Summary
여기에 설명 된 orthotopic 수정 난소 영향 받는 사람 마우스의 생리학에 대 한 난소 이식 프로토콜이 있습니다. 이 수술 난소 영향의 다양 한 종류를 여성 쥐를 노출 하는 데 사용 하 고 heterochronic 이식 및 이식 다양 한 비보 전 치료 받은 난소의 포함 될 수 있습니다.
Abstract
난소 이식 1963 년에 유타 주립 대학에서 처음 실시 되었다. 최근 작품에서 포유류 난소의 heterochronic 이식 젊은 여성에서 젊은 난소의 건강 보호 효과 조사 하기 위해 사용 됩니다. 현재 절차 allogenic 난소 난소 부르사에서 그들의 원래 위치에 다시 이식는 orthotopic 이식 메서드를 사용 합니다. 이것은 난소/난소 조직의 더 일반적으로 사용 되 heterotopic 이식 달리 피하 또는 신장 캡슐 아래입니다. 모든 3 개의 위치는 이식 조직의 효율적인 revascularization를 제공합니다. 그러나, orthotopic 이식 가장 자연 스러운 신호 환경으로 난소를 제공 하 고 post-operatively 자연스럽 게 재현 동물에 대 한 기회를 제공 하는 유일한 프로시저입니다. 하나 ovariectomy 절차 동안 모든 생 난소 조직을 제거를 주의 해야 합니다. 어떤 생 조직 유지 하는 경우, 하나의 난소를 제거 하는 경우에 이식된 조직을 기존 조직 노화 될 때까지 휴면 유지 됩니다. 이식 받는 상당한 양의 새로운 hypothalamic/뇌/gonadal/부 신 (HPG/A)를 축 하는 정권 관련는 이식 된 신호에 적응 하는 시간을 걸릴 수 있습니다 revascularization 이식된 난소의 매우 신속 하 게 발생 하는 동안 조직입니다. 이 일반적으로 마우스에 100 일 정도 걸립니다. 따라서, 이식 실험이 적응 기간에 맞게 설계 되어야 한다. 전형적인 결과 난소 이식으로 이식된 난소의 나이 보다는 받는 사람의 연대기 나이 반영 하는 받는 사람의 건강 변화 포함 됩니다.
Introduction
건강과 수명에 재생산의 영향력은 종종 실수로 생식 능력을 포괄 하는 기간에만 제한 된의 생각. 라이프 스타일 및 생활 스팬의 재생산으로 유능한 단계와 관련 된 고기는 쉽게 사전 및 postreproductive 단계에서 분화 된다, 하는 동안 생식 상태 수명의 모든 단계에 걸쳐 건강 영향. 생식 능력의 기간은 종종 생식 수명, 연대기 수명에서 자신을 차별화 라고 합니다. 이 용어 라는 현실에서 두 수명 지정의 인공 분리, 모두에 이벤트와 서로 밀접 하 게 묶인된에 영향을 미치는 한, 보다 더 자주는 아니지만, 뿐만 아니라 다른 영향을 미치는입니다.
지난 10 년간 증거 개인의 생식 상태 만성 건강 상태1을 개발의 위험 증가와 관련 있음을 나타냅니다. 한 연구는 남자2의 동료에 대 한 짧은 수명을 생식 실패 사이 연결을 문서화. 협회는 여성에서 더욱 눈에 띄는. 심혈 관 질환은 드문 premenopausal 여자3, 하지만 난소 실패 심장 혈관 질병5조기 난소 실패 젊은 여성, 폐 경4 에서 급격히 증가. 인슐린 저항6 와 뼈 손실 폐 경7 에 증가 하 고 거의 2/3 미국인의 Alzheimer의 질병과 여자8입니다. 난소 신호에 잘 정의 된 변화는 폐 경 후, 질병 부담 상태로 premenopausal, 질병 저항 상태에서 전환을 표시합니다. 이 안정적인 전환 메커니즘을 가속 노화 질병 위험을 식별 하는 기회를 선물 한다.
최근, cryopreserved 난소 조직 이식 생식 선 세포 화학 요법 등을 위태롭게 수 있는 의료 절차를 받아야 하는 여성 불 임 복원 사용 되었습니다. 난소 조직 이식 또한 난소 비 기반으로 불 임, 유전자 변형 마우스9를 포함 하 여 동물에 가능한 자손 생산을 사용할 수 있습니다. 난소 이식 생식 기능 또는 연대기 노화 se 당에서 생식 노화의 영향을 분리 하는 효율적인 방법입니다.
여성 건강의 여러 측면에서 난소 호르몬에 대 한 잘 설립 지원 역할에서 적극적으로 폐 경에서 위험 증가 질병의 주 원인으로 생식 세포, 순환 호르몬 생산의 손실 연루. 여성 건강에 난소 호르몬의 값은 의심, peri-및 폐 경 후 여성에서이 호르몬 대체 되었습니다 젊은 난소를 가진 젊은 여자에 의해 즐기 게 하는 효능의 복원에 신뢰할 수 있는. 이러한 건강 혜택 postreproductive 여성 쥐10,11,12,,1314젊은 난소의 heterochronic 이식 하 여 안정적으로 복원 됩니다.
이식 또는 ovariectomy 절차 이전 전후 모두 기증자와 받는 사람 쥐의 생식 상태를 결정 합니다. 나이의 12 개월에 수술 전에 gonadal 입력의 흔적을 표시 하는 추정 postreproductive 쥐이 실험에서 제외 됩니다. Gonadal 입력 질 세포학에 의해 결정 됩니다. 데이터 질 세포학에 적어도 10 일 연속 사전 수술 받는 사람 마우스에서 postreproductive 국가 기증자 쥐에서 난소 적극적으로 자전거를 위해 수집 됩니다. 날 로부터 기간 nucleated 상피 세포로 estrous 주기 정의 하나 표시 (즉, proestrus)는 leukocytic의 기간이 질 얼룩에 nucleated 상피 세포의 다음 모습을 앞에 존재 (즉, diestrus) 사이. 발 정기는 큰, 편평 상피 세포, 또는 핵 없이 존재에 의해 결정 됩니다. 전에 10 일 동안 또는 수술 했다 동안 gonadal 입력을 결정 후 마우스는 순환 활동이 표시 됩니다. 전에 10 일 동안 또는 수술 했다 동안 gonadal 입력을 결정 한 후 마우스를 하나 이상 전체 estrous 주기 표시 합니다. 여성 쥐 남성 쥐의 존재 유 숙 하거나 주기 유도 하는 자극에 일관 된 노출 되도록 남자의 케이지에서 더럽혀진된 침구에 노출 해야 합니다.
이러한 이식 절차는 기증자와 받는 사람 마우스에 동시에 작동 하는 두 명의 외과로 가장 효율적으로 수행 됩니다. 그러나, 절차는 쉽게 수행 한 외과 의사에 의해 가장 자주 받는 사람 마우스에서 ovariectomy 프로시저를 시작 하기 전에 복구 기증자 난소와 함께. 이 프로토콜에서는 단일 외과 의사에 대 한 절차를 설명합니다. 생식 관의 노출 및 사이트의 폐쇄는 일반적으로 없이 이루어집니다 현미경, 반면 제거 및 교체는 난소의 현미경으로 이루어집니다. 와 학습 어떤 수술, 절 개 사이트 더 큰 수 있습니다 수술 절차를 학습 하면서 더 오래 걸릴 수 있습니다 및 일반적으로 것입니다 경험을 가진 감소.
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Protocol
여기에 설명 된 모든 방법 지침 관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 가이드에서 발견 하 고 유타 주립 대학 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 된 국가 연구 위원회에서 개발 되었다.
참고: 난소 이식 절차 포함 수 있습니다 쥐 (긴장 CBA/J) 나이의 21 일에서 18 개월. CBA/J 긴장의 쥐 나이의 45 ~ 60 일 reproductively 능력과 나이의 10의 그리고 12 달 사이 재생산으로 노화 된다.
1. 세 쥐 그대로 난소의 이식
참고:이 첫 번째 프로토콜 전송 하는 동안 난소의 젊은 마우스 (나 두 일)에서 postreproductive 여성을 (12 개월 나이의) 같은 타고 난된 긴장의 사용 하는 프로시저를 설명 합니다. 동일한 절차는 어떤 두 여성 쥐 사이 난소 이식에 사용 됩니다.
- 무게 및 anesthetize 복 (I.P., 27가 바늘)에 의해 기증자 동물 주입, 케 타 민, xylazine 및 acepromazine의 칵테일을 사용 하 여 예 (65 밀리 그램/kg 케 타 민, 13 mg/kg xylazine 2.0 mg/kg, acepromazine; 칵테일 복용량-6.5 ml/kg). 때까지 마 취 효과 열띤된 홈 케이지를 동물을 반환 합니다.
- 취, 일단 홈 케이지 및 온수 종이 타 올에 장소에서 동물을 제거 합니다. '패치' 헤어 스트립을 떠나 경향이 마우스의 양쪽에 약 2-3 cm 광장 갈비뼈 바로 아래 시작 distally 이동, 준비는 클리핑된 각 편이 중간에 옆 머리 몇 mm 클리퍼 스 (#40 블레이드 선호), 제거를 사용 하 여 약 1-2 cm는 중간을 취재입니다.
- 가볍게 70% 에탄올으로 잘린된 영역을 닦 고, 면 기울 ㄴ 면봉으로 클리핑된 사이트에 betadine 솔루션을 적용.
- 눈 보호를 위한 항생제 젤을 적용 하 고 피하 meloxicam (2.0 mg/kg)를 관리 (사우스 캐롤라이나, 27가 바늘) 수술 후 통증 완화를 위해 동물의 목의 옆 부분에.
- 온수 메 마른 외과 분야에서 발생 하기 쉬운 위치에 동물을 놓고 70% 에탄올 배어 2 cm x 2 cm 면 거 즈로 잘린된 영역을 닦으십시오.
- 1.0-1.5 c m paralumbar 절 개를 하 고 퉁 명 스럽게 기본 근 막에서 피부를 해 부. 간판을 통해 또 다른 절 개를 확인 합니다. 퉁 명 스럽게 해 부 옆이 근 막 아래 최대한으로 복 부 구멍에 도달할 때까지
- 장소 (2 cm x 2 cm 거 즈에서 잘라) 절 개 그리고 젖은 멸 균 식 염 수와 드 레이프 작은 수술 주름 잡아 드리운 다.
- 작은 집게를 사용 하 여 복 부 구멍에서 난소를 둘러싸는 지방 조직 그리고 부드럽게 지방 패드와 난소 추출 찾아서 젖은 거 즈 드 레이프에 배치. 난소 지방 패드 주변 지방 조직 보다 더 '화이트' 표시 됩니다.
- 뚱뚱한 패드 (복용 하지 않도록 주의 난소 부르사 방해)에 1.5 인치 불독 클램프를 배치 절차 동안은 장소에서 개최.
- 곳으로 해 현미경을 이동 하 고 명확 하 게 난소 부르사를 식별 합니다. 두 시계 집게와 부르사를 파악 하 고 노출 난소 난소 hilum 반대 난소 부르사 incise. 부르사의 의도 된 액세스 영역 나가도록 높은 경우 찢 어 시 출혈을 줄이기 위해 bursal 표면에 주사기와 피 네 프 린 (1: 100, 000)의 한 방울을 적용 됩니다.
- 부드럽게 난소 부르사에서 난소를 제거 하 고 출혈을 방지 하기 위해 시계 집게와 난소 hilum에 클램핑 함으로써 난소를 삭제할.
- 기증자 난소 4 ° C 살 균 염 분 가득한 시계 유리에, 느슨하게 커버 놓고 이식에 대 한 준비까지 따로 설정 합니다. 이상적으로, 난소 장악 될 수 있다 쉽게는 외과 의사에 의해 이식 시 되도록 추가 해 현미경 시계 유리를 놓습니다.
- 이 시점에서, 안락사 하거나 이식된 난소, 조직, 세포 또는 나중 시간에 자리 표시자 유리 비드를 (지속적으로 모니터링 해야) 기증자 마우스를 따로 설정 합니다.
- 깨끗 한 수술 필드와 악기, 위와 같이 받는 사람 동물을 ovariectomize. 더 오래 된 쥐 지방 조직의 양이 증가 하는 경향이 고 증가 마 취 복용량 (최대 20%까지) 하는 것을 요구할 수 있습니다.
- 받는 사람에서 난소의 절제, 후 내부 출혈을 제어 및 응고에 도움이 노출된 사이트를 통해 식 염 수에 젖은 거 즈의 작은 조각을 배치 하 빈 부르사 hemostatic 거품 패드의 작은 조각을 넣으십시오.
- 기증자의 난소 (또는 조직, 세포, 개체 틀 유리 구슬) 시계 집게를 한 손으로 고 현미경 시야의 이동으로 찾습니다. 반대 손에 다른 집게와 거 즈를 제거 하 고 동시에 부르사 내 새로운 난소를 배치 하면서 부르사에서 hemostatic 거품 패드를 제거 합니다.
- 새로운 난소 내부 받는 사람 부르사 맞지 않으면, 절반 (1/3 또는 1/4) 기증자 난소를 잘라 고 조각에 버 합니다. 부르사 전체 난소를 완전히 커버 하지 않습니다, 경우 배치는 부르사, 난소 및 장소에는 난소를 부르사 통해 다시 봉합 (토론 섹션 참조).
참고: 유리 자리 표시자 구슬 시계의 집게와 처리 하기 어려울 수 있습니다. - 부르사 내부 유리 구슬 때, 큰 집게로 비드를 선택 하 고 난소 부르사 옆 지방 패드 위에 놓습니다. 부르사에 비드를 롤.
- Castroviejo 바늘 홀더 이미 로드 테이퍼 바늘 및 9-0 또는 10-0 monofilament 봉합 사를 선택 하 고 부르사의 찢어진된 가장자리를 찾아 하나 또는 두 개의 Halsted의 봉합을 사용 하 여 부르사를 닫습니다.
참고: 봉합 또는 수행할 수 있습니다 시계 또는 다른 작은 집게로. - 멸 균 식 염 수로 가볍게 사이트 관개, 지방 패드 클램프를 제거 하 고 복 부에 난소/지방 패드를 반환 합니다.
- 에 드 레이프를 제거 하 고 6-0 크롬 창 자 또는 vicryl 복 벽을 닫습니다. 이 단계는 또는 현미경 없이 할 수 있습니다.
- 옆으로 (만약 이전 단계에서 이동 하지) 현미경을 이동 하 고 9mm 상처 있는 피부를 닫습니다.
- 빛에서 음영 온수 복구에에서 동물을 놓고 동물 마 취에서 회복까지 지속적으로 모니터링 합니다. 추가 meloxicam 표시 하는 경우에 post-operatively 24 시간 사용할 수 있습니다. Post-operatively 상처 클립 약 9 일 제거 합니다.
참고: 없음 면역 기술을 고용 하 고 후 이식 또는 죽음에서 이식-비교-호스트 질병의 증거가 발견 되었습니다.
2. 세균 세포의 이식 그대로 쥐 난소 고갈.
참고:이 프로토콜 젊은, 생식 세포 고갈 마우스에서 postreproductive 여성 난소의 전송이 포함 됩니다. 이 프로토콜에서 난소 받는 사람 및 ovariectomy 및 이식 절차는 위의 예외의 원시 및 기본 모 공/세균 세포의 고갈 이식된 난소 화학적으로 되었습니다. 보조 및 antral 낭 나머지 모집/이 폐쇄 증 없는 생식 세포 난소를 떠나 받게 된다. 4-vinylcyclohexene diepoxide (VCD)와 생식 세포 소모는 잘 설명된16. VCD는 독 소입니다. VCD 치료 난소 치료 비 마우스에 이식 되는, 때문에이 절차는 VCD의 독성 효과에 노출 되지 마우스에 VCD 치료 난소에서 혜택. 이 프로토콜에서는 젊은, 난소 기증자 생쥐 생식 세포 고갈에 대 한 절차를 설명합니다.
- 참 깨 오일 주입 및 4 ° C에서 저장소에 대 한 사용까지 VCD (64 mg/mL)을 희석.
- 주사 난소 기증자는 하루에 한 번 VCD I.P. (160 mg/kg)와 15 일의 나 두 일에 시작. 참 깨 오일 같은 일정에 따라 통제 쥐를 주사.
- 나이의 50 일에서 위와 같이 10 일 동안 VCD 처리 고 오일만 처리 마우스 생식 cyclicity의 중단을 확인 합니다. 나이의 60 일, VCD 치료 쥐 gonadal 입력의 cytological 증거가 표시 됩니다.
- 60 일 된 쥐에서 난소를 복구 하 고 위와 같이 이식 합니다.
- 난소 생식 세포 고갈의 성공적인 이식 생식 사이클의 부족과 androstenedione 순환의 증가 수준을의 검출 하 여 확인 합니다. 안 드로 겐: 에스트로겐 비율 VCD17생식 세포 고갈 후 크게 증가.
- Postoperatively 질 세포학 10-14 일을 시작 하 고 cyclicity의 정확한 결정을 위해 적어도 10 일 연속에 대 한 데이터를 수집 합니다.
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Representative Results
Ovariectomy 21 일의 나이에 사춘기의 개시에 생식 시스템의 주요 업 규제를 피하기 위해 하 고 여성 생식 gonadal 호르몬의 직접 효과 또한 있을 다른 영향을 제거 것입니다. CBA/J 쥐에 생식 감소 일반적으로 8-10 개월에 불규칙 한 주기 시작합니다. 대부분 여성 쥐의이 라인에에 나이의 11 개월에서 12 개월에 의해 응답 oocytes의 완전 한 손실 생식 실패15 의 포인트도에 도달 했습니다. 이 연령대는 쥐의 다른 긴장에서 변화 한다. 양자 ovariectomy/난소 이식 활성화 이식된 난소의 몇 일 이내에 일반적으로 발생합니다. 나머지 생 난소 제거 될 때까지 휴면 나머지 이식된 난소 이식 전에 받는 사람의 생 난소 (hemi-ovariectomy)의 모두 제거를 발생 합니다. 수술 절차는 가장 자주 (exteriorizing는) 오픈 필드에 고 해 현미경 (ovariectomy 및 이식 절차)에서 실시 됩니다.
수명 연장
CBA/J 여성 쥐에 대 한 평균 수명 644 일18이다. 마우스 (가짜 [난소 제거 및 즉시 교체] 또는 이식) 수술을 받았습니다 수술의 시간에 적어도 살 선정 됐다. 실험에 따라이 나이의 11과 18 개월 사이 했다. 초기에 실험19, 수술 나이의 11 개월에서 실시 했다 및 가짜 쥐 728 일 (393 일 수술의 시간 이후)의 평균 살면서 새로운 난소 받을 그대로 쥐 살 811 일 (476 일 과거 수술, GC-TX-1, 그림 1). 최근 실험에서 수술 17 개월에서 실시 했다 및 새로운 난소 받을 마우스 살 798 일 (281 일 과거 수술, GC-TX-2). 난소 생식 세포 고갈 받은 마우스 880 일의 평균 수명에이 확장 (363 일 post-operatively).
건강 범위의 확장
마우스 받은 새로운, 포함 하는 생식 세포 난소 크게 감소 심혈 관 질환10 및 정형 외과 질환11 를 표시 하 고 여러 가지 건강의 중요 한 개선을 보여주었다 스팬 매개 변수. 나이의 12 달에 새로운 난소를 받은 고 연령, 16 개월에서 분석 했다 postreproductive 마우스 시연 감소 sarcopenia12, 면역 및 신장 기능을 향상 된13, 그리고 향상 된 인지에 관한 행동 및 감각 기능14 .
생식 세포 고갈의 확인
VCD 15 일 동안 28 일 된 여성 CBA/J 쥐의 치료 결과 원시 및 기본 (생식 세포 포함) 낭의 고갈. VCD 치료 이미 표시 된 정지 생식 cyclicity (영구 질 cornification)의 개시 후 37 일만에 분석 하는 CBA/J 쥐 난소 무게 감소 (1.7 mg에 VCD 취급에 0.9 밀리 그램 대 오일 전용) 원시 고갈 및 고 기본 난소 모 공, 컨트롤 (그림 2)와 비교.
그림 1: Postreproductive 받는 사람의 수명에 젊은 난소의 영향. 11% 수명 연장 11 개월 된 생쥐에 이식 하는 젊은 난소 (GC-Tx-1 n = 14, 60 일 된, 받은 11 개월의 나이에 새로운 난소 생식 세포를 포함). 17 개월에서 젊은 난소의 이식 생산 수명 확장에 아무런 변화가 없습니다 (GC-Tx-2 n = 5, 60 일 된, 받은 17 개월에 새로운 난소 생식 세포를 포함 하). 21% 수명 확장을 두 배로 이식 전에 젊은 난소에서 생식 세포를 없애고 (GD-Tx n = 5, 60 일 된, 받은 17 개월에 새로운 난소 생식 세포 고갈). 죽음에서 나이: AAD. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2: CBA/J 쥐에 작은 낭의 VCD 고갈. H & E 스테인드 섹션 (25 X) 오일 처리에 풍부한 작은 낭 (A)를 보여주는 (n = 6) 쥐, (B) VCD 치료에 작은 모 낭의 숫자 감소 (n = 4) 마우스 및 (C)와 원시 및 기본에 큰 차이가 여 포 숫자입니다. 화살표 표시 원시 및 기본 모 공. 오류 막대를 대표 SE. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
Ovariectomy 및 손상과 세균 세포 고갈 난소 이식 18 개월 21 일에서 배열 하는 생쥐에 실시 되었습니다. 수행 된 ovariectomy 난소 부르사를 그대로 유지 하는 것은 때 incising bursal 조직 배려를가지고 한다. 쥐 나이의 6 개월 이상, 부르사의 많은 액세스를 위해 사용할 수 있는 영역을 제한 하는 지방 패드와 중첩 된다. 이러한 경우에, 그것은 종종 지방 패드 국경 거의 오픈 부르사 눈물을. 이 메서드는 종종 ' 턱 ' 부르사 내 새로운 난소 bursal 조직의 더 쉽게 접근할 수 있는 '포켓' 단풍. 이 방법은 또한 bursal 조직을 봉합 덜 필요할 수 있습니다. 부르사에 개방을 옆으로 회전 유지할 수 있습니다 또한 새로운 난소 자리에 봉합 하는 동안.
때때로, bursal 조직 과도 한 지방 패드 검사, 관의 특이 한 방향으로 인해 널리 열 하거나 검색 하기 어려운 난소 조직 파편을 복구 해야 합니다. 이러한 경우 새로운 난소 수 없습니다 효과적으로 될 '에 자리 잡고 ' 부르사. 난소는 오픈 부르사 위에 설정 되 고 난소의 절반 이상이 남은 bursal 조직으로 덮여 있다, 지갑 문자열 봉합 부르사와 난소 주변의 찢어진된 가장자리 떨어져 잘 배치 됩니다. 지갑-문자열은 천천히 강화, 난소 나머지 부르사 눌러졌는지 고 부르사 유지 하는 난소, 충분히 멀리 폐쇄는 하지만 완전히 닫힐 수 있습니다. 난소 오픈 부르사 위에 설정 되 고 난소의 절반 보다 작은 나머지 bursal 조직으로 덮여 있다는 봉합은 반대편에 부르사를 통해 난소를 통해 한쪽에 버의 찢어진된 가장자리에서 잘 되 고 맨 위에 매듭 난소의. 이 메서드와 여러 봉합 해야 하지 bursal 조직으로 난소의 완전 한 범위에서 발생 합니다. 그러나,이 메서드 장소에서 난소를 개최 하 고 효율적인 revascularization와 난소 활동의 최후 재개.
수행 된 ovariectomy 난소 부르사를 그대로 유지 하는 것은, 내 생 난소 조직 모두 제거 되도록 하기 위해 또한 배려를가지고 한다. 이 큰 생 난소 어려울 수 있습니다. 가능한 많은 bursal 조직으로 유지 하기 위해 조각에 큰 난소를 제거할 수 있습니다. 그러나,이 메서드를 사용할 때 모든 생 난소 조직 제거 되도록 하기 위해 여분의 경계를 사용 해야 합니다. 이 난소의 일부를 제거 하 고 부르사 혈액으로 가득 차 있다 후에 어려울 수 있습니다. Hemostatic 거품 패드의 작은 조각은 혈액을 치환 하 여 부르사 내부 응고에 도움이 오픈 부르사에 놓일 수 있다. 30-60 s 후 hemostatic 거품 패드를 제거 하 고 부르사 검사 (부르사 수 있습니다 또한 씻어 서 살짝 식 염 수와 함께) 모든 나머지 난소 파편의 존재에 대 한.
난소 이식 해야 이식된 난소의 설립된 혈액 공급에서 분리 되 고 그것의 새로운 가정에 있는 난소의 revascularization 즉시 아니다. 이 때문에, 이식된 난소 주로 성숙 및 채용 낭을 포함 일부 괴 사를 겪 습. 그러나, 이식된 난소의 대부분 이식 후 주기적 활동을 표시 하 고 일부 이식 받는 사람 죽음까지를 계속할 것 이다. 따라서, 이식 괴 사로 인해 모 낭의 이식된 난소의 통합의 새로운 주인으로의 설립에 강하게 영향을 나타나지 않습니다.
포유류의 노화에 일반적인 보기는 에스트로겐 건강에만 중요 한 생식 영향을 나타냅니다. 극적인 변화에서에서 관찰 건강의 에스트로겐 수준을 순환의 간단한 복원으로 새로운 난소를 받은 쥐를 쉽게 당할 수 있습니다. 그러나, 최근 연구에서20, 3 개의 실험실 의해 독립적으로 복제 17-α-estradiol 했다 여성 수명 나이의 10 개월부터 먹 일 때에 영향을 주지 않습니다. 이것은 확실히 같은 호르몬으로 잘 알려진 17-β-estradiol, 하지만 많은 스 트로 겐의 건강 관련 된 효과의 17-α-estradiol 신호21에 관찰 되었습니다. 에스트로겐 치료는 폐 경 후 여자에 있는 많은 연령 관련 pathologies에 긍정적이 고 부정적인 영향을 보여줘 왔다 그리고 명확 하 게 소유 하지 않는 폐 경 후 여성에서 동일한 영향 젊은 여성에서와 마찬가지로. 생식 세포 자극 에스트로겐 생산은 복제, 폐 경에 대 한 중요 한 난소 생식 세포 고갈 여전히 보유 건강 증진 특성, 더 postreproductive 난소의 제거는 사망률의 증가 등 나이 관련 된 질병22. Ovariectomized 마우스 가짜 수술 마우스 (715 한 일, 각각19대) 보다 약간 짧은 수명을. 장 수에 영향을 미치는 메커니즘은 진화론 보존, 건강 스팬 확장 포유류에 대 한 증거 모형 유기 체에서 에스트로겐만 설명에 대 한 주장.
모두와 함께 활성 세균 세포 없이 난소의 이식은 호르몬 치료 혼자 달성을 위해 노력 하고있다 수준 효능 복원. 부정적인 영향에 의해 여성에서 노화, 건강의 여러 측면 세 쥐에서 난소 기능을 활성의 재건 립에 의해 긍정적으로 좌우 될 수 있다. 그러나, 최근 파일럿 연구 난소 생식 세포 호르몬의 독립적인 어느 정도 이러한 효과 있을 수 있습니다 것이 좋습니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
노화, 세 쥐 식민지 (낸시 Nadon) 국립 연구소에서 14 개월 여성 CBA 생쥐의 관대 한 선물에 의해 그리고 유타 주립 대학, 수의학의 학교, 학과의 동물, 유제품이이 간행물에서 보고 된 연구 지원 고 수의 과학입니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Dissecting microscope | Any dissecting scope with an adjustable working distance. | ||
| Warm Water Recirculator and appropriate pad for your size surgical/recovery field. | Stryker/Gaymar | TP700 | Circulating water pads produce even and consistent temperature operating and recovery fields. |
| Surgical instruments-dissection instruments for access to the reproductive tract | Choice of specific surgical instruments is highly surgeon-specific | ||
| Surgical instruments-fine instruments for the transplantation procedure. | Choice of specific surgical instruments is highly surgeon-specific | ||
| Suture material for abdominal wall | eSutures | G3756K: 6-0 MILD CHROMIC GUT 18" HE-7 CUTTING, DOUBLE ARMED | |
| Suture material for ovarian bursa | eSutures | 2809G: 9-0 or 2810G: 10-0 ETHILON BLACK 5" BV130-5 TAPER | 10-0 suture can be difficult to locate if dropped on the surgery field. |
| Absorbable gelatin sponge | PFIZER. | Gelfoam- PFIZER 09-0315-08. | cut into small (~2mm) pieces under sterile conditions. |
| Staples for skin closure | Becton Dickinson | MikRon Autoclip 9mm (BD 427631) | |
| Eye ointment. | MWI Veterinary Supply Co. | Puralube sterile opthalmic ointment | |
| Syringes for anesthesia, analgesia and epinephrine | MWI Veterinary Supply Co. | BD 305536 | 27g x 3/8in,Intradermal Bevel 1/2ml |
| Syringes for saline. | MWI Veterinary Supply Co. | BD 309657. | 3ml syringe, luer-lok tip, 27g needle |
| Clippers/blade | Andis | Super AGR+™ Cordless Detachable Blade Clipper and a CeramicEdge® #40 blade. | Any clippers with a fine blade. |
| Ethanol | University chemical supply | dilute to 70% for use. | |
| Betadine solution | MWI Veterinary Supply Co. | 003233 | |
| 2x2 gauze pads | MWI Veterinary Supply Co. | 003073 | autoclaved with surgery packs |
| Borosilicate glass beads | Sigma-Aldrich Co. | Z273619 | Autoclave in sintilation vials |
| 4-vinylcyclohexene diepoxide | Sigma-Aldrich Co. | 94956 | |
| Sesame oil | Sigma-Aldrich Co. | S3547 |
References
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