Summary

Tracciamento oculare simultaneo e registrazioni mononeurone nei pazienti affetti da epilessia umana

Published: June 17, 2019
doi:

Summary

Descriviamo un metodo per condurre registrazioni mononeurone con tracciamento oculare simultaneo negli esseri umani. Dimostriamo l’utilità di questo metodo e illustriamo come abbiamo usato questo approccio per ottenere neuroni nel lobo temporale mediale umano che codificano gli obiettivi di una ricerca visiva.

Abstract

Le registrazioni intracraniche da pazienti con epilessia intrattabile forniscono un’opportunità unica per studiare l’attività dei singoli neuroni umani durante il comportamento attivo. Uno strumento importante per quantificare il comportamento è il tracciamento oculare, che è uno strumento indispensabile per studiare l’attenzione visiva. Tuttavia, il tracciamento oculare è difficile da usare contemporaneamente con l’elettrofisiologia invasiva e questo approccio è stato quindi poco utilizzato. Qui, presentiamo un protocollo sperimentale collaudato per condurre registrazioni mononeurone con tracciamento oculare simultaneo negli esseri umani. Descriviamo come i sistemi sono collegati e le impostazioni ottimali per registrare neuroni e movimenti oculari. Per illustrare l’utilità di questo metodo, riassumiamo i risultati resi possibili da questa impostazione. Questi dati mostrano come l’utilizzo del tracciamento oculare in un’attività di ricerca visiva guidata dalla memoria ci ha permesso di descrivere una nuova classe di neuroni chiamati neuroni bersaglio, la cui risposta rifletteva l’attenzione dall’alto verso il basso verso l’obiettivo di ricerca corrente. Infine, discutiamo il significato e le soluzioni ai potenziali problemi di questa configurazione. Insieme, il nostro protocollo e i risultati suggeriscono che le registrazioni mononeurone con tracciamento oculare simultaneo negli esseri umani sono un metodo efficace per studiare la funzione del cervello umano. Fornisce un collegamento mancato chiave tra neurofisiologia animale e neuroscienze cognitive umane.

Introduction

Le registrazioni umane mononeurone sono uno strumento unico e potente per esplorare la funzione del cervello umano con straordinaria risoluzione spaziale e temporale1. Recentemente, le registrazioni mononeurone hanno guadagnato ampio uso nel campo delle neuroscienze cognitive perché consentono l’indagine diretta dei processi cognitivi centrali alla cognizione umana. Queste registrazioni sono rese possibili dalla necessità clinica di determinare la posizione dei focolai epilettici, per i quali gli elettrodi di profondità vengono temporaneamente impiantati nel cervello di pazienti con sospetta epilessia focale. Con questa impostazione, le registrazioni mononeurone possono essere ottenute utilizzando microfili sporgenti dalla punta dell’elettrodo di profondità ibrido (una descrizione dettagliata della metodologia chirurgica coinvolta nell’inserimento di elettrodi di profondità ibrida è fornita nel precedente protocollo2). Tra gli altri, questo metodo è stato utilizzato per studiare la memoria umana3,4, emozione5,6, e attenzione7,8.

Il tracciamento oculare misura la posizione dello sguardo e i movimenti oculari (fissazioni e saccade) durante le attività cognitive. Gli eye tracker basati su video utilizzano in genere il riflesso corneale e il centro della pupilla come caratteristiche per tenere traccia nel tempo9. Il tracciamento oculare è un metodo importante per studiare l’attenzione visiva perché la posizione dello sguardo indica il focus dell’attenzione durante la maggior parte dei comportamenti naturali10,11,12. Il tracciamento oculare è stato ampiamente utilizzato per studiare l’attenzione visiva in individui sani13 e popolazioni neurologiche14,15,16.

Mentre entrambe le registrazioni mononeurone e tracciamento oculare sono utilizzati individualmente negli esseri umani, pochi studi hanno usato entrambi contemporaneamente. Di conseguenza, rimane ancora in gran parte sconosciuto come i neuroni nel cervello umano rispondono ai movimenti oculari e/o se sono sensibili allo stimolo attualmente fissato. Questo è in contrasto con gli studi con macachi, dove eye-tracking con registrazioni simultanee mononeurone è diventato uno strumento standard. Al fine di studiare direttamente la risposta neuronale ai movimenti oculari, abbiamo combinato le registrazioni dei singoli neuroni umani e il tracciamento oculare. Qui descriviamo il protocollo per condurre tali esperimenti e poi illustrare i risultati attraverso un esempio concreto.

Nonostante il ruolo consolidato del lobo temporale mediale umano (MTL) sia nella rappresentazione dell’oggetto17,18 e memoria3,19, rimane in gran parte sconosciuto se i neuroni MTL sono modulati in funzione di dall’alto verso il basso l’attenzione verso gli obiettivi rilevanti dal punto di vista comportamentale. Lo studio di tali neuroni è importante iniziare a capire come le informazioni rilevanti per gli obiettivi influenzano i processi visivi dal basso verso l’alto. Qui, dimostriamo l’utilità del monitoraggio oculare durante la registrazione dei neuroni utilizzando la ricerca visiva guidata, un paradigma noto per studiare il comportamento diretto agli obiettivi20,21,22,23, 24 Mi lasa’ di , 25. Utilizzando questo metodo, abbiamo recentemente descritto una classe di neuroni chiamati neuroni bersaglio, che segnala se lo stimolo attualmente frequentato è l’obiettivo di una ricerca in corso8. Di seguito, presentiamo il protocollo di studio necessario per riprodurre questo precedente studio scientifico. Si noti che lungo questo esempio, il protocollo può essere facilmente regolato per studiare un’attività di attenzione visiva arbitraria.

Protocol

1. Partecipanti Recluta pazienti neurochirurgici con epilessia intrattabile che sono sottoposti a posizionamento di elettrodi intracranici per localizzare le loro crisi epilettiche. Inserire elettrodi di profondità con microfili incorporati in tutte le posizioni bersaglio clinicamente indicate, che in genere includono un sottoinsieme di amigdala, ippocampo, corteccia cingolata anteriore e area motoria pre-supplementare. Vedere i dettagli per l’impianto nel nostro protocollo precedente<sup class="xref…

Representative Results

Per illustrare l’utilizzo del metodo di cui sopra, viene descritto brevemente un caso d’uso che abbiamo recentemente pubblicato8. Abbiamo registrato 228 singoli neuroni dal lobo temporale mediale umano (MTL; amigdala e ippocampo) mentre i pazienti stavano eseguendo un compito di ricerca visiva (Figura 3A, B). Durante questo compito, abbiamo studiato se l’attività dei neuroni differenziata tra fissazioni su obiettivi e…

Discussion

In questo protocollo, abbiamo descritto come impiegare registrazioni mononeurone con tracciamento oculare simultaneo e descritto come abbiamo usato questo metodo per identificare i neuroni bersaglio nella MTL umana.

L’installazione prevede tre computer: uno che esegue l’attività (computer di stimolo), uno che esegue l’eye tracker e uno che esegue il sistema di acquisizione. Per la sincronizzazione tra i tre sistemi, la porta parallela viene utilizzata per inviare trigger TTL dal computer di s…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ringraziamo tutti i pazienti per la loro partecipazione. Questa ricerca è stata sostenuta dal Rockefeller Neuroscience Institute, dalla Autism Science Foundation e dalla Dana Foundation (a S.W.), un premio NSF CAREER (1554105 a U.R.) e il NIH (R01MH110831 e U01NS098961 a U.R.). I finanziatori non hanno avuto alcun ruolo nella progettazione dello studio, nella raccolta e nell’analisi dei dati, nella decisione di pubblicazione o nella preparazione del manoscritto. Ringraziamo James Lee, Erika Quan e lo staff del Cedars-Sinai Simulation Center per il loro aiuto nella produzione del video dimostrativo.

Materials

Cedrus Response Box Cedrus (https://cedrus.com/) RB-844 Button box
Dell Laptop Dell (https://dell.com) Precision 7520 Stimulus Computer
EyeLink Eye Tracker SR Research (https://www.sr-research.com) 1000 Plus Remote with laptop host computer and LCD arm mount Eye tracking
MATLAB MathWorks Inc R2016a (RRID: SCR_001622) Data analysis
Neuralynx Neurophysiology System Neuralynx (https://neuralynx.com) ATLAS 128 Electrophysiology
Osort Open source v4.1 (RRID: SCR_015869) Spike sorting algorithm
Psychophysics Toolbx Open source PTB3 ( RRID: SCR_002881) Matlab toolbox to implement psychophysical experiments

References

  1. Fried, I., Rutishauser, U., Cerf, M., Kreiman, G. . Single Neuron Studies of the Human Brain: Probing Cognition. , (2014).
  2. Minxha, J., Mamelak, A. N., Rutishauser, U., Sillitoe, R. V. Surgical and Electrophysiological Techniques for Single-Neuron Recordings in Human Epilepsy Patients. Extracellular Recording Approaches. , 267-293 (2018).
  3. Rutishauser, U., Mamelak, A. N., Schuman, E. M. Single-Trial Learning of Novel Stimuli by Individual Neurons of the Human Hippocampus-Amygdala Complex. Neuron. 49, 805-813 (2006).
  4. Rutishauser, U., Ross, I. B., Mamelak, A. N., Schuman, E. M. Human memory strength is predicted by theta-frequency phase-locking of single neurons. Nature. 464, 903-907 (2010).
  5. Wang, S., et al. Neurons in the human amygdala selective for perceived emotion. Proceedings of the National Academy of Sciences. 111, E3110-E3119 (2014).
  6. Wang, S., et al. The human amygdala parametrically encodes the intensity of specific facial emotions and their categorical ambiguity. Nature Communications. 8, 14821 (2017).
  7. Minxha, J., et al. Fixations Gate Species-Specific Responses to Free Viewing of Faces in the Human and Macaque Amygdala. Cell Reports. 18, 878-891 (2017).
  8. Wang, S., Mamelak, A. N., Adolphs, R., Rutishauser, U. Encoding of Target Detection during Visual Search by Single Neurons in the Human Brain. Current Biology. 28, 2058-2069 (2018).
  9. Holmqvist, K., et al. . Eye tracking: A comprehensive guide to methods and measures. , (2011).
  10. Liversedge, S. P., Findlay, J. M. Saccadic eye movements and cognition. Trends in Cognitive Sciences. 4, 6-14 (2000).
  11. Rehder, B., Hoffman, A. B. Eyetracking and selective attention in category learning. Cognitive Psychology. 51, 1-41 (2005).
  12. Blair, M. R., Watson, M. R., Walshe, R. C., Maj, F. Extremely selective attention: Eye-tracking studies of the dynamic allocation of attention to stimulus features in categorization. Journal of Experimental Psychology: Learning, Memory, and Cognition. 35, 1196 (2009).
  13. Rutishauser, U., Koch, C. Probabilistic modeling of eye movement data during conjunction search via feature-based attention. Journal of Vision. 7, (2007).
  14. Wang, S., et al. Autism spectrum disorder, but not amygdala lesions, impairs social attention in visual search. Neuropsychologia. 63, 259-274 (2014).
  15. Wang, S., et al. Atypical Visual Saliency in Autism Spectrum Disorder Quantified through Model-Based Eye Tracking. Neuron. 88, 604-616 (2015).
  16. Wang, S., Tsuchiya, N., New, J., Hurlemann, R., Adolphs, R. Preferential attention to animals and people is independent of the amygdala. Social Cognitive and Affective Neuroscience. 10, 371-380 (2015).
  17. Fried, I., MacDonald, K. A., Wilson, C. L. Single Neuron Activity in Human Hippocampus and Amygdala during Recognition of Faces and Objects. Neuron. 18, 753-765 (1997).
  18. Kreiman, G., Koch, C., Fried, I. Category-specific visual responses of single neurons in the human medial temporal lobe. Nature Neuroscience. 3, 946-953 (2000).
  19. Squire, L. R., Stark, C. E. L., Clark, R. E. The Medial Temporal Lobe. Annual Review of Neuroscience. 27, 279-306 (2004).
  20. Chelazzi, L., Miller, E. K., Duncan, J., Desimone, R. A neural basis for visual search in inferior temporal cortex. Nature. 363, 345-347 (1993).
  21. Schall, J. D., Hanes, D. P. Neural basis of saccade target selection in frontal eye field during visual search. Nature. 366, 467-469 (1993).
  22. Wolfe, J. M. What Can 1 Million Trials Tell Us About Visual Search?. Psychological Science. 9, 33-39 (1998).
  23. Wolfe, J. M., Horowitz, T. S. What attributes guide the deployment of visual attention and how do they do it?. Nature Review Neuroscience. 5, 495-501 (2004).
  24. Sheinberg, D. L., Logothetis, N. K. Noticing Familiar Objects in Real World Scenes: The Role of Temporal Cortical Neurons in Natural Vision. The Journal of Neuroscience. 21, 1340-1350 (2001).
  25. Bichot, N. P., Rossi, A. F., Desimone, R. Parallel and Serial Neural Mechanisms for Visual Search in Macaque Area V4. Science. 308, 529-534 (2005).
  26. Rutishauser, U., Schuman, E. M., Mamelak, A. N. Online detection and sorting of extracellularly recorded action potentials in human medial temporal lobe recordings, in vivo. Journal of Neuroscience Methods. 154, 204-224 (2006).

Play Video

Cite This Article
Wang, S., Chandravadia, N., Mamelak, A. N., Rutishauser, U. Simultaneous Eye Tracking and Single-Neuron Recordings in Human Epilepsy Patients. J. Vis. Exp. (148), e59117, doi:10.3791/59117 (2019).

View Video