Abstract
Denne protokol beskriver en centralt kateter musemodel for langvarig kritisk sygdom. Vi kombinerer den caecale ligering og punktering metode til at inducere sepsis med anvendelse af et centralt venekateter for væsker, stoffer og administration af næringsstoffer til at efterligne den humane kliniske omgivelser. Kritisk syge patienter kræver intensiv medicinsk støtte for at overleve. Mens størstedelen af patienterne vil komme inden for få dage, omkring en fjerdedel af patienterne har brug for langvarig intensiv pleje og er i høj risiko for at dø af ikke-løse multiorgansvigt. Endvidere er forlænget fase af kritisk sygdom stemplet af dyb muskelsvaghed og endokrine og metaboliske ændringer, hvoraf patogenesen øjeblikket ufuldstændigt forstået. Den mest udbredte dyremodel i kritisk pleje forskning er cecal ligering og punktering model til at inducere sepsis. Dette er en meget reproducerbar model, med akutte inflammatoriske og hæmodynamiske svarende til human september ændringersis, som er udformet til at undersøge den akutte fase af kritisk sygdom. Men denne model stemplet af en høj letalitet, som er forskellig fra den kliniske menneskelige situation, og er ikke udviklet til at studere den forlængede fase af kritisk sygdom. Derfor vi tilpasset teknikken ved at placere et centralt venekateter i halsvene tillader os at administrere klinisk relevant understøttende behandling, for bedre at kunne efterligne den humane kliniske situation kritisk sygdom. Denne musemodel kræver en omfattende kirurgisk indgreb og daglig intensiv pleje af dyrene, men det resulterer i en relevant model af den akutte og længerevarende fase af kritisk sygdom.
Introduction
Kritisk sygdom er en sygdomstilstand, hvor funktionen af et eller flere organsystemer hæmmes i det omfang, at patienten vil dø, medmindre administreres intensiv medicinsk støtte. Den indledende årsag til optagelse på intensivafdelingen (ICU) kan variere fra traumer, kompliceret kirurgi, forbrændinger, sygdom eksacerbationer af sepsis, lider alle kritisk syge patienter fra cellulær beskadigelse forårsaget af hypoperfusion, hypoxi og overdreven inflammation bl.a. , hvilket fører til organsvigt. De fleste patienter overlever deres akutte fornærmelse, men en vigtig del af patienterne ikke umiddelbart komme sig og har brug for langvarig intensiv pleje. De er i høj risiko for at dø på grund af ikke-løsningen multiorgansvigt. Endvidere er forlænget fase af kritisk sygdom stemplet af dyb muskelsvaghed og endokrine og metaboliske ændringer, hvoraf patogenesen øjeblikket ufuldstændigt forstået.
adskillige rOdent modeller bliver brugt i den kritiske pleje forskning indstilling. De to mest anvendte modeller er den exogene indgivelse af lipopolysaccharid (LPS) og cecal ligering og punktering (CLP). Begge modeller er udviklet til at efterligne den akutte fase af sepsis, defineret som en livstruende organsvigt forårsaget af en dysreguleret værtens respons på infektion, og en af de primære årsager til indlæggelsen på IA verdensplan 1, 2. LPS model har adskillige ulemper, da det kun kortvarigt påvirker frigivelse af cytokiner og den hæmodynamiske status af dyret 3. I modsætning til mennesker, gnavere er også særligt resistente over for endotoksin og anvendelsen af 'høje doser' af endotoksin er nødvendig for at producere hypotension og dødelighed, herved hæves yderligere bekymringer gyldigheden af denne metode 4, 5. Den anden model, cecal ligering og punktering model (CLP)har en ligering af en del af coecum efterfulgt af en nålepunktur gennemgående og-through. Denne procedure forårsager en polymikrobielle abdominal infektion med vævsbeskadigelse, efterfulgt af en translokation af bakterier i blodkammeret. Dette vil udløse en systemisk inflammatorisk reaktion og udvikling af sepsis. CLP model er blevet grundigt anerkendt som en dyremodel for akut kritisk sygdom, der gengiver de vigtigste elementer i sepsis: hyperinflammation, vasodilation, hypotension og øget minutvolumen 6, 7. Men denne model ikke tillade undersøgelse af ikke-løse multipel organsvigt, muskelsvind, og endokrine og metaboliske ændringer, som er typiske for den forlængede fase af kritisk sygdom. Desuden nylig gyldigheden af musemodeller for kritisk sygdom er blevet sat spørgsmålstegn ved, da resultaterne fra musemodeller ikke altid kan oversættes til mennesket indstilling 8, 9, 10. En mulig forklaring kunne være, at understøttende behandling, der leveres til kritisk syge humane patienter adskiller sig væsentligt fra den pleje, der er tilvejebragt til kritisk syge mus.
Derfor, for at ligne den humane indstilling tættere og tilladelse til undersøgelse af den forlængede fase af kritisk sygdom, udviklede vi en musemodel, der efterligner den akutte intensiv pleje som gives til mennesker, såsom omfattende administration af intravenøse væsker og antibiotisk behandling, og som tillader at administrere understøttende behandling for at overleve den forlængede fase af kritisk sygdom, såsom ernæringsmæssig støtte. Til dette formål, vi tilpasset musemodel for CLP-induceret sepsis, er den gyldne standard for sepsis og anbragt et centralt venekateter som muliggør administration af fluider, ernæring og lægemidler.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Protokollen blev godkendt af University of Leuven Etisk Review Board for Animal Research.
1. Forberedelse af venekateter
- Forberede spidsen af venekateter ved hurtigt at nedsænke den midterste del af 60 cm microrenathane (MRE) rør i varmt (> 220 ° C) sesamolie. Efterfølgende strække den midterste del af røret for at frembringe en snæver diameter (ydre diameter (OD) <0,5 mm) ved forsigtigt at bevæge enderne af røret bort fra hinanden.
- Brug en skalpel til at skære røret i to dele af 30 cm hver (se figur 1, tabel 1).
- Tilslut MRE slangen til polyethylenrør PE10 under anvendelse af polyethylen PE50, og sæt denne PE10 rør til den nederste del af drejeleddet. Forbinde den øverste del af drejeblokken til PE10 rør, og forbinde denne til en Luer stub nål med PE50 forbindelsesslangen som pr figur 1.
- Påfør stærk fast-acting selvklæbende lim til alle forbindelser og teste kateteret for lækage ved skylning med luft. Gas sterilisere kateteret før anvendelse.
Figur 1: Konstruktion af venekateter. Venøse linjer fremstilles ved strækning af MRE slangen til en lille diameter og forbinde den via polyethylenrør til en gnaver svirvelindretning. Se Tabel 1 for instruktioner om længder af de forskellige dele. Klik her for at se en større version af dette tal.
| Legende | Længde | Bind |
| 1) Luer stub kanylen 22G | ||
| 2) PE50 - polyethylen 0,023" x 0,038" | 5 cm | 13 pi |
| 3) PE10 - polyethylen 0,011" x 0,024” | 50 cm | 30 uL |
| 4) Rodent Swivel 20 G | ||
| 5) PE-10 | 15 cm | 9 uL |
| 6) PE-50 (stik) | 5 cm | 13 pi |
| 7) MRE025 Tip strakt microrenathane 0,025" x 0,012" | 30 cm | 27 uL |
| Samlet sum | 105 cm | 92 uL |
Tabel 1: Konstruktion af venekateter. Denne tabel viser en teksten til figur 1.
2. Anæstesi og Pre-kirurgi Håndtering
- Brug 24 uger gamle C57BL / 6J mus (27 - 32 g).
BEMÆRK: Vi bruger 24-uger gamle mus (voksne) som denne alder svarer bedre med den gennemsnitlige alder af intensivpatienter. Vi bruger kun hanmus for at undgå den cykliske påvirkning af østrogener. Teknikken kan også anvendes på yngre dyr (testet i 16 uger gamle mus) og hunner, hvis det foretrækkes. - Sterilisere alle kirurgiske instrumenter før brug. Skyl sterile hjemmelavede venekateter med saltvand for at fjerne eventuelle luftbobler og at teste for åbenhed og potentielle lækager.
- Skær en metaltråd (0,8 mm diameter) 80 cm længde, fordoble den ved foldning og lave en løkke. Føre 3 perler over fordoblet ledning til sløjfen. Fastgør kateteret til metaltråden ved at styre spidsen af katetret gennem de 3 perler.
BEMÆRK: Metallet fastgørelse ledning er nødvendig til drejning af drejeleddet, som kateteret er tilsluttet. Som sådan kan musen bevæge sig frit, uden at blokere den venøse linje. - Bedøve mouse ved en intraperitoneal (IP) injektion af en blanding af 0,03 ml ketamin (100 mg / kg) og 0,02 ml xylazin (13 mg / kg). Sørg for, at anæstesi er tilstrækkelig ved at kontrollere fraværet af reflekser. forsigtigt trække muse tunge udenfor med pincet for at undgå kvælning ved at sluge af tungen.
BEMÆRK: Hvis efter 10 minutter, musen stadig forsøger at trække sine lemmer give yderligere ketamin som en 0,01 mL bolus. - Barbere det kirurgiske område, herunder maven, ventrale side af halsen (trekant mellem hagen, brystben og kravebenet) og mellem skulderbladene i bunden af hovedet).
- Placer musen i liggende stilling på en forvarmet varmepude, desinficere huden med 70% ethanol og anvende en lille mængde af ophthalmisk smøremiddel til at beskytte øjnene mod udtørring. Infiltrere kirurgiske steder (mave, hals-og bagside) med 0,2 ml ropivacain (0,67 mg / kg).
- Mens musen er stadig i bugleje, lave et lille snit i bunden af den dorsale sideaf hovedet med skalpel eller saks. Udsætte de posteriore Nakkemusklerne, og binde musklen til sløjfen af fastgørelsen tråd med 3,0 nylon ved at føre en 3,0 nylontråd under musklen.
- Placer musen på sin højre side. Lav en lille lodret snit i huden på den ventrale hals med en skalpel eller saks. Under visuel vejledning, tunnel en 18-gauge nål subkutant gennem denne ventral incision mod indsnit på ryggen gjorde tidligere og tråd kateteret gennem nålen at blotlægge det på den ventrale side.
- Placer musen på ryggen. Pass en 3,0 nylontråd bag de øverste fortænder med musen og tape det ned til varmepuden. Fastgør hovedet på en ansigtsmaske til afgivelse oxygen (2 L / min). Fastgør mus i en strakt position ved at tape ned halen og de to forbenene.
BEMÆRK: Hvis ketamin-xylazin-anæstesi alene ikke er tilstrækkelig, inhaleret isofluran - kan (0,5 1,5%) leveres under kirurgi.
- Placer musen under dissektionsmikroskop. I snit tidligere i den ventrale hals, forsigtigt drille fedtvæv og kirtler væk med en pincet, indtil halsvene kan visualiseres.
- Stumpt dissekere at frigøre halsvenen fra binde- og subkutane væv over og rundt om skibet ved at anbringe spidsen af tangen mellem venen og bindevæv og åbne tangen gentagne gange parallelt med venen. Som sådan vil undgås beskadigelse af venen.
- Isoler halsvenen ved at placere stumpe pincet under venen. Foder tre stykker af 3,0 silke tråden under vene, position ét stykke proximalt til bifurkationen af halsvenen (craniale ligatur) og ét stykke tæt på musculus sternocleidomastoideus (caudale ligatur). Spænd kraniel ligatur og den kaudale ligatur at strække venen og forhindre voldsom blødning samtidig lægge kateteret. Tdvs. en løs ligatur med den midterste tråd for at sikre let fastgørelse af kateteret senere.
- Ved hjælp af mikro saks, foretage et snit langs venen mellem kranie og caudale ligaturer og store nok til at passere kateteret. Grab kateteret med pincet, og indsæt kateteret 11 mm ind i venen. Løst fast kateteret ved at binde off den midterste ligatur og bekræft korrekt placering ved forsigtigt at skylle med sterilt saltvand.
- Fastgør kateteret ved fast binde off den midterste og caudale ligatur omkring skibet og kateter. Tie ender af halefinnen og midterste ligatur sammen til fastgøre kateteret. Sørg for, at knuderne ikke okkludere venen, ved at skylle kateteret efter hver knude lavet. Endelig binde caudale og kranielle ligaturer. Luk snittet med 5,0 silke suturer.
4. cecal Ligation og Puncture
- Lav en 1-cm midtlinjesnit gennem huden i den nederste halvdel af maven med skalpel eller saks;være omhyggelig med ikke at trænge ind i bughulen.
- Identificere linea alba af den abdominale muskulatur og foretage en intermuskulært indsnit for at få adgang ind i bughulen. Lokalisere coecum, og bruge blunt anatomiske pincet til at isolere coecum og blotlægge det.
- Ligere coecum ved 50% af sin længde med 3,0 silkesuturer. Sørg for ikke at ligere ileocecal ventil, så der opretholdes tarm kontinuitet.
- Perforere coecum med en 18-gauge nål ved en enkelt gennemgående og-through punktur midtvejs mellem ligeringen og spidsen af coecum. Efter fjernelse af nålen, ekstrudere en lille mængde af afføring fra hullet for at sikre åbenheden.
- Repositionere tarmen i bughulen, og lukke bughinden og hud med 5,0 silkesuturer.
BEMÆRK: I gennemsnit en ny praktikant kræver 10 til 15 dyr til at kunne jævnt placere venekateter og udfør CLP inden for 45 min. Efter træningsperioden, en anæstesi / operation relakan forventes ted dødelighed på 10%.
5. Post-kirurgisk behandling og Fluid Genoplivning
- Placer musen i liggende stilling, og fastgøre katetret til fastgørelse wire med tape. Flyt musen til et individuelt bur. Brug et stativ med justerbare rørholder til at holde drejeleddet 25 cm over mus og fast tape den frie del af metallet fastgørelse ledning til den roterende punkt af swivel.
- Vedhæfte en sprøjte indeholdende blandingen af afbalancerede kolloider og krystalloider (1: 4) til den venøse linje at starte væsketilskud.
- Placer buret i et temperaturreguleret (27 ° C) dyr kabinet med 12 timers lys og mørke cykler og begynde intravenøs væske genoplivning (10 ml / kg / h) via en nøjagtig sprøjte-drevet infusionspumpe. Tilvejebringe bur berigelse såsom redemateriale og en træklods.
6. Intensiv
- Ved 6 timer efter operation, subkutant injicere smerte medication og antibiotika (0,3 ml buprenorphin (0,15 mg / kg) og 0,2 ml imipenem (16.67mg / kg)). BEMÆRK: Efter standard forsøgsdyr medicin praksis, er den første dosis af smertestillende medicin givet før den indledende kirurgisk snit og derefter som anvist af institutionens veterinære politikker. Subkutane injektioner bør omhyggeligt injiceres i det subkutane rum.
- Efter 20 - 24 timers væsketilskud, udskifte Krystalloider / kolloider af total parenteral ernæring (6,67 ml / kg / h).
BEMÆRK: Total parenteral ernæring indgivet (5,8 kcal / 24 timer) dækker omkring 40% af de daglige kaloriebehov af mus, svarende til den tidlige kalorieindtag af patienter i intensiv afdeling. - Subkutant administrere smertestillende medicin og antibiotika (0,6 ml buprenorphin (0,3 mg / kg) og 0,2 ml imipenem (16,67 mg / kg) hver 12 timer i hele perioden af kritisk sygdom.
- Tjek dyrene mindst hver 3 timer i løbet af dagen. Vurdere lidelse ved at give en smertescore baseret på den validerede muse grimasse skala 11. Intensivere overvågning for dyr med en høj smerte score.
7. forsøgets afslutning
bør søges Godkendelse af og anbefalinger om niveauet af sværhedsgraden af model og retningslinjer og politikker for menneskelige endepunkter fra den lokale Institutional Etisk Review Board for Animal Research: OBS.
BEMÆRK: I tilfælde af et ikke-funktionelt venekateter såsom blokeret kateter, delokalisering af kateteret, problemer med sprøjtepumpen dyret udelukket fra undersøgelsen og eutaniseret.
- Ved afslutningen af forsøgsperioden, dybt bedøver musen under anvendelse af en blanding af 0,03 ml ketamin (100 mg / kg) og 0,02 ml (13 mg / kg) xylazin. Aflive musen ved udtagning af blod ved hjertepunktur. Store snap frosne vævsprøver af interesse ved -80 ° C.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
C57BL / 6-mus blev gjort kritisk syge som beskrevet ovenfor. Vi udførte to forsøg for at vurdere post-CLP overlevelse indtil to tidspunkter: overlevelse indtil dag 5 (n = 15) og overlevelse indtil dag 7 (n = 22) efter CLP. Overlevelseskurver for de to forsøg var ikke signifikant forskellige (sammenlignet indtil dag 5), hvilket indikerer reproducerbarhed forsøgsopstillingen. Ikke-overlevende dyr blev fundet død eller aflives på grund af alvorlige følger for personer endpoints. Ligering af 50% af coecum i kombination med antibiotika, væske genoplivning og total parenteral ernæring via i vena jugularis en venekateter, som beskrevet, resulterede i en dødelighed på 13% efter 1 dags kritisk sygdom, 24% dødelighed efter 3 dage med kritisk sygdom 27 - 31% dødelighed efter 5 dages kritisk sygdom og 36% efter 7 dages kritisk sygdom. De sunde pair-fed mus, som var caloric begrænset til indtagelse af kritisk næringsstofsyge mus, viste ikke nogen dødelighed.
Figur 2: overlevelseskurver efter 5 eller 7 dage af kritisk sygdom. Der var ingen mortalitet i gruppen af raske dyr (A, B, stiplet linie - sunde dyr uden kirurgi). Fem dage efter kirurgi (A), dødelighed var 27% (optrukket linie). Syv dage efter induktion af sepsis (B), var dødeligheden 36%. Mus med utæt eller løsnede katetre blev udelukket fra forsøget (15%). Klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vi udviklede et mere klinisk relevant musemodel af kritisk sygdom, ved at kombinere den caecale ligering og punktering metode til at inducere sepsis med anvendelse af et centralt venekateter for væsker, stoffer og administration næringsstof. Denne forsøgsopstilling er reproducerbar, gør det muligt at studere den forlængede fase af kritisk sygdom og resulterer i en stabil dødelighed, herved efterligne den humane kliniske situation 1.
Cecal ligering og punktering er blevet omfattende anerkendt som en dyremodel for akut kritisk sygdom, der gengiver de vigtigste elementer i sepsis 6, 7. Men denne model af akut kritisk sygdom ikke tillade studiet af ikke-løse multipel organsvigt, muskelsvind, og endokrine og metaboliske ændringer, som er typiske for den forlængede fase af kritisk sygdom. Desuden prækliniske resultater med denne model ofte undlader at translate til den kliniske humane indstilling 8, 9, 10. Derfor har vi udviklet en model, hvor anbringelse af et centralt venekateter tillader undersøgeren for at administrere omfattende væsketilskud, narkotika og total parenteral ernæring. Disse støtteforanstaltninger er af vital betydning for kritisk syge patienter for at overleve den akutte fase af kritisk sygdom. På trods af placeringen af denne centralt venekateter, dyrene er stadig i stand til at bevæge sig frit med relativt mindre ubehag. Daglig smerte medicin hjælper lindre lidelse, som vurderes af mus grimasse omfanget af smerter 11. Denne model indeholder også andre væsentlige aspekter af understøttende behandling for kritisk syge patienter, såsom antibiotisk behandling og smertestillende medicin.
Denne model har flere begrænsninger. Først den omfattende kirurgiske procedure er krævende og kræver tilstrækkelig uddannelse. Aldrigdesto mindre, med tilstrækkelig uddannelse i gennemsnit 10% af de opererede dyr dør under eller umiddelbart efter operationen. Endvidere katetre, der ikke er velplacerede, kan føre til lækage af genoplivningsvæsker eller parenteral ernæring i thorax af dyret. I gennemsnit 15% af overlevende dyr skal udelukkes i løbet af undersøgelsen på grund af disse kateter relaterede problemer. Således, når man beregner det nødvendige antal dyr til et eksperiment, må man tage hensyn til et 25% overskud på grund af operation og kateter relaterede tab. For det andet, med kun én venøs adgangspunkt, antibiotika og smertestillende medicin skal stadig administreres subkutant to gange dagligt. Faktisk kan ikke garanteres kompatibilitet parenteral ernæring med antibiotika og smertestillende medicin narkotika, og derfor co-infusion bør undgås. Skylning af linjen efterfulgt af en bolusinjektion er også teknisk mulig på grund af begrænset volumen af musene blod. Tredje, anæstesi og operation nødvendig for to placere kateteret vil fremkalde en alvorlig stress reaktion af sig selv. Vi bruger sunde dyr uden kirurgi som kontrol, og overveje kateteret relateret kirurgi som en del af den kritiske sygdom, der kan sammenlignes med, hvad menneskelige kirurgiske patienter i intensiv behandling nødt til at udholde. For det fjerde, mens post-operative smerter medicin og antibiotika og brugen af et centralt venekateter at tillade administration af parenteral ernæring øger den kliniske relevans af det murine CLP-modellen, vores model stadig ikke helt efterligne den kliniske menneskelige situation. Faktisk på grund af den lille dyrets størrelse det er udfordrende at indføre flere avancerede støttende teknikker, såsom dialyse. Men brugen af denne model giver mulighed genetisk indblanding, afgørende optrævling patogenesen af kritisk sygdom.
Det er blevet vist, at dødeligheden og sværhedsgraden af CLP procedure kan manipuleres, hvis det skønnes nødvendigt, med den del af coecum, som ligeres, af størrelsen og number af punkteringer, subkutan væske genoplivning og daglig antibiotikum administration 6, 12. Vi vælger en protokol, hvor vi gav omfattende væske genoplivning ved 10 ml / kg / time for de første 20 timer, da det er blevet påvist tidligere, at dette forbedrer dødelighed 13. Vores tilpasninger bør indarbejdes i protokollen, hvis der ønskes en model for langvarig kritisk sygdom i stedet for en model af letalitet. Denne musemodel anvender en mid-grade CLP, intravenøs væske genoplivning og antibiotisk behandling for at skabe en mere klinisk relevant model for kritisk sygdom, som det fremgår af dets langvarige overlevelseskurver som efterligner overlevelsesraten for human sepsis 1. Den ICU patientpopulation, som den almindelige befolkning, bliver ældre 14. For at efterligne den ICU indstilling human endnu tættere, kan man anvende modne mus (6 måneder), som anvendt i denne undersøgelse, i ellerder at øge kliniske relevans af den eksperimentelle model.
Afslutningsvis denne musemodel kræver en omfattende kirurgisk indgreb og daglig intensiv pleje af dyrene, men det resulterer i en model af kritisk sygdom, som gør det muligt for investigator at studere aspekter af den langvarige fase af kritisk sygdom.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Buprenorphine | Ecuphar | Vetergesic 0.3 mg/mL | |
| C57BL/6 | Janvier labs | C57BL/6JRj | |
| colloids | Fresenius Kabi | Volulyte 6% | |
| crystalloids | Baxter | Plasmalyte a viaflo | |
| Ethilon 3.0 | Ethicon | F3211 | |
| Imipenem | MSD | Tienam 500 mg powder for injection fluid | |
| Isoflurane | Eurovet | Iso-vet | |
| Ketamine | Eurovet | Nimatek 100 mg/mL | |
| LocTite Super glue3 all plastics | Rectavit | 119818 | |
| Mersilk 3.0 | Ethicon | L192 | |
| Mersilk 5.0 | Ethicon | F682 | |
| Microrenathane .025" O.D. x .012" I.D. | Bioseb | MRE-025 | |
| olimel N7E | Baxter | ||
| PE10 - Polyethylene .011" x .024" | Instech Solomon | BTPE-10 | |
| PE-50 tubing .023" x.038" | Instech Solomon | BTPE-50 | |
| Rodent Swivel 20 G | Bioseb | RS-20G | |
| Ropivacaïne | Astrazenica | Naropin 2 mg/mL | |
| Xylazine | VMD | Xylazine hydrochloride 2% |
References
- Angus, D. C., van der Poll, T. Severe sepsis and septic shock. N Engl J Med. 369 (9), 840-851 (2013).
- Singer, M., et al. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). JAMA. 315 (8), 801-810 (2016).
- Remick, D. G., Newcomb, D. E., Bolgos, G. L., Call, D. R. Comparison of the mortality and inflammatory response of two models of sepsis: lipopolysaccharide vs. cecal ligation and puncture. Shock. 13 (2), 110-116 (2000).
- Copeland, S., et al. Acute inflammatory response to endotoxin in mice and humans. Clin Diagn Lab Immunol. 12 (1), 60-67 (2005).
- Seok, J., et al. Genomic responses in mouse models poorly mimic human inflammatory diseases. Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (9), 3507-3512 (2013).
- Rittirsch, D., Huber-Lang, M. S., Flierl, M. A., Ward, P. A. Immunodesign of experimental sepsis by cecal ligation and puncture. Nat Protoc. 4 (1), 31-36 (2009).
- Zolfaghari, P. S., Pinto, B. B., Dyson, A., Singer, M. The metabolic phenotype of rodent sepsis: cause for concern. Intensive Care Med Exp. 1 (1), 25 (2013).
- Radermacher, P., Haouzi, P. A mouse is not a rat is not a man: species-specific metabolic responses to sepsis - a nail in the coffin of murine models for critical care research. Intensive Care Med Exp. 1 (1), 26 (2013).
- Dyson, A., Singer, M. Animal models of sepsis: why does preclinical efficacy fail to translate to the clinical setting. Crit Care Med. 37 (1 Suppl), S30-S37 (2009).
- Osuchowski, M. F., et al. Abandon the mouse research ship? Not just yet. Shock. 41 (6), 463-475 (2014).
- Langford DJ1, B. A., Chanda, M. L., Clarke, S. E., Drummond, T. E., Echols, S., Glick, S., Ingrao, J., Klassen-Ross, T., Lacroix-Fralish, M. L., Matsumiya, L., Sorge, R. E., Sotocinal, S. G., Tabaka, J. M., Wong, D., van den Maagdenberg, A. M., Ferrari, M. D., Craig, K. D., Mogil, J. S. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat Methods. 7, (2010).
- Hollenberg, S. M., et al. Characterization of a hyperdynamic murine model of resuscitated sepsis using echocardiography. Am J Respir Crit Care Med. 164 (5), 891-895 (2001).
- Heuer, J. G., et al. Cecal ligation and puncture with total parenteral nutrition: a clinically relevant model of the metabolic, hormonal, and inflammatory dysfunction associated with critical illness. J Surg Res. 121 (2), 178-186 (2004).
- Conti, M., Merlani, P., Ricou, B. Prognosis and quality of life of elderly patients after intensive care. Swiss Med Wkly. 142, (2012).
