Summary
Здесь описаны ортотопическая яичников трансплантации протоколы для изменения яичников влияние на физиологии получателя мыши. Эта хирургическая процедура используется для предоставления самок мышей для различных типов яичников влияния и может включать в себя heterochronic пересадки и трансплантации яичников, которые прошли различные процедуры ex vivo .
Abstract
Яичников трансплантации было впервые проведено в университете штата Юта в 1963 году. В более поздних работ трансплантация heterochronic млекопитающих яичников используется для изучения здоровья защитные эффекты молодых яичников у молодых женщин. Нынешние процедуры используют метод ортотопическая трансплантации, где аллогенных яичников пересаженные обратно в их первоначальное положение в яичников Бурса. Это в отличие от более часто используемых heterotopic пересадка ткани яичников/яичников подкожно или под капсулу почки. Все три направления обеспечивают эффективное реваскуляризации пересаженных тканей. Однако ортотопическая трансплантация обеспечивает яичника с наиболее естественным сигнальную среду и является единственной процедурой, которая предоставляет возможность для животного, чтобы воспроизвести естественно постоперационно. Один должен заботиться, чтобы удалить все эндогенного тканей яичника во время процедуры овариоэктомии. Если любой эндогенного ткани остается или только один яичник удаляется, пересаженных тканей останется неактивных до тех пор, пока существующие ткани становится стареющей. В то время как реваскуляризации пересаженных яичников происходит очень быстро, трансплантации получатель может занять значительное количество времени для адаптации к новой (HPG/A) гипоталамуса/гипофиза/гонадной/надпочечниковой оси, сигнализации режима, связанного с пересаженной ткани. Обычно это занимает около 100 дней в мыши. Таким образом трансплантация эксперименты должны разрабатываться для размещения этот период адаптации. Типичные результаты с яичников трансплантации будет включать в себя изменения в состоянии здоровья получателя, который отражал возраст пересаживаемых яичник, а не хронологический возраст получателя.
Introduction
Влияние на здоровье и продолжительность жизни воспроизводства является часто ошибочно думал как ограничивается только период, охватывающий репродуктивные компетентности. В то время как образ жизни и фенотипы, связанные с этапа репродуктивно компетентным жизни легко отличать от пред- и postreproductive фаз, репродуктивного статуса влияет на здоровье на всех этапах жизни. Период репродуктивного компетентности часто называют репродуктивной жизни, дифференцировать себя от хронологического продолжительность жизни. Эта терминология поддается искусственное разделение двух обозначения жизни, когда в действительности, оба тесно связаны друг с другом с событиями, затрагивающих один, более часто чем не, затрагивая другие также.
За последнее десятилетие свидетельствуют что репродуктивного статуса индивида связан с повышенным риском развития хронических заболеваний условия1. В одном исследовании документально ассоциацию между короче продолжительности жизни и репродуктивной недостаточности когорте мужчин2. Ассоциация является еще более поразительным в женщин. Сердечно-сосудистые заболевания редки в пременопаузе женщин3, но недостаточность яичников увеличивает сердечно-сосудистых заболеваний резко в менопаузе4 и молодых женщин с преждевременным недостаточность яичников5. Инсулин сопротивления6 и костной потери увеличение менопаузы7 и почти две трети американцев с болезнью Альцгеймера женщин8. Четкая изменения яичников сигнализации знаменуют переход от государства пременопаузе, болезням, в постменопаузе, бремя болезни состояние. Этот стабильной экономикой, дает возможность определить механизмы, которые ускоряют риски заболеваний в старения.
Недавно трансплантация криоконсервированных тканей яичника был использован для восстановления фертильности у женщин, которые проходят медицинские процедуры, которые могут поставить под угрозу линии клетки семенозачатка, такие как химиотерапия. Трансплантации тканей яичника может также использоваться для создания жизнеспособного потомства в животных с-яичниковой основе бесплодия, в том числе трансгенных мышей9. Яичников трансплантации является эффективным методом для разделения влияние репродуктивной функции или репродуктивного старения от хронологического старения само по себе.
Устоявшихся вспомогательную роль для гормонов яичников во многих аспектах женского здоровья подразумевает потерю гормонов из активно Велоспорт зародышевые клетки, как основной причиной увеличения заболеваний рисков в период менопаузы. В то время как несомненное значение яичников гормонов женского здоровья, заменив эти гормоны в пери - и постменопаузе женщин был ненадежным в восстановлении здоровья пользуются молодые женщины с молодыми яичников. Эти преимущества для здоровья надежно восстанавливается heterochronic пересадка молодых яичники postreproductive самок мышей10,11,12,,1314.
Репродуктивного статуса мышей, доноров и получателей помощи должны определяться до и после трансплантации или овариоэктомии процедур. Предполагаемого postreproductive мышей, которые проявляют признаки гонадной ввода до операции в возрасте 12 месяцев исключаются из этих экспериментов. Гонадной ввода определяется вагинальной цитологии. Для предоперационного по крайней мере 10 дней подряд для обеспечения postreproductive государства получателя мышей и активно велосипедные яичников у мышей доноров собираются данные о вагинальной цитологии. Сначала отображается один эстрального цикла определяется как период с дня тому эпителиальных клеток (например, proestrus) на день, предшествующий следующей появление ядерных эпителиальных клеток в мазке влагалища, условии, что период лейкоцитарной присутствие (то есть, диэструса) между ними. Эструса определяется наличием большого, Плоскоклеточный эпителиальных клеток, с или без ядер. Мышей, которые отображают не циклической активности за 10 дней до или после операции определяются иметь не гонадной ввода для указанного периода. Мышей, отображения по крайней мере один полный эстрального цикла в течение 10 дней до или после операции определяются иметь гонадной ввода для указанного периода. Самок мышей следует размещается в присутствии самцов мышей или подвергается грязные постельные принадлежности от мужской клетки для обеспечения последовательного воздействия на раздражители, вызывая цикла.
Эти процедуры трансплантации наиболее эффективно осуществляется с двух хирургов, работающих одновременно на доноров и получателей мышей. Однако процедуры легко выполняются одним хирургом, с доноров яичников, чаще всего восстановлены до начала процедуры овариоэктомии на получателя мыши. Этот протокол описывает процедуру для одного хирурга. Экспозиции репродуктивного тракта и закрытие сайта обычно делается без микроскопа, в то время как удаление и замена яичников делается под микроскопом. Как с обучения любой хирургической процедуры, разрез сайтов может быть больше и операции может занять больше времени, изучая первая процедура и обычно будет уменьшаться с опытом работы.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все методы, описанные здесь были разработаны в рамках национального исследовательского совета руководящие принципы нашли в руководстве для ухода и использования лабораторных животных и были одобрены Юта государственного университета институциональных животное уход и использование Комитета.
Примечание: Процедуры трансплантации яичника может включать мышей (штамм ЦБА/J) от 21-дневного возраста 18 месяцев возраста. Мышей СВА/J штамма становятся репродуктивно компетентным между 45 и 60 дней возраста и репродуктивно стареющей возрасте 10 и 12 месяцев.
1. пересадка нетронутыми яичников в возрасте мышей
Примечание: Это первый Протокол описывается процедура, используемая во время передачи яичников молодые мыши (60 дней возраста) postreproductive женщин (12 месяцев) же инбредных деформации. Такая же процедура используется для яичников трансплантации между любой двух самок мышей.
- Весят и анестезировать доноров животных внутрибрюшинного (и.п., 27 ga иглы) раствор для инъекций, например с помощью коктейль кетамина, Ксилазина и acepromazine (кетамин 65 мг/кг, 13 мг/кг Ксилазина 2,0 мг/кг, acepromazine; коктейль доза - 6,5 мл/кг). Возвращает животное с подогревом дома Кейдж пока анестезии вступило в силу.
- Как только под наркозом, удалите животное из дома клетке и место на подогревом бумажные полотенца. Использование кусачки (#40 лезвие предпочитает), удалить волосы несколько мм боковые средней линии на каждой стороне, начиная чуть ниже ребер и перемещение дистально, подготовка обрезанный «обновление» примерно 2-3 см квадрат на обе стороны склонны мыши, оставляя полосы волос примерно 1-2 см, охватывающих средней линии.
- Слегка протрите подрезанной области с 70% этанола и применять Бетадин-раствор на подстриженные сайт тампоном ватным наконечником.
- Применение антибиотиков гель для защиты глаз и администрировать мелоксикам (2,0 мг/кг), подкожно (S.C., 27 ga иглы) на боковое аспект шеи животного для послеоперационного обезболивания.
- Поместите животное в положении лежа на поле с подогревом стерильные хирургические и протрите обтравленной области марлей хлопок 70% этанола, пропитанной 2 см x 2 см.
- Сделать разрез paralumbar 1,0-1,5 см и тупо рассечения кожи от базового фасции. Сделайте еще один разрез через фасции. Тупо вскрыть боково под этой фасции поверхностно максимально до достижения брюшной полости
- Место небольшой хирургической драпировка над разрез (вырезанные из марлей 2 x 2 см) и мокрой драпировки с стерильного физиологического раствора.
- С помощью небольших щипцы, найдите жировой ткани, которая окружает яичника в брюшной полости и осторожно извлечь жировой ткани и завязи и поместите его на смоченные Салфетки марлевые пелерина. Яичников жировой ткани будет появляться более «белый», чем окружающие жировой ткани.
- Поместите зажим 1,5 дюймовый бульдог на жировой ткани (заботиться, чтобы не препятствовать яичников Бурса) провести в урочище на месте во время процедуры.
- Переместить рассечения Микроскоп на место и четко идентифицировать яичников Бурса. Возьмите Бурса с двумя часовщик щипцами и надрезать яичников Бурса напротив яичников рубчика подвергать яичника. Если предполагаемого доступа районе Бурсы весьма васкуляризированной, нанесите каплю эпинефрина (1: 100, 000) с помощью шприца на bursal поверхность для уменьшения кровотечения во время срывать.
- Аккуратно удалите яичника из яичников Бурса и акцизных завязи путем зажима в рубчик яичников с часовщиком щипцы для предотвращения кровотечения.
- Место доноров яичника в часы стекло наполнен стерильного физиологического раствора 4° C, слабо крышку и отложите до готовности для трансплантации. В идеале место часы стекло под микроскопом дополнительных рассечения, так что яичников может быть легко понято хирург во время пересадки.
- На данный момент либо усыпить или выделить доноров мышь (должен постоянно контролироваться) получить пересаженных яичника, ткани, клетки или заполнитель штапика в более поздний момент времени.
- С чистого операционного поля и инструментов ovariectomize получателя животных как указано выше. Старых мышей клонат иметь увеличение объема жировой ткани и может потребоваться увеличение анестезии дозы (до 20%).
- После иссечения завязи от получателя место небольшой кусок гемостаза пенопластовую подкладку внутри пустой Бурса для остановки кровотечения и оказания помощи в процессе свертывания и поместите небольшой кусочек Марли, смоченной соленой подвергаются сайта.
- Найти доноров яичников (или ткани, клетки, заполнитель штапика) с часовщиком щипцами в одной рукой и переехать в поле зрения микроскопа. С другой щипцами в противоположной стороны удалить марлю и одновременно удалить гемостаза пенопластовую подкладку из Бурса при размещении новой завязи внутри сумки.
- Если новый яичник не помещается внутри получателям Бурса, вырезать доноров яичника в половину (или 1/3 или 1/4) и поместите в Бурсе в куски. Если Бурса полностью не охватывают весь яичник, место шов через Бурса, завязи и обратно через Бурса провести завязи на место (см. раздел "обсуждение").
Примечание: Место держатель бисер может быть трудно справиться с часового щипцами. - При размещении штапика внутри Бурса, забрать шарик больше пинцетом и поверх жировой ткани рядом с яичников Бурса. Roll шарик в Бурсе.
- Поднять иглодержатель Кастровьехо, уже загружен с конической иглы и 9-0 или 10-0 леска шов, найдите рваные края Бурсы и закрыть Бурса, используя один или два Хальстед швы.
Примечание: в качестве альтернативы ушивание может быть проведена с часовщиком или других небольших щипцы. - Орошения на сайте слегка с стерильного физиологического раствора, удалить жир pad зажим и вернуть панель яичника/жир живота.
- Удаление драпировка и закрыть брюшной стенки с хромовой кишки или Викрил 6-0. Этот шаг может быть сделано с или без микроскопа.
- Перемещения микроскопа сторону (если не переехал на предыдущем шаге) и закройте кожи с 9 мм раны клипов.
- Поместите животное в клетке с подогревом восстановления, тени от света и контролировать животное непрерывно до восстановления от анестезии. Дополнительные Мелоксикам может использоваться 24 часа постоперационно, если указано. Удалите клипы рану приблизительно девять дней постоперационно.
Примечание: Не иммуносупрессивные методы используются и никаких доказательств трансплантат – versus – хост болезнь была обнаружена после трансплантации или смерти.
2. трансплантация клетки семенозачатка истощения яичников для интактных мышей.
Примечание: Этот протокол включает в себя передачу яичников из молодых, истощенных клеток зародыша мыши к postreproductive женщинам. В этом протоколе, яичник получателей и овариоэктомии и трансплантации процедуры являются как указано выше за исключением что пересаженных яичники были химически истощены изначальное и первичных фолликулов/зародышевых клеток. Оставшиеся среднего и полостная фолликулы будут проходить вербовки/атрезия покидает яичник лишенный клетки семенозачатка. Истощение зародышевых клеток с 4-vinylcyclohexene diepoxide (VCD) является хорошо описана16. VCD является токсин. Потому что мышь не лечить пересаживают VCD-лечение яичников, эта процедура выгоды от VCD-лечение яичников в мышь, не подвергаются воздействию токсичных VCD. Этот протокол описывает процедуру для клеток зародыша истощения в молодых, яичник доноров мышей.
- Разбавьте VCD (64 мг/мл) в кунжутном масле для инъекций и хранить при 4° C до использования.
- Придать завязи доноров, один раз в день с VCD и.п. (160 мг/кг) на 15 дней, начиная в возрасте 28 дней. Внедрить контроль мышей с кунжутным маслом после же графику.
- В возрасте 50 дней проверьте VCD-лечение и нефти только лечить мышей для прекращения репродуктивного цикличность на 10 дней, как указано выше. В возрасте 60 дней VCD-лечение мышей должен отображать признаков цитологической гонадной ввода.
- Восстанавливаться 60-день old мышей яичников и пересадке как указано выше.
- Определите успешные трансплантации истощены зародышевых клеток яичников, обнаружение отсутствия репродуктивного Велоспорт и повышение уровня циркулирующих андростендион. Андрогенов: эстроген соотношения значительно возрастет после истощения зародышевых клеток с VCD17.
- Инициировать вагинальной цитологии 10-14 дней после операции и собирать данные для по крайней мере 10 дней подряд для обеспечения точного определения цикличность.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Овариоэктомии в возрасте 21 дней будет избегать крупных вверх регулирования репродуктивной системы в начале полового созревания и ликвидации других влияний, у женщин гонад могут Кроме прямого воздействия половых гормонов. Репродуктивное снижением мышей СВА/J обычно начинается с нерегулярными циклами в возрасте 8-10 месяцев. В возрасте 11 месяцев большинство женщин в этой линии мышей достигли точки репродуктивной недостаточности15 с полной потерей реагировать яйцеклеток в возрасте 12 месяцев. Эти возрастов варьируются в различных штаммов мышей. Двусторонние овариоэктомии яичников трансплантация обычно приводит к активации пересаженных яичников в течение нескольких дней. Невозможность удалить оба получателя эндогенного яичников (hemi овариоэктомии) до трансплантации приведет к пересаженных яичника, оставшиеся неактивных до тех пор, пока оставшиеся эндогенного завязи удаляется. Хирургические процедуры наиболее часто проводятся в открытом поле (урочище exteriorizing) и под микроскопом рассечения (овариоэктомии и трансплантации процедуры).
Увеличение продолжительности жизни
Средняя продолжительность жизни для самок мышей СВА/J-648 дней18. Мышей, которые перенес операцию (фиктивный [удаление яичника и немедленной замены] или трансплантации) были отобраны жить по крайней мере на время операции. В зависимости от эксперимента это было между 11 и 18 месяцев возраста. В первоначальном экспериментов19, операции были проведены в возрасте 11 месяцев и Шам мышей жили в среднем 728 дней (393 дней после времени хирургии) и интактных мышей, которые получают новые яичников жил 811 дней (476 дней мимо хирургии, GC-TX-1, рис. 1). В более поздних эксперименте, операции были проведены в возрасте 17 месяцев и мышей, которые получают новые яичников жил 798 дней (281 дней мимо хирургии, GC-TX-2). Мышей, которые получили истощены зародышевых клеток яичников распространить это средняя продолжительность жизни 880 дней (363 дней постоперационно).
Расширение диапазона здравоохранения
Мышей получил новые, содержащие герминогенные клетки яичников отображаются значительно снижение сердечно-сосудистых заболеваний10 и11 ортопедических заболеваний и продемонстрировали значительное улучшение состояния здоровья несколько охватывают параметры. Postreproductive мышей, которые получили новые яичников в возрасте 12 месяцев и дубликатах в 16 месяцев, показали снижение саркопения12, улучшение иммунной и почечной функции13и улучшение когнитивных поведение и сенсорные функции14 .
Проверка зародышевых клеток истощения
Результаты лечения 28 день старый самок мышей СВА/J в течение 15 дней с VCD истощение изначальное и первичных фолликулов (содержащие герминогенные клетки). Мышей СВА/J, проанализированы только 37 дней после начала лечения уже отображается прекращения VCD репродуктивного цикличности (стойких вагинальный ороговения), снижение веса яичников (1,7 мг в нефти только против 0,9 мг в VCD-лечение) и истощены изначальное и первичных фолликулов яичника, по сравнению с контролем (рис. 2).
Рисунок 1: Влияние молодых яичников на продолжительность жизни в postreproductive получателей. Молодые яичников, пересаженные в 11 месяц old мышей продлил срок на 11% (n GC-Tx-1 = 14, получил 60 день старый, содержащие герминогенные клетки новые яичников в возрасте 11 месяцев). Пересадку молодых яичников в возрасте 17 месяцев производится никаких изменений в жизни расширение (GC-Tx-2 n = 5, получил 60 день старый, содержащие герминогенные клетки новые яичников в возрасте 17 месяцев). Разрушающих клетки семенозачатка от молодых яичников до трансплантации вдвое увеличение продолжительности жизни до 21% (GD-Tx n = 5, получил 60 день старый, истощенных клеток зародыша новой яичников в возрасте 17 месяцев). Возраст в момент смерти: AAD. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 2: истощение VCD малых фолликулов в мышей СВА/J. H & E-окрашенных разделы (25 X) показаны обильные малых фолликулов (A) в нефти лечение (n = 6) мышей, (B) сокращение числа мелких фолликулов в VCD-лечение (n = 4) мышей и (C) и существенные различия в изначальное и первичной фолликул чисел. Стрелки указывают изначальное и первичных фолликулов. Ошибка бары представляют SE. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
У мышей, начиная от 21 дней до 18 месяцев были проведены овариоэктомии и трансплантация нетронутыми и истощены зародышевых клеток яичников. При выполнении овариоэктомии, где это желательно сохранить нетронутыми яичников Бурса, будьте внимательны при промо bursal ткани. В мышах старше шести месяцев большая часть Бурса становится обложил с жировой ткани, который ограничивает районы, которые могут быть использованы для доступа. В этих случаях часто бывает выгодно чтобы разорвать Бурса на границе жировой ткани. Этот метод часто оставляет более доступным «карманные» bursal ткани «уложить» новые завязи внутри сумки. Этот подход может также требуют меньше швов, чтобы закрыть на bursal ткани. Вращающиеся открытия в Бурсе боково также может помочь сохранить новые завязи на месте во время наложения швов.
Иногда bursal ткани необходимо широко открыт из-за чрезмерного жировой ткани покрытия, необычные ориентации тракта или восстановить фрагменты тканей яичника трудно получить. В этих случаях новые завязи может не эффективно быть «заправленные» в Бурсе. Если яичник расположен поверх открытых Бурса и более половины из яичника покрывается оставшиеся bursal ткани, шовный материал кошелька строка помещается хорошо порванные края Бурсы и окружающих яичника. Как кошелек строка медленно затягивается, яичник толкнул в оставшихся Бурса и Бурса закрыт далеко достаточно сохранить завязи на месте, но не может полностью закрыть. Если яичник расположен поверх открытых Бурса и менее половины из яичника покрывается оставшиеся bursal ткани, шовный материал помещается также порванные края Бурсы на одной стороне, через яичника, через Бурса на противоположной стороне и завязывают над верхней частью завязи. Этот метод может потребовать несколько швов и не приведет к полный охват яичника bursal ткани. Однако этот метод проведет завязи на месте и позволяют эффективно реваскуляризации и возможного возобновления активности яичников.
При выполнении овариоэктомии, где это желательно сохранить нетронутыми яичников Бурса, должны также быть заботиться все эндогенного яичников ткани удаляется. Это может быть трудно с большой эндогенного завязи. Чтобы сохранить как много bursal ткани, как это возможно, большие яичников могут быть удалены в куски. Однако при использовании этого метода, дополнительных бдительности должны использоваться чтобы убедиться, что удалены все эндогенного тканей яичника. Это может быть трудно после того, как удаляется часть завязи и Бурса заполнил с кровью. Небольшой кусок гемостаза пены колодки могут быть помещены в открытых Бурса сместить крови и помощи в процессе свертывания внутри Бурса. После 30-60 сек, кровоостанавливающие пены колодки удаляется и проинспектировала Бурса (Бурса может также быть сполоснуть слегка соленой) на наличие любых оставшихся яичников фрагментов.
Яичников, трансплантация требует, что пересаженные завязи быть отделены от своей установившейся кровоснабжение и реваскуляризации завязи в своем новом доме не является срочным. Из-за этого пересаженные завязи проходит некоторые некроза, главным образом с участием зрелых и/или набранных фолликулов. Однако подавляющее большинство из пересаженных яичников отображение циклической активности вскоре после пересадки и некоторые получатели трансплантации будет продолжать цикл до смерти. Таким образом потери фолликулов за пересадки некроза не появляются сильно влиять на создание пересаженных завязи интеграции в новый узел.
Преобладающее мнение в старения млекопитающих является, что эстроген представляет только важные репродуктивного влияние на здоровье. Драматические изменения наблюдаемые в здоровье старых мышей, которые получили новые яичников могут быть легко уволены как простое восстановление циркулирующие уровни эстрогена. Однако в недавнем исследовании, реплицируются независимо друг от друга три лаборатории20, 17-α-эстрадиол был не влияет на женщин продолжительность жизни, когда ФРС от 10 месяцев возраста. Это, безусловно, не же гормон как более well-known 17-β-эстрадиола, но многие из связанных здоровья эффектов эстрогена были приписывают 17-α-эстрадиола сигнализации21. Эстроген терапии было показано, чтобы иметь как позитивные, так и отрицательное влияние на многих возрастных патологий у женщин в постменопаузе и явно не обладают же влияние женщин в постменопаузе, как в молодых женщин. В то время как клетка семенозачатка стимулирует эстроген производство имеет решающее значение для размножения, в период менопаузы, яичников зародышевых клеток истощены все еще обладают здоровь повышая атрибуты, как удаление postreproductive яичников далее увеличивается уровень смертности, включая 22возрастных заболеваний. Ovariectomized мышей имеют немного короче продолжительности жизни чем Шам хирургии мышей (715 дней против 728 дней, соответственно,19). Если механизмы, влияющие на долголетие эволюционно консервируют, доказательства от модельных организмов утверждает против объяснение эстроген только для здоровья охватывают расширение млекопитающих.
Трансплантация яичников с и без активных клетки семенозачатка восстановил преимущества здоровья до уровня, который гормональной терапии только стремился достичь. Многие аспекты здоровья, негативно повлиявшие на старение у женщин, может быть положительно влиянием восстановление активной функции яичников в возрасте мышей. Однако последние экспериментальные исследования показывают, что эти эффекты могут быть до некоторой степени, независимо от гормонов яичников зародышевых клеток.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего сообщать.
Acknowledgments
Исследования в этой публикации было поддержано щедрый дар 14-месячного самок мышей СВА от национального института по проблемам старения, в возрасте грызунов колонии (Nancy Nadon) и Университет штата Юта, школа ветеринарной медицины, животных, молочные и ветеринарных наук.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Dissecting microscope | Any dissecting scope with an adjustable working distance. | ||
| Warm Water Recirculator and appropriate pad for your size surgical/recovery field. | Stryker/Gaymar | TP700 | Circulating water pads produce even and consistent temperature operating and recovery fields. |
| Surgical instruments-dissection instruments for access to the reproductive tract | Choice of specific surgical instruments is highly surgeon-specific | ||
| Surgical instruments-fine instruments for the transplantation procedure. | Choice of specific surgical instruments is highly surgeon-specific | ||
| Suture material for abdominal wall | eSutures | G3756K: 6-0 MILD CHROMIC GUT 18" HE-7 CUTTING, DOUBLE ARMED | |
| Suture material for ovarian bursa | eSutures | 2809G: 9-0 or 2810G: 10-0 ETHILON BLACK 5" BV130-5 TAPER | 10-0 suture can be difficult to locate if dropped on the surgery field. |
| Absorbable gelatin sponge | PFIZER. | Gelfoam- PFIZER 09-0315-08. | cut into small (~2mm) pieces under sterile conditions. |
| Staples for skin closure | Becton Dickinson | MikRon Autoclip 9mm (BD 427631) | |
| Eye ointment. | MWI Veterinary Supply Co. | Puralube sterile opthalmic ointment | |
| Syringes for anesthesia, analgesia and epinephrine | MWI Veterinary Supply Co. | BD 305536 | 27g x 3/8in,Intradermal Bevel 1/2ml |
| Syringes for saline. | MWI Veterinary Supply Co. | BD 309657. | 3ml syringe, luer-lok tip, 27g needle |
| Clippers/blade | Andis | Super AGR+™ Cordless Detachable Blade Clipper and a CeramicEdge® #40 blade. | Any clippers with a fine blade. |
| Ethanol | University chemical supply | dilute to 70% for use. | |
| Betadine solution | MWI Veterinary Supply Co. | 003233 | |
| 2x2 gauze pads | MWI Veterinary Supply Co. | 003073 | autoclaved with surgery packs |
| Borosilicate glass beads | Sigma-Aldrich Co. | Z273619 | Autoclave in sintilation vials |
| 4-vinylcyclohexene diepoxide | Sigma-Aldrich Co. | 94956 | |
| Sesame oil | Sigma-Aldrich Co. | S3547 |
References
- National Institutes of Health, Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health and Human Development, Fertility and Infertility Branch. 'Fertility Status as a Marker of Overall Health'. "Support studies that investigate fertility status as a marker of overall health for both men and women". New Research Priorities. , (2016).
- Eisenberg, M. L., Li, S. F., Behr, B., Cullen, M. R., Galusha, D., Lamb, D. J., Lipshultz, L. I. Semen quality, infertility and mortality in the USA. Hum. Reprod. 29 (7), 1567-1574 (2014).
- Thom, T., et al. American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee. Heart disease and stroke statistics - 2006 update - A report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee. Circulation. 113 (6), E85-E151 (2006).
- Shuster, L. T., Rhodes, D. J., Gostout, B. S., Grossardt, B. R., Rocca, W. A. Premature menopause or early menopause: Long-term health consequences. Maturitas. 65 (2), 161-166 (2010).
- Jacobsen, B. K., Knutsen, S. F., Fraser, G. E. Age at natural menopause and total mortality and mortality from ischemic heart disease: The Adventist health study. J Clin Epidemiol. 52 (4), 303-307 (1999).
- Kulaksizoglu, M., et al. Risk Factors for Diabetes Mellitus in Women with Primary Ovarian Insufficiency. Biol Trace Elem Res. 154 (3), 313-320 (2013).
- Johnell, O., Kanis, J. A. An estimate of the worldwide prevalence and disability associated with osteoporotic fractures. Osteoporos Int. 17 (12), 1726-1733 (2006).
- Rosario, E. R., Chang, L., Head, E. H., Stanczyk, F. Z., Pike, C. J. Brain levels of sex steroid hormones in men and women during normal aging and in Alzheimer's disease. Neurobiol Aging. 32 (4), 604-613 (2011).
- Cargill, S. L., Medrano, J. F., Anderson, G. B. Infertility in a line of mice with the high growth mutation is due to luteal insufficiency resulting from disruption at the hypothalamic-pituitary axis. Biol Reproduction. 61 (1), 283-287 (1999).
- Mason, J. B., et al. Transplantation of young ovaries restored cardioprotective influence in postreproductive-aged mice. Aging Cell. 10 (3), 448-456 (2011).
- Mason, J. B., Terry, B. C., Merchant, S. S., Mason, H. M., Nazokkarmaher, M. Manipulation of Ovarian Function Significantly Influenced Trabecular and Cortical Bone Volume, Architecture and Density in Mice at Death. Plos One. 10 (12), 15 (2015).
- Peterson, R. L., Parkinson, K. C., Mason, J. B. Manipulation of Ovarian Function Significantly Influenced Sarcopenia in Postreproductive-Age Mice. J. Transplant. , (2016).
- Peterson, R. L., Parkinson, K. C., Mason, J. B. Restoration of immune and renal function in aged females by re-establishment of active ovarian function. Reprod. Fertil. Dev. , (2017).
- Parkinson, K. C., Peterson, R. L., Mason, J. B. Cognitive behavior and sensory function were significantly influenced by restoration of active ovarian function in postreproductive mice. Exp. Geront. 92, 28-33 (2017).
- Cargill, S. L., Carey, J. R., Muller, H. G., Anderson, G. Age of ovary determines remaining life expectancy in old ovariectomized mice. Aging Cell. 2 (3), 185-190 (2003).
- Brooks, H. L., Pollow, D. P., Hoyer, P. B. The VCD Mouse Model of Menopause and Perimenopause for the Study of Sex Differences in Cardiovascular Disease and the Metabolic Syndrome. Physiology. 31 (4), 250-257 (2016).
- Rivera, Z., Christian, P. J., Marion, S. L., Brooks, H. L., Hoyer, P. B. Steroidogenic Capacity of Residual Ovarian Tissue in 4-Vinylcyclohexene Diepoxide-Treated Mice. Biol. Reprod. 80 (2), 328-336 (2009).
- Yuan, R., et al. Aging in inbred strains of mice: study design and interim report on median lifespans and circulating IGF1 levels. Aging Cell. 8 (3), 277-287 (2009).
- Mason, J. B., Cargill, S. L., Anderson, G. B., Carey, J. R. Transplantation of Young Ovaries to Old Mice Increased Life Span in Transplant Recipients. J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 64 (12), 1207-1211 (2009).
- Harrison, D. E., et al. Acarbose, 17-alpha-estradiol, and nordihydroguaiaretic acid extend mouse lifespan preferentially in males. Aging Cell. 13 (2), 273-282 (2013).
- Manay, K., et al. 17α-Estradiol Attenuates Neuron Loss in Ovariectomized Dtg AβPP/PS1 Mice. J. Alzheimers Dis. 23 (4), 629-639 (2011).
- Parker, W. H., et al. Ovarian conservation at the time of hysterectomy and long-term health outcomes in the nurses' health study. Obstet Gynecol. 113, 1027-1037 (2009).
