: 1) أي فيلم عن طريق الفم، 2) الجير الرئيسية النكهة الفيلم عن طريق الفم مع أي IVM و 3) الجير الرئيسية النكهة الفيلم عن طريق الفم مع IVM (0.21 ملغ، أي ما يعادل 10 ملغ / كغ تدار في الدراسة المشار إليها آنفا ) يشار إلى السيطرة، وهمي والكساء، على التوالي. تم علاج الفئران لمدة 20 يوما، 5 أيام متتالية في الأسبوع لمدة 4 أسابيع. لم يكن هناك زراعية مختلفة كبيرrence في كمية الإيثانول بين N / ألف وهمي الفئران المعالجة، مشيرا إلى أن المجموعة الثانية المواد المستنفدة للأوزون تمثل السيطرة صالحة التي يمكن بعد ذلك إجراء مقارنة للمجموعة الكساء. في اتفاق مع العمل السابق 13،15، IVM انخفاض كبير ومستمر تناول 10E.
ويرد التمثيل التصويري للتقنية في الشكل (3).
الفئران الشكل 1. السيطرة Gavaged هي غير قادر على الحفاظ على مستويات الإيثانول تناول ممثل الدرن النموذج 24 ساعة. وعولج ذكر C57BL / 6J الفئران لمدة 10 أيام (5 أيام متتالية في الأسبوع لمدة 2 أسابيع). سيارة العلاج أنبوب تغذية في المجموعة الثانية تغييرا كبيرا القيم كمية الإيثانول بنسبة 48٪ بالمقارنة مع غير أنبوب تغذية N / مجموعة. على الرغم من أن IVM انخفاض كبير في كمية 10E مقارنةهمي وأضافت قيم منخفضة السعرات 10E من المجموعة الثانية لإرباك الثاني للدراسة، التي يمكن أن يكون لها تأثير المساس فائدة مجموعة كعنصر تحكم الشرب الكافية للدراسة. الرسوم البيانية أقحم توضح متوسط كمية 10E خلال العلاج 10 يوم. وتمثل القيم يعني ± SEM ل n = 6-8 الفئران / مجموعة. +++ P <0.001 مقابل همي، و*** P <0.001 مقابل N / A، تركيا بعد المخصصة للتجارب. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2. المواد المستنفدة للأوزون علاج IVM أنثى C57BL عولج / 6J الفئران لمدة 20 يوما (5 أيام متتالية في الأسبوع لمدة 4 أسابيع). كان العلاج الوهمي المواد المستنفدة للأوزون أي تأثير كبير على كمية 10E، نسبة إلى N غير المعالجة / مجموعة، والحفاظ على validiتي واي لوهمي المواد المستنفدة للأوزون باعتبارها الرقابة الكافية الشرب الاجتماعية. انخفاض ملحوظ IVM تناول 10E مقارنة مع الشاهد وهمي. الرسوم البيانية أقحم توضح متوسط كمية 10E خلال العلاج 20 يوما. وتمثل القيم يعني ± SEM ل n = 6-8 الفئران / مجموعة. *** P <0.001 مقابل همي، اختبار تركيا بعد المخصصة .. وقد تم تعديل هذا الرقم من ياردلي وآخرون. 15 الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3. التمثيل التصويري من تسليم المواد المستنفدة للأوزون. تصوير الفوتوغرافي من هذا الإجراء. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
ويرتبط أنبوب تغذية عن طريق الفم مع العديد من المضاعفات التي تؤدي إلى جمع البيانات يحتمل شبهة وارتفاع معدلات الاستنزاف الحيوان 1. هنا هو عرض طريقة بسيطة لتوصيل الدواء عن طريق الفم من خلالها الفئران (والحيوانات الأخرى المحتملة) بسهولة وبشكل موثوق ويمكن تستهلك الدواء المفضل من خلال الشريط حل عن طريق الفم (ODS). والجدير بالذكر أن استخدام هذا الأسلوب يمثل بديلا آمنة ومريحة، وإنسانية للتسمين عن طريق الفم.
حاليا بدائل أخرى للتسمين عن طريق الفم، على الرغم من واعدة إلى حد ما، وترتبط مع مختلف القيود التي تمنعهم من تغطية مجموعة كاملة من احتياجات المرتبطة دراسات الجرعات المخدرات مثل عدم القدرة على استخدامها في الفئران، أو تفضيل الفرد للنكهة التي تجعل من المخدرات بسرعة أقل يستهلك 9. في المقابل، المواد المستنفدة للأوزون يمكن أن تصاغ في ومجموعة واسعة من النكهات التي لا تقل أهمية عن التفضيلات الفردية لنكهة يمكن أن تتغير بمرور الوقت ونكهةقد تختلف الأفضليات في مختلف السلالات والأنواع.
التعامل مع الحيوان السليم هو عنصر أساسي من هذه التقنية. تسليط الضوء على أهمية فترة التعود، تجدر الإشارة إلى أن الفأر معين قد يكون من الصعب كبح جماح إذا كان الشباب بشكل خاص أو غير معتادين على التعامل معها. أي صعوبة في إدراك الماوس يجب أن تهدأ مع مرور الوقت كما اطلع الحيوان لمعالجة ويصبح أقل خوفا من مجرب (ق). وقد لوحظ الماوس سلالة C57 يتمثل في نتائج تمثيلية لروض إلى التعامل مع الإجراءات بسرعة نسبيا (في حدود ما يقرب من 1-3 جلسات تداول). على الرغم من أن هذه المدة قد تؤجل عبر مختلف الأنواع والسلالات، وليس هناك سبب لافتراض والتأقلم الإطار الزمني سوف تتصاعد بشكل كبير. يجب الفنيين المبتدئين العمل مع القوارض أن يدرك أنه عندما وقف التنفيذ وتتدلى في الهواء لأكثر من بضع ثوان، الفئران عرضة لتطوير لحبإصابة الذيل 12. فرص هذه الزيادة تحدث مع الوزن من الفأرة وكذلك مع المواقع من ناحية، مع فهم أقرب إلى طرف الذيل من المرجح أن يسبب الاصابة. محددة في نطاق هذا البروتوكول، فمن الضروري أن الماوس يوضع على القفص أعلى الشبكة المعدنية، أو في جهاز بديل، عندما نقله من القفص لتوسيع نطاق، وكذلك في إعداد لمكافحة المخدرات والتسليم. ضبط النفس أثناء عملية تسليم المخدرات هو خطوة حاسمة أخرى في البروتوكول. يمكن أن يحدث استهلاك المواد المستنفدة للأوزون عن طريق وضع طبقة رقيقة بالقرب من الخياشيم و / أو الفم من الفأرة، وفي هذه الحالة هذا الموضوع سوف يميل إلى الأمام للاستهلاك الفيلم. بدلا من المواد المستنفدة للأوزون يمكن أن يتم تسليم موضعيا لتجويف الفم عن طريق وضع الفيلم مباشرة يدويا على اللسان عن الماوس لابتلاع.
التحقيقات التي تنطوي على تقييم المعلمات من التوتر حساسة يمكن مرتبك عن طريق استخدام الرجل القياسية يمكن بسهولة تقنيات تركيزا على ضبط النفس هو مبين في هذا البروتوكول وتعديلات بسيطة لمنهجية بذل لاستيعاب الدراسات التي يحظر ضبط النفس. في هذا النهج تعديل، يمكن أن توضع المواد المستنفدة للأوزون مباشرة في القفص لهذا الحيوان للاستهلاك. الملاحظات المستقاة من الدراسات التجريبية في مختبر الخاصة بنا تشير إلى أن هذا من شأنه أن يكون أفضل أداء عن طريق وضع الحيوانات في قفص دون أي الفراش / مواد التعشيش، فقط لمدة إجراءات تسليم المخدرات، من أجل زيادة السهولة التي استهلاك المواد المستنفدة للأوزون يمكن رصدها بالعين المجردة من قبل المجرب (ق). وعلاوة على ذلك، قد يكون من المناسب لبدء فترة التدريب وهي الفترة التي يتم تقديمها للحيوانات المواد المستنفدة للأوزون حتى يتمكنوا من التغلب على تجنب الفطري الأولي من المواد الغذائية رواية (4). بالطبع ستكون هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتحسين بروتوكول خالية من ضبط النفس لتسليم المواد المستنفدة للأوزون، ولكن ليس هناك ما يدعو للاعتقاد بأن مثل هذا الإجراء لا يمكن أن يتم بكل سهولة.
"jove_content"> هناك بعض القيود على طريقة المواد المستنفدة للأوزون. على سبيل المثال، بالنظر إلى أن المواد المستنفدة للأوزون هي حل سريع البوليمر الحيوي لاصق، والمجرب بحاجة للنظر في القضايا الامتصاص والتمثيل الغذائي في ذلك تبعا لوضع الشريط، وبعض من المخدرات يحتمل أن تجاوز تمر أولا التمثيل الغذائي نتيجة ل جزء من المخدرات يجري استيعابها عبر لسانية أو آلية الشدق. من ناحية أخرى، على الجهاز العصبي المركزي المستهدفة المخدرات، لساني أو امتصاص الشدق قد تكون ذات فائدة السماح لمزيد من مجمع للوصول إلى الهدف الجهاز العصبي المركزي قبل عملية التمثيل الغذائي. وعموما، يمكن معالجة هذه المشكلة عن طريق تغيير صياغة المواد المستنفدة للأوزون التي من شأنها أن تؤدي إلى الدواء سواء والتي لا تتوفر بسهولة حتى يتم امتصاصه عبر الأمعاء أو للاستفادة من الوصول مباشرة إلى الجهاز العصبي المركزي. بالإضافة إلى ذلك، قد الفئران تطوير مشروط النفور طعم والانسحاب من استهلاك المواد المستنفدة للأوزون الطوعي إذا كان الدواء يتسبب الآثار الجانبية مكره. على الرغم من أننا لم يلاحظ هذا في دراساتنا، واحدة قويةان طريقة الاتحاد العالمي للتعليم لتحسين هذا الوضع سيكون بالتناوب نكهة شريط الاختبار للمساعدة على إبقاء شيء من الجدة للحيوان الاختبار. وأخيرا، في تركيزات عالية قد لا تكون المواد المستنفدة للأوزون مستساغا. ومع ذلك، يمكن أيضا أن تعالج هذه المشكلة عن طريق التغييرات في صياغة حيث يتم تغليف الدواء نفسه، وبالتالي طعم لن تكون قضية، أو بدلا من ذلك، ببساطة عن طريق إدارة شرائط النكهة مختلفة، بحيث لا يزال هناك جديدا في نكهة للموضوع الاختبار .
والجدير بالذكر، من حيث إمكانية استنساخ البيانات، المواد المستنفدة للأوزون يمكن أن تصاغ على التمسك اللسان أو الخد من الحيوان ومصممة لتفكك عن طريق الفم السريع للافراج بسرعة الدواء، وبذلك يضمن ويتحقق الجرعات المناسبة. و، مع إدارة المواد المستنفدة للأوزون، والقضاء على الحاجة إلى أنبوب تغذية وغيرها من التجارب الغازية غير سارة للحيوان. هذا هو أكثر إنسانية فحسب، بل أنه يقلل أيضا من آثار الإجهاد كمتغير في التجربة. وتجدر الإشارة إلى عشرفي طريقة المواد المستنفدة للأوزون يمكن زيادة الأمثل، كما هو الحال في العديد من عمليات التصنيع الجديدة، والتي قد تزيد من تحسين الدوائية من مجمع الاختبار كما يتم توسيع المواد المستنفدة للأوزون لعلاجات إضافية. واحد القيود التي ينبغي الإشارة إلى يتعلق بحقيقة أن تطوير المواد المستنفدة للأوزون في المراحل الأولى من التنمية. القضايا المتعلقة تحميل الأدوية المختلفة مميزة الفيزيائية على منبهة للذوق / منصة المواد المستنفدة للأوزون تزال تشكل تحديا لبراعة وتعميم هذه التقنية. هذا هو مجال التحقيق الجاري.
التقنية المقترحة هي تقنية بسيطة والرواية التي يمكن اعتمادها للاستخدام في الدراسات الحيوانية قبل السريرية على المدى القصير والطويل ولإيصال الأدوية للحيوانات (على سبيل المثال، والكلاب). تسليم المخدرات من خلال المواد المستنفدة للأوزون يمثل نهجا جديدا، سريعة ومريحة وإنسانية بالمقارنة مع الأساليب التقليدية القائمة مثل أقراص، كبسولات، سوائل، مساحيق، والمواد الهلامية، وأنبوب تغذية عن طريق الفم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
وقد طبقت DD للحصول على براءة باعتباره المشارك المخترع على هذا الأسلوب، ويهتم في تقاسم هذا الأسلوب مع اللجنة العلمية لجعل هذه التقنية معروفة ومتاحة بسهولة عن التجارب على الحيوانات المزمن (التسليم عن طريق الفم الأصول المخدرات في الحيوانات المختبرية عن طريق نحو سريع حل أفلام عن طريق الفم (ديفيز، الشريك المخترع، قدم طلب البراءة 2014/6/23).
لاحظت أي مصالح مالية أخرى منافسة.
Acknowledgments
فإن الكتاب أن نعترف جيمي ثوي للعمل الفني. وأيد هذا العمل، في جزء منه، من خلال المنح البحثية SC CTSI المعاهد الوطنية للصحة / NCRR / NCATS - UL1TR000130 (DLD)، AA022448 (DLD)، وكلية الصيدلة جامعة جنوب كاليفورنيا. بالإضافة إلى ذلك، حل سريع الأفلام عن طريق الفم التي تحتوي على IVM تفضلت التي تقدمها علاج الدوائية (أوكسنارد، كاليفورنيا).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Orally Dissolving Strip | Cure Pharmaceutical | Available upon special request. Alternatively, ODS may also be prepared in-house. | |
| Gavage Feeding Needle | VWR | 7912 | Our rodent studies utilized a 18 gauge feeding needle. This size may need to be adjusted for use in other mammilian species. |
| Sucrose | Sigma Aldrich | S0389-500G |
References
- Brown, A. P., Dinger, N., Levine, B. S. Stress produced by gavage administration in the rat. Contemp Top Lab Anim Sci. 39 (1), 17-21 (2000).
- Gonzales, C., et al. Alternative method of oral administration by peanut butter pellet formulation results in target engagement of BACE1 and attenuation of gavage-induced stress responses in mice. Pharmacol Biochem Behav. 126, 28-35 (2014).
- Walker, M. K., et al. A less stressful alternative to oral gavage for pharmacological and toxicological studies in mice. Toxicol Appl Pharmacol. 260 (1), 65-69 (2012).
- Zhang, L. Voluntary oral administration of drugs in mice. Protocol Exchange: Nature Publishing Group. , (2011).
- Froehlich, J. C., Hausauer, B. J., Federoff, D. L., Fischer, S. M., Rasmussen, D. D. Prazosin reduces alcohol drinking throughout prolonged treatment and blocks the initiation of drinking in rats selectively bred for high alcohol intake. Alcohol Clin Exp Res. 37 (9), 1552-1560 (2013).
- Goldkuhl, R., Carlsson, H. E., Hau, J., Abelson, K. S. P. Effect of subcutaneous injection and oral voluntary ingestion of buprenorphine on post-operative serum corticosterone levels in male rats. Eur Surg Res. 41 (3), 272-278 (2008).
- Marx, J. O., Vudathala, D., Murphy, L., Rankin, S., Hankenson, F. C. Antibiotic administration in the drinking water of mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 53 (3), 301-306 (2014).
- Ferguson, S. A., Boctor, S. Y. Use of food wafers for multiple daily oral treatments in young rats. J Am Assoc Lab Anim Sci. 48 (3), 292-295 (2009).
- Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (5), 600-613 (2011).
- Bala, R., Pawar, P., Khanna, S., Arora, S. Orally dissolving strips: A new approach to oral drug delivery system. Int J Pharm Investig. 3 (2), 67-76 (2013).
- Potashkin, J. A., Blume, S. R., Runkle, N. K. Limitations of animal models of Parkinson's disease. Parkinsons Dis. 2011, (2010).
- Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. Manual restraint and common compound administration routes in mice and rats. Journal of Visualized Experiments JoVE. (67), e2771 (2012).
- Yardley, M. M., et al. Ivermectin reduces alcohol intake and preference in mice. Neuropharmacology. 63, 190-201 (2012).
- Hoggatt, A. F., Hoggatt, J., Honerlaw, M., Pelus, L. M. A spoonful of sugar helps the medicine go down: a novel technique to improve oral gavage in mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 49, 329-334 (2010).
- Yardley, M. M., Huynh, N., Rodgers, K. E., Alkana, R. L., Davies, D. L. Oral delivery of ivermectin using a fast dissolving oral film: implications for repurposing ivermectin as a pharmacotherapy for alcohol use disorder. Alcohol. 49 (6), 553-559 (2015).
