Abstract
Denne protokollen beskriver et sentralt kateterisert musemodell for langvarig kritisk sykdom. Vi kombinerer det cøkale ligering og punktering metode for å indusere sepsis med bruk av et sentralt venekateter for væsker, legemidler og nærings administrering for å etterligne den humane kliniske omgivelser. Alvorlig syke pasienter krever intensiv medisinsk støtte for å overleve. Mens flertallet av pasientene vil komme i løpet av få dager, om lag en fjerdedel av pasientene trenger langvarig intensiv pleie og har høy risiko for å dø av ikke-løse feil flere organ. Videre er forlenget fase av kritisk sykdom hall ved dyp muskelsvakhet, og endokrine og metabolske forandringer, av hvilken patogenesen for tiden ufullstendig forstått. Den mest brukte dyremodell i kritisk omsorg forskning er cecal ligation og punktering modell for å indusere sepsis. Dette er en meget reproduserbar modell, med akutte inflammatoriske og hemodynamiske endringer ligner menneske septembersis, som er utformet for å undersøke den akutte fase av kritisk sykdom. Imidlertid er denne modellen hall av en høy dødelighet, som er forskjellig fra den kliniske menneskelig situasjon, og er ikke utviklet for å studere langvarig fase av kritisk sykdom. Derfor tilpasses vi teknikken ved å plassere et sentralt venekateter i halsvenen tillater oss å administrere klinisk relevant støttende omsorg, for å bedre etterligne den menneskelige kliniske situasjonen for kritisk sykdom. Denne musen Modellen krever et omfattende kirurgisk inngrep og daglig intensiv pleie av dyrene, men det resulterer i en relevant modell av akutt og langvarig fase av kritisk sykdom.
Introduction
Kritisk sykdom er en sykdomstilstand, hvor funksjonen av én eller flere organsystemer blir hemmet i den grad at pasienten vil dø, med mindre intensiv medisinsk støtte administreres. Mens den opprinnelige årsaken for adgang til intensivavdelingen (ICU) kan variere, som strekker seg fra traume, komplisert operasjon, brannskader, sykdoms eksaserbasjoner av sepsis, alle kritisk syke pasienter som lider av cellulær skade forårsaket av hypoperfusjon, hypoksi og overdreven betennelse bl.a. , noe som fører til organsvikt. De fleste pasientene overlever deres akutte fornærmelse, men en viktig del av pasientene ikke umiddelbart gjenopprette og trenger langvarig intensivbehandling. De har høy risiko for død på grunn av ikke-løse feil flere organ. Videre er forlenget fase av kritisk sykdom hall ved dyp muskelsvakhet og endokrine og metabolske endringer, hvorav patogenesen for tiden ufullstendig forstått.
flere rodent modeller blir brukt i den kritiske omsorgsforskning setting. De to mest brukte modeller er den eksogene administrering av lipopolysakkarid (LPS) og cekale ligering og punktering (CLP). Begge modellene er utviklet for å etterligne den akutte fase av sepsis, definert som en livstruende organ dysfunksjon forårsaket av en feilregulert vert reaksjon på infeksjon, og en av de viktigste grunnene for opptak til ICU verdensomspennende 1, 2. LPS-modellen har flere ulemper da det bare kortvarig påvirker frigivelsen av cytokiner og hemodynamiske status av dyret 3. I motsetning til mennesker, gnagere er også meget motstandsdyktig mot endotoksin og bruk av 'høye doser' av endotoksin er nødvendig for å produsere hypotensjon og dødelighet, som herved ytterligere medfører utfordringer av gyldigheten av denne metode 4, 5. Den andre modellen, cekale ligering og punktering modell (CLP)har ligering av en del av blindtarmen, etterfulgt av en nål gjennom punktering-og-gjennom. Denne fremgangsmåten fører til et blandingsflora bestående mageinfeksjon med vevsskade, etterfulgt av et translokasjon av bakteriene inn i blodbanen. Dette vil utløse en systemisk inflammatorisk respons og utvikling av sepsis. CLP-modellen har blitt grundig anerkjent som en dyremodell for akutt kritisk sykdom som gjengir hovedtrekkene i sepsis: hyperinflammation, vasodilasjon, hypotensjon og økt blodsirkulasjon 6, 7. Men denne modellen ikke tillate undersøkelse av multippel organsvikt ikke-oppløsnings, muskelsvinn, og endokrine og metabolske endringer som er typiske for langvarig fase av kritisk sykdom. Videre nylig gyldigheten av musemodeller for kritisk sykdom har blitt avhørt, siden funn fra musemodeller ikke alltid kan oversettes til den menneskelige innstilling 8, 9, 10. En mulig forklaring kan være at den understøttende behandling som gis til kritisk syke humane pasienter er vesentlig forskjellig fra den behandling som gis til kritisk syke mus.
Derfor, for å ligne den menneskelige omgivelser som er mer tett og for å tillate undersøkelse av langvarig fase av kritisk sykdom, har vi utviklet en musemodell som etterligner den akutte intensiv pleie som gis til mennesker, slik som omfattende intravenøs væsketilførsel og antibiotikabehandling, og som gjør det mulig å administrere støttebehandling for å overleve langvarig fase av kritisk sykdom, slik som ernæringsmessig støtte. For dette formål kan vi tilpasset musemodellen av CLP-indusert sepsis, blir den gylne standard for sepsis, og plassert et sentralt venekateter som muliggjør administrering av væsker, ernæring og narkotika.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Protokollen ble godkjent av University of Leuven Ethical Review Board for Forsøksdyrutvalget.
1. Fremstilling av veneledningen
- Forbered spissen av venekateter ved raskt å nedsenke den midtre del av 60 cm microrenathane (MRE) rør i varm (> 220 ° C) sesamolje. Deretter strekkes den midtre del av røret for å frembringe en smal diameter (ytre diameter (OD) <0,5 mm) ved forsiktig å bevege endene av røret bort fra hverandre.
- Bruke et skalpellblad for å skjære røret i to deler på 30 cm hver (se figur 1, tabell 1).
- Koble MRE slangen til polyetylenrør PE10 PE50 anvendelse av polyetylen, og koble denne PE10 slange til den nederste delen av svivelen. Kobler den øvre del av svivelen til PE10 rør, og koble denne til en Luer stump nål med PE50-kontakt rør som per figur 1.
- Påfør sterk fast-akting selvklebende lim for alle forbindelser og teste kateter for lekkasje ved spyling med luft. Gass sterilisere kateteret før bruk.
Figur 1: Bygging av venøs Line. Veneledningene blir fremstilt ved strekking av MRE slangen til en liten diameter, og som forbinder det via polyetylenslange til en gnager svivelanordning. Se tabell 1 for instruksjoner om lengden på de ulike delene. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
| Legende | Lengde | Volum |
| 1) Luer stump nål 22G | ||
| 2) PE50 - polyetylen 0,023" x 0,038" | 5 cm | 13 ul |
| 3) PE10 - polyetylen 0,011" x 0,024” | 50 cm | 30 mL |
| 4) Rodent svivelen 20 G | ||
| 5) PE-10 | 15 cm | 9 ul |
| 6) PE-50 (plugg) | 5 cm | 13 ul |
| 7) MRE025 Tips strukket microrenathane 0,025" x 0,012" | 30 cm | 27 mL |
| Total sum | 105 cm | 92 mL |
Tabell 1: Bygging av venøs Line. Denne tabellen gir en tegnforklaring for figur 1.
2. Anestesi og Pre-kirurgi Håndtering
- Bruk 24-uker gamle hann C57BL / 6J-mus (27-32 g).
MERK: Vi bruker 24 uker gamle mus (moden voksen) som denne alderen korresponderer bedre med gjennomsnittsalderen for intensivpasienter. Vi bruker bare mannlige mus for å unngå den sykliske påvirkning av østrogener. Teknikken kan også anvendes på unge dyr (som ble testet i 16-uker gamle mus) og hunner, hvis ønskelig. - Steriliser alle kirurgiske instrumenter før bruk. Skyll den sterile hjemmelagde venekateter med saltvann for å fjerne eventuelle luftbobler og for å teste for åpenhet og mulige lekkasjer.
- Skjær en metalltråd (0,8 mm diameter) på 80 cm lengde, fordoble det ved bretting til en ring. Bly 3 perler enn det doblede ledningen til sløyfen. Feste kateteret til metalltråden ved å føre tuppen av kateteret gjennom de 3 perler.
MERK: Metallet festetråden er nødvendig for rotasjon av svivelen til hvilken kateteret er forbundet med. Som sådan, kan mus bevege seg fritt, uten å blokkere veneledningen. - Bedøve mouse av en intraperitoneal (IP) injeksjon av en blanding av 0,03 ml ketamin (100 mg / kg) og 0,02 ml xylazin (13 mg / kg). Påse at anestesi er tilstrekkelig ved å sjekke fraværet av reflekser. Trekk forsiktig mus tungen utsiden med tenger for å unngå kvelning ved svelging av tungen.
MERK: Hvis etter 10 minutter, fremdeles forsøker musen til å trekke sine lemmer gi ytterligere ketamin som en 0,01 mL bolus. - Barbere det kirurgiske området, inkludert abdomen, ventrale side av halsen (trekant mellom haken, brystben og krage), og mellom skulderbladene på undersiden av hodet).
- Den plasseres i liggende stilling på et forvarmet varmepute, desinfisere huden med 70% etanol og anvende en liten mengde av oftalmisk smøremiddel for å beskytte øynene mot uttørking. Infiltrere den kirurgiske områder (mage, hals foran og bak) med 0,2 ml ropivakain (0,67 mg / kg).
- Mens mus fremdeles er i liggende stilling, å gjøre et lite snitt på bunnen av dorsalsidenav hodet med skalpell eller saks. Utsette de bakre cervical muskler, og knytte muskelen til sløyfen av festetråd med 3,0 nylon ved å lede en 3,0 nylontråd under muskelen.
- Plasser musen på sin høyre side. Lag en liten vertikal snitt i huden av ventral halsen med en skalpell eller saks. Under visuell veiledning, tunnel en 18-gauge nål subkutant gjennom denne ventralt innsnitt mot snittet på baksiden gjort tidligere og træ kateteret gjennom nålen til exteriorize det på buksiden.
- Plasser musen på ryggen. Passere en 3,0 nylontråd bak de beste fortennene i mus og tape den ned til varmeputen. Sikre hode i en ansiktsmaske for levering av oksygen (2 l / min). Fest mus i en strukket stilling ved taping ned halen og begge forbena.
MERK: Dersom ketaminxylazin anestesi alene er ikke tilstrekkelig, inhalert isofluran - kan (0.5 1,5%) blir levert i løpet av operasjonen.
- Plasser musen under dissekere mikroskop. I innsnitt gjort tidligere i den ventrale hals, forsiktig erte fettvev og kjertler bort med pinsett til halsvenen kan visualiseres.
- Rett ut dissekere å frigjøre halsvene fra binde og subkutane vev over og rundt beholderen ved å plassere spissen av tang mellom vene og bindevev og åpner pinsetten gjentatte ganger parallelt med venen. Som sådan, vil skade venen unngås.
- Isoler halsvenen ved å plassere butte tang under vene. Mate tre stykker 3,0 silketråden under vene, posisjon ett stykke proksimalt til forgreningen av Vena jugularis (kranie ligatur) og i ett stykke nær den sternocleidomastoideus (kaudal ligatur). Trekk til cranial ligatur og haleligaturen for å strekke venen og forebygge overdreven blødning mens plassere kateteret. Tdvs. en løs ligatur med den midtre gjenge for å sikre enkel sikring av kateteret senere.
- Ved hjelp av mikro saks, gjør et snitt langs venen mellom de craniale og caudale ligaturer og stor nok til å passere kateteret. Gripe kateteret med tang, og føre inn katetret 11 mm inn i venen. Løst feste kateteret ved å knytte de midte ligatur og bekrefte riktig plassering ved å forsiktig skylle med sterilt saltvann.
- Sikre kateteret ved fast å binde den midterste og caudal ligatur rundt beholderen og kateteret. Tie ender av hale og mellomligaturen sammen for å fast feste kateteret. Sørg for at knutene ikke occlude venen, ved å skylle kateteret etter hver knute gjort. Til slutt, knytte hale og kranieligaturer. Lukk snittet med 5,0 silke sting.
4. cecal hemorroider og punktering
- Foreta en 1-cm midtlinjesnitt gjennom huden av den nedre halvdel av magen med skalpell eller saks;være forsiktig for ikke å trenge inn i bukhulen.
- Identifisere linea alba av den abdominale muskulatur og foreta en intra innsnitt for å få adgang inn i bukhulen. Lokal cecum, og bruk butte anatomiske tang for å isolere cecum og exteriorize den.
- Ligere cecum ved 50% av dens lengde med 3,0 silkesuturer. Sørg for ikke å ligere ileocecal ventilen slik at tarm kontinuitet opprettholdes.
- Perforere cecum med en 18-gauge nål med en enkelt gjennomgående og gjennom punktering midtveis mellom ligering og spissen av blindtarmen. Når nålen er fjernet, ekstrudere en liten mengde av avføring fra hullet for å sikre åpenheten.
- Reposisjonere tarmen i bukhulen, og lukker peritoneum og hud med 5,0 silkesuturer.
NB: I gjennomsnitt krever en ny elev 10 til 15 dyr for å være i stand til jevnt å plassere det venøse kateteret og utføre CLP innen 45 min. Etter opplæringsperioden, en anestesi / kirurgi related dødelighet på 10% kan forventes.
5. Post-kirurgisk behandling og Fluid Resuscitation
- Den plasseres i liggende stilling og feste kateteret til festetråden med tape. Flytt musen til en enkelt mær. Bruke et stativ med justerbar klemme for å holde svivelanordningen 25 cm over mus og fast tape den frie del av metallfestetråden til rotasjonspunktet av svivelen.
- Fest en sprøyte inneholdende blandingen av kolloider og balanserte krystalloider (1: 4) for å veneledningen for å starte gjentilførsel av væske.
- Plasser holderen i et temperaturregulert (27 ° C) dyr Skap med 12 timer lys og mørke-sykluser og begynne intravenøs væske-redning (10 ml / kg / t) via en nøyaktig sprøyte-drevet infusjonspumpe. Gi bur anrikning slik som reirmateriale og en trekloss.
6. Intensive Care
- Ved 6 timer etter operasjon, subkutant injisere smerte medication og antibiotika (0,3 ml buprenorfin (0,15 mg / kg) og 0,2 ml imipenem (16.67mg / kg)). MERK: Ved å følge standard forsøksdyr medisin praksis blir den første dose av smerte meds gitt før den opprinnelige kirurgiske innsnitt og deretter som anvist ved institusjonens retningslinjer veterinær. Subkutane injeksjoner bør være nøye injiseres inn i det subkutane området.
- Etter 20 - 24 timer med gjentilførsel av væske, erstatte de krystalloider / kolloider med total parenteral ernæring (6,67 ml / kg / time).
MERK: Total parenteral ernæring administrert (5,8 kcal / 24 timer) dekker omkring 40% av de daglige kaloribehovet til mus, tilsvarende den tidlige kaloriinntak av pasienter i intensivavdelinger. - Subkutant administrere smertestillende og antibiotika (0,6 ml buprenorfin (0,3 mg / kg) og 0,2 ml imipenem (16,67 mg / kg) hver 12. time i løpet av hele perioden av kritisk sykdom.
- Sjekk dyrene minst hver 3 time i løpet av dagen. Vurdere lidelse ved å gi en smertepoengsum basert på det validerte mus grin skala 11. Intensivere overvåking for dyr med en høy smertescore.
7. slutten av forsøket
MERK: Godkjenning av og anbefalinger om nivået av alvorlighetsgraden av modellen og retningslinjer og retningslinjer for menneske endepunkter må innhentes fra den lokale Institutional Ethical Review Board for Forsøksdyrutvalget.
NB: I tilfelle av en ikke-funksjonell venekateter som blokkerte kateter, delokalisering av kateteret, problemer med sprøytepumpe, er den dyr ekskludert fra studien og avlives.
- Ved slutten av forsøksperioden, dypt bedøve mus ved bruk av en blanding av 0,03 ml ketamin (100 mg / kg) og 0,02 ml (13 mg / kg) xylazin. Avlive mus ved å trekke blod ved hjertestans punktering. Lagres snap frosne vevsprøver av interesse ved -80 ° C.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
C57BL / 6-mus ble gjort for kritisk syke som beskrevet ovenfor. Vi har utført to forsøk for å vurdere etter CLP overlevelse inntil to tidspunkter: overlevelse inntil dag 5 (n = 15) og overlevelse til dag 7 (n = 22) etter CLP. Overlevelseskurvene for de to forsøkene var ikke signifikant forskjellig (i forhold til dag 5), som indikerer reproduserbarheten av det eksperimentelle oppsett. Ikke-overlevende dyr ble funnet død eller avlives på grunn av rekkende menneskelige endepunkter. Ligering av 50% av blindtarmen i kombinasjon med antibiotika, gjentilførsel av væske og total parenteral ernæring via et venekateter i vena jugularis, som er beskrevet, resulterte i en 13% dødelighet etter en dag med kritisk sykdom, 24% dødelighet etter 3 dagers kritisk sykdom, 27-31% dødelighet etter 5 dager med kritisk sykdom og 36% etter 7 dager med kritisk sykdom. De friske par-matede, mus, som var kalori begrenset til næringsinntaket av kritisksyke mus, ikke viste noen dødelighet.
Figur 2: overlevelseskurver etter 5 eller 7 Dager med kritisk sykdom. Det var ingen dødelighet i gruppen av friske dyr (A, B, stiplet linje - friske dyr uten kirurgi). Fem dager etter operasjonen (A), dødeligheten var 27% (heltrukket linje). Syv dager etter induksjon av sepsis (B), var dødeligheten var 36%. Mus med lekker eller løsnede katetere ble utelukket fra forsøket (15%). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vi har utviklet en mer klinisk relevant musemodell med kritisk sykdom, ved å kombinere det cøkale ligering og punktering metode for å indusere sepsis med bruk av et sentralt venekateter for væsker, legemidler og nærings administrasjon. Det eksperimentelle oppsettet er reproduserbar, gjør det mulig å studere langvarig fase av kritisk sykdom og resulterer i en stabil dødelighet, herved etterligne den humane kliniske situasjonen 1.
Cekale ligering og punktering har blitt grundig anerkjent som en dyremodell for akutt kritisk sykdom som gjengir hovedtrekkene ved sepsis 6, 7. Men denne modell av akutt kritisk sykdom ikke tillater studiet av multippel organsvikt ikke-oppløsnings, muskelsvinn, og endokrine og metabolske endringer som er typiske for langvarig fase av kritisk sykdom. Videre prekliniske funn med denne modellen ofte unnlater å translate til den kliniske human innstilling 8, 9, 10. Derfor har vi utviklet en modell hvor plassere et sentralt venekateter lar etterforsker for å administrere omfattende væske gjenoppliving, narkotika og total parenteral ernæring. Disse støttende tiltak er av avgjørende betydning for kritisk syke pasienter for å overleve den akutte fasen av kritisk sykdom. Til tross for plassering av denne sentrale venekateter, dyrene er fortsatt i stand til å fritt bevege seg med relativt mindre ubehag. Daglig smertestillende medikamenter bidrar til å lindre lidelse, som vurdert av musen grimase omfanget av smerte 11. Denne modellen har også andre viktige aspekter av støttebehandling for kritisk syke pasienter, slik som antibiotikabehandling og smertestillende medikamenter.
Denne modellen har flere begrensninger. Først er det omfattende kirurgisk inngrep krevende og krever tilstrekkelig opplæring. Aldritheless, med tilstrekkelig trening, i gjennomsnitt 10% av de opererte dyrene dør i løpet av eller umiddelbart etter operasjonen. Videre katetere som ikke er godt plassert, kan føre til lekkasje av gjenopplivings væsker eller parenteral ernæring inn i toraks av dyret. I gjennomsnitt 15% av overlevende dyrene må bli ekskludert i løpet av studien på grunn av disse kateterrelaterte problemer. Således, når man beregner det nødvendige antall dyr som for et eksperiment, må man ta i betraktning en 25% overskudd på grunn av kirurgi og katetermessige tap. For det andre, med bare en venøs tilgangspunkt, antibiotika og smertestillende medikamenter har fortsatt å bli administrert subkutant to ganger daglig. I virkeligheten kan kompatibiliteten av parenteral ernæring med antibiotika og smertestillende medikamenter medikamenter ikke garanteres, og derfor co-infusjon bør unngås. Spyling av linjen etterfulgt av en bolus-injeksjon er også teknisk ikke mulig på grunn av begrenset blodvolum av musene. Tredje, anestesi og kirurgi nødvendig to kateteret vil indusere en alvorlig stressrespons av seg selv. Vi bruker friske dyr uten kirurgi som kontroller, og vurdere kateterrelatert kirurgi som en del av kritisk sykdom, kan sammenlignes med hva menneskelige kirurgiske intensivpasienter må tåle. For det fjerde, mens postoperativ smertestillende og antibiotika, og bruken av et sentralt venekateter for å tillate administrering av parenteral ernæring øker den kliniske relevansen av det murine CLP-modellen, vår modell fremdeles ikke fullstendig etterligner den kliniske menneskelige situasjon. Faktisk, på grunn av den lille størrelsen på dyret blir det vanskelig å innføre flere avanserte støttende teknikker, slik som renal erstatningsterapi. Men bruk av denne modellen gjør at genetisk innblanding, avgjørende rakne patogenesen av kritisk sykdom.
Det har vist seg at dødeligheten og alvorlighetsgraden av CLP prosedyre kan manipuleres, dersom det anses nødvendig, ved den del av blindtarmen som blir ligert av størrelsen og number av punkteringer, subkutan fluid gjenoppliving og daglig antibiotisk administrasjon 6, 12. Vi velger en protokoll der vi tilgjengelig omfattende gjentilførsel av væske ved 10 ml / kg / time i de første 20 timer, som det tidligere er blitt vist at denne øker dødelighet 13. Våre tilpasninger skal innlemmes i protokollen hvis en modell av langvarig kritisk sykdom er ønsket i stedet for en modell av dødelighet. Denne musemodell benytter en middels kvalitet CLP, intravenøs gjentilførsel av væske og antibiotikabehandling for å skape en mer klinisk relevant modell av kritisk sykdom, slik som vist med sine forlengede overlevelseskurver som etterligner overlevelsesraten til human sepsis 1. ICU pasientpopulasjon, som den generelle befolkning, er aldring 14. For å etterligne humant intensivavdeling enda tettere, kan man bruke modne mus (6 måneder), som anvendt i denne studien, i ellerder for å forbedre kliniske relevansen av den eksperimentelle modell.
I konklusjonen, dette krever mus modell en omfattende kirurgisk prosedyre og daglig intensiv pleie av dyrene, men det resulterer i en modell av kritisk sykdom, som gjør at etterforsker for å studere aspekter ved langvarig fase av kritisk sykdom.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Buprenorphine | Ecuphar | Vetergesic 0.3 mg/mL | |
| C57BL/6 | Janvier labs | C57BL/6JRj | |
| colloids | Fresenius Kabi | Volulyte 6% | |
| crystalloids | Baxter | Plasmalyte a viaflo | |
| Ethilon 3.0 | Ethicon | F3211 | |
| Imipenem | MSD | Tienam 500 mg powder for injection fluid | |
| Isoflurane | Eurovet | Iso-vet | |
| Ketamine | Eurovet | Nimatek 100 mg/mL | |
| LocTite Super glue3 all plastics | Rectavit | 119818 | |
| Mersilk 3.0 | Ethicon | L192 | |
| Mersilk 5.0 | Ethicon | F682 | |
| Microrenathane .025" O.D. x .012" I.D. | Bioseb | MRE-025 | |
| olimel N7E | Baxter | ||
| PE10 - Polyethylene .011" x .024" | Instech Solomon | BTPE-10 | |
| PE-50 tubing .023" x.038" | Instech Solomon | BTPE-50 | |
| Rodent Swivel 20 G | Bioseb | RS-20G | |
| Ropivacaïne | Astrazenica | Naropin 2 mg/mL | |
| Xylazine | VMD | Xylazine hydrochloride 2% |
References
- Angus, D. C., van der Poll, T. Severe sepsis and septic shock. N Engl J Med. 369 (9), 840-851 (2013).
- Singer, M., et al. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). JAMA. 315 (8), 801-810 (2016).
- Remick, D. G., Newcomb, D. E., Bolgos, G. L., Call, D. R. Comparison of the mortality and inflammatory response of two models of sepsis: lipopolysaccharide vs. cecal ligation and puncture. Shock. 13 (2), 110-116 (2000).
- Copeland, S., et al. Acute inflammatory response to endotoxin in mice and humans. Clin Diagn Lab Immunol. 12 (1), 60-67 (2005).
- Seok, J., et al. Genomic responses in mouse models poorly mimic human inflammatory diseases. Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (9), 3507-3512 (2013).
- Rittirsch, D., Huber-Lang, M. S., Flierl, M. A., Ward, P. A. Immunodesign of experimental sepsis by cecal ligation and puncture. Nat Protoc. 4 (1), 31-36 (2009).
- Zolfaghari, P. S., Pinto, B. B., Dyson, A., Singer, M. The metabolic phenotype of rodent sepsis: cause for concern. Intensive Care Med Exp. 1 (1), 25 (2013).
- Radermacher, P., Haouzi, P. A mouse is not a rat is not a man: species-specific metabolic responses to sepsis - a nail in the coffin of murine models for critical care research. Intensive Care Med Exp. 1 (1), 26 (2013).
- Dyson, A., Singer, M. Animal models of sepsis: why does preclinical efficacy fail to translate to the clinical setting. Crit Care Med. 37 (1 Suppl), S30-S37 (2009).
- Osuchowski, M. F., et al. Abandon the mouse research ship? Not just yet. Shock. 41 (6), 463-475 (2014).
- Langford DJ1, B. A., Chanda, M. L., Clarke, S. E., Drummond, T. E., Echols, S., Glick, S., Ingrao, J., Klassen-Ross, T., Lacroix-Fralish, M. L., Matsumiya, L., Sorge, R. E., Sotocinal, S. G., Tabaka, J. M., Wong, D., van den Maagdenberg, A. M., Ferrari, M. D., Craig, K. D., Mogil, J. S. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat Methods. 7, (2010).
- Hollenberg, S. M., et al. Characterization of a hyperdynamic murine model of resuscitated sepsis using echocardiography. Am J Respir Crit Care Med. 164 (5), 891-895 (2001).
- Heuer, J. G., et al. Cecal ligation and puncture with total parenteral nutrition: a clinically relevant model of the metabolic, hormonal, and inflammatory dysfunction associated with critical illness. J Surg Res. 121 (2), 178-186 (2004).
- Conti, M., Merlani, P., Ricou, B. Prognosis and quality of life of elderly patients after intensive care. Swiss Med Wkly. 142, (2012).
