Summary
Här presenterar vi ett protokoll för att upprätta depressiva musmodell, iaktta de beteendeförändringar som är associerad med kronisk oförutsägbara mild stress (CUMS) och utvärdera den antidepressiva effekten av Xiaoyaosan.
Abstract
Förutom standardiserade användning av antidepressiva läkemedel och psykoterapi har användningen av traditionell kinesisk medicin lett till en generell förbättring av patienter med egentlig depression (MDD). Syftet med denna studie var därför att fastställa depressiva musmodell, iaktta de beteendeförändringar som är associerad med kronisk oförutsägbara mild stress (CUMS) och sedan utvärdera den antidepressiva effekten av Xiaoyaosan. Mössen delades slumpmässigt in i fyra grupper: en kontrollgrupp, en modellgrupp, en behandlingsgrupp med Xiaoyaosan och en behandlingsgrupp med fluoxetin. Alla möss var individuellt hålls i burar och depression var inducerad i möss genom att utsätta dem för flera designade manipulationer av CUMS för 21 dagar, som beskrivs i protokollet. Mössen i kontrollgruppen och modell koncernen fick 0,5 mL destillerat vatten, medan möss i behandlingsgrupperna fick antingen Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dag) eller fluoxetin (2,6 mg/kg/dag). De läkemedel som används i studien gavs intragastrically dagligen under hela tre veckor. Att uppskatta de depressiva-liknande beteenden, en rad parametrar inklusive coat staten, kroppsvikt, öppna fältet testresultat och sackaros preferens testresultat spelades in. Analys av data visade att beteenden av modell möss var signifikant jämfört med beteenden av mössen i kontrollgruppen, vilket förbättrades genom behandling av Xiaoyaosan och fluoxetin. De aktuella resultaten visade de antidepressiva effekterna av Xiaoyaosan på beteenden av CUMS-inducerad möss och avslöjade att föreningar från Xiaoyaosan receptet kan vara värt för behandling av depression, med tanke på deras positiva effekter på depression-liknande beteenden.
Introduction
MDD är en kronisk, mycket återkommande mental sjukdom att presenter med ihållande nedstämdhet, depression, låg självkänsla, psykisk utvecklingsstörning, förlust av intresse, sömnstörningar, djupt pessimistisk eller suicidala tendenser; Det har orsakat stor skada för människors hälsa och social stabilisering1. Det har blivit en av världens främsta orsaken till funktionshinder, och det kan vara en av de främsta ledande orsakerna till sjukdomsbördan 2030 enligt Världshälsoorganisationen2,3. Antidepressiva läkemedel och psykoterapi anses för närvarande vara det första valet att behandla MDD. Dock ett enormt antal patienter som diagnostiserats med MDD svarar inte på kontinuerlig medicinering eller behandling, och de listas som att ha behandlingsresistent depression4.
Xiaoyaosan är en klassisk kinesisk förening5 som har använts för behandling av psykologiska sjukdomar för tusentals år sedan Songdynastin i Kina6. Den består av 8 kinesiska örter: Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Radix Angelicae Sinensis, Poria, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Radix Glycyrrhizae, Rhizoma Zingiberis Recens , och Herba Menthae. Xiaoyaosan innehåller flera beståndsdelar, har flera mål, och utnyttjar flera vägar7. Xiaoyaosan har ofta visat sig vara en säker och effektiv formel för behandling av olika sjukdomar relaterade till psykiska sjukdomar, och moderna studier har också fokuserat på anti-depression mekanismen av detta sammansatta8,9, 10. Patogenesen av MDD är ännu oklart, även om det finns mångskiftande hypoteser, inklusive Mao hypotesen, signalsubstansen receptor hypotesen, neuroendokrina funktion ändra hypotesen, immunsystemet abnormitet hypotesen, etc. Flera studier har visat att den antidepressiva effekten av Xiaoyaosan har en anslutning med de materiella baserna av den ovanstående hypoteser11,12, och dess terapeutiska verkan godsspecifikationer som en förbättring av depressiva-liknande beteenden13.
Dessutom med förekomsten av depression, har moderna samhället drabbats av minskningar i arbetskraften, förtidspensioneringar och dyra behandlingar14. Dyr behandling behöver strikta läkarvård, vilket innebär en rad ökade sjukvårdskostnader och exakt förutse exakt oönskade resultat samt biverkningar15. Kinesiska örten Xiaoyaosan har hjälpmedelskomponenter, unika effekter och mindre biverkningar. Dess tillämpning kan spela en roll för att minska bördan av modern medicinsk behandling. Därför, för att ge en mer teoretisk grund för tillämpningen av Xiaoyaosan, en alternativ klinisk behandling bör erbjudas för behandling av depression, incidensen av som ökar år för år och bör förbättra människors hälsa samtidigt. Detta dokument beskriver ett protokoll som inbegriper användning av Xiaoyaosan att förhindra de depressiva-liknande beteenden genom att upprätta den depressiva modellen av musen. Det öppna fälttest och sackaros preferens test användes för att kontrollera de antidepressiva effekterna av Xiaoyaosan.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Detta protokoll godkändes av animaliskt etikkommitté Beijing University of kinesisk medicin och var enligt alla riktlinjer för vård och användning av laboratorium djur i Kina. Det fanns ingen dödsolycka situation under det experimentella förfarandet, och inga djur behövs för att bli euthanized i denna studie.
1. förbereda droger för experimentet
Obs: De kinesiska örterna köptes och sedan bestyrkts av Dr. B. Liu vid Beijing University of kinesisk medicin. Xiaoyaosan innehåller följande åtta traditionella kinesiska läkemedel i ett förhållande av 6:6:6:6:3:6:2:2: Radix Angelicae Sinensis, Radix Paeoniae Alba, Poria, Radix Bupleuri, Radix Glycyrrhizae, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Herba Menthae och Rhizoma Zingiberis Recens.
- Förbereda Xiaoyaosan som tidigare beskrivits16.
Obs: Vi extraherade dessa föreningar i kinesisk medicin beredningslokalen av sjukhuset Kina-Japan vänskap och utvinning avkastningen var 18,8%. - Kontrollera kvaliteten på Xiaoyaosan av högpresterande liquid chromatography-masspektrometri analys (LC-MS/MS)17.
2. förbereda möss för experimentella förfarandet
Obs: För experimentell förfarande, 60 friska C57BL/6J hanmöss åldern 12 veckor var utvalda, med varje mus väger mellan 18 och 22 g.
- Hålla möss individuellt i burar i ett typiskt specifik patogen fri (SPF) laboratorium djur rum (22 ± 1 ° C, 12 h/12 h mörk/ljus cykel, relativ luftfuktighet: 30 – 40%) i en vecka innan CUMS förfarandet.
- Slumpmässigt dela alla möss i en kontrollgrupp, en modellgrupp, en Xiaoyaosan behandlingsgrupp eller en fluoxetin behandlingsgrupp enligt sin kroppsvikt. Varje grupp har 15 möss.
- Före initiering av försöket, antal möss i varje grupp på stjärten med en märkning penna.
- Testa alla möss med en fem dagars sackaros preferens-testet (se steg 5) och ett öppet fält-test (se steg 6).
3. induktion av Depression hos möss
Obs: För att framkalla depression, genomgick möss i modellgruppen och två behandlingsgrupperna CUMS för 21 dagar18. Planen kan ändras enligt den konkreta situationen, men principen att i samma stressfaktor inte kan användas kontinuerligt bör följas.
-
Exponera möss dagligen till två av de följande sju stressfaktorerna för 21 dagar19. Våra modellering planen är utformad enligt följande:
- På måndag, exponera möss till mat deprivation (tom matningen av varje bur för 24 h, klockan 8:00 till 8:00) och vatten deprivation (ta bort den dricka flaskan varje bur för 24 h, klockan 8:00 till 8:00).
- På tisdag, exponera möss till återhållsamhet stress (hindra möss i en liten plast badkar för 3 h, 8:00 a.m. till 11:00) och tomma burar (ta bort stoppning i varje bur för 11 h, 8:00 till 19:00).
- På onsdag, exponera möss till våta och smutsiga burar (Häll vatten i varje bur och hålla våt för 24 h, klockan 8:00 till 8:00) och trångt burar (sätta fem möss i en bur för 24 h, klockan 8:00 till 8:00).
- På torsdag, exponera möss till återhållsamhet stress och iskalla bad20,21 (kraft varje mus för att simma i ett akvarium med klart glas med isvatten för 5 min).
- På fredag, exponera möss till våta och smutsiga burar och mat deprivation.
- På lördag, exponera möss till återhållsamhet stress och trånga burar.
- På söndag, exponera möss till tomma burar och iskalla bad.
- Registrera den pälsen tillstånd och kroppsvikt varje vecka fram till slutet av modellering (dag 21). Beräkna den totala poängen i den päls staten som summan av poängen från sju olika kroppsdelar: huvud, hals, dorsala coat, ventrala coat, framtassarna, svans och hind tassar. En poäng indikerar en välskött päls och noll poäng indikerar en ovårdad coat22.
- Utföra en femdagars sackaros preferens test (se steg 5) och ett öppet fält-test (se steg 6) i slutet av experimentet.
4. administration av Xiaoyaosan
Obs: Dosen av Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dag) valdes på grundval av dess tillfredsställande effekt som tidigare beskrivits9.
- Under experimentet, använda destillerat vatten att förbereda Xiaoyaosan och fluoxetin upphängningarna och se till att använda omedelbart.
- Ger 0,5 mL destillerat vatten till mössen i kontrollgruppen och modell av intragastrisk tillförsel varje dag innan modellering. Samtidigt ger Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dag) eller fluoxetin (2,6 mg/kg/dag) till möss i de två behandlingsgrupperna.
5. sackaros preferens Test
Obs: Ingen vatten eller mat deprivation tillämpades före provningen. Protokollet utfördes som tidigare rapporterats23.
- På de första två dagarna, hus mössen individuellt med två flaskor fyllda med kranvatten.
- På de kommande två dagarna, ge mössen två flaskor fyllda med 1% sackaroslösning.
- Den sista dagen, ge mössen två flaskor för 24 h, en med kranvatten och den andra med 1% sackaroslösning. För att eliminera en sida preferens av möss i dricka beteende, växla positionen för de två flaskorna efter 12 h.
- Spela in volymen (mL) av både konsumerade sackaroslösning och kranvatten. Beräkna inställningen sackaros som följer: sackaros preferens (%) = sackaros konsumtion/totalt flytande konsumtion × 100%.
6. öppna fälttest
- Utför testet öppet fält i ett svagt upplysta och tysta rum med en fyrsidig svart glanslös trälåda. Dela golvet i 25 lika fyrkanter med blå linjer.
- Ren rutan Öppna-fältet med 5% alkohol före tillträde i varje mus. Sedan placera musen i mitten av fältet öppna försiktigt.
- Avbryta en högupplöst digitalkamera cirka 200 cm precis ovanför fältet, och spela in beteendet hos varje mus för 5 min.
- Bedöma möss beteendemässiga video med video-mjukvara system och registrera data av den totala kör avstånd och antal poster i zonen center.
- Analysera uppgifter om den totala sträckan flyttade och antalet poster i zonen center genom statistisk programvara.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Observera att resultaten tidigare har publicerats av Dr Xiu-Fang Ding, o.a. 18
Data var uttryckt som medelvärde ± standardavvikelsen för medelvärdet (SEM). En envägs ANOVA eller ett icke-parametriska test användes för allmänna data baserat på det normalitet-testet och test för homogenitet av variansen. LSD testet användes för jämförelser mellan grupper. Dessutom upprepade mätningen processen för den allmänna linjära modellen (GLM) användes för att genomföra one-way ANOVA analys för upprepad uppmätta data (coat Poäng och kroppsvikt), och en multivariat analysprocess av variansen antogs för att göra jämförelser mellan grupperna vid varje tidpunkt punkt (LSD-metoden).
Det fysiska tillståndet av CUMS-inducerad möss
Efter utsätta möss till tre veckor av CUMS för induktion av depression, förmåddes en gradvis dystrofi av pälsen statligt i modellgruppen; dystrofi inte presentera efter två veckor av stress, men den har förvärrats i slutet av förfarandet CUMS (tre veckor) och kappa poängen minskade signifikant jämfört med kontrollgruppen (F (3, 56) = 25.08, p = 0.000). Coat delstaten möss förbättrades särskilt efter kontinuerlig behandling med Xiaoyaosan eller fluoxetin jämfört med modellgruppen (F (3, 56) = 25.08, både p = 0,001, figur 1a). Enligt veckans kropp vikt uppgifter i varje grupp, en betydande minskning i kroppsvikt manifesterades av den tredje veckan (F (3, 56) = 16.149, p = 0.000, figur 1b), medan Xiaoyaosan eller fluoxetin behandling ökat betydligt kroppen vikt jämfört med modellgruppen (F (3, 56) = 16.149, både p = 0,001).
Sackaros preferens testet
Innan stress exponering hade möss i alla grupper en liknande sackaros preferens (baseline tillstånd, figur 2a). Emellertid en betydande nedgång i sackaros preferens observerades efter tre veckor av stress förfarande i modellgruppen (F (3, 56) = 41.379, p = 0.000, figur 2b). Xiaoyaosan och fluoxetin behandling effektivt omvända dessa förändringar och ökat betydligt sackaros preferensen jämfört med modellgrupp (F (3, 56) = 41.379, båda p = 0.000).
Öppna fältet testet
Innan stress exponering uppvisade alla möss en liknande beteende stat (baseline villkor. Figur 2 c och 2d). Dock flyttade stress exponering i tre veckor, det totala avståndet i fem minuter avsevärt skilde sig mellan grupperna. Den totala sträckan rörd av möss i modellgruppen var signifikant lägre (F (3, 56) = 4.216, p = 0,003, figur 2f) än i kontrollgruppen. Dessutom var antalet poster i den centrala zonen också signifikant skillnad mellan grupperna. Antalet poster i den centrala zonen i modellgruppen minskade signifikant (F (3, 56) = 2.809, p = 0,013, figur 2e) jämfört med kontrollgruppen. Fluoxetin behandling hindrade dessa förändringar i locomotion trend och avsevärt förbättrat det totala avståndet och antalet poster i den centrala zonen (F (3, 56) = 4.216, p = 0,029; F (3, 56) = 2.809, p = 0,004). Ett liknande fenomen observerades också i gruppen Xiaoyaosan behandling (F (3, 56) = 4.216, p = 0,014; F (3, 56) = 2.809, p = 0,029).
Figur 1 : Effekter av Xiaoyaosan på CUMS-inducerade förändringar i möss aggregationstillstånd. Mössen rock state (en) och kroppsvikt (b) mättes varje vecka under perioden stress. Data var uttryckta i medelvärde ± SEM, n = 15 per grupp. ** p < 0,001 kontra kontroll; ΔΔ p < 0,001 kontra modellen. Denna siffra har ändrats från Ding, o.a. 18 Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2 : Effekter av Xiaoyaosan på CUMS-inducerad depressiva-liknande beteenden. Ett batteri av beteendemässiga tester genomfördes och följande parametrar mättes: sackaros preferens (a, b), antal poster i zonen center (c, e) och den totala sträckan flyttade (rörelseaktivitet) (d, f). Data var uttryckta i medelvärde ± SEM, n = 15 per grupp. * p < 0,05, *p < 0,01 och *p < 0,001 kontra kontroll; Δ p < 0,05, ΔΔp < 0,01 och ΔΔΔp < 0,001 kontra modell. Denna siffra har ändrats från Ding, o.a. 18 Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Den CUMS-modell som används i denna studie är en gemensam metod för att fastställa stress diates modell av depression24. De flesta manifestationer av CUMS kan återställas av antidepressiva medel, som angivit att denna modell metod har en stark prediktiva giltighet25. Med denna metod, djur får kronisk oförutsägbara stressande stimuli och core symtom på egentlig depression, inklusive minskad plats preferens luftkonditionering, likgiltighet och nedsatt emotion-liknande beteenden26. Här, i detta protokoll, kan kontinuerlig användning av Xiaoyaosan eller fluoxetin förbättra depressiva-liknande beteenden av CUMS-inducerad modell möss enligt resultaten av experimentet; fluoxetin är som en positiv kontroll drog att bevisa ingripande effekten av Xiaoyaosan.
Utvärdering av pälsen poäng, till skillnad från det öppna fältet test, tvingade simning test, eller nyhet undertryckta utfodring test, är ett mått som inte är associerade med depression hos människor men är den mest utbredda, tillförlitliga och väl validerad metoden för depressiva modellen mus27. I den aktuella studien, en gradvis dystrofi coat statens i modellgruppen förmåddes och kan uppvisa inte efter två veckor av stress men försämrades i slutet av förfarandet CUMS (tre veckor), medan kroppsvikten inte skiljde sig signifikant mellan grupperna efter en vecka av stress exponering. Skillnaden på kroppsvikt i varje grupp började dock växa fram efter modellering i två veckor, vilket leder till en efterföljande minskning i slutet av tre veckor. Resultaten tyder på att dessa förändringar i fysiska tillstånd av CUMS-inducerad möss kunde vändas genom både Xiaoyaosan och fluoxetin behandling, vilket tyder på att Xiaoyaosan skulle kunna förbättra de fysiska tillstånd av deprimerad möss.
För att ytterligare validera CUMS modellen och verifiera effekten av den förening som används i detta protokoll, användes ett sackaros preferens test och ett öppet fält-test för att bedöma de möjliga depressiva beteenden i CUMS-inducerad möss. Minskning av likgiltighet i sackaros preferens användes för att utvärdera det depressiva-liknande tillståndet hos gnagare, medan öppna fältet testet, som ett djurs psykologiska test, ofta används för att utvärdera motorisk funktion och emotionalitet gnagare28. Resultatet visade att 3 veckor av stress exponering hade en tydlig påverkan på sackaros preferensen av möss, och likgiltighet återfördes genom både Xiaoyaosan och fluoxetin behandlingar. Öppna fältet testet används ofta för att bedöma motorisk funktion och emotionalitet i laboratorium djur29. I denna studie användes det för att analysera depressiva beteenden. Resultaten av det öppna fältet testet visade att det totala avståndet rörd av möss i modellgruppen var betydligt lägre än i kontrollgruppen. Dessutom var antalet poster i den centrala zonen av modellgruppen möss betydligt lägre än för gruppen som behandlades av möss, som föreslog att CUMS-inducerad möss visas depressiva-liknande beteenden. Studien visade också att Xiaoyaosan och fluoxetin kunde lindra de förändringar som presenteras i det öppna fält testet.
I samförstånd med de liknande resultat som diskuterats i tidigare studier, visade detta papper att CUMS orsakar en minskning av sackaros konsumtion och rörelseaktivitet. Kontinuerlig användning av Xiaoyaosan var effektivt för förebyggande och behandling av CUMS-inducerad depression hos möss. Många studier har undersökt depression, en avancerad förståelse av en djurmodell kan vara nyckeln till att klargöra mekanismen av depression30. Den CUMS metod som beskrivs i detta protokoll kan effektivt Visa tillståndet depression av möss. Till skillnad från den kronisk mild stress (CMS) eller kronisk immobilisering stress (CIS) metod31,32ligger den viktigaste punkten av CUMS i valet av oförutsägbara stressfaktorer och rationell användning av modell utvärdering. För att ytterligare bekräfta metoden och resultatet visas i detta protokoll, bör framtida arbete omfatta val av fler stressfaktorer och utvärderingsmetoder för CUMS metod och upptäckt av de långsiktiga effekterna av Xiaoyaosan för 28-48 dagar av CUMS.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har något att avslöja.
Acknowledgments
Denna forskning stöddes av bidrag från National Natural Science Foundation Kina (nr 81630104, nr 81473597) och den grundläggande forskningsmedel för Central universiteten (nr 2018-JYBZZ-XS005). Protokoll och resultaten visade i denna uppsats härstammar från artikeln Inblandning av normaliserade Glial Fibrillary sura proteinuttryck i Hippocampi i Antidepressant-Like effekter av Xiaoyaosan på kroniskt stressade möss av Dr. Xiu-Fang Ding, o.a.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Chinese Herbs | Tongrentang (Bozhou, AnHui) Decoction Pieces Limited Company | - | The drugs were extracted by the Chinese medicine preparation room of the China-Japan Friendship Hospital, distilled water was used to prepare the suspension of Xiaoyaosan, and the dose was 0.25 g/kg/d. |
| Fluoxetine | PATHEON FRANCE | 5545A | The distilled water was used to prepare the suspension of fluoxetine, and the dose 2.6 mg/kg/d. |
| C57BL/6j mice | Beijing Vital River of the Charles River Company | SCXK 2011-0004 | 60 healthy male C57BL/6J mice aged 12 weeks were purchased from Beijing Vital River of the Charles River Company. |
| Mouse cage | Styling Biotechnology | 34853016 | 318×202×135 mm |
| Distilled Water | - | - | The water was used througout the experiment. |
| Sucrose | Sigma | - | The sucrose was used in the sucrose preference test to prepare 1% sucrose solution. |
| ACS-2EAS Electronic Balance | Beijing Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd. | - | It was used to weigh the avoirdupois of mice at different stages. |
| Wooden Black Lusterless Box | - | - | (40 cm x 40 cm x 15 cm), divided into 25 equal squares by blue lines. |
| WV-CP470 Camera | Panasonic, Japan | - | A HD digital camera which was used for recording the whole process of the open field test. |
| Etho Vision 3.0 Software | Noldus, Wageningen, Holland | - | A video-tracking system which was used to evaluate the locomotor function and emotionality of mice. |
| SPSS Statistics 21.0 Software | IBM | - | SPSS 21.0 software was used to analyze the data, one-way ANOVA or non-parametric test was used for general data based on normality test and homogeneity test for variance, and LSD method was adopted for the comparisons between groups. |
| Graphpad Prism 6.0 Software | Graphpad Software,Inc.USA | - | Graphpad Prism 6.0 software was used to draw statistical graphs. |
References
- Chrousos, G. P., Gold, P. W. The concepts of stress and stress system disorders. Overview of physical and behavioral homeostasis. JAMA. 267 (9), 1244-1252 (1992).
- Yao, Y., Huang, H. Y., Yang, Y. X., Guo, J. Y. Cinnamic aldehyde treatment alleviates chronic unexpected stress-induced depressive-like behaviors via targeting cyclooxygenase-2 in mid-aged rats. Journal of Ethnopharmacology. 162, 97-103 (2015).
- Murray, C. J., Lopez, A. D. Global health statistics: a compendium of incidence prevalence and mortality estimates for over 200 conditions. World Health Organization Harvard School of Public Health World Bank. , ii (1996).
- Sackeim, H. A. The definition and meaning of treatment-resistant depression. Journal of Clinical Psychiatry. 62 (16), 10-17 (2001).
- Li, W., et al. The effect of compounds of soothing liver, invigorating spleen, tonifying kidney on the praxiology and immunological function of chronic immobilization stressed rats. Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica. 11, 33-37 (2003).
- Meng, Z. Z., Chen, J. X., Jiang, Y. M., Zhang, H. T. Effect of Xiaoyaosan Decoction on Learning and Memory Deficit in Rats Induced by Chronic Immobilization Stress. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2013 (17), 297154 (2013).
- Zhao, H., Wan, X., Chen, J. X. A mini review of traditional Chinese medicine for the treatment of depression in China. American Journal of Chinese Medicine. 37 (02), 207-213 (2009).
- Gao, X., et al. Metabonomic study on chronic unpredictable mild stress and intervention effects of Xiaoyaosan in rats using gas chromatography coupled with mass spectrometry. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 690-699 (2011).
- Li, P., et al. CNP signal pathway up-regulated in rectum of depressed rats and the interventional effect of Xiaoyaosan. World Journal of Gastroenterology. 21 (5), 1518 (2015).
- Li, X. J., et al. Xiaoyaosan exerts anxiolytic-like effects by down-regulating the TNF-α/JAK2-STAT3 pathway in the rat hippocampus. Scientific Reports. 7 (1), 353 (2017).
- Jun-Sheng, T., et al. Dynamic analysis of the endogenous metabolites in depressed patients treated with TCM formula Xiaoyaosan using urinary (1)H NMR-based metabolomics. Journal of Ethnopharmacology. 158, 1-10 (2014).
- Dai, Y., et al. Metabolomics study on the anti-depression effect of xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 128 (2), 482-489 (2010).
- Zhou, Y., et al. Antidepressant-like effects of the fractions of Xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 236-244 (2011).
- Wang, P. S., et al. The Costs and Benefits of Enhanced Depression Care to Employers. Archives of General Psychiatry. 63 (12), 1345-1353 (2006).
- Pirraglia, P. A., Rosen, A. B., Hermann, R. C., Olchanski, N. V., Neumann, P. Cost-utility analysis studies of depression management: a systematic review. American Journal of Psychiatry. 161 (12), 2155-2162 (2004).
- Wang, S. X., et al. Xiaoyaosan Decoction Regulates Changes in Neuropeptide Y and Leptin Receptor in the Rat Arcuate Nucleus after Chronic Immobilization Stress. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine. 2012 (4), 381278 (2012).
- Zhu, X., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behavior in Rats through Modulation of β-Arrestin 2-Mediated Pathways in Hippocampus. Evidence-based Complementary and Alternative. 2014, (2014).
- Ding, X. F., et al. Involvement of Normalized Glial Fibrillary Acidic Protein Expression in the Hippocampi in Antidepressant-Like Effects of Xiaoyaosan on Chronically Stressed Mice. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2017, 1960584 (2017).
- Ding, X. F., et al. Involvement of the glutamate/glutamine cycle and glutamate transporter GLT-1 in antidepressant-like effects of Xiao Yao san on chronically stressed mice. BMC Complementary & Alternative Medicine. 17 (1), 326 (2017).
- Murua, V. S., Gomez, R. A., Andrea, M. E., Molina, V. A. Shuttle-box deficits induced by chronic variable stress: reversal by imipramine administration. Pharmacol Biochem Behav. 38 (1), 125 (1991).
- Duan, J. J., et al. Pharmacokinetics of 5-fluorouracil and cyclophosphamide in depression rats. European Review for Medical & Pharmacological Sciences. 16 (4), 427-436 (2012).
- Cao, X., et al. Astrocyte-derived ATP modulates depressive-like behaviors. Science Foundation in China. 19 (1), 56 (2013).
- Kirshenbaum, G. S., et al. Decreased neuronal Na+, K+ -ATPase activity in Atp1a3 heterozygous mice increases susceptibility to depression-like endophenotypes by chronic variable stress. Genes Brain & Behavior. 10 (5), 542-550 (2011).
- Liu, X. J., et al. Urinary metabonomic study using a CUMS rat model of depression. Magnetic Resonance in Chemistry. 50 (3), 187-192 (2012).
- Zhu, S., et al. Unpredictable chronic mild stress induces anxiety and depression-like behaviors and inactivates AMP-activated protein kinase in mice. Brain Research. 1576, (2014).
- Yang, C., Wang, G., Wang, H., Liu, Z., Wang, X. Cytoskeletal alterations in rat hippocampus following chronic unpredictable mild stress and re-exposure to acute and chronic unpredictable mild stress. Behavioural Brain Research. 205 (2), 518-524 (2009).
- Ding, X. F., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behaviors in Rats with Chronic Immobilization Stress through Modulation of Locus Coeruleus-Norepinephrine System. Evidence-Based Complementary and Alternative. , 605914 (2014).
- Wu, L. L., et al. Antidepressant-Like Effects of Fractions Prepared from Danzhi-Xiaoyao-San Decoction in Rats with Chronic Unpredictable Mild Stress: Effects on Hypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis, Arginine Vasopressin, and Neurotransmitters. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2016 (3), 1-11 (2016).
- Stanford, S. C. The Open Field Test: reinventing the wheel. Journal of Psychopharmacology. 21 (2), 134 (2007).
- Zeldetz, V., et al. A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats. Journal of Visualized Experiments. (132), e57137 (2018).
- Willner, P. Chronic mild stress (CMS) revisited: consistency and behavioural-neurobiological concordance in the effects of CMS. Neuropsychobiology. 52 (2), 90-110 (2005).
- Wood, G. E., Norris, E. H., Waters, E., Stoldt, J. T., Mcewen, B. S. Chronic immobilization stress alters aspects of emotionality and associative learning in the rat. Behavioral Neuroscience. 122 (2), 282-292 (2008).
