Summary
Rats' angst-lignende adfærd testet af forhøjet plus labyrint varierer meget afhængigt af omgivelserne. Viser her vi, hvordan apparatet indstillinger, især arm struktur, påvirke adfærd på labyrinten, og vi forklare en pålidelige protokol til påvisning af effekter af angstdæmpende narkotika. Denne betænkning vil bidrage til forskning, angst.
Abstract
Forhøjet plus maze test er en adfærdsmæssige test til vurdering af dyrs angst i gnavere. Selv om denne test er almindeligt anvendt i feltet i adfærdsmæssige videnskab, er modstridende resultater ofte hentet fra forskellige laboratorier. For at identificere årsagerne til de forskellige resultater, fokuseret vi tidligere har på arm funktioner, som varierer mellem laboratorier, de fleste især tilstedeværelse/mangel af afsatser på siderne af åbne arme og gennemsigtighed/uigennemsigtighed af lukkede arm vægge. I en tidligere betænkning, vi brugte en brugerdefineret designede beholder for at sammenligne rotte adfærd på forskellige kombinationer af åbne og lukkede arm design under ellers identiske forsøgsbetingelser, og viste, at forskelle i arm funktioner interferere med eksperimentelle resultater. Kort sagt, åbne arm afsatser betydeligt øget angst-lignende adfærd i rotter, mens gennemsigtig våben kan også faldet denne adfærd. Derudover har vi bekræftet en højere påvisning følsomhed af effekten af en angstdæmpende narkotika i en kombination af no-ledged åben arm + uigennemsigtig walled lukkede arm sammenlignet med en kombination af ledged åben arm + gennemsigtig walled lukkede arm. I denne betænkning introducere vi vores protokol for forhøjet plus maze test, samt diskussion af de vigtigste resultater fra den foregående betænkning og vores eksperimentelle erfaringer. Vi mener, at denne rapport vil give nyttig information til forskere, der har ansat eller som planlægger at bruge forhøjet plus labyrint i deres studier.
Introduction
Antallet af patienter, der lider af humør lidelser, herunder angst og depression, er stigende. Selv om udviklingen af disse lidelser indebærer både genetiske og miljømæssige faktorer, er de detaljerede patogene mekanismer endnu ikke fuldt forstået1. Forskning skal derfor fokusere på at afdække de underliggende mekanismer af affektive sindslidelser, samt udvikling af effektive lægemidler, der har færre bivirkninger.
Adfærdsmæssige test for forsøgsdyr er nyttige til at undersøge højere hjernefunktion, herunder følelser. Som dyrs adfærd er stærkt varierende, varierer eksperimentelle resultater ofte mellem laboratorier, selv hvis en identisk indavlet stamme blev brugt2. Således nødt forskere også til at forstå de grundlæggende funktioner i de eksperimentelle enheder, de vedtager for at give pålidelige og præcise resultater i laboratoriet.
Forhøjet plus maze test blev oprindeligt oprettet for at undersøge følelsesmæssig reaktivitet i gnavere3,4. Hele apparatet er normalt placeret 500 mm over gulvet, og består af to åbne og to lukkede arme, der gør en plus figur. Målinger af arm udforskning (herunder varigheden og hyppigheden af poster på hver arm), afstanden rejste, og angivne adfærd såsom strakt-deltager kropsholdning underkastet dyr registreres observationelle perioder. Af disse foranstaltninger anslås animalske angst som en eksperimentel resultat.
Forhøjet plus maze test bruges i hele verden, men ikke alle laboratorier anvender de samme apparater design5,6, og disse forskelle kan påvirke de eksperimentelle resultater. For eksempel omfatter forskelle tilstedeværelse eller fravær af afsatser langs de åbne arme og/eller brug af gennemsigtige eller uigennemsigtige vægge til lukkede arme5,6. Afsatser langs åbne arme og brug af gennemsigtige vægge til lukkede arme blev udviklet til at forhindre dyr afsporet apparater7og lette adfærdsmæssige observationer inde i de lukkede arme, henholdsvis8,9. Selv om der har været nogle undersøgelser der undersøgt, hvordan individuelle arm struktur forskelle kan påvirke evnen til at opdage dyr angst1,2,5,10,11 , de kombinerede virkninger af open (med/uden kort afsats) og lukkede (transparent/uigennemsigtig vægge) arm funktioner på dyrs adfærd er endnu ikke blevet undersøgt.
I en nylig rapport drøftede vi effekten af disse kombinationer af arm design på angst-lignende adfærd i rotter12. Kort sagt, åbne arm afsatser betydeligt øget angst-lignende adfærd i rotter, mens gennemsigtig våben kan også faldet denne adfærd. Derudover har vi bekræftet højere påvisning følsomhed af effekten af en angstdæmpende narkotika i en kombination af no-ledged åben arm + uigennemsigtig walled lukkede arm sammenlignet med en kombination af ledged åben arm + gennemsigtig walled lukkede arm. I denne rapport, vil vi introducere vores protokol for forhøjet plus labyrint test, sammen med diskussion af de vigtigste resultater fra den foregående betænkning. Vi mener, at denne betænkning vil give nyttige oplysninger for dem, der har ansat eller som planlægger at bruge forhøjet plus labyrint i deres studier.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle eksperimentelle procedurer beskrevet her er blevet godkendt af institutionelle Animal Care og brug Udvalget af Meiji University (IACUC 14-0002(1)). Dyr, der anvendes i de repræsentative resultater blev forberedt som følger: mandlige Sprague-Dawley rotter blev købt fra en laboratorium animalsk virksomhed og har til huse i grupper af 4 dyr pr. standard rotte bur (W200 × D410 × H250 mm) for mindst en uge før starten af den adfærdsmæssige eksperiment. Staldfaciliteter værelse blev opretholdt på omgivende standardbetingelser for lys (12:12 lys/mørke tidsplan med lys på klokken 10:00 h), stuetemperatur (25,0 ± 0,5 ° C), luftfugtighed (55 ± 10%) og ventilation (10 gange / h), og dyrene havde ad libitum adgang til fødevarer ( Oriental gær Co Ltd, Tokyo, Japan) og vand. Dyrene blev holdt i en standard rotte bur (W410 x D250 x H200 mm, Toyoriko Co, Ltd, Aichi, Japan) med papir sengetøj (alpha-dri, LSG Corporatin, Tokyo, Japan).
1. forhøjet Plus Maze Test
- Oprettet den forhøjede plus labyrint apparater i en brugerdefineret objektbeholder (W1, 500 × D1, 500 × H2, 000 mm) (figur 1A) med et plus-formet metal ramme 500 mm over ordet for at støtte run måde våben (figur 1B), belysning i container loftet til belyse overfladen af labyrinten til den krævede lysintensitet (figur 1 c), og en digital video kamera i center loft at aktivere live video overvågning af de adfærdsmæssige test (figur 1 c).
- Løse arme (L500 x W100 mm) på plus-formede ramme, og derefter lave den firkantet central platform (W100 x D100 mm) i midten af de fire arme (fig. 1 d -F).
Bemærk: I vores laboratorium, vi har to typer af åbne arme (L500 x W100 mm) og to typer af lukkede arme (L500 x W100 x H450 mm) (figur 1 d). De lukkede arme har enten gennemsigtig eller uigennemsigtig vægge (fig. 1 d), og de åbne arme er designet med eller uden et kort afsats (H5 mm, figur 1E). Den firkantede centrale platform (W100 × D100 mm) er placeret i midten af de fire arme (fig. 1 d -F). Således følgende fire kombinationer af våben kan fremstilles efter eksperimentelle formål: åbne arme med afsatser + lukkede arme med gennemsigtige vægge (afsatser/gennemsigtig), åbne arme med afsatser + lukkede arme med uigennemsigtig vægge (afsatser/uigennemsigtig), åbne arme uden afsatser + lukkede arme med gennemsigtige vægge (No-afsatser/gennemsigtig), og åbne arme uden afsatser + lukkede arme med uigennemsigtig vægge (No-afsatser/uigennemsigtig). Overfladen af arm landingsbanen er sort, hen til muliggøre bedre dyr sporing af automatiseret adfærd analyse software, som beskrevet i afsnit 2, adfærdsmæssige analyse. - Justere belysning intensitet på overfladen af den distale ende del af hver arm og central platform til ca. 100 Lux.
- Før hver prøve skal rense det hele apparat med 70% ethanol opløsning og tørres af med destilleret vand.
- Klik på "record" på harddisk optager til at starte det digitale videokamera, der vil optage rottens adfærd for videoen imaging analyse er beskrevet i afsnit 2, adfærdsmæssige analyse.
- Placer et dyr på den centrale platform står over for en åben arm og lad fri udforskning på apparater i 5 min.
- Klik på knappen"stop" på harddisk optager til at afslutte optagelsen.
- Tæl antallet af afføring og urinations efter hjemkomsten de testede dyr at dyr bolig værelse.
- Gentag fra trin 1.4 indtil slutningen af forsøget.
Bemærk: En tør prøvekørsel altid udføres før start hvert eksperiment for at kontrollere, at alle de eksperimentelle indstillinger er indstillet korrekt før alle forsøgsdyr er udsat for de eksperimentelle betingelser. Ellers nogle dyr, især de første dyr kan opleve forskellige miljøforhold (f.eks., lyde eventuelt induceret af eksperimentatoren under manipulation og/eller dyr stikord eventuelt efterladt af den tidligere testede dyr).
Bemærk: Eksperimentatorer er i nærheden af beholderen, når et dyr er ved at blive testet. Således, selvom eksperimentatorer ikke er synlige rotten kan stadig være stand til at fornemme dem via lugt og/eller lyd.
2. adfærdsanalyse
Bemærk: Adfærdsanalyse udføres ved manuel og automatiseret analyse software.
-
Manuel observation
- Når dyret er placeret på afsatsen, observere følgende: antallet af poster (en post på en arm er defineret som enhver forekomst, når alle 4 poter på armen), tid brugt på hver arm, og antallet af strakt-deltager yogastillinger står over for en åben arm , mens opbakning fra den centrale platform mod et lukket arm.
- Måler varighed og hyppighed af opførsel defineret ovenfor med stopur og tæller i 5 min, startende fra når dørene til beholderen er lukket.
-
Automatiseret analyse
- Ved hjælp af den tilgængelige softwareprogram, registrere følgende: afstand rejste, tid brugt i forskellige positioner på åbne arme (proksimale, midten, og distal segmenter fra den centrale platform), og et minut-for-minut analyse af tiden brugt på åbne og lukkede arme.
- Klik på knappen"start" af automatiseret analyse software på samme tid som den manuelle observation begynder (optagelsen vil stoppe automatisk, hvis optagelse varighed angives).
Bemærk: Den adfærdsmæssige analyse software, der anvendes i denne undersøgelse spor dyret via dens kontrast med feltet baggrund; dyr, som er tildelt en fast størrelse, er identificeret som objektet lysere og bevægelse af dens midtpunkt kan således bruges til sporing af dyr.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
I den tidligere undersøgelse sammenlignede vi de kombinerede virkninger af åbne arm afsatser og gennemsigtighed af lukkede arm væggene på de sonderende adfærd på labyrint12. Rotter væsentligt brugt meget mindre tid på åbne arme uden afsatser end på åbne arme med afsatser (F [1, 60] = 13.49, P = 0.0005) (figur 2A). Lignende resultater fandtes også for antallet af poster i åbne arme (F [1, 60] = 11.17, P < 0.0014)12, tyder på, at tilstedeværelsen af afsatser øger rotte sonderende adfærd på åbne arme. Rotter viste betydeligt mindre strakt-deltager kropsholdning på apparatet, der havde lukket arme med gennemsigtige vægge end på apparater, der havde lukket arme med uigennemsigtig vægge (F [1,60] = 4.03, P = 0.0492) (figur 2B), tyder på, at gennemsigtige lukkede arm væggene faldt angst-lignende adfærd i rotter. Rotter brugt mere tid på det distale segment af åbne arme på apparatet, der havde gennemsigtige lukkede arm vægge end på apparater med uigennemsigtig lukkede arm vægge (F [1,60] = 8,00, P = 0.0983) (figur 2 c), tyder på, at gennemsigtige vægge maj også formindske rotte åben arm sonderende adfærd. Derudover var åben arm udforskning af distale segmentet væsentligt lavere i No-afsatser/uigennemsigtig apparatet i forhold til afsatser/Transparent apparatet (fig. 2 c). Tilsammen, viser disse resultater, at påvisning følsomhed for angst-lignende adfærd kan variere afhængigt af typerne af arm designfunktioner bruges, og de ikke-afsatser/uigennemsigtig og afsatser/Transparent apparater kan have en forholdsvis stor forskellen i påvisning følsomhed.
Du kan kontrollere forskelle i påvisning følsomhed mellem forskellige typer af arm design, blev en yderligere eksperiment udført ved hjælp af angstdæmpende medicin diazepam (tal 3A-D). Kort sagt, opdaget nej-afsatser/uigennemsigtig apparater effekten af høj-dosis diazepam behandling på den tid i de åbne arme, mens apparatet afsatser/Transparent ikke gjorde (figur 3A-B). Også blev fundet lignende resultater for antallet af poster i åbne arme12 (data ikke vist). Manglen på nogen betydelig virkning på afsatser/Transparent apparater kan have været skyldes, at den basale aktivitet (køretøj behandling) på dette apparat var højere end på No-afsatser/uigennemsigtig apparater, men at åbne arm udforskning aldrig overskrides 33% af tid på noget tidspunkt på begge apparater. Derfor, denne smallere åben arm udforskning tidsinterval gjort det mere vanskeligt at skelne angstdæmpende virkning af diazepam på Ledged/Transparent apparater (figur 3 c-D).
Figur 1 : Specialdesignet udstyr til forhøjede plus labyrint test. Panelet (A): forhøjet plus maze test container. Apparatet er placeret i den sorte beholder, og en skærm ved siden af containeren projekter levende film billeder registreret under eksperimentet. Panel (B): Plus labyrint ramme i beholderen, der understøtter monteret arme. Hele apparatet er beliggende 500 mm over gulvet. Panelet (C): loft belysning, der kan justeres for intensitet. Et digitalt videokamera (Se pilen) omgivet af belysning poster dyrs bevægelser. Panel (D): forhøjet plus labyrint arme og central platform, der er udstyret til at ramme; fra venstre mod højre, uigennemsigtig væg lukket arm, no-afsats åben arm, ledged åben arm, central platform, gennemsigtig væg lukket arm. Panel (E): nærbillede af åbne arme; fra venstre mod højre, skal du åbne arm uden afsatser, åbne arm med afsatser (H5 mm). Panel (F): et eksempel på en konstrueret labyrint (afsatser/Transparent apparater). Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2 : Åben arm afsatser reducere angst-lignende adfærd og gennemsigtige vægge delvis mindske angst-lignende opførsel. Mandlige rotter undergik forhøjet plus maze test med forskellige kombinationer af arm strukturer (afsatser/Transparent, afsatser/uigennemsigtig, No-afsatser/Transparent, og No-afsatser/uigennemsigtig). Test ordre var normaliseret på tværs af de eksperimentelle grupper (hver kombination af apparater type). Denne procedure normaliserer uventede virkninger, der kunne have opstået på grund af tidspunktet på dagen for hver test. Panelet (A): tid brugt på åbne arme; Panel (B): antallet af strakt-deltager arbejdsstillinger; Panelet (C): tid tilbragt i den distale del af åbne arme. Solid og stiplede linjer angiver betydelig vigtigste effekter af åbne og lukkede arm strukturer, henholdsvis (tovejs ANOVA, #P < 0,1, * P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001). Forskellige breve ved siden af barer i panelet (C) viser en signifikant forskel (Bonferroni flere sammenligning test, en < b, Pedersen < 0.0125). Dataene blev udtrykt som middelværdi med SEM (n = 16 pr. eksperimentelle gruppe). Disse tal er blevet ændret fra vores forrige rapport12. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3 : Nej-afsatser/uigennemsigtig apparatet viser højere påvisning følsomhed af angstdæmpende virkning af diazepam. Mandlige rotter undergik forhøjet plus maze test, med enten No-afsatser/uigennemsigtig eller afsatser/Transparent apparater, 30 min efter at være behandlet med køretøjet (0 mg/kg), lav (0,25 mg/kg) eller høj (0,5 mg/kg) doser af angstdæmpende medicin diazepam (intraperitoneal injektion). Diazepam løsning blev opløst i 0,9% normal saltopløsning med en overflade-aktivering agent. I dette eksperiment, test rækkefølgen af de tre stof behandlingsgrupper og to typer af apparater design blev randomiseret til regnskab for de virkninger, der kan opstå på grund af tidspunktet på dagen for hver test. Paneler (A & B): samlet procent tid (5 min) brugt på åbne arme af afsatser/gennemsigtig og ikke-afsatser/uigennemsigtig apparater, henholdsvis. Paneler (C & D): minut-for-minut procent tid brugt på åbne arme af afsatser/gennemsigtig og ikke-afsatser/uigennemsigtig apparater, henholdsvis. Forskellige breve ved siden af barer i panelet (B) viser en betydelig forskel mellem behandlinger (Bonferroni flere sammenligning test, en < b, Pedersen < 0.0167). Solid og stiplede linjer i paneler (C & D) angiver betydelig vigtigste effekter af time-lapse og diazepam behandlinger, henholdsvis (gentaget foranstaltninger ANOVA, *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001). dataene blev udtrykt som middelværdi med SEM. tal i kolonnerne angiver dyr, der afsluttede eksperimentet (tallene i parentes angiver dyr afsporet apparatet). Disse tal er blevet ændret fra vores forrige rapport12. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Antallet af patienter med psykiatriske lidelser, herunder angst, stiger, er det vigtigt at udvikle banebrydende undersøgelser for at forbedre forståelsen af den grundlæggende mekanisme af angst. For at opnå dette, er det også vigtigt at optimere de eksperimentelle procedurer. Derfor, at forbedre anvendelsen af forhøjet plus maze test, vi har vist effekt af arm funktioner på eksperimentelle resultater ved hjælp af rotter.
Forhøjet plus labyrint blev oprindeligt etableret til at teste dyr angst i gnavere4, men selv om de grundlæggende strukturer er normalt konsekvent (f.eks.forhøjede 500 mm over gulv med en plus figur), forskellige arm design bruges ofte. Oprindeligt, apparatet bestod af åbne arme uden afsatser, og lukkede arme med uigennemsigtig trævægge. Dog mere for nylig åbne arme er blevet udviklet med afsatser at forhindre dyrene falder ned fra apparatet, og lukkede arms udviklede også med gennemsigtige vægge til at lette observation af adfærd på de lukkede arme. Men der har ikke været rapporter, behandles de kombinerede virkninger af disse arm funktioner på de eksperimentelle resultater i forhøjet plus maze test. Som det fremgår af vores resultater, tilstedeværelsen af åbne arm afsatser og gennemsigtighed i den lukkede arm vægge nedsat undgåelse af åbne arm udforskning i rotter (figur 2), som kan nedsætte påvisning følsomheden af angstdæmpende virkning af diazepam ( Figur 3). Apparatet afsatser/Transparent syntes at tilskynde til større udforskning på de åbne arme ved køretøjet behandlede rotter (figur 3). Dette reduceret adfærdsmæssige forskelsbehandling i åben arm udforskning aktivitet mellem køretøjet og diazepam behandlede rotter, hvilket gør det vanskeligere at opdage forskelle i angst niveauer. Derfor, den lavere følsomhed af afsatser/Transparent apparater kan betyde at flere dyr skal testes for at vise betydelige behandling effekter sammenlignet med at bruge No-afsatser/uigennemsigtig apparater.
I vores protokol, blev varighed og antal indrejser på hver arm manuelt målt af veluddannede eksperimentatorer. Denne procedure giver mulighed for nøjagtig måling af arm poster, defineret som alle 4 poter placeret på en arm. Selv om det er sandt, at automatiserede animalske sporingssystemer er tilgængelig for nogle adfærdsmæssige parametre, som rejser afstand, i vores erfaring, de ikke kan altid præcist skelne mellem poster og poster på arme, især når dyr udføre strakt-deltager arbejdsstillinger nær grænsen mellem central-platform og en arm. Således, vi anbefaler at bruge en kombination af både manuelle og automatiske observationssystemer, baseret på deres respektive styrker for hver adfærdsmæssige parameter.
Der er nogle andre protokol forskelle mellem laboratorier. For eksempel, placere nogle forskere dyr på den centrale platform vender ud mod en lukket arm13,14, mens andre placerer rotter står over for en åben arm15,16. Derudover teste nogle forskere adfærd umiddelbart efter indtagelse af rotter fra deres hjem-buret, mens andre tillader rotter nogle tid til at akklimatisere til funktionen test værelse før testen påbegyndes. Med hensyn til førstnævnte tilfælde i indledende tests oplevet vi, hvordan resultaterne varierede afhængig som arm rotten i første omgang står; der var en øget forekomst af ind på armen at rotten var placeret, står over for. Også, når rotterne var placeret, vender ud mod en lukket arm, nogle dyr ikke flytte ud af den lukkede arm efter den første post. I sådanne tilfælde er det vanskeligt at skelne om rotter opleve konflikt mellem de åbne og lukkede arme, eller at de blot foretrækker at være i en lukket sted uden nogensinde erkender tilstedeværelsen af de åbne arme. Selvom i vores undersøgelse valgte vi at placere de rotter, som står over for en åben arm, for at sikre en høj forekomst af at være under konflikten, anbefales det, at yderligere undersøgelser gennemføres for at sikre, at effekten af denne protokol forskel på eksperimentelle resultater er korrekt undersøgt.
Målinger af udforskning af den distale segment af åbne arme og minut for minut analyse givet ekstra detaljerede oplysninger om rotte angst-lignende adfærd. Disse målinger hjalp til at vise forskelle i påvisning følsomhed mellem de forskellige arm design. Trods dette, rapporterede resultater af angst forskning ved hjælp af forhøjet plus maze test rapporterer ofte ikke disse typer af detaljerede målinger13,17,18. Vi anbefaler derfor, at forskerne også rapportere yderligere oplysninger om rotte forsøgsaktiviteter, herunder distale udforskning, minut for minut analyse, og også strakt-deltager kropsholdning.
Afslutningsvis, tyder vores resultater på at forskellige typer af apparater kan have deres egne karakteristika. Fra disse tests, har vi vist, at No-afsatser/uigennemsigtig apparater bedre kan afsløre effekten af narkotika potentielt med angstdæmpende virkning. Derimod er det tænkeligt at afsatser/Transparent apparater kan have en tilsvarende fordel ved afprøvning af potentielle anxiogenic narkotika. Til dato, har adfærdsmæssige test været anvendt ikke blot for narkotika-screening, men også for fænotyper assays i mutant dyr. Faktisk, avancerede genom redigering teknikker tillader hurtig produktion af mutant dyr. Det er derfor meget vigtigt at udvikle testprocedurer med bedre præcision og følsomhed over for bedre opdager variationerne i adfærd. Denne rapport viser en bedre anvendelse af forhøjet plus test for animalske angst forskning baseret på de forventede funktioner af generne, stof eller mål. Vi mener således, at vores indsats vil bidrage til at fremme forskning beskæftiger forhøjet plus labyrint.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ikke noget at oplyse.
Acknowledgments
Forfatterne vil gerne takke Mr. Akihiro Hirano for hans hjælp i at producere de tilpassede apparater. Forfatterne vil gerne takke Mr. Kosuke Takahashi og Mr. Shingo Nakajima for deres tekniske bistand. Dette arbejde blev støttet af forskning på risiko for kemiske stoffer, sundhed og laboratorium Sciences forskningsbevillinger, Ministeriet for sundhed, arbejdskraft og velfærd, Japan (H25-KAGAKU-IPPANN-003) og Research Project Grant A af Institut for videnskab og teknologi Meiji Universitet, Japan.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Customized container (W1500 × D1500 × H2000 mm) | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Lighting | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Elevated plus maze apparatus | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Digital video camera | Watec | WAT-250D2 | Any suitable video camera can be attached to a hard disk recorder for recording tracking profiles. |
| Hard disk recorder | TOSHIBA | RD-R200 | Any suitable hard disk recorder can be attached to the digital video camera. |
| Sprague-Dawley rats | Charles River Laboratories Japan, Inc. | NA | Any suitable rats can be used for your study |
| Standard rat cage | Toyoriko | TP-105 | Any suitable rat cage be used for your study |
| Instrument to measure light intensity | AS ONE | 1-5818-02 | Any suitable instrument to measure light intensity |
| EthoVision XT version 8.0 | Noldus | NA | Any suitable software to measure animal behavior |
| Diazepam | Taiyo Pharmaceutical Industry | 1124402A2061 | Any suitable drug can be used for your study |
| Tween 80 | Wako Pure Chemical Industries | 9005-65-6 | Any suitable drug can be used for your study |
References
- Nestler, E. J. Role of the Brain's Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms. Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).
- Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment. Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).
- Handley, S. L., Mithani, S. Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).
- Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat. J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).
- Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze. Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).
- Hogg, S. A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety. Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).
- Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze. Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).
- Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze. Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).
- Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls. Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).
- Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam. Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).
- Fernandes, C., File, S. E. The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze. Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).
- Horii, Y., Kawaguchi, M. Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats. Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).
- Santos, R. O., et al. Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests. Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).
- Lynn, D. A., Brown, G. R. The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood. Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).
- Horii, Y., et al. Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats. Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).
- Walf, A. A., Frye, C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).
- Yang, Y., et al. Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze. Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).
- Albani, S. H., et al. Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age. Front Behav Neurosci. 9, 31 (2015).
