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Behavior

प्रकृति के विभिन्न स्तरों के साथ तीन स्थानों पर यात्रा के बाद जैवभौतिक और मनोवैज्ञानिक तनाव के स्तर को मापने

Published: June 19, 2019 doi: 10.3791/59272
Automatic Translation
1, 2, 3, 3
1School of Kinesiology and Recreation, Illinois State University, 2Department of Recreation, Park, and Tourism Studies, Indiana University, 3Department pf Environmental and Occupational Health, School of Public Health-Bloomington, Indiana University

Summary

इस पत्र का उद्देश्य तीन अलग अलग सेटिंग्स के लिए यात्रा के बाद तनाव के स्तर में परिवर्तन की पहचान करने के लिए और लार कोर्टिसोल के उपायों के आधार पर तनाव के स्तर की पहचान करने में इस्तेमाल किया तरीकों का वर्णन करने के लिए है, जेड-एमिलेस, और एक मनोवैज्ञानिक आत्म रिपोर्ट साधन.

Abstract

प्राकृतिक वातावरण के लिए यात्रा मनोवैज्ञानिक तनाव में कमी से जोड़ा गया है. हालांकि सबसे तनाव से संबंधित अनुसंधान आत्म रिपोर्ट प्रारूपों पर भरोसा किया है, अध्ययन की बढ़ती संख्या अब जैविक तनाव से संबंधित हार्मोन और उत्प्रेरक को शामिल, कोर्टिसोल और जेड-amylase के रूप में, तनाव के स्तर को मापने के लिए. यहाँ प्रस्तुत प्रकृति के विभिन्न स्तरों के साथ तीन अलग अलग स्थानों के लिए यात्रा के बाद जैवभौतिक और मनोवैज्ञानिक तनाव के स्तर पर प्रभाव की जांच करने के लिए एक प्रोटोकॉल है. Biophysical और स्वयं की रिपोर्ट मनोवैज्ञानिक तनाव का स्तर चयनित स्थानों में प्रवेश करने पर तुरंत मापा जाता है और बस साइट छोड़ने आगंतुकों से पहले. एक "drool" विधि का उपयोग करना, biophysical उपाय तीन अध्ययन स्थानों में से एक के लिए प्रवेश पर अध्ययन विषयों द्वारा प्रदान की लार के 1-2 एमएल नमूने के होते हैं. वर्तमान साहित्य द्वारा निर्धारित के रूप में, लार स्थान पर आगंतुक सगाई के अंत के बाद एक 45 मिनट की समय सीमा के भीतर एकत्र की है. लार संग्रह के बाद, नमूनों लेबल और एक जैविक प्रयोगशाला में ले जाया जाता है। Cortisol इस अध्ययन में ब्याज की जैवभौतिक चर है और एक TECAN प्लेट रीडर के साथ एक ELISA प्रक्रिया का उपयोग कर मापा. स्वयं की रिपोर्ट तनाव को मापने के लिए, perceived तनाव प्रश्नावली (PSQ), जो चिंता के स्तर की रिपोर्ट, तनाव, खुशी, और कथित मांगों. दोपहर बाद तक तीनों स्थलों पर डाटा एकत्र किया जाता है। जब सभी तीन सेटिंग्स भर में तुलना, तनाव का स्तर, के रूप में दोनों जैविक मार्करों और आत्म रिपोर्ट द्वारा मापा, सबसे प्राकृतिक सेटिंग के लिए यात्रा के बाद काफी कम कर रहे हैं.

Introduction

ऊंचा तनाव का स्तर लंबे समय से हृदय रोग, मोटापा, और मनोवैज्ञानिक विकारों1,2,3जैसे कई गंभीर स्वास्थ्य स्थितियों से जुड़ा हुआ है . अनुसंधान के एक बढ़ते शरीर से पता चलता है कि करीब निकटता या इस तरह के पार्क और गैर विकसित परिदृश्य के रूप में प्राकृतिक सेटिंग्स के लिए यात्रा मनोवैज्ञानिक अच्छी तरह से किया जा रहा है और तनाव के स्तर में कमी पर एक उल्लेखनीय प्रभाव हो सकता है1, 5,6,7,8,9,10. प्राकृतिक सेटिंग्स और तनाव के स्तर के प्रभाव के लिए स्पष्टीकरण निम्नलिखित शामिल हैं: (1) प्राकृतिक सेटिंग्स शारीरिक गतिविधि के लिए स्थानों प्रदान8,11 और (2) प्राकृतिक वातावरण के लिए आगंतुकों को ध्यान केंद्रित करने की क्षमता है अधिक गैर कार्य सोचा प्रक्रियाओं पर, जिससे ध्यान थकान12में कमी करने के लिए अग्रणी . तनाव में कमी पर प्रकृति के प्रभाव का निर्धारण करने के लिए, इस अध्ययन में तीन अलग-अलग मनोरंजन स्थलों की यात्रा के बाद मनोवैज्ञानिक तनाव (पीएसक्यू) और लार-आधारित बायोमार्कर, कोर्टिसोल और जेड-एमाइलेज की आत्म-रिपोर्ट का उपयोग किया गया है। इन स्थानों "प्राकृतिकता" के अपने स्तर के बीच बदलती हैं और एक जंगल प्रकार की स्थापना, नगर निगम पार्क, और स्थानीय फिटनेस और मनोरंजन की सुविधा शामिल हैं.

इस अध्ययन का उद्देश्य निम्नलिखित शोध प्रश्नों का समाधान करना है: (RQ1) क्या सभी तीन साइटों (अर्थात ्प्राकृतिक, अर्ध-प्राकृतिक, निर्मित) की तुलना में लार कोर्टिसोल और जेड-एमाइलस द्वारा मापे गए जैवभौतिक तनाव के स्तर में अंतर हैं? (RQ2) वहाँ मनोवैज्ञानिक तनाव के स्तर में मतभेद PSQ द्वारा मापा जाता है (चार constructs द्वारा प्रकट: मांग, चिंता, तनाव, और खुशी) जब सभी तीन साइटों (यानी, प्राकृतिक, अर्द्ध प्राकृतिक, निर्मित) भर में तुलना में?

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Protocol

यह अध्ययन इंडियाना विश्वविद्यालय संस्थागत समीक्षा बोर्ड के मानव अनुसंधान संरक्षण कार्यक्रम की नीतियों और दिशानिर्देशों का पालन करता है।

1. स्थान चयन

  1. प्रकृति के विभिन्न स्तरों के आधार पर साइट्स (n) की संख्या का चयन करें.
    नोट: हम अपने काम के लिए तीन साइटों को चुना है. "प्राकृतिकता" के स्तर पर आधारित एक सातत्य का उपयोग करना, साइट ए सबसे प्राकृतिक माना जाता था और एक झील की सीमा पर जंगली लकीरों के लगभग 1,200 एकड़ जमीन के शामिल है और एक पर्णपाती जंगल के भीतर सेट. सबसे आम गतिविधियों घूमना और वन्य जीवन देख शामिल हैं. साइट बी एक 33 एकड़ नगर निगम पार्क चलने रास्तों, समारोहों के लिए स्थानों, खेल के मैदान, और कारण मनोरंजन गतिविधियों के लिए खुले क्षेत्र अंतरिक्ष की विशेषता थी. साइट सी प्राकृतिकता के निम्नतम स्तर के साथ एक शहरी, इनडोर व्यायाम की सुविधा थी. सभी तीन साइटों के मध्य पश्चिमी संयुक्त राज्य अमेरिका में एक मध्यम आकार के शहर (46,000 लोगों की अनुमानित आबादी) के अपेक्षाकृत करीब निकटता में हैं.

2. प्रतिभागी स्क्रीनिंग और तैयारी

  1. विषयों से पहले पूर्ण भागीदार भर्ती मनोरंजन अनुभवों में संलग्न हैं।
    नोट: साइटों ए और बी के लिए, विषयों पार्क प्रवेश द्वार की पार्किंग में शोधकर्ता द्वारा संपर्क किया गया. साइट सी के लिए, विषयों इनडोर व्यायाम सुविधा के सामने डेस्क पर संपर्क किया गया. गतिविधि प्रकार में अंतर के लिए नियंत्रण करने के लिए, दोनों साइटों ए और बी के लिए भर्ती विषयों predominately लंबी पैदल यात्रा कर रहे थे, जबकि साइट सी के लिए प्राथमिक गतिविधि चल रहा था या इनडोर ट्रैक पर चल रहा था.
  2. भर्ती के दौरान, लार कोर्टिसोल नमूने इकट्ठा करने से संबंधित दिशा निर्देशों का पालन करने के लिए विषयों को याद दिलाना। वे खाने के लिए या लार के नमूने प्रदान करने से पहले 10 मिनट पीना नहीं चाहिए.
    नोट: यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि इस मामले में, लार के नमूने मात्रा या कमजोर पड़ने (संकेंद्रण) के लिए सामान्यीकृत नहीं थे - यानी कि प्रतिभागियों को पर्याप्त रूप से हाइड्रेटेड थे और /
  3. प्रत्येक प्रतिभागी को लाल बाजूबंद (या समान रूप से ध्यान देने योग्य कपड़े) दें ताकि उनकी सहभागिता के अंत में उभरते समय आसान पहचान की अनुमति दी जा सके।
  4. 30-40 मिनट का समय आवंटन असाइन करें ताकि तीनों साइटों के सभी विषय प्रत्येक साइट में समान समय व्यतीत करें. उन विषयों को शामिल न करें जो नमूने के शेष की तुलना में काफी अधिक या कम समय खर्च करते हैं.
  5. गतिविधि के प्रकार को संगत बनाए रखें.
    नोट: इस मामले में, "मध्यम" गतिविधि चल रहा था या लंबी पैदल यात्रा. विषय है जो गतिविधियों में लगे काफी चलने या लंबी पैदल यात्रा से अलग नमूने से बाहर रखा गया था. उदाहरण के लिए, जो विषय मछली पकड़ने, पिकनिक, या वजन उठाने थे संबंधित नमूनों में शामिल नहीं थे.

3. शर्तों और प्रयोगात्मक डिजाइन

  1. एक अर्ध-प्रयोगात्मक पूर्व परीक्षण /पोस्ट-परीक्षण डिजाइन का उपयोग करें।
  2. विषयों की पहचान करने और भाग लेने के लिए उनके सहमत होने पर, प्रत्येक विषय को पढ़ने के लिए और स्वैच्छिक प्रकृति, उद्देश्य, और अध्ययन की प्रक्रियाओं को समझा एक आईआरबी फार्म पर हस्ताक्षर करने के लिए पूछना.
  3. इस प्रक्रिया के बाद, भविष्य की पहचान के लिए कपड़े का एक टुकड़ा (उदाहरण के लिए, लाल आर्मबैंड) विषयों दे और तनाव के स्तर के शारीरिक और मनोवैज्ञानिक उपायों को प्राप्त (यानी, PSQ, लार के 1-2 एमएल कि थूक है या एक परीक्षण ट्यूब में drooled). देर से दोपहर से शाम तक नमूने एकत्र करें।
    नोट: इन आंकड़ों शोधकर्ताओं द्वारा एकत्र किए गए दोनों 1) बस से पहले विषयों साइट में प्रवेश किया और 2) तुरंत साइट के लिए यात्रा समाप्त होने पर.

4. लार के नमूने

  1. नमूना कमजोर पड़ने से बचने के लिए, लार के नमूने प्रदान करने से पहले 10 मिनट खाने, पीने, या मुंह कुल्ला करने के लिए नहीं विषयों पूछना।
  2. विषयों से पूछो 1-2 एमएल लार नमूने प्रदान करने के लिए (फोम को छोड़कर) सिर्फ मनोरंजन अनुभव से पहले और तुरंत अनुभव के समापन के बाद.
  3. एक निष्क्रिय drool विधि का उपयोग कर लार नमूने ले लीजिए:
    1. प्लास्टिक पीने के भूसे में 2 विषय ों को 2 एमएल क्रायोविज में ड्रूल करने के लिए विषय प्रदान करें (सामग्री की सारणीदेखें )।
    2. उनके मुंह में लार पूल करने के लिए अनुमति देने के लिए विषयों को निर्देश, तो पुआल नीचे और cryvial में drool. सालारी संग्रह और हैंडलिंग सलाह (2011) के अनुसार, 1 एमएल (फोम को छोड़कर) अधिकांश परीक्षणों के लिए पर्याप्त है।
    3. डेटा संग्रह के समय को इंगित करने के लिए एक असाइन किए गए 3-अंकीय ID संख्या (यानी, 001) और पत्र के साथ लेबल नमूने (यानी, A पूर्व परीक्षण का प्रतिनिधित्व करता है, बी पोस्ट-परीक्षण का प्रतिनिधित्व करता है; जहां 001A आयोजन करने से पहले भागीदार 001 द्वारा प्रदान किए गए लार नमूने का प्रतिनिधित्व करता है मनोरंजन अनुभव).
    4. नमूना एकत्र और लेबल के बाद, यह तो कोई अधिक से अधिक 2 एच के लिए सूखी बर्फ से भरा एक स्टेरॉयड फोम बॉक्स में अस्थायी रूप से जमे हुए संग्रहीत किया जाना चाहिए.
    5. चिह्नित नमूनों को एक प्रयोगशाला में ले जाएं और विश्लेषण किए जाने तक -80 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें।

5. जेड-एमाइल्स का परिमाणीकरण

नोट: इस परख में, जेड-एमिलेज हाइड्रोलीज़ 2-क्लोरो-पी-निट्रोफेनिल-जेड-डी-माल्टोट्राइसाइड को 2-क्लोरो-नाइट्रोफेनोल बनाता है और ग्लूकोज बनाता है, 2-क्लोरो-पी-नाइट्रोफेनिल-डी-माल्टोसाइड, माल्टोट्राइज, और ग्लूकोज बनाता है। अभिक्रिया की निगरानी 405 दउ के अवशोषण पर की जाती है, जो प्रतिदर्श में जेड-एमाइलस क्रियाकलाप से मेल खाती है। यह परख 0 और 2000 U/L के बीच रैखिकता को दर्शाता है।

  1. सामग्री
    1. लार के नमूनों में जेड-एमाइल्स की मात्रा निर्धारित करने के लिए तरल एमिलस अभिकर्मक सेट (सामग्री की सारणीदेखें) का उपयोग किया जाता है। सभी अभिकर्मकों के लिए तैयार करने के लिए उपयोग तरल पदार्थ के रूप में प्रदान की जाती हैं और 0-4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत.
    2. एक बहु मोड पाठक काप्रयोग करें (सामग्री की तालिका देखें) परख के दौरान 37 डिग्री सेल्सियस के लिए नियंत्रित तापमान के साथ 405 एनएम पर एक ऑप्टिकल घनत्व पढ़ने में सक्षम.
  2. विश्लेषण
    1. विश्लेषण से पहले बर्फ पर नमूने thaw.
    2. 1x पीबीएस (10 एल लार के + 90 डिग्री एल पीबीएस) के साथ 1:10 नमूनों को पतला करें।
    3. डुप्लिकेट में प्रत्येक नमूने का विश्लेषण करें.
    4. एमिलेस अभिकर्मक को कम से कम 30 मिनट के लिए 20-25 डिग्री सेल्सियस तक बराबर करें।
    5. प्रत्येक नमूने के लिए एक 96 अच्छी तरह से माइक्रोप्लेट में एमिलेस अभिकर्मक का 0.1 एमएल जोड़ें।
    6. माइक्रोप्लेट को कम से कम 5 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर प्री-इनक्यूबेट करें।
    7. नमूना के 2.5 डिग्री सेल्सियस जोड़ें amylase अभिकर्मक.
    8. 60 s के बाद एक प्रारंभिक पढ़ने ले लो.
    9. एक अतिरिक्त 2 मिनट के लिए हर 60 s रीडिंग जारी रखें.
    10. प्रति मिनट माध्य अवशोषण अंतर की गणना करें ([Abs/min)
  3. गणना
    1. amylase गतिविधि की गणना करने के लिए, निम्न सूत्र का उपयोग करें:
      Equation 1
      जहां [Abs/min ] प्रति मिनट अवशोषण अंतर में परिवर्तन; टी वी कुल परख मात्रा (0.1025 एमएल); *1000 ] U/mL के U/L में रूपांतरण; एमएमए - मिलीमोलर अवशोषण 2-क्लोरो-पी-नाइट्रोफेनोल की क्षमता ] 12.9; SV - नमूना मात्रा (0.0025 एमएल); और एल.पी. - प्रकाश पथ (1 सेमी). प्रतिस्थापन देता है:
      Equation 2
      अतः उधल में एमिलस प्राप्त करने के लिए 3178x को कम करने के कारक (10) से र्बों को गुणा करें।
    2. 2000 से ऊपर के नमूनों के लिए U/L (परख रैखिकता) आगे पतला (कम से कम 2x पीबीएस का उपयोग कर) और फिर से परख, तो अतिरिक्त कमजोर पड़ने कारक द्वारा $-amylase परिणाम गुणा.

6. कोर्टिसोल की मात्रा

नोट: इस परख में, मुक्त कोर्टिसोल एक कोर्टिसोल मानक वक्र का उपयोग कर लार में मात्रा निर्धारित है। मानक और पतला नमूने एक microtiter प्लेट है कि एक एंटीबॉडी के साथ पूर्व लेपित है करने के लिए जोड़ रहे हैं. एक कोर्टिसोल-पेरोक्सिडेज संयुग्मी को कुओं में जोड़ा जाता है, इसके बाद कोर्टिसोल के लिए मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के अलावा। नमूना में कोर्टिसोल की एकाग्रता बढ़ जाती है के रूप में कोर्टिसोल/

  1. सामग्री
    1. लार के नमूनों में कोर्टिसोल की मात्रा निर्धारित करने के लिए कॉर्टिसोल एंजाइम इम्युनोसाय किट (सामग्री की तालिकादेखें) का उपयोग करें। इस परख करने के लिए आवश्यक सभी अभिकर्मकों किट में शामिल किए गए हैं. किट के सभी घटकों की समय सीमा समाप्ति की तारीख तक पहुँचने से पहले 0-4 डिग्री सेल्सियस पर जमा हो जाती है।
    2. 450 एनएम पर एक ऑप्टिकल घनत्व (ओडी) को पढ़ने में सक्षम एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करें (सामग्री की तालिकादेखें), साथ ही प्लेट रीडर से ओडी रिकॉर्डिंग का उपयोग करने में सक्षम सॉफ्टवेयर चार पैरामीटर लॉजिस्टिक वक्र (4 पीएलसी) फिटिंग प्रदर्शन करने के लिए।
  2. अभिकर्मक तैयारी
    1. सभी अभिकर्मकों को कम से कम 30 मिनट के लिए 20-25 डिग्री सेल्सियस तक बराबर करने की अनुमति दें।
    2. कोर्टिसोल परख बफर 1:5 deionized पानी का उपयोग कर पतला.
    3. डीऑनीकृत जल का उपयोग करके धोने के बफर 1:20 को पतला करें।
      नोट: परख और धोने बफ़र्स 3 महीने के लिए स्थिर हैं जब 0-4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत.
  3. नमूना तैयारी
    1. विश्लेषण से पहले बर्फ पर नमूने thaw.
    2. कोर्टिसोल परख बफर के साथ 1:10 नमूनों को पतला करें (लार का 20 डिग्री सेल्सियस + बफर का 180 डिग्री सेल्सियस) और तैयारी के 2 एच के भीतर उपयोग करें।
  4. मानकों की तैयारी
    1. लेबल ग्लास टेस्ट ट्यूब #1-#7।
    2. पाइप्ट 225 जेडएल परख बफर ट्यूब #1 में और 125 डिग्री सेल्सियस ट्यूबों में बफर #2-#7।
    3. ट्यूब #1 और भंवर के लिए कोर्टिसोल स्टॉक समाधान के 25 डिग्री एल जोड़ें।
    4. ट्यूब #1 से बफर के 125 डिग्री एल निकालें और यह ट्यूब #2 में जोड़ें, तो भंवर.
    5. ट्यूबों के लिए सीरियल कमजोर पड़ने #3 दोहराएँ #7.
      नोट: प्रत्येक मानक के अंतिम कोर्टिसोल सांद्रता तालिका 1में दिखाया गया है।
    6. मानक तैयारी के 2 घंटे के भीतर इस्तेमाल किया जाना चाहिए.
मानक #1 #2 #3 #4 #5 #6 #7
परख बफर वॉल्यूम (जेडएल) 225 125 125 125 125 125 125
अलावा स्टॉक एसटीडी #1 #2 #3 #4 #5 #6
इसके अलावा की मात्रा ($L) 25 125 125 125 125 125 125
अंतिम एकाग्रता (पीजी/ 3200 1600 800 400 200 100 50

तालिका 1: मानक वक्र तैयारी तालिका.

  1. विश्लेषण
    1. माइक्रोप्लेट सेट करने के लिए एक गाइड के रूप में चित्र 1 में नीचे प्लेट लेआउट का उपयोग करें।
    2. यह अभिकर्मकों के अलावा के लिए एक multichannel pipette का उपयोग करने के लिए सिफारिश की है.
    3. प्लेट में कुओं की उचित संख्या में 50 डिग्री सेल्सियस के नमूने या मानकों को जोड़ें। नमूने और मानकों डुप्लिकेट में चलाया जाना चाहिए.
    4. गैर विशिष्ट बाइंडिंग (एनएसबी) कुओं में परख बफर (75 डिग्री सेल्सियस) जोड़ें।
    5. अधिकतम बाइंडिंग (B0) कुओं और शून्य मानक (रिक्त) कुओं में परख बफर (50 डिग्री सेल्सियस) जोड़ें।
    6. प्रत्येक अच्छी तरह से कोर्टिसोल संयुग्मी के 25 डिग्री सेल्सियस जोड़ें।
    7. एनएसबी कुओं को छोड़कर प्रत्येक कुएं में कोर्टिसोल एंटीबॉडी का 25 डिग्री सेल्सियस मिलाकर डालें।
    8. अभिकर्मकों को मिलाने के लिए प्लेट के साइड को धीरे से टैप करें।
    9. प्लेट सीलर के साथ कवर करें और कमरे के तापमान (आरटी) पर 1 एच के लिए 20-25 डिग्री सेल्सियस पर हिलाएं।
    10. अच्छी तरह से सामग्री निकालें और धोने बफर के साथ प्रत्येक अच्छी तरह से 4x कुल्ला (300 $l). washes के बीच शोषक तौलिए पर सुखाने के लिए प्लेट टैप करें।
    11. प्रत्येक अच्छी तरह से करने के लिए TMB सब्सट्रेट जोड़ें (100 $L).
    12. प्लेट को 30 मिनट तक बिना मिलाते हुए 20-25 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें।
    13. प्रत्येक अच्छी तरह से करने के लिए बंद समाधान जोड़ें (50 $L).
    14. 450 एनएम पर माइक्रोप्लेट के प्रत्येक कुएं में ऑप्टिकल घनत्व पढ़ें।
    15. प्रत्येक मानक के लिए ऑप्टिकल घनत्व औसत, तो नमूना और एनएसबी कुओं के लिए मतलब ऑप्टिकल घनत्व घटाना.
    16. अधिकतम बाइंडिंग (B0) नियंत्रणों का उपयोग करके सभी नमूनों के लिए % बाउंड (B/B0) परिकलित करें.
    17. %B/B0 वक्र से परिकलित चार-पैरामीटर लॉजिस्टिक प्रतिगमन वक्र फिटिंग में सक्षम सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके एक मानक वक्र बनाएँ.
    18. pg/mL में कोर्टिसोल मान प्राप्त करने के लिए कमजोर पड़ने कारक (10) द्वारा परिणाम गुणा करें।
    19. ऑप्टिकल घनत्व उच्चतम मानक से ऊपर गिरने के साथ नमूने आगे परख बफर और फिर से कहा जाता है के साथ पतला किया जाना चाहिए, तो परिणाम अतिरिक्त कमजोर पड़ने कारक द्वारा गुणा किया जाना चाहिए.

Figure 1
चित्र 1 : उदाहरण प्लेट लेआउट. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

7. मनोवैज्ञानिक माप (परेशान तनाव प्रश्नावली)

  1. Fliege एट अल 13 द्वारा प्रकाशित PSQका उपयोग कर विषयों के मनोवैज्ञानिक स्तर को मापने, जो चार कारकों (चिंता, तनाव, तनाव, खुशी) शामिल हैं और 20 मदों का इस्तेमाल करता है.
  2. बस अपने मनोरंजन के अनुभव से पहले और तुरंत अनुभव के समापन के बाद PSQ को भरने के लिए विषय से पूछो.
  3. प्रत्येक विषय के जैव-भौतिक स्तर के समान 3 अंकों की आईडी संख्या के साथ टैग प्रश्नावली।

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Representative Results

नमूना विवरण
एक कोटा नमूना तकनीक का उपयोग, इस अध्ययन के तीन साइटों में से प्रत्येक से 35 आगंतुकों की भर्ती की. इस अध्ययन में कुल 105 विषयों की भर्ती की गई, जिनमें 63 पुरुष और 42 महिलाएं शामिल थीं। तीन अलग-अलग साइटों से भर्ती आगंतुकों की औसत उम्र 25.9 साल (साइट ए), 37.2 साल (साइट बी), और 28.8 साल (साइट सी) थे। चयनित तीन स्थलों पर विषयों के दौरे की आवृत्ति भी दर्ज की गई। साइट ए और साइट सी के लिए, विषयों के बहुमत प्रति सप्ताह एक से तीन बार इस साइट का दौरा किया. साइट बी में विषयों के लिए, यात्रा की उनकी आवृत्ति समान रूप से प्रति सप्ताह एक से तीन बार और प्रति सप्ताह तीन बार से अधिक के बीच विभाजित किया गया था.

जैवभौतिक और मनोवैज्ञानिक तनाव संकेतक. शारीरिक तनाव के स्तर में परिवर्तन की पहचान करने के लिए कोर्टिसोल और जेड-एमिलेस स्तर के जैवभौतिक उपायों का उपयोग किया गया। मनोवैज्ञानिक तनाव में परिवर्तन PSQ साधन के माध्यम से पहचान की गई.

कॉर्टिसोल के स्तर और जेड-एमाइलेज स्तर पर मनोरंजन स्थल दर्शन के प्रभाव
पहले शोध प्रश्न में पूछा गया था कि क्या साइट के प्रकार (जैसे, प्रकृति के स्तर) के एक समारोह के रूप में कोर्टिसोल और जेड-एमाइलेज के स्तर में अंतर होगा। एक युग्मित नमूना टी-परीक्षण के परिणामस्वरूप साइट A (प्राकृतिक सेटिंग) का दौरा करने के बाद लार कोर्टिसोल में एक महत्वपूर्ण कमी हुई [ 31 ] 3.26, p और lt; .01, चित्र 2देखें। साइट बी और सी में कोर्टिसोल के स्तर में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं देखा गया। सभी तीन साइटों में अपने कोर्टिसोल के स्तर में विषयों में परिवर्तन की तुलना करते समय, ANOVA परीक्षण के परिणामों ने संकेत दिया कि विभिन्न साइटों (प्रकृति के स्तर) कोर्टिसोल के स्तर में परिवर्तन विषयों पर एक समग्र महत्वपूर्ण प्रभाव नहीं था -एफ(2,95 ) [ 1.86, च [ 0.16] छोटे प्रभाव आकार (0.01-0.04) के साथ।

तनाव के स्तरों में परिवर्तन के मापन (पूर्व/पोस्ट विजिशन) जेड-एमिलेस के स्तरों का उपयोग करते हुए तीन अध्ययन स्थानों के बीच मिश्रित निष्कर्ष ों के परिणामस्वरूप। उपयोग युग्मित प्रतिदर्श t-परीक्षणों के बाद साइट C पर जाने के बाद $-amylase के स्तर में महत्वपूर्ण वृद्धि का संकेत मिलता है -t34 ] 2.79, च और lt; .01. साइट A या साइट B. पर जाने के बाद सांख्यिकीय अंतर नहीं देखे गए (चित्र 3देखें ) ANOVA तकनीकों का उपयोग करके विश्लेषण ने विभिन्न स्थानों के साथ स्थान के मुख्य प्रभाव का संकेत दिया, [-एमाइलस स्तरों में परिवर्तन करने वाले विषयों पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा ]F(2,101)] 3.36, p और lt; 0.05]। साइट बी की तुलना में साइट सी पर जाने के बाद Scheffe पोस्ट-हॉक विश्लेषण का उपयोग करना, जेड-एमाइलस स्तर काफी अधिक था। साइट A और साइट B, या साइट A और साइट C. प्रभाव आकार (0.03-0.01) के बीच आगंतुकों की तुलना करते समय $-amylase के स्तर पर महत्वपूर्ण अंतर की कमी थी और छोटे होने के लिए निर्धारित किया गया था।

मनोवैज्ञानिक तनाव के स्तर पर मनोरंजन साइट यात्रा के प्रभाव
युग्मित नमूना टी-परीक्षण क्रमशः तीन साइटों के बीच मनोवैज्ञानिक तनाव के स्तर के पूर्व और बाद की यात्रा की तुलना करने के लिए लागू किए गए थे। जैसा कि चित्र 4 और 5 में दिखाया गया है, तीन स्थानों पर जाने के बाद, मांगों और चिंता के कारकों पर महत्वपूर्ण कमी देखी गई (च और 0.01) का अवलोकन किया गया। तीन स्थानों में से किसी के लिए कारक, तनावमें कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं देखा गया। (चित्र 6देखें ) । महत्वपूर्ण वृद्धि साइटों ए और साइट बी में कारक, खुशीके लिए सूचित किया गया. साइट C पर आने वाले आगंतुकों के लिए कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं देखा गया (चित्र 7देखें).

यह निर्धारित करने के लिए कि क्या तीन साइट में से कौन सा मनोवैज्ञानिक तनाव के विषयों के स्तर को कम करने में अधिक प्रभावशाली है, ANOVA परीक्षणों के परिणाम ने तीन साइटों के बीच महत्वपूर्ण अंतर का संकेत दिया (च और 0.01) पोस्ट-हॉक विश्लेषण के साथ Scheffe विधि, साइट ए का दौरा करने के बाद खुशी के स्तर में महत्वपूर्ण वृद्धि रिपोर्टिंग, साइट बी और साइट सी पर जाकर आगंतुकों की तुलना में. तीन स्थानों पर मांगों , चिंताओंऔर तनाव (च ) में परिवर्तन में कोई अंतर नहीं पाया गया .

सारांश में, साइट ए (सबसे प्राकृतिक) के लिए आगंतुकों कोर्टिसोल के महत्वपूर्ण कम स्तर की सूचना दी; जैविक तनाव के स्तर में कमी का सुझाव. इसके अलावा, के रूप में PSQ द्वारा मापा, मांगों और चिंताओंके मनोवैज्ञानिक कारकों में महत्वपूर्ण कमी, और खुशी के स्तर में एक महत्वपूर्ण वृद्धि साइट ए के लिए आगंतुकों में देखा गया (अर्द्ध प्राकृतिक) मांग और चिंताओं के स्तर में कमी की सूचना दी , और खुशीका स्तर बढा हुआ है . सी (निर्मित वातावरण) मांग और चिंताओं के स्तर में दो घट जाती है सूचित किया गया. दिलचस्प बात यह है कि साइट सी की यात्रा के बाद जेड-एमाइल्स के स्तर में काफी वृद्धि हुई। इसके अलावा अनुसंधान संभावित कारकों के प्रभाव की जांच करने के लिए warranted है, इस तरह के विशिष्ट गतिविधि या सामाजिक आसपास के रूप में, विशेष रूप से उत्प्रेरक पर, जेड-amylase.

Figure 2
चित्र 2 : तीन अलग अलग साइटों का दौरा करने के बाद कोर्टिसोल के स्तर में परिवर्तन. यह आंकड़ा विषयों से पता चलता है कोर्टिसोल स्तर से पहले और प्रकृति के विभिन्न स्तरों का प्रतिनिधित्व तीन अलग अलग साइटों पर जाकर के बाद मापा: साइटें ए, बी, और सी डेटा मतलब के रूप में प्रस्तुत कर रहे हैं - प्राकृतिक लॉग पैमाने में एसडी. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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चित्र 3 : तीन अलग अलग साइटों का दौरा करने के बाद amylase के स्तर में परिवर्तन. यह आंकड़ा साइट ए, बी, और सी डेटा पर जाने से पहले और बाद में मापा विषयों amylase स्तर से पता चलता है मतलब के रूप में प्रस्तुत कर रहे हैं - प्राकृतिक लॉग पैमाने में एसडी. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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चित्र 4 : तीन अलग अलग साइटों का दौरा करने के बाद मांगों के कथित स्तर में परिवर्तन. यह आंकड़ा साइट ए, बी, और सी डेटा पर जाने के बाद कम हुई मांगों के विषयों के स्तर को दर्शाता है, जिसका अर्थ है - एसडी. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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चित्र 5 : तीन अलग अलग साइटों का दौरा करने के बाद चिंताओं के कथित स्तर में परिवर्तन. यह आंकड़ा साइट ए, बी, और सी डेटा पर जाने के बाद कम चिंताओं के विषयों के स्तर को दर्शाता है, मतलब के रूप में प्रस्तुत किए जाते हैं - एसडी. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 6
चित्र 6 : तीन अलग अलग साइटों का दौरा करने के बाद तनाव के कथित स्तर में परिवर्तन. यह आंकड़ा साइट ए, बी, और सी डेटा पर जाने के बाद कम तनाव के विषयों के स्तर को दर्शाता है, जिसका अर्थ है - एसडी. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 7
चित्र 7 : तीन अलग अलग साइटों पर जाकर खुशी के कथित स्तर में परिवर्तन. यह आंकड़ा साइट ए, बी, और सी डेटा पर जाने के बाद बढ़ी हुई खुशियों के विषयों के स्तर को दर्शाता है, जिसका अर्थ है - एसडी. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

इस अध्ययन का उद्देश्य प्रकृति के विभिन्न स्तरों के साथ तीन अलग अलग सेटिंग्स के लिए मनोरंजक यात्रा के बाद जैव भौतिक और मनोवैज्ञानिक उपकरणों का उपयोग कर तनाव में संभावित परिवर्तन की पहचान करने के लिए है. कोर्टिसोल और जेड-एमाइलेज दोनों को मनोवैज्ञानिक तनाव के स्तर के विश्वसनीय संकेतक के रूप में दर्शाया गया है। इस अध्ययन में वर्णित amylase परख प्रक्रिया एक 96 अच्छी तरह से प्रारूप के लिए अनुकूलित किया गया है. जब लार में एमिलेस का स्तर अधिक होता है, तो अवशोषण परिवर्तन तेजी से होते हैं। इसलिए, यह एक समय में विश्लेषण नमूनों की संख्या को सीमित करने के लिए महत्वपूर्ण है, नमूने की संख्या है कि एक समय में विश्लेषण किया जा सकता है के रूप में कितनी जल्दी से 2.5 नमूने के एल प्रत्येक अच्छी तरह से जोड़ा जा सकता द्वारा सीमित है. इस अध्ययन में, amylase स्तर एक दिए गए समय में एक कॉलम (आठ प्रतिक्रियाओं) में मापा गया. दो प्रमुख प्रणालियों तनाव प्रतिक्रिया में शामिल हैं, hypothalamus-पिट्यूटरी-एड्रेनोकॉर्टिकल अक्ष (HPA) और सहानुभूति-एड्रेनोमेडुलरी प्रणाली (एसएएम) सहित. Kirschbaum और Hellhammer14 की सूचना दी है कि लार कोर्टिसोल माप बारीकी से सीरम कोर्टिसोल के स्तर के साथ सहसंबद्ध हैं और कम हाइपर तनाव जटिलताओं रक्त नमूना तकनीक के साथ जुड़े शामिल है. अल्फा-एमिलेज एक प्रमुख लार एंजाइम है जो आमतौर पर सहानुभूति (एसएएम) उत्तेजनाओं के साथ जुड़ा हुआ है और एसएएम प्रणाली16के मूल्यांकन के लिए एक उपयोगी माप उपकरण माना जाता है।

जबकि जैवभौतिक और मनोवैज्ञानिक दोनों उपाय तनाव के स्तर में परिवर्तन का पता लगाने में प्रभावशाली हैं, इस अध्ययन में कई मुद्दे मौजूद हैं। सबसे पहले, वहाँ कोर्टिसोल और जेड-एमिलेस माप परिणामों के बीच incongruity था, विभिन्न साइटों पर नोट मतभेद के साथ. Nater एट अल17 की सूचना दी है कि वहाँ के रूप में कम सबूत है कि क्या HPA (cortisol) या सैम (amylase) मनोवैज्ञानिक तनाव के दौरान प्रमुख है. एक संभावित स्पष्टीकरण Takai एट अल द्वारा किया गया था18, जो सुझाव दिया है कि प्रक्रिया जिसके द्वारा - amylase और कोर्टिसोल कोर्टिसोल के साथ खून में प्रवेश, यह दर्शाता है कि एक और अधिक जटिल और लंबी प्रणाली आपरेशन में है.

परिणामों की एक अन्य व्याख्या में तनाव का स्तर और लवणताशामिल है. परिणामों से पता चलता है कि तनाव के तीव्र स्तर के परिणामस्वरूप कोर्टिसोल और जेड-एमाइलेज के बीच अधिक से अधिक सहयोग होता है, और तनाव के अधिक मध्यम स्तर के परिणामस्वरूप अधिक वियोग होता है। इस अध्ययन में, मनोरंजन सगाई के दौरान अनुभव तनाव सबसे अच्छा में मध्यम माना जाता है. इस प्रकार, यहाँ प्रस्तुत एक के रूप में अध्ययन में, जिसमें अनुभवी तनाव मध्यम करने के लिए कम है, कोर्टिसोल और जेड-एमाइलेज के मापा स्तर में मतभेद की उम्मीद की जानी चाहिए.

कोर्टिसोल और जेड-एमाइलेज माप के बीच असंगतता को प्रभावित करने वाले तीसरे चर में लार प्रवाह दर के साथ मुद्दे शामिल हैं। लार प्रवाह दर, संग्रह तकनीक, और तनाव19के बीच संबंध पर सीमित सबूत है. इस अध्ययन में, लार एक परीक्षण ट्यूब में "drooling" के माध्यम से एकत्र की है. विषयों गम चबाना या डेटा संग्रह से पहले खाने के लिए नहीं सलाह दी जाती है, लेकिन कैसे मेहनती वे इन दिशा निर्देशों के लिए इस अध्ययन में थे अज्ञात है. इसके अलावा, एक salivette डिवाइस का उपयोग कर एक निर्दिष्ट समय के भीतर लार की आवश्यक राशि इकट्ठा करने में अधिक प्रभावी हो सकता है. Nater एट अल20 सुझाव दिया है कि कप या salivets उपयोग किया जाता है कि क्या के आधार पर विभिन्न जैव रासायनिक विशेषताओं में कोई अंतर नहीं हो सकता है.

अंत में, इस अध्ययन के रूप में Granger एट अलद्वारा वर्णित लार इकट्ठा करने की "drool" विधि का उपयोग करता है. लार इकट्ठा करने की इस विधि अन्य दृष्टिकोण पर कई फायदे हैं, लेकिन एक सक्षम, अनुरूप, जाग, और सक्षम भागीदार की आवश्यकता है. इस प्रकार, छह वर्ष से कम आयु के बच्चों या बुजुर्ग विषयों को आम तौर पर उपयुक्त उत्तरदाताओं नहीं माना जाता है। इस विधि के फायदे एक बड़े नमूना मात्रा है कि कई मार्करों और तथ्य यह है कि एक अप्रयुक्त नमूना भविष्य assays के लिए जमे हुए किया जा सकता है के लिए assays की सुविधा शामिल हैं. इसके अलावा, drool विधि ऐसे चबाने गम और पीने घोला जा सकता है के रूप में लार प्रवाह को प्रोत्साहित करने के लिए इस्तेमाल पदार्थों से प्रभाव को कम करता है.

आंकड़ों को एकत्र करने के लिए एक अन्य विधि कपास गिरवी का उपयोग शामिल है, जहां लार गिरवी द्वारा अवशोषित कर लेता है और कपास से बाहर एक संग्रह शीशी में centrigugation के माध्यम से व्यक्त किया जाता है. Shirtcliff एटअल. 19 एक चेतावनी नोट जारी किया है कि कुछ स्थितियों में, कपास के माध्यम से लार छानने इम्यूनोसेस में हस्तक्षेप पैदा कर सकता है. अन्य दृष्टिकोणों में फिल्टर पेपर और हाइड्रोसेलुलोज माइक्रोस्पंज21का उपयोग शामिल है। जबकि प्रत्येक दृष्टिकोण विशिष्ट लाभ और नुकसान है, नमूना आकार इस अध्ययन में उपयोग दिया, drool नमूना विधि चुना गया था.

अंत में, विषयों के एक व्यापक स्पेक्ट्रम से अनुसंधान के एक जमा शरीर का सुझाव है कि प्राकृतिक वातावरण मानव स्वास्थ्य पर सकारात्मक प्रभाव हो सकताहै 6,22. सेटिंग्स के इन प्रकार के विशिष्ट पार्क, greenspaces, उद्यान, और वन क्षेत्रों में शामिल हैं. 23 स्वास्थ्य के लिए फायदेमंद माना जाता है कि क्षेत्रों के इन प्रकार के साथ जुड़े कारकों में बेहतर हवा की गुणवत्ता, शारीरिक गतिविधि और सामाजिक संपर्क के लिए बढ़ अवसर, और जीवन की गुणवत्ता की भावनाओं को बढ़ाया शामिल हैं। उदाहरण के लिए, गिडलो एट अल24 ने पाया कि जबकि शारीरिक व्यायाम दोनों प्राकृतिक और शहरी वातावरण में salutogenic प्रभाव था, प्राकृतिक सेटिंग्स अक्सर तनाव के स्तर को कम करने में अधिक प्रभावी थे.

कोर्टिसोल के जैवभौतिक माप और तनाव के कथित स्तर को मापने के लिए एक आत्म-रिपोर्ट को शामिल एक बहु-विधि दृष्टिकोण का उपयोग करना, इस अध्ययन से पता चलता है कि प्राकृतिक सेटिंग्स है साहित्य के विस्तार शरीर के लिए अतिरिक्त समर्थन प्रदान करता है स्वास्थ्य से संबंधित मुद्दों पर लाभकारी प्रभाव जैसे तनाव के स्तर को कम करना25,26. इस अध्ययन से यह भी पता चलता है कि प्रकृति के अधिक से अधिक स्तर अधिक स्पष्ट संभावित लाभ है.

इस अध्ययन में कई सीमाएं मौजूद हैं। पहले biophysical डेटा संग्रह की निष्ठा है. जबकि आगंतुकों को इसी तरह के समय के दौरान लार संग्रह में लगे हुए थे, अर्थात् मध्य से देर से दोपहर के माध्यम से जल्दी शाम के माध्यम से, कोर्टिसोल के दैनिक चक्र के लिए खाते में, शोधकर्ताओं ने केवल उन लोगों की पहचान करने का प्रयास किया जो कुछ भी कम से कम नहीं खाया था 2 ज पहले लार इकट्ठा करने के लिए. यह जब वे पिछले भोजन ingested था की मौखिक पूछताछ के माध्यम से किया गया था. इस प्रकार, शोधकर्ताओं विषय प्रतिक्रियाओं की सच्चाई पर निर्भर थे.

दूसरा, डेटा संग्रह के समय के कारण, प्रतिक्रिया पूर्वाग्रह इन नमूनों के भीतर हुई हो सकता है, जो अलग हो सकता है अगर संग्रह एक अलग समय पर या यादृच्छिक चयन द्वारा किया गया था. अर्थात, दोपहर या शाम में प्रत्येक स्थान का दौरा करने वाले विषय अलग-अलग समय पर आए संभावित उत्तरदाताओं के प्रतिनिधि नहीं हो सकते हैं।

अंत में, जबकि biophysical डेटा एकत्र और अच्छी तरह से मान्यता प्राप्त प्रक्रियाओं के माध्यम से संसाधित किया गया, वहाँ कोई माप तनाव के पुराने स्तर का पता लगाने गया था. इस मामले में, भविष्य के अध्ययन बाल नमूने या इसी तरह की तकनीक है कि विभिन्न स्थानों पर मनोरंजक गतिविधियों में सगाई से पहले तनाव की लंबी अवधि के स्तर का निर्धारण का उपयोग कर एक कोर्टिसोल माप शामिल करना चाहिए.

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Disclosures

लेखक हितों के टकराव की घोषणा नहीं करते हैं।

Acknowledgments

इस अध्ययन के भाग में संकाय अनुसंधान अनुदान कार्यक्रम (FRGP) इंडियाना विश्वविद्यालय, Bloomington, में सार्वजनिक स्वास्थ्य के स्कूल के माध्यम से प्रायोजित के माध्यम से वित्त पोषित किया गया था, IN. लेखक अपने संपादकीय सहायता और रचनात्मक टिप्पणियों के लिए डॉ एलिसन Voight और Melissa पेज शुक्रिया अदा करना चाहते हैं.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cortisol Enzyme Immunoassay Kit DetectX K003-H1 The Cortisol Enzyme Immunoassay kit is designed to quantitatively measure cortisol present in dried fecal extracts, saliva, urine, serum, plasma and culture media samples.
Cryogenic Labels for Cryogenic Storage Fisherbrand 5-910-A Unique adhesive withstands extreme temperature
Liquid Amylase (CNPG3) Reagent Set Pointe Scientific A7564 For the quantitative kinetic determination of α-amylase activity in human serum.
Round Bottom 2mL Polypropylene Tubes with External Thread Cap Greiner Bio-One 07-000-257 2.0 ml U-BTM Cryo.s self standing polypropylene sterilized
Synergy Multi-Mode Microplate Reader BioTek It is a single-channel absorbance, fluorescence, and luminescence microplate reader that uses a dual-optics design to perform measurements of samples in a microplate format.

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Chang, Y., Ewert, A., Kamendulis, L. M., Hocevar, B. A. Measuring Biophysical and Psychological Stress Levels Following Visitation to Three Locations with Differing Levels of Nature. J. Vis. Exp. (148), e59272, doi:10.3791/59272 (2019).

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