हम ग्लैस्टर कोडिंग का अध्ययन करने के लिए तीन नए तरीके पेश करते हैं । एक सरल पशु, मोंडुका सेफ्टा (मंडुका) की मस्ती का उपयोग करते हुए, हम एक विच्छेदन प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं, जो कि स्टेरस्युलुलर टेट्रोड का उपयोग करने के लिए कई ग्लैस्टर रिसेप्टर न्यूरॉन्स की गतिविधि रिकॉर्ड करता है, और तस्करों के ठीक समय पर दालों को वितरित करने और निगरानी करने की एक प्रणाली है।
स्वाद की भावना पशुओं को पर्यावरण में रसायनों का पता लगाने के लिए अनुमति देता है, जिससे जीवित रहने के लिए महत्वपूर्ण व्यवहार पैदा होता है। जब रूचिकर रिसेप्टर न्यूरॉन्स (जीआरएन) स्टेस्टेंट अणुओं का पता लगाते हैं, तो वे स्वाद के बारे में सूचना और तेंदुए की एकाग्रता के बारे में जानकारी देते हैं, जो कि मस्तिष्क में अनुयायी न्यूरॉन्स के लिए प्रचार करते हैं। ये पैटर्न तात्विक के आंतरिक प्रस्तुतीकरण का गठन करते हैं, जो तब जानवरों को क्रियाओं और फार्म यादों का चयन करने की अनुमति देता है। संवेदी कोडिंग में बुनियादी सिद्धांतों का अध्ययन करने के लिए अपेक्षाकृत सरल पशु मॉडल का उपयोग एक शक्तिशाली उपकरण रहा है। यहां, हम मोंडुका सेन्स्टा की पतंग का उपयोग करके ग्लैस्टर कोडिंग का अध्ययन करने के लिए तीन नए तरीकों का प्रस्ताव करते हैं। सबसे पहले, हम एक्सीक्शन प्रक्रिया को एक्सिलोनी नसों और उपसमूह क्षेत्र (एसईजेड) को उजागर करने के लिए पेश करते हैं, जो उनके एक्सॉन से जीआरएन की गतिविधि की रिकॉर्डिंग की अनुमति देता है। दूसरा, हम टी रखकर कई जीआरएन की गतिविधि रिकॉर्ड करने के लिए बाह्य इलेक्ट्रोड के उपयोग का वर्णन करते हैंतंतुओं के तारों को सीधे तंत्रिका तंत्र में सीधे तीसरा, हम उच्च तात्कालिक परिशुद्धता के साथ, अलग-अलग स्वाद के दालों के वितरण और निगरानी के लिए एक नई प्रणाली पेश करते हैं। इन विधियों से जीवाणुओं से सीधे स्विस में न्यूरॉन संबंधी प्रतिक्रियाओं को लक्षण वर्णन करने की अनुमति मिलती है, इसके दौरान और बाद में स्तनपान दिया जाता है। हम कई जीआरएन से दर्ज वोल्टेज निशान के उदाहरण प्रदान करते हैं, और एक उदाहरण प्रस्तुत करते हैं कि व्यक्तिगत न्यूरॉन्स की प्रतिक्रियाओं की पहचान करने के लिए एक स्पाइक सॉर्टिंग तकनीक कैसे लागू हो सकती है। अंत में, हमारे रिकॉर्डिंग दृष्टिकोण को मान्य करने के लिए, हम जीआरएन से प्राप्त टेस्टोड्स के साथ तेज कांच इलेक्ट्रोड से प्राप्त इंट्रासेल्युलर रिकॉर्डिंग के लिए बाह्य रिकॉर्डिंग की तुलना करते हैं।
स्वाद और घृणित सिस्टम पर्यावरण में रसायनों के आंतरिक प्रतिनिधित्व को उत्पन्न करते हैं, जो क्रमशः स्वाद और गंध की धारणाओं को जन्म देते हैं। इन रासायनिक इंद्रियों जीवों के अस्तित्व के लिए महत्वपूर्ण कई व्यवहारों को हासिल करने के लिए जरूरी हैं, जो साथी और भोजन को शिकारियों और विषाक्त पदार्थों से बचाते हैं। प्रक्रिया शुरू होती है जब पर्यावरण रसायन संवेदी रिसेप्टर कोशिकाओं के प्लाज्मा झिल्ली में स्थित रिसेप्टर्स के साथ बातचीत करते हैं; इन कोशिकाओं, सीधे या न्यूरॉन्स के साथ बातचीत के माध्यम से, बिजली के संकेतों में पहचान और रसायनों की एकाग्रता के बारे में जानकारी transduce। तब ये संकेत उच्च क्रम न्यूरॉन्स और अन्य मस्तिष्क संरचनाओं के लिए प्रेषित होते हैं। इन चरणों की प्रगति के रूप में, मूल संकेत हमेशा परिवर्तनों से गुज़रता है, जो संवेदी जानकारी का पता लगाने, भेदभाव, वर्गीकृत, तुलना और संचय करने के लिए जीव की क्षमता को बढ़ावा देते हैं, और एक उपयुक्त कार्रवाई चुनने के लिए। समझ कैसे ब्रामें पर्यावरणीय रसायनों के बारे में जानकारी को विभिन्न प्रकार के कार्यों में सर्वश्रेष्ठ रूप से बदलने के लिए न्यूरोसाइंस में एक बुनियादी सवाल है।
घृणित कोडिंग अपेक्षाकृत सरल माना गया है: एक व्यापक रूप से आयोजित दृष्टिकोण यह मानता है कि हर रासायनिक अणु जो स्वाद (एक "स्वाद") को प्राप्त करता है, स्वाभाविक रूप से लगभग पांच या तो बुनियादी स्वाद गुणों ( अर्थात मीठा, कड़वा, खट्टा , नमकीन और उमामी) 1 इस "बुनियादी स्वाद" दृश्य में, स्वाद का तंत्र का काम यह निर्धारित करना है कि इन बुनियादी स्वादों में से कौन सा मौजूद है। इसके अलावा, तंत्रिका तंत्र में बुनियादी स्वाद का प्रतिनिधित्व करने वाले तंत्रिका तंत्र स्पष्ट नहीं हैं, और यह "लेबल लाइन" 2 , 3 , 4 , 5 , 6 या "फाइबर पैटर्न के पार" 7 द्वारा शासित होने का अनुमान है। </suP> , 8 कोड एक लेबल वाले कोड में, प्रत्येक संवेदी कोशिका और प्रत्येक तंत्रिका अनुयायियों को एक स्वाद की गुणवत्ता का जवाब मिलता है, साथ ही इस स्वाद के लिए समर्पित केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में उच्च प्रोसेसिंग केंद्रों के लिए सीधे और स्वतंत्र चैनल का गठन होता है। इसके विपरीत, एक फाइबर पैटर्न कोड में, प्रत्येक संवेदी सेल कई स्वाद गुणों का जवाब दे सकता है जिससे कि स्वाद के बारे में जानकारी संवेदी न्यूरॉन्स की आबादी के समग्र प्रतिक्रिया से दर्शायी जाती है। चाहे स्वादिष्ट सूचनाएं मूलभूत स्वादों, लेबल वाली रेखाओं के माध्यम से, या किसी अन्य तंत्र के माध्यम से प्रदर्शित की जाती हैं, यह अस्पष्ट है और हाल ही में 3 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 की जांच का फ़ोकस है। हमारे अपने हाल के काम से पता चलता है कि स्नेही प्रणाली उत्पन्न करने के लिए एक spatiotemporal जनसंख्या कोड का उपयोग करता हैबुनियादी स्वाद श्रेणियों के बजाय व्यक्तिगत टीचरों का प्रतिनिधित्व
यहां हम स्वाद का कोडिंग के अध्ययन में सहायता के लिए 3 नए टूल प्रदान करते हैं। सबसे पहले, हम हॉक्वमोथ मंडुका सेक्स्टा का इस्तेमाल अपेक्षाकृत सरल मॉडल जीव के रूप में करते हैं, जो स्वाद के इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल अध्ययन के लिए उत्तरदायी है और विच्छेदन प्रक्रिया का वर्णन करता है। दूसरा, हम व्यक्तिगत जीआरएन की गतिविधि को रिकॉर्ड करने के लिए बाह्य "टेट्रोड" का उपयोग करने का सुझाव देते हैं। और तीसरा, हम पशु को तस्सैल के ठीक समय पर दालों को वितरित करने और निगरानी करने के लिए एक नया उपकरण सुझाते हैं। इन उपकरणों को हमारी प्रयोगशाला और अन्य तकनीकों से अनुकूलित किया गया था जो घ्राण प्रणाली का अध्ययन करने के लिए उपयोग किया जाता था।
फलों के उड़ने जैसे ड्रोसोफिला मेलेनोगास्टर , टिड्डिस शिस्टोकेर्का अमेरीकाना और साथ ही कीट मंडुका सेफ्टा जैसे किड़े, दशकों तक नेताओं के बारे में बुनियादी सिद्धांतों को समझने के लिए शक्तिशाली संसाधन प्रदान किए हैंसंवेदी कोडिंग ( जैसे, ऑल्फ़ैक्शन 13 ) सहित vous सिस्टम। स्तनधारियों में, स्वाद रिसेप्टर विशिष्ट कोशिकाएं हैं जो कि जटिल द्वितीय-दूत मार्गों 1 , 14 के माध्यम से न्यूरॉन्स के साथ संवाद करते हैं। यह कीड़ों में सरल है: उनके स्वाद रिसेप्टर्स न्यूरॉन्स हैं। इसके अलावा, परिधि के पास स्तनधारी स्वाद पथ अपेक्षाकृत जटिल हैं, जिसमें कई, समानांतर तंत्रिका मार्ग शामिल हैं, और महत्वपूर्ण घटकों का उपयोग करने के लिए चुनौतीपूर्ण हैं, जिनमें छोटे बोनी संरचनाएं 15 कीट स्वाद के रास्ते सरल लगते हैं। कीड़ों में जीआरएन विशेष संश्लेषण में समाहित होती हैं जिन्हें एंटीना, माउंपर, पंख और पैर 16 , 17 में स्थित सेंसिला कहा जाता है। जीआरएन सीधे सबोसोफेगल ज़ोन (एसईजेड) को एक परियोजना बनाते हैं, जिनकी भूमिका को मुख्य रूप से स्नेही 17 माना जाता है, और जिसमें दूसरा क्रम होता हैस्वाद न्यूरॉन्स 10 वहां से सूचना शरीर को सजगता चलाने के लिए यात्रा करती है, और अधिक मस्तिष्क क्षेत्रों को एकीकृत, संग्रहित करने और अंततः व्यवहार विकल्पों को चलाने के लिए 16 ।
परिधीय स्वाद की प्रतिक्रियाओं को समझना आवश्यक है कि स्वाद की जानकारी कैसे फैल गई है और तंत्रिका तंत्र में बिंदु से लेकर पूरे बिंदु तक बदल जाती है। कीड़ों में जीआरएन की तंत्रिका गतिविधि की निगरानी करने के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका टिप-रिकॉर्डिंग तकनीक 12 , 18 , 1 9 , 20 , 21 , 22 , 23 है । इसमें एक इलेक्ट्रोड सीधे एक संवेदी पर रखा जाता है, जिनमें से कई अपेक्षाकृत आसानी से पहुंचते हैं। स्वाद इलेक्ट्रोड के अंदर शामिल किया गया है, जिससे कि एक को सक्रिय और विस्तारित किया जा सकता हैसंवेदीकरण में जीआरएन के न्यूरॉनल प्रतिक्रियाओं के बारे में racellularly उपाय लेकिन, क्योंकि स्वाद इलेक्ट्रोड में निहित है, तात्पर्य को हटाया जाने के बाद जीआरएन गतिविधि को मापना संभव नहीं है या इलेक्ट्रोड 20 की जगह के बिना चश्मदीद का आदान-प्रदान करने के लिए संभव है। एक अन्य विधि, "साइड-वॉल" रिकॉर्डिंग तकनीक, का उपयोग जीआरएन की गतिविधि को रिकॉर्ड करने के लिए भी किया गया है। यहाँ, एक रिकॉर्डिंग इलेक्ट्रोड को स्वाद संवेदी 24 के आधार में डाला जाता है, और सेंथिलम की नोक पर एक अलग गिलास केशिका के माध्यम से टैस्टेंट दिया जाता है। दोनों तकनीकों को जीआरएन से एक विशेष संवेदना तक रिकॉर्ड करना प्रतिबंधित है। यहाँ, हम एक नई तकनीक का सुझाव देते हैं: अलग-अलग संवेदी से यादृच्छिक रूप से चयनित जीआरएन एक्सॉनों से रिकॉर्डिंग करते हुए, जबकि अलग-अलग स्वादुस्सैस को संदेह के रूप में वितरित करते हैं। ऐक्सोन रिकॉर्डिंग को तेज ग्लास इलेक्ट्रोड या बाह्य इलेक्ट्रोड बंडलों (टेट्रॉड्स) को तंत्रिका में रखा जाता है जो कि एसिन्स से युक्त होते हैंजीईआरएस एसईजेड 10 को संदेह में मंडुका में , ये एक्सॉन अधिकाधिक तंत्रिका को पार करते हैं, जो कि विशुद्ध रूप से अभिवाही होने के लिए जाना जाता है, जिससे संवेदी प्रतिक्रियाओं की स्पष्ट रिकॉर्डिंग 25 हो सकती है । अक्षांश से रिकॉर्डिंग की इस पद्धति, दो घंटे से अधिक समय तक, स्वाद के प्रस्तुतियों की श्रृंखला के दौरान और बाद में, जीआरएन प्रतिक्रियाओं के स्थिर माप के लिए अनुमति देता है।
यहां, हम एसईजेड के साथ उपकला तंत्रिकाओं को उजागर करने के लिए एक विच्छेदन प्रक्रिया का वर्णन करते हैं, जो एसईजेड 10 में कई जीआरएन और न्यूरॉन्स की प्रतिक्रियाओं को एक साथ रिकॉर्ड करने की अनुमति दे सकता है। हम कस्टम-निर्मित 4-चैनल मुड़ तार टेदरोड का उपयोग करते हुए जीआरएन के बाह्य रिकॉर्डिंग के उपयोग का भी वर्णन करते हैं, जो एक स्पाइक सॉर्टिंग पद्धति के साथ मिलकर कई (हमारे हाथों में), जीआरएन के साथ-साथ एक साथ विश्लेषण करती है। हम टेस्टोड के साथ रिकॉर्डिंग की तुलना में तीव्र इंट्रासेल्युलर के साथ बनाए गए रिकॉर्डिंग की तुलना करते हैंइलेक्ट्रोड। अंत में, हम स्वादित उत्तेजनाओं को वितरित करने के लिए एक नए उपकरण का वर्णन करते हैं। कई शोधकर्ताओं द्वारा लंबे समय तक ऑल्फ़ाफी अध्ययन में सुगंध वितरित करने के लिए इस्तेमाल किए जाने वाले उपकरणों से अनुकूलित किया गया, हमारे नए उपकरण में गैस्टेशन के अध्ययन के लिए फायदे हैं: पिछले मल्टीचैनल डिलीवरी सिस्टम जैसे स्ट्रर्को और सहयोगियों द्वारा विकसित (जैसे संदर्भ 26 , 27 देखें ) में सुधार, हमारे उपकरण सटीक इस समय के एक वोल्टेज readout प्रदान करते हुए स्वाभाविक वितरण के समय पर नियंत्रण; और यह कई स्वादित उत्तेजनाओं 10 के तीव्र, अनुक्रमिक वितरण की अनुमति देता है। तंत्र स्वच्छ पानी के निरंतर प्रवाह में सूंड की जांच करता है जिसमें स्वादिष्ट दालों को नियंत्रित किया जा सकता है। प्रत्येक स्वाद नब्ज गुंडों से गुजरता है और फिर इसे धोया जाता है टेस्टेंट में बेस्वाद खाद्य रंगों की एक छोटी मात्रा होती है, जिससे एक रंग संवेदक को मॉनिटर करने की अनुमति मिलती है, सटीक समय के साथ, स्वादिष्ट ओव का मार्गह्रास के एर
यहां वर्णित विधियां अपेक्षाकृत सरल पशु, मंडुका सेक्स्टा से विवो रिकॉर्ड्स में अनुमति देने के लिए, लंबे समय से अधिक लंबे समय से चुनी गई जीआरएन (2 घंटे से अधिक समय के लिए), पहले, प्रसव के दौरान और प्रसव के बाद इन विधियों में सटीक अस्थायी नियंत्रण के साथ कई स्वादित उत्तेजनाओं के तेजी से, अनुक्रमिक वितरण की सुविधा है, लाभ जो स्वाभाविक प्रतिनिधित्व वाले तंत्रिका तंत्र के अध्ययन के लिए उपयोगी हैं। इस प्रोटोकॉल का अध्ययन करने के लिए इसका उपयोग किया गया है कि कैसे जीआरएन के टीएनटी के प्रति प्रतिक्रियाओं को बदल दिया जाता है जब वे अपने पोस्टअन्तैप्टीक लक्ष्य न्यूरॉन्स ( जैसे एसईजेड में) को संक्रमित करते हैं, तो एक साथ जीआरएन (जीआरएन) पर निगरानी रखने के लिए एक साथ monosynaptically connected interneurons 10 इसके अतिरिक्त, इन विधियों को प्रयोगकर्ता की जरूरतों के अनुसार अनुकूलित किया जा सकता है, जिससे परिष्कृत कोडन के मौलिक पहलुओं का अध्ययन करने के लिए जटिल मानदंडों का निष्पादन किया जा सकता है।
जब शुरुआतीहमारे अध्ययन, एक तकनीकी समस्या जिसे हम कभी-कभी समस्या निवारण करना पड़ते थे टेटरोड तारों के साथ अधिकाधिक तंत्रिका से स्पिकिंग सिग्नल का पता लगाने में अक्षमता थी। इसके लिए संभावित कारण भिन्न हैं, क्योंकि विच्छेदन प्रोटोकॉल चुनौतीपूर्ण है, और अच्छी तैयारी प्राप्त करने के लिए कुछ अभ्यास आवश्यक है। सबसे पहले, पतंग विच्छेदन के दौरान तंत्रिका ऊतक के आस-पास के म्यान को हटाने के दौरान अतिसंवेदनशील तंत्रिकाओं को क्षतिपूर्ति करना आसान होता है दूसरा, अगर म्यान पूरी तरह से नहीं हटाया जाता है, तो टेट्रोड तार तंत्रिका तक पहुंचने में सक्षम नहीं हो सकते हैं। दोनों ही मामलों में, इन मुद्दों को सुलझाने का सबसे आसान तरीका एक नई तैयारी शुरू करना अक्सर होता है तीसरा, टेदरोड तारों के साथ समस्या हो सकती है यह तारों के प्रतिबाधा को मापकर जांच की जा सकती है, जो कि ~ 270 के.यू. 1 किलोहर्ट्ज़ पर होना चाहिए। अगर प्रतिबाधा मूल्य ~ 300 के.टी.ए ऊपर है, वांछित प्रतिबाधा हासिल करने के लिए सोने के तारों के तारों को विद्युत रूप से उतारना (संदर्भ 30 देखें)। चौथा, उपकरण का एक टुकड़ा गलत तरीके से जुड़ा हो सकता हैया दुर्व्यवहार
एक और संभावित समस्या यह है कि स्पाइकिंग सिग्नल रिकॉर्ड किए जाते हैं लेकिन न्यूरॉन (टी) टीस्टेंट्स के लिए अनुत्तरदायी दिखाई देते हैं। ऐसा इसलिए हो सकता है क्योंकि दर्ज न्यूरॉन्स वितरित टीचंट्स के सेट में असंवेदनशील हैं। इसके अलावा, यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि जीआरएन के ऐक्सानों के अलावा, अतिसंवेदनशील तंत्रिका भी मेकांस्पेन्सरी फाइबर भी लेती हैं। इस प्रकार, जीआरएन के अलावा या इसके अतिरिक्त, तंत्रिकाय न्यूरॉन्स से रिकॉर्ड करना संभव है। हालांकि, स्वाभाविक डिलीवरी सिस्टम पूरे प्रयोग के दौरान लगातार मैकेनिकल इनपुट प्रदान करने के लिए डिज़ाइन किया गया है जिससे यह संभव नहीं हो पाया कि एक स्वाद के प्रति प्रतिक्रियाएं उसके प्रसव के यांत्रिक घटकों के प्रति प्रतिक्रियाओं से चकित होंगी। न्यूरॉन्स जो कुछ लेकिन कुछ अन्य टीचंट्स को नहीं देते हैं, या अलग अलग तरीकों के लिए अलग-अलग तरीकों से जीआरएन के रूप में वर्गीकृत किया जा सकता है। मिश्रित गिरावट या वाष्पीकरण के कारण स्वाददार एकाग्रता या संरचना में भिन्नता से बचने के लिए हम ताजा पतले tastants का उपयोग करने की सलाह देते हैंविलायक का हम टयूबिंग संदूषण और / या अवरोधों से बचने के लिए नियमित रूप से सिस्टम सफाई की सिफारिश करते हैं।
एक अन्य संभावित तकनीकी समस्या एक हानिकारक संकेत-टू-शोर अनुपात है। इस समस्या को अक्सर रिंचोराइड या बाथ ग्राउंड इलेक्ट्रोड की स्थिति का समायोजन करके हल किया जा सकता है। अन्य समाधानों को परिरक्षण और उपकरण में प्रत्येक विद्युत कनेक्शन की लंबाई को कम करने की आवश्यकता हो सकती है।
अंत में, यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि टेट्रोड रिकॉर्डिंग के उपयोग से प्राप्त आंकड़ों के सही विश्लेषण के लिए सावधान स्पाइक सॉर्टिंग आवश्यक है। हमने पाया कि पूरी तरह से स्वचालित विधियां आम तौर पर अपर्याप्त हैं हम सलाह देते हैं कि टेटरोड डेटा 10 , 2 9 , 31 , 32 , 33 का विश्लेषण करने से पहले स्पाइक सॉर्टिंग साहित्य से परिचित हो।
हमारे विच्छेदन समर्थक के विकल्पतिल का इस्तेमाल किया जा सकता है यहां, हमने मस्तक के ऊतक हिस्से के माध्यम से एक विच्छेदन का वर्णन किया है, जो कि उपकला नसों और एसईजेड तक पहुंच प्रदान करता है, लेकिन पृष्ठीय पक्ष के माध्यम से विदारक द्वारा इन संरचनाओं तक पहुंचना भी संभव है। हमें पाया गया कि पृष्ठीय पक्ष की तैयारी इन गन्दा संरचनाओं से उनके गहरे स्थान के कारण रिकॉर्डिंग करने के लिए इष्टतम नहीं है, लेकिन यह तैयारी मशरूम के शरीर जैसे उच्च क्रम संरचनाओं से रिकॉर्डिंग को सक्षम करने का लाभ प्रदान करती है, एक ऐसा क्षेत्र जो बहु से जुड़ा हुआ है -सेंद्री एकीकरण, एसोसिएटिव अधिगम और स्मृति प्रोसेसिंग 34 । हमने टेट्रोड इलेक्ट्रोड के इस्तेमाल से अधिकाधिक तंत्रिका से रिकॉर्ड करने पर ध्यान केंद्रित किया है, लेकिन जैसा कि हमने सचित्र किया है, मानक इन्ट्रासेल्युलर तेज इलेक्ट्रोड भी इस उद्देश्य के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। इसके अतिरिक्त, दोनों तकनीकों को कई मस्तिष्क क्षेत्रों 10 से एक साथ रिकॉर्डिंग करने के लिए जोड़ा जा सकता है। तंत्रिका विज्ञान साहित्य में कई उदाहरण हैं Iनैवेटेब्रेट मॉडल, जो संवेदी प्रसंस्करण के मौलिक सिद्धांतों जैसे कि घ्राण कोडिंग के बारे में खुलासा करने के लिए शक्तिशाली उपकरण साबित हुए हैं, जो कि कीड़े और कशेरुक दोनों के लिए लागू होते हैं 35 , 36 , 37 , 38 , 39 । हम आशा करते हैं कि हमारे तरीकों से चंचल कोडिंग के बारे में मौलिक नए अंतर्दृष्टि हो जाएंगे।
The authors have nothing to disclose.
यह काम एनआईएच-एनआईआईएचडी से एमएस के लिए इंट्रामरल अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था। टीआईएआईएच-एनआईएचएच इंस्ट्रुमेंटेशन कोर सुविधा के जी डॉल्ड और टी। टैलबॉट को स्वाभाविक डिलीवरी सिस्टम डिजाइन करने में सहायता के लिए धन्यवाद।
Dissection and specimen preparation | |||
Polypropylene tube, 15 ml -Falcon | Fisher Scientific | 14-959-53A | |
Needle, Short bevel, 19G x 1-1/2" | MONOJET | 888200144 | For aplying air to remove the hair from the moth. |
Modeling Clay-Van Aken Plastalina | DickBlick | 33268 | |
Petri dish-100 x 15 mm | VWR International | 89000-304 | |
Pipette tip (1-200 µL) | USA Scientific | 1111-0806 | |
Razor blade | Techni Edge | TE05-071 | |
22 AWG standard hookup wire | AlphaWire | 1551 | For inserting the proboscis into the pippete tip. |
Batik wax | Jacquard | 7946000 | |
Electric waxer | Almore International | 66000 | |
Stereo Myscroscope | Leica | MZ75 | |
Dumont #1 forceps (coarse) | World Precision Instruments | 500335 | For removing fat and non nervous tissue. |
Dumont #5 titanium forceps (fine) | World Precision Instruments | 14096 | For removing fat and non nervous tissue. |
Dumont #5SF forceps (super-fine) | World Precision Instruments | 500085 | For desheathing the nervious tissue. |
Vannas scissors (fine) | World Precision Instruments | 500086 | For removing the cuticle. |
Collagenase/Dispase | Sigma-Aldrich | 11097113001 | |
Epoxy | Permatex | 84101 | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Saline perfusion system | |||
Extension set with rate flow regulator | B Braun Medical Inc. | V5200 | |
IV administration set with Y injection site | B Braun Medical Inc. | V1402 | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Tastant delivery system | |||
White Translucent Nylon Tubing OD 1/4", ID 1/8" | Small Parts Inc. | B001JJT4SA | Rigid tube that connects the four main elements of the system. |
Soldering iron | Circuit Specialists | ZD200BK | |
Rotary tool-Dremel | Dremel | 4200 | |
Polypropylene mesh, hole size (hole size 0.1 x 0.13 cm) | Industrial Netting | XN5170 | For ensuring that the probosises of different animals are placed in the same location. |
Pressurized 16-Channel perfusion system | Bioscience Tools | PS-16H | For tastant delivery. This system includes pinch valves, tubing, manifold, solution cylinders, valve controler and fitting accesories. |
Polypropylene tubing, ID 0.034", ID 0.050" | Becton, Dickinson & Co | 427421 | Output tube from the perfusion system. |
Pneumatic PicoPump | World Precision Instruments | SYS-PV820 | For controlling the output channel of the perfusion system. |
Data acquisition software system, LabVIEW PCI-MIO-16E-4 DAQ card | National Instruments | LabVIEW 2011 | To control the pico pump for tastant delivery and to record the signals from the color sensor . |
Compulab 3 Manostat peristaltic pump | Sigma | P1366 | For pumping water. |
Silicone tubing, ID 1/16" OD 1/8" | Cole-Parmer | WU-95802-02 | To connect the water source to the peristaltic pump tubing, and the outlet tube of the pump to the rigid tube of the delivery system. |
Color sensor-digital fiber optic sensor | Keyence | FS-V31M | For monitoring tastant delivery. |
Color sensor-reflective fiber unit | Keyence | FU35-FZ | To connect the color sensor device. |
Dental periphery Wax | Henry-Schein Dental | 6652151 | To secure the proboscis into the rigid tube. |
Two 3.7 L containers | To provide water to the system, and to recollect the water waste. | ||
Fast green FCF | Sigma | F7258 | |
Dressing forceps 25.5 cm | WPI | 500364 | To introduce moths proboscis into the proboscis hole from the rigid tube. |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Electrophysiology Equipment | |||
D.C. amplifier | Brown-Lee | 440 | |
Lamp | Schott | Schott Fostec Light Source DCR 2 | |
Manual micromanipulator | Leica | micromanipulator | To precicely insert the tetrodes into the animals brain. The manipulator has to allow fine and coarse movements in x, y and z axis. |
Stereomicroscope | Leica | MZ75 | |
Vibration-isolation table (MICRO-g lab table) | TMC | 63-541 | |
Oscilloscope | Tektronix | TDS2014 | |
16-channle pre-amplifier and amplifier | 16 Channel MA-800 Amplifier System | B.E.S 2013 | |
Computer | Dell | optiplex 780 | The following are the minimum recommended requirements. RAM: 3.32GHz, 3GB. Processor: Intel Core 2 Duo. Graphic card: integrated Intel GMA X4500. |
Data acquisition software system, LabVIEW PCI-MIO-16E-4 DAQ card | National Instruments | LabVIEW 2011 | To control the pico pump for tastant delivery and to record the signals from the color sensor and electrode . |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Tastants | |||
KAc | Sigma-Aldrich | P5708 | |
LiCl | Sigma-Aldrich | L9650 | |
NaCl | Sigma-Aldrich | 73575 | |
Sucrose | Sigma-Aldrich | 84097 |