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Neuroscience

दबाव रोडेंट मध्य मस्तिष्क धमनियों पर ब्लास्ट प्रेरित न्यूरोट्रामा के प्रभाव

Published: April 1, 2019 doi: 10.3791/58792
Automatic Translation
1,2, 1,2, 1,2, 1,2, 1,2, 1,2
1Charles R. Allen Research Laboratories, Department of Anesthesiology, University of Texas Medical Branch, 2The Moody Project for Translational Traumatic Brain Injury Research, University of Texas Medical Branch

Summary

यहाँ, हम एक प्राथमिक विस्फोट दर्दनाक मस्तिष्क चोट (bTBI) का उपयोग कर पृथक, दबाव, रोडेंट मध्य सेरेब्रल धमनी (एमसीए) खंडों के बाद पूर्व वीवो संवहनी गतिविधि निर्धारण के लिए विधियों का वर्णन करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं । bTBI प्रेरण एक सदमे ट्यूब, भी एक उन्नत ब्लास्ट सिम्युलेटर (ABS) डिवाइस के रूप में जाना जाता है का उपयोग कर पूरा किया है ।

Abstract

हालांकि वहां histopathological और विस्फोट जोखिम के व्यवहार के प्रभाव पर अध्ययन किया गया है, कम है विस्फोट मस्तिष्क संवहनी प्रभाव को समर्पित किया गया है । प्रभाव (यानी, गैर ब्लास्ट) दर्दनाक मस्तिष्क चोट (tbi) दोनों मनुष्यों और प्रयोगात्मक जानवरों में मस्तिष्क vasculature में दबाव autoregulation कम करने के लिए जाना जाता है । परिकल्पना है कि विस्फोट प्रेरित दर्दनाक मस्तिष्क चोट (bTBI), प्रभाव TBI की तरह, बिगड़ा मस्तिष्क संवहनी जेट में परिणाम के लिए रोडेंट मध्य सेरेब्रल धमनी (एमसीए) में कम intravascular दबाव के लिए मयोजेनिक डिलेटरी प्रतिक्रियाओं को मापने के द्वारा परीक्षण किया गया था हल्के bTBI के अधीन चूहों से एक उंनत विस्फोट सिम्युलेटर (ABS) सदमे ट्यूब का उपयोग कर खंडों । वयस्क, पुरुष Sprague-Dawley चूहों anesthetized थे, intubated, हवादार और शम bTBI के लिए तैयार (विस्फोट चोट के लिए छोड़कर समान हेरफेर और बेहोशी) या हल्के bTBI । चूहों बेतरतीब ढंग से अन्तर्वासना bTBI या हल्के bTBI के बाद बलिदान 30 या ६० मिनट के बाद चोट प्राप्त करने के लिए सौंपा गया था । इसके तुरंत बाद बीटीबीआई, लेकन पलटा (आरआर) दमन बार का मूल्यांकन किया गया, इच्छामृत्यु के समय अंक पोस्ट-चोट पूरी हो गई थी, मस्तिष्क काटा गया था और व्यक्तिगत एमसीए खंडों एकत्र, घुड़सवार और दबाव थे. के रूप में धमनी क्षेत्रों के माध्यम से perfused intraluminal दबाव 20 mmhg वृद्धि में १०० से 20 mmhg में कम किया गया था, एमसीए व्यास मापा और दर्ज की गई । Intraluminal दबाव कम करने के साथ, एमसीए व्यास तेजी से काफी कम हो गया है, जबकि एमसीए फैलावर प्रतिक्रियाओं (पी < ०.०५) दोनों btbi समूहों में बिगड़ा, छोटे एमसीए ने बीटीबीआई समूहों के लिए रिकॉर्ड किया । इसके अलावा, bTBI समूहों में आरआर दमन काफी था (पी < ०.०५) की तुलना में शम btbi समूहों में अधिक है । अन्तर्वासना के बीटीबी समूहों से एकत्रित एमसीए ने विशिष्ट vasodilatory संपत्तियों का प्रदर्शन किया, जबकि एमसीए के निम्नलिखित btbi के लिए एक कम दबाव के लिए महत्वपूर्ण बिगड़ा पेशीजनक वाहिनीलेटरी प्रतिक्रियाओं का प्रदर्शन किया, जबकि intraluminal दबाव में कमी आती है कि बीटीबीआई के बाद न्यूनतम ६० मिनट के लिए बनी ।

Introduction

इसी तरह के प्रभाव से उत्पंन (यानी, गैर विस्फोट) tbi, विस्फोट प्रेरित दर्दनाक मस्तिष्क चोट (btbi) मस्तिष्क संवहनी चोट1 और बिगड़ा मस्तिष्क संवहनी प्रतिपूरक प्रतिक्रियाओं के साथ संबद्ध किया गया है जैसे घटनाओं कार्बन डाइऑक्साइड के आंशिक दबावों में परिवर्तन (paco2)2,3,4 और ऑक्सीजन (पाओ2)5. इसके अतिरिक्त, ब्लास्ट एक्सपोजर जानवरों में मस्तिष्क धमनी वाहिकारद्रव्य के कारण होता है6 और btbi रोगियों7,8. जबकि नैदानिक tbi9 और द्रव टक्कर चोट (fpi)10,11,12 धमनी रक्तचाप में परिवर्तन करने के लिए बिगड़ा मस्तिष्क नाड़ी प्रतिक्रियाओं के साथ जुड़े रहे हैं (यानी, दाब स्वरिगणन)9,10,11,12, अनिश्चितता मस्तिष्क संवहनी दबाव autoregulation क्षमता पर btbi के प्रभाव के विषय में रहते हैं ।

सेरेब्रल परिसंचरण एक सतत ऑक्सीजन और पोषक तत्व की आपूर्ति को बनाए रखने के इरादे से प्रणालीगत धमनी दबाव में बदलाव के लिए प्रतिक्रिया metabolically सक्रिय मस्तिष्क को दिया13,14,15, 16. Homeostasis का एक अनूठा प्रकार, autoregulation17,18,19 होता है जब "एक अंग रक्त में परिवर्तन के बावजूद एक निरंतर रक्त प्रवाह बनाए रखता है (परफ्यूजन) दबाव या अन्य शारीरिक या रोगविज्ञान उत्तेजकता" 20. सेरेब्रल धमनियों के रक्तचाप में बदलाव के जवाब में कसना या फैलाते हुए, नाइट्रिक ऑक्साइड (NO), रक्त चिपचिपापन, paco2 और पाओ2, आदि4,11,16, 21. धमनी मयोजेनिक अनुक्रिया ऐसे संकुचन या फैलाव को निर्दिष् ट करता है. मयोजेनिक संवहनी प्रतिक्रिया, पहले22 बायलाइस और cbf के autoregulation के लिए योगदान एक प्रमुख तंत्र द्वारा वर्णित है, अगर छिड़काव दबाव बढ़ जाती है और वाहिकासंकीर्णन की विशेषता है अगर छिड़काव दबाव घटाता है 14 , 17. इस संवहनी प्रतिक्रिया संकुंचनशील ऊतकों की अंतर्निहित क्षमता है (जैसे संवहनी चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं, vsmc है) के लिए जवाब देने के लिए खिंचाव और/या दीवार तनाव में23,24, 25,26,27,28,29. जब धमनियों में खिंचाव (जैसे, intravascular दबाव बढ़ जाती है के दौरान), vsmc है कसना24,25,26,28।

अध्ययन है कि प्रतिरोध वाहिकाओं पूर्व vivo की जांच सामांयतः औषधीय और अलग प्रतिरोध वाहिकाओं के शारीरिक गुणों के परीक्षण के लिए दो विधियों में से एक कार्यरत है: अंगूठी घुड़सवार विधि और cannulated, दबाव विधि । अंगूठी घुड़सवार पोत तैयार करने की विधि दो तार शामिल पोत खंड, जो जगह में खंड पकड़ के माध्यम से intraluminally पारित कर दिया । Isometrically निरंतर तारों पर लागू बल की मात्रा को मापने है vsmc की उत्तेजना गेज । हालांकि, इस तकनीक के साथ यह कुछ आरक्षण किया जाता है, सबसे विशेष रूप से, अपरिहार्य लुमेन की endothelial परत द्वारा निरंतर नुकसान के रूप में तारों के माध्यम से इसे पारित कर रहे है30 और अलग खंड द्वारा निरंतर खींच की बदलती डिग्री जो बारी में पोत की दीवार distension की ओर जाता है, अंततः औषधीय एजेंटों के लिए पोत की संवेदनशीलता को प्रभावित31। Cannulated, दबाव पोत तैयारी पद्धति एक दो अलग कक्षों है कि प्रत्येक घर एक मध्यम मस्तिष्क धमनी (एमसीए) एक ही जानवर से काटा की नियुक्ति के शामिल एक arteriograph का इस्तेमाल करता है । एक माइक्रोपिपेट खंड के प्रत्येक छोर में डाला जाता है, इस खंड के समीपस् थ सिरे को टांके के साथ माइक्रोपाइपेट से बांधा जाता है और लुमेन रक्त और किसी भी अन्य पदार्थ को समाप्त करने के लिए एक शारीरिक लवण समाधान (पीएसएस) के साथ नरम रूप से perfused है । बाहर का अंत तो टांके के साथ सुरक्षित है । प्रत्येक पिपेट से संबद्ध दो जलाशयों को प्रत्येक खंड के ऊपर एक उपयुक्त ऊँचाई तक बढ़ाते हुए, लेकिन अन्य३२,३३,३४,३५ के संबंध में विभिन्न ऊंचाइयों पर, transmural या luminal दबाव स्थापित किया जाता है । ,३६. दबाव ट्रांसड्यूसर जलाशयों और माइक्रोपिपेट के साथ तैनात है, जबकि जहाजों एक उल्टे एक मॉनिटर, वीडियो कैमरा और बाहरी के माप के लिए अनुमति scaler के साथ outfitted माइक्रोस्कोप का उपयोग कर बढ़ाया जाता है । एमसीए diameters । हालांकि दोनों तरीकों मूल्यवान, cannulated, दबाव पोत तैयारी पद्धति बेहतर mimics और परमिट जहाजों को vivo स्थितियों३२,३७ में उनके करीब होने की जांच कर रहे हैं ।

मस्तिष्क संवहनी प्रतिक्रियाओं पर प्रभाव के विभिंन प्रकार (यानी, गैर विस्फोट) tbi के प्रभाव पहले से सेरेब्रल धमनी खंडों में21,३५,३६,३८अध्ययन किया गया है । पोत संग्रह, बढ़ते और छिड़काव के लिए एक समान पूर्व vivo एमसीए प्रोटोकॉल का उपयोग कर के रूप में वर्तमान अध्ययन में वर्णित है, पहले अध्ययन मस्तिष्क vasculature रोग के जुड़े तंत्र में अपने संबंधित जांच के साथ सफलता प्राप्त की निंनलिखित TBI । गोल्डिंग एट अल३४ वयस्क में endothelial मध्यस्थता dilations की जांच की, पुरुष लांग इवांस नियंत्रित वल्कुट प्रभाव (सीसीआई) चोट के माध्यम से है एमसीए निंनलिखित गंभीर tbi चूहा । एक दूसरे अध्ययन में, गोल्डिंग एट अल.३६ की जांच के बाद हाइपोटेंशन या सह2 के लिए मस्तिष्कवाहिकीय जेट है कि एक हल्के सीसीआई निरंतर की कटाई एमसीए चूहों से । यू एट अल३८ विश्लेषण कि क्या peroxynitrite मैला ढोने वाले वयस्क, पुरुष sprague-dawley चूहा एमसीए fpi के अधीन क्षेत्रों में कम intravascular दबाव में सुधार किया है, जबकि mathew एट अल.21 का अध्ययन किया पेशीजनक प्रतिक्रियाओं के लिए मध्यम, केंद्रीय एफपीआई के बाद एमसीए की फसल में हाइपोटेंशन ।

बेहतर परिकल्पना की जांच करने के लिए कि bTBI, गैर की तरह विस्फोट TBI, बिगड़ा मस्तिष्क संवहनी जेट में परिणाम, हम एक मैकेनिक डिलेटरी प्रतिक्रियाओं को मापने के द्वारा ऑटोरेगुलेशन समझौता करने के लिए योगदान दिया तंत्र का परीक्षण कम intravascular दबाव पूर्व विवो में अलग, दबाव रोडेंट एमसीए खंडों (चित्रा 1) हल्के btbi के अधीन चूहों से एकत्र एक उंनत ब्लास्ट सिम्युलेटर (ABS) सदमे ट्यूब मॉडल का उपयोग (चित्रा 2 और चित्रा 3) (रोड्रिगेज एट अल.३९ देखें तालिका 1) कि संपीड़ित हवा का उपयोग करता है सीधे एक चालक चैंबर को दिया-४० की तरह Freidlander उत्पंन-और के तहत दबाव तरंगों (rodriguez एट अल.३९चित्रा 1ए) देखें ।

Figure 1
चित्रा 1 : मध्य सेरेब्रल धमनियों (एमसीए) का स्थान. चूहा मस्तिष्क के पश्चवर्ती मस्तिष्क धमनियों (पीसीए), आंतरिक ग्रीवा धमनियों (आईसीए), बाहरी ग्रीवा धमनियों (ईसीए), आधार धमनी (बीए) और आम ग्रीवा धमनियों (सीसीए) के लिए एमसीए के रिश्तेदार के स्थान पर प्रकाश डाला का अधर दृश्य । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 2
चित्रा 2 : उन्नत ब्लास्ट सिम्युलेटर (ABS) सदमे ट्यूब डिवाइस । ABS सभी अध्ययन जानवरों में प्राथमिक विस्फोट चोट का उत्पादन करने के लिए इस्तेमाल किया । 1 = चालक कक्ष; 2 = विस्तार कक्ष;  3 = नमूना कक्ष; 4 = परावर्तित तरंग दमनकारी; पीला सितारा = नमूना ट्रे । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Protocol

सभी प्रायोगिक प्रोटोकॉलों को टेक्सास विश्वविद्यालय चिकित्सा शाखा के संस्थागत पशु परिचर्या एवं उपयोग समिति (आईएयूसी), प्रयोगशाला पशु परिचर्या के मूल्यांकन एवं प्रत्यायन के लिए संघ (AAALAC) मान्यता प्राप्त सुविधा द्वारा अनुमोदित किया गया.

1. ABS ब्लास्ट चोट के लिए पशु तैयारी

  1. यांत्रिक रोडेंट मात्रा वेंटिलेटर पर बारी और प्रति मिनट 40-45 साँस के बीच सांस की दर सेट.
  2. पर thermostatically नियंत्रित वार्मिंग कंबल और टेप पर एक नीले रंग की पैड स्विच ।
  3. वेंटीलेटर की नली में संलग्न करें ।
  4. Endotracheal इंटुबैषेण स्लेज, स्वरयंत्रदर्शी, लंबे पिक चिमटी, स्टाइलेट, endotracheal ट्यूब, और एक कपास झाड़ू इकट्ठा 1% के ०.०५ मिलीलीटर के साथ लथपथ lidocaine HCl. ब्लू पैड पर व्यवस्थित करें ।
  5. पुष्टि करें कि रोडेंट चेचक "बुलबुला" चैंबर, वेंटिलेटर, एयर चैंबर और isoflurane चैंबर hoses सुरक्षित रूप से जुड़े हुए हैं और उनके संबंधित प्लग या सॉकेट के लिए संलग्न हैं । संवेदनाहारी बुलबुला चैंबर दबाना खुला होना चाहिए; वेंटीलेटर दबाना बंद किया जाना चाहिए ।
  6. एयर चैंबर पर, 2 एल/मिनट के लिए कमरे में हवा के लिए दस्ता सेट और 1 एल के लिए ऑक्सीजन के लिए दस्ता/
  7. Isoflurane पर बारी और मात्रा मिश्रण के 4% के लिए दस्ता सेट ।
  8. एक टाइमर शुरू करें और एक युवा वयस्क जगह (≈ 3 महीने पुराने), पुरुष sprague-dawley चूहा (350-400 ग्राम) संवेदनाहारी बुलबुला चैंबर में 4-6 मिनट के लिए ।
  9. 2 मिनट के निशान पर चूहे का वजन ।
  10. की पुष्टि करें चूहा पूरी तरह धीरे से हिंद पंजा पैर की उंगलियों चुटकी द्वारा ऊपर है । यदि कोई पंजा वापसी मनाया जाता है, कमरे हवा को कम करने और 1 L/min, ऑक्सीजन के लिए ०.४ L/min और isoflurane मात्रा मिश्रण का 2% करने के लिए घुंडी सेट ।
  11. मलाशय टेलीथर्मामीटर तापमान मॉनिटर पर बारी.
  12. वेंटिलेटर के लिए दबाना खुला और चेतनवाला बुलबुला चैंबर के लिए दबाना बंद करो ।
  13. एनास्थेटिक बुलबुला चैंबर और endotracheal इंटुबैषेण स्लेज पर स्थिति से चूहा निकालें ।
  14. Intubate चूहा । पशु के मुंह में स्वरयंत्रदर्शी प्लेस, लंबी पिकअप चिमटी का उपयोग करने के लिए बाहर रास्ते की जीभ की स्थिति, झाड़ू lidocaine लथपथ कपास झाड़ू टिप गले के अंदर के साथ और धीरे चूहा श्वासनली में endotracheal ट्यूब युक्त शूकिका डालें ।
  15. एक बार intubated, endotracheal ट्यूब के बाहर अंत करने के लिए वेंटिलेटर नली के अंत डालने और निरीक्षण और चूहे की पुष्टि तेजी से सांस ले रहा है और बिना किसी कठिनाई ।
  16. यह ध्यान में रखते हुए कि जीभ गाँठ से मुक्त है जगह में endotracheal ट्यूब नीचे टाई ।
  17. सफेद पेट्रोलियम जेली गुदा टेलीथर्मामीटर जांच करने के लिए लागू करें और सीधे पूंछ के नीचे डालें ।
  18. ट्रे पर चूहा प्लेसमेंट से पहले वार्मिंग के लिए गर्मी लैंप के तहत नमूना कक्ष और जगह से ABS नमूना ट्रे निकालें ।
  19. आंखों के ऊपर और कान के बीच के लिए नीचे शुरू चूहे की खोपड़ी के शीर्ष दाढ़ी ।
  20. एक मानक-कैंची के साथ समान हिस्सों में फोम कान प्लग आकार काटें । प्लग के आधार के केंद्र में शुरू और सीधे गोल टिप करने के लिए कटौती । कान नहर के साथ पहले कान टिप में एक आधा टुकड़ा डालें जब तक संपर्क मध्यकर्ण झिल्ली के साथ किया जाता है ।
  21. मलाशय के तापमान पर नजर रखें । एक बार ३७ डिग्री सेल्सियस का तापमान पहुंच जाता है, चूहे ABS नमूना ट्रे में लोड किया जा करने के लिए तैयार है ।
  22. ABS नमूना ट्रे पर चूहा सुरक्षित । Endotracheal ट्यूब से वेंटिलेटर नली को हटा दें और जल्दी लेकिन धीरे से ट्रे के शीर्ष छोर में चूहे स्लाइड, धीरे सिर धारक खोलने और रबर कॉलर के माध्यम से सिर मार्गदर्शन । वेंटिलेटर नली वापस endotracheal ट्यूब में डालें, रबर कॉलर की जांच करने के लिए सुनिश्चित करें कि यह सुरक्षित है, लेकिन गर्दन के आसपास कसकर नहीं है और सत्यापित करें कि चूहा एक पार्श्व प्रवण स्थिति में बिछाने है (चित्रा 3) ।
  23. आइसोफ्लूराइन बंद करें और endotracheal ट्यूब से वेंटिलेटर नली को हटा दें ।
  24. Abs नमूना चैंबर में ऊपर चूहे युक्त abs नमूना ट्रे लॉक और सुरक्षित.
  25. धीरे चुटकी हिंद पंजा पैर की उंगलियों लंबे चिमटी का उपयोग कर हर 3 एस जब तक एक वापसी पलटा प्रतिक्रिया elicited है ।

2. ABS ब्लास्ट डिवाइस तैयारी और ब्लास्ट-TBI प्रेरण

नोट: प्रोटोकॉल कदम 2.1-2.10 आमतौर पर एक ही समय में पूरा कर रहे है 1.1-1.22 कदम के रूप में तो ABS ब्लास्ट चोट प्रशासन के लिए तैयार है सही के बाद चूहे भरी हुई है और नमूना चैंबर में सुरक्षित ।

  1. हाइड्रोलिक हाथ पंप ढीला (चित्रा 4ए) दस्ता किसी भी अवशिष्ट फंस हवा के लिए अनुमति देने के लिए चालक कक्ष से बचने के लिए (चित्रा 4बी) और अपनी मुहर से चैंबर ढीला करने के लिए ।
  2. टोपी नट ढीला (चित्रा4सी) सभी धागा छड़ से (चित्रा 4डी) चालक कक्ष के आसपास और बाईं ओर चैंबर स्लाइड और विस्तार कक्ष से दूर (चित्रा 4ई) ।
  3. पूरी तरह से दो सभी धागा छड़ और उनके इसी टोपी चालक चैंबर के शीर्ष पर स्थित पागल को हटाने के लिए चालक और विस्तार कक्ष के बीच में mylar चादरें की नियुक्ति के लिए अनुमति देने के लिए ।
  4. स्टैक और टेप एक साथ शीर्ष किनारे चार पूर्व कट और पूर्व मापा (30 सेमी लंबाई, 20 सेमी चौड़ाई, ०.००४ में. मोटा) mylar शीट्स (एक mylar ' झिल्ली ' का गठन) मास्किंग टेप के एक २.५४ सेमी टुकड़ा का उपयोग कर । टेप के एक दूसरे टुकड़े का प्रयोग, सुरक्षित रूप से विस्तार चैंबर के शीर्ष पर mylar झिल्ली के शीर्ष किनारे टेप और चालक और विस्तार मंडलों के बीच खोलने के केंद्र पर (चित्रा 4एफ) ।
  5. चैंबर और हाथ के शीर्ष पर दो सभी धागा छड़ की जगह द्वारा mylar झिल्ली के खिलाफ चालक कक्ष सुरक्षित सभी टोपी चैंबर आसपास नट कस ।
  6. सुरक्षित रूप से फिट जब तक हाइड्रोलिक हाथ पंप ब्लॉक और चालक कक्ष के खिलाफ गौण इस्पात ब्लॉक स्थिति ।
  7. हाइड्रोलिक हाथ पंप घुंडी कस और चालक चैंबर हाइड्रोलिक गेज पर एक निरंतर दबाव दहलीज देख द्वारा कोई लीक के साथ दबाव रहता है की पुष्टि करें ।
  8. Abs ब्लास्ट डिवाइस कंप्यूटर पर ABS ब्लास्ट डिवाइस दबाव निशान रिकॉर्ड है कि ट्रिगर अधिग्रहण फ़ाइल खोलें ।
  9. संपीड़ित हवा टैंक की (चित्रा 4जी) मुख्य घुंडी थोड़ा airway खोलने के लिए पर्याप्त ढीला ।
  10. हाइड्रोलिक हाथ पंप काम जब तक गेज संकेतक ≈ ५,००० साई के एक वांछित चैंबर दबाव स्तर का संकेत लाल तीर तक पहुंचता है ।
  11. सुरक्षित और एबीएस नमूना ट्रे (चित्रा4एच) पर एक पार्श्व प्रवण स्थिति में (चित्रा3) और abs नमूना कक्ष में नमूना ट्रे ताला (चित्रा 4मैं) पर ऊपर जानवर स्थिति ।
  12. धीरे पिंच एक पिछला पंजा लंबे चिमटी का उपयोग कर हर 3 एस जब तक एक वापसी पलटा प्रतिक्रिया elicited है ।
  13. ABS ब्लास्ट डिवाइस कंप्यूटर पर खोले गए प्राप्ति पृष्ठ पर प्रारंभ करेंक्लिक करें ।
  14. एक बार ' Acquisitioning ' विंडो स्क्रीन पर प्रकट होता है, प्रेस और जब तक ब्लास्ट बंद हो जाता है ABS ब्लास्ट डिवाइस ट्रिगर दबाए रखें, mylar झिल्ली टूटना और ABS ब्लास्ट चोट प्रशासन (२०.९ साई ± १.१४, १३८ kPa ± ७.९) चूहा करने के लिए । सही ब्लास्ट के बाद विस्फोट, एक दूसरे टाइमर शुरू करने के लिए कितना समय का ट्रैक रखने के लिए (मिनट और एस में) के बाद चोट गुजर गया है ।
  15. ABS नमूना ट्रे से चूहा निकालें और नीले पैड और वार्मिंग कंबल के लिए वापस, लेकन पलटा दमन के आकलन के लिए उसे पूरी तरह से उसकी पीठ पर रखकर ।
  16. लेकन पलटा की वापसी के लए समय का रिकॉर्ड. दूसरा टाइमर, मिनट में दस्तावेज़ अवलोकन और समय के बाद की लंबाई एस चोट यह चूहे के लिए लेता है उसके पेट पर उसकी पीठ से रोल करने के लिए लगातार तीन बार । संवेदनाहारी बुलबुला चैंबर के लिए चूहा वापस ।
  17. ड्राइवर चैंबर ढीला और आंदोलन के लिए अनुमति देने के क्रम में हाइड्रोलिक हाथ पंप घुंडी ढीला ।
  18. हवा के रास्ते को बंद करने के क्रम में संपीड़ित एयर टैंक के मुख्य दस्ता कस ।

Figure 3
चित्रा 3 : Abs नमूना ट्रे और अंदर abs पर चूहा प्लेसमेंट । दिशा और ABS के अंदर अध्ययन जानवर की उंमुखीकरण । जब ABS में रखा, पशु सदमे की लहर दिशा (लाल तीर) के लंबवत सिर के पृष्ठीय सतह के साथ एक अनुप्रस्थ प्रवण स्थिति में है । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 4
चित्रा 4 : उन्नत ब्लास्ट सिम्युलेटर (ABS) सदमे ट्यूब डिवाइस योजनाबद्ध । ABS के प्रमुख घटक । एक = हाइड्रोलिक हाथ पंप; B = चालक कक्ष; C = टोपी नट; डी = सभी धागा छड़;  ई = विस्तार कक्ष; F = mylar झिल्ली प्लेसमेंट का स्थान; G = संपीड़ित एयर सिलिंडरों; H = नमूना ट्रे; मैं = नमूना कक्ष ।  कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें । 

3. रोडेंट एमसीए PSS समाधान की तैयारी

नोट: प्रोटोकॉल चरण 3.1 – 3.3 आमतौर पर एक ही समय में पूरा कर रहे हैं के रूप में चरण 1.1 – 1.22 PSS समाधान उपयोग के लिए तैयार है करने के लिए ।

  1. तैयार है और निंनलिखित संरचना और सांद्रता के १,००० मिलीलीटर शारीरिक नमक समाधान (PSS) मिश्रण: १३० mM NaCl; ४.७ मिमी केसीएल; १.१७ मिमी MgSO4∙ 7h2हे; 5 मिमी ग्लूकोज; १.५ मिमी CaCl2; 15 एमएम नहको3.
  2. पीएसएस को 21% ओ2 और 5% सह2 के एक संतुलन में गैस मिश्रण के साथ equilibrate करें। समाधान के लिए तैयार है जब पीएच ७.४ पढ़ता है ।
    नोट: उपर्युक्त सांद्रता में संपीडित गैस सिलिंडरों से सभी गैसें प्राप्त की जाती हैं ।
  3. जलाशय बोतलों और तैयार PSS समाधान के साथ टयूबिंग भरें और शेष समाधान चिल ।

4. रोडेंट एमसीए खंडों का निष्कर्षण

  1. लेकन पलटा समय की लम्बाई का दस्तावेजीकरण करने के बाद, चूहे को चेतनमय बबल चैम्बर में वापस लौटाएं. बंद करो वेंटिलेटर के लिए दबाना, और कक्ष के लिए दबाना खुला । मात्रा मिश्रण के 4% पर isoflurane बारी और 2 के लिए चैंबर में चूहा रखने-3 मिनट तक गहराई से anesthetized ।
  2. एक बार चूहा anesthetized है, वेंटिलेटर के लिए दबाना खुला और चेतनाशूंय करने वाला बुलबुला चैंबर के लिए दबाना बंद करो । मात्रा मिश्रण के 2% के लिए isoflurane कम है, और उसे बुलबुला चैंबर से हटा दें । उसे वार्मिंग कंबल पर अपने पेट पर प्लेस और फिर से endotracheal ट्यूब के बाहर अंत करने के लिए वेंटिलेटर नली के अंत डालने ।
  3. 40 के बीच एक सांस की दर पर यांत्रिक वेंटिलेशन बनाए रखने के लिए-45 और या तो 30 या ६० मिनट के लिए मात्रा मिश्रण के 2% पर anस्थेसिया प्रति मिनट और तुरंत बाद bTBI चोट ।
  4. या तो 30 या ६० मिनट जीवन रक्षा समय के पूरा होने के बाद, मात्रा मिश्रण का 4% isoflurane बढ़ाने के लिए, और गहराई से 5 के लिए anesthetize-6 मिनट. तुरंत एक कृंतक विशिष्ट गिलोटिन का उपयोग कर decapitation द्वारा euthanize ।
    नोट: इन प्रयोगों में हमने पशुओं को निस्थीकृत और यांत्रिक रूप से हवादार बना रखा था लेकन प्रतिवर्त की वापसी जब तक नहीं हुई ।  यदि अध्ययन लंबे समय तक अस्तित्व timepoints की आवश्यकता है, दर्दनाशक दवाओं बेहोशी से उभरने से पहले जानवर को प्रशासित किया जाना चाहिए ।
  5. नाजुक खोपड़ी से मस्तिष्क को हटा दें । एक #10 स्केलपेल ब्लेड का प्रयोग करें एक केंद्रीय, १.५ इंच ऊर्ध्वाधर, अस्थि गहरे चीरा मुंडा खोपड़ी के ऊपर से नीचे पश्चकपाल condyle करने के लिए ।
  6. खोपड़ी की हड्डी से खोपड़ी त्वचा को खोलने और अलग करने के लिए छोटे अस्थि rongeurs का प्रयोग करें ।
  7. कट और पश्चकपाल निकालने के लिए बड़ी हड्डी rongeurs का प्रयोग करें, interparietal, और मस्तिष्क encasing ललाट हड्डियों के निचले आधे.
  8. एक शल्य चिकित्सा रंग का उपयोग करने के लिए ध्यान से खोपड़ी के बाहर मस्तिष्क खुदाई एक बार मस्तिष्क हड्डी के आसपास से मुक्त है ।
    नोट: खोपड़ी से मस्तिष्क को अलग करते समय अत्यधिक सावधानी बरतें ताकि अनावश्यक रूप से रस्साकशी, झटका या कपाल की दीवार से नाजुक एमसीए खंडों को न खींचा जा सके.
  9. सीधे एक ठोस बर्फ ब्लॉक के शीर्ष पर आराम कर रहा है कि एक छोटे गिलास पेट्री डिश में समाहित ठंडा PSS समाधान में काटा मस्तिष्क जमा करें ।
  10. ध्यान से छोड़ दिया और सही दोनों Willis के सर्कल में एमसीए शुरू हटा दें । लगभग 4-5 मिमी के लिए खंड laterally और dorsally हटाने जारी रखें ।
  11. धीरे microforceps का उपयोग कर किसी भी संयोजी ऊतक की लंबाई में लगभग 4-5 मिमी के एकत्र एमसीए खंडों साफ ।
  12. आरोह पर एमसीए की माउंट । पहली ग्लास माइक्रोपिपेट (व्यास ≈ ७० μm) के साथ प्रत्येक खंड के समीपस् थ अंत कैलेट और एक 10-0 नायलॉन सीवन के साथ सुरक्षित ।
  13. मृदुलता लुमेन से किसी भी अवशिष्ट रक्त और अन्य सामग्री को हटाने के लिए पीएसएस के साथ लूमिना शवद.
  14. एमसीए खंड खींच और एक 10-0 नायलॉन सीवन के साथ सुरक्षित बिना दूसरे micropipette के साथ प्रत्येक खंड के बाहर का छोर कैलीजने ।
  15. एमसीए खंड के सफल बढ़ते के बाद, जहाजों के आवर्धन के लिए एक औंधा माइक्रोस्कोप के मंच के शीर्ष पर चैंबर जगह है । माइक्रोस्कोप एक वीडियो कैमरा, मॉनिटर और धमनी व्यास माप के लिए एक ऑप्टिकल माइक्रोमीटर के साथ calibrated एक वीडियो scaler से सुसज्जित है ।
  16. प्रत्येक खंड को भरें और आस-पास के आर्टीग्राफ बाथ को लगातार परिचालित करके कमरे के तापमान से ३७ डिग्री सेल्सियस तक गर्म किया और 21% O2 और 5% सह2 के गैस मिश्रण के साथ Equilibrated N2संतुलन में ।
  17. Equilibrate ५० mmHg के दबाव में एमसीए खंडों ६० मिनट के लिए एक उपयुक्त ऊंचाई के लिए micropipettes से जुड़े जलाशय बोतलों को ऊपर उठाने के द्वारा खंडों के ऊपर । दबाव ट्रांसड्यूसर माइक्रोपिपेट और जलाशय की बोतलों के बीच स्थित एमसीए खंड के भीतर ट्रांसड्यूसर दबाव का आकलन करेगा जब वांछित ५० mmhg दबाव प्राप्त है ।
  18. साम्य अवधि के समापन के बाद, विभिन्न ऊंचाइयों पर जलाशय बोतलें स्थापित करके १०० mmHg के लिए intravascular दबाव में वृद्धि ।
  19. (पोत संकुचन की पुष्टि के लिए) 30 मिमी K देने के लिए और माप धमनी व्यास के माध्यम से लुमिनल । लगभग 10 मिनट बाद 10-5 M Ach उद्धार (पोत फैलाव के लिए) और माप धमनी व्यास ।
  20. पोत की विस्वेषणात्मक प्रतिक्रियाओं की जांच । कम जलाशय बोतलों १०० mmHg से ८० mmHg को intravascular दबाव को कम करने के लिए । एमसीए खंडों 10 मिनट के लिए equilibrate करने के लिए अनुमति देते हैं. माप धमनी व्यास ।
  21. ८० mmHg से ६० mmHg के लिए intravascular दबाव को कम करें । एमसीए खंडों 10 मिनट के लिए equilibrate करने के लिए अनुमति देते हैं. माप धमनी व्यास ।
  22. ६० mmHg से ४० mmHg के लिए intravascular दबाव को कम करें । एमसीए खंडों 10 मिनट के लिए equilibrate करने के लिए अनुमति देते हैं. माप धमनी व्यास ।
  23. ४० mmHg से 20 mmHg के लिए intravascular दबाव को कम करें । एमसीए खंडों 10 मिनट के लिए equilibrate करने के लिए अनुमति देते हैं. माप धमनी व्यास ।

Representative Results

मतलब सभी अध्ययन जानवरों के लिए bTBI दबाव २०.९ साई ± १.१४ (१३८ केपीए ± ७.९) था । एबीएस बीटीबीआई shockwave जोखिम (५.३७ min ± २.१) के अधीन चूहों के लिए लेकन पलटा (आरआर) दमन की औसत अवधि काफी लंबे समय तक नहीं था (पी = ०.३६, btbi बनाम अन्तर्वासना) की तुलना में शम समूह (५.१० मिन ± १.६).

30 और ६० मिनट के दोनों समूहों में, एमसीए व्यास आधार रेखा से ऊपर वृद्धि हुई intraluminal दबाव के रूप में १०० से 20 mmhg कम हो गया था । उनकी इसी अन्तर्वासना समूहों की तुलना में, मनाया गया 30 min (p = ०.०१, btbi vs. अन्तर्वासना) और ६० min (p = ०.०२, btbi vs. अन्तर्वासना) में intravascular दबाव में लगातार लगाए गए कमी के लिए एमसीए डिलेटरी प्रतिक्रियाओं और ABS btbi समूह थे विस्फोट जोखिम के बाद काफी कम (चित्रा 5) । इन परिणामों की एक और अधिक विस्तृत चर्चा के लिए, रोड्रिगेज एट अल३९देखें ।

इन अध्ययनों से पता चला कि हल्के btbi काफी बिगड़ा मस्तिष्क प्रतिपूरक फैलावर प्रतिक्रियाओं एमसीए क्षेत्रों में कम intravascular दबाव के लिए 30 और ६० मिनट हल्के btbi के बाद जबकि हल्के सदमे तरंग इन अध्ययनों में इस्तेमाल किया स्तरों के durations के परिणामस्वरूप आरआर (< 30 एस) के दमन में उन लोगों के समान है-घायल चूहों ।

सांख्यिकीय विश्लेषण सॉफ्टवेयर के साथ प्रदर्शन किया गया । Intravascular दबाव में परिवर्तन के लिए पेशीजनक प्रतिक्रिया (८०, ६०, ४०, और 20 mmhg) intraluminal दबाव के प्रत्येक स्तर के लिए आधार रेखा (१०० mmhg) से प्रतिशत परिवर्तन की गणना द्वारा मूल्यांकन किया गया था । अयुग्मित छात्र के t-परीक्षणों का उपयोग bTBI और अन्तर्वासना समूह आधाररेखाओं के बीच अंतर का मूल्यांकन करने के लिए किया गया था. BTBI और अन्तर्वासना समूहों के बीच एमसीए फैलेटर प्रतिक्रियाओं में अंतर (ANOVA) डनेट की एकाधिक तुलना परीक्षण और समान प्रसरण के लिए एक Bartlett परीक्षण एक दोहराया एक तरफा विश्लेषण का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया था ।

सांख्यिकीय शक्ति में कमी के कारण है कि दोहराया परीक्षण से परिणाम, एमसीए प्रयोगों में प्रत्येक विशिष्ट दबाव बिंदु पर तुलना (जैसे, १०० और ८० mmHg के बीच या के बीच ६० और ४० mmhg, आदि) नहीं किए गए थे. महत्व पी ≤ ०.०५ स्तर पर स्वीकार किया गया था । पाठ, संदर्भित तालिका में सभी डेटा, और आंकड़ा मतलब के रूप में व्यक्त किया है ± मानक त्रुटियों का मतलब है (SEM) ।

Figure 5
चित्रा 5 : मध्यम सेरेब्रल धमनी (एमसीए) प्रतिक्रियाओं पर कम intravascular दबाव के लिए bTBI का प्रभाव । डाइलेटर intravascular दबाव में प्रगतिशील कटौती करने के लिए प्रतिक्रियाएं बिगड़ा vasodilatory प्रतिक्रियाओं का प्रदर्शन किया और 30 मिनट (पी = ०.०१, btbi बनाम अन्तर्वासना) में काफी कम थे और ६० मिनट (पी = ०.०२, bTBI बनाम अन्तर्वासना) btbi समूहों (n = 6/समूह) दोनों शम समूहों (n = 12) की तुलना में विस्फोट के बाद प्रदर्शन । 30 और ६० मिनट के दोनों समूहों में, एमसीए व्यास आधार रेखा से ऊपर वृद्धि हुई intraluminal दबाव के रूप में १०० से 20 mmhg कम हो गया था । मान के रूप में रची जाती हैं मतलब ± SEM. *p < ०.०५ बनाम अन्तर्वासना. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Discussion

सभी प्रोटोकॉल और निर्देशों के साथ के रूप में, यह जरूरी है कि इस विशेष अध्ययन में प्रोटोकॉल के लिए कुछ कदम के रूप में सही है और के रूप में संभव के रूप में ठीक से पीछा कर रहे हैं । चूहे के प्रारंभिक इंटुबैषेण के बाद यह पुष्टि करने के लिए महत्वपूर्ण है कि यह तेजी से सांस ले रहा है और बिना किसी कठिनाई । गलत रूप से श्वासनली के बजाय घेघा में एंडोट्रेशियल ट्यूब डालने के परिणामस्वरूप रेपिंग, मुश्किल सांस, खून बह रहा है और फेफड़ों के लिए कमी संवेदनाहारी डिलीवरी के कारण चूहे के बाद गर्मजोशी में परिणाम होगा ।

जब चालक और विस्तार कक्ष के बीच खोलने के केंद्र पर mylar झिल्ली चादरें टेप, यह आवश्यक है कि चादरें केंद्रित कर रहे है और पूरी३९,४१को कवर । खुलने के बाद चादरों की संरेख करने से चालक कक्ष से वायु रिसाव हो जाएगा, झिल्ली फटने के लिए अपेक्षित दबाव में कमी होगी और विस्फोट में चोट लगने की संभावना से प्रशासन वंचित रहेगा । ठीक से स्थिति और सुरक्षित हाइड्रोलिक हाथ पंप ब्लॉक और चालक चैंबर के खिलाफ गौण स्टील ब्लॉक फिटिंग भी आवश्यक है के रूप में हाइड्रोलिक हाथ पंप घुंडी कस रहा है और चालक चैंबर लीक के बिना दबाव रहता है की पुष्टि । इस्पात ब्लॉक के उचित स्थान के लिए चालक कक्ष कसकर विस्तार चैंबर के खिलाफ बंद करने के लिए अनुमति देता है, इस तरह अनिवार्य Mylar झिल्ली चादरें द्वारा चैंबर खोलने पर आवश्यक मुहर बनाने और चालक और विस्तार कक्ष के बीच ।

एमसीए पोत extractions से पहले तैयारी के दौरान, गैसन पीएसएस के अपेक्षित मिश्रण के साथ 21% ओ2 और 5% CO2 के एक संतुलन में N2 equilibrates समाधान और की सुविधा आवश्यक तटस्थ शारीरिक पीएच के लिए एक काम कर रहे PSS समाधान21,३३,३४।

६० मिनट21,३२,३३,३४ के लिए एक निरंतर दबाव में खंडों equilibrating अत्यंत अनिवार्य है के रूप में इस कदम के दौरान प्रदर्शित एक अधिकतम फैलाव के बाद कसना करने के लिए खंडों की अनुमति देता है उनका पहला प्राथमिक दबाव । इस घटना को सहज टोन की घटना, एक स्वस्थ धमनी३२,३३,३४के विचारोत्तेजक संपत्ति को दर्शाता है । हालांकि खंड साम्य के लिए मिश्रित दबाव का स्तर अन्य अध्ययनों३३,३४,४२, इस अध्ययन और मैथ्यू एट अल.21के उन लोगों में उपयोग किया गया है, गोल्डिंग एट अल.३५ और गोल्डिंग एट अल४३ ५० mmHg में खंडों equilibrated । जबकि equilibrating ४० mmHg के बीच कहीं भी एकत्र खंडों-100 mmHg३२ प्रोटोकॉल के उस कदम के लिए कुछ लचीलापन और संशोधन के लिए अनुमति देता है, उन दबाव मापदंडों के भीतर एक घंटे के equiliदोलन अवधि अंततः स्वस्थ पुष्टि प्रयोग को जारी रखने के लिए धमनियों की जरूरत ।

जब उन जहाजों को अक्षुण्ण रखते हुए खोपड़ी और विल्स के सर्कल से बाएँ और दाएँ एमसीए खंडों से मस्तिष्क को हटाने चरम सावधानी ले रही है शायद पूरे प्रोटोकॉल का सबसे महत्वपूर्ण कदम है. हड्डी rongeurs, फाड़ या हटाने के दौरान खंडों की गंभीर खींच या गलती से शल्य चिकित्सा रंग के साथ जहाजों खींच जब खोपड़ी के बाहर मस्तिष्क खुदाई अंततः फसल के विनाश में परिणाम होगा के साथ मस्तिष्क पंचर एमसीए, अनुपयोगी क्षेत्रों के कारण और धमनियों के उस सेट का उपयोग बंद कर दिया है, अंततः उस जानवर के लिए पूरे प्रयोग voiding ।

यद्यपि एमसीए खंडों में विमस्तिष्कीय संवहनी प्रतिक्रियाओं या विकारी उत्तेजकों को मापने पूर्व vivo प्रभाव के बाद एकत्र या वीवो में विस्फोट tbi सफलता मिली है, कार्यप्रणाली अपनी कठिनाइयों और/ शायद एक और अधिक प्रमस्तिष्कीय vasculature के संचलन पर TBI के परिणामों की जांच के साथ जुड़े जटिलताओं का स्पष्ट प्रभाव विभिंन सामग्रियों की वजह से किए गए प्रभाव से जहाजों पर TBI का अलग से detaching है और घायल मस्तिष्क४४द्वारा उत्पंन तत्वों । इस बोधगंय विलता संभवतः पूर्व vivo का विश्लेषण द्वारा चोरी किया जा सकता है, काटा, perfused और/या पर दबाव एमसीए की vasoconstrictory प्रतिक्रियाओं । एक के लिए समय की अवधि को कम करने के प्रयास में है कि vivo में मस्तिष्क धमनियों स्थानीय रूप से छुट्टी दे दी है पैरेन्काइमल vasoactive सामग्री मौत से पहले उजागर कर रहे हैं, के बाद सीधे TBI की डिग्री कम कर सकते है मस्तिष्क धमनियों के संग्रह ऐसे लंबे समय तक जोखिम प्रभाव. Ex vivo पर अध्ययन आइसोलेटेड एमसीए इसके अतिरिक्त विशेष रिसेप्टर एगोनिस्टों के उपयोग के माध्यम से दर्दनाक संवहनी चोट के तंत्र का विश्लेषण करने की संभावना मौजूद है और विरोधी या संवहनी चोट के प्रतिष्ठित वाहनों है कि जांच के रूप में बर्दाश्त नहीं होगा कुशलतापूर्वक या vivo में भेदभावपूर्ण के रूप में । बाद में, इस पूर्व vivo विधि के साथ संयुक्त किया जा सकता है vivo दवाओं के लिए जोखिम के परिणामस्वरूप की जांच करने के लिए पेशीजनक प्रतिक्रियाओं (वाहिकसंकीर्णन या फैलाव पोत खंड के कारण intravascular या असाधारण दवा जोखिम) ।

अंय सीमाएं मोटे तौर पर या बेसब्री से शामिल है एमसीए काटा मस्तिष्क जो जहाजों के समय से पहले फाड़ में परिणाम कर सकते है से हटाने, इस प्रकार उनके उपयोग voiding । इसके अलावा, पशुओं की इच्छामृत्यु के बीच कुछ मिनट से अधिक समय देना, जहाजों का संग्रह और तैयार PSS समाधान में उनकी नियुक्ति भी उनकी व्यवहार्यता को नकार सकते हैं । जब ठीक से प्रदर्शन किया और बाद में, इस प्रोटोकॉल में वर्णित तरीकों के परीक्षण के लिए है एमसीए के बाद bTBI की प्रतिक्रियाओं के लिए शुरू से कई घंटे लगते है समाप्त करने के लिए और सफलता के लिए आवश्यक समय की लंबाई में कटौती का प्रयास प्रयोगात्मक में परिणाम कर सकते है विफलता. हालांकि, इस विधि विट्रो में किया जाता है और काफी अधिक लागत प्रभावी इंस्ट्रूमेंटेशन और उपकरणों की तुलना में vivo उच्च संकल्प चुंबकीय अनुनाद (MR) इमेजिंग४५,४६ या पारंपरिक डॉपलर सोनोग्राफी का इस्तेमाल करता है/ velocimetric तकनीक४७,४८,४९ जो भी पोत अध्ययन के लिए कार्यरत हैं ।

इन निष्कर्षों कि हल्के btbi चोट बिगड़ा मस्तिष्क डिलेटरी प्रतिक्रियाओं के साथ जुड़ा हुआ है करने के लिए कम intravascular दबाव संभवतः वाहिकाकर्ष के एक समारोह हो सकता है6,7 और vsmc अतिसंकुचन५० पहले विस्फोट जोखिम अंततः ऐसे कम सापेक्ष मस्तिष्क छिड़काव के रूप में घटनाओं के लिए अग्रणी के बाद की सूचना दी । इसके अतिरिक्त, ब्लास्ट प्रेरित नुकसान मस्तिष्क vasculature की सामान्य विस्फारात्मक प्रतिक्रियाओं बाधा संभवतः मस्तिष्क छिड़काव में आगे की कमी को बढ़ावा देने के लिए जब धमनी हाइपोटेंशन के साथ संयुक्त, लड़ाकू आपरेशनों के दौरान एक बार घटना ।

इन परिणामों से संकेत मिलता है कि bTBI धमनी संवहनी नियंत्रण की सुविधा तंत्र के लिए एक परिवर्तन में परिणाम है । हालांकि तीव्र चरण के मस्तिष्क संवहनी हानि के लिए intravascular दबाव में कटौती करने के लिए धमनी की गंभीर प्रतिक्रिया की कमी के बाद एक घंटे के बाद चोट देखा गया, वहां की सूचना में अंतराल के बाद गंभीर चरण के आसपास bTBI । क्या भौतिक और जैव रासायनिक कमी मस्तिष्क vasculature के लिए चोटों और bTBI के लिए मस्तिष्क जोखिम की पहचान के महत्व चिकित्सकीय और/या पुनर्वास के स्तर का निर्धारण करने में सहायता कर सकता है काफी चोट के तुरंत बाद सफलता ।

Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

अध्ययन एक टीम के भाग के रूप में पूरा किया गया Translational दर्दनाक मस्तिष्क चोट अनुसंधान और पुरस्कार W81XWH के लिए मूडी परियोजना द्वारा समर्थित अमेरिकी सेना चिकित्सा अनुसंधान और सामग्री कमान से 08-2-0132-रक्षा विभाग ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Advanced Blast Simulator (ABS) Dyn-FX Consulting, Ltd. and ORA, Inc. N/A Blast-simulating shock tube used to induce primary blast injuries 
Adult, male, Sprague-Dawley rats  Charles River Laboratories N/A Experimental animals
Arteriograph Living Systems Instrumentation, Inc. Arteriograph Mounting of harvested arteries and measurement of lumen diameter 
Bone rongeurs, large FST Fine Science Tools Friedman Rongeur Brain extraction from skull
Bone rongeurs, small FST Fine Science Tools Boynton Rongeur Brain extraction from skull
CaCl2  Sigma Calcium chloride Preparation of rodent middle cerebral arterial physiological salt solution (PSS)
Ear plugs 3M Foam Ear Plugs 1100 Class AL  Prevent injury of ear tympanic membrane when in the blast machine 
Glucose Sigma D-[+]-Glucose Preparation of rodent middle cerebral arterial physiological salt solution (PSS)
Isoflurane  Piramal Enterprises Limited  Isoflurane, USP Anesthetic
KCl Sigma Potassium chloride Preparation of rodent middle cerebral arterial physiological salt solution (PSS)
MgSO4•7H2O  Sigma Magnesium sulfate Preparation of rodent middle cerebral arterial physiological salt solution (PSS)
Microforceps Buxton Biomedical Inc. Micro Tying Fcps, 180mm Brain extraction from skull
Mylar sheets Texas Art Supply Mylar Membrane used for compressed air build-up during blasting
NaCl Sigma Sodium chloride Preparation of rodent middle cerebral arterial physiological salt solution (PSS)
NaHCO3 Sigma Sodium bicarbonate Preparation of rodent middle cerebral arterial physiological salt solution (PSS)
Nylon suture Ethicon 10-0 Ethilon nylon suture black monofilament 5" (13 cm) Mounting of harvested arteries and measurement of lumen diameter      
Scalpel blade #10 Bard-Parker 10 Stainless Steel Surgical Blade Brain extraction from skull
Surgical spatula Delmaks Surgico Cement Spatula  Brain extraction from skull
Thermometer  Physitemp Instruments, Inc.,  Thermalert Monitoring Thermometer Monitoring of experimental animal's core body temperature 
Volume ventilator  Harvard Apparatus, Inc. Small Animal Ventilator Constant and steading breathing of the intubated experimental animal
Water blanket Gaymar Industries, Inc.  Mul-T-Pad Temperature Therapy Pad Maintenance of experimental animal's body temperature 

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दबाव रोडेंट मध्य मस्तिष्क धमनियों पर ब्लास्ट प्रेरित न्यूरोट्रामा के प्रभाव
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Rodriguez, U. A., Zeng, Y., Parsley, … More

Rodriguez, U. A., Zeng, Y., Parsley, M. A., Hawkins, B. E., Prough, D. S., DeWitt, D. S. Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries. J. Vis. Exp. (146), e58792, doi:10.3791/58792 (2019).

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