Summary
نقدم هنا، وضع بروتوكول لتحسين البارافين تمزيقها. ويجمع هذا الأسلوب قطع والعائمة باستخدام دائرة ترموستاتي بسيطة لتجنب عملية التحويل المطلوبة بالطريقة التقليدية. نتيجة لذلك كانت إلى حد كبير تحسين الكفاءة وعدد المقاطع البارافين سليمة.
Abstract
تقطيع الأنسجة جزءا لا يتجزأ من البارافين يستخدم على نطاق واسع في علم الأنسجة وعلم الأمراض. ومع ذلك، أنها مملة. لتحسين هذا الأسلوب، وضعت العديد من الشركات التجارية أنظمة نقل قسم معقدة باستخدام الماء السائل. لتبسيط هذه التكنولوجيا، أنشأنا طريقة بسيطة باستخدام معدات محلية الصنع الذي يجمع بين قطع والعائمة داخل دائرة ترموستاتي بسيطة؛ ولذلك، أدخل المقاطع تلقائياً حمام الماء على سطح الماء. وقطعت الحصين من العقول الماوس الكبار والكليتين الماوس الكبار وادمغة الفأر الجنينية وعيون الزرد الكبار باستخدام البارافين التقليدية تمزيقها وطريقة عرضها للمقارنة. ويبين التحليل الإحصائي أن لدينا طريقة تحسين حفظ الوقت وإنتاج أعلى جودة المقاطع. وباﻹضافة إلى ذلك، البارافين تقطيع العينة كلها في فترة زمنية قصيرة من السهل لصغار المشغلين.
Introduction
من المهم دراسة الخصائص المورفولوجية في الأبحاث البيولوجية. على الرغم من أن التكنولوجيا الجديدة قد سمح الباحثين مراعاة أهدافها مباشرة من الأنسجة كاملة أو الكائنات الحية1،2،3، قطع العينة إلى أجزاء رقيقة، متبوعاً تلطيخ، تبقى المرحلة الابتدائية الأسلوب فورنوت مورفولوجيا الأنسجة فقط ولكن أيضا البروتين تستهدف مباشرة في الأنسجة. الخفيفة الميكروسكوب يستخدم ثلاثة أنواع المقاطع: البارافين، المجمدة، وسيميثين. على الرغم من أن كريوسيكتيونينج المشتركة لحماية أنتيجينيسيتي الأنسجة، وإعداد نموذج بسيط، مورفولوجيا الأنسجة المحتفظ بها الفقراء وغير مناسب لتقطيع رقيقة4،5. تقطيع البارافين هو الأسلوب الأكثر استخداماً لنستعرض مورفولوجيا حفظت جيدا. كما العينات المجففة تماما وجزءاً لا يتجزأ من الشمع، يمكن تخزين كتل البارافين إلى أجل غير مسمى. وباﻹضافة إلى ذلك، تقطيع البارافين تنتج مقاطع رقيقة تحسين وصول المسبار البيولوجية في مزيد من التجارب، والحد من خلية طبقة تراكب في اتجاه Z.
ومع ذلك، تمزيقها البارافين التقليدية شاقة وتتطلب مهارة المشغل. مقاطع البارافين الخضوع للتثبيت والجفاف، والتضمين، وقطع والعائمة. نقل قسم شرائط من صاحب السكين إلى حمام الماء الأهم من ذلك ضرورية ولكنها صعبة لصغار المشغلين. لا سيما في الهواء الجاف، شرائط القسم سوف تطور بسبب الكهرباء الساكنة ويصعب أن تتكشف على سطح الماء الدافئ. يوصي بتحسين قسم الجودة، يبلل سطح الأنسجة المكشوفة بين مبضع بليد يمر، وتبريد كتل الشمع بغمر لهم في الماء المثلج، أو رفع درجة الرطوبة مع مرطب قرب مبضع6،7 . وتشمل أحدث أساليب لتحسين تمزيقها البارافين التضمين البارافين الهجين، كريوسيكتيونينج8، والقسم التجاري نقل نظام المساعدة9. على الرغم من أن هذه الأساليب تحسين جزئيا البارافين تمزيقها السرعة والجودة، أنها تجعل تمزيقها مرهقة أكثر بكثير، ونظم نقل القسم التجاري غالية الثمن.
في هذا البروتوكول، نحن لشرح كيفية إنشاء معدات بسيطة ورخيصة ومرنة خطوة خطوة، التي يمكن أن تكون مرتبطة إلى صاحب شفرة مبضع الدوارة. وتتألف هذه المعدات قناة قسم وحمام مائي وسخان مع تبديل الكشف عن درجة حرارة. بعد القطع، تتدفق إلى القناة قسم العشرات من الأقسام وأدخل حمام المياه مباشرة، وهكذا تتكشف تلقائياً. وهذا يحسن كفاءة البارافين تمزيقها ويجعل هذه التكنولوجيا أكثر ملاءمة. باستخدام هذا الأسلوب والكبار أكثر أقسام هيبوكامبال الماوس، وأقسام الكلي الماوس الكبار، (E15.5) عمرها يوما 15.5 الجنينية الماوس الدماغ المقاطع والعين الزرد الكبار المقاطع كانت تحصد في وقت أقل وبقيت سليمة أكثر شكلياً. يمكن أيضا استخدام هذا الأسلوب لعينات الأنسجة الأخرى التي تتطلب البارافين المعجل تمزيقها مع تجنب فقدان التمييز القسم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
عليها جميع الأساليب الموصوفة هنا بالعناية بالحيوان واستخدام اللجنة لجامعة نانتشانغ.
1-تجميع المعدات والاتصال مبضع
- تصميم المعلمة كل المتطلبات (الملحق الرقم 1).
- تقديم المعلمة لمصنع محلي لتصنيع لوحات اﻷكريليك.
- تجميع جميع أنحاء في التسلسل: استخدام كلوروفورم لضم 7 لوحات اﻷكريليك التجارية في دبابة مع قسم حمام القناة والمياه (الشكل 1).
تنبيه: كلوروفورم تنتج مواد سامة عندما يجتمع الضوء والأكسجين. قم بتجميع الجهاز في غطاء دخان. - تثبيت الكهربائية والتدفئة من خلال الثقب في المجلس اﻷكريليك #1 (الشكل 2A، رأس السهم).
- لتثبيت وحدة التحكم بدرجة الحرارة، إنشاء حفرة صغيرة على متنها اﻷكريليك #2 استخدام مثقاب كهربائي، وتثبيت كاشف درجة الحرارة (الشكل 2A، سهم). تثبيت الحرارة رقمية على الدبابة (الشكل 2A).
ملاحظة: ينبغي أن يكون الكشف عن درجة الحرارة داخل 1 سم تحت سطح الماء. - لتوفير الوصول إلى السلطة، ضبط الجهد أدناه 24 الخامس قبل تشغيل المعدات.
- إزالة علبة النفايات قسم من مبضع.
- ربط قناة المقاطع مع صاحب بليد مبضع مع سيليكون محايدة للتسرب (الشكل 2).
ملاحظة: لا تشويه أي تسرب السيليكون المحايد فوق الجزء العلوي من النصل حتى أن يتم استبدال شفرة القديمة بسهولة. - الجاف بين عشية وضحاها للسماح كلوروفورم وسيليكون محايدة تسرب الوقت لترسيخ.
- قم بتثبيت الشفرة لصاحب بليد. صب الماء في حوض ماء (الشكل 2). ينبغي أن تلمس سطح الماء فقط الجزء العلوي من الشفرة (الشكل 2D، رأس السهم).
2. البارافين تمزيقها
ملاحظة: غالباً ما تتراكم الحطام على الحواف العليا أو السفلي لكتلة الشمع وسطح الماء. يجب أن يتم مسح هذا الحطام بانتظام.
-
أداء البارافين التقليدية تمزيقها10.
- المشبك العينة جزءا لا يتجزأ من البارافين في مبضع روتاري وبليد في حامل بليد.
- يجب بدوره وقسم العينة.
- نقل الشريط البارافين مقطوع إلى حمام الماء الدافئ 38.5 درجة مئوية.
- اختيار متابعة المقاطع على المجهر الشريحة من سطح الماء بعد تتكشف.
- جاف الشرائح في فرن في 42 درجة مئوية بين عشية وضحاها.
-
تحسين البارافين تمزيقها (الشكل 3)
- قم بتشغيل المعدات.
- فتح السخان مع تبديل الكشف عن درجة الحرارة وضبط درجة حرارة المستهدفة بين 38.0 درجة مئوية إلى 40.0 ° C ل 1 (ح) مقدما الماء دافئ.
- تعديل كتلة البارافين المكتسبة عن طريق تضمين البارافين؛ ثم وضع كتلة البارافين في المشبك كاسيت مبضع وتأمينه.
ملاحظة: تعدل الحدود العليا والسفلي من كتلة البارافين أفقياً لمنع الشريط قسم من تشكيل قوس وأصبح غير قادر على التدفق من خلال قناة أبواب ضيقة. - بسرعة نهج العينة بقطع المقاطع أكثر سمكا.
- ضبط لسماكة قسم مناسب (10 ميكرون للعقول الكبار الماوس والماوس الكبار الكليتين وادمغة الأجنة الماوس، 4 ميكرون لعيون الزرد). بدوره ويجب وسوف تلقائياً أدخل المقاطع قناة المقاطع وحمام.
- قسم العينة في جرة قطع بطيئة وموحدة (الشكل 3A).
ملاحظة: سوف تتغير ثيثيكنيس للقسم الأول بعد أن تم إيقاف ويجب لبضع دقائق. ينبغي الاستعاضة عن ريش المتاح لدى الفروع خدوش على التوالي. - دليل الأقسام في قاعة حمام لتطفو في خط (الشكل 3، 3 ج).
ملاحظة: إذا كان رئيس القسم تتمسك بالجدار الدائرة، استخدام دليل فرشاة لإبقائها عائمة. - تلتزم الأقسام على شرائح المجهر. بعد المقاطع كاملة تتكشف في حوض ماء، عدة أقسام منفصلة مع ملاقط. ثم اعتقالهما من حمام الماء على الشرائح المجهر (3D الشكل).
ملاحظة: المقاطع ينبغي أن يتم انتقاؤها من مؤخرة حمام الماء، كما في قناة المقاطع والامامي من حمام الماء سوف لا يكون بعد أصبح جاهزاً تماما. - الجاف للشرائح عن طريق وضعها في فرن 42 درجة مئوية بين عشية وضحاها. يمكن ثم تخزين الشرائح في درجة حرارة الغرفة إلى أجل غير مسمى.
- استخدام تلوين الهيماتوكسيلين ويوزين (أنه) من أجل التقييم ل تحسين أسلوب8.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
طريقة تحسين زيادة عدد المقاطع البارافين سليمة. نحن اختبار هذا الأسلوب الجديد في الأنسجة هيبوكامبال الماوس الكبار والكليتين الماوس الكبار وادمغة الفأر الجنينية وعيون الزرد. تم إضافة المياه إلى الخزان، وتمت المحافظة على درجة حرارة الماء بين 38.0 درجة مئوية إلى 40.0 ° C. بعد نحو متسلسل إعداد عينات الأنسجة، وقد مقطوع ومقارنة بتقطيع التقليدية. تجنب فقدان قسم الأسلوب الجديد وزيادة نسبة الأقسام سليمة في الحصين الماوس الكبار والكليتين الماوس الكبار، E15.5 الماوس العقول، وعيون الزرد الكبار (الشكل 4 أ، ج 4، 4E، ز 4). وفي الختام، تحسين أسلوبنا تمزيقها بمنع وقوع خسائر في القسم وجني المزيد من المقاطع سليمة كل عينة.
طريقة تحسين انخفض الوقت الذي يقضيه كل عينة. في المقارنة بين الوقت الذي يستغرقه بين الأسلوب التقليدي وأسلوب تحسين لدينا، أجرينا كل سلسلة تمزيقها (من الجزء الأول إلى الجزء الأخير من جهاز) على الحصين الماوس الكبار والكليتين الماوس الكبار، E15.5 الماوس العقول، والكبار عيون الزرد. وتشير النتائج إلى الإسراع بتحسين أسلوب البارافين تمزيقها السرعة في جميع العينات المختبرة (الشكل 4 باء، 4 د، 4F، ح 4). بشكل عام، لدينا أسلوب مسموح به لسرعة عالية الجودة البارافين تمزيقها.
ولاحظ سلسلة المقاطع الشبكية البصرية الزرد تلطيخ ح وه. لتقطيع سلسلة الجزء القرص البصري للشبكية الزرد، كانت الفروع حصادها من تحسين أسلوب أفضل بسلامة أفضل من تلك التي من البارافين التقليدية تمزيقها الأسلوب (الشكل 5A، 5B). وكان هناك لا يوجد فرق كبير بين هاتين الطريقتين فيما يتعلق بنوعية المقاطع الأكثر المقطوع (الشكل 5، 5 د). في بعض الأحيان، نوعية المقاطع التي تحصد من الطريقة التقليدية كانت منخفضة نسبيا (الشكل 5E, 5F).
رقم 1: العملية لتجميع لوحات اﻷكريليك التجاري 7 في دبابة. (أ) عرض عموما لوحات اﻷكريليك 7. (ب-غ) الجمعية التدرجي من الخزان من المجلس # 1 إلى المجلس #7. (ح) خزان الأولية بعد الجمعية العامة. (ط) حجم الخزان العام؛ تمت إزالة الأغشية الواقية على سطح دبابة لمزيد من التثبيت. L = 400 مم، L ' = 220 مم، ح = 122 ملم، ث = 200 ملم. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
رقم 2: مجمع بشكل مناسب المعدات جاهزة للاستخدام- المعدات (A) حالها بعد متصلة مبضع الدوارة. يتم تثبيت مؤشر السهم، كشف درجة الحرارة من خلال ثقب صغير بمثقاب كهربائي. يتم تثبيت رأس السهم، والسخان (الكهربائية والتدفئة) من خلال الثقب في المجلس #1. (ب) منطقة متقطع تضخيم في ميزة، والاتصال بين صاحب بليد مبضع وقناة المقاطع. رأس السهم وحامل شفرة قناة المقاطع متصلة بتسرب السيليكون المحايد. (ج) نفس ب، مع المياه تدفقت وتثبيت شفرة. (د) عرض الجانب من منطقة متقطع في رأس السهم جيم، على سطح الماء قريب من حافة شفرة. فاتو: محول الجهد؛ البنك الدولي: حمام المياه؛ DT: الحرارة الرقمية؛ باء: بليد؛ البوسنة والهرسك: بليد حامل؛ مقرر اتفاقية استكهولم: مقاطع القناة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3: البارافين تحسين عملية تقطيع. الأرقام الموجودة في الزاوية السفلي اليسرى هي المجالات متقطع تضخيم في ألف-دال على التوالي. مؤشرات السهم، القسم الأول. (، أ ') يدخل القسم أقسام القناة فورا ومباشرة بعد قطع. (ب، ب) الشريط مقاطع تقاطع الحدود بين أقسام القناة والمياه الحمام. (ج، ج ') المقاطع تطفو إلى مؤخرة حمام الماء وأصبح جاهزاً تماما. (د، D ') المقاطع يتم انتقاؤها من قبل الشريحة المجهر عندما تصل إلى مؤخرة حمام الماء وهي تكشفت تماما. مقرر اتفاقية استكهولم: مقاطع القناة؛ البنك الدولي، حوض ماء. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 4: تحسين طريقة تقطيع تحسين معدل الكفاءة والعائد إلى حد كبير لأقسام الجامعة-سلسلة- معدل العائد يعادل نسبة الأقسام سليمة في جميع أقسام قطع. البيانات كما هو موضح في يعني ± ووزارة شؤون المرأة والتي حصل عليها نفس المشغل. (أ، ج، ه، ز) طريقة تحسين منع فقدان قسم من الحصين الماوس الكبار (1.429 ± 91.04% N = 3، مقابل 97.63 ± 0.4864% N = 3، ف = 0.0120)، والكبار الماوس الكلي (92.30 ± 0.5689% N = 3، مقابل 95.99 ± 0.7055% N = 3، ف = 0.0153)، E15.5 الماوس الدماغ (90.67% ± 1.549، ن = ± 3 مقابل 97.01 0.2816% N = 3، ع = 0.0158)، وعيون الزرد الكبار (0.9734 ± 91.27% N = 4 مقابل 96.32 ± 0.7217% N = 4، ف = 0.0059). (ب، د، و، ح) تحسين أسلوب حفظ الوقت مقارنة بالأسلوب التقليدي الحصين الماوس الكبار (126.0 مقابل 79.67 3.606 دقيقة ± ± 1.856 دقيقة، N = 3، ف = 0.0003)، الكبار الماوس الكلي (66.67 ± ± مقابل 41.33 مين 1.764 2.186 دقيقة، N = 3، ف = 0.0008)، br الماوس E15.5 العين (99.67 مقابل 52.33 دقيقة 3.480 ± ± 4.333 دقيقة، N = 3، ف = 0.0010)، وعيون الزرد الكبار (48.00 مقابل 30.75 2.160 دقيقة ± ± 1.797 دقيقة، N = 4، ف = 0.0009). * ف < 0.05، * * ف < 0.01، * * * ف < 0.005. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الرقم 5: ح وه تلطيخ أبواب الجامعة-سلسلة الجزء القرص البصري من الزرد عيون المكتسبة من الأساليب التقليدية وتحسين البارافين تمزيقها بنفس المشغل وتقارن. (أ) التقليدية البارافين تمزيقها (المادتان 21). (ب) تحسين البارافين تقطيع (المادتان 24). (ج) مجال متقطع A6. (د) مجال متقطع B7. (ه) مجال متقطع A17. (و) منطقة B19 متقطع. العلامات النجمية، المقاطع ذات جودة ضعيفة نسبيا. رؤساء السهم، القرص البصري؛ أسهم، شديدة تمزق الأنسجة الشبكية. شريط المقياس = 200 ميكرومتر (ألف وباء)؛ شريط المقياس = 50 ميكرومتر (ج، د، ه، و). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
التكميلية الرقم 1: معلمات البعد من لوحات اﻷكريليك التجارية 7- ويمثل العدد طول المقابلة المجلس الهامش. الوحدات: مم- اضغط هنا لتحميل هذا الملف.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
لتحسين البارافين قسم التشكل وإيجاد حل لمشكلة الوقت الضائع أثناء تقطيع البارافين التقليدية، أنشأنا تحسين بارافين تمزيقها الأسلوب الذي يجمع بين القطع وتتكشف. يعتمد هذا الأسلوب محسنة على المعدات البسيطة التي تضم قناة قسم وحمام مائي وسخان مع تبديل الكشف عن درجة حرارة. الشريط قسم يدخل حمام المياه عن طريق القنوات قسم وتتكشف تلقائياً أثناء القطع. ولذلك، هذا الأسلوب يحسن البارافين تمزيقها الجودة والكفاءة التي تم التحقق منها بتقطيع البارافين الحصين الماوس الكبار والكليتين الماوس الكبار، E15.5 الماوس العقول، وعيون الزرد الكبار.
بذلت لتجنب القسم الشباك خلال التقليدية البارافين تمزيقها، تعديلات عديدة، مثل يبلل سطح النسيج والتبريد كتلة الشمع، وزيادة نسبة الرطوبة، والجمع بين، كريوسيكتيونينج،من67 8؛ ولكن هذه التعديلات جعل البارافين تمزيقها أكثر مملة. نظام نقل قسم تجاري الذي يعتمد على الماء السائل حققت نجاحا أكبر. في هذا النظام، القسم اتصالات سطح الماء مباشرة بعد القطع، ومجرى المياه المحركات الكهربائية نقل المقاطع من صاحب بليد إلى حمام الماء الدافئ أقل9. بسبب آليتها، لا يمنع الكهرباء الساكنة تمزيقها، أسفر عن قسم تحسين الجودة. وباﻹضافة إلى ذلك، كما يتجنب هذا النظام يدوياً نقل أقسام من صاحب بليد إلى حمام الماء، بسهولة إتلاف الأجزاء الهشة، كما أنه يساعد في الحصول على مقاطع أرق عالية الجودة.
مع أسلوبنا محسنة، توجه معدات بسيطة في تجربة نظام نقل القسم التجاري مع بعض المزايا. أولاً، أن المعدات أرخص، الذي يمكن تعميم هذا الأسلوب في المختبرات في المناطق النامية، ويمكن أن تكمل نظام نقل القسم التجاري. ثانيا، المياه في المعدات ثابتة وتزعج ابدأ في الفروع، مما يجعل من الممكن الحصول على أبواب أرق. نحن التتالي مقطوع عيون الزرد 2 ميكرومتر سمك باستخدام الأسلوب محسنة، وكانت الفروع المكتسبة ذات جودة أعلى. ثالثا، يتم استخدام أكبر خزان مياه حمام في المعدات التي تسمح أقسام على الأقل 40 تتكشف وتطفو في نفس الوقت، يسمح للشركتين على التعاون. شخص واحد يمكن قص عينات الأنسجة بشكل مستمر وأخرى يمكن أن الأسماك مباشرة أبواب. هذا يقلل من الوقت في انتظار المقاطع للعيان. قطع المتعاقبة بسكتة دماغية شاملة موحدة أيضا يحسن من جودة المقطع.
بنية ومظهر من معدات بسيطة تتطلب التحسين. على سبيل المثال، يمكن أن تكون متكاملة المكونات، مثل السلطة، وسخان، ووحدة تحكم بحرارة، لجعل هذه المعدات أكثر لا يتجزأ والمحمولة. بالإضافة إلى ذلك، ميكروتوميس الدوارة التجارية ذات أحجام مختلفة. للاتصال بالآخرين ميكروتوميس، ينبغي أن تعدل بالزاوية والارتفاع لهذه المعدات. البارافين تمزيقها جنبا إلى جنب مع غيرها من التقنيات الجزيئية يستخدم على نطاق واسع في بيولوجيا الأعصاب ومورفولوجيا الأنسجة وغيرها البحوث حقول11،،من1213. يحتمل أن تكون، يمكن تحسين هذا الأسلوب التفتيش السريرية الكفاءة14،15 والعينات البيولوجية الأخرى خارج الأنسجة ثلاثة أنواع المستخدمة هنا.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب على براءة اختراع هذا الجهاز وتعلن لا تضارب المصالح.
Acknowledgments
هذا العمل كان تدعمها "مؤسسة العلوم الطبيعية الوطنية الصينية" (المنحة رقم 31400936، 31460260) و "العلوم الطبيعية مؤسسة جيانغشي مقاطعة من الصين" (20171BAB215020). ونشكر أيضا البرنامج المشترك بين جامعة نانتشانغ، وجامعة الملكة ماري في لندن لدعم هذا العمل.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Incubator | Boekel Scientific | 133000-2 | |
| Ethanol | Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid | 64-17-5 | |
| Xylene | Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid | 1330-20-7 | |
| Paraplast | Leica | 39601006 | |
| Heated Paraffin Embedding Module | Leica | ||
| Commercial acrylic board | |||
| Trichloromethane | Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid | 67-66-3 | |
| Tubular electric heating element(12 V 200 W) | |||
| Temperature controller(12 V 120 W) | Mingsuo | XH-W3002 | |
| Rotary microtome | Leica | ||
| Neutral silicone sealant | Link the water channel with the microtome knife holder | ||
| Voltage transformer | Dearll | S-250-12 | |
| Disposable blade | Accu-Edge | 4689 | |
| Hematoxylin | Baso Diagnostics Inc. | BA-4025 | |
| Eosin | Baso Diagnostics Inc. | BA-4025 | |
| Microslide | Sail Brand | 7105 | |
| Neutral balsam | Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid | 10004160 | |
| Coverslip | Citoglas | 10212424C | |
| Microscope | Carl Zeiss | ||
| Hydrochloric acid | Xilong Chemical | 7647-01-0 | |
| Water bath for paraffin sections | Leica | ||
| HistoCore Arcadia C - Cold Plate | Leica | ||
| paraffin repellent spray | Thermo Scientific | 9990420 |
References
- Chung, K., Deisseroth, K. CLARITY for mapping the nervous system. Nature Methods. 10 (6), 508-513 (2013).
- Fujita, S. Analysis of neuron differentiation in the central nervous system by tritiated thymidine autoradiography. Journal of Comparative Neurology. 122 (3), 311-327 (1964).
- Mironov, V., Boland, T., Trusk, T., Forgacs, G., Markwald, R. R. Organ printing: Computer-aided jet-based 3D tissue engineering. Trends in Biotechnology. 21 (4), 157-161 (2003).
- Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. Cryosectioning tissues. Cold Spring Harbor Protocols. 3 (8), (2008).
- Viebahn, C., Luttenberg, H. P. A modified anti-roll plate as a remedy for the ill-effects of electrical charge during cryosectioning. Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 37 (7), 1157-1160 (1989).
- Onozato, M. L., Hammond, S., Merren, M., Yagi, Y. Evaluation of a completely automated tissue-sectioning machine for paraffin blocks. Journal of Clinical Pathology. 66 (2), 151-154 (2013).
- Sabaliauskas, N. A., et al. High-throughput zebrafish histology. Methods. 39 (3), 246-254 (2006).
- Chen, T. K., et al. Hybrid-Cut: An Improved Sectioning Method for Recalcitrant Plant Tissue Samples. Journal of Visualized Experiments. (117), e54754 (2016).
- Kucherenko, M. M., et al. Paraffin-Embedded and Frozen Sections of Drosophila Adult Muscles. Journal of Visualized Experiments. (46), e2438 (2010).
- Cornell, W. C., et al. Paraffin Embedding and Thin Sectioning of Microbial Colony Biofilms for Microscopic Analysis. Journal of Visualized Experiments. (133), e57196 (2018).
- Whiteland, J. L., et al. Immunohistochemical detection of T-cell subsets and other leukocytes in paraffin-embedded rat and mouse tissues with monoclonal antibodies. Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 43 (3), 313-320 (1995).
- Tucker, D. K., Foley, J. F., Bouknight, S. A., Fenton, S. E. Sectioning Mammary Gland Whole Mounts for Lesion Identification. Journal of Visualized Experiments. (125), e55796 (2017).
- Venegas-Pino, D. E., Banko, N., Khan, M. I., Shi, Y., Werstuck, G. H. Quantitative Analysis and Characterization of Atherosclerotic Lesions in the Murine Aortic Sinus. Journal of Visualized Experiments. (82), e50933 (2013).
- Lau, S. K., Chu, P. G., Weiss, L. M. CD163: A specific marker of macrophages in paraffin-embedded tissue samples. American Journal of Clinical Pathology. 122 (5), 794-801 (2004).
- Campbell-Thompson, M. L., Heiple, T., Montgomery, E., Zhang, L., Schneider, L. Staining Protocols for Human Pancreatic Islets. Journal of Visualized Experiments. (63), e4068 (2012).
