Aqui, nós descrevemos um modelo pré-clínico do grande-animal (porcine) da transplantação transplantação orthotopic do do coração que foi estabelecida firmemente e utilizada para investigar estratégias cardioprotetores novas.
50-anos após o primeiro relato bem-sucedido, o transplante cardíaco continua sendo o tratamento padrão-ouro para pacientes elegíveis com insuficiência cardíaca avançada. Vários modelos de pequenos animais de transplante cardíaco têm sido utilizados para estudar os efeitos agudos e a longo prazo de novas terapias. No entanto, poucos são testados e demonstraram sucesso em ensaios clínicos. É de fundamental importância avaliar novas terapias em um modelo de grande animal clinicamente relevante para a tradução eficiente e confiável dos achados de estudos básicos. Aqui, nós descrevemos um modelo pré-clínico do grande-animal (porcine) da transplantação transplantação orthotopic do do coração que foi estabelecida firmemente e usada previamente para investigar estratégias cardioprotetores novas. Este procedimento centra-se na lesão aguda de isquemia-reperfusão e é um método confiável para investigar novas intervenções que foram testadas e validadas em modelos experimentais menores, como o modelo murino. Demonstramos sua utilidade na avaliação do desempenho cardíaco durante o período pós-transplante precoce e outras possibilidades potenciais possibiliadas pelo modelo.
50-anos após o primeiro relato bem-sucedido, o transplante cardíaco continua sendo o tratamento padrão-ouro para pacientes elegíveis com insuficiência cardíaca avançada1. Embora os tempos isquêmicos de até quatro horas sejam tolerados adequadamente, um tempo isquêmico superior a seis horas está associado a desfechos inferiores2. A disfunção primária do enxerto continua sendo a principal causa de morbidade e mortalidade precoce após o transplante2,3. As causas da disfunção primária do enxerto são multifatoriais e incluem o uso de órgãos marginais, doença vascular pulmonar destinatária, rejeição hiperaguda e lesão de isquemia-reperfusão sustentada no momento do transplante3.
Vários estudos têm investigado novos métodos de preservação do coração do doador para reduzir a incidência de disfunção primária do enxerto4,5,6,7. É prática comum avaliar novas técnicas e tratamentos em modelos murinos de lesão de isquemia-reperfusão ou transplante cardíaco heterotópico. Adicionalmente, modelos animais pequenos permitem modelos de sobrevida e seguimento a longo prazo para investigar o desenvolvimento da rejeição e do aloenxerto cardíaco vasculopatia11,12,13. No entanto, a maioria dessas estratégias falham em ensaios clínicos iniciais de piloto ou nunca chegam a este estágio. É de suma importância avaliar novas terapias em um modelo de grande animal clinicamente relevante para uma tradução eficiente e confiável dos achados de estudos básicos.
O coração de suínos é muitas vezes considerado o mais anatomicamente semelhante ao coração humano ao usar modelos de animais grandes. Como tal, é uma plataforma ideal para realizar a pesquisa cirúrgica cardíaca. No entanto, há vários fatores importantes a serem considerados ao usar um modelo porcino. Em primeiro lugar, o tecido é tipicamente descrito como frágil e friável, especialmente no átrio direito e na artéria pulmonar, sendo propenso a lágrimas14. Adicionalmente, o coração de porco é considerado sensível à manipulação e propenso a arritmias, razão pela qual se deve administrar rotineiramente um antiarrythmetic para cada animal no início do experimento. Uma importante diferença anatômica entre o modelo porcino e o transplante cardíaco clínico é a veia hemiázima esquerda nos suínos que drena diretamente para o seio coronariano. Isto tem de ser ligado durante o procedimento de receptor para evitar hemorragias contínuas. Finalmente, o modelo porcino é muito sensível à isquemia, mas ainda é apropriado para estudos agudos no transplante cardíaco15.
Este manuscrito descreve um modelo pré-clínico de grande animal (porcina) de transplante cardíaco ortotópico que tem sido firmemente estabelecido e utilizado para investigar novas estratégias cardioprotetoras5,6,8 ,9.
Este manuscrito descreve um modelo pré-clínico grande-animal da transplantação transplantação orthotopic do do coração. Vários modelos animais pequenos da transplantação Heterotopic do coração foram usados com sucesso para estudar os efeitos de tratamentos novos para melhorar a preservação do órgão e para diminuir ferimento da isquemia-reperfusão11,12, 13. Adicionalmente, os modelos animais pequenos permitem m…
The authors have nothing to disclose.
Os autores não têm agradecimentos.
Amiodarone | Purchased from institutional pharmacy | ||
Angiocath 20G | BD | 381704 | |
Calcium Chloride 1g/10ml | Purchased from institutional pharmacy | ||
Cardioplegia solution | This should be chosen at the investigators discretion. | ||
Cautery Pencil | Covidien | E2515H | |
Central Venous Catheter double-lumen | Cook Medical | C-UDLM-501J-LSC | |
CPB pack | Medtronic | Custom-made cardiopulmonary bypass perfusion circuit. | |
D5W 5% 250ml | Baxter | JB1064 | |
DLP Aortic Root Cannula/stabber | Medtronic | 12218 | |
DLP single-lumen venous cannula (24F or 28F) | This should be chosen at the investigators discretion. | ||
Dobutamine | Purchased from institutional pharmacy | ||
Electrode Polyhesive | Covidien | E7507 | |
EOPA arterial cannula (17F or 21F) | This should be chosen at the investigators discretion. | ||
Epinephrine | Purchased from institutional pharmacy | ||
Eppendorf Tubes, 1.5 mL | Sarstedt | 72.690.001 | |
Gloves, nitrile, medium | Fischer | 27-058-52 | |
Heparin 1000 IU/ml | Purchased from institutional pharmacy | ||
Ketalean (Ketamine) inj. 100mg/ml, 50ml/vial | Health Canada | Requires health canada approval | |
Lidocaine/Xylocaine 1% | Purchased from institutional pharmacy | ||
Magnesium Sulfate 5g/10ml | Purchased from institutional pharmacy | ||
Midazolam inj. USP 5mg/ml vial/10ml | Health Canada | Requires Health canada approval | |
MPS Quest delivery disposable pack | Quest medical | 5001102-AS | |
NACL 0.9% 1L | Baxter | JB1324 | |
Organ Bag | CardioMed | 2990 | |
Pipette Tips, 1 mL | Fisherbrand | 02-707-405 | |
Propofol 1mg/ml | Purchased from institutional pharmacy | ||
Rocuronium | Purchased from institutional pharmacy | ||
Set Admin Prim NF PB W/Checkvalve | Smith Medical | 21-0442-25 | Intravenous infusion pump line. Researchers should choose infusion lines compatible with the infusion pump available at their facilities |
Set Intro Sheath 8.5FRx 10CM | Arrow | SI-09880 | |
Sofsilk 0 wax coated | Covidien | S316 | |
Solumedrol 500mg/5ml | Purchased from institutional pharmacy | ||
Suction tip | Covidien | 8888501023 | |
Suction Tubing 1/4" x 120" | Med-Rx | 70-8120 | |
Suture 5.0 Prolene BB | Ethicon | 8580H | |
Suture Prolene Blum 4-0 SH 36 | Ethicon | 8521H | |
Sutures 2.0 Prolene Blu M SH | Ethicon | 8523H | |
Sutures BB 4.0 Prolene | Ethicon | 8881H | |
Tracheal Tube, 6.5mm | Mallinckrodt | 86449 |