Summary
Her presenterer vi delvis galle duct ligation som kirurgiske modell av skader og gjenfødelse gnagere.
Abstract
I Red er komplett galle duct ligation (cBDL) av felles galle duct en etablert kirurgisk teknikk for å studere hindrende cholestasis og galle duct spredning. Long-term forsøk kan imidlertid føre til økt sykelighet og dødelighet. I Velg musen stammer med underliggende leversykdom, kan meningsfull sammenligninger gjøres selv med ligation av en enkelt flik av leveren, som kan redusere dyr tap og utgifter. Her beskriver vi delvis galle duct ligatur (pBDL) i musen, der bare den venstre hepatic galle duct er samskrevet, forårsaker biliær hindring i den venstre lobe men ikke gjenværende lobes. Med forsiktig Mikrokirurgiske teknikk, kan pBDL eksperimenter være kostnadseffektive, siden unligated lobe fungerer som en intern kontroll til ligated lobes, når utsatt for samme vilkår i samme dyret. I motsetning til cBDL er en separat humbug-opererte kontrollgruppe ikke nødvendig. pBDL er svært nyttig å direkte sammenligne lokalisert versus systemiske effekter av cholestasis og andre beholdt galle komponenter. pBDL kan også brukes på nytt som en ny metode for å undersøke mekanismer knyttet til medisiner og celle migrasjon.
Introduction
Kirurgisk modeller av akutte skader og reparasjon, som delvis hepatectomy eller felles galle duct ligatur (cBDL), har blitt brukt i flere tiår i gnagere lever foryngelse og pathobiology1,2. I cBDL, er felles galle duct (som drenerer alle galle som produseres i leveren) samskrevet, resulterer i hindrende cholestasis, betennelse og fibrose i de første 2-3 uker etter operasjonen, med eventuell progresjon til skrumplever3. Galle duct spredning, transdifferentiation og induksjon av bosatt leveren progenitor celler er også funksjoner cBDL4,5. Selv om cBDL kaster spesifikke mekanismene av hindrende cholangiopathy, som er godt karakterisert med reproduserbar resultater i vill-type mus og i de stammene med normal lever6,7,8, den prosedyren kan være teknisk krevende i noen transgene musen modeller leversykdommer, krever flere dyr enn forventet på grunn av høyere sykelighet og dødelighet biliær hindringer over tid. Denne teknikken er også gunstig for å studere transgene mus med underliggende leveren sykdom, som ikke kanskje ellers tolerere stress i lengre tid kurs eksperimenter etter cBDL.
pBDL gir et rimelig alternativ for å overvinne noen av disse utfordringene. Første pBDL studier i vill-type mus rettet å skille lokalt skuespill og systemisk meglere på betennelse9. Viktigste biliær samløpet mellom høyre og venstre hepatic galle kanaler over felles galle duct er nøye visualisert på hilum pBDL, og bare den venstre hepatic galle duct er samskrevet for å generere en lokalisert hindrende cholestasis. pBDL tilbyr flere fordeler til cBDL. PBDL fungerer unligated høyre flik som en identisk like intern kontroll for den ligated venstre lobe, utsatt for de samme systemiske effektene, for eksempel ernæringsmessig status eller sirkulerende faktorer. Selv om systemisk pro-inflammatoriske mediatorer var tilstede, Osawa et al. observert mindre fibrose og nekrose i unligated lobes, men økt inflammatoriske celler og transformere vekst faktor-β uttrykk i samskrevet lobe9.
Nyligere har pBDL blitt omdefinert for å studere lever parenchymal effekter beholdt galle10. Ved å bruke samme dyret for intern kontroll (unligated "humbug") og eksperimentelle grupper, halvdeler pBDL effektivt antall dyr nødvendig per eksperimentet, som igjen er mer kostnadseffektive. Mus tolerere effekten av pBDL mye bedre, slik at den ideelle tiden selvfølgelig eksperimentere (≥2 uker) kan oppnås i ligated flik. Viktigst, pBDL kan skille direkte intrahepatic effekter av hindrende cholestasis og beholdt galle komponenter i ligated flik, sammenlignet med unligated kontroll flik. Samlet er pBDL en attraktiv metode å studere lobe-spesifikke effekter av lokaliserte cholestasis i leveren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle prosedyrer ble utført i samsvar med etiske retningslinjer institusjonelle Animal Care og bruk komiteen av University of Pittsburgh.
1. grunnleggende teknikker og felles prosedyrer
- Autoclave alle Mikrokirurgiske utstyr før bruk.
- For å unngå drepe musen ved anestesi, sjekk dens pustemønster nøye.
- Touch organer og tarmen som mulig for å unngå skade organer og forårsaker blødninger. Trykk blødning poeng med våt bomull vattpinner eller gasbind svamper.
- Bruk våt bomull vattpinner mild manipulering av organer. Våt, ikke-vevde gasbind svamper brukes i to størrelser, 3,5 x 3,5 cm og 6.0 × 6.0 cm. Bruk pongpongen til å trekke hele leveren. Bruk større en for å bryte små og store tarmen.
2. presurgical forberedelse
- Bruk mannlige c57/b6 mus, 8-12 ukens av alderen (når kroppsvekten er ca 20-35 g) for delvis galle duct hemorroider.
- Kan mus gratis tilgang til vann og mat til induksjon av anestesi.
3. delvise galle Duct Ligation operasjon
- Bedøve musen ved å sette dyret i en induksjon kammer med en blanding av 1.5-2.0% isoflurane og 1 L/min oksygen. Overvåke dyret nøye ved å observere pustefrekvens. Når pustefrekvens av dyret er ett per sekund, er musen godt bedøvet. Siden foran lem uttak refleks forsvinner raskere, knip hind lem foten samt for å bekrefte fullstendig fravær av uttak refleks. Øyne bør være smurt med en ophthalmica smøring agent å hindre hornhinnen sår. Merk den første dosen av smertestillende kan gis pre-operatively å hindre stimulering av smerte reseptorene.
- Barbere bukveggen med hårklippere, og plassere musen på tabellen kirurgisk under kirurgisk mikroskop. Fikse alle lemmer til bordet med tape. Bruk isoflurane innånding for å opprettholde musen under narkose.
- Justere isoflurane vaporizer og bruk 2.0-3.0% isoflurane for induksjon.
- Bruker sterilt vattpinner, desinfisere bukveggen først med 0,3 til 0.5 mL povidon-jod brukes lokalt, etterfulgt av 70% etanol. Dyr bør være belagt med en bakteriefri drapere.
- Gjøre en lang midtlinjen abdominal snitt fra xiphoid å skambeinet ved hjelp av saks og Adson tang. Etter den abdominal snittet, redusere isoflurane 0,8-1.0% for vedlikehold.
- Utsett bukhulen ved hjelp av en mikro-festepunkt. Hold xiphoid med mygg tang og trekke mot hodet av musen. Fix mygg tang i stedet bruker bløt leire.
- Innpode 1-2 mL varmet (37 ° C) sterilisert fosfat-bufret saltvann (PBS) i bukhulen å unngå å skade abdominal organer. Hold små tarmen med våt bomull vattpinner og forsiktig trekke dem mot hodet av musen. Kuttet båndene mellom små tarmen og retroperitoneum å unngå å skade små tarmen (figur 1A).
- Pakk små og store tarmen med en våt, ikke-vevde gasbind svamp. Plass dem på caudal side i bukhulen. Tarmen innpakket i sterilt gasbind kan plasseres på feltet for sterilt drapert å unngå forurensning.
- Forsiktig trekke hele leveren mot xiphoid ved hjelp av en liten våt ikke vevede gasbind svamp for å avsløre hepatisk hilum og sykdommer-duodenal ligament (figur 1B).
- Kontroller bekrefte anatomi av hepatisk hilum. Felles galle duct ligger på ventral side av portalen blodåre. Bekrefte plasseringene til høyre og venstre hepatisk gallekanalen, som tømme i viktigste biliær samløpet på hepatisk hilum.
- Identifiserer den venstre hepatic galle duct som drenerer til venstre lobe og omslutter det med en 10-0 nylon Sutur bruker blunt siden av en Sutur nål (figur 2A). Unngå skader i portalen blodåre, hepatic arterien og leveren overflaten.
- Ligate venstre galle røret med 10-0 nylon. (Figur 2B).
- Sett små og store tarmen i samme posisjon som før operasjonen ved hjelp av våt bomull vattpinner.
- Bekrefte det er ingen intestinal torsjon og intra-abdominale blødninger, og deretter lukke muskelen og huden i to lag med 4-0 vicryl. Flettet Sutur (Vicryl) ble brukt for huden nedleggelse, men monofilament foretrekkes å redusere sannsynligheten for infeksjon.
Merk: Nærheten fascia fortsatt Sutur fra xiphoid til pubis, og nærheten huden fortsatt Sutur fra pubis til xiphoid. - Stopp anestesi etter stengetid innsnitt.
4. postoperativ behandling og oppfølging
- Bare etter operasjonen, knip dorsal huden av mus og injisere Buprenex (0,1 mg/kg) og Cefazolin (100 mg/kg) subcutaneously, etterfulgt av Buprenex injeksjon hver 12 h for 3 dager, og Cefazolin hver 24 timer for 3 dager henholdsvis11,12 ,13. Merk den første dosen av smertestillende kan gis pre-operatively å hindre stimulering av smerte reseptorene. Cefazolin og andre peri-operative antibiotika er bare nødvendig for immun-undertrykkes dyr, som brukes i transplantasjon studier.
Merk: Hvis operasjonen er utført, musen vanligvis gjenoppretter innen 30 min. aktivitet av mus vil være nesten det samme som preoperativ betingelsen. - Sjekk musene daglig for tegn på distress.
- Ofre mus for cervical forskyvningene under narkose å skaffe lever og andre vevsprøver på definerte tidspunkt (dvs.7, 14, 21 dager) etter pBDL.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
For dette typisk eksperimentet, ble pBDL utført i tre eksemplarer PiZ transgene mus, som recapitulate menneskelige leversykdom i alfa-1 antitrypsin (A1AT)-mangel. PiZ musen overexpresses en transgene bestående av flere genomisk fragmenter av DNA som inneholder koding regionene mutant menneskelige A1AT genet og promoter, introns og ~ 2 kilobases av oppstrøms og nedstrøms flankert regioner14, 15. Normal A1AT er et utskilles serum protein som produseres i leveren. Mutant form av A1AT genererer uløselig protein aggregater som spontant akkumuleres i leveren forårsaker giftige stress. Eksperimentene utnyttet 3 - måneder gammel mannlig PiZ mus, som uttrykker alvorligste fenotypen av denne sykdommen, når protein aggregering topper16.
Serum lever biochemistries var forhold i pBDL og cBDL PiZ mus (tabell 1)10. Leverenzymer alanin aminotransferase (ALT) og aspartate aminotransferase (AST) er biomarkers hepatocellulært skader, mens totale serum bilirubin (TSB) måler graden av cholestasis. Samlet viser mus utsatt for pBDL ikke tegn på alvorlige skader eller cholestasis, som feltverdier serum var lik for opprinnelig plan10. Det er viktig å merke seg at mus med mislykkede pBDL (på grunn av tekniske problemer, for eksempel galle duct eller vaskulære skader) vil vise serum verdier som ligner cBDL mus, med betydelig forhøyede leverenzymer og TSB. Klinisk mus med mislykkede pBDL vises mer gulsott og distresset, med resultatene av galle lekkasjer, ascites, peritonitis eller hematom, og til slutt må ofres.
Siden mus utsatt for pBDL utvikle lobe-spesifikke hindrende cholestasis, kjøpe de ikke distended, mørk, galle-fylt galleblæren sett i cBDL. Bare ligated lobe vises lysere i fargen, mens unligated lobes vil opprettholde sin normale, mørk, rødbrun farge (Figur 3). Det er viktige forskjeller i leveren histology også, med økt galle duct spredning og fibrose i ligated flik (Figur 4). 10
Tabell 1: Representant serum lever biochemistries fra delvis galle duct ligatur (pBDL) sammenlignet med fullføre galle duct ligatur (cBDL) 10 . Hvert punkt representerer 3-4 mus. Merk PiZ transgene mus på c57/bl6 bakgrunn. Lab referanse områder er også gitt i parentes. (WT, vill-type; TSB, totalt serum bilirubin; ALT, alanin aminotransferase; ALP, alkalisk fosfatase).
Figur 1:eksponering av abdominal hulrom og sykdommer i lever og. (A) små tarmer er forsiktig trukket for å unngå tarm skader og koble leddbånd kuttes uten retroperitoneum. (B) leveren er forsiktig trukket for å tillate maksimal visualisering av biliær treet på den hepatisk hilum (pil). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : Delvis galle duct ligation. (A) sløv slutten av kirurgiske nålen brukes å nøye omringe nylon Sutur rundt den venstre hepatic galle duct, over samløpet til felles galle duct (opprinnelige forstørrelse 40 x). (B) vellykket ligatur av det venstre hepatic galle duct, som normalt drenerer til venstre leveren lobe. Gjenværende galle kanaler er unligated (opprinnelige forstørrelse 40 X). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3: brutto utseendet på WT (c57/b6) musen leveren 14 dager etter pBDL. Merk at den ligated venstre lobe vises lysere i fargen (piler), mens unligated lobes beholde sine normal, mørk, rødbrun farge. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4 : Lobe-spesifikke endringer i representant leveren vev deler fra dag 14 pBDL sammenligne unligated høyre (R) lobe til samskrevet venstre (L) flik i WT (c57/b6) mus. (A) Hematoxylin og eosin (H & E) flekker viser økt galle duct spredning (piler) i ligated flik. (B) Sirius røde flekker viser bygge bro fibrose følger galle duct spredning i ligated flik. Histology for PiZ musen har vært tidligere rapporterte10. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Selv om cBDL er den vanligste eksperimentelle teknikken for hindrende cholestasis, kan det presentere flere utfordringer i gnagere. Hvor mange postoperativ dager kreves for å oppnå et sluttpunkt, kan dyrene oppleve betydelige sykelighet og dødelighet som tiden går. Graden av vev skade og biliær nekrose er ytterligere forsterket når du arbeider med noen transgene musen modeller av leversykdom, som viser unormale leveren parenchyma og funksjon ved baseline. Sammenlignet med cBDL, rapporter om pBDL er begrenset, men denne teknikken kan brukes som et alternativ i select eksperimenter for å redusere negative resultater og dyr tap.
Variasjoner i metoden pBDL har også blitt rapportert. I metoden av Heinrich et al.plasseres en ekstern buet nålen ved felles galle duct, etterfulgt av ligatur rundt både felles galle duct og nål17. Nålen fjernes deretter før bukveggen nedleggelse, noe som resulterer i begrenset galle strømme gjennom en smalere lumen (dvs., delsum obstruksjon) galle duct17. Under denne prosedyren fjernes galleblæren også for å hindre cholecystitis17. Forfatterne konkluderte med at denne metoden var mer gunstig å studere akutt cholestasis i stedet for kronisk endringer17. Derimot er pBDL metoden vi beskrevet her strengt kontrollert, med både samskrevet og unligated ("humbug") lobes i samme dyr, slik det kreves mindre dyr per forsøk. Selv transgene mus med alvorlig underliggende leversykdom kan opprettholdes i lengre sluttpunktene (2-3 uker). Hensyn må tas å fullt avsløre og identifisere biliær treet microdissection teknikker, med begrenset manipulering av vaskulære strukturer og galle kanaler å hindre skade.
I ideelle forsøket, vil vev fra samskrevet (venstre) og unligated (høyre) lobes bli høstet samtidig, så direkte sammenligninger av galle sekretoriske funksjon og transportører kan gjøres ved hjelp av histologic og molekylære teknikker. Selv om serum lever biochemistries ikke vil reflektere alvorlig cholestasis, vil den ligated lobe demonstrere histologic filendringer tilknyttet hindrende cholestasis10. Denne modellen er nyttig å studere direkte microenvironmental effekter av beholdt galle komponenter (f.eks, gallesyrer, lipider, kolesterol) i leveren. Som en fremtidig studie, kan pBDL anses å undersøke cholehepatic skifting, der visse gallesyrer og narkotika er reabsorbed direkte fra cholangiocytes til hepatocytter18,19. Endogene gallesyrer ineffektivt konjugert av hepatocytter absorberes passivt av biliær epitel å gjennomgå cholehepatic skifting også, som fører til hypercholeresis og alkanlinization av galle av økt bikarbonat sekresjon20. Anvendelse av pBDL teknikken kan lette stoffet funnet ved å identifisere pharmacologic mekanismer for romanen Gallesyre therapeutics under etterforskning for leversykdom.
Tilleggsprogrammer for pBDL kan utvide utover biliær treet. Reversibilitet av cBDL og dens tilknyttede effekter har blitt beskrevet, og dette kan også brukes til pBDL med direkte sammenligning internkontroll21. Tilsvarende har langsgående i vivo bioimaging fluorescerende reporter uttrykk i mus leveren blitt studert etter cBDL22, med kraftig implikasjoner for pBDL eksperimenter. Videre har gnager eksperimenter ved hjelp av pBDL potensial til å innlemme avstamning sporing eller "homing" av sirkulerende celler, for eksempel Ben margtransplantasjon-avledet mesenchymal celler, til området av skader, slik at de kan spores i vivo med mer presisjon23,24,25.
Klart, det er omfattende programmer for pBDL alene som et internt kontrollert og reproduserbar teknikk skader og reparasjon, sammen med biliær fysiologi og narkotika metabolisme. For eksperimenter som mål å evaluere progresjon og systemiske effekter av kronisk cholestasis, er cBDL fortsatt den mest foretrukne metoden; pBDL vil imidlertid fortsatt legge til utfyllende data for å støtte slike funn.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen avsløringer.
Acknowledgments
Dr. Khan erkjenner gi støtte fra NIH/NICHD K12HD052892, alfa-1 grunnlaget, Hillman grunnlaget og Pittsburgh leveren Research Center. Dr. Michalopoulos erkjenner gi støtte fra NIH/NIDDK P01DK096990. Vi setter pris på gode og sjenerøs teknisk assistanse av Anne Orr. Vi er også takknemlige for Dr. David A. Geller for å gi tilgang til transplantasjon/Red mikrokirurgi lab.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope-Leica Wild M650, 6–40× magnification | Leica Microsystems | n/a | |
| Tec 3 isoflurane funnel fill vaporizer | General Anesthetic Services | n/a | |
| Stevens Tenotomy Scissors | Accurate Surgical & Scientific Instruments Corporation | ASSI.9193 | |
| Adson Forceps | Fine science tools | 11006-12 | |
| Mosquito classic delicate hemostatic forceps | Codman | 30-4472 | |
| Micro-retractor | Murdock; Roboz Surgical Instrument | RS-6550 | |
| Nonwoven gauze sponges | Fisherband | 870-PC-DBL | |
| Puritan 6” Small Cotton Swab w/Wooden Handle | Puritan Medical Products Company | 868-WCS | |
| Dumont SS Forceps - Standard Tips/Straight/Inox/13.5cm | Fine science tools | 11203-23 | |
| Dumont SS Forceps - Standard Tips/Angled 45°/Inox/13.5cm | Fine science tools | 11203-25 | |
| Vannas Spring Scissors - 3mm Cutting Edge | Fine science tools | 15000-00 | |
| Microneedle holder | Aesculap Surgical Instruments | FD231R | |
| Micro AROSuture, sterile 10-0 nylon suture, 70 µm, TAP points | AROSurgical Instruments Corporation | T4A10N07 | |
| 4-0 Vicryl | Ethicon | J662H | |
| 5-ml Syringe | BD | 309646 | |
| Falcon tissue culture dish, 60 × 15 mm | Corning | 353002 | |
| Isoflurane, United States Pharmacopeia (USP) liquid for inhalation, 250 ml | Piramal Healthcare | NDC 66794-017-25 | |
| Buprenex injectable (buprenorphine hydrochloride) | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals | NDC 12496-0757-1 | |
| Cefazolin for injection , USP | APP Pharmaceuticals | NDC 63323-238-61 | |
| PVP scrub solution (povidone–iodine 7.5%) | Medline | NDC 12496-0757-1 | |
| 70% Ethanol | Decon Labs | 2716 | |
| Phosphate Buffered Saline Without Calcium or Magnesium | LONZA | 17-516F | |
| Sirius Red | Sigma | 365548 | |
| Hematolxylin | Fisher (Richard-Allan Scientific) | 22-050-111 (7211) | |
| Eosin | Anatech (Fisher) | 832 (NC9686037) | |
| Formalin | Fisher | SF100-20 |
References
- Higgins, G. M., Anderson, R. Experimental pathology of the liver - Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal. Arch Pathol. 12, 186-202 (1931).
- Cameron, G. R., Oakley, C. L. Ligation of the common bile duct. The Journal of Pathology and Bacteriology. 35 (5), 769-798 (1932).
- Kountouras, J., Billing, B. H., Scheuer, P. J. Prolonged bile duct obstruction: a new experimental model for cirrhosis in the rat. Br J Exp Pathol. 65 (3), 305-311 (1984).
- Michalopoulos, G. K., Barua, L., Bowen, W. C. Transdifferentiation of rat hepatocytes into biliary cells after bile duct ligation and toxic biliary injury. Hepatology. 41 (3), 535-544 (2005).
- Dipaola, F., et al. Identification of intramural epithelial networks linked to peribiliary glands that express progenitor cell markers and proliferate after injury in mice. Hepatology. 58 (4), 1486-1496 (2013).
- Guyot, C., Combe, C., Desmouliere, A. The common bile duct ligation in rat: A relevant in vivo model to study the role of mechanical stress on cell and matrix behaviour. Histochem Cell Biol. 126 (4), 517-523 (2006).
- Zhang, Y., et al. Effect of bile duct ligation on bile acid composition in mouse serum and liver. Liver Int. 32 (1), 58-69 (2012).
- Tag, C. G., et al. Bile duct ligation in mice: induction of inflammatory liver injury and fibrosis by obstructive cholestasis. J Vis Exp. (96), e52438 (2015).
- Osawa, Y., et al. Systemic mediators induce fibrogenic effects in normal liver after partial bile duct ligation. Liver Int. 26 (9), 1138-1147 (2006).
- Khan, Z., et al. Bile Duct Ligation Induces ATZ Globule Clearance in a Mouse Model of alpha-1 Antitrypsin Deficiency. Gene Expr. 17 (2), 115-127 (2017).
- Birkhead, H. A., Briggs, G. B., Saunders, L. Z.
- Kunst, M. W., Mattie, H., van Furth, R. Antibacterial efficacy of cefazolin and cephradine in neutropenic mice. Infection. 7 (1), 30-34 (1979).
- Traul, K. A., et al. Safety studies of post-surgical buprenorphine therapy for mice. Lab Anim. 49 (2), 100-110 (2015).
- Carlson, J. A., et al. Accumulation of PiZ alpha 1-antitrypsin causes liver damage in transgenic mice. J Clin Invest. 83 (4), 1183-1190 (1989).
- Sifers, R. N., Finegold, M. J., Woo, S. L. Alpha-1-antitrypsin deficiency: accumulation or degradation of mutant variants within the hepatic endoplasmic reticulum. Am J Respir Cell Mol Biol. 1 (5), 341-345 (1989).
- Rudnick, D. A., Shikapwashya, O., Blomenkamp, K., Teckman, J. H. Indomethacin increases liver damage in a murine model of liver injury from alpha-1-antitrypsin deficiency. Hepatology. 44 (4), 976-982 (2006).
- Heinrich, S., et al. Partial bile duct ligation in mice: a novel model of acute cholestasis. Surgery. 149 (3), 445-451 (2011).
- Glaser, S. S., Alpini, G. Activation of the cholehepatic shunt as a potential therapy for primary sclerosing cholangitis. Hepatology. 49 (6), 1795-1797 (2009).
- Gurpinar, E., et al. A novel sulindac derivative inhibits lung adenocarcinoma cell growth through suppression of Akt/mTOR signaling and induction of autophagy. Mol Cancer Ther. 12 (5), 663-674 (2013).
- Alpini, G. G., Francis, H., Marzioni, M., Venter, J., Phinizy, J., LeSage, G. Madame Curie Bioscience Database. , Landes Bioscience. Austin, TX. (2013).
- Kirkland, J. G., et al. Reversible surgical model of biliary inflammation and obstructive jaundice in mice. J Surg Res. 164 (2), 221-227 (2010).
- Delhove, J. M., et al. Longitudinal in vivo bioimaging of hepatocyte transcription factor activity following cholestatic liver injury in mice. Sci Rep. 7, 41874 (2017).
- Li, C., et al. Homing of bone marrow mesenchymal stem cells mediated by sphingosine 1-phosphate contributes to liver fibrosis. J Hepatol. 50 (6), 1174-1183 (2009).
- Xu, J., et al. Factors released from cholestatic rat livers possibly involved in inducing bone marrow hepatic stem cell priming. Stem Cells Dev. 17 (1), 143-155 (2008).
- Sharma, S., et al. Propitious role of bone marrow-derived mononuclear cells in an experimental bile duct ligation model: potential clinical implications in obstructive cholangiopathy. Pediatr Surg Int. 29 (6), 623-632 (2013).
