쥐에서 담 즙이 폐쇄 증 증후군 장황 하는 실버 나노 방법

Summary

이 문서는 장황 실험 담 즙이 폐쇄 증 마우스 모델에서 담 즙이 폐쇄 증 증후군에 대 한은 나노 입자에 따라 하는 방법을 자세하게에서 설명 합니다. 시 약 준비 과정 및 신생아 마우스 주입 기술을 이해 신생아 마우스 모델 연구에 사용 되는 방법에 익숙해지도록 연구 하는 데 도움이 됩니다.

Abstract

담 즙이 폐쇄 증 (바)의 병 인은 아직 완전히 이해 하는 아이 들에 있는 높은 사망률과 염의 심각한 유형입니다. 바이러스 성 감염 원인 중 하나 있을 수 있습니다. 학사 학위를 공부에 대 한 사용 되는 전형적인 동물 모델 붉은 털으로 타 바이러스와 신생아 마우스 접종으로 설정 됩니다. 나노 항균 및 항 바이러스 효과; 발휘 표시 되었습니다. 바 마우스 모델에서 그들의 기능은이 연구에서 평가 됩니다. 현재, 바 동물 실험, 바 쥐의 증상을 개선 하는 데 사용 하는 방법을 통해 음식이 나 다른 약물을 주어진 일반적으로 증상 치료입니다. 이 연구의 목적은 쥐에서 바 증후군은 나노 입자의 복 주입 장황 하는 새로운 방법을 설명 하 고은 나노 젤 배합을 준비 하기 위한 자세한 방법을 제공입니다. 이 메서드는 간단 하 고 광범위 하 게 적용 하며 바, 뿐만 아니라 임상 치료 메커니즘을 연구 하는 데 사용할 수 있습니다. 쥐 전시 황 달 때 바 마우스 모델에 따라, 준비 된은 나노 젤 낮은 간 표면에 intraperitoneally 주입 됩니다. 생존 상태를 관찰 하 고 생화학 지표 및 간 histopathology 검사. 이 메서드는 두 바 모델 및 소설 바 트리 트 먼 트의 설립의 더 직관적인 이해를 수 있습니다.

Introduction

바는 cholestasis 영구적인 황 달 특징의 한 형태 이며, 간 이식의 부재에 높은 사망률을 있다. 바이러스 성 감염 바의 병 인에 밀접 하 게 연관 된다. 세포, reovirus, 그리고로 모두 바^1,2,3병원 균으로 제안 되었습니다. 추가-intrahepatic 및 담 관, 담 즙 상피 세포 apoptosis, 포털에서 선 동적인 세포 침투를 선도 대 한 면역 dysregulation 신생아 기간 동안 바이러스 감염에 대 한 미숙한 면역 시스템의 응답 결과 지역, intrahepatic 및 extrahepatic 담 관 방해, 그리고 마지막으로, 간 섬유 증^4,,56.

학사 연구에 대 한 일반적으로 사용 되 동물 모델에서는 붉은 털으로 타 바이러스 (RRV)와 신생아 마우스의 접종 합니다. 마우스는 일반적으로 낮은 몸 무게 및 acholic 변 5-6 일 후 황 달 개발. 질병 과정에서 면역 반응의 역할은 중요, 특히 자연적인 살인자 (NK) 세포; 안티 NKG2D 항 체로이 셀의 소모는 크게 바-손상⁷감소 시킨다. 게다가, 다른 세포, CD4 포함⁺ T 세포, CD8⁺ T 세포, 수지상 세포, 및 규정 하는 T 세포 모두 표시 되었습니다 질병^8,9,,1011에 역할을. 모든 데이터는 학사 과정에서 면역 시스템의 필수적인 자연 제안.

나노 (AgNPs)는 몇 가지 전염 성 질환, 세균 감염¹² 등 바이러스 감염^13,,1415에 대 한 유익한 효과를 입증 되었습니다. 그러나, 피부과 사용 이외의 몇 가지 연구는 사용 AgNPs 임상 치료에 그들의 잠재적인 독성 때문에 주로. 동물 실험에서 연구팀은 일반적으로 구두¹⁶ 통해 AgNPs 관리 또는 정 맥 주사 방법¹⁷의 효능을 공부 했다. 그러나, 다른 연구원 AgNPs 관리 통해 신생아 마우스에 복 (i.p.) 주사 실험을 간단 하 고 빠른 방법을 선도 하 고 간 및 담 즙 관 동안에 더 직접적인 영향의 효능 공부 면역 시스템과 같은 다른 시스템에 독성을 감소. AgNPs NK 세포 활동¹⁸; 영향을 보였다합니다 따라서, 우리는 바 마우스 모델에서 AgNPs 관리 통해 i.p. 주입의 치료 효과 시험 했다.

Protocol

모든 동물 실험 프로토콜 기관 동물 관리 및 사용 Sun 야만 센 대학 실험실 동물 센터 (#IACUC-DB-16-0602)의 위원회에 의해 승인 되었습니다가지고. 1. 담 즙이 폐쇄 증 마우스 모델 구축 압력가 마로 소독 차 우 광고 libitum에 대 한 액세스와 25 ° C에서 12 h 다크/라이트 사이클에서 특정 병원 체 자유로운 환경에서 임신 BALB/c 마우스를 유지. 준비 하려면 RRV 스트레…

Representative Results

설치 바 마우스 모델을 기반으로, 감염 된 신생아 쥐 관리 되었다 준비 AgNP 콜라겐 혼합물 2의 i.p. 주사 황 달 전시 후 x. 마우스 생존은 매일, 확인 하 고 간 기능 검사, 간 병 리, 그리고 cytometry 수행 했다. 치료 컨트롤 바 쥐에 비해, AgNP 처리 쥐 감소 황 달 그리고 유지 하는 그들의 정상적인 몸 무게 (그림 3). 빌리 루빈 물질 대사 및 간장 transaminase 레벨…

Discussion

AgNPs 전시 강력한 넓 스펙트럼 항균 특성 및 강한 침투성²²; 또한, 그들은 항균 의료 제품²³의 범위를 생산 하는 데 사용 됩니다. 그러나, AgNPs는 일단 그들은 장기에 축적 하 고이 속성은 독성 효과^24,25이어질 수 있습니다 취소 하는 데 시간이 오래 걸릴 수 있습니다. 이전 연구는 쥐 실험에서 단일 i.v. 주입 후 급성 독성?…

Materials

BALB/c mouse	Guangdong Medical Experimental Animal Center	SYXK2017-0174	Animal experiment
Rhesus rotavirus (RRV)	ATCC	ATCC VR-1739	Establish biliary atresia mouse model
MA104 cells	ATCC	ATCC CRL-2378.1	For laboratory use only
DMEM	Thermo Fisher	10569010	Mammalian Cell Culture
Fetal Bovine Serum	Thermo Fisher	10099141	Mammalian Cell Culture
collagen Type I	CORNING	354236	For research use only
PBS buffer	OXOID	BR0014G	For washing
NaOH	Sigma	1310-73-2	Adjust the PH value
AgNP			Antibacterial Note: The AgNps was a gift from Prof CM Che. in the Department of Chemistry, the University of Hong Kong.
Insulin syringe with integrated needle	BD	9161635S	For medical use
15-mL Centrifuge Tube	Corning	430791	For laboratory use only
1.5-mL Microcentrifuge Tube	GEB	CT0200-B-N	For laboratory use only
Microscope	Nikon	ECLIPSE-Ci	For laboratory use
Dissecting/Intravital microscope	Nikon	SMZ 1000	For laboratory use
anti-Mouse NKp46 FITC	eBioscience	11-3351	For research use only
anti-Mouse CD4 PE-Cyanine5	eBioscience	15-0041	For research use only
Monoclonal Mouse Anti-Human CD4	DAKO	20001673	For research use only
anti-NKG2D	RD	MAB1547	For research use only
BD FACSCanto Flow Cytometer	BD Biosciences	FACS Canto Plus	For laboratory use only