Per comprendere la fisiopatologia di ictus, è importante utilizzare modelli affidabili. Questo documento descrive uno dei modelli di ictus più frequentemente utilizzati nei topi, chiamato il modello cerebrale media occlusione dell'arteria (MCAO) (anche chiamato il filamento intraluminale o modello di sutura) con riperfusione.
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Articolo metodologico
Approccio chirurgico per occlusione dell'arteria cerebrale media e riperfusione indotta ictus nei topi
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'ictus è una delle principali cause di morte nel mondo e continua ad essere una delle principali cause di disabilità per adulti a lungo termine. Circa 87% degli ictus ischemico sono di origine e si verificano nel territorio dell'arteria cerebrale media (MCA). Attualmente l'unico Food and Drug Administration (FDA) ha approvato farmaco per il trattamento di questa malattia devastante è attivatore tissutale del plasminogeno (tPA). Tuttavia, tPA ha una piccola finestra terapeutica per l'amministrazione (3-6 ore), ed è efficace solo nel 4% dei pazienti che effettivamente ricevono. La ricerca attuale si concentra sulla comprensione della fisiopatologia di ictus al fine di trovare potenziali bersagli terapeutici. Così, modelli affidabili sono cruciali, e il modello MCA occlusione (MCAO) (anche definito il filamento o di sutura modello endoluminale) è considerato il modello più clinicamente rilevante chirurgica di ictus ischemico, ed è abbastanza non invasiva e facilmente riproducibile. Tipicamente il modello MCAO viene utilizzato con i roditori, in particolare con i topi dovutea tutte le variazioni genetiche disponibili per questa specie. Qui si descrive (e presente nel video) come eseguire con successo il modello MCAO (con riperfusione) nei topi per generare dati affidabili e riproducibili.
Introduzione
L'ictus è la causa quinta di morte nel mondo, con una persona che muore dalla malattia ogni 4 minuti. Oltre 800.000 americani soffrono un ictus ogni anno, che non solo è devastante per il paziente, ma anche per le loro famiglie. L'ictus è la principale causa di disabilità adulta e la spesa annua è stimata nell'ordine dei $ 36500000000 1 nonostante poche opzioni di trattamento che sono disponibili.
Attivatore tissutale del plasminogeno (tPA) è l'unico Food and Drug Administration (FDA) concesso in licenza farmaco per l'ictus ischemico. Tuttavia, è efficace solo se somministrato a pazienti entro 3-6 ore dall&#....
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Protocollo
Questo protocollo e gli esperimenti riportati nel video sono stati approvati dal Comitato LSUHSC-S Institutional Animal Care e Uso e sono in conformità con le linee guida del NIH.
NOTA: Maschio C57BL / 6 topi che pesano 25 - 29 g sono stati utilizzati in questo studio. I topi sono stati mantenuti su una dieta chow pellet di serie con libero accesso all'acqua, sotto un / buio ciclo 12 ore di luce in gabbie a ventilazione individuale. La procedura viene eseguita in condizioni di sterilità utilizzando tecniche sterili (ad esempio, guanti sterili, strumenti sterili).
Preparativi 1. Pre-chirurgiche
- Indurre l'anestesia utilizzand....
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Risultati
I topi sottoposti a 30 minuti di ischemia cerebrale MCAO-indotta (Figura 1), seguito da un periodo di riperfusione (24 hr e 1 sett sono presentati qui, ma la lunghezza della riperfusione può essere variata). La mortalità durante MCAO è stato minimo (circa il 2%). ischemia Post, il tasso di mortalità (entro le prime 24 ore) è stato di circa il 26%.
Laser Doppler flussimetria stata utilizzata per confermare sang.......
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Discussione
Dal suo concepimento 20 anni fa, il modello MCAO di ictus umana coinvolge l'inserimento di un filamento è stato utilizzato in un gran numero di studi. Ciò è principalmente dovuto al fatto che imita ciò accade clinicamente nella forma più comune di ictus (cioè, ictus ischemico). Il corpo striato è più sensibile all'ischemia rispetto alla corteccia cerebrale, e come tale, la lunghezza del tempo ischemico si tradurrà in se sia il striato e la corteccia dorsolaterale saranno interessati, o solo il corpo str.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato finanziato dal National Institute of Health, dal National Heart Lung and Blood Institute (NIH e NHLBI; HL125572-01A1) e il fondo di avviamento LSUHSC-S a F.N.E. Gavins.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Topi maschi C57BL / 6 | Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME | # 000664 | |
| ketamina cloridrato | Morris & Dickson, Shreveport, LA | 67457-108-10 | |
| Xylazine | Akorn, Inc, Lake Forest, IL | NADA# 139-236 | |
| Sistema di controllo della temperatura CC | FHC, Bowdoin, ME | 40-90-8D | |
| Mini sonda termistore rettale | FHC, Bowdoin, ME | 40-80-5D-02 | |
| Termoforo | FHC, Bowdoin, ME | 40-90-2-06 | |
| Clippers | Amazon, Bellevue, WA | #64800 | |
| 70% etanolo | Worldwide Medical Products, Bristol, PA | #51011023 | |
| Microscopio da dissezione | Olympus, Center Valley, PA | SZ40 | |
| Forbici per iride (diritte) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 11251-20 | |
| Pinze Dumont (punta piegata a 45 gradi) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 11297-00 | |
| Clip per micro vasi | Fine Science Tools, Foster City, CA | 18055-05 | |
| Forbici a molla per micro dissezione (diritte) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 14088-10 | |
| Divaricatori (smussati) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 18200-11 (Helen usata 17022-13) | |
| Applicatori con punta in cotone | Fisher Scientific, Waltham, MA | 23-400-100 | |
| Spugne di garza | Covidien, Mansfield, MA | #9023 | |
| 7-0 sutura chirurgica intrecciata in seta | Braintree Scientific, Braintree, MA | SUT-S103 | |
| 0,9% cloruro di sodio | Morris & Dickson, Lake Forest, IL | 0409-4888-20 | |
| 6-0 sutura media MCAO (monofilamento rivestito in gomma siliconica) | Doccol Corporation, Sharon, MA | 6023PKRe | |
| Sofsilk 6-0 seta intrecciata rivestita in silicone | Covidien, Mansfield, MA | SUT-14-1 | |
| Carprofen | Pfizer, New York, NY | NADA# 141-199 | |
| Puralube | Dechra, Norwich, Regno Unito | NDC 17033-211-38 | |
| Regolatore di temperatura Physitemp | Harvard Apparatus, Holliston, MA | TCAT-2AC | |
| Lampada termica | Harvard Apparatus, Holliston, MA | HL-1 | |
| Sonda doppler laser | AD Instruments, Colorado Springs, CO | MSP100XP | |
| piastre a 24 pozzetti | Fisher Scientific, Waltham, MA | #353226 | |
| Phosphate buffered soluzione salina (PBS) | Life Technologies, Carlsbad, CA | 20012-050 | |
| Lamette da barba a filo singolo | Fisher Scientific, Waltham, MA | 12-640 | |
| 2,3,5-trifeniltetrazalium cloruro (TTC) | Sigma Aldrich, St. Louis, MO | T8877-50G | |
| Affettatrice per matrici cerebrali di topo | Braintree Scientific, Braintree, MA | BS-A 5000C | |
| Bagno d'acqua | VWR, Radnor, PA | #182 | |
| 10% formalina | Sigma Aldrich, St. Louis, MO | HT501128-4L | |
| Software di analisi ImageJ | NIH, Bethesda, MD | download | |
| Divaricatore | Acquisto di dispositivi medici, Newcastle, CA | MP-740 |
Riferimenti
- Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2014 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 129 (3), e28-e292 (2014).
- Marks, M. P., et al.
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Ristampe e permessi
