Summary
アレルギーの診断に血清特異免疫グロブリン E マイクロ カートリッジ ベースの化学発光システムとその有用性の評価を検出のためのプロトコルを提案する.
Abstract
アレルギー性疾患は、大人と子供の両方で共通です。原因となるアレルゲンの同定は疾患管理と予防に重要です。しかし、高い価格性能比を持つ特定免疫グロブリン E (IgE) 測定システムはプライマリ ・ ケアの病院を中心に、中国本土で欠けています。本稿では、血清中のアレルゲン特異的 IgE を検出するマイクロ カートリッジ ベースの化学発光システムを使用しての原理と操作手順について説明します。イムノ (システム 1)、工業規格からのそれらと比較した、共通のアレルゲンに感作患者を検出するシステムの再現性を評価します。イムノ (システム 1) と比較して BioIC システム (システム 2) が良好な精度と血清特異的 IgE 様々 な吸入、食物アレルゲンに対して、大幅に低いコストでの検出に感度を持って、その結果。それは低い金融手頃な価格を持っている中国本土のプライマリ ・ ケア病院でシステム 1 に良い代替として使用できます。
Introduction
アレルギーの有病率は過去数十年間に着実に増加しているし、1の世界の人口の 20-30% に影響を及ぼしています。原因となるアレルゲンの同定は疾患の管理に重要な意義です。中国では、国で登録されている体内の皮膚プリック テストは利用できないので、血清特異的 IgE の in vitro における決定は最も重要な一般的に使用されるツールの I 型アレルギーは、2を診断します。これは西部の世界で実践に似ていますが、イムノ システム (システム 1) 蛍光酵素免疫測定の基本システムは体外アレルギー診断3のためのゴールド スタンダードとして認識されて、中国での使用は非常に限られたため高い機器と試薬価格。それ故に高い価格性能比を持つ新しい代替アレルギー診断システムが必要ひどく。
BioIC システム (システム 2) は血清特異的 IgE の多重アッセイ用化学発光原理に基づくマイクロ カートリッジ ベース システムです。サイズは 7 cm × 4 cm、マイクロ カートリッジはプラスチックの射出成形の 3 つの層で構成されます。上の部分は 3 mm 厚の透明なポリカーボネート熱アセンブリ プロセス中に良好な安定性を運ぶです。一緒にアクリロニ トリル、ブタジエン、スチレン (ABS) の共重合体から構成されて 3 mm 厚底層、それは 0.5 mm 厚の中間層シリコーンゴム製のサンドイッチします。色の黒が、中間層では、化学発光検出時により低い背景を提供しています。ケイ酸ゲルの上に硝酸セルロースの膜 (NC 膜) の薄層は異なるアレルゲン蛋白質のスポッティングが可能反応ゾーンに対応する位置に散布されています。本研究の目的は、多重化された血清中のアレルゲン特異的 IgE によるマイクロ流体システムの臨床性能評価することです。
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Protocol
この研究と人間の血清の使用は、最初提携病院の広州医科大学 (GYYY-2016-73) の倫理委員会によって承認されました。すべての参加者は、単独で、あるいは (子供) の場合親を介して彼らの書面による同意を与えています。
研究会の基本情報
注: 状態キー研究所の呼吸器疾患 (空気 SKLRD) のアレルギー情報リポジトリは広州呼吸研究所病院 (GIRH) 内に開設された大規模な血清銀行です。最後の十年に開始、空気 SKLRD、すでに収集し、一緒に彼らの臨床情報 (表 1)4、5のアレルギー疾患患者の血清サンプルを格納始めました。空気 SKLRD 血清と現在の研究を行った。
- 2015 年 1 月から 2018 年 6 月に採取した血清の空気 SKLRD のデータベースを検索し、地域で共通のアレルゲンに敏感であることがわかったのアレルギー性疾患を持つ患者を選択します。
- すべての選択された患者にアレルギー性鼻炎や喘息やアレルギー性皮膚炎、じんましんなどのアレルギー関連疾患があるし、複数血清中のアレルゲン特異免疫グロブリン E (sIgE) がこれらの患者の血清に含まれていることを確保します。この地域は、システム 1 で検出された一般的なアレルゲンの感作。
- これらの科学的な目的、それらの特定の免疫不全、免疫療法に現在これらの血清試料の使用に関するインフォームド コンセントを与えることを拒否する人フォロー アップに失われた不完全なカルテの患者を除外または免疫調節剤や寄生虫感染があることが分かった。
- 検査所見への干渉を最小限に抑えるために血清コレクション前に治療や薬の処方が与えられていないことを確認します。条件を満たしていないすべての血清サンプルは拒否されました。
2. 研究の流れと利益の測定
注: マイクロ流体システムは、19 のアレルゲンを決定するための 100 μ L の血清を必要があります。静脈血 (5 mL) は、分離ゲルを含む真空血管を使用して各患者から採取しました。1,000 x gで 10 分間遠心分離した後、上層をテスト収集しました。未使用の血清は-80 ° C で保存されていた試験前に, 血清は、30 分間室温で保たれ、渦のミキサーと揺れた。凍結融解の繰り返しは避けた。
- ヤケヒョウヒダニ(d1)、コナヒョウヒダニ(d2)、ろ紙性(d201)、猫のフケ (e1)、犬のフケ (e5) バミューダ島草 (g2) の全体のアレルゲンに sIgEs の血清サンプルを主にテスト、ティモシー草 (g6)、ゴキブリ (i6)、コウジカビの fumigatus (m3)、カンジダ ・ アルビカンス(m5)、ブタクサ (w1)、卵白 (f1)、ミルク (f2)、小麦 (f4)、ピーナッツ (f13)、大豆 (f14)、アーモンド (f20) ・ カニ (f23) ・海老 (f24)。セクション 3 で与えられた指示に従います。
注: sIgE 定量は、化学発光分析装置によるアレルゲン特異的 IgE のアッセイ キット (材料の表を参照) と測定で行われました。 - 再現性に関する十分な血清 (少なくとも 900 μ L) とサンプルの中から 3 つのサンプルをランダムに選択します。9 日間連続で毎日アレルゲン sIgEs の 3 つの血清を測定変更せずに、すべての条件を維持する (すなわち、総数 100 × 9 = 900 μ L の血清)。
3 マイクロ流体システムの半自動化テスト手順
注: システム 2 は、自動マイクロ流体技術、蛋白質のマイクロ アレイ、冷や光の解析、並列の IgE 解析と画像処理技術の統合です。テスト プロトコルは 4 つの部分に分けられる: 装置、サンプル読み込み、潜伏、および測定の準備。
-
機器の準備
- PC とアナライザーの電源を入れます。
注: 電源スイッチは底面の左側です。 - PC でラビ美術館プログラムを起動します。ダーク フレーム警告ウィンドウがポップアップする場合は、リークのテストを実行する[ok]をクリックします。その後、操作インターフェイスに入るように中心のロゴをクリックします。
注: システムは、アイドル状態が 24 時間以上の場合は、リークのテストを実行するユーザーを思い出させます。 - 反応温度と CCD (電荷結合素子) 一時画面の右下隅で確認します。反応温度は 37 ° C ± 1 ° C、約 10 分で上昇して、CCD の温度は-15 ° C ± にドロップする必要が 1 ° C
- CCD の温度が-15 ° C ± にドロップ後漏れテストを実行 1 ° Cリークのテストを実行する前に計測器内部に残って他の項目がないことを確認し、ドアを閉じます。ツールをクリックして |システム テスト|リークテスト。テスト中にドアを開けないでください。テストを終了すると、レポート ウィンドウがポップアップ表示されます。
- PC とアナライザーの電源を入れます。
-
サンプル ロード
- マイクロ カートリッジに対応する試薬タンクに洗浄バッファー、バッファーの妨害の 120 μ L、60 μ A と B の基質 A と B、60 μ L、100 μ L の血清サンプルは抱合体の 620 μ L を追加します。
-
インキュベーション
- カートリッジ IDをクリックして、バーコード スキャナーを使用して、カートリッジのシリアル番号をスキャン、サンプル ID を入力、アナライザーにカートリッジを入れて、ドアを閉じる、アナライザーと分析を開始するを実行] をクリックします。
-
測定
- 測定後結果を統計解析ソフトウェア (Excel など) をエクスポートします。
注: インキュベーションの 30 分後アナライザー自動的に測定を実行、結果を報告します。
- 測定後結果を統計解析ソフトウェア (Excel など) をエクスポートします。
-
アナライザーの切り替え
- テストを終えた後、定期メンテナンスのため、カートリッジを取り外し、アナライザーの内部加熱鉄と電磁石 75% アルコールで軽く拭いてください。
注: いないハードを押すか電磁石を振る。 - ラビ美術館ウィンドウを閉じます。温度監視ウィンドウがポップアップします。CCD が 5 ° C 保護モードにあたたまるとき自動的に閉じます。その後で、それはアナライザーと PC の電源をオフにしても安全になります。
注: は CCD の温度は 5 ° C に上昇している前に、ウィンドウを監視する温度を手動で閉じていないと CCD のウォーミング アップ中に、アナライザーも PC の電源を切らないでください。
- テストを終えた後、定期メンテナンスのため、カートリッジを取り外し、アナライザーの内部加熱鉄と電磁石 75% アルコールで軽く拭いてください。
4. sIgE 反応の定義
注: 原液血清試料システム 2 の検出範囲は 0.21-100 IU/mL。
- 0.35 IU/mL のしきい値に基づいて、正6,7に 0.35 IU/mL を超える sIgE レベルを検討してください。8として sIgE テストの反応性の評価: クラス 1 (≥0.35、< 0.70 IU/mL)、クラス 2 (≥0.70 と < 3.50 IU/mL)、クラス 3 (≥3.50 と < 17.50 IU/mL)、クラス 4 (≥17.50 と < 50.00 IU/mL)、クラス 5 (≥50.00 と < 100.00 IU/mL)、とクラス 6 (≥100.00 IU/mL)。
5. 統計解析
- ヒストグラムを使用して、(図 1) の 19 のアレルゲンの陽性率を示し、検出システム (図 2)9の再現性を示すため売れ行きジェニングス曲線を使用します。
- 3 つの最も一般的な吸入性アレルゲンと食物アレルゲン (合計で、六つのアレルゲン) を選択し、その臨床診断性能10,11を評価するシステム 1 に結果を比較します。一致率、感度、特異性、正と負の予測値、評価基準として動作して特性 (ROC) カーブ (AUC) 受信機の下の領域が含まれます。
- スピアマンの相関分析12に 2 つのシステム間の相関関係を説明し、一貫性を保つのためのカッパ値を使用を適用します。カッパ値をほぼ分類パーフェクト (0.8-1.0)、実質的な物 (0.6-0.8)、中等度 (0.4-0.6)、fair (0.2-0.4)、または貧しい人々 (< 0.2)13。SPSS 23.0 とすぐ MedCalc 11.0 の統計的分析を使用し、 Pを定義 < 統計的有意性として 0.05。
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Representative Results
19 一般的なアレルゲンの陽性率
293 血清の結果は、図 3のとおりです。コナヒョウヒダニすべての吸入性アレルゲンの中で最も高い陽性率を持っていた (80.89%, 273/293) D.続いてヤケヒョウヒダニ(78.84%, 231/293)。食物アレルゲンの中でカニは最高の陽性率 (20.48%、60/293) 13.65% (40/293) エビが続きます。食物アレルゲンよりも吸入性アレルゲンの合計の陽性率が高かった。
マイクロ流体システムの再現性
猫のフケ、犬のフケ、ゴキブリ、に基づいてテスト、9 ラウンドいた 32.98 ± 8.94、1.61 ± 0.48、0.76 ± 0.18、それぞれと整合性レベルが 100% 再現性の結果 (9/9)、100% (9/9)、および 67% (6/9)。結果の分布は、図 2の売れ行き-ジェニングス曲線を示しています。すべてのデータは、許容最大の臨床エラー14に一貫している X ± 2 x SD の範囲内にあります。
2 つのシステムの比較
定性結果認めたそのネコのふけシステム 1 の最高のコンコー ダンス (95.33%, 243/150)。エビに最低の一致が見られた (40.75%、88/216)。〜 92.00% 95.33% 吸入性アレルゲンの合計の一致。食物アレルゲンのコンコー ダンス範囲 40.74%-72.39% であった。吸入の最高感度は、100% の特異性とコナヒョウヒダニ(93.94%) に見られました。食物アレルゲンの中で最高の感度は 80.65% の特異性とピーナッツ (54.55%) に見られました。表 2では、吸入性アレルゲンの評価結果をすべての食物アレルゲンに優れていたことも示します。AUC 値は 0.984 0.613 からの範囲を示した 3 つの吸入性アレルゲンの AUC が 0.950 より大きいので、システム 2 の高精度システム 1 を参照するいると判断できます。
2 つのシステムの整合性の解析は、3 つの吸入のカッパ値の間にあった 0.727-0.876 0.876 (95 %ci、0.786-0.965) としてネコのふけで見られる最大の値を持つことを示した。彼らは一般的に、落ちてきた食物アレルゲンのカッパ値よりすべて優れていた < 0.400。カッパの最小値はエビ (95 %ci、0.062-0.162) 0.112 (表 3)。スピアマンの相関分析を示した最もよい相関がみられたことでピーナッツと猫のふけ、相関係数r = 0.942 (95 %ci、0.907-0.965;p < 0.0001) とr = 0.927 (95 %ci、0.900-0.947;p < 0.0001)、それぞれ。
Xシステム 2 の結果を図 3散布を構築-軸とyに沿ってシステム 1- D. ヤケヒョウヒダニ + の濃度結果に 2 つのシステムから、sIgE の分布を表示する軸ファリーナ、猫のフケ、牛乳、エビ、ピーナッツ。一致・不一致分析 ± 1 クラスの違いを示したアレルゲンがヤケヒョウヒダニ(91.60%、250 対 229)コナヒョウヒダニ(81.25%、112 対 91)、猫のフケ (98.00%、150 対 147)、牛乳 (83.58%, 134 対 112) エビ (59.72%、216 対 129)、ピーナッツ (76.56%、64 対 49)。結合された合計一致率 81.75% (926 対 757) であった。
図 1: マイクロ流体の定量による 19 一般的なアレルゲンの検出の陽性率です。d1 -ヤケヒョウヒダニd2 -コナヒョウヒダニd201 -ろ紙性e1 - 猫のふけ、e5 - 犬のふけ、g2 - バミューダ島草 g6 - ティモシー草、i6 - ゴキブリ、m3 -アスペルギルスm5 - カンジダ ・ アルビカンス、w1 - ブタクサ, 卵白, f1 f2 - ミルク、f4 - 小麦、f13 - ピーナッツ、f14 キー - 大豆、f20 - アーモンド、f23 - カニ、f24 - エビします。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください。
図 2: 繰り返し検出マイクロ流体システムによって 3 つのアレルゲンの Levey ジェニングス グラフ。(A) (C) ゴキブリ、(B)、犬の毛、猫の毛は再現性の評価のために選ばれました。黒、緑、黄、および赤のラインを表す (X)、平均 ± 標準偏差 (SD X ±)、平均平均 + 標準偏差回二つの (X ± 2SD) と平均 + 標準偏差回複数の測定値 (± 3SD) X 3、それぞれ。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください。
図 3: 散布図を用いて六つのアレルゲン sIgE 濃度のシステム 1.システム 1 (Y-軸) とシステム 2 (X-軸)。プロット内の各行を表しますクラス ヒューズ (クラス 0: 0.35、クラス 1: 0.35 – 0.7 クラス 2: 0.7 – 3.5、クラス 3: 3.5-17.5、クラス 4: 17.5-50、クラス 5:50-100 とクラス 6: > 100 IU/mL)。影付きボックスは、集中クラスで一致した領域です。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください。
特性 | No.(%) |
性別、n(%) | |
女性 | 123(41.98%) |
男性 | 170(58.02%) |
年齢, 年, n(%) | |
中央 (25%、75%) | 23(8,36) |
≤10 | 97(33.11%) |
11-20 | 37(12.63%) |
21-40 | 101(34.47%) |
> 41 | 58(19.80%) |
診断、n(%) | |
アレルギー性鼻炎 | 92(31.40%) |
アレルギー性喘息 | 117(39.93%) |
喘息とアレルギー性鼻炎 | 36(12.29%) |
その他 | 48(16.38%) |
表 1: 患者の人口統計学的特性です。合計で 23 (四分位範囲 8 から 36 歳) の年齢の中央値と基準を満たす 293 科目が見つかりました。それら、170 (58.02%) の間で男性と 123 (41.98%)女性であった。また、92 (31.40%)それらのアレルギー性鼻炎、117 (39.93%) を持っていた。アレルギー性喘息、36 (12.29%) があった鼻炎と喘息の 48 (16.38%) の共存をしていた食物アレルギーや皮膚アレルギーなど、その他のアレルギー性疾患を持っていた。
サンプル サイズ | キャップ + | キャップ- | 合計契約 | SE | SP | PPV | NPV | AUC (95 %CI) | |||
BioIC + | BioIC- | BioIC + | BioIC- | ||||||||
d1 | 250 | 196 | 20 | 0 | 34 | 92.00% | 90.74% | 100.00% | 100.00% | 62.96% | 0.975 (0.991 に 0.947) |
d2 | 112 | 93 | 6 | 0 | 13 | 94.64% | 93.94% | 100.00% | 100.00% | 68.42% | 0.984 (0.999 に 0.941) |
e1 | 150 | 34 | 5 | 2 | 109 | 95.33% | 87.18% | 98.20% | 94.44% | 95.61% | 0.968 (0.925 0.990 に) |
f2 | 134 | 16 | 27 | 10 | 81 | 72.39% | 37.21% | 89.01% | 61.54% | 75.00% | 0.744 (0.815 に 0.661) |
f13 | 64 | 18 | 15 | 6 | 25 | 67.19% | 54.55% | 80.65% | 75.00% | 62.50% | 0.731 (0.606 0.834 に) |
f24 | 216 | 36 | 127 | 1 | 52 | 40.74% | 22.09% | 98.11% | 97.30% | 29.05% | 0.613 (0.678 に 0.545) |
d1 Der. p1、d2 Der. f1、e1 ネコのふけ、f2 ミルク、f13 ピーナッツ、f24 エビ。キャップ-イムノ + 陽性、--否定的な SE の区別、SP-特異度, PPV 陽性予測値、NPV 陰性予測値、ROC 曲線の下面積 AUC。AUC 値 95% 間隔の値 (95 %ci) はテーブルにも表示されます。 |
表 2: 2 つのシステム間の臨床性能。d1 -ヤケヒョウヒダニd2 - D. ファリーナe1 - 猫のふけ、f2 - ミルク、f13 - ピーナツ、f24 - エビします。キャップ - イムノ、+ - 肯定的な- - 否定的な SE - 感度、SP - 特異度, PPV - 肯定的な予言する値、NPV - 負の ROC 曲線下面積 AUC - の予測値。AUC 値 95% 間隔の値 (95 %ci) はテーブルにも表示されます。
Kappa(95%,CI) | Spearman'rho(95%,CI) | |
d1 | 0.727 (0.838 に開く 0, 617) | 0.896 (0.918 に 0.869) |
d2 | 0.783 (0.948 に開く 0, 617) | 0.731 (0.807 する 0.631) |
e1 | 0.876 (0.965 に 0.786) | 0.927 (0.947 に 0.900) |
f2 | 0.293 (0.463 に 0.122) | 0.681 (0.763 に 0.579) |
f13 | 0.349 (0.569 する 0.129) | 0.969 (0.981 に 0.949) |
f24 | 0.112 (0.162 する 0.062) | 0.833 (0.870 に 0.788) |
テーブル 3: 相関は、2 つのシステム間の契約です。d1 -ヤケヒョウヒダニd2 - D. ファリーナe1 - 猫のふけ、f2 - ミルク、f13 - ピーナツ、f24 - エビします。カッパは、スピアマンの Rho 値 95% 間隔の値 (95 %ci) は表に示すも。
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Discussion
結果と同様に他の多くの研究から15,16,17、その家を示した 293 アレルギー患者の血清に基づくマイクロ流体システムから結果ダニ (含むヤケヒョウヒダニ、 D. コナヒョウヒダニとB. 性) が主な吸入性アレルゲンの食品、牛乳、ピーナッツ、エビ、カニはアレルギー症状を引き起こす最も一般的なアレルゲンに対し、中国南部のアレルギー疾患に 。3 アレルゲン、再現性研究に関してそれらのすべては許容最大エラーに出会った 88.89% の全体的な繰り返しレートの良い結果を示した。
システム 1 を参照として使用して、現在の研究は、システム 2 の臨床診断の有効性を評価しました。カットオフ2として 0.35 IU/mL の血清 sIgE の sIgE > 0.35 IU/ml のサンプルは、患者は、アレルゲンや価患者の症状18より良い相関関係に敏感を意味します。3 吸入性アレルゲンの一致率が 90% を超えるすべての結果表示。~40.74%-72.39% の一致を持っていた、食物アレルゲンの検索結果に加えて合計コンコー ダンス 81.75% (757/926) であった。猫のフケ、 D. ファリーナ、ヤケヒョウヒダニのカッパ値あった 0.778、0.663、0.860 (p < 0.001).食物アレルゲンのカッパ値は 0.4 以下すべてだった。3 つの主要な吸入、食物アレルゲン、量的な結果の有意な相関関係は (rスピアマン≈ 0.681 0.969、< p 0.01) の 2 つのシステム間にみられました。
それに気づいたことrS係数中ピーナッツだった 0.969、一貫性評価指標のカッパ値のみ 0.349 (95 %ci、0.129 0.569)。そのような不一致は地域でピーナッツの感度の低い有病率が原因かもしれないし、それ故に、募集された血清の大部分その特異 ige 抗体は陰性であった。多くの研究は、sIgE 価と食物アレルギーの臨床症状との間重大な不一致を見ることができることを示されています。食物特異 IgE 定量のためのさまざまな分析システムの使用は、大きなバリエーション19を作成することも。実際にアレルギー症状を誘発する摂取のローフードではない可能性がありますが、調理や消化中に変更されたコンポーネントが生成されます。アレルゲンに異なった製造業者によってさまざまな原材料の使用は、結果不一致20にも貢献できます。
マイクロ カートリッジは 5 つの主要部分から成る: 5 つの貯蔵タンク、5 試薬配信チャンネル、5 方向ポンプ、アレルゲンのエキスを固定化することができます、単一反応ゾーン、すべて反応副生成物を収集するために廃棄物のタンク。40 アレルゲン エキスは反応帯に点在することができますまで、分析ニーズに基づいてください。PC によって制御される、5 つの一方向のポンプはガイドし抱合体、ブロッキング試薬、洗浄液、血清サンプルの流れを調整し、減算、2 段階酵素免疫アッセイを終了します。反応が完了したら、化学発光反応の画像は低解像度の冷却 CCD カメラによってキャプチャされ、信号が較正曲線を確立し、定量的 sIgE の結果を計算する PC によって処理されます。
現在の研究では、2 つのシステムが良い一貫性を示すことを示しています。ただし、システム 1 に比べ、システム 2 は使いやすく、オペレーターのトレーニング需要の減少。各マイクロ カートリッジは独自の品質管理のカーブがあるので、システムの信頼性が高くなります。システムの他の利点があります、光と小さなフット プリント、拡張セットアップ モジュールと制御用の PC に接続が容易。すべてのこれらの利点は、セットアップとランニング コストを大幅に削減し、同時に彼らシステムはプライマリ ・ ケアの病院でアレルギーのスクリーニングのために特に適して、日常臨床で精度と速度要件が損なわれない中国では。それにもかかわらず、マイクロ流体システムの 1 つの主要な欠点は、全自動システムではないし、操作中に頻繁な介入が必要です。それはまだ毎日サンプルの大きな数を処理する必要があるシステムを置き換えることはできません。
特定のアレルゲンに対する十分な肯定的な血清の不足のため、この研究はマイクロ カートリッジが南中国で利用できるわずか六つの一般的なもので利用可能なすべての 19 のアレルゲンをカバーしていません。多くの調査は、評価がまた他のアレルゲンに該当するかどうかについて詳しく説明する必要です。
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Disclosures
著者が明らかに何もありません。
Acknowledgments
著者は、原稿の準備で統計解析に梅江教授と氏ハンマー ツイをありがとうございます。本研究は、広州科学技術振興財団 (201804020043) と、国家自然科学基金、中国の (NSFC 81572063 および NSFC 81802076) によって支えられました。資金調達グループは、研究デザイン、データの解析、原稿を準備、発行するという決定に同意しました。他の資金受信されませんでしたこの研究のため。
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Agnitio BioIC Analyzer | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | BA-G2000 | |
BioIC Allergen specific-IgE Detection Kit | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | DR17A12 | |
BioIC Cartrideg Placement plate | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | T20SET | |
BioIC Reagent Dispenser | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | DS-1 | |
Image two-dimensional barcode machine | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | NLS-HR200 | |
Software Package, LabIT | Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) | Version 2.4.12 | |
VORTEX-5 Vortex Mixer | Haimen Kylinbell Lab Lastruments Co., Ltd. | VORTEX-5 |
References
- Kamble, S., Bharmal, M. Incremental Direct Expenditure of Treating Asthma in the United States. Journal of Asthma Research. 46 (1), 73-80 (2009).
- Paganelli, R., et al. Specific IgE antibodies in the diagnosis of atopic disease. Clinical evaluation of a new in vitro test system, UniCAP, in six European allergy clinics. Allergy. 53 (8), 763-768 (1998).
- Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. Correlation of serum allergy (ige) tests performed by different assay systems. Journal of Allergy and Clinical Immunology. 121 (5), 1219-1224 (2008).
- Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, Southern China. PLoS ONE. 9 (5), e94776 (2014).
- Zeng, G., et al. Component-Resolved Diagnostic Study of Dermatophagoides Pteronyssinus Major Allergen Molecules in a Southern Chinese Cohort. Journal of Investigational Allergology & Clinical Immunology. 25 (5), 343-351 (2015).
- Luo, W., et al. grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma. Molecular Immunology. 78 (2016), 105-112 (2016).
- Zeng, G., et al. Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children. Molecular Immunology. 74 (2016), 1-9 (2016).
- Lee, J. H., et al. Specific IgE measurement using AdvanSure(R) system: comparison of detection performance with ImmunoCAP(R) system in Korean allergy patients. Clinica Chimica Acta. (9-10), 914-919 (2012).
- Eckels, J., et al. Quality control, analysis and secure sharing of Luminex(R) immunoassay data using the open source LabKey Server platform. Bmc Bioinformatics. 14 (1), 145 (2013).
- Bland, J. M., Altman, D. G. Statistical methods for assessing agreement between two methods of clinical measurement. Lancet. 327 (8476), 307-310 (1986).
- Carletta, J. Assessing Agreement on Classification Tasks: The Kappa Statistic. Computational Linguistics. 22 (2), 249-254 (1996).
- Shyur, S. D., et al. Determination of multiple allergen-specific IgE by microfluidic immunoassay cartridge in clinical settings. Pediatric Allergy and Immunology. 21, 623-633 (2010).
- Cesana, B. M., Antonelli, P., Gallazzi, E., Marino, A. Comparison of measurement methods: an endless application of wrong statistical methods. Intensive Care Medicine. 37 (6), 1038-1040 (2011).
- Park, K. H., Lee, J., Sim, D. W., Lee, S. C. Comparison of Singleplex Specific IgE Detection Immunoassays: ImmunoCAP Phadia 250 and Immulite 2000 3gAllergy. Annals of Laboratory Medicine. 38 (1), 23-31 (2018).
- Teppo, H., Revonta, M., Haahtela, T. Allergic rhinitis and asthma have generally good outcome and little effect on quality of life - a 20-year follow-up. Allergy. 66 (8), 1123-1125 (2011).
- Fischer, J., et al. Prevalence of type I sensitization to alpha-gal in forest service employees and hunters. Allergy. 72 (10), 1540-1547 (2017).
- Li, J., et al. A multicentre study assessing the prevalence of sensitizations in patients with asthma and/or rhinitis in China. Allergy. 64 (7), 1083-1092 (2009).
- Ahlstedt, S. Understanding the usefulness of specific IgE blood tests in allergy. Clinical & Experimental Allergy. 32 (1), 11-16 (2002).
- Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. Accuracy of IgE antibody laboratory results. Annals of Allergy Asthma & Immunology. 100 (2), 288-289 (2008).
- Aberer, W., Kränke, B., Hager, A., Wick, G. In vitro allergy testing needs better standardization--test results from different laboratories lack comparability mostly due to missing effective standards. International Archives of Allergy & Immunology. 108 (1), 82-88 (1995).