आमतौर पर, माउस गर्दन इंजेक्शन मॉडल pruritogen प्रेरित खरोंच व्यवहार का मूल्यांकन करने के लिए प्रयोग किया जाता है. हालांकि, मॉडल केवल खुजली पर जानकारी प्रदान करता है, दर्द नहीं. यहाँ, एक गाल इंजेक्शन मॉडल चूहों में पेश किया है जो एक साथ दर्द और खुजली से संबंधित व्यवहार को मापने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
खुजली को 1941 में रोथमैन द्वारा “एक अप्रिय त्वचीय सनसनी” के रूप में परिभाषित किया गया था जो खरोंच करने की इच्छा को उत्तेजित करती है। माउस मॉडल में, खरोंच bouts आम तौर पर pruritogens द्वारा प्रेरित खुजली का मूल्यांकन करने के लिए गिना जाता है. हालांकि, पिछले रिपोर्टों से पता चला है कि algesic पदार्थ भी एक माउस गर्दन इंजेक्शन मॉडल है, जो सबसे आम व्यवहार खरोंच के लिए प्रयोग किया जाता है परीक्षण में scratching व्यवहार प्रेरित. इस खोज के कारण चूहों में खुजली का अध्ययन करना मुश्किल हो जाता है। इसके विपरीत, capsaicin, एक आम algogen, कुछ गर्दन इंजेक्शन प्रयोगों में खरोंच व्यवहार कम. इसलिए, खरोंच व्यवहार पर दर्द का प्रभाव स्पष्ट नहीं रहता है। इस प्रकार व्यवहार परीक्षणों का उपयोग करके खुजली और दर्द की अनुभूति की जांच करने के लिए एक विधि विकसित करना आवश्यक है। यहाँ, एक गाल इंजेक्शन मॉडल पेश किया है जो एक साथ दर्द को मापने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है- और खुजली से संबंधित व्यवहार. इस मॉडल में, pruritogens खरोंच व्यवहार प्रेरित करते हुए algesic पदार्थ पोंछते व्यवहार प्रेरित. इस मॉडल का उपयोग करना, लाइसोफॉस्फेटिक एसिड (एलपीए), खुजली के साथ cholestatic रोगियों में पाया एक खुजली मध्यस्थ, विशेष रूप से खुजली प्रेरित लेकिन दर्द नहीं दिखाया गया है. हालांकि, माउस मॉडल में, LPA दोनों एक pruritogen और एक algogen होने की सूचना दी गई है. एक माउस गाल इंजेक्शन मॉडल में LPA के प्रभाव में जांच से पता चला कि LPA केवल खरोंच प्रेरित, लेकिन व्यवहार पोंछते नहीं. यह इंगित करता है कि LPA चूहों और मनुष्यों में इसी तरह एक pruritogen के रूप में कार्य करता है, और खुजली अनुसंधान के लिए एक गाल इंजेक्शन मॉडल की उपयोगिता को दर्शाता है.
खुजली मूल रूप से एक सनसनी है जो त्वचा की सतह से हानिकारक सामग्री को दूर करने के लिए व्यवहार खरोंच लाती के रूप में विशेषता थी. हालांकि, खुजली एटोपिक जिल्द की सूजन, न्यूरोजेनिक घावों, और कोलेस्टेसिस1जैसे कई रोगों के कारण अप्रिय संवेदनाओं के लिए उपचारों का ध्यान केंद्रित किया गया है। इन मामलों में, खुजली दर्द के समान एक गंभीर अप्रिय सनसनी है। इसलिए, खुजली एक महत्वपूर्ण अनुसंधान लक्ष्य का प्रतिनिधित्व करता है। खरोंच व्यवहार पशु प्रयोगों में खुजली का प्राथमिक सूचक है, और खरोंच व्यवहार उनकी गर्दन पर त्वचा में pruritogens इंजेक्शन द्वारा चूहों में प्रेरित किया जा सकता है2,3. हालांकि, एक पिछले अध्ययन से पता चला है कि capsaicin, एक algogen, भी एक गर्दन इंजेक्शन मॉडल4में व्यवहार खरोंच लाती है, यह मुश्किल इस मॉडल में दर्द से खुजली भेदभाव करने के लिए कर रही है. इसके विपरीत, यह पाया गया है कि capsaicin एक गर्दन इंजेक्शन मॉडल में खरोंच व्यवहार कम, यह दर्शाता है कि खरोंच व्यवहार पर दर्द का प्रभाव जटिल है और प्रयोगात्मक स्थितियों पर निर्भर करता है. इसलिए, दर्द और खुजली से संबंधित व्यवहार के एक साथ माप pruritogens और algogens के सटीक विश्लेषण सक्षम होगा. स्टीवन जी Shimada और रॉबर्ट एच LaMotte दर्द और खुजली से संबंधित व्यवहार के एक साथ माप में गर्दन से गाल4को बदलने के द्वारा सफल रहा. गाल इंजेक्शन मॉडल में, capsaicin प्रेरित पोंछते, लेकिन व्यवहार खरोंच नहीं है, जबकि हिस्टामाइन, एक pruritogen, केवल खरोंच व्यवहार प्रेरित. इसलिए, इस मॉडल खुजली और दर्द के स्वतंत्र मूल्यांकन सक्षम बनाता है, गाल इंजेक्शन खुजली अनुसंधान के लिए एक उपयोगी मॉडल बना रही है. जब एक परीक्षण पदार्थ एक pruritogen और / या एक algogen है यह निर्धारित करने की कोशिश कर रहा, इस मॉडल गर्दन इंजेक्शन मॉडल से अधिक जानकारी प्रदान करता है. यह लेख गाल इंजेक्शन प्रदर्शन और खरोंच या पोंछते के bouts गिनती के लिए एक व्यावहारिक विधि का वर्णन करता है, और lysophosphatidic एसिड (LPA) द्वारा प्रेरित खरोंच व्यवहार के मूल्यांकन के लिए इस विधि की उपयोगिता से पता चलता है.
इस लेख में, एक गाल इंजेक्शन मॉडल पेश किया है और दर्द और खुजली से संबंधित व्यवहार के विश्लेषण के लिए उपयोगी होना दिखाया गया है.
पिछली रिपोर्ट में बताया गया था कि अल्जेसिक पदार्थ माउस गर्दन इंजेक्शन मॉडल4में खरोंच व्यवहार को प्रेरित करते हैं . इसके विपरीत, कैप्सेसिन ने अन्य गर्दन इंजेक्शन प्रयोगों में खरोंच व्यवहार को कम किया (चित्र 3)। इसलिए, खरोंच व्यवहार पर दर्द का प्रभाव स्पष्ट नहीं रहता है। इस प्रकार व्यवहार परीक्षणों के माध्यम से दर्द और खुजली की समवर्ती जांच करने के लिए एक विधि विकसित करना आवश्यक है। एक गाल इंजेक्शन मॉडल का उपयोग करके, दर्द और खुजली दोनों पर एक पदार्थ के प्रभाव का मूल्यांकन किया जा सकता है।
यह पहले से सूचित किया गया है कि intracellular LPA सीधे LPA प्रेरित खुजली5के एक तंत्र के रूप में TRPV1 और TRPA1 सक्रिय करता है. तदनुसार, एलपीए प्रेरित खुजली हिस्टामाइन स्वतंत्र हो सकता है। एक पिछले अध्ययन से यह भी पता चला है कि एक गाल इंजेक्शन मॉडल हिस्टामाइन स्वतंत्र खुजली16के मूल्यांकन के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इसलिए, इस मॉडल दोनों हिस्टामाइन पर निर्भर और स्वतंत्र खुजली के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
इस प्रयोग में महत्वपूर्ण चरणों में से एक इंजेक्शन है. क्योंकि यह एक तीव्र व्यवहार परीक्षण है, संज्ञाहरण इंजेक्शन कदम में इस्तेमाल नहीं किया जा सकता है क्योंकि यह इन व्यवहार को प्रभावित कर सकता है. इसलिए, माउस सुरक्षित रूप से आयोजित करने के लिए एक सटीक इंजेक्शन प्रदर्शन करने की जरूरत है. जब पशु पर पकड़ सुरक्षित नहीं है, खासकर जब मजबूत algogens इंजेक्शन, चूहों संघर्ष कर सकते हैं, एक गलत इंजेक्शन मात्रा और गहराई के लिए अग्रणी, परिणामों की व्याख्या करने में कठिनाई के बाद. जब एक माउस से निपटने, अंगूठे और तर्जनी के बीच झपकी पर त्वचा खींच माउस के आंदोलन को बाधित करने के लिए.
एक और महत्वपूर्ण कदम व्यवहार विश्लेषण है. क्योंकि खरोंच बहुत तेजी से है, वीडियो को ध्यान से देखा जाना चाहिए. इसके अलावा, पोंछते सौंदर्य से अलग करने के लिए मुश्किल हो सकता है। इसलिए, पहले प्रयोग के दौरान कैप्सेसिन जैसे सकारात्मक नियंत्रण रसायनों के उपयोग की सिफारिश की जाती है। रिकॉर्डिंग और फिर से खेलना शर्तों को भी दोनों व्यवहार की गिनती को प्रभावित कर सकते हैं. यदि व्यवहार का स्पष्ट रूप से निरीक्षण करना कठिन है, तो देखने के कोण4को बढ़ाने के लिए पिंजरों के चारों ओर दर्पणों का उपयोग किया जा सकता है।
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि गाल इंजेक्शन मॉडल गर्दन इंजेक्शन मॉडल की तुलना में परीक्षण रसायनों के लिए कम मात्रात्मक सटीकता दिखा सकते हैं. जैसा कि चित्र ामाल 3 और चित्रा 4में दिखाया गया है, हिस्टामाइन की समान मात्रा ने गाल मॉडल की तुलना में गर्दन मॉडल में अधिक खरोंच व्यवहार को प्रेरित किया, और गर्दन इंजेक्शन मॉडल में छोटी भिन्नता दिखाई। एक बार एक परीक्षण पदार्थ गाल इंजेक्शन मॉडल के साथ कम algesic प्रभाव के साथ एक pruritogen होना दिखाया गया है, गर्दन इंजेक्शन मॉडल अतिरिक्त मात्रात्मक विश्लेषण के लिए सिफारिश की है. यहां तक कि इन सीमाओं के साथ, गाल इंजेक्शन मॉडल परीक्षण पदार्थों के सटीक मूल्यांकन के लिए उपयोगी है, विशेष रूप से खुजली अनुसंधान के क्षेत्र में.
The authors have nothing to disclose.
हम Drs. स्टीवन जी Shimada और रॉबर्ट एच LaMotte (येल विश्वविद्यालय स्कूल ऑफ मेडिसिन, कनेक्टिकट) जिसका तरीकों (संदर्भ 4) इस तकनीक अनुकूलित किया गया था के लिए आभारी हैं। हम भी माउस चित्र बनाने के लिए श्री Kentaro Miyahara धन्यवाद. इस अध्ययन को जापान में शिक्षा, संस्कृति, खेल, विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय (सं. 15H02501 और 15H05928 से एम.टी., और एच.के. को 16K21691) और Uehara मेमोरियल फाउंडेशन (एच.के.) से वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था। हम येल विश्वविद्यालय में प्रो LaMotte द्वारा गाल इंजेक्शन विधि की शुरूआत की सराहना करते हैं.
capsaicin | Sigma | M2028 | |
diphenhydramine hydrochloride | Wako | 044-19772 | |
histamine | Sigma | H7125 | |
iMovie | Apple | ||
lysophosphatidic acid | Avanti Polar Lipids | 325465-93-8 | |
myjector | Terumo | ss-05M2913 | |
tween-80 | Sigma | P4780 | |
video camera | Panasonic | VX985M |