Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Implantation af Electrospun vaskulære Grafts med optimeret struktur i en rotte Model

doi: 10.3791/57340 Published: June 27, 2018

Summary

Vi præsenterer her, en modificeret electrospinning metode til at fabrikere PCL vaskulære podninger med tykke fibre og store porer, og beskrive en protokol for at vurdere i vivo ydeevne i en rotte model af abdominale aorta udskiftning.

Abstract

Vi præsenterer her, en protokol til at fabrikere kombineret makroporøs PCL vaskulære graft og beskrive en evaluering protokollen ved hjælp af en rotte model af abdominale aorta udskiftning. Electrospun vaskulære grafts besidder ofte forholdsvis små porer, som begrænser celle perkolatnedsivning i podninger og hindre regenerering og remodellering af neo-arterier. I denne undersøgelse, blev PCL vaskulære podninger med tykkere fibre (5-6 µm) og større porer (~ 30 µm) fremstillet ved hjælp af en modificeret behandling teknik. De langsigtede resultater af graften blev evalueret af implantation i en rotte abdominale aorta model. Ultralyd analyse viste, at podninger forblev patent uden aneurisme eller stenose sker selv efter 12 måneder efter implantation. Kombineret makroporøs struktur forbedret celle indvækst og dermed fremmet væv regenereres på 3 måneder. Endnu vigtigere, var der ingen tegn på uønskede remodeling, såsom forkalkning i graft væggen efter 12 måneder. Derfor hold electrospun PCL vaskulære podninger med modificerede kombineret makroporøs behandling potentiale til at blive en arterie erstatning for langsigtet implantation.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Vaskulære grafts fremstillet af syntetiske polymerer udnyttes bredt i klinikken til behandling af hjerte-kar-sygdomme (lidelser). Desværre for lille diameter vaskulære podninger (D < 6 mm) der findes ingen succesfulde produkter på grund af den lave passage udløst af nedsat blod flow hastighed, hvilket ofte fører til trombose, intima hyperplasi og andre komplikationer1.

Vævsmanipulering giver en alternativ strategi til at realisere langsigtede passage og homøostase baseret på et stillads-styrede vaskulære regenerering og genopbygning. Detaljeret, vaskulære graften som en tre-dimensionel skabelon, kunne give mekanisk støtte og strukturelle vejledning under regenerering af karvæv og indflydelse cellulære funktioner, herunder celle vedhæftning, migration, spredning, og sekretion af ekstracellulære matrix2. Indtil nu er blevet evalueret forskellige syntetiske polymerer til applikationer i karvæv engineering. Blandt disse polymerer, har poly(ε-caprolactone) (PCL) været intensivt undersøgt på grund af god celle forenelighed og langsom nedbrydning spænder fra flere måneder til to år3. I en rotte aorta model4,5,6, PCL vaskulære grafts behandles af electrospinning udstillet fremragende strukturelle integritet og passage, så godt som løbende øget celle invasion og neovascularization i den pode væg i op til 6 måneder. Men negative væv remodellering, herunder regression af celler og kapillærer og forkalkning, blev også observeret ved længere timepoints, op til 18 måneder.

Cellularization af vaskulære podekvisten er en nøglefaktor bestemmelse vævsregeneration og remolding7. Electrospinning, har som en alsidig teknik, været bredt ansat i udarbejdelsen af vaskulære podninger med nano-fiber struktur8. Desværre, den relativt lille pore struktur ofte fører til utilstrækkelig celle infiltration i electrospun vaskulære graft, som begrænser den efterfølgende vævsregeneration. Du kan løse dette problem ved har forskellige teknikker været forsøgt at øge porestørrelse og samlet porøsitet, herunder salt/polymer udvaskning9,10, ændring af collector apparater, efterbehandling af laserstråling11 , osv. Faktisk, er strukturen af electrospun grafts (herunder fiber diameter, porestørrelse og porøsitet) nært beslægtet med forarbejdning betingelser12,13. Under electrospinning, kan fiber diameteren styres let ved at ændre parametrene, såsom koncentrationen af polymer løsning, strømningshastighed, spænding, osv. 14 , 15, og derfor porestørrelse og porøsitet er blevet forbedret i overensstemmelse hermed.

Vi har for nylig rapporteret en modificeret PCL electrospun graft med kombineret makroporøs struktur (fibre med diameter på 5-7 µm og porerne i 30-40 µm). In vivo implantation af erstatter rotte abdominale aorta viste høj sats af passage, samt god endothelialization og glatte muskler regeneration på 3 måneder efter operationen16. Endnu vigtigere, kunne ingen negative væv remodellering herunder forkalkning og celle regression konstateres selv efter et år af implantation.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Brugen af forsøgsdyr blev godkendt af dyr eksperimenter etiske udvalg af Nankai universitetet og udføres i overensstemmelse med vejledningen til pleje og brug af forsøgsdyr.

1. fabrikation af Electrospun PCL Grafts

Bemærk: Heri, en electrospinning teknik blev udnyttet til at fabrikere vaskulære podninger.

  1. Forberede PCL løsninger af 25 wt % og 10 wt %, ved at opløse PCL i en blanding af metanol og chloroform, henholdsvis (1:5 volumen ratio), ved stuetemperatur (RT) for 12 timer.
  2. Indlæse PCL løsning i en 10 mL glas sprøjte.
  3. Sted i sprøjten med en 21-G kanyle.
  4. Placer rustfrit stål dornen (2 mm i diameter, 25 cm i længden) på samling instrument.
  5. Til tykkere-fiber grafts, bruger PCL løsning af 25 wt %, arbejde afstand på 17 cm fra nålen tip til opkøber, strømningshastigheden af 8 mL/h, og spænding på 11 kV som electrospinning parametre. For tyndere-fiber grafts, bruger PCL løsning af 10 wt %, arbejde afstand af 20 cm fra nålen tip til opkøber, en gennemstrømningshastighed på 2 mL/h, og spænding af 18 kV som electrospinning parametre.
  6. Sikre, at de opnåede podninger er placeret i vakuum natten over for at fjerne de resterende opløsningsmiddel. Sterilisere alle instrumenter før proceduren og fastholde aseptisk teknik i hele.
  7. Forud for implantation, desinficere podninger ved at nedsænke dem i 10 mL af 75% ethanol i 30 min og derefter udsætter dem for UV-lys natten over.
  8. Fiber og pore størrelse målinger: beregne den gennemsnitlige fiber diameter ved hjælp af ImageJ software baseret på scanning elektronmikroskopi (SEM) billeder.
  9. Mekanisk testning af stilladser:
    1. Skær de rørformede stilladser i 3 mm sektioner i længde ved hjælp af et barberblad. Måle tykkelsen af stilladser ved hjælp af en mikrometer.
    2. Placer de rørformede stilladser på en trækstyrke-test maskine med en lasteevne på 100 N.
    3. Klemme stilladser med en 1 mm Inter clamp afstand og træk på langs med en hastighed på 10 mm/min. indtil brud. Måle trækstyrke og ultimative brudforlængelse. Beregne Youngs modulus fra den oprindelige lineære region (op til 5% stamme) af stress-strain kurve.

2. rotte abdominale Aorta Implantation Model

Bemærk: Alle materialer og redskaber, der anvendes i kirurgi er sterile. Under operationen, Sørg for, at operatøren bærer en gaze maske og sterile handsker for at undgå infektioner. Sikre rumtemperaturen holdes ved 27-30 ° C til at bevare dyrenes kropstemperatur. Følg lokale IACUC retningslinjer vedrørende analgesi.

  1. Brug mandlige Sprague Dawley rotter vejer 240-270 g som modtagere af vaskulære graft. Sikre rotten har fastet 24 timer før operationen. Formålet med fastende rotter i 24 timer er at Tom fæces i tarmkanalen tilstrækkeligt, dermed udvide operatørens horisont.
  2. Forstå rottens tilbage hals og holde hovedet nedad, indsætte springe nålen i bughulen af underlivet. Fremkalde rotte for anæstesi med Kloral hydrat (330 mg/kg) ved en intraperitoneal injektion.
  3. Bekræfte passende anesthetization ved at sikre, at rotten har afslappet muskler og støt vejrtrækning. Sted rotte under drift mikroskop i en liggende stilling.
  4. Anvende Vaselin oftalmologiske vet salve på øjnene at forhindre tørhed under anæstesi. Administrere antikoagulation (100 UI/kg) med heparinized fysiologisk saltvand løsning (50 UI/mL) ved halen vene injektion før operationen.
  5. Barbere pels i den forreste bugvæggen ved hjælp af et barberblad, og rengør huden ved hjælp af jodopløsning og medicinsk alkoholopløsning.
  6. Udføre en midterlinjen laparotomi snit med kirurgisk saks og sikre, at indsnittet er omkring 4-5 cm lang, og så udsætte bughulen.
  7. Trække og wrap tarmene med gaze fugtet med saltvandsopløsning fortrinsvis.
  8. Dissekere den abdominale aorta omhyggeligt.
  9. Identificere og ligate alle små grene ved hjælp af 9-0 monofilamenter nylon sutur.
  10. Klemme den isolerede sektion (op til 1 cm i længden) af aorta ved hjælp af to vaskulære klemmer. Aorta kan forblive fastspændt i 20-30 min.
  11. Transekttællinger abdominal aorta mellem to klemmer ved hjælp af mikro-saks til at oprette de Anastomotiske websteder.
  12. Skyl de to ender af aorta ved hjælp af heparinized saltvand (50 UI/mL) løsning til at fjerne de resterende blod.
  13. Skrælle adventitia ved hjælp af mikro-saks.
  14. Anastomose transplantat med 2 mm indre diameter og 1 cm i længden at rottens abdominale aorta med en figur af otte sutur mønster ved hjælp af 9-0 monofilamenter nylon sutur.
  15. For det første, konstruere fire anastomoser ifølge sekvensen af 9, 3, 12 og klokken 6 positioner på den proksimale side, derefter anastomose skære kanterne i 4 masker mellem to suturer. Efter at have afsluttet den proksimale sutur, sutur i distale side efter samme metode.
    Bemærk: Hver søm er forpligtet til at sikre den oprindelige side er lidt indlejret i graften.
  16. Fjerne den distale klemme til at tillade blodet at flyde ind i podekvisten, så fjerne de proximal clamp.
  17. Tryk på sutur enderne til at stoppe blødningen ved hjælp af et sterilt stykke vat eller en lille gaze svamp. Tryk for omkring 3 min, indtil hæmostase.
  18. Returnere tarmen ind i bughulen.
  19. Skyl bughulen bruger varme fysiologisk saltvand løsning med gentamicin (320 U/mL).
  20. Sy op den abdominale væg ved hjælp af en 3-0 Nylon sutur i muskel og hud lag, henholdsvis.
  21. Placere rotten i en ren og tør bur og sætte en varmepude under buret til at bevare dyrenes kropstemperatur; Så vent til rotten hen til genoprette fra anæstesi. Deltage i dyret, indtil den har genvundet tilstrækkelig bevidsthed for at opretholde brystbenet recumbency.
  22. Når det kommer til bevidsthed, sætte rotten i en enkelt bur med mad og vand. Anvende jod på såret til at forhindre infektion efter operation. Vende tilbage rotten til selskab med andre dyr, indtil det fuldt ud genopretter.
  23. Aflive rotter efter institutionelle retningslinjer på forud fastsatte tidspunkter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

PCL grafts var eksplanterede på 3 måneder og 12 måneder post-operatively og analyseret af histologiske standardteknikker for hæmatoxylin og eosin (H & E), Masson trichrome, Verhoeff-van Gieson (VVG), Von Kossa og immunfluorescens farvning for α-SMA, MYH, vWF og elastin. De histologiske billeder blev taget ved hjælp af en opretstående mikroskop, og immunfluorescens billeder blev taget ved hjælp af en fluorescence mikroskop.

Alle data blev udtrykt som betyder ± SD. En to-sidede parret Student's t-test blev anvendt til at sammenligne forskellene. En værdi af p < 0,05 blev anset for at være statistisk signifikant.

Roman electrospun PCL podninger med optimeret struktur, det vil sige tykkere fibre og større porer, blev med held fremstillet i denne undersøgelse. SEM billeder viste, at gennemsnit fiber diameteren var næsten 8 gange tykkere i de modificerede grafts (figur 1A) end i de konventionelle en (figur 1B) (5,59 ± 0,67 versus 0.69 ± 0,54 µm). Som et resultat, gennemsnit porestørrelse var markant forøget, fra ~ 4.66 µm i tyndere-fiber graft til ~ 40.88 µm i den tykkere-fiber, en. Tværsnit viste homogene fiber fordeling i væggen af rørformede graftene i både tykkere-fiber (fig. 1 d-F) og tyndere-fiber grupper (figur 1 g-jeg). Vægtykkelse var omkring 400-500 µm. De mekaniske egenskaber af podninger var karakteriseret ved trækstyrke test, og den typiske stress-strain kurver blev vist i figur 1 c. De mekaniske egenskaber af to grafts var åbenbart forskellige med hensyn til brudforlængelse. Den tilsvarende værdi af tykkere-fiber grafts var omkring 3 gange højere end de tyndere-fiber podninger, foreslår den forbedrede sejhed.

De forberedte vaskulære podninger (indre diameter på 2,0 mm) og længde på 1 cm (figur 2A) blev implanteret for at erstatte et segment af indfødte abdominale aorta i rotte (figur 2B). På forud fastsatte tidspunkter, blev passage af de implanterede grafts undersøgt af ultralyd. Resultaterne viste, at de fleste af podninger var patent (figur 2 c). Yderligere, hastigheden af blodgennemstrømningen var ens mellem graft og tilstødende indfødte blodkar på 12 måneder. Eksplanterede grafts bevaret gode morfologi uden aneurisme (figur 2D), og ingen stenose eller trombi kunne observeres om det luminale overflade (figur 2E).

Vævsregeneration og ECM sekretion efter 3 måneder var yderligere vurderet af histologi analyser. H & E farvning viste, at et lag af neo-væv blev dannet på lumen af graften (figur 3 g-H). Derudover vWF farvning vis at den luminale overflade var fuldt dækket af nydannede endotelet (figur 3A), der ligner den, de indfødte aorta (figur 3B). I mellemtiden var flere lag af MYH-positive celler arrangeret langs omkredsen retning, med angivelse af regenerering af vaskulære medier (figur 3 c-D). Ekstracellulær matrix syntese blev observeret af Masson og VVG farvning, henholdsvis. En betydelig mængde af kollagen og fibrøst elastin kunne iagttages inden for transplantat (figur 3I-J, K-L), som spiller en vigtig rolle i vaskulære regenerering og remodellering. Immunfluorescens farvning yderligere viste struktur af elastin blev tilpasset circumferentially i et mønster som i den oprindelige arterie (figur 3E-F).

Derudover folier væv, herunder endothelium og glatte muskulatur vedligeholdes integreret og relatere ikke efter 12 måneder efter implantation (figur 4A-C). Vigtigere er, var der ingen tegn på forkalkning indtræffer inden for graft væggen baseret på Von Kossa farvning (figur 4D).

Figure 1
Figur 1 : Struktur og mekaniske ejendom af PCL graften. SEM billeder af electrospun PCL måtter med tykkere fibre (A) og tyndere fibrene (B). Tværsnit af tykkere-fiber rørformede podninger (D-F) og tyndere-fiber grafts (G-jeg). Repræsentative stamme-stress-kurven er vist i (C). Disse tal er blevet ændret fra Zhao, et al. 16 Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 2
Figur 2 : Implantation af vaskulære grafts i en rotte abdominale aorta model. Electrospun PCL vaskulære graft 1 cm i længden (A) var kirurgisk interposed ind i den abdominale aorta i rotte (B). Ultralyd billede viste graften patent i vivo på 1 år (C). Stereomicroscopic billeder viser, at transplantatet var godt integreret med tilstødende indfødte aorta uden aneurisme (D), og den luminale overflade er ren og fri for blodprop (E). Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 3
Figur 3 : Vævsregeneration og deposition af ECM i de eksplanterede podninger på 3 måneder sammenlignet med indfødte aorta. Tværsnits billeder af folier grafts (A, Cog E) og indfødte arterie (B, Dog F) var immunostained til at registrere i endothelial celler, glatte muskelceller og elastin. H & E farvning viser vævsregeneration i de eksplanterede grafts (G) sammenlignet med indfødte aorta (H). Masson farvning afslørede at tilstedeværelsen af kollagen i det eksplanterede grafts, (jeg) og indfødte aorta (J). VVG farvning viste tilstedeværelsen af elastin i det eksplanterede grafts (K) og indfødte aorta (L). Disse tal er blevet ændret fra Zhao, et al. 16 Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 4
Figur 4 : Histologisk analyse af de eksplanterede podninger på 12 måneder. (A) H & E farvning viste vævsregeneration i de eksplanterede podninger. B endotelet var immunostained af vWF antistof. (C) glatte muskulatur var immunostained af α-SMA antistof. (D) forkalkning blev evalueret af Von Kossa farvning. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Celle infiltration er kritisk for regenerering og remodellering af vaskulære graft i vivo16. Begrænset celle infiltration er ofte relateret til de relativt små porer af graften, der forhindrer migration af celler ind i graft væggen. For at løse denne vanskelighed, udviklede vi en modificeret metode for at forberede electrospun PCL vaskulære podninger med store pore struktur. Detaljeret øget porestørrelse med forhøjelsen af fiber tykkelse, der let kunne styres ved forarbejdning parametre. Resultaterne viste at værtsceller kunne nemt infiltrere ind i væggen af denne kombineret makroporøs graft efter i vivo implantation og celleforandringer forblev på et relativt højt niveau uden indlysende celle regression på 12 måneder efter operationen.

Native arterie består hovedsageligt af tre lag, det vil sige, endotel, tunica media og adventitia. Endotel, spiller som anti-trombogen grænseflade, en afgørende rolle i at opretholde den langvarige passage af blodkar. I vores undersøgelse, blev fuld endothelialization på podekvisten observeret på 3 måneder. Derudover er tunica media bestående af flere lag af glatte muskelceller meget vigtige i reguleringen blodkar funktion og giver passende mekaniske egenskaber af arterie. Den nuværende undersøgelse viste, at electrospun PCL podninger med tyk-fiber og store pore markant forbedret regenerering af funktionelle tunica media. Desuden er struktur af folier glatte muskulatur ligner den indfødte tunica media. Immunfluorescens farvning viste flere lag af MYH+ celler fordelt inden for elastin nettet, afspejler de kontraktile Fænotypen af glatte muskelceller circumferentially. Mere vigtigere, regenereret væv (både endothelium og glatte muskulatur) holdt intakt og der var ingen negative remodeling selv efter 12 måneder på grund af ubalance mellem ECM syntese og nedbrydning.

Forkalkning er stadig et stort problem forbundet med hjerte-kar-implantater, især i kar graften. Vaskulære glatte muskelceller (VSMCs) mister deres oprindelige fænotype og opleve trans-differentiering i osteochondrogenic retning, fører til ektopisk mineralisering i løbet af processen af vaskulære forkalkning. Vores undersøgelse viste, at der var ingen calcium deposition indtræffer inden for graft væggen selv efter 12 måneder efter implantation. De vigtigste årsager til hæmmet forkalkning i makroporøs vaskulære graften omfatter: (1) strukturen i makroporøs graften fremmer stofskiftet, såsom ion udveksling mellem celler og blod; (2) de fysiske signaler af transplantat struktur kunne regulere eller hæmme differentiering af VSMC ind i osteoblastdannelse1, (3) god celle infiltration i de store porer fremmer udskillelsen af ECM og hæmmer dets nedbrydningsprodukter, der vil udløse forkalkning17, og (4) normal eller funktionelle VSMCs har et potentiale til at undgå calcium deposition18.

I Resumé giver den langsigtede evaluering af makroporøs electrospun PCL vaskulære grafts i rotte abdominale aorta model vigtig indsigt i potentielle udfordringer af nedbrydeligt vaskulære grafts, som vil lede den følgende forskning.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har ingen modstridende økonomiske interesser.

Acknowledgments

Dette arbejde blev økonomisk støttet af NSFC projekter (81522023, 81530059, 91639113, 81772000, 81371699 og 81401534).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Poly(ε-caprolactone) (PCL) pellets (Mn=80,000) Sigma 704067
Methanol Tianjin Chemical Reagent Company 1060
Alcohol Tianjin Chemical Reagent Company 1083
Chloroform Tianjin Chemical Reagent Company A1007
Sucrose Tianjin Fengchuan Company 2296
Triton X-100 Alfa Aesar A16046
Sprague Dawley rats Laboratory Animal Center of the Academy of Military Medical Sciences
Normal saline Hebei Tiancheng Pharmaceutical company
Chloral hydrate Tianjin Ruijinte chemical company 2223
Heparin sodium Injection Tianjin Biochem Pharmaceutical company
Gentamycin Sulfate Injection Jiangsu Lianshui Pharmaceutical company
Mouse anti-α-SMA primary antibody Abcam ab7817
Mouse anti-smooth MYH primary antibody Abcam ab683
Rabbit polyclonal anti-rat elastin antibody Abcam ab23748
Rabbit anti-von Willebrand factor primary antibody Abcam ab6994
Goat anti-mouse IgG (Alexa Fluor 488) Invitrogen ab150117
Goat anti-rabbit IgG (Alexa Fluor 488) Invitrogen ab150077
5% normal goat serum Zhongshan Golden bridge ZLI9022
Hematoxylin and eosin (H&E) Beijing leagene biotech DH0006
Masson's trichrome Beijing leagene biotech DC0032
Verhoeff-van Gieson (VVG) Beijing leagene biotech DC0059
Von Kossa Beijing leagene biotech DS0003
Surgical sutures needles with thread,3-0 silk Shanghai Jinhuan medical supplies company G3002b
Surgical sutures needles with thread,9-0 silk Shanghai Jinhuan medical supplies company H901

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Coombs, K. E., Leonard, A. T., Rush, M. N., Santistevan, D. A., Hedberg-Dirk, E. L. Isolated effect of material stiffness on valvular interstitial cell differentiation. J Biomed Mater Res A. 105, (1), 51-61 (2017).
  2. Zhang, L., et al. A sandwich tubular scaffold derived from chitosan for blood vessel tissue engineering. J Biomed Mater Res A. 77, (2), 277-284 (2006).
  3. Thottappillil, N., Nair, P. D. Scaffolds in vascular regeneration: current status. Vasc Health Risk Manag. 11, 79-91 (2015).
  4. Pektok, E., et al. Degradation and healing characteristics of small-diameter poly (e-caprolactone) vascular grafts in the rat systemic arterial circulation. Circulation. 118, (24), 2563-2570 (2008).
  5. Innocente, F., et al. Paclitaxel-eluting biodegradable synthetic vascular prostheses: a step towards reduction of neointima formation? Circulation. 120, (11 Suppl), S37-S45 (2009).
  6. de Valence, S., et al. Advantages of bilayered vascular grafts for surgical applicability and tissue regeneration. Acta Biomater. 8, (11), 3914-3920 (2012).
  7. Assmann, A., et al. Acceleration of autologous in vivo recellularization of decellularized aortic conduits by fibronectin surface coating. Biomaterials. 34, (25), 6015-6026 (2013).
  8. Hasan, A., et al. Electrospun scaffolds for tissue engineering of vascular grafts. Acta Biomater. 10, (1), 11-25 (2014).
  9. Baker, B. M., et al. The potential to improve cell infiltration in composite fiber-aligned electrospun scaffolds by the selective removal of sacrificial fibers. Biomaterials. 29, (15), 2348-2358 (2008).
  10. Wang, K., et al. Creation of macropores in electrospun silk fibroin scaffolds using sacrificial PEO-microparticles to enhance cellular infiltration. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 101, (12), 3474-3481 (2013).
  11. Lee, B. L. P., et al. Femtosecond laser ablation enhances cell infiltration into three-dimensional electrospun scaffolds. Acta Biomaterialia. 8, (7), 2648-2658 (2012).
  12. Rnjak-Kovacina, J., Weiss, A. S. Increasing the pore size of electrospun scaffolds. Tissue Eng Part B Rev. 17, (5), 365-372 (2011).
  13. Zhong, S., Zhang, Y., Lim, C. T. Fabrication of large pores in electrospun nanofibrous scaffolds for cellular infiltration: a review. Tissue Eng Part B Rev. 18, (2), 77-87 (2012).
  14. Pham, Q. P., Sharma, U., Mikos, A. G. Electrospun poly(epsilon-caprolactone) microfiber and multilayer nanofiber/microfiber scaffolds: characterization of scaffolds and measurement of cellular infiltration. Biomacromolecules. 7, (10), 2796-2805 (2006).
  15. Rnjak-Kovacina, J., et al. Tailoring the porosity and pore size of electrospun synthetic human elastin scaffolds for dermal tissue engineering. Biomaterials. 32, (28), 6729-6736 (2011).
  16. Wang, Z., et al. The effect of thick fibers and large pores of electrospun poly(epsilon-caprolactone) vascular grafts on macrophage polarization and arterial regeneration. Biomaterials. 35, (22), 5700-5710 (2014).
  17. Hutcheson, J. D., et al. Genesis and growth of extracellular-vesicle-derived microcalcification in atherosclerotic plaques. Nat Mater. 15, (3), 335-343 (2016).
  18. Tara, S., et al. Well-organized neointima of large-pore poly(L-lactic acid) vascular graft coated with poly(L-lactic-co-epsilon-caprolactone) prevents calcific deposition compared to small-pore electrospun poly(L-lactic acid) graft in a mouse aortic implantation model. Atherosclerosis. 237, (2), 684-691 (2014).
Implantation af Electrospun vaskulære Grafts med optimeret struktur i en rotte Model
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Qin, K., Wu, Y., Pan, Y., Wang, K., Kong, D., Zhao, Q. Implantation of Electrospun Vascular Grafts with Optimized Structure in a Rat Model. J. Vis. Exp. (136), e57340, doi:10.3791/57340 (2018).More

Qin, K., Wu, Y., Pan, Y., Wang, K., Kong, D., Zhao, Q. Implantation of Electrospun Vascular Grafts with Optimized Structure in a Rat Model. J. Vis. Exp. (136), e57340, doi:10.3791/57340 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter