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Medicine

Aplicación de la tecnología de microfluidos Biochip para detectar suero alergénico-específicos de la inmunoglobulina E (sIgE)

doi: 10.3791/59100 Published: April 21, 2019
* These authors contributed equally

Summary

Este papel presenta un protocolo para la detección específica de suero, inmunoglobulina E, con un sistema de quimioluminiscencia basado en cartucho de microfluidos y la evaluación de su utilidad en diagnósticos de alergia.

Abstract

Enfermedad alérgica es común en adultos y niños. Identificación de los alergenos causales es importante en la prevención y manejo de la enfermedad. Sin embargo, carece de un sistema de medición específicos de la inmunoglobulina E (IgE) con una alta relación calidad-precio en China continental, especialmente en los hospitales de atención primaria. Este documento describe los procedimientos de principio y funcionamiento de la utilización de un sistema de quimioluminiscencia basado en el cartucho de microfluidos para detectar IgE alergeno-específica en suero. Los resultados fueron comparados con los de ImmunoCAP (sistema 1), el estándar industrial, y se evalúa la reproducibilidad del sistema para detectar a pacientes sensibilizados a los alergenos comunes. Los resultados mostraron que en comparación con ImmunoCAP (sistema 1), el sistema BioIC (sistema 2) tiene buena precisión y sensibilidad en la detección de suero específico IgE contra alergenos inhalantes y alimentos distintos pero con un costo significativamente menor. Puede servir como una buena alternativa en los hospitales de atención primaria en la China continental que tienen baja rentabilidad financiera del sistema 1.

Introduction

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La prevalencia de las alergias ha aumentado de manera constante en las últimas décadas y afecta a 20% - 30% de la población mundial1. Identificación de los alergenos causales tiene gran importancia en el manejo de las enfermedades. En China, ya que no hay pruebas del pinchazo de la piel in vivo registrado en el país, determinación in vitro de IgE específicos del suero es la más importante herramienta comúnmente utilizada para alergia de tipo I el diagnóstico2. Esto es similar a las prácticas en el mundo occidental, pero aunque el sistema ImmunoCAP (sistema 1), un sistema de base de enzima-ligado del inmunosorbente de la fluorescencia, es percibido como el estándar de oro para el diagnóstico de alergia in vitro3, su uso en China es muy limitada debido a su alto precio equipo y reactivo. Por lo tanto, es urgentemente un nuevo sistema de diagnóstico de alergias alternativa con una alta relación calidad-precio.

El sistema BioIC (sistema 2) es un sistema de cartucho de microfluidos basado en el principio de quimioluminiscencia para ensayos multiplexados de suero específico IgE. Con un tamaño de 7 cm x 4 cm, el cartucho de microfluidos se compone de tres capas de plástico moldeado por inyección. La parte superior es de policarbonato transparente de 3 mm de grosor que lleva buena estabilidad durante los procesos de Asamblea termal. Junto con la capa de 3 mm de espesor inferior hecha de un copolímero de acrilonitrilo, butadieno y estireno (ABS), sandwiches los 0.5 mm de espesor capa intermedia hecha de caucho de silicona. Color negro, la capa media ofrece fondo inferior durante la detección de la quimioluminescencia. En la parte superior del gel de silicona, se rocía una fina capa de nitrocelulosa membrana (NC) en la posición correspondiente a la zona de reacción, que permite la localización de diferentes proteínas alergénicas. El propósito de este estudio es evaluar el rendimiento clínico del sistema de microfluidos para la determinación multiplexado de alergénico-específicos de IgE en suero.

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Protocol

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Este estudio y el uso de muestras de suero fueron aprobados por el Comité de ética de la primera afiliada Hospital de Guangzhou Universidad médica (GYYY-2016-73). Todos los participantes han dado su consentimiento por escrito de forma independiente o a través de sus padres (en el caso de los niños).

1. básica información del grupo de estudio

Nota: El repositorio de información de la alergia del estado clave de laboratorio de enfermedades respiratorias (aire-SKLRD) es un banco grande de suero dentro del Hospital Instituto de Guangzhou de respiratorio (GIRH). Iniciado en la última década, la SKLRD de aire ya ha comenzado a recolectar y almacenar muestras de suero de pacientes con enfermedades alérgicas, junto con su información clínica (tabla 1)4,5. El presente estudio se realizó con sueros de aire-SKLRD.

  1. Base de datos de aire SKLRD para sueros recogidos de enero de 2015 a de 2018 junio y seleccionamos a los pacientes con enfermedad alérgica, que fueron encontrados para ser sensibles a los alérgenos comunes en la región.
  2. Asegurar que todos los pacientes seleccionados tienen enfermedades relacionadas con la alergia, tales como rinitis alérgica y asma, dermatitis alérgica, o urticaria, y que el suero de estos pacientes contiene múltiples sérica alergeno-específica, inmunoglobulina E, (sIgE) sensibilizaciones de los alergenos comunes en esta región, detectados por el sistema 1.
  3. Excluir a los pacientes con historias clínicas incompletos, los perdidos durante el seguimiento, los que se niegan a dar su consentimiento informado con respecto al uso de sus muestras de suero para propósitos científicos, ésos con una inmunodeficiencia identificada, ésos actualmente en inmunoterapia o agentes inmunomoduladores, o los que se encuentran que las infecciones parasitarias.
  4. Asegúrese de que ninguna prescripción de tratamiento o fármaco fue dado antes de la colección del suero con el fin de minimizar la interferencia en los resultados del laboratorio. Todas las muestras de suero que no cumplan los criterios fueron rechazadas.

2. estudio de flujo y las mediciones de interés

Nota: El sistema de microfluidos necesita 100 μl del suero para la determinación de los 19 alérgenos. Se extrajo sangre venosa (5 mL) de cada paciente usando un recipiente vacío de sangre conteniendo gel de separación. Después de centrifugar 10 min a 1.000 x g, se recolectó la capa superior para la prueba. Suero se almacenó a-80 ° C. Antes de la prueba, el suero se mantuvo a temperatura ambiente durante 30 min y fue sacudido con un mezclador de tipo vórtex. Ciclos repetidos de congelación y descongelación se evitaron.

  1. Prueba sobre todo las muestras de suero para sIgEs a todo alergenos del Dermatophagoides pteronyssinus (d1) Dermatophagoides farinae (d2), Blomia tropicalis (d201), caspa de gato (e1), caspa de perro (e5), zacate Bermuda (g2), timothy grass) G6), cucarachas (i6), Aspergillus fumigatus (m3), Candida albicans (m5), Ambrosia (w1), clara de huevo (f1), leche (f2), trigo (f4), maní (f13), soja (f14), almendra (f20), cangrejo (f23) y camarón (f24). Siga las instrucciones en la sección 3.
    Nota: sIgE determinación se realizó con la IgE alergeno-específica análisis kit (véase la Tabla de materiales) y medido por un analizador de quimioluminiscencia.
  2. Seleccionar al azar tres muestras entre las muestras con suficiente suero (por lo menos 900 μL) para un estudio de reproducibilidad. Mantener todas las condiciones sin cambios, medir los tres sueros para alérgenos sIgEs diariamente durante 9 días consecutivos (es decir, un total de 100 x 9 = 900 μl de suero).

3. procedimiento de prueba de semi-automatización del sistema de microfluidos

Nota: El sistema 2 es la integración de la tecnología de microfluidos automático, microarrays de proteínas, análisis de luz fría, paralelo análisis de IgE y tecnología de procesamiento de imagen. El protocolo de pruebas se divide en cuatro partes: preparación de los equipos, carga de la muestra, incubación y medición.

  1. Preparación de los equipos
    1. Encienda el PC y el poder del analizador.
      Nota: El interruptor está a la izquierda de la base.
    2. Inicie el programa LabIT en el PC. Si aparece la ventana de advertencia de Marco oscuro , haga clic en Aceptar para ejecutar la prueba de fugas. Después, haga clic en el logo del centro para entrar en la interfaz de la operación.
      Nota: El sistema recordará al usuario para ejecutar la prueba de fugas si está inactivo durante más de 24 h.
    3. Compruebe la temperatura de reacción y el CCD (dispositivo de carga acoplada) Temp en la esquina inferior derecha de la pantalla. Se eleva la temperatura de reacción a 37 ° C ± de 1 ° C en unos 10 minutos, y la temperatura de la CCD debe caer hasta-15 ° C ± 1 ° C.
    4. Ejecutar la prueba de fuga después de que la temperatura de la CCD ha bajado a-15 ° C ± 1 ° C. Antes de ejecutar la prueba de fuga, asegúrese de que no hay otros artículos dejados dentro el instrumento y cierre la puerta. Haga clic en herramientas | Prueba del sistema | Prueba de fugas. No abra la puerta durante la prueba. Cuando la prueba haya terminado, aparecerá la ventana de informe.
  2. Carga de la muestra
    1. Añadir 620 μl de tampón de lavado, 120 μl de solución amortiguadora de bloqueo, 60 μL de conjugados de A y B, 60 μL de sustrato A y B y 100 μl de las muestras de suero para el correspondiente depósito de reactivo en el cartucho de microfluidos.
  3. Incubación
    1. Clic en ID del cartucho, utilice el escáner de código de barras para analizar el número de serie del cartucho, introduzca el ID de muestra, ponga el cartucho en el analizador y cierre la puerta y analizador y Ejecutar para iniciar el análisis.
  4. Medición
    1. Exportar los resultados a software estadístico (por ejemplo, Excel) después de la medición.
      Nota: Después de 30 min de incubación, el analizador realiza la medición y automáticamente informa el resultado.
  5. Conmutación en el analizador
    1. Para mantenimiento de rutina, después de terminar la prueba, retire el cartucho y el analizador hierro calefacción interna y electroimán ligeramente con alcohol del 75%.
      Nota: No presione fuerte o sacudir el electroimán.
    2. Cierre la ventana LabIT. Se abrirá la ventana de control de temperatura. Se cerrará automáticamente cuando el CCD se calienta en el modo de protección de 5 ° C. Entonces, será seguro desconectar la alimentación del analizador y PC.
      Nota: No cierre manualmente el control ventana antes de que la temperatura de la CCD ha aumentado a 5 ° C de la temperatura y no apague el analizador ni el PC durante el calentamiento de la CCD.

4. definición de reactividad sIgE

Nota: Para una muestra de suero sin diluir, el rango de detección de la 2 de sistema es 0.21 – 100 IU/mL.

  1. Basado en el valor de umbral de 0,35 UI/mL, considerar un nivel sIgE superior a 0,35 UI/mL para ser positivo6,7. Tarifa de la reactividad de las pruebas sIgE como8: clase 1 (≥0.35 y < 0,70 UI/mL), clase 2 (≥0.70 y < 3,50 UI/mL), clase 3 (≥3.50 y < 17,50 UI/mL), clase 4 (≥17.50 y < 50,00 UI/mL), clase 5 (≥50.00 y < 100,00 UI/mL) y la clase 6 (≥100.00 UI/mL).

5. estadístico análisis

  1. Utilice un histograma para mostrar la tasa positiva de los 19 alergenos (figura 1) y la curva de Levey-Jennings para demostrar la capacidad de repetición de la detección de sistema (figura 2)9.
  2. Seleccionar los tres más comunes alergenos inhalantes y alérgenos alimentarios (en total, seis alergenos) y comparar los resultados al sistema 1 para evaluar su rendimiento diagnóstico clínico10,11. Incluyen la tasa de concordancia, sensibilidad, especificidad, valores predictivos positivo y negativo y el área bajo el receptor funcionando curva característica (ROC) (AUC) como los criterios de evaluación.
  3. Aplicación de análisis de correlación de Spearman12 para describir correlaciones entre los dos sistemas y utilizar el valor kappa de consistencia. Categorizar el valor de kappa como casi perfecto (0,8 – 1,0), sustancial (0,6 – 0,8), moderada (0,4 – 0,6), Feria (0.2 – 0.4) o pobre (< 0,2)13. Uso de análisis estadístico SPSS 23.0 y MedCalc 11.0 y definir P < 0.05 como significación estadística.

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Representative Results

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Tasas positivas para los alergenos comunes 19
Los resultados de 293 sueros se muestran en la figura 3. Entre todos los alergenos inhalantes, D. farinae tuvo la mayor tasa de positiva (80.89%, 273/293), seguido por D. pteronyssinus (78.84%, 231/293). Entre los alérgenos alimentarios, el cangrejo tiene la mayor tasa positiva (20,48%, 60/293), seguido de 13,65% (40/293) de camarón. La tasa total positiva para alergenos inhalantes fue mayor que para los alérgenos alimentarios.

Repetibilidad del sistema de microfluidos
Resultados de repetibilidad para caspa de gato, caspa de perro y cucaracha, basan en nueve rondas de pruebas, fueron 32,98 ± 8.94, 1.61 ± 0.48 0.76 ± 0.18, respectivamente, y los niveles de consistencia fueron 100% (9/9), 100% (9/9) y el 67% (6/9). Distribución de los resultados se muestra con la curva de Levey-Jennings en la figura 2. Todos los datos están dentro del rango de X ± x 2 SD, que es consistente con el error clínico permisible máximo14.

Comparación de dos sistemas
Resultados cualitativos demostraron que caspa de gato tenía la mayor concordancia al sistema 1 (95.33%, 243/150). La concordancia más bajo se observó en camarones (40,75%, 88/216). La concordancia total entre los alergenos inhalantes entre 92.00% 95.33%. De los alérgenos alimentarios, el rango de concordancia fue 40.74-72.39%. La mayor sensibilidad de los inhalantes se vio en Dermatophagoides farinae (93.94%), con una especificidad de 100%. Entre los alérgenos alimentarios, la mayor sensibilidad se vio en maní (54.55%), con una especificidad de 80.65%. La tabla 2 muestra también que todos los resultados de la evaluación de alérgenos inhalantes eran superiores a los alérgenos alimentarios. Puesto que los valores AUC mostraron un rango de 0.613 a 0.984 y el AUC para los tres alergenos inhalantes fue mayor de 0.950, puede concluirse que el sistema 2 tiene una alta exactitud con referencia a sistema de 1.

Análisis de consistencia para los dos sistemas demostró que los valores kappa para los tres inhalantes eran entre 0.727 – 0.876, con el valor más alto visto en caspa de gato como 0.876 (95% IC, 0,786-0.965). Eran todo mejores que los valores kappa para los alérgenos alimentarios que, en general, cayeron < 0,400. El menor valor de kappa fue 0.112 en camarones (95% IC, 0,062-0.162) (tabla 3). Análisis de correlación de Spearman demostraron que la mejor correlación se ha visto en maní y gato caspa, con coeficientes de correlación como r = 0.942 (IC del 95%, 0,907 – 0.965; p < 0.0001) y r = 0,927 (95% IC: 0,900 – 0.947; p < 0.0001), respectivamente.

En la figura 3, se construye un diagrama de dispersión con resultados del sistema 2 a lo largo de la x-eje y sistema de 1 a lo largo de la y-eje para mostrar la distribución de la sIgE resultados de concentración de los dos sistemas para D. pteronyssinus, D. Farina de, cat caspa, leche, camarones y maní. Para un análisis de concordancia y discordancia, los alergenos que mostraron diferencias de ± 1 clase fueron D. pteronyssinus (91.60%, 229 y 250), D. farinae (81.25%, 91 vs. 112), caspa de gato (98.00%, 147 y 150), leche (83.58%, 112 vs 134), camarón (59.72%, 129 y 216) y maní (76,56%, 49 y 64). La tasa de concordancia total combinada fue de 81.75% (757 vs. 926).

Figure 1
Figura 1: las tasas de positividad de la detección de los alergenos comunes 19 por el ensayo de microfluidos. D1 - Dermatophagoides pteronyssinus, d2 - Dermatophagoides farinae, d201 - Blomia tropicalis, e1 - caspa de gato, e5 - caspa de perro, g2 - Bermuda grass, g6 - timothy grass, i6 - cucarachas, m3 - Aspergillus fumigatus, m5 - Candida albicans, w1 - ambrosía, f1 - clara de huevo, f2 - f4 - trigo, la leche, f13 - maní, f14 - soja, f20 - almendra, f23 - cangrejo y f24 - camarón. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figure 2
Figura 2: gráficas de Levey-Jennings de los tres alergenos repetidamente detectados por el sistema de microfluidos. (A) pelo de gato, de pelo de perro (B) y (C) cucaracha fueron seleccionados para la evaluación de repetibilidad. El negro, verdes, amarillas y rojas las líneas representan la media (X), la media ± la desviación estándar (X ± SD), el promedio + la desviación estándar veces dos (X ± 2) y la media + los tiempos de desviación estándar tres (X ± 3de) de mediciones múltiples, respectivamente. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figure 3
Figura 3: dispersión de parcelas de seis concentraciones de sIgE de alérgenos medidas por Sistema 1. Sistema 1 (Y-axis) y el sistema 2 (X-eje). Cada línea en el diagrama representa cortes de clase (clase 0: 0.35, clase 1: 0.35-0.7, clase 2: 0.7 – 3.5, clase 3: 3.5 – 17.5, clase 4: 17.5 – 50, clase 5:50 – 100 y la clase 6: > 100 UI/mL). Cajas de sombra son concordantes en la clase de concentración. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Característica No.(%)
Género, n(%)
Mujer 123(41.98%)
masculino 170(58.02%)
Edad, año, n(%)
Mediana (25%, 75%) 23(8,36)
≤10 97(33.11%)
11-20 37(12.63%)
21-40 101(34.47%)
> 41 58(19.80%)
Diagnóstico, n(%)
Rinitis alérgica 92(31.40%)
Asma alérgica 117(39.93%)
Rinitis alérgica con asma 36(12.29%)
Otros 48(16.38%)

Tabla 1: características demográficas de los pacientes. En total, se encontraron 293 sujetos que cumplieron con los criterios de inclusión, con una edad media de 23 (rango intercuartílico: de 8 a 36 años de edad). Entre ellos, 170 (58.02%) fueron hombres y 123 (41.98%) eran mujeres. Además, 92 (31.40%) de ellos tenían rinitis alérgica, 117 (39.93%) tenía asma, 36 (12,29%) tenía comorbilidad de 48 (16.38%), rinitis y asma tenía otras enfermedades alérgicas, como una alergia o alergias de la piel.

Tamaño de la muestra TAPA + CAP- Totalmente de acuerdo SE SP PPV VALOR ACTUAL NETO AUC (95%, IC)
BioIC + BioIC- BioIC + BioIC-
D1 250 196 20 0 34 92.00% 90.74% 100.00% 100.00% 62.96% 0.975 (0.947 a 0.991)
D2 112 93 6 0 13 94.64% 93.94% 100.00% 100.00% 68,42% 0.984 (0.941 a 0.999)
E1 150 34 5 2 109 95.33% 87.18% 98.20% 94,44% 95.61% 0.968 (0.925 a 0.990)
F2 134 16 27 10 81 72.39% 37,21% 89.01% 61,54% 75.00% 0.744 (0.661 a 0.815)
F13 64 18 15 6 25 67.19% 54.55% 80.65% 75.00% 62.50% 0.731 (0.606 a 0.834)
F24 216 36 127 1 52 40.74% 22.09% 98.11% 97.30% 29.05% 0.613 (0.545 a 0.678)
p1 D1 Der. d2 Der. f1, caspa de gato e1, f2-leche, f13 cacahuete, f24-camarón. CAP-ImmunoCAP, + positivo,--negativo, sensibilidad a la SE, SP-especificidad, valor predictivo positivo VPP, valor predictivo negativo VPN, AUC-área bajo la curva ROC. Para los valores AUC, el valor del intervalo de 95% (95% CI) también se muestra en la tabla.

Tabla 2: rendimiento clínico entre los dos sistemas. D1 - D. pteronyssinus, d2 - D. farina, e1 - caspa de gato, f2 - f13 - maní, la leche y f24 - camarón. CAP - ImmunoCAP, + - positivo, - negativo, SE - sensibilidad, SP - especificidad, PPV - valor predictivo positivo, VPN - negativo valor predictivo, AUC - área bajo la curva ROC. Para los valores AUC, el valor del intervalo de 95% (95% CI) también se muestra en la tabla.

Kappa(95%,CI) Spearman'rho(95%,CI)
D1 0.727 (0,617 a 0.838) 0.896 (0.869 a 0.918)
D2 0.783 (0,617 a 0.948) 0.731 (0.631 a 0.807)
E1 0.876 (0,786 a 0.965) 0,927 (0,900 a 0.947)
F2 0.293 (0.122 a 0.463) 0.681 (0.579 a 0.763)
F13 0.349 (0.129 a 0.569) 0,969 (0.949 a 0.981)
F24 0.112 (0,062 a 0.162) 0.833 (0.788 a 0.870)

Tabla 3: correlación y acuerdo entre los dos sistemas. D1 - D. pteronyssinus, d2 - D. farina, e1 - caspa de gato, f2 - f13 - maní, la leche y f24 - camarón. Para kappa y los valores de Rho de Spearman, el valor del intervalo de 95% (95% CI) también se muestra en la tabla.

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Discussion

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Similar a los resultados de otros muchos estudios15,16,17, los resultados del sistema de microfluidos basado en sueros de pacientes alérgicos 293 demostró que casa los ácaros del polvo (como D. pteronyssinus, D. farinaey B. tropicalis) son los principales alergenos inhalantes lleva a enfermedades alérgicas en sur de China, mientras que para alimentos, leche, maní, camarón y cangrejo son los alergenos más comunes que causan síntomas alérgicos. En relación con el estudio de la reproducibilidad en tres alérgenos, todos ellos mostraron buenos resultados, con una tasa de repetición de 88.89%, lo que significa que cumplieron con el error máximo permisible.

Utilizando el sistema 1 como referencia, el presente estudio evaluó la eficacia de diagnóstico clínico del sistema 2. Con un nivel de suero sIgE 0,35 UI/ml como límite2, una muestra con sIgE > 0,35 UI / mL implica que el paciente es sensible a los alérgenos y cuanto mayor sea el título, la mejor correlación de los síntomas del paciente18. Los resultados muestran que la tasa de concordancia de los tres alergenos inhalantes eran todos más del 90%. Además de los resultados de los alérgenos alimentarios, que tenía una concordancia de ~40.74%-72.39%, la concordancia total fue de 81.75% (757/926). El valor kappa de D. pteronyssinus, D. farinay caspa de gato fueron 0.778 0.663 y 0,860 (p < 0,001), respectivamente. Los valores kappa para los alérgenos alimentarios estuvieron todos por debajo de 0,4. Para los tres principales inhalante y alérgenos alimentarios, se observó una correlación significativa de resultados cuantitativos entre los dos sistemas (rSpearman ≈ 0.681 0,969, p < 0.01).

Se observó que mientras que el coeficiente de rS de maní fue de 0,969, el valor de kappa del índice de evaluación de consistencia era sólo 0.349 (IC del 95%: 0.129-0.569). Tal discrepancia puede ser debido a la baja prevalencia de cacahuete sensibilidad en la región y, por lo tanto, la mayoría de los sueros reclutados era negativa para eso IgE específico. Muchos estudios han indicado que podría considerarse una discrepancia significativa entre título de sIgE y los síntomas clínicos de los alérgenos alimentarios. El uso de sistemas de ensayo diferentes para la determinación de IgE específica de alimentos también puede crear variaciones grandes19. Esto puede ser debido a que no es el alimento ingerido crudo que desencadena los síntomas alérgicos, pero los componentes modificados generan durante la cocción o la digestión. El uso de diferentes materias primas por diversos fabricantes para hacer los alergenos también puede contribuir a la discrepancia de resultados20.

El cartucho de microfluidos se compone de cinco partes principales: cinco tanques de almacenamiento, cinco canales de entrega de reactivos, cinco bombas unidireccionales, una zona de reacción individual que alergeno pueden ser inmovilizados extractos y un depósito de residuos a recoger todos los subproductos de reacción. Basado en la necesidad de ensayo, hasta 40 alergénicos extractos pueden ser puntos en la zona de reacción. Las cinco bombas unidireccionales controlado por la PC, guían y coordinan el flujo de la muestra de suero, tampón de lavado, bloqueo reactivo, conjugados y resta, para terminar un análisis enzima-ligado del inmunosorbente de dos etapas. Una vez finalizada la reacción, las imágenes de la reacción de quimioluminiscencia son capturadas por una cámara CCD refrigerada de baja resolución y las señales son procesadas por la PC para establecer la curva de calibración y para calcular resultados sIgE cuantitativa y semicuantitativa.

El estudio actual demuestra que los dos sistemas demuestran buena consistencia. Sin embargo, en comparación con el sistema 1, sistema 2 es más fácil de usar y tiene una menor demanda de capacitación de operadores. Ya que cada cartucho de microfluidos tiene su propia curva de control de calidad, la fiabilidad del sistema es mucho mayor. Otras ventajas del sistema incluyen una luz y pequeña huella, una configuración modular expandible y la facilidad con la que está conectado a un PC para control de la operación. Todas estas ventajas reducen grandemente la instalación y el costo corriente, y al mismo tiempo, no pongan en peligro los requisitos de precisión y velocidad en la práctica clínica diaria, que hace que el sistema idóneo para detección de alergia en los hospitales de atención primaria en China. Sin embargo, una desventaja importante del sistema de microfluidos es que no es un sistema completamente automático, y se requiere intervención frecuente durante la operación. Todavía no puede reemplazar los sistemas que necesitan para procesar un gran número de muestras diariamente.

Debido a la falta de suficientes sueros positivos para ciertos alergenos, este estudio no cubren todos los 19 alergenos disponibles en el cartucho de microfluidos, pero sólo seis más comunes disponibles en sur de China. Se necesitan más estudios para la elaboración de la evaluación sea también aplicable a otros alergenos.

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Disclosures

Los autores no tienen nada que revelar.

Acknowledgments

Los autores agradecen profesor Mei Jiang por su ayuda en el análisis estadístico y el Sr. Hammer Tsui en la preparación del manuscrito. Este estudio fue apoyado por el Guangzhou ciencia y Technology Foundation (201804020043) y la nacional Ciencias naturales Fundación de China (NSFC 81572063 y NSFC 81802076). Los grupos de financiación de acuerdo con el diseño del estudio, análisis de datos, preparación de manuscrito y publicación. Ninguna otra financiación fue recibida para este estudio.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Agnitio BioIC Analyzer Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) BA-G2000
BioIC Allergen specific-IgE Detection Kit Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) DR17A12
BioIC Cartrideg Placement plate Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) T20SET
BioIC Reagent Dispenser Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) DS-1
Image two-dimensional barcode machine Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) NLS-HR200
Software Package, LabIT Agnitio Science & Technology(Taiwan, China) Version 2.4.12
VORTEX-5 Vortex Mixer Haimen Kylinbell Lab Lastruments Co., Ltd. VORTEX-5

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Aplicación de la tecnología de microfluidos Biochip para detectar suero alergénico-específicos de la inmunoglobulina E (sIgE)
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Huang, Z., Luo, W., Zou, X., Liu, X., Cai, C., Wu, Z., Hu, H., Sun, B. Application of Biochip Microfluidic Technology to Detect Serum Allergen-specific Immunoglobulin E (sIgE). J. Vis. Exp. (146), e59100, doi:10.3791/59100 (2019).More

Huang, Z., Luo, W., Zou, X., Liu, X., Cai, C., Wu, Z., Hu, H., Sun, B. Application of Biochip Microfluidic Technology to Detect Serum Allergen-specific Immunoglobulin E (sIgE). J. Vis. Exp. (146), e59100, doi:10.3791/59100 (2019).

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