Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Environment
Click here for the English version

Environment

Val och nr-val Bioassays att studera förpuppningen preferens och uppkomsten framgång av Ectropis grisescens

Published: October 30, 2018 doi: 10.3791/58126
Automatic Translation
1, 1, 1,2, 3, 4, 5, 1, 1, 1, 1
1Guangdong Key Laboratory for Innovation Development and Utilization of Forest Plant Germplasm, College of Forestry and Landscape Architecture, South China Agricultural University, 2College of Agriculture, South China Agricultural University, 3Tea Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, 4College of Horticulture, South China Agricultural University, 5College of Coast and Environment, Louisiana State University

Summary

Här presenterar vi ett protokoll för att undersöka förpuppningen preferensen av mogen larver av Ectropis grisescens svar på jord faktorer (t.ex., substrat typ och fukt innehåll) använder val bioassays. Vi presenterar också ett protokoll av nr-val bioassays att fastställa de faktorer som påverkar förpuppningen beteenden och efterlevande av E. grisescens.

Abstract

Många insekter lever över marken som larver och vuxna och som förpuppas under marken. Jämfört med de ovan jord skeden av deras livscykel, mindre uppmärksamhet har ägnats på hur miljömässiga faktorer påverkar dessa insekter när de förpuppas i marken. Den te looper, Ectropis grisescens Warren (Lepidoptera: Geometridae), är en svår pest av te växter och har orsakat stora ekonomiska förluster i södra Kina. De protokoll som beskrivs här syftar till att undersöka, genom flervalsfrågor bioassays, huruvida mogen sista-instar E. grisescens larver kan diskriminera jord variabler såsom substrat typ och fukt innehåll och avgöra, genom nr-val bioassays, effekterna av substrat typ och fukt innehåll på förpuppningen beteenden och uppkomsten framgång E. grisescens. Resultaten skulle förbättra förståelsen av E. grisescens förpuppningen ekologi och väcka insikter om markförvaltning taktik för att undertrycka E. grisescens populationer. Dessutom kan dessa bioassays ändras för att studera påverkan av olika faktorer på förpuppningen beteenden och efterlevande av jord-pupating skadedjur.

Introduction

Jämfört med de larver och vuxna stadierna av insekter, är Pupp scenen mycket sårbara på grund av den begränsade mobila förmågan av puppor, som snabbt inte kan fly från farliga situationer. Pupating under jord är en gemensam strategi som används av olika grupper av insekter (t.ex., i order Diptera1,2,3,4, Coleoptera5, Hymenoptera6, Thysanoptera7, och Lepidoptera8,9,10,11,12) för att skydda dem från ovan jord rovdjur och miljöfaror. Många av dem är svår och skogsbrukssektorernas skadedjur1,2,3,4,5,6,7,8 ,9,10,11,12. Äldre larver av dessa jord-pupating insekter vanligtvis lämna sina värdar, faller på marken, vandra för att hitta en lämplig plats, burrow i marken och konstruera en Pupp kammare för pupating8,10.

Den te looper, Ectropis grisescens Warren (Lepidoptera: Geometridae), är en av de mest betydande defoliator skadedjur av te plantera Camellia sinensis L.13. Även om denna art beskrevs första gången 1894, det felaktigt har identifierats som Ectropis obliqua Prout (Lepidoptera: Geometridae) tidigare decennier14,15. Skillnader i morfologi, cellbiologi och geografiska fördelningen mellan de två syskon-arterna har beskrivits i några senaste studier14,15,16. Till exempel Zhang et al. 15 rapporterade att E. sneda främst inträffat på gränsar av tre provinser (Anhui, Jiangsu och Zhejiang) i Kina, medan E. grisescens har en mycket bredare distribution jämfört med E. oblique. Därför ekonomiska förluster till följd av E. grisescens förbises i hög grad, och kunskap om denna skadegörare behöver revideras i stor utsträckning och förnyat16,17,18,19 . Våra tidigare studier visade att E. grisescens föredrar att förpuppas i marken men kunde också förpuppas när marken inte är tillgänglig (nr-förpuppningen-substrat villkorar)11,12.

Denna uppsats innehåller stegvisa instruktioner för att (1) fastställa förpuppningen preferensen av E. grisescens svar på faktorer som typ av substrat och fukt innehåll med hjälp av flervalsfrågor bioassays, och (2) avgöra inverkan av abiotiska faktorer på förpuppningen beteenden och uppkomsten framgång av E. grisescens med hjälp av no-val bioassays. Alla dessa bioassays bedrivs under väl kontrollerade laboratorieförhållanden. Också, dessa bioassays är anpassade för att utvärdera påverkan av andra faktorer på förpuppningen beteenden och efterlevande av olika jord-pupating insekter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. fukt-val Bioassays att avgöra förpuppningen preferens av E. grisescens

  1. Att få mogna sista-instar larver av E. grisescens
    1. Skär färska skott (30-40 cm i längd) av te växter (Camellia sinensis L.). Sätt in 25-30 skott i en triangulär 250 mL-mätkolv. Fyll kolven med kranvatten. Lägg 3-4 kolvar (med te skott) i en plastbalja (ovansidan: 51 cm i diameter, undersidan: 40 cm i diameter, höjd: 16 cm).
    2. Släppa 1,000-2,000 larver (andra till femte instar) av laboratoriet kolonin av E. grisescens på bladen av tea skotten i varje bassäng. Upprätthålla dessa larver på kontrollerade laboratorieförhållanden [en fotoperiod 14 h av ljus följt av 10 h mörk (14:10 l), 60-90% relativ luftfuktighet (RH) och 24-28 ° C]. Noggrant överföra larverna på färska blad för hand varje 1-2 d. Varje dag bort avföring och skräp från botten av handfaten.
    3. Välj mogna sista-instar larver som faller från bladen av tea skotten och aktivt vandra på botten av bassängen. Erhålla minst 240 mogna larverna för att säkerställa att tillräckligt larver är tillgängliga för bioassays.
      Obs: Endast välja aktivt vandrande larver för experiment. Välj inte larverna som bo på bladen, eftersom dessa inte är redo att förpuppas. Också, inte markera prepupae med begränsade mobila aktiviteter eftersom de aktivt inte söker korrekt villkoren efter släpps ut i bioassayen arenorna.
  2. Substratet förberedelse
    1. Samla in och identifiera 4 typer av substrat (t.ex.sand, sandig lerjord 1, sandiga loam 2 och silt loam) med hydrometer metod20. Sterilisera jorden och sanden på 80 ° C ugn torktumlare för > 3 d, och sedan helt torr jord och sand vid 50 ° C under flera veckor tills det torra väger av substrat proverna inte ändrar längre över tiden.
    2. Jorda den torra jorden med trä mortlar och granatkastare. Sålla sand och jordade jorden genom en 3 mm såll och lagra dem i förslutningsbar plastpåse.
    3. Beräkna olika fukt innehållet i varje substrat (sand, sandig lerjord 1, sandiga loam 2 eller silt loam) som följer2:
      Equation 1
    4. Tillsätt den nödvändiga mängden destillerat vatten i förslutningsbar plastpåsar som innehåller torr jord eller sand för att förbereda 5%-20%-, 35%-, 50%, 65% och 80%-fukt substrat. Grundligt blanda i destillerat vatten och jord eller sand.
  3. Bioassay arena förberedelse
    1. Lika delar av polypropylen containrar (ovansidan: 20,0 cm längd x 13,5 cm i bredd, undersidan: 17,0 cm i längd x 10,0 cm i bredd, höjd: 6,5 cm) i 6 avdelningar med vattentät polyvinyl chloride (PVC) ark (höjd: 3,5 cm). Fixa PVC arken och täta sprickor med varmt lim.
      Obs: Täta helt någon spricka för att förhindra vatten genomträngning.
    2. För varje test fylla 6 avdelningar med samma typ av substrat med olika fukt innehåll (5%-20%-, 35%-, 50%, 65% och 80%-fukt) (figur 1a).
      Obs: Använd bara 1 typ av substrat av olika fukt innehåll i varje test. Slumpmässigt tilldela ordning på chambers som innehåller underlaget med 6 fukt innehållet.
    3. Klistra in 4-6 bitar av färska teblad med små bitar av tejp för att täcka den inre ytan av locken på polypropylen containrar (figur 1b).

Figure 1
Figur 1: exempel på bioassay arenor för val testerna. (en) vattentät polyvinyl chloride (PVC) ark används till lika delar av polypropylen containrar i 6 avdelningar. PVC blad korrigeras med varmt lim och sprickor tätas noggrant. I det här exemplet sandig lerjord 2 med olika fukt innehåll (5%, 20%, 35%, 50%, 65% och 80% fukt) används för att fylla kamrarna i slumpmässigt tilldelade order. (b), nybryggt te blad klistras på insidan av locken där den mogna Ectropis grisescens larver kommer att släppas. (c), PVC ark används till lika delar av polypropylen containrar i 4 kammare, som är fyllda med 4 typer av substrat (sand, sandig lerjord 1, sandiga loam 2 och silt loam) på 50% fukt. Denna siffra har ändrats från Wang et al. 11. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

  1. Bioassay inställning och dataregistrering
    1. Släpp 30 mogen sista-instar larver (som erhålls i steg 1.1.3) på de färska teblad som klistras på locket till behållaren polypropylen. Försiktigt stjälpa locket och tätt täcka behållaren polypropylen.
    2. Upprepa varje testa 8 x. Upprätthålla bioassay arenorna i en klimatkammare miljö på en 14:10 (l) fotoperiod och 26 ° C.
    3. Dag 5, räkna antalet puppor på ytan av marken i varje kammare. Också, ta isär bioassays och räkna antalet puppor inom substratet.
      Obs: Endast räknas de levande puppor eller inom substratet. Kontrollera puppor livskraft genom att observera buk rörelser efter att röra de puppor som använder tången.
  2. Dataanalyser
    1. Beräkna procentandelen av puppor som finns i varje kammare av varje replikat för varje test. Dataöverföring den procentsats till log-förhållandet med metoden som tillhandahålls av Kucera och Malmgren21.
    2. Jämföra andelen puppor (omvandlade data) i varje kammare med en envägs variansanalys (ANOVA). Ange betydelse nivåerna vid α = 0,05 för varje test.

2. substrat-val Bioassays att bestämma förpuppningen preferensen av E. grisescens

  1. Upprepa steg 1.1 att få mogna sista-instar larver, och steg 1.2 för att förbereda underlaget med olika fukt innehåll. Denna tid, endast 20%, 50% och 80%-fukt substrat behövs.
  2. Beredning av bioassayen arenorna
    1. Liknar steg 1.3.1, lika dela de polypropylen containrarna i 4 kammare använda PVC ark. Fixa PVC arken och täta sprickor med varmt lim.
    2. För varje test fylla kamrarna med 4 typer av substrat (sand, sandig lerjord 1, sandiga loam 2 och silt loam) som har samma vattenhalt (20%, 50% eller 80% fukt) med slumpmässigt tilldelad order (figur 1 c). Upprepa steg 1.3.3 att förbereda locken.
  3. Upprepa steg 1.4 att ställa bioassays och registrera data och steg 1,5 för att analysera data.

3. nr-val Bioassays att bestämma jord-grävande beteende och uppkomsten framgång av E. grisescens

  1. Upprepa steg 1.1 att få mogna sista-instar larverna och steg 1.2 för att förbereda de 4 substrat (sand, sandig lerjord 1, sandiga loam 2 och silt loam) på 3 fukt innehåll (20%, 50% och 80% fukt).
  2. Bioassay inställning
    1. Tillsätt substrat i en plastbehållare (ovansidan: 11,5 cm i diameter, undersidan: 8,5 cm i diameter, höjd: 6,5 cm) till ett djup av 3 cm. Se till att det blir 12 behandlingar (kombinationer av 4 substrat typer och 3 fukt innehåll) totalt. Upprepa varje behandling 7 x.
    2. Släpp 15 mogen sista-instar larver på substratet av varje bioassay arena. Täta behållare av tätt täcker locken. Bibehålla de biologiska testsystem i en klimatkammare miljö på en 14:10 (l) fotoperiod och 26 ° C.
      Obs: Det blir ingen anledning att klistra in färska teblad på locken som nämns i de val bioassays.
  3. Dataregistrering och analyser
    1. På dag 3, räkna antalet puppor och eventuella döda larver på ytan av substratet av varje replikat. Beräkna procentandelen av E. grisescens individer som grävt i underlaget enligt följande:
      Equation 2
    2. Registrera antalet framväxande vuxna varje dag tills inget mer vuxen framkommit för 15 d. beräkna uppkomsten framgång enligt följande:
      Equation 3
    3. Jämföra andelen lånad individer och uppkomsten framgång bland de behandlingar med envägs ANOVA. Ange betydelse nivåerna vid α = 0,05.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

De fukt-val bioassays visade att betydligt fler E. grisescens individer pupated på eller inom 5% - och 35%-fukt sand jämfört med 80%-fukt sanden (figur 2a). Dock betydligt föredrog fler individer att förpuppas eller inom smutsa (sandig lerjord 1 och 2 och silt loam) som hade en mellanliggande vattenhalt (siffror 2b - 2d).

Figure 2
Figur 2: resultat från de fukt-val bioassays. Dessa paneler Visa procentsatserna för levande puppor som finns i varje kammare som innehåller olika fukt innehåll (5%, 20%, 35%, 50%, 65% och 80%-fukt) av (en) sand, (b) sandig lerjord 1, (c) sandy loam 2 eller (d) silt loam. Data presenteras som medelvärde ± SE. De olika bokstäverna indikera signifikanta skillnader (P < 0,05). Denna siffra har ändrats från Wang et al. 11. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

De substrat-val bioassays visade att sand betydligt mer föredrogs av E. grisescens individer jämfört med sandig lerjord (1 och 2) under 20%-fukt villkora (figur 3a). Det var ingen signifikant skillnad i andelen puppor hittade i kamrarna som innehåller de 4 substratesna vid en 50%-vattenhalt (figur 3b). Betydligt pupated fler personer på eller inom sanden än på eller inom de andra substratesna under 80%-fukt villkora (figur 3 c).

Figure 3
Figur 3: resultat från de substrat-val bioassays. Dessa paneler Visa procentsatserna för levande puppor som finns i varje kammare som innehåller sand, sandig lerjord 1, sandig lerjord 2, eller silt loam på (en) en 20%-, (b) en 50%-, eller (c) en 80%-vattenhalt. Data presenteras som medelvärde ± SE. De olika bokstäverna indikera signifikanta skillnader (P < 0,05). Denna siffra har ändrats från Wang et al. 11. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Olika fukt innehåll av sand påverkade inte påtagligt andelen lånad individer och uppkomsten framgång av E. grisescens (figur 4a och 4b). Betydligt färre E. grisescens grävt till torr (20% fukt) eller våt (80% fukt) mark för pupating (figur 4a). Dessutom betydligt färre vuxna framkom av 20%-fukt sandig lerjord 2 och silt loam än de som hade pupated i 50% - eller 80%-fukt sandig lerjord 2 och silt loam (figur 4b).

Figure 4
Figur 4: resultat från de no-val bioassays. Dessa paneler visar (en) procentsatserna för lånad individer och (b), uppkomsten framgång Ectropis grisescens i svar på olika substrat typer (sand, sandig lerjord 1, sandiga loam 2 och silt loam) och fukt innehåll (20%, 50% och 80%). Data presenteras som medelvärde ± SE. De olika bokstäverna indikera signifikanta skillnader (P < 0,05). Denna siffra har ändrats från Wang et al. 11. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Förpuppningen inställningar svarar på olika mark variabler har studerats i några skadedjur6,9,22,23. Till exempel för att studera preferensen av mogen larver av Bactrocera tryoni (Froggatt) (Diptera: Tephritidae) bland olika markförhållanden fukt, Hulthen och Clarke22 ställa in en 3 x 3 Latin-square design som innehåller 9 behållare fylld med jorden vid antingen 0%, 75% eller 100% fältet kapacitet och 25 mogen larver släpptes på ytan av varje behållare. Alyokhin et al. 23 placeras 100 behållare (fylld med jord) i en träram, med 36 center behållarna (antingen torr eller våt) ordnade i ett ”schackbräde” mönster och 350-450 sen tredje-instar larver av Bactrocera dorsalis (Hendel) (Diptera: Tephritidae) släpptes på mitten av 36 behållarna. Dessa studier är lämpliga för B. tryoni och B. dorsalis larver eftersom de flesta av dem återfanns inom jorden i bioassayen arenas22,23. Dock omfattades dessa arenor inte. Som ett resultat, får vandrande larver med en stark rörliga kapacitet resa en lång sträcka och fly från arenorna. Här, gav vi en enkel metod för att studera preferensen av jord-pupating insekter oavsett deras storlekar och mobila förmågor. Jämfört med tidigare studier, är dessa bioassays lätt att ställa in. Flera nivåer (t.ex., > 4) av jord variabel kan även studeras i relativt små arenor.

Det är värt att notera att de uppgifter som erhållits från de val-prov som beskrivs här direkt inte kan analyseras med ANOVA eftersom procentandel data inte är oberoende (summan av andelen puppor i varje kammare alltid är lika med 1, och, därför, ökningen av ”andelen puppor i 1 kammare kommer att orsaka minskningen av andelen i kvarvarande). Här, vi utfört log-ratio omvandlingen eftersom det är en enkel procedur som ”tar effektivt bort CSC (konstant-summan constraint) från kompositionella data och samtidigt bibehåller sin sanna kovarians struktur”21. I den aktuella studien, efterlevande av E. grisescens puppor var hög och vi spelade bara in procentandelen levande puppor i varje kammare. Dock vissa jord-pupating skadedjur såsom furu tallprocessionsspinnaren moth, Thaumetopoea pityocampa (Denis & Schiffermüller) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae), oftast uppvisar en hög dödlighet under pupating24. I så fall skulle det vara rätt att räkna både levande och döda puppor.

Nr-val bioassays har använts att undersöka effekten av jord variabler på uppkomsten framgången av jord-förpuppningen skadedjur. De substrat typer och fukt innehåll var de mest frekvent studerade faktorerna i dessa studier2,3,4,5,9,10,11 , 12. E. grisescens kan antingen förpuppas inom eller på substratesna. Som ett resultat, vi spelade in procentandelen av lånad individer. Detta resultat skulle vara viktigt för att förstå de förpuppningen mönster av E. grisescens.

Både valet och de no-val bioassays kan ändras för att undersöka effekterna av andra jord faktorer (såsom jordens densitet, surface kompakthet, innehåll av ekologiska frågor, etc.) på de preferenser och prestanda för olika jord-pupating insekter. I ett senare arbete, vi ändrade dessa bioassays att studera (1) huruvida marken behandlats med kemiska bekämpningsmedel eller Agrilus agent avvärja pupating E. grisescens (både levande och döda puppor räknades), och (2) effekten av sådana behandlingar på förpuppningen beteenden (t.ex., procentandelen av lånad individer) och uppkomsten framgång av E. grisescens.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna har något att avslöja.

Acknowledgments

Vi tackar Yuzhen Wen, Shiping Liang, Shengzhe Jian och anonym Li (College of Forestry och Landscape Architecture, South China Agricultural University) för deras hjälp i insekt uppfödning och experimentella set-up. Detta arbete finansierades av den nationella naturvetenskap Foundation i Kina (Grant nr 31600516), Stiftelsen Guangdong naturvetenskap (Grant No. 2016A030310445), och vetenskap och teknik planering projekt i provinsen Guangdong (Grant No. 2015A020208010) .

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Triangular flask Bomex Chemical (Shanghai) Co., LTD 99 250 mL
Plastic basin Chahua, Fuzhou, China 100 upper side: 51 cm in diameter; bottom side: 40 cm in diameter; height: 16 cm
Zip lock bags Glad, Guangzhou, China 126/133
Polypropylene containers Youyou Plastic Factory, Taian, China 139/155/160/161/190 upper side: 20.0 cm [L] × 13.5 cm [W], bottom side: 17.0 cm [L] × 10.0 cm [W], height: 6.5 cm
Waterproof polyviny chloride sheet Yidimei, Shanghai, China 141
Tape V-tech, Guangzhou, China VT-710
Oven drier Kexi, Shanghai, China KXH-202-3A
Environmental chamber Life Apparatus, Ningbo, China PSX-280H

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Dimou, I., Koutsikopoulos, C., Economopoulos, A. P., Lykakis, J. Depth of pupation of the wild olive fruit fly, Bactrocera (Dacus) oleae (Gmel.) (Dipt., Tephritidae), as affected by soil abiotic factors. Journal of Applied Entomology. 127 (1), 12-17 (2003).
  2. Chen, M., Shelton, A. M. Impact of soil type, moisture, and depth on swede midge (Diptera: Cecidomyiidae) pupation and emergence. Environmental Entomology. 36 (6), 1349-1355 (2007).
  3. Holmes, L. A., Vanlaerhoven, S. L., Tomberlin, J. K. Substrate effects on pupation and adult emergence of Hermetia illucens (Diptera: Stratiomyidae). Environmental Entomology. 42 (2), 370-374 (2013).
  4. Renkema, J. M., Cutler, G. C., Lynch, D. H., MacKenzie, K., Walde, S. J. Mulch type and moisture level affect pupation depth of Rhagoletis mendax Curran (Diptera: Tephritidae) in the laboratory. Journal of Pest Science. 84 (3), 281 (2011).
  5. Ellis, J. D. Jr, Hepburn, R., Luckman, B., Elzen, P. J. Effects of soil type, moisture, and density on pupation success of Aethina tumida (Coleoptera: Nitidulidae). Environmental Entomology. 33 (4), 794-798 (2004).
  6. Pietrantuono, A. L., Enriquez, A. S., Fernández-Arhex, V., Bruzzone, O. A. Substrates preference for pupation on sawfly Notofenusa surosa (Hymenoptera: Tenthredinidae). Journal of Insect Behavior. 28 (3), 257-267 (2015).
  7. Buitenhuis, R., Shipp, J. L. Influence of plant species and plant growth stage on Frankliniella occidentalis pupation behaviour in greenhouse ornamentals. Journal of Applied Entomology. 132 (1), 86-88 (2008).
  8. Zheng, X. L., Cong, X. P., Wang, X. P., Lei, C. L. Pupation behaviour, depth, and site of Spodoptera exigua. Bulletin of Insectology. 64 (2), 209-214 (2011).
  9. Wen, Y., et al. Effect of substrate type and moisture on pupation and emergence of Heortia vitessoides (Lepidoptera: Crambidae): choice and no-choice studies. Journal of Insect Behavior. 29 (4), 473-489 (2016).
  10. Wen, Y., et al. Soil moisture effects on pupation behavior, physiology, and morphology of Heortia vitessoides (Lepidoptera: Crambidae). Journal of Entomological Science. 52 (3), 229-238 (2017).
  11. Wang, H., et al. Pupation behaviors and emergence successes of Ectropis grisescens (Lepidoptera: Geometridae) in response to different substrate types and moisture contents. Environmental Entomology. 46 (6), 1365-1373 (2017).
  12. Wang, H., et al. No-substrate and low-moisture conditions during pupating adversely affect Ectropis grisescens (Lepidoptera: Geometridae) adults. Journal of Asia-Pacific Entomology. 21 (2), 657-662 (2018).
  13. Ge, C. M., Yin, K. S., Tang, M. J., Xiao, Q. Biological characteristics of Ectropis grisescens Warren. Acta Agriculturae Zhejiangensis. 28 (3), 464-468 (2016).
  14. Xi, Y., Yin, K. S., Tang, M. J., Xiao, Q. Geographic populations of the tea geometrid, Ectropis obliqua (Lepidoptera: Geometridae) in Zhejiang, eastern China have differentiated into different species. Acta Entomologica Sinica. 57, 1117-1122 (2014).
  15. Zhang, G. H., et al. Detecting deep divergence in seventeen populations of tea geometrid (Ectropis obliqua Prout) in China by COI mtDNA and cross-breeding. PloS One. 9 (6), e99373 (2014).
  16. Ma, T., et al. Analysis of tea geometrid (Ectropis grisescens) pheromone gland extracts using GC-EAD and GC× GC/TOFMS. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 64 (16), 3161-3166 (2016).
  17. Zhang, G. H., et al. Asymmetrical reproductive interference between two sibling species of tea looper: Ectropis grisescens and Ectropis obliqua. Bulletin of Entomological Research. , (2016).
  18. Luo, Z. X., Li, Z. Q., Cai, X. M., Bian, L., Chen, Z. M. Evidence of premating isolation between two sibling moths: Ectropis grisescens and Ectropis obliqua (Lepidoptera: Geometridae). Journal of Economic Entomology. 110 (6), 2364-2370 (2017).
  19. Li, Z. Q., et al. Chemosensory gene families in Ectropis grisescens and candidates for detection of Type-II sex pheromones. Frontiers in Physiology. 8, article no: 953 (2017).
  20. Chen, L. Q. Research on structure of soil particle by hydrometer method. Environmental Science Survey. 29 (4), 97-99 (2010).
  21. Kucera, M., Malmgren, B. A. Logratio transformation of compositional data: a resolution of the constant sum constraint. Marine Micropaleontology. 34 (1-2), 117-120 (1998).
  22. Hulthen, A. D., Clarke, A. R. The influence of soil type and moisture on pupal survival of Bactrocera tryoni (Froggatt) (Diptera: Tephritidae). Australian Journal of Entomology. 45 (1), 16-19 (2006).
  23. Alyokhin, A. V., Mille, C., Messing, R. H., Duan, J. J. Selection of pupation habitats by oriental fruit fly larvae in the laboratory. Journal of Insect Behavior. 14 (1), 57-67 (2001).
  24. Torres-Muros, L., Hódar, J. A., Zamora, R. Effect of habitat type and soil moisture on pupal stage of a Mediterranean forest pest (Thaumetopoea pityocampa). Agricultural and Forest Entomology. 19 (2), 130-138 (2017).

Tags

Miljövetenskap fråga 140 jord-förpuppningen beteende te looper Ectropis grisescens uppkomsten framgång preferens substrat effekt substrat typ vattenhalt val test nr-val test Camellia sinensis
Val och nr-val Bioassays att studera förpuppningen preferens och uppkomsten framgång av <em>Ectropis grisescens</em>
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Wang, C., Wang, H., Ma, T., Xiao,… More

Wang, C., Wang, H., Ma, T., Xiao, Q., Cao, P., Chen, X., Xiong, H., Qin, W., Sun, Z., Wen, X. Choice and No-Choice Bioassays to Study the Pupation Preference and Emergence Success of Ectropis grisescens. J. Vis. Exp. (140), e58126, doi:10.3791/58126 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter