Summary
هنا يمكننا وصف بروتوكول لإنتاج حصاد الإبر التي يمكن استخدامها لجمع الأنسجة كاملة-سمك الجلد دون التسبب بالجهات المانحة للموقع تندب. يمكن الجمع بين الإبر مع نظام لجمع بسيطة لتحقيق حصاد كبيرة الحجم.
Abstract
ويصف هذه المخطوطة في عملية الإنتاج لجهاز مختبر، المصنوعة من المكونات الجاهزة، التي يمكن استخدامها لجمع ميكروكولومنس أنسجة الجلد كامل-سمك. الحجم الصغير ميكروكولومنس تسمح الجهات المانحة المواقع للشفاء بسرعة دون التسبب في موقع المانحة تندب، بينما الحصاد الكامل-سمك الأنسجة يتيح إدماج جميع مكونات الخلوية وخارج الخلية الأنسجة الجلد، بما في ذلك تلك المرتبطة مع أعمق مناطق الجلد وهياكل الجلد أدنيكسال، التي لم يمكن استنساخها بنجاح باستخدام الأنسجة التقليدية هندسة التقنيات. يمكن أن تطبق ميكروكولومنس مباشرة في الجروح الجلدية لتعزيز الشفاء، أو يمكن استخدامها كمصدر لخلية/الأنسجة الذاتي للنهج هندسة الأنسجة الأخرى. تصنع الإبر الحصاد عن طريق تعديل معيار إبر الإبر، ويمكن استخدامها وحدها لحصاد كميات صغيرة من الأنسجة أو مقترنة بنظام جمع شفط بسيطة (أيضا مصنوعة من اللوازم المختبرية المتاحة عموما) ارتفاع حجم الحصاد لتيسير الدراسات في النماذج الحيوانية الكبيرة.
Introduction
ترقيع الجلد الذاتي هو الدعامة الأساسية لإصلاح الجرح، بل أنه مقيد بندرة موقع الجهات المانحة والاعتلال، مما أدى إلى بذل جهود متضافرة في العقود الأخيرة لتطوير خيارات علاجية جديدة لتحل محل التقليدية ترقيع الجلد1،2 . ونحن مؤخرا بوضع طريقة بديلة لحصاد الجلد تسخير فوائد ترقيع الجلد كامل-سمك مع التقليل من الاعتلال موقع الجهات المانحة. بجمع كامل-سمك الجلد في شكل الصغيرة (~0.5 مم) "ميكروكولومنس"، مواقع الجهات المانحة قادرة على شفاء سريعاً ودون تندب في الظروف العادية (للاستثناءات المحتملة، راجع المقطع المناقشة أدناه)3. ميكروكولومنس يمكن تطبيقها مباشرة في أسرة الجرح للتعجيل بإغلاق الجرح، والحد من انكماش3، واستعادة مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا البشرة والجلد والهياكل الوظيفية أدنيكسال4، التي تعاني من نقص في ترقيع الجلد سبليت-سمك التقليدية أو بدائل الجلد المحورة وراثيا الحالية5. القدرة ميكروكولومنس لتعزيز الشفاء ومواقعهم المانحة للشفاء دون تندب لها سواء بشكل مستقل صودق قبل6،مجموعات البحث الأخرى7.
ونحن قد سبق أن وضعت نظام حصاد مختبر لتمكين مجموعة ميكروكولومنس في الجدول8؛ ومع ذلك، يتكون هذا النظام من العديد من المكونات المخصصة التي لا تتوفر على نطاق واسع. هنا، نحن تصف بالتفصيل هذه العملية لإنتاج حصاد الإبر، فضلا عن نظم جمع بسيطة، مصنوعة من معظمهم من المكونات الجاهزة، التي يمكن استخدامها لتحقيق حصاد كبيرة الحجم. جهاز الموصوفة في هذه المخطوطة مناسب في المختبر وعمل الحيوان، ولكن ليس للاستخدام في البشر. جهاز سريرية مع إزالة إدارة الأغذية والعقاقير لتطبيق هذا الأسلوب في البشر هو متاح تجارياً ولكن لن تناقش بالتفصيل هنا.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
جميع العمل التي تشمل الحيوانات الحية وتمت الموافقة على عينات الأنسجة الحيوانية "ماساشوستس العام المؤسسي الحيوان الرعاية في المستشفيات" واستخدام اللجنة (إياكوك).
1-إنتاج حصاد الإبر
- الإعداد لمرحلة الإنتاج
- تأمين رابط قفل اللوير الإناث على وظيفة، وجبل المنصب على مرحلة تناوب حيث يكون قفل اللوير في وسط المرحلة (الشكل 1أ).
- ضع هذه المرحلة الأولى من التناوب عمودياً، وجبل عمودياً إلى مرحلة تناوب الأفقي، والثاني (الشكل 1ب).
- جبل مرحلة التناوب الأفقي إلى مرحلة ترجمة المحور الثاني (الشكل 1ب).
- ربط تركيبة على سطح مستقرة، مثل الكهربية ضوئية.
- جبل أداة دوارة على نفس التوصيل، مع أداة المتمركزة بالتوازي مع التوصيل وفي تقريبا نفس ارتفاع الرابط قفل اللوير في مرحلة الجمع بين التناوب/الترجمة (الشكل 1ج) بشكل منفصل.
- تثبيت اثنين من العجلات الوقف والأيبوكسي على الأداة دوارة (حصى أصغر حجماً وأقل الماس وقف عجلة على عجلة إنتاج حجر الحصباء أكبر وأعلى) (الشكل 1د).
ملاحظة: عن 9 مم الفرق بين أقطار العجلات اثنين يكفي بوجه عام. - الموقف حمل خفيفة المصدر مع ذراع قابل لتعديل فوق الأداة دوارة، مع الضوء ترمي عجلات القطع.
- ولتعزيز التصور، ضع مجهر تشريح إعداد الإنتاج حتى تركز العدسة على أقراص القطع (الشكل 1ج).
ملاحظة: بدلاً من ذلك، المستخدمين يمكن ارتداء نظارات مكبرة.
- إعادة تشكيل طرف إبرة
- ارتداء نظارات واقية وقناع جراحية للحيلولة دون دخول العينين أو الخطوط الجوية الجسيمات المعدنية الدقيقة.
- اختر الإبر إبر من المناسب قياس الحجم، استناداً إلى الاحتياجات التجريبية.
- وضع علامة على إيقاف طول المقصود في كل إبرة الحصاد.
ملاحظة: للحصاد من جلد الخنازير، الإبر 8 ملم عادة كافية؛ وعلى الرغم من الطول قد تختلف استناداً إلى الاحتياجات التجريبية (مثلاً.، سمك النسيج الجلد المستهدف، إبرة قياس الحجم). عموما، يعمل إبرة 19-مقياس جيد لجلد الخنازير. - انخفاض الإبرة عمودياً إلى أداة دوارة مع السلطة، باستخدام حافة القرص الخارجي قطع بقطع الزائد طول الإبرة، عند النقطة ملحوظ في خطوة 1.2.3.
- قم بتوصيل الإبرة كليلة، وتقصير موصل قفل اللوير الإناث في مرحلة الإنتاج.
- ضبط مرحلة التناوب الأفقي حيث تكون الإبرة بزاوية 12 درجة موازية لأقراص القطع على أداة دوارة (تغيير الزاوية سوف تؤثر على القوة المطلوبة لغرز الإبرة).
- بدوره على ضوء النفقات العامة وتعديل موقفها أثناء مراقبة الإبرة تحت التكبير، حتى ينعكس الضوء قبالة خط الوسط (طوليا) من الإبرة.
- السلطة على أداة دوارة، ثم استخدام مرحلة الترجمة لدفع الإبرة نحو الداخلية (الماس) قطع القرص (الشكل 2أ).
- الاحتفاظ بدفع الإبرة ببطء ضد قطع القرص حتى يصل القرص قطع خط الوسط تقريبا من الإبرة (كتصور قبل التفكير في ضوء النفقات العامة على طول خط الوسط).
- تتحرك ببطء على السطح إبرة قطع من الماس الداخلية العجلة إلى العجلة الحجر الخارجي لإنهاء السطح إبرة قطع مع البولندية الدقيقة (الشكل 2ب).
- سحب الإبرة بعيداً عن القرص قطع.
- استخدام مرحلة التناوب الرأسي، قم بتدوير الإبرة 180°.
- كرر الخطوات 1.2.9-1.2.10 لإعادة تشكيل الجانب الآخر من الإبرة.
ملاحظة: يجب أن يكون الآن الإبرة نصائح قطع اثنين من طول متساو تقريبا (الشكل 2 و 2D). - إزالة الإبرة من مرحلة الإنتاج.
- نظيفة الداخل تجويف مع سلك معدني أصغر قليلاً من القطر الداخلي للابرة.
- باستخدام عصا خشبية حادة (مثلاً.، بالتقاط قبالة نهاية عصا خشبية صغيرة على قضيب نصيحة القطن)، إزالة أي نتوءات قد تكون لا تزال تعلق على حواف الإبرة المشكلة حديثا.
ملاحظة: حصاد الإبر يمكن أن يكون اليكتروبوليشيد وتعقيمها قبل اﻷوتوكﻻف إذا لزم الأمر.
2-الجلد الأنسجة الحصاد
- استخدام الإبر الحصاد لجمع ميكروكولومنس الجلد من السابقين فيفو الأنسجة أو الحيوانات الحية.
- السابقين فيفو الجلد الأنسجة رقيقة (وخاصة من عينات فيها الدهون تحت الجلد مفقود أو تم اقتطاعها بعيداً)، عقد النسيج المستهدف خلال افتتاح أنبوب الطرد المركزي 50 مل، أو كومة قطعتين من النسيج فوق بعضها البعض، لتجنب إتلاف n عدلي نصائح عن طريق ضرب لهم ضد السطوح الصلبة.
ملاحظة: في فيفو حصاد من الحيوانات الحية، من المستحسن أن ليدوكائين المحلية وادرينالين تدار عن طريق الحقن داخل الأدمة للتسكين والحد من النزيف. - تجميع جهاز الحصاد وفقا لمقدار ميكروكولومنس اللازمة، كما هو موضح أدناه.
- الخيار المنخفضة والمتوسطة الحجم:
- حصاد الصغيرة لكميات متوسطة من ميكروكولومنس، ببساطة ملء حقنه قياسية (10-20 مل الحقن عادة ما تعمل بشكل جيد) مع المحلول الملحي العادي وتوصيله بإبرة حصاد.
- تماما إدراج إبرة الحصاد في الجلد المانحة، ثم أتراجع.
- الضغط على مكبس المحاقن لتدفق المياه المالحة من خلال إبرة الحصاد وطرد microcolumn التي هي استقرت في تحمل إبرة.
- لتسريع عملية الحصاد، كرر الخطوة 2.4.2 3 إلى 5 مرات قبل طرد ميكروكولومنس في خطوة 2.4.3.
ملاحظة: أنها عادة ما تكون مريحة لطرد ميكروكولومنس في مصفاة خلية قياسية لتسهيل جمع ميكروكولومنس اللاحقة. - في حالة انسداد الإبر، زيادة الضغط على المكبس طرد الأنسجة عالقة وإزالة تسد. إذا كانت مجرد زيادة الضغط غير كافية، إدراج أسلاك معدنية من خلال فتح نصيحة إبرة لمسح تسد في الإبرة وتتحمل.
- تبقى ميكروكولومنس غارقة في المالحة أو المتوسطة حتى استخدامها لمنع جفاف.
ملاحظة: مع عامل تشغيل ذوي خبرة، يمكن استخدام الطريقة الموضحة أعلاه لحصاد ميكروكولومنس بمعدل حوالي 1 microcolumn في الثانية الواحدة.
- ارتفاع حجم الخيار:
- إنشاء جهاز الشفط مساعدة بسيطة التي يمكن بناؤها لتسهيل جمع كميات كبيرة من ميكروكولومنس.
ملاحظة: يتكون الجهاز من إبرة الحصاد، محقنة 20 مل مع نظام قفل فوهة, شفط محول يستخدم عادة لشفط الدهون (الشكل 3أ)، والعلبة شفط معقمة. - إزالة المكبس من محقنة 20 مل.
- إرفاق محول شفط المحاقن.
- إكمال الجمعية العامة عن طريق إرفاق إبرة حصاد للمحاقن (الشكل 3ب).
- استخدام قطعة من أنابيب شفط معقمة لتوصيل المحول الشفط باسطوانة شفط عقيمة. تأكد من توصيل جهاز الحصاد لأحد مدخلات علبة التي يسمح للسائل في التدفق إلى العلبة دون عراقيل (والتي قد تتطلب الاتصال بمنفذ علبة التي تم وضع علامة للتدفق إلى الخارج بدلاً من تدفق).
- قم بتوصيل الجهاز إلى مصدر ضغط سلبي.
ملاحظة: يعتمد الضغط اللازم على الإبر القطر والطول، كما هو موضح سابقا8. للأجهزة المذكورة في هذه المخطوطة، نظام الشفط الموجودة في غرف العمليات النموذجية يكفي بوجه عام. - قم بتوصيل إبرة حصاد المحاقن.
- الحصاد ميكروكولومنس عن طريق إدراج حصاد إبرة في الجلد.
ملاحظة: ميكروكولومنس سيتم رسمها في المحاقن بالشفط، ثم مسح في العلبة شفط. - بشكل متقطع وتراجع الإبرة الحصاد في حاوية من المحلول الملحي المعقم أثناء عملية الحصاد لطرد النظام.
ملاحظة: هذا التدفق المالحة وييسر النقل microcolumn ويضمن أنهم يبقى رطب. وبدلاً من ذلك، يمكن توصيل محول اللوير مهرجان قفل اللوير المحاقن، وعن طريق أنابيب اتصال، أيضا لحقيبة مالحة بالتنقيط معلقة. - إبقاء اليد على سلك معدني، أو قياس أصغر إبرة أصغر قليلاً من القطر الداخلي للابرة الحصاد. إذا يصبح انسداد الإبرة، يمكن أن يتم مسح عن طريق إدراج الأسلاك المعدنية إلى تحمل إبرة.
- عندما المبلغ المطلوب من ميكروكولومنس تراكمت في العلبة، قم بقطع اتصال الجهاز من شفط، ثم صب محتويات العلبة شفط خارجاً من خلال عامل تصفية لجمع ميكروكولومنس.
- إنشاء جهاز الشفط مساعدة بسيطة التي يمكن بناؤها لتسهيل جمع كميات كبيرة من ميكروكولومنس.
- بعد الحصاد، تطبيق مرهم مضاد حيوي موضعي مواقع الجهات المانحة.
ملاحظة: الضمادات إضافية عموما غير مطلوبة لمواقع الجهات المانحة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
الإبر الحصاد ينبغي أن تكون قادرة على جمع ميكروكولومنس أنسجة الجلد كامل-سمك مع حوالي 80-90 ٪ نسبة نجاح، وينبغي أن يتضمن كل microcolumn البشرة، الأدمة، وبعض الدهون تحت الجلد (الشكل 4). إذا كان معدل النجاح لحصاد منخفضة، أو إذا كان يصبح من الصعب إدخال إبرة في الأنسجة، ثم يرجح أن يلزم إبرة جديدة. إذا كان معدل النجاح لحصاد منخفضة دائماً، حتى مع الإبر الجديدة، ثم الإبر على الأرجح قصيرة للغاية.
إذا استخدمت في فيفو، ينبغي أن تشفي مواقع الجهات المانحة بسرعة، كما ابيثيلياليزيشن إعادة تحدث عادة خلال بضعة أيام3. ميكروكولومنس يمكن تطبيقها مباشرة على الجرح بأسره لزيادة الجرح الشفاء3،4، أو أنها قد تكون جنبا إلى جنب مع المواد مصفوفة مختلفة لإنتاج بنيات تركيبة. يمكن أيضا الاحتفاظ ميكروكولومنس في الثقافة في المختبر الدراسات9.
الشكل 1 : صنع جهاز إبرة. (أ) موصل قفل اللوير ذكور المضمونة عن طريق وظيفة تصاعد إلى مرحلة تناوب موضوعة عمودياً، حيث يكون قفل اللوير في وسط المسرح. (ب) مرحلة التناوب الرأسي محمل عمودياً إلى مرحلة تناوب الأفقي، والثانية (السهم الأسود). يتم تأمين مرحلة التناوب الأفقي إلى مرحلة ترجمة المحور الثاني (السهم الأبيض). (ج) تحديد المواقع بواسطة أداة دوارة موازية للتوصيل (السهم الأبيض)، ومجهر تشريح على جهاز صنع إبرة (السهم الأحمر). (د) عجلات متحدة المركز وقف إنتاج المواد الانشطارية التي شنت على أداة دوارة، مع عجلة الماس في الداخل (السهم الأسود) والعجلة الحجرية في الخارج (السهم الأبيض). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 2 : بعد قطع الإبرة إلى الطول المطلوب، يتم استخدام الأداة دوارة لطحن نصائح إبرة جديدة- (أ) أولاً، يتم استخدام عجلة إنتاج الماس لجعل التخفيضات "الخام" لتشكل إرشادات القطع الجديدة والسطوح. (ب) بعد النصائح قطع جديدة تتشكل مع عجلة الماس، يتم نقل الإبرة للعجلة الحجرية لتلميع غرامة. (ج) انتهى حصاد إبرة عرضه من الجبهة و (د) من الجانب. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3 : الجمعية لارتفاع حجم الحصاد. (أ) الفردية مكونات الجمعية، بما في ذلك (اليسار إلى اليمين) محول الشفط, محقنة 20 مل مع فوهة قفل اللوير، وابرة الحصاد. (ب) يظهر هو الجمعية العامة المكتملة، جاهزاً للاتصال بمصدر الضغط السلبي. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 4 : ميكروكولومنس الجلد الممثل حصاد باستخدام الجهاز المبين في هذه المخطوطة. تحتوي كل microcolumn على البشرة (1)، وكامل الأدمة (2)، وبعض الدهون تحت الجلد (3). تمثل علامات الاختيار الموجودة في الشكل 1 مم. وقد تم تعديل هذا الرقم من تام وآخرون. 4 وفقا لشروط الترخيص جميل المقابلة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
الأساليب الموصوفة هنا تهدف إلى تمكين جمع ميكروكولومنس الأنسجة بكميات كافية في فيفو كبير الدراسات الحيوانية، استخدام أدوات مصنوعة من اللوازم المختبرية المتاحة تجارياً. وقد استخدمت هذا الجهاز سابقا في حصاد الأنسجة من جلد الإنسان قصت4،9 ، فضلا عن جلد الخنازير الحية3. البارامترات المحددة المذكورة هي تلك التي تم العثور عليها أن تكون أكثر ملاءمة للاستخدام في الخنازير. ومن المتوقع أن الجهاز نفسه يمكن تعديلها وتكييفها لجمع الأنسجة من القوارض وغيرها من الحيوانات الصغيرة، ولكن هذا لم يتم اختباره في المختبر.
وتشمل الخطوات الحاسمة في هذا البروتوكول ضمان الإبر الحصاد لمدة كافية (الحصاد غير فعالة عادة بسبب الإبر ويجري قصيرة جداً)، والحفاظ ميكروكولومنس مغمورة في سائل طوال عملية الحصاد لمنع جفاف، ومسح النظام مع المحلول الملحي بشكل متقطع على الأقل (وإلا يكون هناك احتمال أعلى من ميكروكولومنس انسداد التجويف إبرة). القيد الرئيسي من هذه التقنية هو السرعة؛ على سبيل المثال، لدينا مظاهرة، جهاز الشفط مساعدة يمكن عموما الحصاد 120 ملغ أنسجة الدقيقة، وكافية لأصغر حجماً الجرح عادة ما تستخدم في التجارب على الحيوانات. من المرجح أن يكون تحديا لوجستيا لاستخدام هذا النهج للجروح الكبيرة جداً (على سبيل المثال.، في الكبرى حرق نماذج الضرر). إبرة قياس قيد آخر-أصغر قياس الإبرة، أكثر عرضه لالتواء، وهو وضع الفشل الرئيسي لهذا الأسلوب (على النقيض من ذلك، هذا الأسلوب نسبيا غير مبال بإبرة لمعانه أثناء الإجراء). لجلد الخنازير، نحن عادة استخدام الإبر 19-قياس، الذي ميكانيكيا قوية بما فيه الكفاية أنها نادراً ما مشبك. وعلاوة على ذلك، كل تجربة الحيوان (التي تشمل عادة حول ميكروكولومنس 3,000-5,000) يتطلب عادة الإبر فقط من 2 إلى 3. 25-قياس أصغر حجم الإبرة وقد استخدمنا مع هذا الأسلوب.
الجروح الجلدية الصغيرة قادرة على حفز تجديد الأنسجة هو المبدأ الأساسي وراء الإجراءات السريرية مثل كسور الليزر الظهور12 وميكرونيدلينج13. هذه العلاجات المعروفة لتحسين مظهر الجلد فوتواجيد مستحضرات التجميل، وتبين في الآونة الأخيرة، للحث على إعادة عرض الندبة وتحسين الوظيفة و cosmesis الجلد ندوب14،15. تجربة سريرية واسعة النطاق مع هذه التقنيات أيضا يوفر كذلك التحقق من أن الجلد يمكن أن تشفي دون ندبات بعد هذه الخثرة في الغالبية العظمى من الحالات، مع بعض الاستثناءات (تقشير الليزر كسرى يقال له معدل 3.8% تندب، دائماً تقريبا نتيجة العدوى16، تسليط الضوء على أهمية العناية بالبشرة بعد الإجرائية). وبالإضافة إلى ذلك، الناس مع تاريخ من الجدره أو التندب الضخامي قد تكون عرضه تندب حتى مع هذه الإصابات أصغر؛ وهكذا، قد يكون كونتيرينديكاتيد العلاجات التي تشمل إنتاج الخثرة.
بينما تحقيقاتنا السابقة ركزت على مباشرة تطبيق ميكروكولومنس إلى جروح الجلد لتعزيز الشفاء، القدرة على جمع مبالغ كبيرة من الأنسجة دون أحداث أخرى قد المراضات موقع المانحة طويلة الأجل (تندب، انكماش، إلخ) تكون مفيدة لمجموعة واسعة من التطبيقات الأخرى. وقد ميكروكولومنس الجلد بمثابة المصدر الأنسجة من النهج التي تشمل التوسع في الثقافة أو الانفصال والتشتت ل خلايا الجلد الذاتي10. وعلاوة على ذلك، ميكروكولومنس تقدم فوائد إضافية للتقليل من الاعتلال موقع الجهات المانحة بما في ذلك أنواع الخلايا الجلدية، مثل تلك المرتبطة بالهياكل أدنيكسال ومختلف السكان الخلية الجذعية/السلف التي تتواجد في مناطق أعمق من الأدمة11 (التي لا تتوفر مع الأساليب التقليدية التي تستخدم سبليت-سمك الجلد كمادة البدء). أيضا يمكن استخدام ميكروكولومنس ذاتي في السابقين فيفو فحوصات لدراسة الأنسجة استجابة للمنبهات المختلفة مثل المخدرات أو مستحضرات التجميل التي، على عكس التقليدية الخلية على أساس الثقافة فحوصات، هياكل الخلوية وخارج الخلية في كل microcolumn تمسك بتنسيقاتها المنظمة الطبيعية الخاصة بكل منها. أعم، قد يكون microcolumn حصاد النهج المطبقة على نطاق واسع لتوفير خلايا ذاتي والأنسجة لأغراض الطب التجديدي/هندسة الأنسجة مختلفة (للجلد والأجهزة الأخرى)، كالمبدأ الأساسي للمانحين الصغيرة أيضا الجراح تمر بالشفاء الكامل وسكارليس من المرجح أن يكون قابلاً للتعميم على سائر أنواع الأنسجة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب هي المخترعين المشاركين في براءات الاختراع المتعلقة بالتكنولوجيا المبينة في هذه المادة، وتلقوا منه الترخيص وإيرادات الإتاوات من خلال مؤسساتهم، مستشفى ماساشوستس العام. J. Tam يتشاور أيضا للصناعات Medline, Inc.، الذي يحمل الترخيص التجاري لهذه التكنولوجيا.
Acknowledgments
كان يؤيد هذا العمل جزئيا بالجيش والبحرية، والمعاهد الوطنية للصحة، والقوة الجوية، خامسا والشؤون الصحية لدعم هذا الجهد الثاني أفيرم، تحت "رقم جائزة" W81XWH-13-2-0054. "الولايات المتحدة الجيش الطبية اكتساب النشاط البحثي"، 820 تشاندلر الشارع، فورت ديتريك، MD 21702-5014 هو مكتب اقتناء مانحة الامتياز والقائمة. الآراء والتفسيرات والاستنتاجات والتوصيات هي آراء المؤلف ولا تقرها وزارة الدفاع بالضرورة.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Diamond wheel | Dremel | 545 | |
| Hypodermic needle (19G) | Fisher Scientific | 14-840-98 | Other needle sizes could be used, depending on experimental needs |
| Stone wheel | Dremel | 540 | |
| Syringe (20mL with luer lock) | Fisher Scientific | 22-124-967 | |
| Suction adapter | Tulip Medical | PA20BD | Optional, for high volume harvesting |
| Suction canister | Fisher Scientific | 19-898-212 | Optional, for high volume harvesting. Sterilize before use. |
| Suction tubing | Medline | DYND50216H | Optional, for high volume harvesting |
References
- Sun, B. K., Siprashvili, Z., Khavari, P. A. Advances in skin grafting and treatment of cutaneous wounds. Science. 346 (6212), 941-945 (2014).
- Singh, M., et al. Challenging the Conventional Therapy: Emerging Skin Graft Techniques for Wound Healing. Plastic and Reconstructive Surgery. 136 (4), 524-530 (2015).
- Tam, J., et al. Fractional Skin Harvesting: Autologous Skin Grafting without Donor-site Morbidity. Plastic and Reconstructive Surgery. Global Open. 1 (6), 47 (2013).
- Tam, J., et al. Reconstitution of full-thickness skin by microcolumn grafting. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 11 (10), 2796-2805 (2017).
- Huang, C., et al. Regeneration of hair and other skin appendages: A microenvironment-centric view. Wound Repair and Regeneration. 24 (5), 759-766 (2016).
- Fernandes, J. R., et al.
- Rettinger, C. L., Fletcher, J. L., Carlsson, A. H., Chan, R. K. Accelerated epithelialization and improved wound healing metrics in porcine full-thickness wounds transplanted with full-thickness skin micrografts. Wound Repair and Regeneration. 25 (5), 816-827 (2017).
- Franco, W., et al. Fractional skin harvesting: device operational principles and deployment evaluation. Journal of Medical Devices. 8 (4), 041005 (2014).
- Rasmussen, C. A., et al. Chimeric autologous/allogeneic constructs for skin regeneration. Military Medicine. 179, 8 Suppl 71-78 (2014).
- Ter Horst, B., Chouhan, G., Moiemen, N. S., Grover, L. M. Advances in keratinocyte delivery in burn wound care. Advanced Drug Delivery Reviews. 123, 18-32 (2018).
- Wong, V. W., Levi, B., Rajadas, J., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Stem cell niches for skin regeneration. International Journal of Biomaterials. 2012, 926059 (2012).
- Manstein, D., Herron, G. S., Sink, R. K., Tanner, H., Anderson, R. R. Fractional photothermolysis: a new concept for cutaneous remodeling using microscopic patterns of thermal injury. Lasers in Surgery and Medicine. 34 (5), 426-438 (2004).
- Iriarte, C., Awosika, O., Rengifo-Pardo, M., Ehrlich, A.
- Anderson, R. R., et al. Laser treatment of traumatic scars with an emphasis on ablative fractional laser resurfacing: consensus report. Journal of the American Medical Association Dermatology. 150 (2), 187-193 (2014).
- Hogan, S., Velez, M. W., Ibrahim, O. Microneedling: a new approach for treating textural abnormalities and scars. Seminars in Cutaneous Medicine and Surgery. 36 (4), 155-163 (2017).
- Manuskiatti, W., Fitzpatrick, R. E., Goldman, M. P. Long-term effectiveness and side effects of carbon dioxide laser resurfacing for photoaged facial skin. Journal of the American Academy of Dermatology. 40 (3), 401-411 (1999).
