Summary
Her presenterer vi en protokoll for å etablere musen depressive modellen, observere endringer i virkemåte som er forbundet med kronisk uforutsigbare mild stress (CUMS) og evaluere anti-depressive effekten av Xiaoyaosan.
Abstract
I tillegg til standardiserte bruk av Antidepressiva medisiner og psykoterapi har bruken av tradisjonell kinesisk medisin ført til en generell forbedring av pasienter med depresjon (MDD). Derfor var formålet med denne studien å etablere musen depressive modellen, observere endringer i virkemåte som er forbundet med kronisk uforutsigbare mild stress (CUMS), og deretter vurdere anti-depressive effekten av Xiaoyaosan. Mus ble tilfeldig delt inn i fire grupper: en kontrollgruppe, en modellgruppe, en behandlingsgruppe med Xiaoyaosan og en behandlingsgruppe ved Fluoxetin. Alle mus ble individuelt holdt i bur og depresjon ble indusert i mus ved å utsette dem til flere designet manipulasjoner av CUMS for 21 dager, som beskrevet i protokollen. Mus i kontrollgruppen og modellgruppe fikk 0,5 mL destillert vann, mens mus i behandling gruppene fikk enten Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dag) eller fluoxetine (2,6 mg/kg/dag). Stoffet brukes i studien ble gitt intragastrically daglig under hele tre ukene. Beregne depressive-lignende atferd, en rekke parametere inkludert pels staten, kroppsvekt, åpne felt testresultat og sukrose preferanse testresultat ble registrert. Dataanalyse viste at opptreden av modellen mus ble betydelig endret i forhold til atferd av mus i kontrollgruppen, som ble forbedret ved behandling av Xiaoyaosan og fluoxetine. Gjeldende funnene vist anti-depresjon effektene av Xiaoyaosan atferd av CUMS-indusert mus og avslørte at forbindelser fra Xiaoyaosan resept kan være verdt for behandling av depresjon, vurderer deres fordelaktig virkninger på depressive-lignende atferd.
Introduction
MDD er en kronisk, svært tilbakevendende mental sykdom som presenterer med vedvarende lav humør, depresjon, lav selvtillit, mental retardasjon, tap av interesse, søvnforstyrrelser, dypt pessimistisk eller suicidale tendenser; Det har forårsaket stor skade helse og sosiale stabilisering1. Det har blitt en av verdens viktigste årsaken til uførhet, og det kan være en av de viktigste viktigste årsakene til sykdomsbyrde 2030 ifølge Verdens helseorganisasjon2,3. Foreløpig anses Antidepressiva medisiner og psykoterapi å være førstevalget til å behandle MDD. Likevel et enormt antall pasienter diagnostisert med MDD reagerer ikke å kontinuerlig medisiner eller terapi, og de er oppført som behandling mot depresjon4.
Xiaoyaosan er en klassisk kinesisk sammensatte5 som har vært mye brukt til å behandle psykiske sykdommer i tusenvis av år siden Song-dynastiet i Kina6. Det består av 8 kinesiske urter: Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Radix Angelicae Sinensis, Poria, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Radix Glycyrrhizae, Rhizoma Zingiberis Recens , og Herba Menthae. Xiaoyaosan inneholder flere bestanddeler, har flere mål og utnytter flere veier7. Xiaoyaosan vist ofte seg å være en trygg og effektiv formel for behandling av ulike sykdommer knyttet til psykiske lidelser og moderne studier har også fokusert på denne sammensatte8,9, anti-depresjon mekanisme 10. Patogenesen av MDD er ennå uklart, selv om det er mangfoldige hypoteser, inkludert monoamin hypotesen, nevrotransmitter reseptor hypotesen, neuroendocrine funksjonen endre hypotesen, immunsystemet abnormitet hypotesen osv. Flere studier har vist at antidepressant effekten av Xiaoyaosan har en forbindelse med materiale baser over hypoteser11,12, og dets terapeutiske handling manifesterer som en forbedring depressive-lignende atferd13.
Videre med utbredelsen av depresjon, har moderne samfunn lidd av reduksjoner i arbeidsstyrken, tidlig avgang og dyre behandlinger14. Dyr behandling trenger strenge legehjelp, som betyr et utvalg av økt medisinske kostnader og presis påvente av presise uønskede resultater samt bivirkninger15. Kinesisk urt Xiaoyaosan har tilgjengelig komponenter, unike effekter og liten bivirkninger. Programmet kan spille en rolle i å redusere byrden av moderne medisinsk behandling. Derfor, for å gi en mer teoretiske grunnlaget for anvendelse av Xiaoyaosan, en alternativ klinisk terapi bør tilbys for behandling av depresjon, forekomsten av som øker år for år, og bør forbedre helse samtidig. Dette dokumentet beskriver en protokoll med bruk av Xiaoyaosan å hindre de depressive-lignende atferd ved å etablere depressive modell av musen. Åpne felttest og sukrose preferanse test ble brukt til å bekrefte antidepressant effekter av Xiaoyaosan.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Denne protokollen ble godkjent av dyr etikk av Beijings universitet for kinesisk medisin og var alle retningslinjer og bruk av laboratoriet dyr i Kina. Det var ikke utilsiktet død situasjonen under den eksperimentelle prosedyren, og ingen dyr måtte være euthanized i denne studien.
1. klargjør narkotika for eksperimentet
Merk: De kinesiske urtene ble kjøpt og deretter godkjent av Dr. B. Liu av Beijings universitet for kinesisk medisin. Xiaoyaosan inneholder følgende åtte tradisjonell kinesisk narkotika i forholdet 6:6:6:6:3:6:2:2: Radix Angelicae Sinensis, Radix Paeoniae Alba, Poria, Radix Bupleuri, Radix Glycyrrhizae, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Herba Menthae og Rhizoma Zingiberis Recens.
- Forberede Xiaoyaosan som beskrevet tidligere16.
Merk: Vi hentet disse forbindelsene i kinesisk medisin forberedelse rommet i Kina-Japan vennskap sykehuset utvinning avkastningen var 18,8%. - Kontrollere kvaliteten på Xiaoyaosan av høy ytelse flytende kromatografi-massespektrometri analyse (LC-MS/MS)17.
2. forberedelser mus for den eksperimentelle prosedyren
Merk: For den eksperimentelle prosedyren, 60 sunn mannlige C57BL/6J-mus i alderen 12 uker ble valgt, med hver musen veier mellom 18 og 22 g.
- Holde mus individuelt i bur i en typisk bestemt patogen gratis (SPF) laboratorium dyr rom (22 ± 1 ° C, 12 h/12 h mørke/lys syklus, relativ fuktighet: 30 – 40%) i en uke før CUMS prosedyren.
- Tilfeldig del alle mus i en kontrollgruppe, en modell, en Xiaoyaosan behandlingsgruppe eller en fluoxetine behandling etter deres kroppsvekt. Hver gruppe har 15 mus.
- Før innvielsen av eksperimentet, nummer musene i hver gruppe på halen bruke en merking.
- Teste alle mus med en fem-dagers sukrose preferanse test (se trinn 5) og en åpen-test (se trinn 6).
3. induksjon av depresjon i mus
Merk: For å indusere depresjon, musene i modellgruppen og to behandlingsgrupper gjennomgikk CUMS for 21 dager18. Planen kan endres i henhold til praktisk situasjonen, men prinsippet at det samme trykk ikke kan brukes kontinuerlig bør følges.
-
Utsett mus daglig til to av følgende sju stressfaktorer for 21 dager19. Vår modellering plan er utformet som følger:
- På mandag, utsette mus til mat deprivasjon (tom på feed av hver bur for 24 h, 8.00 til 08:00) og vann savn (fjerne drikke flaske hver bur for 24 h, 8.00 til 08:00).
- På tirsdag, utsette mus til tilbakeholdenhet stress (holde mus i en liten plast badekar for 3t, 8:00 am til 11:00) og tom bur (fjerne polstringen hver bur for 11 h, 8.00 til 19:00).
- Onsdag, utsette mus til vått og skittent bur (helle vann i hver bur og holde våt 24 h, 8.00 til 08:00) og overfylte bur (sette fem mus i en bur for 24 h, 8.00 til 8:00).
- På torsdag, utsette mus til tilbakeholdenhet stress og iskalde svømming20,21 (force hver musen for å svømme i et klart glass akvarium med isvann i 5 min).
- På fredag, utsette mus vått og skittent bur og mat deprivasjon.
- På lørdag, utsette mus til tilbakeholdenhet stress og overfylt burene.
- På søndag, utsette mus til tom burene og iskalde svømming.
- Registrere pels stat og kroppen vekt ukentlig til slutten av modellering (dag 21). Beregne den totale poengsummen av pelsen som summen av score fra syv forskjellige kroppsdeler: hodet, nakken, dorsal pels, ventral belegge, forepaws, hale og bakben paws. En score på en angir velstelte pels, og en poengsum på null angir en uflidd pels22.
- Fem dagers sukrose preferanse teste (se trinn 5) og en åpen-test (se trinn 6) på slutten av eksperimentet.
4. administrasjon av Xiaoyaosan
Merk: Dosen av Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dag) ble valgt på grunnlag av tilfredsstillende effekt som beskrevet tidligere9.
- Under eksperimentet bruk destillert vann å forberede Xiaoyaosan og fluoksetin suspensjoner, og bruk umiddelbart.
- Gi 0,5 mL destillert vann til mus i kontrollgruppen og modellgruppe av intragastric hver dag før modellering. I mellomtiden gi Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dag) eller fluoxetine (2,6 mg/kg/dag) til mus i to behandlingsgrupper.
5. sukrose preferanse Test
Merk: Ingen vann eller mat deprivasjon ble brukt før testen. Protokollen ble utført som tidligere rapportert23.
- På de første to dagene, huset musene individuelt med to flasker fylt med vann fra springen.
- På de neste to dagene, gi musene to flasker fylt med 1% sucrose løsning.
- På den siste dagen, gi musene to flasker for 24 h, med vann og andre med 1% sucrose løsning. For å eliminere en side preferanse av mus i drikking oppførsel, bytte plasseringen av de to flaskene etter 12 h.
- Registrere volumet (mL) av både brukte sucrose løsning og vann fra springen. Beregne sukrose preferanse som følger: sukrose preferanse (%) = sukrose forbruk/totalt flytende forbruk × 100%.
6. åpen Test
- Utfør den åpne-feltet i svakt opplyst og rolige rom med en firesidede svart lusterless treeske. Del av floor i 25 lik rutene av blå linjer.
- Rens åpne-boksen med 5% alkohol før tilgang hver mus. Deretter plassere musen midt i feltet Åpne forsiktig.
- Suspendere en HD digitalkamera ca 200 cm rett over feltet, og spille inn virkemåten til hver mus for 5 min.
- Evaluere mus atferdsmessige videoen av systemprogramvaren video-sporing og registrere data av avstand og antall oppføringer i sonen center.
- Analysere data total distanse flyttet og antall oppføringer i sonen center ved statistisk programvare.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Merk at resultatene er tidligere publisert av Dr. Xiu-Fang Ding, et al. 18
Dataene ble uttrykt som gjennomsnittlig ± standard feil av gjsnitt (SEM). En enveis ANOVA eller en ikke-parametriske test ble brukt for generelle data basert på normalitet testen og testen for homogenitet avvik. LSD testen ble brukt sammenligninger mellom grupper. I tillegg gjentatte måling prosessen med generell lineær modell (GLM) ble brukt til å utføre enveis ANOVA analyse for gjentatte måledata (pels score og kroppen vekt), og multivariabel analyseprosessen med avvik ble vedtatt for å gjøre sammenligninger mellom grupper på hver gang pek (LSD-metoden).
Den fysiske tilstanden på CUMS-indusert mus
Etter utsette mus 3 uker av CUMS for induksjon av depresjon, ble en gradvis dystrophy pels stat i modellgruppen indusert; dystrophy ikke presentere etter to uker med stress, men det forverret etter CUMS prosedyren (tre uker) og pels score betydelig redusert sammenlignet med kontrollgruppen (F (3, 56) = 25.08, p = 0.000). Pelsen delstaten mus ble særlig forbedret etter sammenhengende behandling med Xiaoyaosan eller fluoxetine sammenlignet modellgruppen (F (3, 56) = 25.08, begge p = 0,001, figur 1a). Ifølge ukentlige kroppen vekt data fra hver gruppe, en betydelig reduksjon i kroppsvekt ble manifestert ved den tredje uken (F (3, 56) = 16.149, p = 0.000, figur 1b), mens Xiaoyaosan eller fluoxetine betydelig økt kroppen vekt sammenlignet med modellgruppen (F (3, 56) = 16.149, begge p = 0,001).
Sukrose preferanse testen
Stress eksponering hadde mus i alle grupper en lignende sukrose preferanse (opprinnelig tilstand, figur 2a). Imidlertid en betydelig nedgang i sukrose preferanse ble observert etter tre uker med stress prosedyre i modellgruppen (F (3, 56) = 41.379, p = 0.000, figur 2b). Xiaoyaosan og fluoxetine effektivt reversert endringene og betydelig økt sukrose preferanse sammenlignet med modellgruppen (F (3, 56) = 41.379, begge p = 0.000).
Åpne feltet testen
Før stress eksponering utstilt alle mus en lignende opptreden tilstand (planlagte vilkår. Figur 2 c og 2d). Imidlertid etter stress eksponering for tre uker, den totale avstanden flyttet i fem minutter betydelig forskjellig mellom gruppene. Den totale avstanden flyttet av mus i modellgruppen var betydelig lavere (F (3, 56) = 4.216, p = 0.003, figur 2f) enn kontrollgruppen. Videre var antall oppføringer i den sentrale sonen også signifikant forskjellig mellom grupper. Antall oppføringer i det sentrale området av modellgruppen betydelig redusert (F (3, 56) = 2.809, p = 0.013, figur 2e) sammenlignet med kontrollgruppen. Fluoxetine behandling forhindret disse endringene i bevegelse trend og forbedret den totale avstanden og antall oppføringer i den sentrale sonen (F (3, 56) = 4.216, p = 0.029; F (3, 56) = 2.809, p = 0.004). Et lignende fenomen ble også observert i gruppen Xiaoyaosan behandling (F (3, 56) = 4.216, p = 0.014; F (3, 56) = 2.809, p = 0.029).
Figur 1 : Effekter av Xiaoyaosan på CUMS-induserte endringer i mus fysisk tilstand. Mus pels tilstand (a) og kroppsvekt (b) ble målt ukentlig under stress perioden. Dataene ble uttrykt som den gjennomsnittlig ± SEM, n = 15 per gruppe. ** p < 0,001 versus kontroll; ΔΔ p < 0,001 versus modellen. Dette tallet har blitt endret fra Ding, et al. 18 Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : Effekter av Xiaoyaosan på CUMS-indusert depressive-lignende atferd. Et batteri av atferdsmessige tester ble utført, og følgende parametere ble målt: sukrose preferanser (a, b), antall oppføringer i sonen center (c, e), og den totale avstanden flyttet (locomotor aktivitet) (d, f). Dataene ble uttrykt som den gjennomsnittlig ± SEM, n = 15 per gruppe. * p < 0,05, *p < 0,01 og *p < 0,001 versus kontroll; Δ p < 0,05, ΔΔp < 0,01 og ΔΔΔp < 0,001 versus modell. Dette tallet har blitt endret fra Ding, et al. 18 Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
CUMS modellen som brukes i denne studien er en vanlig måte å etablere stress diathesis modell av depresjon24. De fleste manifestasjoner av CUMS kan gjenopprettes ved antidepressiva som indikerte at denne modellen metoden har en sterk prediktiv validitet25. På denne måten, dyr får kronisk uforutsigbare stressende stimuli og utvikle kjernen symptomer på alvorlig depresjon, inkludert redusert sted preferanse condition, anhedonia og nedsatt følelse-lignende atferd26. Her, i denne protokollen, kan kontinuerlig bruk av Xiaoyaosan eller fluoxetine forbedre depressive-lignende atferd av CUMS-indusert modell mus etter resultatene i eksperimentet. fluoxetine er som et positivt kontroll stoff å bevise intervensjon effekten av Xiaoyaosan.
Evalueringen av pelsen score, i motsetning til feltet åpen test, tvunget svømmende test, eller nyheten undertrykt fôring test, er et mål som ikke er knyttet til depresjon hos mennesker men er den mest utbredte, pålitelig og godt validert metoden for depressive modellen musen27. Studien, en gradvis dystrophy av frakken i modellgruppen ble indusert og finnes ikke etter to uker med stress, men forverret på slutten av CUMS prosedyren (tre uker), mens kroppsvekten ikke var signifikant forskjellige grupper etter én uke stress eksponering. Men begynte forskjellen kroppsvekt i hver gruppe å dukke opp etter modellering for to uker, dermed fører til en påfølgende reduksjon i slutten av tre uker. Resultatene indikerer at disse endringene i fysiske tilstand av CUMS-indusert mus kan reverseres ved både Xiaoyaosan og fluoxetine behandling, tyder på at Xiaoyaosan kan forbedre de fysiske tilstander deprimert mus.
For å ytterligere validere CUMS modellen og kontrollere effekten av sammensatte brukes i denne protokollen, ble en sukrose preferanse test og en åpen felttest brukt til å vurdere mulig depressive atferd i CUMS-indusert mus. Reduksjon av anhedonia i sukrose preferanse ble brukt til å evaluere depressive som staten gnagere, mens i åpne-felttest, en dyr psykologisk test, brukes ofte til å evaluere locomotor funksjon og emosjonalitet Red28. Resultatet viste at 3 uker stress eksponering hadde en stor innflytelse på sukrose preferanse for mus, og anhedonia ble tilbakeført av både Xiaoyaosan og fluoxetine behandlinger. Åpne feltet testen er vanlig å vurdere locomotor funksjon og emosjonalitet i laboratoriet dyr29. I denne studien ble den brukt til å analysere depressive atferd. Resultatene av åpen test viste at den totale avstanden flyttet av musene i modellgruppen var betydelig lavere enn kontrollgruppen. Videre var antall oppføringer i det sentrale området av modellen mus betydelig lavere enn gruppen behandling av mus, som foreslo at CUMS-indusert mus vises depressive-lignende atferd. Også viste studien at Xiaoyaosan og fluoksetin kan forbedre endringene i åpne-feltet testen.
Med lignende resultatene i tidligere studier viste dette papiret at CUMS forårsaker en nedgang i sukrose forbruk og locomotor aktivitet. Kontinuerlig bruk av Xiaoyaosan var effektive for forebygging og behandling av CUMS-indusert depresjon i mus. Mange studier har undersøkt depresjon, en avansert forståelse av en dyremodell kan være nøkkelen til å avklare mekanismen av depresjon30. CUMS metoden beskrevet i denne protokollen kan effektivt viser depresjon mus. Motsetning til kronisk mild stress (CMS) eller kronisk immobilisering stress (CIS) metoden31,32ligger den sentrale punkt CUMS i valg av uforutsigbare stressfaktorer og rasjonell bruk av modell evaluering. For å ytterligere bekrefte metoden og resultatet som vises på denne protokollen, bør fremtidig inneholde mer stressfaktorer og evalueringsmetoder for CUMS metoden og gjenkjenning av langsiktige virkningene av Xiaoyaosan for 28-48 dager CUMS.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne ikke avsløre.
Acknowledgments
Denne forskningen ble støttet av tilskudd fra National Natural Science Foundation av Kina (nr. 81630104, nr. 81473597) og grunnleggende forskning midlene sentral universitetene (nr 2018-JYBZZ-XS005). Protokollen og resultater i dette papiret kommer fra artikkelen Involvering av normalisert Glial Fibrillary Sure Protein uttrykk i Hippocampi i Antidepressant-Like effekter av Xiaoyaosan på kronisk stresset mus av Dr. Xiu-Fang Ding, et al.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Chinese Herbs | Tongrentang (Bozhou, AnHui) Decoction Pieces Limited Company | - | The drugs were extracted by the Chinese medicine preparation room of the China-Japan Friendship Hospital, distilled water was used to prepare the suspension of Xiaoyaosan, and the dose was 0.25 g/kg/d. |
| Fluoxetine | PATHEON FRANCE | 5545A | The distilled water was used to prepare the suspension of fluoxetine, and the dose 2.6 mg/kg/d. |
| C57BL/6j mice | Beijing Vital River of the Charles River Company | SCXK 2011-0004 | 60 healthy male C57BL/6J mice aged 12 weeks were purchased from Beijing Vital River of the Charles River Company. |
| Mouse cage | Styling Biotechnology | 34853016 | 318×202×135 mm |
| Distilled Water | - | - | The water was used througout the experiment. |
| Sucrose | Sigma | - | The sucrose was used in the sucrose preference test to prepare 1% sucrose solution. |
| ACS-2EAS Electronic Balance | Beijing Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd. | - | It was used to weigh the avoirdupois of mice at different stages. |
| Wooden Black Lusterless Box | - | - | (40 cm x 40 cm x 15 cm), divided into 25 equal squares by blue lines. |
| WV-CP470 Camera | Panasonic, Japan | - | A HD digital camera which was used for recording the whole process of the open field test. |
| Etho Vision 3.0 Software | Noldus, Wageningen, Holland | - | A video-tracking system which was used to evaluate the locomotor function and emotionality of mice. |
| SPSS Statistics 21.0 Software | IBM | - | SPSS 21.0 software was used to analyze the data, one-way ANOVA or non-parametric test was used for general data based on normality test and homogeneity test for variance, and LSD method was adopted for the comparisons between groups. |
| Graphpad Prism 6.0 Software | Graphpad Software,Inc.USA | - | Graphpad Prism 6.0 software was used to draw statistical graphs. |
References
- Chrousos, G. P., Gold, P. W. The concepts of stress and stress system disorders. Overview of physical and behavioral homeostasis. JAMA. 267 (9), 1244-1252 (1992).
- Yao, Y., Huang, H. Y., Yang, Y. X., Guo, J. Y. Cinnamic aldehyde treatment alleviates chronic unexpected stress-induced depressive-like behaviors via targeting cyclooxygenase-2 in mid-aged rats. Journal of Ethnopharmacology. 162, 97-103 (2015).
- Murray, C. J., Lopez, A. D. Global health statistics: a compendium of incidence prevalence and mortality estimates for over 200 conditions. World Health Organization Harvard School of Public Health World Bank. , ii (1996).
- Sackeim, H. A. The definition and meaning of treatment-resistant depression. Journal of Clinical Psychiatry. 62 (16), 10-17 (2001).
- Li, W., et al. The effect of compounds of soothing liver, invigorating spleen, tonifying kidney on the praxiology and immunological function of chronic immobilization stressed rats. Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica. 11, 33-37 (2003).
- Meng, Z. Z., Chen, J. X., Jiang, Y. M., Zhang, H. T. Effect of Xiaoyaosan Decoction on Learning and Memory Deficit in Rats Induced by Chronic Immobilization Stress. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2013 (17), 297154 (2013).
- Zhao, H., Wan, X., Chen, J. X. A mini review of traditional Chinese medicine for the treatment of depression in China. American Journal of Chinese Medicine. 37 (02), 207-213 (2009).
- Gao, X., et al. Metabonomic study on chronic unpredictable mild stress and intervention effects of Xiaoyaosan in rats using gas chromatography coupled with mass spectrometry. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 690-699 (2011).
- Li, P., et al. CNP signal pathway up-regulated in rectum of depressed rats and the interventional effect of Xiaoyaosan. World Journal of Gastroenterology. 21 (5), 1518 (2015).
- Li, X. J., et al. Xiaoyaosan exerts anxiolytic-like effects by down-regulating the TNF-α/JAK2-STAT3 pathway in the rat hippocampus. Scientific Reports. 7 (1), 353 (2017).
- Jun-Sheng, T., et al. Dynamic analysis of the endogenous metabolites in depressed patients treated with TCM formula Xiaoyaosan using urinary (1)H NMR-based metabolomics. Journal of Ethnopharmacology. 158, 1-10 (2014).
- Dai, Y., et al. Metabolomics study on the anti-depression effect of xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 128 (2), 482-489 (2010).
- Zhou, Y., et al. Antidepressant-like effects of the fractions of Xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 236-244 (2011).
- Wang, P. S., et al. The Costs and Benefits of Enhanced Depression Care to Employers. Archives of General Psychiatry. 63 (12), 1345-1353 (2006).
- Pirraglia, P. A., Rosen, A. B., Hermann, R. C., Olchanski, N. V., Neumann, P. Cost-utility analysis studies of depression management: a systematic review. American Journal of Psychiatry. 161 (12), 2155-2162 (2004).
- Wang, S. X., et al. Xiaoyaosan Decoction Regulates Changes in Neuropeptide Y and Leptin Receptor in the Rat Arcuate Nucleus after Chronic Immobilization Stress. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine. 2012 (4), 381278 (2012).
- Zhu, X., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behavior in Rats through Modulation of β-Arrestin 2-Mediated Pathways in Hippocampus. Evidence-based Complementary and Alternative. 2014, (2014).
- Ding, X. F., et al. Involvement of Normalized Glial Fibrillary Acidic Protein Expression in the Hippocampi in Antidepressant-Like Effects of Xiaoyaosan on Chronically Stressed Mice. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2017, 1960584 (2017).
- Ding, X. F., et al. Involvement of the glutamate/glutamine cycle and glutamate transporter GLT-1 in antidepressant-like effects of Xiao Yao san on chronically stressed mice. BMC Complementary & Alternative Medicine. 17 (1), 326 (2017).
- Murua, V. S., Gomez, R. A., Andrea, M. E., Molina, V. A. Shuttle-box deficits induced by chronic variable stress: reversal by imipramine administration. Pharmacol Biochem Behav. 38 (1), 125 (1991).
- Duan, J. J., et al. Pharmacokinetics of 5-fluorouracil and cyclophosphamide in depression rats. European Review for Medical & Pharmacological Sciences. 16 (4), 427-436 (2012).
- Cao, X., et al. Astrocyte-derived ATP modulates depressive-like behaviors. Science Foundation in China. 19 (1), 56 (2013).
- Kirshenbaum, G. S., et al. Decreased neuronal Na+, K+ -ATPase activity in Atp1a3 heterozygous mice increases susceptibility to depression-like endophenotypes by chronic variable stress. Genes Brain & Behavior. 10 (5), 542-550 (2011).
- Liu, X. J., et al. Urinary metabonomic study using a CUMS rat model of depression. Magnetic Resonance in Chemistry. 50 (3), 187-192 (2012).
- Zhu, S., et al. Unpredictable chronic mild stress induces anxiety and depression-like behaviors and inactivates AMP-activated protein kinase in mice. Brain Research. 1576, (2014).
- Yang, C., Wang, G., Wang, H., Liu, Z., Wang, X. Cytoskeletal alterations in rat hippocampus following chronic unpredictable mild stress and re-exposure to acute and chronic unpredictable mild stress. Behavioural Brain Research. 205 (2), 518-524 (2009).
- Ding, X. F., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behaviors in Rats with Chronic Immobilization Stress through Modulation of Locus Coeruleus-Norepinephrine System. Evidence-Based Complementary and Alternative. , 605914 (2014).
- Wu, L. L., et al. Antidepressant-Like Effects of Fractions Prepared from Danzhi-Xiaoyao-San Decoction in Rats with Chronic Unpredictable Mild Stress: Effects on Hypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis, Arginine Vasopressin, and Neurotransmitters. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2016 (3), 1-11 (2016).
- Stanford, S. C. The Open Field Test: reinventing the wheel. Journal of Psychopharmacology. 21 (2), 134 (2007).
- Zeldetz, V., et al. A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats. Journal of Visualized Experiments. (132), e57137 (2018).
- Willner, P. Chronic mild stress (CMS) revisited: consistency and behavioural-neurobiological concordance in the effects of CMS. Neuropsychobiology. 52 (2), 90-110 (2005).
- Wood, G. E., Norris, E. H., Waters, E., Stoldt, J. T., Mcewen, B. S. Chronic immobilization stress alters aspects of emotionality and associative learning in the rat. Behavioral Neuroscience. 122 (2), 282-292 (2008).
