Abstract
İnme, dünyada morbidite ve mortalitenin en önemli nedenlerinden biridir. İnme, beyin ödemi ve diğer patofizyolojik olaylar nedeniyle karmaşıklaşır. inme-uyarılmış beyin ödemi gelişmesi ve evriminde en önemli oyuncuları arasında hormon arjinin-vasopresin ve reseptörleri, V1a ve V2 olduğunu. Son zamanlarda, V1a ve V2 reseptör blokeri Conivaptan inme sonrası beyin ödemi azaltmak için potansiyel bir ilaç olarak dikkat çekmektedir. Bununla birlikte, vuruş araştırma Conivaptan uygulamaları dahil hayvan modelleri uygulama uygun yolları göre değiştirilmesi gerekir. Burada 48 saat sürekli intravenöz (IV) 'sonuçları farelerde deneysel inme sonrası intraperitoneal (İP) Conivaptan tedavileri ile karşılaştırılmıştır. Bu orta serebral arter oklüzyonu Conivaptan (0.2 mg) veya aracın IV tedavisi için boyun damarına sonda yükleme ile kombine edildiği bir protokol geliştirilmiştir. Hayvanların Farklı Gruplar 0.2 ile muamele edilmiştirGünlük Conivaptan veya aracına IP mg bolus. Deneysel inme uyarılmış beyin ödemi, sürekli IV ve IP tedavilerden sonra farelerde değerlendirildi. sonuçların karşılaştırılması Conivaptan Sürekli infüzyon tedavisi Conivaptan IP uygulamasının farklı olarak, farelerde post-iskemik beyin ödemi azaltır olduğunu ortaya koymuştur. Bizim modeli inme ve beyin ödemi bağlamında Conivaptan uygulamaların gelecekteki çalışmalar için kullanılabileceğini düşünmekteyiz.
Protocol
Deneyler araştırma bakım ve hayvanların kullanımı için Ulusal Sağlık Enstitüleri kurallarına uygun olarak yürütülmüştür ve İsveç Tıp Merkezi Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi. Tüm işlemler, uygun aseptik teknikler ile yapıldı. çalışma için kullanılan Deney hayvanları 25 ile 27 g vücut ağırlığına sahip yabani tip C57 farelerine, 3 aylık, erkektir.
Vivo İnme İndüksiyon 1.
- Ön-ceket önce Cerrahi Diş Reçine ile Filament.
- 7-0 naylon dikiş gelen filament 12 mm uzunluğunda bir parça kesin. 1 kısım sertleştirici reçine 2 parça karıştırın ve hemen yaklaşık 1/3 tüm uzunluğunun kapak karışımına filamanın ucu batırın. hızlı bir şekilde çıkarın ve diş reçine düz yüzeyli ceket ile kaplı olduğundan emin olun.
- Hava kullanımdan önce 2 saat boyunca filamanın kurutun.
- Bir içine fare yerleştirinn, anestezi indüksiyonu odası (2 litre hacim) ve 2 L / dk odasına girmeden% 25 oksijen bakımından zenginleştirilmiş havada bulunan% 1.5 izofluran akışını ayarlamak.
- Kuyruk tutam yanıt eksikliği ile belirlenen tam olarak, 8 anestezi kadar fare indüksiyon odasında kalmasına izin verin.
- ısıtılmış bir ped ile ameliyat masasına üzerine fare koyun ve burun konisi ile kendiliğinden teslim anestezi bakımı için% 1 izofluran konsantrasyonu ayarlayın.
- ön ve ensesindeki saçları klip ve ispirto ile boyun püskürtün. Her iki göze veteriner oftalmik merhem sürün.
- sürekli vücut ısısını izlemek için, ameliyat sırasında dijital ekrana bağlı bir rektal ısı probu kullanın.
- , Yatar pozisyonda fare yerleştirin dezenfeksiyon için povidon-iyot,% 10 bodur çözümü uygulayın, steril bir örtü ile kapatın ve daha sonra bir boyutu 10 cerrahi neşter bıçağı ile boyun boyunca bir orta hat kesi yapmak. <li> Geçici 6.0 ipek sütür ile sol karotis arter (CCA) Arter.
- Sol dış karotid arter (ECA) başka bir kravat yerleştirin.
- internal karotis arter (ICA) bir mikrovasküler klip yerleştirin.
- mikrovasküler makas ile eksternal karotid arter üzerinde küçük bir delik kesin. klip çıkarırken direnci (CCA çatallanma noktasından yaklaşık 5-7 mm) keçe kadar, ECA ağzına diş reçine ile kaplı 7-0 naylon sütür yapılmış bir filamanın takın ve cephalically ilerletin.
- pozisyonunda filamanın sabitlemek için internal karotid arter üzerine geçici bir kravat yerleştirin. Diyagram, Şekil 1A bakın. ipek sütür ile cilt kapatın ve adım 2.6 gibi% 0.5 bupivakain 0.2 ml boynun ön yüzünde yara sızmak.
- Fare 60 dakika için bir kurtarma odasında bilinci anestezi uyandırmak ve yeniden kazanmak için izin verir. o kazanmış kadar sahipsiz hayvan bırakmayınYeterli bilinç sternum recumbence korumak için.
- = Geri kalanı, 3 de karşı tarafa fakat normal postür için çizerek 0 = normal motor fonksiyonu, gövde ve kuyruk lift üzerinde kontralateral ön ayakları 1 = fleksiyon, 2 kontralateral eğilerek = aşağıdaki gibidir: nörolojik defisit puanlama (NDS) için fareyi test geri kalanı, 4 yan = hiçbir spontan motor aktivite. 4,9
- NDS testi için, gözlem (2-3 dk) için düz bir yüzey üzerinde kuyruk ve yerine göre fare kaldırın. Alternatif olarak, kurtarma odasında fareler gözlemlemek. nedeniyle MCA yetersiz tıkanıklığına alt deneyden 2'den NDS sergileyen fareler hariç.
Not: Lazer Doppler flowmetre teknik MCA oklüzyonu teyit etmek için kullanılabilir 9-11.
- NDS testi için, gözlem (2-3 dk) için düz bir yüzey üzerinde kuyruk ve yerine göre fare kaldırın. Alternatif olarak, kurtarma odasında fareler gözlemlemek. nedeniyle MCA yetersiz tıkanıklığına alt deneyden 2'den NDS sergileyen fareler hariç.
- Yeniden uyutmak yukarıda açıklandığı gibi, indüksiyon odasında toparlanmanın 60 dakika sonra hayvan% 10 povidon-iyot fırçalama çözeltisi ile önceki cilt kesisi yeniden sterilize ve cerrahi yara yenidenkesme ve ipek sütür kaldırarak boyun ön.
- ECA filamanın kaldırmak için aşağıdaki adımları gerçekleştirin:
- ICA bir mikrovasküler klip yerleştirin. ICA üzerinde dikiş çöz ve açık klip tutarak filamanın çekin.
- klibi kapatın ve kesim proksimal ECA üzerine kravat yerleştirin.
- klibini kaldırmak ve beyne kan akışını geri CCA dan bitişik harfleri çıkarın. Diyagram, Şekil 1B bakın.
Sürekli 48 saat Tedavi Juguler Ven içine IV Kateter 2. Kurulum
Not: hemen fare uyanış olmadan adım 1.16.3 sonra kateter kurulumu devam edin.
- esnek borular iki farklı boyutları kullanın: iç boruyu takın; (; iç boru korunması için dış çapı 3.18 mm), dış boru içine (dış çapı 0.94 mm ilacı içeren aşılanmış olan).
- P, Yüzüstü pozisyonda fare dantel dezenfeksiyonu için% 10 povidon-iyot bodur çözümü uygulayın ve bir boyut 10 cerrahi neşter bıçağı ile ensesindeki 1 cm kesi yapmak. , Yatar pozisyonda içine fare çevirin% 10 povidon-iyot fırçalama çözeltisi ile boyun ön yeniden sterilize ve boynun ön cerrahi yara yeniden. Tünel boynun ön arka yapılan kesiden cilt altına boru ve açık yara 1 cm onu exteriorize.
- orta hattan yaklaşık 1 cm yanal boynun ön sol kanattan gelen deri altı yağ dokusu çıkarın. Sol juguler ven bulun 5 mm aralıklı ven boyunca iki bağları yerleştirin ve hafifçe damar germek. mikrovasküler makasla iki bağları arasındaki şah damarından küçük bir delik açın; (Kalbe doğru), iç boru 5 mm derinliğinde kaudal ucunu yerleştirin.
- şahdamarından hem bağları ile boru sabitleyin. boynun ön deriyi kapatın3-0 ipek sütür. Diyagram, Şekil 1C bakın.
- Bir dikiş ile ensesindeki cilde boru sabitleyin ve bir fırdöndü ile Mikroinfüzyon IV pompasına hortumu bağlayın. döner yiyecek ve su tam erişim ile kafes içinde farelerin serbest dolaşımını sağlar.
- önündeki deri kesiler ve post-operatif ağrı önlemek için% 0.5 bupivakain 0.2 ml ensesini Infiltrate.
Not: Kurumsal özel hayvan protokolleri bağlı olarak, hayvan eroin, NSAID veya antibiyotik öncesi ve sonrası işlevsel ile tedavi edilebilir. Ancak, söz konusu tedaviler iskemik inme sonucu sonuçlarını değiştirebilir (Tartışma Bölüm bakınız). 11-14 - hayvan deneyinde uç noktasına kadar ayrı bir kafeste hayvan kurtarma odasında uyandırmak ve daha sonra evine izin verin. sternal muhafaza edilmesi için yeterli bilinci yerine kadar sahipsiz hayvan bırakmayınrecumbence.
- 1.5 mL / kg / saat, 4 sürekli 48 saatlik IV Conivaptan tedavisinde (% 5 dekstroz içinde 0.14 mg / ml) ya da araç için infüzyon hızını ayarlamak ve infüzyon başlar.
Not: IV infüzyon Conivaptan toplam 1.44 ml bir toplam hacim içinde yaklaşık 0.2 mg / fare / gün olmalıdır.
Not: 1.44 ml% 5 dekstroz çözeltisi içinde 0.2 mg toplam miktarda, günde iki kez Conivaptan intraperitoneal (İP) enjeksiyonu gerçekleştirin. IP enjeksiyonu, daha önce açıklanan uygulama. 15 gövde ve kuyruk posterior yüzeyinin cilt kavrama fareler kısıtlamaktadır. 26 G / 1/2 inç iğne kullanılarak karın sol alt kadranda içine Conivaptan veya aracına enjekte edilir. 15 - Deneyin (48 saat) süresi boyunca günde iki kez hayvanları gözlemlemek. Hayvanlar yiyecek ve su tam erişim için izin verir. Hayvan sıkıntı ya da nefes darlığı belirtileri gösteriyorsa bir veteriner danışınız. ötanazi ciddi dist hayvan için gerekli iseArş aşağıda adım 3.1 bakın ve çalışma hayvan hariç.
son noktada İnme-uyarılmış Beyin Ödemi 3. Değerlendirme
- % 5 izofluran ile aşırı anestezi ile fare Kurban.
- orta hat boyunca kafatası kemiği üzerinde bir cilt kesi yapmak için bir neşter kullanın ve beyin üzerinde tüm kafatası açığa cildi geri çekin. foramen magnum başlayarak, yanal her iki tarafta beynin çevresi boyunca kafatası kemiği kesti, ve onun altındaki beyin dokunmadan dikkatlice kaldırın. omurgadan beyin ve kafatası tabanında takılır sinirleri Sever.
- , Beyin kaldırmak koku ampul ve beyincik ayırın ve daha önce açıklandığı gibi, iskemik ve non-iskemik serebral hemisfer içine interhemisferik fissür boyunca beyni incelemek. 9
- Islak-kuru karşılaştırarak oranları (WDR), daha önce 4,9 açıklandığı gibi beyin ödemini değerlendirin. dokuları tartmakönce ve bir fırın içinde 100 ° C'de 3 gün boyunca kurutulduktan sonra. % H 2 O = olarak beyinin su içeriğini (BWC) hesaplayın (1-kuru ağırlık. / Islak ağırlık.) X% 100.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Hayvanların vücut sıcaklığı, fizyolojik aralıkta ve inme indüksiyon cerrahi prosedür boyunca sabit. MCAO çalışma dışı bırakıldı hemen sonra 2'den düşük NDS sergiledi iki fare.
Farelerde MCAO 48 saatte ipsilateral yarımkürede infarkt hacmi üretir. TTC-lekeli dilimleri değerlendirilmesi beyin iskemik inme başlangıcı şiddetli olur 2009. 10 Zeynalov, E. ve Dore, S., tarafından yayınlanan yarıkürenin yaklaşık% 50, MCAO (Şekil 1D) sonra enfarkt etkilendiğini göstermektedir oksijen ve besin beyin dokusunun yoksunluk. Bu yerel beyin dokusu hipoksi sonucu olarak, nöron ve glial hücreler, beyin infarkt parçası olan kalıp. Şekil 1D MCAO kaynaklı enfarkt etkilenen Örnek fare beyni dilimleri gösterir ve yaralanma boyutunda bir tahminini verir. 48 saat 60 dakika sonra MCAO indüksiyon beyin su içeriği (BWC) değerlendirilmesi Conivaptan uygulanan IV (0.2 mg / gün) anlamlı hem ipsilateral ve kontralateral hemisfer beyin ödemi, (Şekil 2A) azalttığı saptandı. Buna karşılık, 0.2 mg bolus ile Conivaptan IP tedavi günlük inme-uyarılmış beyin ödemi (Şekil 2B) benzer olumlu etkileri üretmek için başarısız oldu. plazma ve idrar osmolalitesi üzerine Conivaptan etkisi Onay deney bitiş noktasında tüm deney hayvanlarında elde edildi. Conivaptan IV tedavi veya aşağıdaki gibi IP plazma artmış ve tüm farelerde idrar osmolalite düşüklüğü 4 Plazma ozmolalite değerleri farelerde idi. 313 ± 4.4 mOsm / kg (araç, IV) karşı 355 ± 7.5 * mOsm / kg (Conivaptan, IV) , daha önce yayınlanmış olduğu gibi, 4 ve 340 ± 7.7 mOsm / kg (araç, IP) vs383 ± 8.8 * mOsm / kg (Conivaptan, IP). Aşağıdaki gibi farelerde idrar osmolalitesi değerler: 1210,6 ± 13.4 mOsm / kg (araç, IV) karşı 595.0 ± 57.4 * mOsm / kg (Conivaptan, IV), daha önce yayımlanan, 4 ve 1535,0 ± 80,9 mOsm / kg (araç, IP) karşı 242,0 ± 23,2 * mOsm / kg (Conivaptan, IP). olarak sunulan tüm veriler kontrol tekabül vs, * p ≤0.05 ± SEM. 
Şekil 1:. Filamanın inme Pozisyonu sonra 48 saat deneysel inme modeli, IV kateter kurulumu ve temsili enfarktüs hacminin Diyagramı sol internal karotid arter reçine (yeşil) ile (ICA) önceden kaplanmış (mavi ile gösterilmiştir) tıkanıklığında (A) ve reperfüzyon süresi (B) sırasında. Sol juguler ven (C) esnek borular ucunun doğru pozisyonu. ExperimentaFarelerde l inme 48 saatte ipsilateral yarımkürede infarkt hacmi üretir. Fareler MCAO ardından 48 saat sonra kurban edilmiştir ve protokolde tarif edildiği gibi beyinler çıkarıldı (3.1-3.3 adım). Brain 2 mm kalınlığında bölümler halinde kesilmiş ve TTC (D) ile boyanmıştır. Şekil 1D Zeynalov, E. ve Dore, S., 2009. orijinal makaleden modifiye edilmiştir 10 bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. 
Şekil 2:., Sürekli damar içi (IV) ve intraperitoneal (İP) Conivaptan (0.2 mg / gün), inme-uyarılmış beyin ödemi için tedaviyi Conivaptan IV işleme 48 saat boyunca tatbik edilmiştir etkileri. Conivaptan tedavisi IV ipsilateral ve kontralateral h post-iskemik beyin ödemi azalır uygulananEmisphere (A). Şekil 2A tarafından Zeynalov ve ark., Orijinal makaleden modifiye edilmiştir, 48 saat süreyle 2015 4 Conivaptan IP tedavi her grupta 10 deneysel inme nedeniyle beyin ödemi azaltmak için başarısız, n =. (Adımlar 1.1.1-1.15.3) Yukarıdaki protokolde tarif edildiği gibi fareler reperfüzyon ile MCAO uygulandı. Daha sonra Conivaptan (0.2 mg) IP enjeksiyonu 22 saat ve reperfüzyonun 46 saat sonra, hemen tatbik edilmiştir. Fareler kurban edildi; protokolde tarif edildiği gibi beyinler fırında çıkarıldı ve kurutuldu (3.1-3.4 adım). (B) Tüm veriler ortalama ± SEM olarak sunulmaktadır, * p <0.05 tekabül kontrol vs. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu çalışma klinik öncesi inme araştırmalar için önemli bir değere sahiptir. Bu çalışma, farede deneysel inme sonrası Conivaptan (0.2 mg / gün) sürekli IV infüzyonu etkili bir şekilde tedavi 48 saat sonra, beyin ödemi azaltır ortaya koymaktadır. Beyin ödemi üzerindeki Conivaptan aynı dozda IP enjeksiyonu etkisi de araştırılmıştır. hem IV ve IP yollarıyla Conivaptan tedavisi belirtildiği gibi farelerde aquaresis üretir: biraz fizyolojik seviyelerin üzerinde plazma osmolalitesinde 1) artış; ve 2) nedeniyle böbrekte su geri emilimini bloke idrar osmolalitesinde azalır. Bu nedenle, tedavi sonuçlarına dayanarak, biz IV teslim yöntemi inme-uyarılmış ödem oluşumunda ek önemli yararlı etkileri olduğunu bildirmektedir.
Bizim temel bulgu IV tedavi Conivaptan IP rota daha beyin ödemi azaltılmasına daha iyi bir etki üretilmiş olmasıdır. Klinik kullanım kor için Conivaptan, mevcut kombine V1a ve V2 reseptör antagonisti olanrect hiponatremi, kan hacmi ve osmolalite. 16 Conivaptan çeşitli durumları olan hastalarda hiponatremi düzeltmek için gösterilmiştir. Conivaptan 17 klinik durumu, beyin ödemi bağlamında arama-hızlı tezgah için başucu çeviri neden düşündürmektedir. Intraserebroventriküler teslim deneysel seçici V1a reseptör blokerlerinin kullanımı Ancak. Diğer araştırmacılar tarafından açıklanan post-iskemik beyin ödemi oluşumunu azaltmak için 3,18 kanıtlanmıştır, ne ilaçlar için olanlar çalışmalarda kullanılan ilaç ne de tedavi rota mümkün klinik uygulama önerir yakın gelecek.
Mekanizmalar hangi beyin iskemi ve AVP neden beyin ödemi karmaşıktır. Ancak, bazı önemli moleküler oyuncular BBB arayüzünde damar duvarlarında lokalize olan sodyum ve klorür ko-nakil 19,20 ve V1a reseptörleri vardır. Conivaptan etkisini bloke V2 excès atılımı sorumludurConivaptan Conivaptan durumunu azaltabilir doku engelleri önlemek için dolaşıma doğrudan teslim edildiğinde böbrek ve beyin ödemi gelişimini önlemeye yardımcı olabilir kan osmolalitesi, yüksekliğine. 21 Bu mekanizmalar, tarafından s su hala oyunda olabilir. Ancak, doz ve tedavi süresi gerekçe 4.. Daha önce yayınlanmış gözlemlere dayalı Bu Conivaptan bölgesel kan akımı hasar kaynaklı düşüşlerin ardından beynin iskemik siteyi erişip erişmediği belirlenecek kalır. Aynı zamanda beyin, serebral arterlerde V1a reseptörlerini bloke ederek böyle vazokonstriksiyon önlenmesi gibi arzu edilen yerel etkiler üretmek için Conivaptan yeterli miktarda alıp almayacağını incelenmesi gerekmektedir.
Deney protokolü Conivaptan tedavi yolu için tercih edilen soruya cevap için tasarlanmıştır. sonuçlarına dayanarak, çalışma Conivaptan reklamın IV yolu için güçlü bir destek sağlarministration. Bununla birlikte, protokol en kritik adım kurulmuş ve farelerde, inme sonrası tedavi sonuçları önemli farklılıklar tespit etmek için ince ayar için gerekli. Bu adımlar arasında şunlardır: MCAO (60 dakika) 1) süresi; 2) bir günlük doz (0.2 mg) ve infüzyon hızı (1.5 ml / kg / saat); ve 3) tedavi (48 sa) uzunluğu. MCAO süresi protokolü bu geri dönüşümsüz hasarlar nedeniyle beyin dokusu için son derece önemlidir iskemik hakaret derecesini belirler. zor hayvan 48 saat hayatta kalmak için, ya da hayvanların beyin ödemi karşı Conivaptan tedaviye daha az yanıt olabileceği için yapacak bir yaralanma çok şiddetli. Öte yandan, MCAO süresi en az 60 dakika, beyin ödemi üretmek olmaz, bu nedenle, fare İşemi indüklemek için yeterli olabilir ve. Doz ve tedavi süresi Conivaptan kullanımı FDA önerilerine göre seçilmiştir. 16. Bununla birlikte, bu bildirilmiştirFareler inme sonrası beyin ödemi azaltmak için Conivaptan insan dozu verimli değildi. Bu nedenle, doz post-iskemik beyin ödemi karşı önemli bir koruma kaynaklı fareler, 10 kat artmış olması gerekiyordu. 4 doğru infüzyon hızının seçiminin önemi toplam kan hacmi, kan basıncı ve interstisyel sıvı birikimi varsa etkileyebilir olduğunu oranı büyük ölçüde önerilen oranını aşıyor. Ancak, toplam kan hacminin ve kan basıncı ölçümleri çok bilgilendirici olacaktır.
MCAO Cerrahi indüksiyon invaziv bir işlemdir ve protokol tüm adımlara tam dikkat gerektirir ve tekniğe sorun giderme ipuçlarını bilmek önemlidir. nedeniyle bir kazayla yırtılmış arter gibi aşırı arteriyel kanama gibi bazı beklenmedik cerrahi komplikasyonlar, deneme için başarı oranını azaltmak ve mortalite oranını artırmak. Ancak, venöz kanama w uygulayarak hafif bir basınç durdurulabilirsteril bir sünger i.
Bu protokol MCA oklüzyonu sağa veya sola MCA üzerinde ya üretilen ima beyin iskemi, tek taraflı indüksiyon açıklanır. Ancak, protokol MCA oklüzyonu ve IV kateter kurulum cerrahın tercih tarafında bağlı değiştirilebilir. 1 diyagramı Şekil MCAO prosedürü, Şekil 1A ve B, IV kateter yükleme protokolü en kritik parçaların bir çizim tasvir Şekil 1C, ve daha önce yayınlanan bir deneyde (48 sa) uç noktasında MCAO-kaynaklı beyin infarkt Örnek beyin kesitleri, 10 Şekil 1D. diyagram ve temsili beyin dilimleri MCAO beynin sol tarafında uyarılan olduğunu ima rağmen MCAO tr boyunca tutarlılık sürece beynin sağ tarafında uyarılan eğer, biz sonuçlarda dramatik farklılıklar olmasını beklemiyoruzLastik çalışması korunur.
cerrahi ve anestezi sonrası iyileşme döneminde, hayvanlar nedeniyle ameliyat sonrası ağrı ve ciddi nörolojik açıklarının sıkıntı yaşayabilirler. Birçok durumda, ameliyat sonrası ağrı tedavisi, sadece lokal anestezik gibi% 0.5 bupivakain kullanarak sınırlı olabilir. İnsanlarda serebrovasküler yanı sıra farelerde deneysel inme nedeniyle inme gibi inflamasyon, beyin enfarktüsü ve beyin ödemi olarak patofizyolojik faktörler içerir. 9 Bu patofizyolojik olaylar böyle siklooksijenazların gibi önemli moleküler oyuncular tarafından ilgileniyoruz (COX) 13 ve G-proteini ile ilgili reseptörleri. onlar bu ayarlara kullanılan 13 ise COX içeren moleküler yollar ile 22 Girişim, NSAID ilaçların neden olabilir. Opioidler G-proteini ve ikinci haberciler 12 bağlı ve inme, 11 ve sonucun patofizyolojik sonuçları değiştirebilir reseptörleri üzerinde etkiBu çalışmanın s. Bu faktörler postoperatif farelerde ağrı kesici ilaç kullanımını sınırlamak.
Özetle, bizim çalışma geniş kapsamlı hedef olarak Conivaptan repurposing ihtimalini araştırıyor. Conivaptan sürekli IV infüzyonu takiben deneysel inme indüksiyon bizim hayvan modeli inmeli hastalarda potansiyel kullanımını önermek tutarlı sonuçlar üretmek için gösterilmiştir. Daha özel olarak ise, ikincil beyin hasarı önlemek için, inme sonrası Conivaptan sürekli IV, tedavi modeli farelerde klinik öncesi çalışma için kullanılabileceğini göstermiştir. Bu çalışma klinik ortamlarda içine hızlı tercüme YBÜ hastalarında hayat kurtarıcı olabilir, çünkü inme sonrası farelerde beyin ödemi incelemek için ek bir araç olarak Conivaptan alternatif bir tedavi uygulama sunmak için tasarlanmıştır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.
Acknowledgments
Biz fon ve imkanları sağlamak için İsveç Tıp Merkezi teşekkür ederim. Biz de laboratuvar alanı cömert kullanımı için Craig Hastanesi teşekkür ederiz.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Heated Pad | K&H Manufacturing Inc | 1060 | |
| Temperature Monitor with Rectal Probe | Physitemp | 7029 | |
| Silk Suture Spool, 6-0 | Surgical Specialties Corporation | SP114 | |
| Silk Suture on a Needle, 3-0 | Ethicon | 1684G | |
| Nylon Suture, 7-0 | Ethicon | 1696G | |
| Dental Resin Polysiloxane with Hardener | Heraeus Kulzer | 65817930 | |
| Microinfusion IV Pump | Kent Scietific | GT0897 | |
| Swivel 22GA | Instech | 375/22PS | |
| Laboratory Tubing, 0.94 mm x 0.51 mm | Dow Corning | 508-002 | |
| Laboratory Tubing, 3.18 mm x 1.98 mm | Dow Corning | 508-009 |
References
- Gueniau, C., Oberlander, C. The kappa opioid agonist niravoline decreases brain edema in the mouse middle cerebral artery occlusion model of stroke. J Pharmacol Exp Ther. 282, 1-6 (1997).
- Krafft, P. R., et al. Etiology of stroke and choice of models. Int J Stroke. 7, 398-406 (2012).
- Vakili, A., Kataoka, H., Plesnila, N. Role of arginine vasopressin V1 and V2 receptors for brain damage after transient focal cerebral ischemia. J Cereb Blood Flow Metab. 25, 1012-1019 (2005).
- Zeynalov, E., Jones, S. M., Seo, J. W., Snell, L. D., Elliott, J. P. Arginine-Vasopressin Receptor Blocker Conivaptan Reduces Brain Edema and Blood-Brain Barrier Disruption after Experimental Stroke in Mice. PloS one. 10, e0136121 (2015).
- Med Lett Drugs Ther.. Conivaptan (Vaprisol) for hyponatremia. The Medical letter on drugs and therapeutics. 48, 51-52 (2006).
- Zhao, X. Y., et al. Effect of arginine vasopressin on the cortex edema in the ischemic stroke of Mongolian gerbils. Neuropeptides. 51, 55-62 (2015).
- Manaenko, A., Chen, H., Kammer, J., Zhang, J. H., Tang, J. Comparison Evans Blue injection routes: Intravenous versus intraperitoneal, for measurement of blood-brain barrier in a mice hemorrhage model. J Neurosci Methods. 195, 206-210 (2011).
- Adams, S., Pacharinsak, C. Mouse anesthesia and analgesia. Curr Protoc Mouse Biol. 5, 51-63 (2015).
- Zeynalov, E., et al. The perivascular pool of aquaporin-4 mediates the effect of osmotherapy in postischemic cerebral edema. Crit Care Med. 36, 2634-2640 (2008).
- Zeynalov, E., Dore, S. Low doses of carbon monoxide protect against experimental focal brain ischemia. Neurotox Res. 15, 133-137 (2009).
- Zeynalov, E., Nemoto, M., Hurn, P. D., Koehler, R. C., Bhardwaj, A. Neuroprotective effect of selective kappa opioid receptor agonist is gender specific and linked to reduced neuronal nitric oxide. J Cereb Blood Flow Metab. 26, 414-420 (2006).
- Ma, M. C., Qian, H., Ghassemi, F., Zhao, P., Xia, Y. Oxygen-sensitive {delta}-opioid receptor-regulated survival and death signals: novel insights into neuronal preconditioning and protection. J Biol Chem. 280, 16208-16218 (2005).
- Ahmad, M., Zhang, Y., Liu, H., Rose, M. E., Graham, S. H. Prolonged opportunity for neuroprotection in experimental stroke with selective blockade of cyclooxygenase-2 activity. Brain Res. 1279, 168-173 (2009).
- Meisel, C., et al. Preventive antibacterial treatment improves the general medical and neurological outcome in a mouse model of stroke. Stroke. 35, 2-6 (2004).
- Miner, N. A., Koehler, J., Greenaway, L. Intraperitoneal injection of mice. Appl Microbiol. 17, 250-251 (1969).
- Adis International Limited. Conivaptan: YM 087. Drugs in R&D. 5, 94-97 (2004).
- Murphy, T., Dhar, R., Diringer, M. Conivaptan bolus dosing for the correction of hyponatremia in the neurointensive care unit. Neurocrit Care. 11, 14-19 (2009).
- Liu, X., Nakayama, S., Amiry-Moghaddam, M., Ottersen, O. P., Bhardwaj, A. Arginine-vasopressin V1 but not V2 receptor antagonism modulates infarct volume, brain water content, and aquaporin-4 expression following experimental stroke. Neurocrit Care. 12, 124-131 (2010).
- Wallace, B. K., Jelks, K. A., O'Donnell, M. E. Ischemia-induced stimulation of cerebral microvascular endothelial cell Na-K-Cl cotransport involves p38 and JNK MAP kinases. Am J Physiol Cell Physiol. 302, C505-C517 (2012).
- O'Donnell, M. E., et al. Intravenous HOE-642 reduces brain edema and Na uptake in the rat permanent middle cerebral artery occlusion model of stroke: evidence for participation of the blood-brain barrier Na/H exchanger. J Cereb Blood Flow Metab. 33, 225-234 (2013).
- Walcott, B. P., Kahle, K. T., Simard, J. M. Novel treatment targets for cerebral edema. Neurotherapeutics. 9, 65-72 (2012).
- Shen, Z., et al. Inhibition of G protein-coupled receptor 81 (GPR81) protects against ischemic brain injury. CNS Neurosci Ther. 21, 271-279 (2015).
