Summary
要密切模仿烧伤的模式, 需要临床观察和动物模型研究之间的相互作用。本研究建立了严重烧伤猪模型, 以评估生理和病理生理环境下的实验敷料。
Abstract
伤口愈合是一个动态的修复过程, 是人类生活中最复杂的生物过程。在对烧伤的反应, 生物途径的改变损害炎症反应, 导致延迟伤口愈合。糖尿病患者经常出现伤口愈合障碍, 导致截肢等不利结果。因此, 敷料具有有益的作用, 促进烧伤伤口修复是必要的。然而, 由于缺乏适当的动物模型, 烧伤伤口治疗的研究有限。我们以前的研究证明了在大鼠和猪模型中使用微创手术技术的伤口愈合性能。这项研究的目的是证明严重烧伤的猪模型, 消除伤口收缩, 更接近人类的过程再上皮化和新的组织形成。该协议提供了一个详细的程序, 以创建一致的烧伤伤口, 并检查伤口愈合性能的治疗实验敷料在猪模型。在背面对称地造成了6处烧伤伤口, 其中覆盖着一个由四层组成的临床敷料: 实验材料的内接触层, 防水薄膜的内部中间层, 纱布的外层中间层,和一层外层的粘合剂石膏。实验结束后, 检查伤口闭合、伤口面积、温哥华疤痕量表评分。从每只动物祭祀后切除的皮肤样本进行组织学准备, 并使用血红素和 eosin 染色染色。还检查了每个敷料在伤口愈合情况下的抗菌活性。临床敷料在猪模型中对伤口的应用模拟了人类伤口愈合的生物学过程, 即上皮化、细胞增殖和血管生成过程。因此, 这种猪模型提供了一个易于学习, 成本效益高, 和强大的方法来评估临床敷料在严重烧伤的效果。
Introduction
烧伤引发炎症过程, 诱发复杂的病理影响, 在事故发生后立即影响众多身体功能, 对患者生活质量产生负面影响。创伤愈合障碍导致糖尿病 1,2例患者的显著发病率和死亡率。大多数烧伤患者在烧伤伤口清创过程中都会出现疼痛, 这被称为一个痛苦的过程, 尽管使用了强大的阿片类镇痛药 3.
与其他哺乳动物不同的是, 猪在上皮化、细胞增殖和血管生成过程中与人类有几个解剖和生理特征。这使得猪成为某些程序和研究的潜在更好的模型, 它们经常被用于随后的研究中, 这些研究在小鼠身上证明了有希望的结果。这些特征导致在临床前检测中越来越多地使用猪作为主要物种。最近, 观察到心血管、泌尿系统、综合系统和消化系统方面的生物医学研究迅速增加。这项研究的目的是证明一个猪模型的严重烧伤, 消除伤口收缩, 并提供了一个更接近的近似人类伤口愈合过程和新组织的形成。在背侧对称地造成了6处烧伤的伤口, 猪脊椎两侧各有3处烧伤。接下来, 在严重烧伤的猪模型中进行了实验敷料检查, 该模型可用于复制人类伤口愈合 (图 1)。伤口上覆盖着一个临床敷料, 它由四层组成: 实验材料的内接触层、防水薄膜的内层、纱布的外层和胶粘剂石膏的外层。防水薄膜保持伤口环境湿润, 同时防止细菌感染, 并允许气体渗透敷料。将纱布的外层涂在防水薄膜上, 并由外层胶粘剂石膏固定。实验结束后, 对创面闭合、伤口面积、温哥华疤痕量表 (vss) 评分进行了检查。用血红素和 eosin (he) 染色对每种动物的皮肤进行组织学准备和染色。该模型还检查了每个敷料在伤口愈合情况下的抗菌活性。我们以前的研究已经证明了伤口愈合性能的大鼠和猪模型使用微创手术技术 7。由于每只猪的背侧有6处烧伤伤口, 因此对每种实验敷料进行了测试和评估, 以最大限度地减少与猪背侧不同部位伤口愈合过程有关的偏差。因此, 本研究建立的严重烧伤猪模型为临床敷料的评价提供了新的途径, 促进了烧伤损伤治疗新方法的发展。本研究为揭示烧伤创面愈合的病理生理学提供了重要的工具。
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Protocol
涉及动物主体的程序已获得台湾国防医疗中心动物护理委员会的批准。这项研究是在国防医学中心实验动物中心进行的。使用该协议成功地检测了体重在20至25公斤之间的猪。
1. 动物适应人类处理
- 到达该设施后, 单独安置动物, 但让它们相互互动。
- 为动物提供食物和水。
- 通过每天至少处理一次动物, 为期一周, 将猪传播到人类处理和从动物设施到实验实验室的运输。
- 手术前将动物快速禁食至少 12小时, 以防止恶心、呕吐和吸入胃液。
2. 镇静剂
- 在烧伤创面产生之前,用zoletil 50 (25 mg/kg) 静脉注射镇静动物。
3. 通风和通风
- 将动物放在桌子上, 或在胸骨位置上放在手推车上。
- 用口腔摊铺机张开动物的嘴。
- 在不充分放松的下巴或吞咽反射的存在, 这阻碍了插管的情况下, 用异氟醚掩盖猪, 以诱导镇静。
- 在手术过程中通过生理信号监测监测血压、心率和体温, 以防止潜在的并发症。
4. 麻醉
- 产生和维持麻醉;最好通过肌肉注射三打胺和唑拉西帕 (25 mg/kg + 25 mg kg) 对动物进行麻醉。
- 观察动物在肌肉松弛时插管, 其特点是颌骨张力丧失, 眼睑反折。
- 在 0.5-2.5% (v/v) 异氟醚的蒸发器设置下, 使所有猪保持麻醉状态, 直到手术结束。
- 在手术前, 用后腿脚趾捏一下方法, 检查麻醉的深度。必要时, 添加额外的麻醉或等待几分钟。在整个手术过程中定期检查疼痛反应。
5. 手术部位的消毒
- 从脊柱一直到两侧的腋窝, 在大约25厘米宽的区域上擦拭和清洁动物的皮肤。
- 用 povidone-dicob 磨砂 (75 mg/ml) 擦洗保湿皮肤约5分钟。
- 使用湿式无菌纱布从皮肤中取出聚维酮碘肥皂。
- 用聚维酮碘化妆水 (100 mg/ml) 对皮肤进行消毒。
- 用无菌手术窗帘覆盖动物, 以减少细菌转移和随后对手术部位的污染。
6. 烧伤创面的创作
- 使用手术标记笔, 在猪的背面对称地标记六个烧伤伤口的中心。确保每个烧伤伤口之间的距离至少大于伤口的半径 (图 1a)。
- 在修改后的焊铁中加入50毫升的甘油, 并在其中插入电子温度计以监测温度。热铁拥有大约 9 cm2的平的区域 (图 1b)。
- 用热板将熨斗加热至 137–139°c (图 1 c)。
- 将熨斗放置在标记区域上, 30秒内不施加任何力, 从而造成6个均匀烧伤伤口 (图 1c)。
- 用0.9% 盐水清洗烧伤创面 (图 1d)。
- 测量伤口尺寸, 并通过显微成像记录伤口 (图 1e)。
7. 敷料的准备
- 通过直接接触, 用四层临床敷料的内接触层覆盖每个伤口。对于此图层, 请使用包含 caps 的敷料或替代材料 (图 1f)。
- 在临床敷料上涂上防水膜, 作为防止细菌渗透的屏障 (图 1f)。
- 用纱布 (0.5 厘米厚) 覆盖每个伤口, 并用胶带固定, 作为敷料的中间层 (图 1g)。
- 用外层的粘合剂石膏固定纱布。将此图层扩展到躯干, 以避免敷料的位移 (图 1h-1j)。
8. 烧伤后护理和测量
- 从麻醉恢复前开始, 每8-12 向猪注射丁丙诺非 (0.1 mg/kg, im) 进行疼痛管理, 为期一周, 以减少潜在疼痛。
- 允许猪免费获得饲料和水。
- 在最初的10天内每2天更换一次临床敷料, 然后每周两次进行为期6周的研究。
- 在重新使用临床敷料之前, 请清洁和测量伤口。换装时使用麻醉剂。
- 通过显微摄影记录伤口, 以便在前10天每2天比较一次伤口愈合率, 然后在6周的研究中每周进行两次。
- 根据前面描述的方法, 将伤口重新上皮化或收缩计算为原始伤口大小的百分比。对伤口闭合的分析是以双盲的方式进行的。
- 使用 vss 测量烧伤疤痕, vss 由四个变量组成: 烧伤后的血管、高度 (厚度)、柔韧性和色素沉着。每个变量都有四到六个可能的分数。总分从0到14不等, 分数为 0, 反映了正常的皮肤。
9. 烧伤后组织的细菌生长实验
- 擦拭伤口, 以便在烧伤后的第0、7、21和42天进行抗菌测试。
- 将棉签放入0.9% 无菌盐水的100毫升中, 轻轻涡旋, 实现均匀悬浮。
- 在选择性和非选择性介质中, 连续稀释 (10-1–10-5), 每次稀释的均匀度和板 100μl.
- 在37°c 有氧条件下, 将所有稀释剂用于24至72小时。
- 从所有稀释到血琼脂板上, 再加上5% 的绵羊血液, 以分离好氧革兰氏阳性生物。
- 通过在琼脂板表面均匀地铺开或浇注样品一夜来孵化样品, 以确定菌落形成单元 (cfu) 的数量。
- 隔夜孵育后阅读盘子。将羊的血琼脂板倒置, 并使用标记和小尺子将菜底分成四个相等的象限。
- 将板材放置在解剖显微镜的舞台上, 并对每个板上的菌落进行计数。根据定义, 殖民地必须至少有 300个 cfu 才能被枚举。
- 数一数三个复制物中的细菌菌落。计算三个副本的平均值。通过将平均值乘以最终稀释系数来确定每个板的 cfu。
10. 安乐死和组织固定
- 在体内注射过量的戊巴比妥钠安乐死溶液 (80–120 mg/kg)。
- 对烧伤伤口组织进行整体切除, 包括底层肌肉组织和周围未受伤组织。
- 用10% 中性缓冲福尔拉林修复组织。
- 将10毫升甲醛 (37%) 混合在90毫升的磷酸盐缓冲溶液 (pbs) 中, 存放在4°c。
- 将组织转移到固定物和旋流容器, 以确保所有组织完全沉浸在固定。固定剂的体积必须是组织体积的30倍。
- 在4°c 下隔夜修复组织。
- 用乙醇使组织脱水, 并嵌入石蜡块中。在振动筛上4°c 时执行以下步骤。
- 用 pbs 清洗两次30分钟。
- 用70% 的乙醇脱水组织 8小时, 80% 的乙醇过夜, 95% 乙醇 8小时, 然后在100% 乙醇过夜。
- 在100% 乙醇中再产组织8小时。
- 在二甲苯的三次变化中对组织进行培养30分钟。
- 将二甲苯更换为新鲜熔化 (52°c) 的蜡, 并在52°c 的温度下在烤箱中孵育1小时。
- 将蜡更换为新鲜蜡, 在52°c 的烤箱中孵育 3小时, 然后再次更换, 在52°c 下孵育过夜。
- 将组织中每隔两个变化的蜡, 每次 1小时, 然后嵌入组织, 并存储在4°c。
- 用 he 切割和染色石蜡嵌入的切片, 并通过光显微镜以100倍的放大倍率进行可视化。
- 使用旋转微孔创建石蜡部分。
- 去蜡部分与三个变化的二甲苯, 每个3分钟。
- 用100%、95%、80% 和70% 乙醇对组织进行补充, 每次 3分钟, 然后浸泡在蒸馏水中。
- 用血红素染色 10分钟, 然后在自来水中冲洗。
- 用0.1% 盐酸乙醇鉴别 5分钟, 然后在自来水中冲洗。
- 用0.5% 的 eosin 染色1分钟。
- 用70%、80%、95% 和100% 乙醇使组织脱水2分钟。
- 用二甲苯清除染色, 并在烟罩中干燥。
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Representative Results
热铁燃烧时间为 30秒, 导致伤口是圆形的, 边缘清晰, 并与红斑边缘均匀苍白 (图 1d)。在每只动物体内, 背上都有6处烧伤伤口。烧伤伤口的排列情况如图 1k所示。烧伤伤口完全覆盖了含有 caps 的敷料, 用于评估烧伤后0、7、21和42天的疤痕形成深度, 并通过总检查确定。烧伤后第42天根据总检查结果, 烧伤伤口重新上皮化。对这些动物的伤口大小进行评估, 以确定伤口愈合率 (图 2a)。烧伤后的第0、7、21和42天,伤口面积分别为9、10、8和3厘米2。烧伤后第42天伤口面积明显减少, 与第0天相比有显著减少。愈合率被定义为最大的平均伤口边缘距离与伤口中心除以完成伤口闭合的时间。在烧伤后第42天, 用含有 caps 的敷料治疗的伤口显示为73.43±6.33% 的伤口闭合 (图 2b)。
图 3显示了烧伤后0、7、21和42的瘢痕血管、柔韧性、色素沉着和高度方面的 vss 得分。烧伤后第21天的 vss 得分达到7.4±0.5 的峰值, 烧伤后第42天的 vss 评分下降到3.33±0.58。
所有的动物都是在烧伤后的第42天献祭的。对样本进行组织学检查, 对每种动物进行组织学准备, 并对其进行染色, 证实已达到全厚度烧伤, 伤口出现完全愈合 (图 4)。在表皮、真皮和伤口真皮成分中可以观察到烧伤引起的坏死, 而不会对底层肌肉产生显著影响 (图 4)。实验敷料下的真皮厚度为5.4 毫米 (图 4a)。此外, 在 h & amp; e 染色中观察到真皮的倾斜和淋巴细胞浸润, 如图4b 中的红色箭头所示。
用 cfu 法测定了实验敷料在烧伤后0、7、21和42的抗菌性能。结果显示, 烧伤后0天至第21天之间观察到的细菌细胞数量略有增加, 烧伤后第42天则显著增加 (图 5)。结果表明, 本研究建立的严重烧伤猪模型可用于监测实验敷料的临床性能, 包括抗菌性能。
图1。烧伤创面的创建和应用的一个包含 caps 的临床敷料.在脱毛和准备皮肤与碘和酒精, (a)手术标记笔被用来概述六个圆圈的背, 两侧的中线。(b)改性后的铁充满甘油和电子温度计插入甘油以显示温度。(c)铁用热板加热至 137-139°c, 在皮肤的痕迹上造成六个均匀烧伤伤口。要造成烧伤伤口, 将没有外力的热铁放在猪的背部皮肤上 (30秒), 形成两个全厚的伤口。(d)所有伤口愈合后, 用0.9% 的盐水清洗伤口。(e)在拍照的伤口旁边放置了秤。(f)第一层覆盖测试敷料, 第二层覆盖防水膜。(g)第三层覆盖约0.5 厘米厚的纱布, 并用纸带固定。(h-j)用外层的粘合剂石膏固定纱布。这一层延伸到躯干, 以避免敷料的位移。(k)烧伤创面分布示意图。请点击这里查看此图的较大版本.
图2。在猪模型中伤口大小的变化。(a)伤口闭合率是按第0天原伤口的百分比确定的。烧伤后42天伤口几乎完全收缩, 烧伤后动物模型观察到(b)伤口区域的变化。在烧伤后的42天表现出最大的下降, 显示90±4% 的伤口面积闭合。请点击这里查看此图的较大版本.
图 3.在猪模型中使用双盲实验设计的温哥华疤痕量表 (vss) 的平均总分。疤痕评估包括色素沉着、血管、柔韧性和瘢痕高度。较低的分数表示在接近正常皮肤的情况下的疤痕 (p = 0.0005)。请点击这里查看此图的较大版本.
图4。烧伤后第42天的血红素和 eosin 染色。 (a, b)黑色倒置三角形表示修复的烧伤组织。全厚创面形态光滑连续 , 状层类似于肥厚疤痕的特征。注意伤口表面有新表皮的存在。(b)红色箭头表示真皮连接组织浸润的炎症细胞在烧伤创面以上的活物真皮。原始放大倍率, x10。请点击这里查看此图的较大版本.
图 5.显示不同时间点伤口细菌计数的条形图。烧伤后伤口动物模型的抗菌活性为0天、7天、21天和42天。在三个独立的实验中, 用菌落形成单位 (cfu) 法评价了抗菌活性。请点击这里查看此图的较大版本.
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Discussion
本研究建立了猪严重烧伤模型, 并采用含 caps 敷料对该模型进行了研究。我们的研究结果表明, 该猪模型可用于监测实验敷料的临床性能, 包括抗菌性能。采用 vss、h & amp; e 染色和抗菌试验, 对创面愈合率、创面闭合性和抗菌活性进行了分析。动物烧伤模型的应用已被开发成为一个有价值的工具, 以审查烧伤的病理生理学。使用大鼠作为实验对象有一定的生物学益处, 包括大量的鼠特异性试剂和获得转基因大鼠的实际方面, 以发现活跃于恢复过程中的分子信号通路过程。然而, 在动物烧伤模型中使用老鼠的主要缺点是它未能完全接近人类伤口愈合过程。再上皮化是在人类8 中观察到的主要愈合方法, 而大鼠的伤口愈合在很大程度上取决于伤口快速收缩9。此外, 大鼠不容易出现肥厚或瘢痕的形成, 这证实了它们的伤口恢复过程与人类不同。另一方面, 猪最近也成为研究人员关注的对象, 因为它们的皮肤结构与人类皮肤相似。此外, 猪和人类的伤口愈合过程发生在生理相似的阶段, 如炎症、增殖、再上皮化和重塑。一般情况下, 猪烧伤愈合 21天, 与重新上皮发生在7至14天的伤口后施加 10,11, 这符合在人类观察的时间表.与老鼠相比, 猪的发病率也更高, 因为它们的体型会使它们对伤口感染有更强的抵抗力。老鼠通常是第一个用于评估不同治疗条件下烧伤伤口状况的模型。此外, 与其他哺乳动物相比, 猪在上皮化、细胞增殖和血管生成过程中与人类有一些解剖和生理特征。这使得猪有可能成为一个更好的模型, 它们经常被用于随后的研究中, 这些研究在小鼠 12、13、14、15中证明了有希望的结果。此外, 真皮胶原蛋白和弹性含量的分布、皮肤血液供应、伤口愈合中的事件序列和重新上皮化使猪成为伤口愈合和重建手术治疗的标准模型15 ,16,17,18。在每只动物体内, 猪的上、中、下背部都有6处烧伤伤口, 并对称地分布在脊椎上。烧伤伤口可以在类似的地点造成, 但在不同的猪身上。因此, 每个实验敷料可以在不同的位置进行测试和评估, 以最大限度地减少与猪背上不同部位的伤口愈合过程有关的偏差。此外, 本研究中建立的这种严重烧伤猪模型还受益于确保每只猪作为自己的控制, 其中一个伤口接受新的治疗, 另一个伤口作为车辆控制, 导致显著减少动物的数量。
烧伤的处理是创面愈合的主要并发症之一。人类的愈合过程由四个生物过程组成: 止血、炎症、增殖和成熟。一旦愈合过程受到干扰或阻碍, 它促进成纤维细胞增殖, 导致增生性疤痕, 这是可见的, 往往是上升到周围的皮肤16以上。为了确保重现性和准确的定量, 受伤后立即需要使用粘合剂石膏进行足够的粘合, 以最大限度地减少延迟时间。皮肤刺激是一种常见的反应, 从粘合剂石膏, 导致皮疹周围的临床敷料。因此, 建议在使用现有的粘合剂石膏时谨慎行事, 以防止瘙痒。遵循无菌技术和彻底消毒所有设备 (如卡钳), 以避免交叉污染的天鹅是必不可少的。
烧伤创面愈合是一个复杂的过程。已经确定了一定数量的因素对伤口愈合过程有负面影响, 如疼痛、瘙痒和细菌污染。疼痛对动物的饮食有负面影响。如果没有足够的营养吸收, 延迟伤口愈合是不可避免的。因此, 每头猪每天连续7天注射丁丙诺非 (0.1 mg/kg, im), 以减轻疼痛。在烧伤创面产生一周后对食物摄入量进行监测。第7天观察到食物摄入量减少后, 丁丙诺非 (0.1 mg/kg, im) 的管理一直持续到第14天。细菌感染是伤口愈合的潜在风险, 可能会引发炎症, 进一步抑制愈合过程。因此, 临床敷料覆盖防水薄膜, 以防止和尽量减少潜在的污染。瘙痒是伤口愈合过程中不舒服的一部分。猪可能会在地上划伤自己的背部, 以减少瘙痒, 这可能不利于伤口愈合过程。一个好的敷料具有加速烧伤伤口愈合与可接受的疤痕, 防止感染和炎症, 减轻疼痛, 并允许容易和早期动员19,20.当需要进一步局部应用和/或测量伤口面积 21,22 时, 可以去除敷料。虽然将四层临床敷料应用于猪是一个比临床更复杂和耗时的过程, 但猪模型允许比小鼠模型更接近人类的生物反应。使用猪模型的许多潜在优势使其成为比其他物种更好的临床前检测平台。
使用含有 caps 的敷料监测烧伤后第42天伤口闭合量的临床疗效。此外, vss 评分, 一个经过验证的主观量表评分, 也被用来评估猪的伤口在本研究17。在实验敷料治疗过程中监测增生性瘢痕的形成是非常重要的, 特别是在临床试验18 中.caps 在烧伤伤口治疗中的应用, 导致烧伤后第42天的 vss 得分与第21天的评分相比发生了重大变化。较低的分数表示受伤区域试图恢复到与正常肤色色素沉着、血管、柔韧性和高度接近的状态。此外, h & amp; e 染色结果表明, 在 caps 处理区, 角膜层完整。结果表明, 严重烧伤的猪模型可以可靠地用于评估伤口面积、伤口闭合、vss 评分和愈合进展。
该协议代表了许多详细的步骤, 以证明使用实验敷料猪模型的严重烧伤, 并可应用于任何类型的临床敷料的评估。在伤口产生过程中, 充满50毫升甘油的改性焊铁能够将温度保持在137以内, 以139°C。然而, 这种方法有一些局限性, 如无法绝对模拟实际烧伤温度和狭窄的烧伤产生的面积, 由于焊接铁的范围。然而, 该方法的主要优点克服了这些限制。与传统方法相比, 这种改性的铁可以准确、轻松地制造一致的伤口。此外, 该模型提供了一个敏感的测量生理和病理生理反应的热烧伤治疗下的各种临床敷料。该模型除了经济优势外, 还具有经济优势, 其优点是手术经验相对较少的人容易处理。临床敷料在猪模型中对创面的应用模拟了人类伤口愈合的生物学过程。因此, 本研究建立了严重烧伤猪模型, 并采用临床敷料进行了试验, 促进了烧伤损伤治疗新方法的发展。本研究为揭示烧伤创面愈合的病理生理学提供了重要的工具。总之, 这种猪模型提供了一个易于学习, 成本效益高, 和强大的方法来评估临床敷料在严重烧伤的效果。
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Disclosures
作者没有什么可透露的。
Acknowledgments
这项研究得到了三科总医院的赠款支持;台湾国防医疗中心 (tgh-c107-042);台湾科技部 (最不发达国家 106-2314-b-016-014);和国防医疗中心 (ma6-106-055;ma6-106-010;mab-107-064)。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sedation: | |||
| Ketamine | Merial | 2528 ESP | 10 mL vial |
| Azaperone | China chemical & pharmaceutical | 47W406 | 100 mL vial |
| Atropine | Oriental chemical works | IN120802 | 1 mL vial |
| Anesthetic: | |||
| Tiletamine+Zolazepam | Virbac | BC91 | 5 mL vial |
| Isoflurane | Baxter | N002A225 | 100 mL vial |
| Surgery: | |||
| Hair clippers | Moser | - | - |
| Povidone iodine scrub solution | Ever star | HA161202 | 4 L barrel |
| Modified iron | - | - | - |
| 0.9% saline solution | CHI SHENG | KC130 | 500 mL vial |
| Gauze | China Surgical Dressings Center | MO15900080 | 10 x10 cm |
| CAPS | CoreLeader Biotech Co., Ltd, Taipei, Taiwan | - | - |
| Paper tape | 3M | NDC-8333-1530-01 | 2.5 cm x 9.1m |
| Waterproof film | 3M | NDC-8333-1600-40 | 10 cm x 10 m |
| Adhesive plaster | Young chemical | BH1426015 | 10 cm x 10 m |
| Dissection: | |||
| Pair of standard sharp/blunt straight scissors (14 cm) | Shinetec instruments | ST-S114 | - |
| Halstead-Mosquito (12.5 cm) | Shinetec instruments | ST-H012 | - |
| Handle(# 4) | Shinetec instruments | ST-H004 | - |
| Surgical Blade(#21) | Shinetec instruments | ST-B021 | - |
| Post-Fixation & Storage: | |||
| 50 ml Plastic centrifuge tube | Falcon | 352070 | - |
| 10% neutral buffered formalin | Leica | 3800604EG | - |
| Bacterial Growth Experiments | |||
| Blood agar plate (BAP) (TSA with 5% sheep blood) | CMP | - | 90 mm Mono |
References
- Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair Regeneration. 17, 763-771 (2009).
- Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regeneration. 17, 1-18 (2009).
- Verhaegen, P. D., et al. Differences in collagen architecture between keloid, hypertrophic scar, normotrophic scar, and normal skin: an objective histopathological analysis. Wound Repair Regeneration. 17, 649-656 (2009).
- Experimental Surgery and Physiology: Induced Animal Models of Human Disease. Swindle, M. M., Adams, R. J. , Williams and Wilkins. Baltimore. (1988).
- Swindle, M. M., Smith, A. C. Swine as Models in Biomedical Research. , Iowa State University Press. Ames. (1992).
- Advances in Swine in Biomedical Research. Vols 1-2. Tumbleson, M. E., Schook, L. B. , Plenum Press. New York. (1996).
- Wang, C. H., et al. Enhanced wound-healing performance of a phyto-polysaccharide-enriched dressing - a preclinical small and large animal study. International Wound Journal. 14, 1359-1369 (2017).
- Rowan, M. P., Cancio, L. C., Elster, E. A., Burmeister, D. M., Rose, L. F., Natesan, S., Chan, R. K., Christy, R. J., Chung, K. K. Burn wound healing and treatment: review and advancements. Journal of Critical Care. 19, 243 (2015).
- Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 969618, 8 (2011).
- Gaines, C., Poranki, D., Du, W., Clark, R. A., Van Dyke, M. Development of a porcine deep partial thickness burn model. Burns. 39, 311-319 (2013).
- Gnyawali, S. C., Barki, K. G., Mathew-Steiner, S. S., Dixith, S., Vanzant, D., Kim, J., Dickerson, J. L., Datta, S., Powell, H., Roy, S., Bergdall, V., Sen, C. K. High-resolution harmonics ultrasound imaging for non-invasive characterization of wound healing in a pre-clinical swine model. PLoS One. 10 (3), e0122327 (2015).
- Eaglstein, W. H., Mertz, P. M. New methods for assessing epidermal wound healing: the effects of triamcinolone acetonide and polyethelene film occlusion. Journal of Investigative Dermatology. 71, 332-384 (1978).
- Swindle, M. M., Smith, A. C. Comparative anatomy and physiology of the pig. Scandinavian Journal of Laboratory Animal Sciences. 25, 1-10 (1998).
- Swindle, M. M. Swine in the Laboratory: Surgery, Anesthesia, Imaging and Experimental Techniques. , 2nd ed, CRC Press. Boca Raton. (2007).
- Mertz, P. M., et al. IL-1 as a potent inducer of wound re-epithelization. Progress in Clinical and Biological Research. 365, 473-480 (1991).
- Eming, S. A., Martin, P., Tomic-Canic, M. Wound repair and regeneration: mechanisms, signaling, and translation. Science Translation Medicine. 6, 265-266 (2014).
- Aryza, M. J., Baryza, G. A. The Vancouver Scar Scale: an administration tool and its interrater reliability. The Journal of Burn & Rehabilitation. 16, 535-538 (1995).
- Bystrom, A., Claesson, R., Sundqvist, G. The antibacterial effect of camphorated paramonochlorophenol, camphorated phenol and calcium hydroxide in the treatment of infected root canals. Endodontics & Dental Traumatology. 1, 170-175 (1985).
- Reig, A., Tejerina, C., Codina, J., Hidalgo, J., Mirabet, V. Application of a new cicatrization dressing in treating second-degree burns and donor sites. Annals of Burn and Fire Disasters. 4, 174 (1991).
- Hindy, A. Comparative study between sodium carboxymethyl-cellulose silver, moist exposed burn ointment, and saline-soaked dressing for treatment of facial burns. Annals of Burn and Fire Disasters. 22, 131-137 (2009).
- Galiano, R. D., et al. Topical vascular endothelial growth factor accelerates diabetic wound healing through increased angiogenesis and by mobilizing and recruiting bone marrow-derived cells. The American Journal of Pathology. 164, 1935-1947 (2004).
- Thangarajah, H., et al. The molecular basis for impaired hypoxia-induced VEGF expression in diabetic tissues. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 13505-13510 (2009).
