Summary
ويعرض هذا العمل منهجية تطبيق عالية تركز على كثافة الموجات فوق الصوتية لعرقلة إمكانات العمل للأعصاب الأعصاب السكري.
Abstract
وقد أجريت العصب التوصيل كتلة مع محول عالية تركز على كثافة الموجات فوق الصوتية (هيفو) في نماذج حيوانية طبيعية والسكري مؤخرا. يمكن حظر هيفو عكسية التوصيل للأعصاب الطرفية دون الأضرار الأعصاب أثناء استخدام معلمة بالموجات فوق الصوتية مناسبة. كتلة مؤقتة وجزئية من إمكانيات عمل الأعصاب تبين أن هيفو يمكن أن تكون مفيدة علاج السريري لتخفيف الألم. يوضح هذا العمل إجراءات قمع إمكانات عمل الأعصاب الأعصاب في الفئران السكري في فيفو استخدام محول هيفو. الخطوة الأولى لتوليد الكبار ذكور الفئران الأعصاب السكري بحقن بالستريبتوزوتوسين (STZ). والخطوة الثانية لإجراء تقييم اعتلال الأعصاب المحيطية السكري في الفئران السكري الناجم عن STZ تحقيقا فراي فون إلكترونية ولوحة الساخن. والخطوة الأخيرة للسجلات في فيفو إمكانات العمل خارج الخلية العصب مكشوف ل sonication هيفو. الأسلوب الذي أظهر هنا قد تستفيد الدراسة للموجات فوق الصوتية تطبيقات مسكن.
Introduction
الأدوية عن طريق الفم، الوخز بالإبر1، و تحفيز العصب الكهربائية2 قد استخدمت لعلاج اعتلال السكري مؤلمة. ومع ذلك، الآثار الجانبية للأدوية عن طريق الفم، الغازية عملية الوخز بالإبر، وتحفيز العصب الكهربائية تعوق الفعالية العلاجية، والامتثال للمريض. وقد تم التحقيق كتلة بالموجات فوق الصوتية للأعصاب المحيطية في نماذج حيوانية لعقود3،،من45. التوصيل في المختبر الأعصاب الوركي من الضفادع الخضراء الكبيرة كانت تحول دون عكسية بعد علاج الحبوب 10-20 من التعرض للموجات فوق الصوتية ل 0.4-1.0 s6. عامل واحد كتلة التوصيل العصب هو ارتفاع درجة الحرارة الناجمة عن الموجات فوق الصوتية7. للمرضى الذين يعانون من اعتلال، أنجز قمع إمكانات العمل مجمع العضلات (CMAPs) في العصب الشظوي المعرضة للموجات فوق الصوتية المنخفضة الكثافة ل 2 دقيقة8. وكان الوقت الانتعاش الكامل ضمن مدة 5 دقائق.
في الآونة الأخيرة، إدارة الأغذية والعقاقير في الولايات المتحدة وافق هيفو كعلاج غير الغازية لاورام الرحم الورم الليفي9، بالييشنز الألم العظام الانبثاث10، و11من سرطان البروستاتا. محول طاقة هيفو تنبعث الأشعة الصوتية خارج الجسم، ويحيل في مختلف الأنسجة وسائل الحزم وتتلاقى على الورم المستهدف في التركيز. فورا تشكيل المنطقة المحورية لتوليد آثار المترجمة على الأورام المستهدفة دون إلحاق الضرر بالانسجة المحيطة بها. كما طبق هيفو تعوق التوصيل العصب أو التسبب في إزالة التعصيب الأعصاب في تجارب في فيفو العادي الفئران سبراغ داولي (SD)12. وباﻹضافة إلى ذلك، كانت الآثار القصيرة الأجل والطويلة الأجل هيفو على الأعصاب الأعصاب التحقيق13. أظهرت النتائج السابقة أن كتلة التوصيل العصبية الحسية عكسها أو الدائم يمكن تحقيقه عن طريق هيفو مع المعلمات المناسبة. بالإضافة إلى التطبيقات، ومسكن هيفو قد تستعمل كأداة للتحقيق الإسهام النسبي لمكونات الأجهزة الطرفية والمركزية للعصب التوصيل الحصار للبحوث الأساسية للجهاز العصبي وتطوير الأدوية للألم. ولذلك، هناك حاجة إلى هيفو حظر منصة تكنولوجية محددة للأعصاب المحيطية في نماذج حيوانية. والغرض من هذه المقالة لإثبات إجراءات تسد جزئيا أو كلياً إمكانات العمل للأعصاب الطرفية في الفئران الأعصاب السكري قبل هيفو. تم إنشاء نماذج الفئران السكري وتقييم الأعراض الأعصاب المحيطية. وتقدم منصة هيفو وعمليات تجريبية محددة لعلاج الأعصاب الوركي الفئران.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
رعاية الحيوان المؤسسية واستخدام اللجنة "معاهد الصحة الوطنية" في تايوان وافقت كافة البروتوكولات الحيوان.
1-"التعريف النموذجي السكري" في "الذكور البالغين سبراغ"-داولي (SD) الفئران
- إزالة الكريات غذاء الفئران من القفص إلى سريع ذكور الفئران SD (300-350 غ) ح 6 قبل التعريفي STZ.
- سترات الصوديوم إعداد المخزن المؤقت (0.1 M، الأس الهيدروجيني 4.5).
- حل 1.05 ز مونوهيدرات حامض الستريك (ج 6 ح 8 س 7 · ح 2 س؛ mol. الوزن 210.14) في 50 مل المقطر المياه لجعل حل حمض الستريك 0.1 م.
- 1.47 حل ز سترات صوديوم ثنائي هيدرات (ج 8 ح 5 س 7 · 3 غ 2 ح 2 س؛ mol. بالوزن 294.12) في 50 مل المقطر المياه لجعل حل سترات الصوديوم 0.1 م.
- إضافة 25 مل حمض الستريك الحل إلى الحل سترات الصوديوم 25 مل. رصد سترات الصوديوم العازلة الرقم الهيدروجيني (pH 4.5) باستخدام مقياس الأس الهيدروجيني.
ملاحظة: المخزن المؤقت هو أدلى متساوي التوتر إضافة وحدة تخزين مناسبة للحل سترات الصوديوم 0.1 م.
- STZ تذوب في المخزن المؤقت لسترات الصوديوم 0.1 M العائد 50 ملغم/مل الحل STZ-
ملاحظة: الحل STZ حساسة للضوء، ولذلك، تغطية الحل STZ مع رقائق الألومنيوم واستخدامها ضمن 15-20 دقيقة - رسم الحل STZ 50 مغ/كغ في محقن الأنسولين أو السلين 1 مل مع إبرة مقياس 26 إلى 28-تنظيف مكان الحقن مع جهاز pad إيثانول وحقن إينترابيريتونيلي الحل STZ في الربع العلوي الأيمن من البطن لتجنب إتلاف أجهزة البطن.
- توريد الفئران مع المياه السكروز 10% كمصدر المياه الوحيد ل 48 ساعة بعد الحقن STZ لمنع نقص السكر في الدم.
2. "تأكيد السكري" في الفئران التي يسببها STZ
- مراقبة تركيز جلوكوز البلازما صيام جميع الفئران حقن من قبل STZ وظيفة ح 72 مع مقياس جلوكوز.
- سريع الفئران السكري الناجم عن STZ ح 15 قبل قياس صيام الدم مستوى السكر.
- كبح جماح الفئران في كيس من ضبط النفس وفضح ذيول لجمع الدم خلال قياسات الجلوكوز في الدم- استخدام
- من مجلة لانسيت دم بوخز غيض الذيل للحصول على قطره دم صغيرة. وضع قطره الدم على شريط اختبار من جلوكوز. تسجيل مستويات جلوكوز البلازما الصائم.
ملاحظة: المقياس الجلوكوز يكشف ويعرض مستوى الجلوكوز في الدم في وحدات من مغ/دل. استبعاد الجرذان مع الصيام مستويات الجلوكوز في الدم أقل من 150 ملغ/دل بعد أسبوعين من STZ-الحث.
3. تقييم "اعتلال الأعصاب المحيطية السكري" في "الفئران السكري"
- تقييم اللودينيا الميكانيكية بالالكترونية فون فري.
- روض المستحثة STZ الفئران السكري في قفص على أرضية شبكة معدنية قطرها 1 سم لمدة 30 دقيقة قبل أن يقيم هند مخلب استجابة الانسحاب.
- استخدام تحقيق فراي فون إلكترونية مع نصيحة جامدة (0.8 ملم في القطر) يدوياً تطبيق الضغط على سطح أخمصي مخلب هند من الفئران، وزيادة الضغط تدريجيا حتى ينظر إلى استجابة انسحاب مخلب.
- سجل الضغط الذي يظهر في النظام، وكرر بقياس 5 مرات في الفئران، مع فاصل زمني 30 ثانية بين كل قياس.
- تقييم هايبرالجيسيا الحرارة مع صفيحة ساخنة.
- روض الفئران السكري الناجم عن STZ على صفيحة (24 ± 0.5 درجة مئوية) لمدة 10 دقائق قبل تقييم استجابة الألم.
- إزالة ووضع الفئران في اقفاصها بعد التعود وتسخين صفيحة والحفاظ على صفيحة ' s درجة حرارة 55 ± 0.5 درجة مئوية.
- مكان الفئران على صفيحة ساخنة أثناء بدء جهاز ضبط الوقت في وقت واحد.
- عند الفئران يسلك السلوكيات المتميزة، مثل لعق مخلب هند أو طبيعي عبها هند مخلب وإيقاف جهاز ضبط الوقت وتسجيل الكمون الانسحاب.
ملاحظة: إذا كان فأر لا تعبر عن سلوكيات متميزة بعد 20 s (20 s وقت التوقف)، إنهاء الاختبار صفيحة وإزالة الفئران من صفيحة.
4. في فيفو العصب "انسداد التوصيل" مع "محول هيفو"
ملاحظة: التجربة في فيفو يبدأ في الأسبوع 5 بعد حقن STZ 50 مغ/كغ-
- تنفيذ الإجراءات الحيوان قبل تجميد CMAPs مع sonication هيفو.
- تعقيم الأدوات الجراحية (مشرط ومقص وملقط وربط الزجاج) في اﻷوتوكﻻف قبل الجراحة.
- تخدير الفئران بالحقن داخل الخليط تيليتاميني/زولازيبام (40 مغ/كغ) وإكسيلازيني (10 مغ/كغ) أو عن طريق استنشاق 1.75 في المائة من إيسوفلوراني عبر المبخر إيسوفلوراني. مكان الفئران على منصة تدفئة للحفاظ على درجة حرارة الجسم. ضع
- على الفئران لإجراء عملية جراحية في ريكومبينسي البطني. تطبيق مرهم العين. تمديد ساق الفئران وقرصة سطح أخمص القدم مع أظافر اليدين للتأكد من عمق التخدير. إذا كانت الفئران تظهر استجابات الانسحاب، تطبيق التخدير إضافية.
- إزالة الشعر من الفخذ والسفلي الخلفي الفئران ماكينة كهربائية. تطبيق اليود السائل مع شاش نظيفة في موقع العمليات الجراحية ودائري التحرك الشاش إلى الخارج موقع الجراحية. استخدام جهاز pad الكحول لمسح اليود السائل مع نفس الحركة الدائرية. يتم إجراء هذه التجربة على موقع اليسار واليمين الجراحية. كرر هذا الإجراء في موقع العمليات الجراحية الأخرى عند تنفيذ الخطوة التالية للإجراء.
- استخدام مقص جراحي معقم أو مشرط جعل شق الجلد في الفخذ الظهرية. استخدم المقص جراحية غير حادة لفصل الأنسجة تحت الجلد بعناية وتأمين الجلد مع الجلد هوكس-يمكن النظر إلى عظم الفخذ في العضلات.
- استخدام المقص لفصل العضلات موازية لعظم الفخذ بعناية حتى ألياف العصب الوركي منتصف الفخذ المضمنة في العضلات مرئية. بعناية باستخدام ربط زجاج لفصل العصب الوركي منتصف الفخذ من الأنسجة الضامة المحيطة والعضلات.
- موضع العصب الوركي في منطقة التنسيق هيفو استخدام التبعي عصب مصنوعة خصيصا ( الشكل 1 و الشكل 3)-
ملاحظة: التبعي العصب مصنوعة خصيصا يتكون من 3 عناصر ( الشكل 3). كافة مكونات مصنوعة من polymethylmethacrylate شفافة (البولي ميثيل ميثا اكريلات). الصفحات الخارجية الهيكل العلوي للعنصر الأول هو 2.5 مم طويل القامة و M10XP0.7 ( الشكل 4 أ). البئر وسط 4.0 مم هول من خلال العنصر. افتتاح أسفل البئر مختومة بورقة من الشريط. قطر فتحه 1.2 مم والمسافة بين الطائرة وسط فتحه والسطح العلوي للعنصر الأول هو 3.1 ملم. "المكون الثاني" يتكون من هيئة رئيسية وأربعة أرجل والهيكل السفلي ( الشكل 4 باء). الصفحات الداخلية للهيكل السفلي هو 2.5 مم طويل القامة و M10XP0.7 لتناسب خيط خارجي مكون أنا. قطر الثقب المركزي هو نفس البئر وسط مكون أنا. أبعاد الهيئة الرئيسية 32 مم وقطرها 5.4 مم في السمك. وينتشر شكل متناظر أربعة أرجل. صممت قدمين قصيرة مماثلة للمحاذاة وقدمين طويلة مطابقة العمل لتركيب على العنصر الثالث. القطر الخارجي وارتفاع المكون الثالث هي 41 و 9.2 ملم. مؤشر الترابط الداخلي M36XP1.0 ومن خلال ثقب 27.5 ملم في القطر (< طبقة قوية = "إكسفيج"> 4 الرقم). المخروط تفتق جوفاء مع افتتاح أعلى من 84 ملم في القطر وافتتاح القاع 27.5 ملم في القطر. الارتفاع 57.5 ملم ( الشكل 5A).- قبل التجربة، نقع التبعي العصب اﻷكريليك مصنوعة خصيصا في حل التبييض لمدة 30-60 دقيقة تليها مغطس في الماء المعقم.
- استخدام ربط زجاج، رفع العصب بعناية ووضعها في الفتحة للعنصر أولاً
- المسمار المكون الثاني للعنصر أولاً ملء المركزي جيدا من مكون أنا مع المسابقة ' حل s للحفاظ على الدعوة والأعصاب بالموجات فوق الصوتية-
- المسمار المكون الثالث للمخروط الإسكان هيفو. قفص الاتهام المكون الثالث مع العنصر الثاني من خلال أربعة أرجل العنصر الثاني-
ملاحظة: يتم محاذاة مركز ثلاثة عناصر هندسية ومحول. المسافة بين العصب ومحول مساو للبعد البؤري، الذي يضمن العصب داخل المنطقة المحورية هيفو.
- إدراج زوج واحد من العلاج بوخز الإبر في أصل العصب الوركي وزوج الأخرى في عضلة الساق. توصيل كل زوج من الإبر إلى نظام حيازة الكهربية من خلال كابل محوري كهربائية ( الشكل 1).
ملاحظة: في واحدة من نهاية الكابل هي قصاصتين التمساح مقطع الإبر اثنين بشكل منفصل، وفي الطرف الآخر من الكبل موصل BNC ربط النظام. الأزواج من العلاج بوخز الإبر تعمل كأقطاب محفزة في العصب الوركي وتسجيل أقطاب كهربائية في عضلة الساق.- بتعيين معدل أخذ العينات وعرض النطاق الترددي من نظام حيازة الكهربية إلى 50 كيلو هرتز وهرتز 70--3 كيلو هرتز، على التوالي. تطبيق حافز المرجع الأعلى مع عرض نبض 0.1 مللي ثانية إلى أقطاب كهربائية محفزة في أصل العصب الوركي.
- تسجيل كمابس من أقطاب تسجيل وتضخيم CMAPs مع مكبر للصوت المدمج في نظام اكتساب الكهربية.
ملاحظة: استخدام مكبر للصوت المدمج في نظام اكتساب الكهربية لتضخيم الإشارات العصبية وسجل CMAPs من أقطاب تسجيل مع نظام حيازة الكهربية.
- استخدام محول هيفو ميجاهرتز 2.68 تجارية لقمع كمابس في الفئران الأعصاب السكري.
ملاحظة: يتم وصف مواصفات محول كما يلي: وعاء كروي عنصر مفرد مع فتحه قطرها 6 سم والبعد البؤري 5 سم، ومنطقة تنسيق الاهليلجي 4 ملم في العمق و 0.8 ملم في العرض في الميدان مجاناً. مليئة- تزج تغطي المخروط كروية، محول هيفو والمخروط في الخزان المياه يطرد. وضع محول هيفو في المخروط كروية وإصلاح غطاء المخروط في افتتاح أعلى المخروط كروية قبل 6 مسامير الرأس ( الشكل 5 (ب)). بعد الفقاعات في المخروط كروية يطردون بطبيعة الحال بسبب انخفاض كثافة الفقاعات بالمقارنة مع المياه، ختم افتتاح الواجهة الأمامية للمخروط بشريط شفاف 0.03 mm سميكة. برغي المكون الثالث على مخروط كروية.
- إخراج محول هيفو مع مخروط كروية والمكون الثالث من خزان المياه يطرد.
ملاحظة: مياه التناضح العكسي المستخدمة في هذه الدراسة هو الماء المنقي بعملية التناضح العكسي. هو غلى مياه التناضح العكسي طرد الغاز. بعد التبريد، يتم الحصول على الماء ديجاسيد في دبابة مختومة فردية-
- وضع مكون أنا في الفضاء بين العصب والعضلات بعناية، وموقف العصب في فجوة المكون "أولاً تنفيذ" الخطوات 4.2.3 و 4.2.4 التأكد من أن العصب داخل منطقة التركيز هيفو ( الشكل 3A )-
- ربط مولد دالة ومضخم الترددات الراديوية. قم بتوصيل مكبر للصوت السلطة محول هيفو لتوليد الشعاع هيفو. تعيين يدوياً إخراج الجهد مولد دالة إلى هيفو محول الطاقة عبر مكبر للصوت السلطة. يدوياً إيقاف تشغيل مولد الدالة مرة واحدة وقت التعرض هيفو متروك. مراقبة الوقت باستخدام جهاز ضبط وقت.
ملاحظة: كثافة والطاقة من شعاع هيفو المستخدمة في هذه الدراسة هي 2,810 ث/سم 2 و 84 ي/مم 2، على التوالي.
في نفس الوقت، تسليم - التحفيز عن طريق نظام حيازة الكهربية (الخطوة 4، 3) وشعاع هيفو عبر نظام هيفو (الخطوة 4.6) للعصب الوركي أثناء تسجيل في كمابس. تدريجيا بزيادة التعرض هيفو على العصب الوركي من 3 ق، 5 s إلى 8 s حتى لوحظ انخفاض أو تثبيط السعة كمابس.
شعاع
- سجل CMAPs مرة في الثانية أثناء تسليم هيفو. وبعد مراقبة التغيير في السعة ل CMAPs، إيقاف النظام هيفو ويدويًا انقر على أيقونة سجل في البرنامج اقتناء الكهربية إلى سجل كمابس كل 2 دقيقة في وقت مبكر 10 دقائق، كل 5 دقائق في 30 دقيقة على التوالي، وكل 10 دقيقة في آخر المرحلة حتى وقت التسجيل تصل إلى 2 حاء
- عنصر منفصل الثاني والثالث من العصب التبعي ( الشكل 3) لإزالة محول هيفو من موقع شق. عنصر منفصل الثاني والإفراج عن العصب الوركي المضمون. خياطة الموقع الجراحي للفئران السكري بخيوط الوتر الكروميك 4-0 بعد تسجيل في كمابس. تطبيق اليود السائل إلى موقع الجراحة للوقاية من العدوى.
- وضع الأقفاص في لوحة تدفئة والسماح للفئران لاسترداد في اقفاصها قبل إعادتها إلى مرفق الحيوان. توفر الفئران مع الايبوبروفين في مياه الشرب لمدة 3 أيام أو داخل حقن البوبرينورفين (0.05-0.1 مغ/كغ)-
- إدراج أقطاب محفزة وتسجيلها في أصل العصب الوركي وعضلات الساق الفئران الأعصاب السكري تخديره كما هو موضح في الخطوات 4.1.2 و 4.3 في أيام 7 و 14 و 28 بعد sonication هيفو الأولى. كرر الخطوات من 4.3.1 إلى 4.3.2.
- وضع الأقفاص في لوحة تدفئة والسماح للفئران لاسترداد في اقفاصها قبل نقل الأقفاص لمرفق الحيوان.
- Euthanize في الفئران بعد التجربة. وضع الفئران في غرفة لثاني أكسيد الكربون. انتظر حوالي 5 دقائق للفئران التوقف عن التنفس. التأكد من أن توقف القلب عن الضرب-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
وبينت الدراسة في فيفو ، مع جرعة هيفو سونيكيشن s 3 في شدتها 2,810 ث/سم2، قمعت كمابس نسبة 20 في المائة من خط الأساس، ولكنها قد تعافي تماما بعد 30 دقيقة (الشكل 2A، الماس) وكانت تقريبا ثابت في فترة 28 يوما (الشكل 2Bوالماس). هيفو s 5 التعرض في نفس الكثافة، CMAPs انخفضت إلى 65.4 في المائة (9.5 في المائة) من خط الأساس في دقيقة 4 وتعافي 73.7 في المائة (12.6%) من خط الأساس خلال 120 دقيقة (الشكل 2A، المربعات). كمابس لم يعودوا إلى مستويات خط الأساس حتى يوم 14 (الشكل 2B، المربعات). عندما ازداد هيفو سونيكاتيون الوقت إلى 8 s تحت نفس الكثافة، كمابس تم تخفيض 26.0 في المائة (14.1 في المائة) من خط الأساس في دقيقة 4 (الشكل 2A، مثلثات)، لكن زيادة 38.0% (12.0 في المائة) من خط الأساس في 120 دقيقة، وزادت تدريجيا إلى 74 في المائة من خط الأساس بيوم 28 (الشكل 2B، مثلثات). انظر لي، المجلس،13 للحصول على تفاصيل إضافية.
الشكل 1 : إعداد تجريبية في فيفو العصب التوصيل كتلة ذات كثافة عالية تركز الموجات فوق الصوتية (هيفو)- (أ) مصنوعة خصيصا اكريليك مخروط كروي مليء بالتناضح العكسي يطرد المياه كان جنبا إلى جنب مع التبعي العصب للتأكد من محول منطقة هيفو المحورية في المستوى البؤري للأعصاب. (ب) تنشيط وتسجيل أقطاب ترد في الشكل. وضع التبعي العصب العصب الوركي في المستوى البؤري لشعاع هيفو. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 2 : ردود كمابس في في فيفو الفئران الأعصاب السكري بعد 3 ق، 5 s، و 8 s Sonication هيفو. (أ) الدورات الزمنية من كمابس أثناء التسجيل يوم 1. بعد 3 ق، 5 s، و 8 s sonication هيفو، كمابس كانت قد انخفضت خلال 10 دقائق مبكرا وشفي بعد 120 دقيقة (ب) الدورات الزمنية CMAPs خلال التسجيلات يوم 7 و 14 و 28. تم استردادها CMAPs الكامل باليوم 03:14 ص s و s 5 هيفو سونيكيشن يوم 1 وزيادة جزئيا بيوم 08:28 ص s هيفو sonication. الماس: 3 s sonication هيفو، المربعات: 5 s sonication هيفو، ومثلثات: 8 s sonication هيفو. n = 6 لكل معلمة هيفو. * Significantly مختلفة من اليوم الأول. يتم التعبير عن البيانات كالمتوسط (النطاق)، حيث شريط الخطأ نصف النطاق. يتم تعديل هذا الرقم من لي، والمجلس، وعام 201513. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3 : عملية تجميع لضمان العصب الوركي في بقعة ساخنة هيفو. (أ) تظهر الخطوات تجميع ثلاثة: (1) تسوية بعناية على العصب في الفتحة للعنصر الأول، (2) تجميع العنصر الثاني والعنصر الأول، (3) إدراج الواجهة الأمامية للمكون الثالث مع هيكل مخروط محول طاقة هيفو في العنصر الثاني. (ب) رسم تخطيطي لمحول هيفو متكاملة مع العصب الفئران. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 4 : رسومات مكونات الأول (أ), الثاني (ب) و III (C)- الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 5 : تغطي الرسوم من مخروط كروية (A) والمخروط (ب)- الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
قمع الجزئية والمؤقتة action potentials الأعصاب الأعصاب من الفئران السكري في فيفو ولحظة وقوع أثر حظر بعد العلاج هيفو على حد سواء وقد لوحظت. أظهرت دراسة متابعة 28 يوما في كمابس أن حصار التوصيل العصبية آمنة يمكن أن تنفذ في تعرض هيفو مناسبة. نتيجة لذلك البروتوكول أعلاه من معاملة هيفو يمكن أن توفر حلاً بديلاً لكتلة التوصيل المعكوس للأعصاب الوركي في الفئران السكري.
في هذا الأسلوب، لا انحطاط العصبية، ويمكن استرداد الأعصاب الحسية تماما على مدى فترة من ساعات إلى عدة أيام في إصابات الأعصاب معتدل14. مسار الانتعاش الحسي الزماني للإصابات الشديدة، عادة يأخذ عدة أشهر، إذا حدث على الإطلاق. وعلاوة على ذلك، الألياف العصبية المحيطية تجديد أكثر تماما عندما تكون سليمة بعد سحق إصابات15أنابيب اندونيوريال وخلايا شوان الصفيحة القاعدية. ولذلك، نستنتج أن هيفو سبب إصابات الأعصاب معتدل لكن عكسها للقضية CMAPs قمعت بعد العلاج هيفو عاد إلى خط الأساس على مر الزمن. للإصابات العصبية الحادة، استرداد CMAPs إلا جزئيا، حتى بعد 28 يوما.
التقنية من هذه الدراسة تقدم برنامج تجريبي لدراسة الحيوان من آثار هيفو على الأعصاب الطرفية قبل الدراسة السريرية. يمكن أن تهدف منطقة التنسيق هيفو تحديداً العصب المستهدف بسبب العناصر الهيكلية والبروتوكول نمواً في هذه الدراسة، التي لا يحل المشكلة السابقة لتحديد المواقع. وإلى جانب العصب العادي، يمكن تطبيقها هيفو حجب التقنية أيضا العصب المريضة. غير أن القيود المفروضة على هذه التقنية الحالية تشمل الافتقار إلى درجة الحرارة رصد (مما يؤدي إلى تلف الأنسجة المحيطة بها)، والقصير وحجب تأثير، على الرغم من تكرار التعرض هيفو قد تمتد التسكين. ترجمة هيفو حجب التقنية للتجارب السريرية، مطلوب توجيه موسع من منطقة التنسيق هيفو، مثل التصوير بالموجات فوق الصوتية أو MR التصوير، لتحديد موقف الأنسجة المستهدفة ورصد درجة الحرارة في الوقت الحقيقي.
ألم الإغاثة نتيجة الأدوية عن طريق الفم الموجودة في فقط واحد من كل أربعة مرضى في تجارب الأم الأعصاب لما يزيد على 50% وتشكل العديد من الآثار الجانبية الهامة مثل النعاس والدوخة والنعاس16. يتم وضع طرائق المادية لنأمل أن تحسن كفاءة مسكن مثل الوخز بالإبر، التحفيز الكهربائية والمغناطيسية. ومع ذلك، فعالية الوخز بالإبر وتعتمد على خبرة الطبيب عاليا، والإجراء الغازية. فعالية التحفيز الكهربائي موسع أو التحفيز المغناطيسي هو حوالي 40% لحرية الألم في ح 2. التحفيز على حد سواء لا تركز على الموقع المحلي، التي تنتج بعض الآثار الضائرة17. ولذلك، لتلبية الاحتياجات غير الملباة السريرية لتخفيف الألم المحيطية، هيفو حجب التقنية أداة واعدة بسبب الفعالية الفورية وتأثير عكسها، والعلاج الطبيعي، والعلاج غير الغازية والاستخدام المنزلي المحتملة.
من المهم لهدف منطقة هيفو المحورية في العصب الوركي بدقة. ويوضح الشكل 3 الإجراء التخطيطي للعصب لتحديد المواقع في هذه المنطقة المحورية. الخطوة الأولى لاستخدام ربط زجاج قليلاً رفع العصب الوركي ووضعت في المكون أنا أدناه العصب، ومن ثم وضع أسفل العصب في فتحه مكون أنا (الشكل 3A). العصب يمر في موقع مركزي للعنصر الأول إلى الخطوة الأولى. والخطوة الثانية لتجميع المكون الثاني بالمكون أنا عن طريق هيكل ملولبة. تجميع المكونات الأولى والثانية هو التبعي العصب هو مبين في الشكل 2. المكون الثاني يلعب دور الربط بين المكونات الأولى والثالثة. قبل الجمع بين العنصرين الثاني والثالث، أنها تمتلئ ولﻵﻻت حل للمسابقة للإرسال الموجات فوق الصوتية، والحفاظ على العصب. الخطوة الأخيرة لإدراج العنصر الثالث هيكل الأمامية مقرنة مخروط محول طاقة هيفو إلى العنصر الثاني. اثنين من أزواج من الأعمدة الطويلة والقصيرة مرنة للمكون الثاني توفير قوة تحديد كافية. تجميع مكونات مصمم الثاني والثالث استناداً إلى مبدأ نقر-الحفرة تينون، التي يمكن أن تضمن توفير نقطة مركزية للمكونات الثلاثة في محور. البعد البؤري لمحول هيفو يساوي المسافة بين النقطة المركزية لمحول والنقطة المركزية لمكون أنا. نتيجة لذلك العصب بالتأكيد داخل المنطقة المحورية، والذي اهليلجي مع عرض 0.8 ملم وعمق 4 مم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
الدراسة تدعمها وزارة العلوم والتكنولوجيا (المشروع الأكثر 105-2221-E-400-001) والوطنية الصحية معاهد البحوث (المشروع BN-105-PP-10)، تايوان.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| streptozotocin | Sigma | 85882 | |
| citric acid monohydrate | Sigma | C1909 | |
| trisodium citrate dihydrate | Sigma | W302600 | |
| glucose meters | Roche Accu-Check Active | GC | |
| electronic von Frey device | IITC Life Science | 2390 | |
| hot plate | IITC Life Science | ||
| Biopac MP36 acquisition system | Biopac Systems, Inc. | ||
| HIFU transducer | Sonic Concepts | H108 | |
| function generator | Agilent | 33250A | |
| power amplifier | Electronics & Innovation | 1040L | |
| Rats | Biolasco taiwan | Sprague-Dawley | |
| Puralube vet ointment | Dechra | ||
| isoflurane vaporizer | Parkland Scientific | V3000PS | |
| Isoflurance | Attane | ||
| Restraint bag (Decapicones) | Braintree Scientific | DC 200 |
References
- Abuaisha, B. B., Costanzi, J. B., Boulton, A. J. Acupuncture for the treatment of chronic painful peripheral diabetic neuropathy: A long-term study. Diabetes Res Clin Pract. 39 (2), 115-121 (1998).
- Hamza, M. A., et al. Percutaneous electrical nerve stimulation: A novel analgesic therapy for diabetic neuropathic pain. Diabetes Care. 23 (3), 365-370 (2000).
- Ballantine, H. T. Jr, Bell, E., Manlapaz, J. Progress and problems in the neurologic applications of focused ultrasound. J Neurosurg. 17, 858-876 (1960).
- Foley, J. L., Little, J. W., Vaezy, S. Image-guided high-intensity focused ultrasound for conduction block of peripheral nerves. Ann Biomed Eng. 35 (1), 109-119 (2007).
- Lee, Y. F., Lin, C. C., Cheng, J. S., Chen, G. S. High-intensity focused ultrasound attenuates neural responses of sciatic nerves isolated from normal or neuropathic rats. Ultrasound Med Biol. 41 (1), 132-142 (2015).
- Young, R. R., Henneman, E. Reversible block of nerve conduction by ultrasound. Arch Neurol. 4, 83-89 (1961).
- Lele, P. P. Effects of focused ultrasonic radiation on peripheral nerve, with observations on local heating. Exp Neurol. 8 (1), 47-83 (1963).
- Hong, C. Z. Reversible nerve conduction block in patients with poly- neuropathy after ultrasound thermotherapy at therapeutic dosage. Arch Phys Med Rehabil. 72 (2), 132-137 (1991).
- Okada, A., Morita, Y., Fukunishi, H., Takeichi, K., Murakami, T. Non-invasive magnetic resonance-guided focused ultrasound treatment of uterine fibroids in a large Japanese population: impact of the learning curve on patient outcome. Ultrasound Obstet Gynecol. 34 (5), 579-583 (2009).
- Huisman, M., et al. International consensus on use of focused ultrasound for painful bone metastases: current status and future directions. Int J Hyperthermia. 31 (3), 251-259 (2015).
- Dickinson, L., et al. Medium-term Outcomes after Whole-gland High-intensity Focused Ultrasound for the Treatment of Nonmetastatic Prostate Cancer from a Multicentre Registry Cohort. Eur Urol. 70 (4), 668-674 (2016).
- Foley, J. L., Little, J. W., Vaezy, S. Effects of high-intensity focused ultrasound on nerve conduction. Muscle Nerve. 37 (2), 241-250 (2008).
- Lee, Y. F., Lin, C. C., Cheng, J. S., Chen, G. S. Nerve conduction block in diabetic rats using high-intensity focused ultrasound for analgesic applications. Br J Anaesth. 114 (5), 840-846 (2015).
- Donoff, R. B. Nerve regeneration: basic and applied aspects. Crit Rev Oral Biol Med. 6 (1), 18-24 (1995).
- Fawcett, J. W., Keynes, R. J.
- Nightingale, S.
- Lipton, R. B., et al. Single-pulse transcranial magnetic stimulation for acute treatment of migraine with aura: a randomised, double-blind, parallel-group, sham-controlled trial. Lancet Neurol. 9 (4), 373-380 (2010).
