Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Bepaling van de snelheid van afwikkeling van klei/cyanobacteriën Floccules

6.8K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/57176

⸱

11 juni 2018

In dit artikel

Samenvatting

De interactie en sedimentatie van klei en bacteriële cellen binnen de mariene realm, waargenomen in de natuurlijke milieus, kunnen het beste worden onderzocht in een gecontroleerde testomgeving. Hier beschrijven we een gedetailleerd protocol, dat een nieuwe methode voor het meten van de snelheid van sedimentatie van klei en cyanobacteriën floccules schetst.

Samenvatting

De mechanismen die de afzetting van fijnkorrelig, zijn organisch rijk sediment nog steeds grotendeels besproken. De gevolgen van de interactie van klei-deeltjes met reactief, planktonische cyanobacteriën cellen aan de sedimentaire record wordt in het bijzonder onder bestudeerd. Deze interactie is een potentieel grote bijdrage aan leisteen energetisch modellen. In een lab-omgeving, kunnen de flocculatie en sedimentatie tarieven van deze materialen worden onderzocht en gemeten in een gecontroleerde omgeving. Hier, detail we een protocol voor het meten van de snelheid sedimentatie van cyanobacteriën/klei mengsels. Deze methodologie wordt aangetoond door de beschrijving van twee monster experimenten: de eerste maakt gebruik van kaolien (een gedehydrateerde vorm van kaoliniet) en Synechococcus sp. PCC 7002 (een mariene coccoid cyanobacteriën), en de tweede gebruikt Kaolien en Synechocystis sp. PCC 6803 (een zoetwater coccoid cyanobacteriën). Cyanobacteriën culturen worden vermengd met wisselende hoeveelheden van klei in een speciaal ontworpen tank apparaat geoptimaliseerd zodat continue, real-time video en fotografische opname. De bemonsteringsprocedures zijn gedetailleerd en een post collectie protocol voor nauwkeurige meting van chlorofyl een waaruit de concentratie van cyanobacteriën cellen resterende in suspensie kan worden bepaald. Door middel van experimentele replicatie, is een profiel opgebouwd waarin sedimentatie tarief.

Inleiding

Met behulp van huidige milieuomstandigheden en processen om te concluderen uit het verleden energetisch mechanismen is al lang een onderbouwing van de sedimentologie. Terwijl moderne energetisch analogen, zoals de Zwarte Zee, hebben gebruikt om te begrijpen van de afzetting van organische-rijke, fijnmazig deposito's, hebben laboratoriumexperimenten het potentieel om te werpen nieuw licht op de oorsprong van leisteen deposito's. Een gebied van onderzoek in de ontstaansgeschiedenis van zwarte leisteen is het mechanisme van oorspronkelijke formatie en afzetting tarief. Traditioneel, heeft zijn veronderstelde dat zwarte leisteen gevormd in omgevingen waar de snelheid sedimentatie, primaire productiviteit en organisch materiaal ademhaling tarieven het promoten van het behoud van organisch materiaal in het sediment,1,2 ,3. Echter, de rol van cyanobacteriën en klei flocculatie grotendeels ondoordachte is gebleven. Dit mechanisme van flocculatie zou voor het snelle aanbrengen van organische-rijke, fijnmazig sedimenten optreden, en doet niet vergen laag-zuurstof. Gezien dit uitgangspunt, dit protocol heeft twee doelen: 1) het meten van de snelheid sedimentatie van cyanobacteriën/klei floccules, en 2) het visualiseren van het proces van de sedimentatie in real-time. Deze methodiek, naast geochemische analyse, is gebruikt om aan te tonen dat cyanobacteriën/klei flocculatie kan in feite worden een belangrijk mechanisme voor shale formatie1. Hoewel oorspronkelijk bedoeld voor de modellering van leisteen depositie, is deze methode van toepassing op andere vakgebieden zoals biologie en milieu sanering waar de invloed van klei input op bacteriële metabolisme en de bevolking moet worden gemeten.

Talrijke studies zijn uitgevoerd om te zien hoe de flocculatie van cyanobacteriën en klei, voor het beperken van schadelijke algenbloei2,3,4,5,6,7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 1 2. echter tijdens het meten van cel concentratie na verloop van tijd, deze studies niet op hebt toegepast cyanobacteriën/klei flocculatie modellering van de afzetting van de rock-record. Deze studies niet als zodanig een visuele component, die cruciaal worden kan wanneer modellering verleden sedimentologische processen. Bovendien, de meerderheid van de studies maken gebruik van cel-tellen (bijvoorbeeld Pan et al.. 11), die moeizaam kunnen zijn. Onze methode, met de recente vooruitgang in meten cyanobacteriën flocculatie, bepaalt de veranderingen in de concentratie van cyanobacteriën cel door het meten van chlorofyl een (Chl een) met discrete tijdsintervallen. Chl een meting met visuele gegevens koppelen is een nieuwe benadering, die kan worden gebruikt voor het afleiden van energetisch voorwaarden. De beelden die gegenereerd kunnen ook worden gebruikt voor de berekening van sedimentatie tarief na het werk van Du et al.. 13. de combinatie van visuele en numerieke gegevens versterkt de betrouwbaarheid van de resultaten. Voorts schetsen wij aanvullende protocollen waardoor de bezinking van dode biomassa en klei ook worden waargenomen. Dit is belangrijk bij het overwegen van verleden sedimentologische omgevingen, waar levende en dode biomassa mede mogelijk hebben voorgedaan. Verschillen in het gedrag van dode biomassa tijdens de flocculatie (bijvoorbeeld flocculatie tarief afname) potentieel sedimentologische gevolgen zou hebben.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

1. voorbereiden van cyanobacteriën culturen

  1. Voorbereiding van de culturen van de inoculatie met vaste voedingsbodems
    1. Een cyanobacteriën cellen verkrijgen bij de American Type Culture Collection of Pasteur Culture Collection. Bijvoorbeeld, de eencellige, mariene Synechococcus sp. PCC 7002 is verkregen uit de Pasteur Culture Collection, het zal worden aangeduid als Synechococcus.
    2. Het handhaven van Synechococcus cellen op platen met vaste voedingsbodems (A + vloeibare media14 en 1,5% agar15). Deze zal hierna worden aangeduid als inoculatie culturen.
    3. Incubeer de platen bij 32 ± 2 ° C met continue licht geboden bij 30-50 µmol fotonen m-2 s-1,15,18.
    4. Herhaal stap 1.1-1.3 en vervangen A + media met BG-11,16 in stap 1.1.2 voor zoetwater cyanobacteriën soorten, zoals Synechocystis sp. PCC 680316,17, hierna Synechocystis. Verwijzen naar tabellen 1-4 voor de samenstelling van A + en BG-11 media.
  2. Voorbereiding van vloeibare culturen: elke tank experiment vereist een 400 mL cyanobacteriën cultuur.
    1. Verzamel een 250 mL en twee 1 L hittebestendig conische kolf.
    2. Spoelen van elke kolf met een 4 M zoutzuur (HCl)-oplossing (30 mL HCl-oplossing voor elke kolf), gevolgd door gedestilleerd water.
      Let op: zoutzuur is bijtende en giftige. Ervoor zorgen dat een laboratoriumjas, veiligheidsbril en zuur-bestendige handschoenen worden gedragen terwijl het gebruiken van de 4 M HCl oplossing. Voer deze stap uit in een laboratorium gootsteen en volgen van de plaatselijke regelgeving inzake het weggooien van de 4 M HCl oplossing
    3. Vul de maatkolf van 250 mL met 50 mL vloeibare media (A + of BG-11). Vul in een maatkolf van 1 L met 400 mL vloeibare media (A + of BG-11) en de andere 1 liter-kolf met 600 mL media (A + of BG-11).
    4. Zegel van elke kolf met een gas permeabele schuim stop en bedek de schuim stop en kolf hals met zilverpapier.
    5. Label en autoclaaf toestaan de kolven bij 121 ° C en 100 kPa voor 25 min. de kolven afkoelen tot kamertemperatuur.
    6. Bereid een laminaire flow-kap door het steriliseren van het oppervlak met 70% alcohol.
    7. Het verzamelen van een draad inoculatie lus, een Bunsenbrander, de afgekoelde 50 mL vloeibare media kolf (uit stap 1.2.5) en de cultuur van de inoculatie (uit stap 1.1). Plaats deze items in de gesteriliseerde stroom kap.
    8. De draad inoculatie lus kort met behulp van de vlam van een bunsenbrander steriliseren en laat ze afkoelen.
    9. Sleep de koele lus langs het oppervlak van de inoculatie cultuur voor het verzamelen van cyanobacteriën cellen.
    10. Verwijder de schuim stop en folie GLB van de kolf van 250 mL (zonder aan te raken de schuim stop) en de rand van de erlenmeyer door het kort door de vlam steriliseren.
    11. Kantelen van de kolf, dus de media in de buurt van de hals van de kolf is en de lus van de inoculatie bekleed met cellen in de maatkolf invoegen. Zodra de lus is ondergedompeld in de media, roer de inoculatie lus de cellen verwijderen.
    12. Verwijder de inoculatie lus en de lip van de kolf met behulp van de vlam Bunsenbrander opnieuw te steriliseren.
    13. Vervang de schuim stop en folie cap op de conische kolf (zonder aan te raken de schuim stop).
    14. De lus van de inoculatie kort in de vlam Bunsenbrander steriliseren.
    15. Bereiden van een kamer van de groei (hierna: de groei kamer) waar de temperatuur op 30 ° C15,18 en lichtintensiteit is 30-50 µmol fotonen m-2 s-1,15,18 . Vochtigheid is niet actief gecontroleerd.
    16. Toestaan dat de geënte 50 mL cultuur Incubeer door schudden bij 150 t/min in de zaal van de groei, met een onderhouden temperatuur van 30 ° C. Houd de mond van de kolf gedekt tijdens de agitatie om controle van de verdampingsemissies verliezen en verontreiniging voorkomen.
    17. Laat de cyanobacteriën culturen groeien voor 96 uur. Een succesvolle cultuur moet worden helder groen weergegeven en hebben een optische dichtheid (OD) bij 750 nm van 0,4-0,6.
    18. Zodra de cultuur is voldoende gegroeid, plaats de 50 mL-cultuur en de maatkolf van 1 L met 400 mL vloeibare media (uit stap 1.2.5) de laminaire flow Hood. Zorgen dat de stroom kap is gesteriliseerd volgende stap 1.2.6.
    19. Herhaal stap 1.2.10 voor beide kolven in een laminaire flow-kap.
    20. Giet de cultuur van 50 mL in de media in de maatkolf van 1 L 400 mL en de lip van de maatkolf van 1 L met behulp van de vlam Bunsenbrander opnieuw te steriliseren.
    21. In de plaats van het schuim stop en folie GLB, hechten een steriele borrelende apparaat bestaande uit een schuim stopper, Pipet, kunststof buizen, in-line filter en folie omslag aan de monding van de kolf.
    22. Agitate de maatkolf van 1 L op 150 rpm bij 30 ° C met het waskolf-apparaat aangesloten op een luchtpomp, die een bevochtigde luchtmengsel via de oplossing15,18 300 mL/min circuleert.
    23. Toestaan dat de culturen om te groeien in de vergaderzaal van de groei bij 30 ° C gedurende 120-168 uur. Een succesvolle cultuur moet worden helder groen weergegeven en hebben een OD750 nm van 0,4-0,6.
    24. Herhaal stap 1.2 voor de productie van een controle-cultuur, die zal niet worden vermengd met de klei.
    25. Experimenten met behulp van dode biomassa vereist een extra stap. Autoclaaf de maatkolf van 1 L cultuur voor 60 min bij 121 ° C en laat ze afkoelen tot kamertemperatuur.

2. experimentele instellen

  1. Plaats een rechthoekige acryl tank (lengte 20 cm), 5.1 cm breed en hoogte van 30 cm voor een bank van fluorescerende lampen (negen T8 lampen, ten minste 2.600 lumen; Figuur 1) 19.
  2. Plaats een doorzichtige, witte plastic folie tussen de bank van de lichten en de tank om te verspreiden het licht, dat door de tank schijnt. Deze set-up werd aangepast van Sutherland et al. 19
  3. Mark de acryl tank op een hoogte van 10 cm, gemeten verticaal vanaf de basis. Alle metingen moeten worden verricht op deze hoogte in de waterkolom te zorgen voor de samenhang van alle bemonstering.
  4. Plaats een camera op een statief, 1 m vóór de tank om te registreren elk experiment. Een videocamera wordt aanbevolen aangezien beelden kunnen worden geëxtraheerd uit videodossiers, en met behulp van wiskundige modellering software, video-bestanden kunnen worden gebruikt om het model beslechting dynamics19.
  5. Plaats een zwarte doek over de lichte bank tank en de camera te beschermen van het experiment van externe lichtbronnen (Figuur 1).

3. flocculatie experimenteel Protocol

  1. Het verzamelen van de cultuur van 400 mL (stap 1.2), een grote afgestudeerd cilinder en 600 mL extra groei media in een maatkolf van 1 L (stap 1.2.5).
  2. Verdun de 400 mL cultuur (eerste cel concentratie van 4-6 mg/mL) met extra groei media (A + of BG-11) tot eindvolume van 1 L met behulp van de gegradueerde cilinder. Voeg deze oplossing aan de acryl tank.
  3. Bereiden van 2 mL microfuge buizen door labeling en plaatsen ze op een gunstige locatie in de buurt van de acryl tank. 50 g van klei voor het experiment te meten.
  4. Video-opname te beginnen. In het geval van meerdere experimenten, kan een bord met de id van het experiment tijdelijk worden gesteld voor de camera.
  5. Met behulp van een precisiepipet, neemt een 1 mL monster en breng dit in een gelabelde microfuge buis. In dit voorbeeld gebruiken om te bepalen van de initiële cyanobacteriën cel telling door het meten van de OD750 nm waarden. Alle monsters te nemen in drievoud om nauwkeurige resultaten te waarborgen.
  6. Snel giet de klei (50 g) in de tank met krachtige agitatie via een opzwepende stick voor 10 – 15 s.
  7. Start de timer en neemt de eerste 1 mL monster voor Chl een bepaling met behulp van een precisiepipet P1000 (monster tijd0).
  8. Extra monsters te nemen op passende tijdstippen (bijvoorbeeld, 1 min 2 min, 3 min, 4 min, 5 min, 10 min, 15 min, 30 min, 60 min, 180 min en 240 min).
  9. Zodra het experiment is voltooid, slaat het videobestand, uitschakelen van de video-camera en verwerken van alle monsters voor Chl een bepaling (stap 4).
  10. Autoclaaf de resterende klei/cyanobacteriën oplossing. Afhankelijk van cyanobacteriën soorten, lokale regelgeving en lab beleid, vervreemding van de oplossing met behulp van geschikte methoden. Schoon de tank met zeep en water, spoelen met gedistilleerd water en lucht drogen.
  11. Bereiden een controle-experiment met geen klei toegevoegd. Monsters te nemen op de dezelfde tijd punten. Deze gegevens kan worden vergeleken met de andere experimentele gegevens om te bevestigen dat beslechting tarieven worden verbeterd als gevolg van de flocculatie met klei, niet een gevolg van de natuurlijke afwikkeling.
  12. Als dode biomassa wordt gebruikt tijdens het experiment, gebruik dezelfde experimentele procedure. De procedure van de beschikking van de oplossing vereist echter geen autoclaaf.

4. verwerking en evaluatie van de proeven

  1. Bepaal Chl een concentratie in elk monster van de cel met behulp van een procedure van Owttrim16gewijzigd. Zodra verzameld, pellet de cellen van elk monster gedurende 3 minuten op 13.000 x g met behulp van een microcentrifuge bij kamertemperatuur.
  2. Verwijder overtollige media met behulp van een precisiepipet P1000 en voeg 1 mL 100% methanol (20 ° C). Vortex het monster bij volledige snelheid voor 1 min aan resuspendeer de pellet cel.
    Let op: Methanol is giftig en brandbaar. Draag handschoenen en veiligheidsbril, en methanol uit de buurt van ontstekingsbronnen houden.
  3. Incubeer de monsters bij-20 ° C gedurende 24 uur om de winning van Chl een.
  4. Na incubatie, pellet het cellulaire puin zoals beschreven in punt 4.1, de groene supernatant overbrengen in een cuvet met behulp van een precisiepipet en plaats de cuvette in de spectrofotometer. Toestaan dat de steekproef om uit te rusten in de spectrofotometer voor 1 min om ervoor te zorgen dat alle resterende klei binnen het monster afwikkelt en niet met de meting interfereert.
  5. Chl een concentratie spectrophotometrically bepalen door het meten van de absorptie bij 665 nm en 652 nm en OD bij 750 nm. De Chl een concentratie wordt bepaald met behulp van de formule Chl een = 16.29 x (een665 - OD750) - 8.54 x (een652 - OD750) 20. CHL een concentratie wordt gebruikt als een proxy voor cel concentratie. Bovendien, een conversiefactor van 7,4 x 1010 cellen/L = 10 g/L21 kan worden gebruikt voor het berekenen van de concentratie van de cel in gram van sommige soorten van cyanobacteriën.
  6. Berekende Chl een waarden tegen de tijd uitgezet.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Wanneer blootgesteld aan klei, worden cyanobacteriën cellen gebracht uit schorsing22. Dit wordt geïllustreerd in de representatieve resultaten hier gegeven. Om het effect van klei op cyanobacteriën populaties te bepalen en te observeren de bezinking tarieven, twee experimenten werden uitgevoerd tijdens die Synechococcus en Synechocystis werden blootgesteld aan 50 g/L Kaolien klei (tabel 5-6, Figuur 2...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Flocculatie gekatalyseerd door cyanobacteriën cel-klei interactie heeft aangetrokken veel van belang op het gebied van ecologie en engineering2,3,4,5,6,7 ,8,9,10,11,

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

De auteurs erkennen dankbaar financiering uit de Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada (05448, 165831 en 213411).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
cyanobacteriën (in dit onderzoek: Synechococcus sp. PCC 7002 en Synechocystis sp. PCC 6803)Pasteur Culture CollectionPCC 7002 of PCC 6803gebruikt om de platen te inoculeren
agarThermo ScientificCM0003gebruikt om twee petrischalen te vullen
Petrischalen (standaard bacteriologie, 100 x 15 mm)Sarstedt82.1473.0012 vereist
1 L hittebestendige ErlenmeyerkolfPyrex4980-1251 vereist
250 mL hittebestendige ErlenmeyerkolfPyrex4980-2501 vereist
Nichrome inoculatieslinger met handvatFisher Scientific14-956-1031 vereist
tinfoilReynolds Wrap Aluminiumfolie89079-06750 cm vereist; gebruikt om schuimstop en hals van Erlenmeyerkolven te bedekken
groeimedia (bijv. A+)1050 mL vereist; geproduceerd met behulp van de samenstelling beschreven in tabellen 1-4
BunsenbranderFisher ScientificS959411 vereist
plastic buisFisher ScientificS5045911 m vereist; gebruikt om het borrelapparaat te maken
sponsstopJaece Industries Inc14-127-40E1 vereist; gat in het midden gemaakt voor pipette; gebruikt voor de constructie van het borrelapparaat
acrylplaat Home DepotOptix heldere acrylplaat model # MC-102S1 vereist; gebruikt om acryltank (20 x 30 x 5,1 cm) te construeren
heldere waterdichte siliconenlijmHome DepotLoctite heldere siliconen model # 9085701 vereist; gebruikt om acryltank (20 x 30 x 5,1 cm) te construeren
camera of videorecorderPanasonicHC-V770 HD camcorder1 vereist
statiefMagnusVT-3001 vereist
zwarte doekprimomart EAN 0726670162199; Onderdeelnummer 680254blacknappedfr1 vereist; duvetyne lichtblokkerende doek; ongeveer 152 x 213 cm om het tankexperiment te bedekken
hittebestendige serologische pipetcorning incorporated C70851013-671-101G1 vereist; gebruikt om het borrelapparaat te maken
monsterbuisjes DynalonS30467minstens 12 (zal variëren met gekozen tijdsinterval)
hittebestendige glazen pipetFisher ScientificCorning Incorporated C708510, 13-671-101G1 vereist; gebruikt om het borrelapparaat te maken; Polystyreen serologische pipet zou ook werken, maar moet na het autoclaveren van de rest van het apparaat worden aangesloten op de buis en de stop.
microcentrifugeEppendorf22 62 120-3 1 vereist;Vergelijkbare producten kunnen worden gebruikt als ze in staat zijn om 1,5 -2 mL microfugebuisjes te centrifugeren bij 13.000 x g
vortexmachine (Vortex-Genie 2)Scientific Industries, IncSI-02361 vereist
100% methanolFisher ScientificA412-500 SDSminstens 12 mL (1mL per monster) vereist; Let op: Ontvlambaar, giftig. Draag handschoenen en veiligheidsbril. Niet gebruiken of opslaan in de buurt van een ontstekingsbron. Alternatieve bronnen kunnen worden gebruikt.
cuvettes (1,6  mL, polystyreen)Sarstedt67.742minstens 12 vereist
spectrofotometerFisher Scientific222-2716001 vereist; Pharmacia Biotech Novaspec ll kan ook worden gebruikt.
lichtbronnenHome Depotmodel # 451807; internet #205477895; winkel SKU #10010615386-8 lichtbronnen vereist om licht te bieden voor de tankexperimenten
pipet (Pipetman Classic P1000GilsonF123602gebruikt om monsters te verzamelen
37 % ZoutzuurgasSigma-Aldrich258148Let op: Corrosief en giftig. Draag een laboratoriumjas, veiligheidsbril en zuurbestendige handschoenen tijdens het gebruik. Voor gebruik op 4 N bereid door verdunning in gedeïoniseerd water in een chemische afzuigkap.
Schuimstop (klein)CanlabT 1385
Schuimstop (groot)CanlabT 1387Vereist enkele intacte stoppen en sommige met een enkel gat door het midden
30 °C incubator/groeiruimte met continue verlichting1 vereist
70 % EthanolFisher ScientificBP820150030 mL  vereist; Let op: Giftig en ontvlambaar. Draag laboratoriumjas en veiligheidsbril
hydrofobe luchtfilter (Midisart 2000, 0,2 µm)Sartorius178051 vereist
klei (bijv. kaolin)Fisher ScientificMFCD00062311minstens 50 g vereist
microfugebuisjes (2 mL, polypropyleen)Sarstedt72.695.500Vergelijkbare producten kunnen worden gebruikt. Minstens 12 (zal variëren met gekozen tijdsinterval)
1000 µL pipettipsSarstedt70.7621 vereist

Referenties

  1. Macquaker, H. S., Keller, M. A., Davies, S. J. Algal blooms and "marine snow": mechanisms that enhance preservation of organic carbon in ancient fine-grained sediments. J. Sediment. Res. 80, 934-942 (2010).
  2. Tyson, R. V. Sedimentation rate, dilution, preservation and total organic carbon: some results of a modeling study. Org. Geochem. 32, 333-339 (2001).
  3. Piper, D. Z., Calvert, S. E. A marine biogeochemical perspective on black shale deposition. Earth-Sci. Rev. 95, 63-96 (2009).
  4. Sengco, M. R., Li, A. S., Tugend, K., Kulis, D., Anderson, D. M. Removal of red- and brown-tide cells using clay flocculation I. Laboratory culture experiments with Gymnodiniumbreve and Aureococcus anophagefferens. Mar. Ecol. Prog. Ser. 210, 41-53 (2001).
  5. Guenther, M., Bozelli, R. Factors influencing algae-clay aggregation. Hydrobiologia. 523, 217-223 (2004).
  6. Archambault, M. -C., Grant, J., Bricelj, V. M. Removal efficiency of the dinoflagellate Heterocapsa triquetra by phosphatic clay and implications for the mitigation of harmful algal blooms. Mar. Ecol. Prog. Ser. 253, 97-109 (2003).
  7. Beaulieu, S. E., Sengco, M. R., Anderson, D. M. Using clay to control harmful algal blooms: deposition and resuspension of clay/algal flocs. Harmful Algae. 4, 123-138 (2005).
  8. de Magalhães, L., Noyma, N., Furtado, L., Mucci, M., van Oosterhout, F., Husza, V., Marinho, M., Lürling, M. Efficacy of coagulants and ballast compounds in removal of cyanobacteria (Microcystis) from water of the tropical lagoon Jacarepaguá (Rio de Janeiro, Brazil). Estuaries and Coasts. 40, 121-133 (2017).
  9. Li, L., Pan, G. A universal method for flocculating harmful algal blooms in marine and fresh waters using modified sand. Environ. Sci. Tech. 47, 4555-4562 (2013).
  10. Miranda, M., Noyma, N., Pacheco, F. S., de Magalhães, L., Pinto, E., Santos, S., Soares, M., Huszar, V., Lürling, M., Marinho, M. The efficiency of combined coagulant and ballast to remove harmful cyanobacterial blooms in a tropical shallow system. Harmful Algae. 65, 27-39 (2017).
  11. Pan, G., Chen, J., Anderson, D. Modified local sands for the mitigation of harmful algal blooms. Harmful Algae. 10, 381-387 (2011).
  12. Shi, W., Tan, W., Wang, L., Pan, G. Removal of Microcystis aeruginosa using cationic starch modified soils. Water Research. 97, 19-25 (2016).
  13. Du, J., Pushkarova, R. A., Smart, R. A cryo-SEM study of aggregate and floc structure changes during clay settling and raking processes. Int. J. Miner. Process. 93, 66-72 (2009).
  14. A+ Medium Recipe, 2017. UTEX Culture Collection of Algae at the University of Texas at Austin. , Available from: http://web.biosci.utexas.edu/utex/Media%20PDF/a%20plus%20medium.pdf (2017).
  15. Stevens, S. E., Porter, R. D. Transformation in Agmenellum quadruplicatum. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 77, 6052-6056 (1980).
  16. Owttrim, G. W. RNA helicases in cyanobacteria: biochemical and molecular approaches. Methods Enzymol. 511, 385-403 (2012).
  17. Rippka, R., Deruelles, J., Waterbury, J. B., Herdman, M., Stanier, R. Y. Generic Assignments, Strain Histories and Properties of Pure Cultures of Cyanobacteria. Microbiology. 111, 1-61 (1979).
  18. Chamot, D., Owttrim, G. W. Regulation of cold shock-induced RNA helicase gene expression in the cyanobacterium Anabaena sp. strain PCC 7120. J. Bacteriol. 182, 1251-1256 (2000).
  19. Sutherland, B. R., Barrett, K. J., Gingras, M. K. Clay settling in fresh and salt water. Environ. Fluid Mech. 15, 147-160 (2014).
  20. Porra, R. J., Thompson, W. A., Kriedemann, P. E. Determination of accurate extinction coefficients and simultaneous equations for assaying chlorophylls a and b extracted with four different solvents: verification of the concentration of chlorophyll standards by atomic absorption spectroscopy. Biochim. Biophys. Acta. 975, 384-394 (1989).
  21. Liu, Y. X., Alessi, D. S., Owttrim, G. W., Petrash, D. E., Mloszewska, A. M., Lalonde, S. V., Martinez, R. E., Zhou, Q. X., Konhauser, K. O. Cell surface reactivity of Synechococcus sp. PCC 7002: implications for metal sorption from seawater. Geochim. Cosmochim. Acta. 169, 30-44 (2015).
  22. Playter, T., Konhauser, K., Owttrim, G., Hodgson, C., Warchola, T., Mloszewska, A. M., Sutherland, B., Bekker, A., Zonneveld, J. -P., Pemberton, S. G., Gingras, M. Microbe-clay interactions as a mechanism for the preservation of organic matter and trace metal biosignatures in black shales. Chem Geol. 459, 75-90 (2017).
  23. Verspagen, J. M. H., Visser, P. M., Huisman, J. Aggregation with clay causes sedimentation of the buoyant cyanobacteria Microcystis spp. Aquat. Microb. Ecol. 44, 165-174 (2006).
  24. Avnimelech, Y., Troeger, B. W., Reed, L. W. Mutual flocculation of algae and clay: evidence and implications. Science. 216, 63-65 (1982).
  25. Chen, L., Men, X., Ma, M., Li, P., Jiao, Q., Lu, S. Polysaccharide release by Aphanothece halophytica inhibits cyanobacteria/clay flocculation. J. Phycol. 46, 417-423 (2010).
  26. Pan, G., Zhang, M. -M., Chen, H., Zou, H., Yan, H. Removal of cyanobacterial blooms in Taihu Lake using local soils. I. Equilibrium and kinetic screening on the flocculation of Microcystis aeruginosa using commercially available clays and minerals. Environ. Poll. 141, 195-200 (2006).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

Mengsels van cyanobacteriën en kleimeting van de sedimentatiesnelheidbereiding van kaolienkleibepaling van chlorofyl atelling van cyanobacteriële cellenacrylbekkenapparatuuroptische dichtheid bij 750 nmbemonstering met microcentrifugebuisjesanalyse van de bezinkingssnelheidsedimentologische depositiemodellen