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Behavior

चूहों में संक्रामक जम्हाई को मापने के लिए एक प्रयोगशाला विधि

Published: June 14, 2019 doi: 10.3791/59289

Summary

यहाँ वर्णित विधि परिचित या अपरिचित पुरुष चूहों के जोड़े में झनझना हुआ छूत घटता प्राप्त करना है. या तो स्पष्ट या अपारदर्शी विभाजन के साथ (या बिना) छेद से अलग छेद के साथ पिंजरों दृश्य, घ्राण, या संवेदी संकेतों के दोनों प्रकार के यायावर छूत को उत्तेजित कर सकते हैं कि क्या पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है।

Abstract

संचार पशु सामाजिक जीवन का एक अनिवार्य पहलू है। जानवर एक-दूसरे को प्रभावित कर सकते हैं और स्कूलों, भेड़-बकरियों और झुंडों में एक-दूसरे के साथ आ सकते हैं। संचार भी जिस तरह से sexes विवाह के दौरान बातचीत और कैसे प्रतिद्वंद्वियों से लड़ने के बिना विवादों का निपटारा है. हालांकि, वहाँ कुछ व्यवहार पैटर्न जिसके लिए यह एक संचार समारोह के अस्तित्व का परीक्षण करने के लिए मुश्किल है, क्योंकि संवेदी रूपरेखा के कई प्रकार की संभावना शामिल हैं. उदाहरण के लिए, संक्रामक जम्हाई स्तनधारियों में एक संचारात्मक कार्य है जो संभावित रूप से दृष्टि, श्रवण, गंध, या इन इंद्रियों का एक संयोजन के माध्यम से होता है जो इस बात पर निर्भर करता है कि जानवर एक-दूसरे से परिचित हैं या नहीं। इसलिए, इस तरह के व्यवहार की संभावित संचारी भूमिका के बारे में परिकल्पनाओं का परीक्षण करने के लिए, भाग लेने वाले संवेदी तौर-तरीकों की पहचान करने के लिए एक उपयुक्त तरीका आवश्यक है।

यहाँ प्रस्तावित विधि का उद्देश्य परिचित और अपरिचित चूहों के लिए यवन छूत वक्र प्राप्त करना और दृश्य और घ्राण संवेदी तौर-तरीकों की सापेक्ष भागीदारी का मूल्यांकन करना है। विधि सस्ती सामग्री का उपयोग करता है, और कुछ मामूली परिवर्तन के साथ, यह भी चूहों जैसे अन्य कृंतक प्रजातियों के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है. कुल मिलाकर, विधि स्पष्ट डिवाइडर के प्रतिस्थापन शामिल है (के साथ या छेद के बिना) अपारदर्शी विभाजक के साथ (के साथ या छेद के बिना) कि या तो अनुमति देते हैं या आसपास के पक्षों में छेद के साथ आसन्न पिंजरों में रखा चूहों के बीच संचार को रोकने. तदनुसार, चार स्थितियों का परीक्षण किया जा सकता है: घ्राण संचार, दृश्य संचार, दोनों दृश्य और घ्राण संचार, और न ही दृश्य और न ही घ्राण संचार। के रूप में सामाजिक संपर्क चूहों के बीच होता है, इन परीक्षण की स्थिति अनुकरण क्या एक प्राकृतिक वातावरण में हो सकता है. इस संबंध में, यहाँ प्रस्तावित विधि पारंपरिक तरीकों की तुलना में अधिक प्रभावी है जो वीडियो प्रस्तुतियों पर निर्भर करती है जिसकी जैविक वैधता चिंताओं को बढ़ा सकती है। फिर भी, यह सुनवाई की संभावित भूमिका और झनझनाहट में गंध और दृष्टि की भूमिकाओं के बीच भेदभाव नहीं करता है.

Introduction

परंपरागत रूप से, संचार व्यवहार दो दृष्टिकोण से अध्ययन किया गया है. एक दृष्टिकोण से, एथोलॉजिस्ट प्राकृतिक सेटिंग्स में पशुओं के व्यवहार का निरीक्षण और अभिलेखित करते हैं और इसके अनुकूली मूल्य1को पहचानने का प्रयास करते हैं। विशेष भावना या शामिल होश इन अध्ययनों के प्राथमिक हित नहीं किया गया है. एक अन्य परिप्रेक्ष्य से, शरीर विज्ञानियों तंत्र जिसके द्वारा जानवरोंसंवाद 1जानने में अधिक रुचि रखते हैं; इसलिए प्रयोगशाला अध्ययनों ने संचार2,3 में संवेदी तौर-तरीकों की भूमिका को संबोधित करने के लिए तरीके उपलब्ध कराएहैं। इन दो दृष्टिकोण वास्तव में पूरक हैं, क्योंकि दोनों अनुकूली मूल्य और तत्काल तंत्र का ज्ञान जानवरों के सामाजिक जीवन में संचार व्यवहार की एक व्यापक समझ हासिल करने के लिए आवश्यक है.

यावन व्यवहार कशेरुकियों की कई प्रजातियों में व्यवहार प्रदर्शनों का एक विशिष्ट घटक है4, जिसमें मछली से लेकर प्राइमेट5तक शामिल हैं . इसे मुंह के धीमी गति से खुलने और इसकी खुली स्थिति के रखरखावके रूप में वर्णित किया जा सकता है, जिसके बाद मुंह 5 को और अधिक तेजी से बंद किया जा सकता है। पूरे अनुक्रम की अवधि प्रजातियों पर निर्भर करता है; उदाहरण के लिए, प्राइमेट्स गैर प्राइमेट प्रजातियों6की तुलना में लंबी अवधि के लिए yawn . कई प्रजातियों में, मनुष्य अपवाद होने के साथ, नर महिलाओं की तुलना में अधिक बार झनकार जाते हैं7. यह सुविधा जम्हाई के संभावित संचार ात्मक समारोह को कम कर सकती है, हालांकि जम्हाई के नियमित पैटर्न और इसकी दैनिक आवृत्ति भी एक शारीरिक समारोह का सुझाव दे सकती है। चूहों में, सहज जम्हाई एक circadian लय के बाद, उच्च आवृत्ति की चोटियों के साथ सुबह और दोपहर8,9में होने वाली .

जम्हाई व्यवहार की एक दिलचस्प विशेषता यह है कि यह एक संक्रामक कार्य हो सकता है(जब किसी व्यवहार की रिहाई उत्तेजना कशेरुकियों की कई प्रजातियों में11,12, 13,14,15,16, पक्षियों सहित17 और कृन्तक18. इसके अलावा, हाल ही में सबूत से संकेत मिलता है कि संक्रामक जम्हाई एक संचारी भूमिका को प्रतिबिंबित कर सकते हैं, क्योंकि एक चूहे की जम्हाई एक और की शारीरिक स्थिति को प्रभावित कर सकते हैं जब घ्राण संकेतों19के संपर्क में . हालांकि, चाहे या नहीं जम्हाई एक संचारी भूमिका है अभी भी बहस के तहतहै 20,21, और संक्रामक जम्हाई का विश्लेषण इस मुद्दे को हल करने के लिए एक आवश्यक पहला कदम है.

दूसरी ओर, संक्रामक जम्हाई अन्य जानवरों के दृष्टिकोण के साथ सहानुभूति करने के लिए एक जानवर की क्षमता से जोड़ा गया है; इसलिए, निकट से संबंधित व्यक्तियों को छूत4दिखाने की अधिक संभावना है। इस परिकल्पना का प्रयोगशाला परिस्थितियों में बार-बार परीक्षण किया जाता है जिसमें वीडियो12,13पर जानवरों को यौन उत्तेजनाओं के साथ प्रस्तुत किया जाता है ; इसलिए, छूत केवल दृश्य संकेतों के माध्यम से हो सकता है। अन्य जांचों में जानवरों के समूहों का उपयोग करते हुए अधिक प्राकृतिक परिस्थितियों में यवन छूत का आकलन किया गया है. इस की एक प्रमुख समस्या यह है कि सामाजिक रूप से बातचीत जानवरों अक्सर संकेत और विनिमय संकेत है कि संवेदी तौर तरीकों के संयोजन के माध्यम से सूचित कर रहे हैं का जवाब है. उनके संयुक्त प्रभाव से किसी दिए गए व्यवहार में शामिल वास्तविक इंद्रियों को दूर करना हमेशा एक आसान काम नहीं होता है। आमतौर पर, शोधकर्ताओं औषधीय या शल्य चिकित्सा किसी दिए गए अर्थ के एक जानवर के उपयोग में बाधा, तो प्रासंगिक व्यवहार2,3,18,22में उस भावना की भूमिका का अनुमान . सौभाग्य से, वहाँ अन्य तरीकों में केवल शारीरिक बाधाओं या तो अनुमति देने के लिए या पशुओं के बीच संचार में बाधा का उपयोग किया जाता है23,24,25, जिससे अधिक जैविक वैधता प्राप्त करने.

यहाँ प्रस्तावित विधि विशेष रूप से एक सामाजिक सेटिंग में परिचित और अपरिचित चूहों में संक्रामक जम्हाई का अध्ययन करने के लिए डिजाइन किया गया है. सहानुभूति परिकल्पना के अनुसार, पूर्व समूह संक्रामक जम्हाई के लिए अधिक संवेदनशील होना चाहिए। विधि जानवरों शल्य चिकित्सा या औषधीय किसी भी होश से वंचित होने की आवश्यकता नहीं है. इसके बजाय, यह छेद के साथ आसन्न पिंजरों में चूहों रखकर काम करता है और शारीरिक रूप से उनके संचार में बाधा या तो स्पष्ट या अपारदर्शी डिवाइडर के साथ या छेद के बिना का उपयोग कर. इस प्रकार, चार परीक्षण शर्तों की जांच की जा सकती है: (1) घ्राण संचार (ओसी, छिद्रित अपारदर्शी विभाजक), (2) दृश्य संचार (वीसी, गैर-परफोएदार स्पष्ट विभाजक), (3) दृश्य और घ्राण संचार (वीओसी, छिद्रित स्पष्ट विभाजक), और (4) न दृश्य और न ही घ्राण संचार (NVOC, nonperforated अपारदर्शी विभाजक). इसलिए, शोधकर्ताओं घ्राण, दृश्य के सापेक्ष योगदान की तुलना कर सकते हैं, और कुछ हद तक, यावन छूत में श्रवण संकेत. यह दृष्टिकोण नया नहीं है, क्योंकि इसी तरह के तरीकों का उपयोग जानवरों में कुछ संचार व्यवहार ों जैसे छिपकली23 और चूहों26में शामिल इंद्रियों को अलग करने के लिए किया गया है। वास्तव में, गैलप और उनके सहयोगियों27 एक ऐसी ही विधि का इस्तेमाल किया है budgerigars में संक्रामक जम्हाई में दृश्य संकेतों की भूमिका प्रदर्शित करते हैं. इन तरीकों की मुख्य विशेषताएं एक सामाजिक संदर्भ का अनुकरण और जानवरों पर दिए गए न्यूनतम तनाव हैं। इसके अलावा, बातचीत जानवरों का उपयोग निष्कर्ष की जैविक वैधता बढ़ जाती है.

संक्रामक जम्हाई25,28को मापने के लिए कई तरीके हैं . डॉ स्टीफन ई जी ली (व्यक्तिगत संचार, 2015) हमें संख्यात्मक रूप से एक विधि पहले प्राइमाटोलॉजिस्ट द्वारा नियोजित अनुकूलन में मदद की13,14 यहाँ इस्तेमाल किया डेटा के एक पहले विश्लेषण के लिए18. इस प्रोटोकॉल में प्रस्तुत अनुप्रयोगों की एक व्यापक रेंज के साथ इस विधि का एक बढ़ाया संस्करण है. यह एक चूहे के yawns की कुल संख्या भार के होते हैं, के भीतर और एक दिया समय खिड़की के बाहर, अवलोकन समय के अनुपात के भीतर और समय खिड़की के बाहर yawns के लिए इसी के अनुपात से.

उदाहरण के लिए, यदि यह माना जाता है कि चूहे ए और बी को 12 मिनट के लिए मनाया जाता है, तो उनकी जम्हाई को निकटतम मिनट में दर्ज किया जाता है, और संक्रामक जम्हाई को मापने के लिए 3 मिनट की समय विंडो सेट की जाती है। अगले, उन चूहों में से प्रत्येक के लिए yawns के निम्नलिखित दृश्यों पर विचार कर रहे हैं: चूहा ए (0,0,0,0,2,1) और चूहा बी (0,1,1,1,0,0,0,0,0,3). यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि प्रत्येक संख्या (0-3) प्रत्येक मिनट में बनाए गए yawns की संख्या से मेल खाती है. चूहा ए के लिए, मिनट 1, 10, और 11 (बोल्ड प्रकार में संख्या) के दौरान, चूहे बी पिछले 3 मिनट (चयनित समय खिड़की) के भीतर या उस मिनट के भीतर नहीं जा सकता है। उन मिनटों में, चूहे एक yawns कुल 2 बार. इसलिए, किसी भी जम्हाई उत्तेजना के बिना चूहे ए की जम्हाई दर (गैर-पोस्ट-यावन दर) 2/3 है (यानी, 0.67 yawns / शेष 9 मिनट में, चूहे बी या तो एक ही मिनट या 3 पिछले मिनट में कम से कम एक बार yawns. चूहा एक उन 9 मिनट में चार बार की कुल yawns. इसलिए, एक जम्हाई उत्तेजना के जवाब में चूहे ए की जम्हाई दर (पोस्ट-यावन दर) 4/9 है (यानी. 0.44 yawns/ चूहा बी के लिए एक ही प्रक्रिया के आवेदन 2/3 (यानी. 0.66) और 5/9 (0.55) के बाद yawn yawn दर की एक गैर-पोस्ट-यावन yawn दर पैदावार।

दूसरी ओर, अगर जम्हाई एक मिनट के निकटतम दशमलव करने के लिए दर्ज की गई है, जम्हाई छूत एक समायोजित पोस्ट-यावन समय में परिणाम होगा। उदाहरण के लिए, यदि निम्नलिखित yawn समय चूहों A और B के लिए एक 12 मिनट अवलोकन अवधि में दर्ज कर रहे हैं: चूहे ए (2.3, 5.1, 5.8, 10.4, 10.8, 11.1) और चूहे बी (1.2, 2.4, 4.5, 5.1, 11.2, 11.6, 11.8). चूहा ए के लिए, समय अवधि जिस पर चूहे बी पिछले 3 मिनट सीमा के भीतर 0 से 1.2 मिनट और 8.1 से 11.2 मिनट (यानी, 3.1 मिनट) के लिए, जो गैर पोस्ट-यावन समय की कुल 4.3 मिनट की पैदावार नहीं करता है। उन समय के दौरान चूहे ए यानों की संख्या तीन (बोल्ड प्रकार में संख्या) है, इसलिए गैर-पोस्ट-यावन दर 3/4.3 (यानी., 0.69) है, जबकि पोस्ट-यावन जम्हाई दर 3/7.7 है (यानी, 0.38; 12-4.3 मिनट से भाजक)। इसी प्रकार, चूहे बी के लिए, वह समयावधि जिस पर चूहा ए पिछले 3 मिनट के भीतर 0 से 2.3 मिनट और 8.8 से 10.4 मिनट तक नहीं जाता है, जो कुल 3.9 मिनट की पैदावार करता है। उन अवधियों के भीतर चूहे बी yawns की संख्या एक है, तो गैर पोस्ट-यावन yawn दर 1/3.9 है (यानी, 0.25). तदनुसार, पोस्ट-यावन दर 6/8.1 (यानी, 0.74) है।

जबकि व्यवहार में एक निकट समकालीन मैच एक आदर्श कसौटी के लिए एक छूत की उपस्थिति का प्रदर्शन है, इस तरह के एक व्यक्ति को क्या करने के लिए भाग लेता है पर बाधाओं के रूप में पहलुओं, एक उत्तेजना के लिए प्रतिक्रिया के समय, समय के साथ व्यवहार का वितरण (जैसे, जम्हाई एपिसोड में हो सकता है), और समय प्रयोगात्मक सेटिंग के लिए acclimateize करने के लिए सभी प्रजातियों मतभेद को जन्म दे, यह मुश्किल एक अद्वितीय समय खिड़की का उपयोग करने के लिए कर रही है. यही कारण हो सकता है कि शोधकर्ताओं ने समय की खिड़कियों का उपयोग किया है जो सेकंड5 से कई मिनट11तक भिन्न होते हैं , जो परिणाम28की तुलना करते समय समस्याएं पैदा करते हैं . इस वजह से, यह समय खिड़कियों की एक श्रृंखला के लिए ऊपर वर्णित प्रक्रिया को दोहराने के लिए यावन छूत घटता प्राप्त करने और प्रजातियों के बीच yawn छूत घटता तुलना करने के लिए प्रस्तावित है.

समतुल्य जम्हाई छूत वक्रों की तुलना अवलोकन अवधि में प्रत्येक चूहे के लिए देखे गए यानों की संख्या को यादृच्छिक रूप से वितरित करके की जा सकती है। इस प्रकार, जम्हाई छूत को मापने के लिए प्रस्तावित विधि नियंत्रण के दो प्रकार प्रदान करता है: (1) yawn दर समय खिड़की के बाहर होने वाली (गैर-पोस्ट-यावन समय) और (2) कृत्रिम जम्हाई छूत वक्र yawns की संख्या के यादृच्छिक वितरण से प्राप्त. इसलिए, जम्हाई छूत का विश्लेषण करने के लिए इस दृष्टिकोण अन्य प्रक्रियाओं से एक कदम आगे है, इस तरह के प्रतिशत या एक एकल समय खिड़की के भीतर जम्हाई की आवृत्ति की तुलना के रूप में उन है कि इस खिड़कीकेबाहर होने वाली 25, खाते में लेने के बिना वास्तविक समय फ्रेम. विधि एक आर आधारित कार्यक्रम29 द्वारा पूरित है आसानी से और निष्पक्ष एक या एक से अधिक समय खिड़कियों के लिए संक्रामक जम्हाई की संभावना की गणना.

इस विधि की उपयोगिता और आर-आधारित प्रोग्राम के लाभों को समझाने के लिए, पहले प्रकाशित अध्ययन 18 से एक डेटा सेट का उपयोग किया जाता है। प्रयोगात्मक हालत या तो एक परिचित या अपरिचित हालत के लिए आवंटित 144 पुरुष चूहों शामिल थे. प्रत्येक प्रयोगात्मक स्थिति में चूहों नौ जोड़े के चार उपसमूहों में विभाजित और ऊपर वर्णित चार परीक्षण स्थितियों में से किसी को उजागर किया गया. प्रत्येक प्रयोगात्मक स्थिति और परीक्षण की स्थिति में चूहों के जम्हाई व्यवहार तो 60 मिनट की अवधि में दर्ज किए गए थे.

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Protocol

प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल और पशुपालन संस्थागत दिशा निर्देशों के अनुसार आयोजित किए गए थे।

1. सामग्री

  1. सामग्री तालिका में विधि को कार्यान्वित करने के लिए प्रयुक्त सामग्री कीएक पूरी सूची प्राप्त करें। चित्रा 1 का उपयोग करें और एक उल्टे टी के आकार की मेज, अवलोकन पिंजरों, और पिंजरे डिवाइडर का निर्माण करने के लिए विशेषज्ञ सलाह लेनी। तेज उपकरणों और संभावित खतरनाक सामग्री के उपयोग के लिए सुरक्षा संकेतों का पालन करें।
  2. दो रेल की तरह लकड़ी की सलाखों (45 सेमी लंबाई, एक दूसरे से 0.6 सेमी अलग) शीर्ष पर और लकड़ी के एक टुकड़े के बीच में (100 सेमी x 45 सेमी x 1.5 सेमी) gluing द्वारा एक उल्टे टी के आकार की मेज बनाओ। फिर, लकड़ी का एक दूसरा टुकड़ा (50 सेमी x 45 सेमी x 0.6 सेमी) खड़ी रेल की तरह सलाखों के बीच जगह है. सुनिश्चित करें कि लकड़ी का यह दूसरा टुकड़ा एक तरफ चूहों की जोड़ी को विपरीत दिशा में दूसरी जोड़ी को देखने से रोकता है (चित्र 1)।
  3. आठ अवलोकन पिंजरों बनाने के लिए कांच और एक्रिलिक का प्रयोग करें। सुनिश्चित करें कि प्रत्येक पिंजरे (19 सेमी चौड़ा, 19 सेमी लंबा, 10 सेमी ऊंचा, 3 मिमी मोटी) में 24 समदूरीक छेद (5 मिमी व्यास) इसके पक्षों में से एक के बीच में तीन पंक्तियों में व्यवस्थित होते हैं। एक्रिलिक के इस पक्ष बनाओ (3 मिमी मोटी) और चूहे साँस लेने के लिए अनुमति देने के लिए 0.7 सेमी से विपरीत पक्ष की ऊंचाई को छोटा.
    1. सुनिश्चित करें कि प्रत्येक अवलोकन पिंजरे एक फिसलने ढक्कन एक्रिलिक से बना है पालन और खुद को ध्यान भंग करने से रोकने के लिए 60 मिनट अवलोकन अवधि के दौरान.
  4. एक्रिलिक (19 सेमी चौड़ा, 30 सेमी ऊंची, 3 मिमी मोटी) से चार डिवाइडर बनाएं। ड्रिल 24 छेद (5 मिमी व्यास) कि अवलोकन पिंजरों में उन मैच, एक स्पष्ट विभाजक और एक अपारदर्शी विभाजक में प्रत्येक.
  5. जम्यानों की घटना को रिकॉर्ड करने के लिए पहले से ही डेटा पत्रक तैयार करें। प्रत्येक डेटा पत्रक के शीर्षक में शामिल करें, प्रेक्षक का नाम, प्रयोगात्मक स्थिति (यानी, परिचित या अपरिचित चूहे), प्रासंगिक परीक्षण स्थिति (ओसी, VC, VOC, NVOC), अवलोकन की तारीख, और प्रारंभिक और अंतिम समय. शेष डेटा पत्रक को दो कॉलमों में विभाजित करें, प्रत्येक में चूहे की संख्या के साथ, चूहों के जम्हाई व्यवहार को रिकॉर्ड करने के लिए।

2. प्रक्रिया

  1. वे उम्र में 2.5 महीने तक पहुँचने तक weaning से प्लास्टिक पिंजरों (घर पिंजरों) में चार के समूहों में 144 पुरुष चूहों. महिला चूहों का उपयोग न करें, क्योंकि वे हार्मोनल चक्र के कारण व्यवहार में अधिक से अधिक भिन्नता दिखाने के लिए करते हैं, जो परीक्षण की स्थिति के प्रभाव के साथ भ्रमित हो सकता है. सुनिश्चित करें कि प्रत्येक पिंजरे में चूहों भाई बहन नहीं हैं.
    नोट: यह एक साथ सभी चूहों को प्राप्त करने के लिए मुश्किल हो सकता है. ऐसी स्थिति में, कम से कम 8 परिचित चूहों और 8 अपरिचित चूहों के ब्लॉक बनाएं ताकि प्रत्येक परीक्षण स्थिति में प्रत्येक प्रायोगिक स्थिति30में एक बार प्रतिनिधित्व किया जा सके।
  2. चूहों की पहचान करने के लिए, उन्हें एक वाणिज्यिक मार्कर का उपयोग कर पूंछ पर प्रतीकात्मक संख्या के साथ चिह्नित. उदाहरण के लिए, डॉट्स और रेखाओं को संयोजित करके 1 से 4 तक की संख्याओं का प्रतिनिधित्व करते हैं (उदा., संख्या 1 के लिए एक बिंदु और संख्या 4 के लिए एक पंक्ति). अलग अलग रंग का उपयोग कर परिचित और अपरिचित चूहों की पहचान.
    नोट: पशु सुविधा कर्मचारियों द्वारा प्रदान की सुरक्षा निर्देशों के बाद चूहों संभाल, और जहां प्रयोगों किया जाएगा संस्थान में प्रयोगशाला जानवरों के सही उपयोग से संबंधित सिफारिशों का पालन करें.
  3. बेतरतीब ढंग से चुनें जो घर पिंजरों परिचित चूहों के समूह घर होगा और जो अपरिचित समूह घर होगा. उदाहरण के लिए, मान लीजिए कि चार घर के पिंजरों में 16 उपलब्ध चूहे हैं: घर के पिंजरों की संख्या 1 से 4 तक, फिर R (http://cran.r-project.org/ पर डाउनलोड करें) का उपयोग करें [संकेत के बाद (gt;)]:
    नमूना(4,4)
    [1] 4 3 2 1
    1. घर पिंजरों में परिचित (या अपरिचित) चूहों समूह 4 और 3, और समूह अपरिचित (या परिचित) घर पिंजरों में चूहों 2 और 1. सुनिश्चित करें कि पशु सुविधा स्टाफ प्रत्येक पिंजरे की पहचान बनाए रखता है और पशु सुविधा में अन्य सभी चूहों के रूप में एक ही तरीके से चूहों संभालती है.
    2. आर प्रोग्राम का पुन: उपयोग करें और प्रत्येक प्रयोगात्मक स्थिति में प्रत्येक युग्म बनाने के लिए यादृच्छिक रूप से चूहों का चयन करें। सुनिश्चित करें कि परिचित चूहों के प्रत्येक जोड़ी में चूहों एक ही घर पिंजरे से उत्पन्न, और सुनिश्चित करें कि विपरीत अपरिचित समूह में जोड़े के लिए सच है. बेतरतीब ढंग से प्रत्येक प्रयोगात्मक स्थिति में प्रत्येक परीक्षण की स्थिति के लिए चूहों के जोड़े का चयन करें.
  4. प्रति परीक्षण सत्र (यानी., 60 मिनट अवलोकन अवधि) आठ संभावित परीक्षण स्थितियों (प्रत्येक परिचित और अपरिचित चूहों के लिए चार) में से दो परीक्षण सत्र प्रति दिन प्रदर्शन करें। लगातार 3 घंटे के भीतर दो परीक्षण सत्रों का संचालन करें।
    नोट: किसी भी confounding कारकों से बचने के लिए या तो सुबह या दोपहर में सभी परीक्षण सत्र (प्रति दिन चूहों के चार जोड़े) का संचालन करने के लिए सुनिश्चित करें. लगातार दो दिनों में प्रयोग की एक पूरी प्रतिकृति (आठ परीक्षण स्थितियों) चलाएँ.
    1. प्रयोग के प्रत्येक प्रतिकृति के लिए एक यादृच्छिक अनुक्रम में परीक्षण स्थितियों का उपयोग करने के लिए सुनिश्चित करें. उदाहरण के लिए, प्रत्येक परीक्षण स्थिति की पहचान करने के लिए संख्या 1 से 8 का उपयोग करें, तब R निम्नानुसार का उपयोग करें:
      नमूना(8,8)
      [1] 8 7 4 6 5 1 2 3
    2. सत्र 1, परीक्षण स्थितियों 4 और 6 सत्र 2, और इतने पर परीक्षण करने के लिए परीक्षण स्थितियों 8 और 7 आवंटित। फिर, बेतरतीब ढंग से उल्टे टी के आकार की मेज के पक्ष का चयन जहां चूहों के प्रत्येक जोड़ी (परीक्षण स्थिति) रखा जाएगा.
  5. प्रयोग की दूसरी प्रतिकृति (यानी, ब्लॉक) के लिए समान प्रक्रिया (चरण 2.3 से 2.4.2) दोहराएँ.
    नोट: यदि अध्ययन का उद्देश्य एक सामाजिक स्थिति के प्रभाव का परीक्षण करने के लिए है (यानी, दो बातचीत चूहों) जम्हाई आवृत्ति पर, एक चूहे का उपयोग एक खाली अवलोकन पिंजरे के बगल में एक खाली अवलोकन पिंजरे में रखा चार परीक्षण स्थितियों में से प्रत्येक के लिए एक नियंत्रण के रूप में. आठ चूहों के नियंत्रण समूह के लिए प्रत्येक परीक्षण स्थिति के लिए यह प्रयोग 2x निष्पादित करें.
  6. वे उपन्यास पर्यावरण के लिए acclimate करने के लिए 15 मिनट के लिए रहेगा, जहां निरीक्षण कक्ष में पशु सुविधा से पहले चार चूहों को स्थानांतरित करके परीक्षण सत्र की स्थापना की। अलग-अलग पिंजरों में चूहों परिवहन और उन्हें परिवहन के दौरान और अवलोकन कक्ष में एक दूसरे से अलग रखने के लिए।
    नोट: पशु सुविधा स्टाफ द्वारा प्रदान की पशुओं के परिवहन के लिए सुरक्षा निर्देशों का पालन करें और संकेत कपड़े का उपयोग करने के लिए प्रयोगशाला में जानवरों के साथ काम करते हैं. चूहों भोजन और पानी के लिए उपयोग नहीं होगा, जबकि वे अवलोकन कक्ष में हैं.
  7. अनुकूलन अवधि बीत जाने के बाद, उलटा टी के आकार की मेज एक बड़ा आयताकार मेज पर जगह है। सुनिश्चित करें कि वहाँ एक छत दीपक है कि पर्याप्त रूप से कमरे में रोशनी जब अवलोकन कर रही है.
  8. प्रत्येक अवलोकन पिंजरे के तल पर फिल्टर कागज रखो और उल्टे टी के आकार की मेज के प्रत्येक पक्ष पर जोड़े में पिंजरों जगह है। पिंजरों की प्रत्येक जोड़ी के बीच में इसी विभाजक स्थिति.
    नोट: फिल्टर कागज यह आसान पिंजरों को साफ करने के लिए बनाता है और एक किसी न किसी सतह जिस पर चूहों फिसल के बिना स्थानांतरित कर सकते हैं प्रदान करता है।
  9. रणनीतिक रूप से दो डिजिटल camcorders जगह ऐसी है कि प्रत्येक चूहों की प्रत्येक जोड़ी के जम्हाई व्यवहार रिकॉर्ड. सुनिश्चित करें कि camcorders सुरक्षित रूप से तिपाई के लिए तय कर रहे हैं और सही ढंग से अवलोकन पिंजरों के लिए उन्मुख. एक साथ चूहों के व्यवहार की निगरानी करने के लिए एक डेस्कटॉप कंप्यूटर के लिए camcorders कनेक्ट करें।
    नोट: स्थायी रूप से प्रयोगात्मक सत्र ों संग्रह करने के लिए फ्लैश ड्राइव पर डिजिटल जानकारी स्टोर. एक उच्च भंडारण क्षमता के साथ फ्लैश ड्राइव का प्रयोग करें.
  10. अनुकूलन अवधि के बाद, पहले निर्धारित आवंटन के अनुसार अवलोकन पिंजरों में चूहों जगह. कैमकॉर्डर का स्वचालित फोकस सेट करें और स्टॉपवॉच के साथ एक साथ वीडियो रिकॉर्डिंग शुरू करें। 60 मिनट अवलोकन अवधि के अंत में वीडियो रिकॉर्डिंग बंद करो.
    नोट: जबकि प्रयोगकर्ताओं परीक्षण सत्र के दौरान कमरे के बाहर हो सकता है और दूर से देख, यह अनुशंसा की जाती है कि एक व्यक्ति अवलोकन कक्ष में है (के रूप में दूर के रूप में प्रयोगात्मक सेटिंग से संभव के रूप में दूर) जबकि चूहों के व्यवहार की निगरानी करने के लिए सुनिश्चित करें कि परीक्षण सत्र बिना किसी रुकावट के आगे बढ़ता है।
  11. जब अवलोकन खत्म हो गया है, पशु सुविधा में अपने घर पिंजरों के लिए चूहों वापस. जानवरों की सुविधा के कर्मचारियों से पूछो सुनिश्चित करने के लिए कि चूहों भोजन और पानी के लिए फिर से उपयोग किया है. एक nontoxic डिटर्जेंट का उपयोग कर अवलोकन पिंजरों को अच्छी तरह से साफ करें और दिन के दूसरे और अंतिम परीक्षण सत्र करने के लिए प्रयोगात्मक सेट-अप तैयार करें।
    नोट: निरीक्षण पिंजरों में रखा जब चूहों द्वारा छोड़ दिया किसी भी scents को दूर करने के लिए लकड़ी साफ, जो परीक्षण चूहों की अगली जोड़ी के व्यवहार को प्रभावित कर सकता है.
  12. एक से दो स्वयंसेवकों को प्रशिक्षित आंशिक रूप से सौंपा उपचार करने के लिए अंधा की पहचान करने और एक सभी घटना नमूना विधि का उपयोग कर जम्हाई रिकॉर्ड. सुनिश्चित करें कि पर्यवेक्षक परिचय अनुभाग में वर्णित जम्हाई की परिभाषा का उपयोग करें।
  13. वापस चलाएँ और किसी भी मानक प्लेबैक सिस्टम का उपयोग कर एक कंप्यूटर स्क्रीन पर प्रत्येक वीडियो प्रोजेक्ट। प्रेक्षक से प्रत्येक वीडियो देखने और पहले से तैयार किए गए डेटा शीट का उपयोग करके जम्हाई व्यवहार का निरीक्षण करने और रिकॉर्ड करने के लिए कहें, फिर उसे धीमी गति से वीडियो की समीक्षा करने की अनुमति दें ताकि निरीक्षण करने और जम्हाई को मापने की क्षमता को बढ़ाया जा सके।
    1. प्रेक्षकों से निम्नलिखित के समान एक संकेतन प्रणाली का उपयोग करके जम्हाई स्कोर करने के लिए कहें: एक जम्हाई की घटना का प्रतिनिधित्व करने के लिए सुपरस्क्रिप्ट के रूप में लिखे गए मिनट के साथ ऊर्ध्वाधर रेखाओं का उपयोग करें (उदा., ] 3 [ ] 6 ] 9, मिनट 3 में एक जम्हाई का संकेत, मिनट 6 पर दो yawns, और एक मिनट 9 पर जम्हाई). स्कोर जम्हाई एक अनुक्रम के रूप में (जैसे,1.2, 2.2, 3.2, 5.0, 5.8) अधिक से अधिक परिशुद्धता के साथ इसे रिकॉर्ड करने के लिए (मिनट एक दशमलव स्थान पर गोल).
    2. वैकल्पिक रूप से, सीधे मानक डेटा संग्रह प्रोग्राम का उपयोग कर एक कंप्यूटर में वीडियो से डेटा इनपुट. सुनिश्चित करें कि प्रेक्षक ऐसे कार्यक्रमों से परिचित है।
      नोट: यदि आवश्यक हो, तो पर्यवेक्षक एक से अधिक सत्र में प्रत्येक वीडियो को देखने के लिए अनुमति दें। सुनिश्चित करें कि एक प्रेक्षक प्रयोगों के एक ब्लॉक से संबंधित सभी वीडियो देखता है. अगर दो अलग-अलग पर्यवेक्षकों ने इन वीडियो को देखा, तो यह भी खतरा हो सकता है कि उनकी क्षमताओं में अंतर का पालन करने और जम्हाई रिकॉर्ड करने से परीक्षण स्थितियों के प्रभावों को प्रभावित किया जा सकेगा। यह सुनिश्चित करने के लिए कि जम्हाई उसी तरह से एनोटेट किया जाता है वीडियो के 10%-20% पर विभिन्न पर्यवेक्षकों के बीच अंतर-observer विश्वसनीयता स्कोर करने के लिए महत्वपूर्ण है।

3. डेटा प्रसंस्करण

  1. डेटा शीट से एक स्प्रेडशीट के लिए प्रत्येक चूहे में yawns के लौकिक अनुक्रम टाइप करें. सुनिश्चित करें कि एक छोटे शीर्षक के साथ प्रत्येक चूहे के लिए एक स्तंभ है (उदाहरण के लिए, fr1.l और fr1.r क्रमशः बाईं और दाईं ओर परिचित चूहों की पहली जोड़ी को इंगित करने के लिए). सुनिश्चित करें कि सभी स्तंभ रिक्त कक्षों को 0 या NA से भरकर समान लंबाई हैं (नीचे देखें).
    नोट: डेटा को संसाधित करने, संक्रामक जम्हाई को मापने, और संक्रामक जम्हाई घटता प्राप्त करने के लिए निम्न चरणों को पूरी तरह से समझने के लिए एक अनुपूरक दस्तावेज के रूप में प्रदान की गई सामान्य गाइड का उपयोग करें।
    1. यदि जम्हाई निकटतम मिनट के लिए दर्ज किया गया था, प्रत्येक प्रासंगिक मिनट पर जम्हाई की संख्या में टाइप करें और का उपयोग करें 0 (कोई जम्हाई) कोशिकाओं में भरने के लिए जब कोई जम्हाई एक दिए गए मिनट में हुई. कार्यपत्रक को किसी पाठ फ़ाइल (.txt) के रूप में सहेजें.
    2. यदि जम्हाई को एक मिनट के निकटतम दशमलव में रिकॉर्ड किया गया था, तो अनुक्रम शीर्ष में नीचे टाइप करें और कॉलम (राट) के रिक्त स्थान को भरने के लिए "NA" का उपयोग करें जिसमें जम्हाई (पंक्ति) की संख्या स्तंभ की अधिकतम संख्या (पंक्तियों) के साथ स्तंभ की तुलना में कम है, जो कि r के लिए रिकॉर्ड की गई है। पर. कार्यपत्रक को किसी पाठ फ़ाइल (.txt) के रूप में सहेजें.
      नोट: R खाली कक्षों के साथ काम करने की क्षमता है के रूप में, कार्यपत्रक विभिन्न लंबाई के स्तंभों के साथ सहेजा जा सकता है। अनुपलब्ध डेटा को हैंडल करने के लिए R द्वारा प्रदान किए गए मदद विकल्पों का उपयोग करें.
  2. R. जिसमें वे पहले स्थित थे फ़ाइल से डेटा आयात करें प्रारंभ करें।
  3. एक्सटेंशन के साथ प्रोग्राम कोड सहेजें ". R" (पूरक सामग्री के रूप में प्रदान की), तो डाउनलोड विशिष्ट कार्यक्रम कोड (सामान्य गाइड देखें) कि क्या yawns पूर्णांकों या आंशिक संख्या के रूप में दर्ज किए गए थे पर निर्भर करता है. चूहों की प्रत्येक जोड़ी और समय फ्रेम की वांछित संख्या के लिए कार्यक्रम चलाते हैं.
    1. कार्यक्रम फिर से चलाने के लिए, अब प्रत्येक चूहे से yawns की संख्या की एक यादृच्छिक वितरण का उपयोग कर (सामान्य गाइड देखें). सभी प्रयोगात्मक स्थितियों (यानी, परिचित और अपरिचित चूहों) और/या सभी परीक्षण स्थितियों के लिए एक ही चरणों (चरण 3.3 से 3.3.1) का पालन करें। सामान्य मार्गदर्शिका में दर्शाए अनुसार आगे बढ़ें और परिणामों को Excel में निर्यात करें.
      नोट: एक पहले से सहेजे गए प्रोग्राम को आयात करने के बजाय, जैसा कि ऊपर एक पाठ संपादक का उपयोग करके सुझाव दिया गया है, प्रतिलिपि बनाएँ और सीधे प्रोग्राम को R के कार्यस्थान में चिपकाएँ.
  4. यौने-फिरे छूत के कर्व बनाने के लिए, स्प्रेडशीट में पहले से सहेजे गए डेटा का उपयोग करें. चूहों, समय विंडो, और परीक्षण की स्थिति के प्रत्येक जोड़ी के लिए संक्रामक दरों से गैर-संक्रामण दरों को घटाना। प्रेक्षित डेटा और कृत्रिम (यादृच्छिक रूप से वितरित) डेटा के विश्लेषणों को अलग करें।
    1. अगला, विश्वास अंतराल की गणना (CI) हर बार खिड़की और परीक्षण की स्थिति के लिए एक बूटस्ट्रैप प्रक्रिया का उपयोग कर (सामान्य गाइड देखें). परिचित और अपरिचित चूहों के लिए विश्लेषण अलग. फिर, प्रत्येक प्रयोगात्मक स्थिति के लिए चार परीक्षण स्थितियों से कृत्रिम डेटा गठबंधन और एक बूटस्ट्रैप प्रक्रिया का उपयोग कर हर बार खिड़की के लिए CI की गणना.
    2. इसके बाद, प्रत्येक परीक्षण स्थिति और प्रयोगात्मक स्थिति के लिए प्लॉट बनाएं (चित्र 2 और चित्र 3देखें). अंत में, परीक्षण स्थितियों के बीच यौने छूत की तीव्रता की तुलना करने के लिए एक से अधिक प्रतिगमन विश्लेषण करें (नीचे देखें).

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Representative Results

चूहों Sprague-Dawley चूहों कि लगातार जम्हाई के लिए चयनित किया गया था की एक पहले से उत्पादित उप लाइन से चयनित किया गया (लगभग 22 yawns प्रति घंटा31). तथापि, अपरिचित और परिचित पुरुष चूहों के नौ जोड़े (2.5 और 3 महीने की उम्र के बीच)परीक्षण की स्थिति प्रति इस्तेमाल किया प्रति लगभग 12 बार प्रति घंटे, औसत 18 पर. इसलिए, परीक्षण स्थितियों यावन छूत आंशिक रूप से बाधित जम्हाई व्यवहार को मापने के लिए।

यावन छूत को 1 से 10 मिनट तक की समय-सीमा पर मापा जाता था। चित्र 2 प्रत्येक समय विंडो और परीक्षण स्थिति के लिए छूत और गैर-संक्रामण स्थितियों में अपरिचित पुरुष चूहों के बीच यवन दरों में औसत अंतर दिखाता है। ये yawn छूत घटता संकेत मिलता है कि केवल ओसी चूहों (एक छिद्रित, अपारदर्शी विभाजक के साथ पिंजरों में) यापन छूत है, जो समय खिड़की से स्पष्ट है दिखाया 4 और उसके बाद, क्योंकि औसत के CI यादृच्छिक आवंटित संख्या के CI के साथ ओवरलैप नहीं करता है 60 मिनट की अवधि में yawns. बैंड संकेत दिया, के रूप में की उम्मीद है, कि अवलोकन अवधि में प्रत्येक चूहे में yawns की संख्या की एक यादृच्छिक आवंटन जम्हाई दरों कि लगभग शून्य पर दोलन का उत्पादन किया, किसी भी स्पष्ट पैटर्न दिखाने के बिना.

डेटा के लिए फिट एकाधिक रैखिक प्रतिगमन मॉडल संकेत दिया है कि चार परीक्षण स्थितियों से घटता काफी अलग थे (F1,3 $ 11.5, p और lt; 0.0001). विशेष रूप से, yawn छूत की तुलना में ओसी चूहों में मजबूत था: कुलपति चूहों (एक nonperforated, स्पष्ट विभाजक के साथ पिंजरों में चूहों; ] -3.8, च और 0.001), VOC चूहों (एक छिद्रित, स्पष्ट विभाजक के साथ पिंजरों में चूहे; t - 5.74, p और lt; 0.0001), और NVOC चूहों (एक nonperforated, अपारदर्शी विभाजक के साथ पिंजरों में चूहों; t ] -2.64, p और lt; 0.01). सभी मामलों में, स्वतंत्रता की डिग्री 695 थे, के बाद से विश्लेषण खाते में न केवल चार परीक्षण स्थितियों लिया, लेकिन यह भी 10 बार खिड़कियों. इन शर्तों autocorrelated माप उत्पन्न के रूप में, एक autocorrelation शब्द जोड़ा गया था (ARMA, autoregressive चलती औसत) सांख्यिकीय मॉडल के लिए. 10 समय खिड़कियों पर समग्र रुझान भी सांख्यिकीयएक 0 ढलान से भिन्न (F1,1 $ 11.99, p और lt; 0.0001). चित्र 3 में वही विश्लेषण दिखाया गया है जो चित्र 2में परिचित नर चूहों पर लागू किया गया था। इस मामले में, चार परीक्षण स्थितियों में से कोई भी yawn छूत प्रेरित क्योंकि उनके CI बेतरतीब ढंग से उत्पन्न CI बैंड के साथ ओवरलैप. चार परीक्षण स्थितियों में कोईअंतर नहीं था (F1,3 ] र् 0ण्14); हालांकि, 10 समय खिड़कियों पर यवन छूत में समग्र वृद्धिएक 0 ढलान से भिन्न (F1,1 $ 9, p और lt; 0.01).

स्तनधारियों के सामाजिक जीवन में घूसीकरण की भूमिका यही कारण हो सकती है कि केवल ओसी चूहों ने ही जम्हाई का संक्रमण दिखाया और वीसी चूहोंकीतुलना में अधिक बार जम्हाई ली . दृश्य संकेतों जम्हाई की सुविधा नहीं हो सकता है, क्योंकि albino चूहों के रूप में अच्छी तरह से गैर albino चूहों के रूप में नहीं देखते हैं. हालांकि, वीसी चूहों दो बार के रूप में चूहों के समूह के रूप में व्यक्तिगत रूप से एक खाली पिंजरे के बगल में एक अवलोकन पिंजरे में रखा18yawned . यह निष्कर्ष निश्चित रूप से जम्हाई की सामाजिक प्रकृति का समर्थन करता है और पता चलता है कि चूहों में जम्हाई छूत घ्राण संकेतों पर निर्भर है. हालांकि, बाद केवल यावन छूत में शामिल किया जा रहा है के रूप में चूहों के जोड़े के बीच परिचित की डिग्री का समर्थन करता है, और श्रवण संकेत संभावना चैनल जिसके द्वारा यावन छूत होता है18.

कुल मिलाकर, इन भविष्यवाणी है कि अपरिचित चूहों के बजाय परिचित संक्रामक जम्हाई दिखाएगा के अनुसार अप्रत्याशित परिणाम हैं. हालांकि प्रस्तुत परिणाम एक सकारात्मक नियंत्रण का उपयोग नहीं करते हैं (हमारे पास कोई डेटा नहीं है जिसमें संक्रामक जम्हाई बारीकी से संबंधित व्यक्तियों में मनाया जाता है), यह माना जाता है कि इस विधि अपरिचित चूहों में संक्रामक जम्हाई के लिए निष्पक्ष है. कई तत्व इस तरह के दावे का समर्थन करते हैं। सबसे पहले, परिचित और अपरिचित चूहों जम्हाई18की औसत आवृत्तियों में अलग नहीं था; इस प्रकार, यहाँ पता चला जम्हाई छूत में मतभेद कितनी बार वे जम्हाई पर निर्भर नहीं लग रहे थे. दूसरा, तथ्य यह है कि चूहे प्रति yawns की एक ही संख्या बेतरतीब ढंग से अवलोकन अवधि के लिए आवंटित किया गया था और यह है कि किसी भी समूह में जम्हाई छूत का उत्पादन नहीं किया अपरिचित चूहों में संक्रामक जम्हाई की खोज और अधिक मजबूत renders. अंत में, एक क्रॉस-सहसंबंध विश्लेषण (व्यवहार के समकालीन मिलान का पता लगाने के लिए) पहले 18 को यहाँ उपयोग किए गए समान डेटासेट पर लागू किया गया था, और परिणाम क्या पाया गया था के साथ मेल खाता था। इसलिए, यह विधि संक्रामक जम्हाई में परिवर्तनका पता लगाने और मापने के लिए पर्याप्त संवेदनशील है।

वैकल्पिक रूप से, यह सवाल किया जा सकता है कि क्या यहाँ पाया गया था संक्रामक जम्हाई है. इस तरह की चिंता इस अध्ययन के लिए विशेष नहीं है. दो दृष्टिकोण हैं जिनसे संक्रामक जम्हाई और इसके कारण चिंताओं को जगाया है. सबसे पहले, सहानुभूति केवल कारक संक्रामक जम्हाई18अंतर्निहित प्रतीत नहीं होता है, प्रजातियों के रूप में सहानुभूति दिखाने की उम्मीद नहीं है और / दूसरा, चिंता बढ़ रही है कि क्या संक्रामक जम्हाई कहा जाता है इस तरह के रूप में नहीं हो सकता है. कई दशकों के लिए (थोरपी,1956; पहले 10 उद्धृत ), संक्रामक, स्टीरियोटाइप व्यवहार पैटर्न और विशेष रूप से संक्रामक जम्हाई को सामाजिक सुविधा की अभिव्यक्ति के रूप में माना गया है। हाल ही में, Kapitny और नीलसन25 नकली डेटा के उपयोग के माध्यम से सुझाव दिया है कि क्या एक अवधारणात्मक पैटर्न मान्यता त्रुटि गलत तरीके से संक्रामक जम्हाई कहा जा सकता है. इसलिए, समस्या संक्रामक जम्हाई मापा जा रहा है, लेकिन यह कैसे परिभाषित किया गया है में नहीं झूठ हो सकता है.

संक्षेप में, यहाँ प्रस्तावित विधि यावन छूत का पता लगाने के लिए उपयोगी है. इसके अलावा, यह कुछ संवेदी संकेतों को छोड़ने के लिए उपयोगी है, जिससे केवल एक या दो संवेदी संकेतों की संख्या को कम करने. विशिष्ट भविष्यवाणियों का परीक्षण करने के लिए आगे के प्रयोगों दूसरों से एक भावना के प्रभाव भेद करने के लिए आवश्यक हैं.

Figure 1
चित्र 1 : अवलोकन सेट अप के Schematic संक्रामक जम्हाई को मापने के लिए. उल्टे टी के आकार की मेज के प्रत्येक पक्ष पर जोड़े में चार अलग-अलग पिंजरों की व्यवस्था की गई थी। प्रत्येक जोड़ी में, पिंजरों के बीच में एक्रिलिक डिवाइडर के साथ एक दूसरे का सामना कर रहे थे. विशिष्ट परीक्षण स्थिति निर्धारित करता है कि क्या पिंजरों के बीच में विभाजक छेद है और क्या यह स्पष्ट है या अपारदर्शी है. कैमकॉर्डर को रणनीतिक रूप से जम्हाई व्यवहार के किसी भी उदाहरण को रिकॉर्ड करने के लिए रखा गया था। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्र 2 : Yawn छूत घटता अपरिचित पुरुष चूहों के नौ जोड़े के लिए (ए) घ्राण संकेतों को उजागर, (बी) दृश्य संकेत, (सी) घ्राण और दृश्य संकेत, और (डी) न तो दृश्य और न ही घ्राण संकेत. प्रत्येक चक्र एक चूहे से 95% विश्वास अंतराल (सीआई) के साथ जम्हाई दर में औसत अंतर का प्रतिनिधित्व करता है कि एक ही मिनट में या मिनट (समय खिड़की) में अन्य चूहे के जम्हाई से पहले और जब यह जम्हाई नहीं था. डैश्ड लाइन के ऊपर यावन दर मान यावन छूत का संकेत देते हैं, जबकि डैश्ड रेखा के नीचे के मान गैर-यावन छूत को इंगित करते हैं। ठोस लाइन हर समय खिड़की पर अंक में शामिल होने के लिए हर समय खिड़की पर जम्हाई दरों में औसत अंतर को इंगित करने के लिए प्रयोग किया जाता है जब प्रत्येक चूहे के yawns की संख्या बेतरतीब ढंग से 60 मिनट अवलोकन अवधि के लिए आवंटित किया गया था. गहरे भूरे रंग के बैंड इंगित करता है एक 95% CI प्रत्येक समय खिड़की पर चार परीक्षण स्थितियों से यादृच्छिक डेटासेट के संयोजन के द्वारा प्राप्त (एक सतत छाया आंकड़ा की व्याख्या की सुविधा के लिए प्रयोग किया जाता है). घ्राण संकेतों के संपर्क में आने वाले चूहों की एक जोड़ी को विश्लेषण से हटा दिया गया था क्योंकि चूहों में से कोई भी जम्हाई नहीं ले रहा था। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 3
चित्र 3 : यावन छूत कर्वन कर्व्स के नौ जोड़े (A) घ्राण संकेतों, (B) दृश्य संकेतों, (C) घ्राण और दृश्य संकेतों, और (D) न तो दृश्य और न ही घ्राण संकेतों के संपर्क में. प्रत्येक चक्र एक चूहे से 95% विश्वास अंतराल (सीआई) के साथ जम्हाई दर में औसत अंतर का प्रतिनिधित्व करता है कि एक ही मिनट में या मिनट (समय खिड़की) में अन्य चूहे के जम्हाई से पहले और जब यह जम्हाई नहीं था. डैश्ड लाइन के ऊपर यावन दर मान यावन छूत का संकेत देते हैं, जबकि डैश्ड रेखा के नीचे के मान गैर-यावन छूत को इंगित करते हैं। ठोस रेखा प्रत्येक समय विंडो पर जम्हाई दरों में औसत अंतर को इंगित करती है जब प्रत्येक चूहे के जम्यानों की संख्या यादृच्छिक रूप से 60 मिनट अवलोकन अवधि के लिए आवंटित की गई थी। गहरे भूरे रंग के बैंड प्रत्येक समय विंडो पर चार परीक्षण स्थितियों से यादृच्छिक डेटासेट के संयोजन के द्वारा प्राप्त एक 95% सीआई इंगित करता है। दृश्य संकेतों के संपर्क में चूहों की एक जोड़ी विश्लेषण से हटा दिया गया था क्योंकि चूहों में से एक नहीं झनझना. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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Discussion

सफल परिणाम प्राप्त करने के लिए ध्यान में लिया जाना चाहिए जो विधि में महत्वपूर्ण कदम हैं। परिचित चूहों के लिए घर पिंजरों का हिस्सा होना चाहिए कम से कम 1.5 महीने के लिए weaning के बाद और प्रयोगों को चलाने से पहले. हालांकि, अपरिचित चूहों अलग घर पिंजरों में रहना चाहिए. दोनों ही मामलों में, चूहों के जोड़े अलग litters से आना चाहिए, लेकिन संभव के रूप में उम्र में समान के रूप में. अवलोकन पिंजरों के बारे में, उनके छेद डिवाइडर में उन लोगों से मेल खाना चाहिए, क्योंकि यह चूहों के बीच घ्राण संपर्क की गारंटी के लिए एक ही रास्ता है. दूसरी ओर, डिवाइडर, दृश्य संपर्क या अपारदर्शी कोई दृश्य संपर्क सुनिश्चित करने के लिए पर्याप्त सुनिश्चित करने के लिए पर्याप्त स्पष्ट होना चाहिए। चूहों और अन्य की एक जोड़ी के बीच लकड़ी विभाजन दूसरी तरफ उन लोगों को देखने से एक तरफ चूहों को रोकने के लिए पर्याप्त होना चाहिए. एक अन्य महत्वपूर्ण पहलू प्रयोग के उपयुक्त डिजाइन है. जब कभी कोई संदेह होता है कि किसी प्रक्रिया में पक्षपाती हो सकता है, तो एक यादृच्छिक प्रक्रिया को30लागू किया जाना चाहिए।

विधि उपयोगकर्ताओं के लिए गंभीर समस्याएँ प्रस्तुत नहीं करना चाहिए। कांच में छेद करना मुख्य तकनीकी समस्या का सामना करना पड़ा था, और उसके कारण, एक्रिलिक के बजाय इस्तेमाल किया गया था. फिर भी, कांच पूरे अवलोकन पिंजरों बनाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, पेशेवर सलाह प्राप्त की है बशर्ते. यह सुनिश्चित किया जाना चाहिए कि छेद के किनारों को कांच के टुकड़े से बचने के लिए दायर किया जाता है जो चूहों को घायल कर सकते हैं। हालांकि, मुख्य विधि को संशोधित करने की सिफारिश नहीं की है (उदा., छेद बड़ा बनाने). इसके अतिरिक्त, पुरुषों और महिलाओं के एक संयुक्त समूह का उपयोग यह मुश्किल झनतर छूत का पता लगाने के लिए कर सकते हैं.

यहाँ इस्तेमाल किया डिवाइडर श्रवण संकेतों का उपयोग करने से चूहों को रोकने के लिए अपर्याप्त हो सकता है, क्योंकि चूहों का उत्पादन और आवृत्तियों पर लगता है जिस पर अवलोकन पिंजरों और डिवाइडर की सामग्री की संभावना ब्लॉक नहीं किया अनुभव करने में सक्षम हैं. हालांकि, इस स्थिति में ही यह अनुमान लगाना संभव बनाता है कि श्रवण संकेतों के कारण जंगली छूत18 और घ्राण संकेतों ने केवल साथी की परिचितता की डिग्री की मान्यता को सुविधाजनक बनाया। इसलिए, यहाँ प्रस्तावित विधि अभी भी संक्रामक जम्हाई और उनकी तीव्रता में शामिल इंद्रियों की पहचान करने के लिए उचित सबूत प्रदान करता है।

इससे पहले के तरीकों को प्रयोगशाला की स्थितियों में संक्रामक जम्हाई का अध्ययन करने के लिए डिजाइन किया गया है मुख्य रूप से प्रयोगात्मक व्यक्तियों को वीडियो पेश करके12,13,लेकिन ये जैविक वैधता के मामले में संदिग्ध दृष्टिकोण थे. यहाँ प्रस्तुत विधि क्या असली दुनिया में होता है और अधिक इसी तरह की स्थितियों में सामाजिक रूप से बातचीत जानवरों का उपयोग करके इस चिंता को हल करती है. इसके अलावा, यह एक साथ एक प्रयोगात्मक सेट अप में कई संवेदी रूपरेखा की भागीदारी का पता लगाने के लिए संभव है. यह मान्यता प्राप्त है कि इस विधि बिल्कुल श्रवण संकेतों और अन्य संवेदी संकेतों के प्रभाव के बीच भेदभाव नहीं करता है. हालांकि, एक अच्छी तरह से डिजाइन आगे प्रयोग शोधकर्ताओं को सबसे अधिक संभावना संवेदी मोडलिटी शामिल अनुमान करने के लिए अनुमति दे सकताहै 18. एक संभव noninvasive समाधान लगता है मुखौटा और श्रवण संकेतों को खत्म करने के लिए सफेद शोर का उपयोग है. इसी प्रकार, शोधकर्ताओं ने ओसी चूहों से बिस्तर करने के लिए भोले चूहों को बेनकाब करने के लिए घ्राण संकेतों की भूमिका है, जो सामाजिक सुविधा अध्ययन32में एक सिद्ध प्रक्रिया है निर्धारित कर सकते हैं.

इस विधि का उपयोग अन्य प्रजातियों में यवन छूत का अध्ययन करने के लिए बढ़ाया जा सकता है। उदाहरण के लिए, इस सेट-अप का उपयोग चूहों और हैम्स्टर जैसे जानवरों के साथ सरल संशोधनों के बाद किया जा सकता है ताकि यान-मोहम्लकीय वक्रों की तुलना की जा सके। विभिन्न प्रजातियों के बीच तुलना अप्रत्याशित पैटर्न प्रकट हो सकता है. बुनियादी प्रयोगात्मक योजना ऐसे गिनी सूअरों, बिल्लियों, और खरगोशों के रूप में बड़े जानवरों के साथ काम कर सकते हैं. इसी तरह, विधि इस तरह के सौंदर्य और खरोंच के रूप में अन्य संभावित संक्रामक व्यवहार का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। आर आधारित कार्यक्रम कई समय खिड़कियों के लिए यावन छूत की गणना में बिताए समय को कम कर सकते हैं और उपयोगकर्ता पहले से प्रासंगिक डेटा एकत्र किया है, बशर्ते अन्य कशेरुकी प्रजातियों में यावन छूत को मापने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।

संक्षेप में, इस विधि का मुख्य लाभ यापन छूत घटता के अधिग्रहण और संवेदी शामिल रूपरेखाके सापेक्ष भूमिकाओं के बीच भेदभाव में सहायता करने के लिए अग्रणी रहे हैं. यापन छूत घटता के अधिग्रहण है, जहाँ तक हम जानते हैं, एक उपन्यास दृष्टिकोण है कि एक छूत की ताकत को मापने के लिए उपयोगी हो सकता है और निरीक्षण कैसे इस तीव्रता प्रजातियों के बीच भिन्न होता है. तदनुसार , इस विधि का उपयोग अन्य पशु प्रजातियों जैसे भेड़16, भेड़ो15, कुत्तों33, सांप34और मछली5में कुछ संशोधनों के साथ भी किया जा सकता है . सांपों को छोड़कर इन सभी प्रजातियों में, जम्हाई पहले से प्रलेखित किया गया है। वास्तव में, यहाँ प्रस्तुत एक विधि के समान एक budgerigars27में सफलतापूर्वक इस्तेमाल किया गया है. इस विधि का उपयोग अन्य प्रकार के व्यवहार का अध्ययन करने के लिए भी किया जा सकता है जो संक्रामक हैं। उदाहरण के लिए, इस तरह के भावनात्मक प्रतिक्रिया के रूप में व्यवहार, सौंदर्य, और कृन्तकों में खरोंच संक्रामक हो सकता है. वास्तव में, यहाँ प्रस्तावित विधि परिचित चूहों में संक्रामक भावनात्मक प्रतिक्रिया से पता चला18.

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Disclosures

लेखक हितों के टकराव की घोषणा नहीं करते हैं।

Acknowledgments

ए. एम. आंशिक रूप से Vicerrectora de Docencia, Benem]rita Universidad Aut$noma de Puebla द्वारा वित्त पोषित किया गया था. हम विशेष रूप से पशु सुविधा के कर्मचारियों के ऋणी हैं "क्लाउड बर्नार्ड" शूटिंग के लिए चूहों के उपयोग के लिए. हम इस पांडुलिपि के प्रारंभिक संस्करणों पर उनकी टिप्पणी के लिए गुमनाम रेफरी धन्यवाद. प्रस्तुति कम मजबूत और उनके विचारशील टिप्पणी की वजह से अधिक संतुलित है

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acrylic dividers Handcrafted Not available Two dividers, one clear and one opaque, will have 24 holes each. The other two dividers, one clear and one opaque, will have no holes. See the main text for details of construction.
An R-based program Benemérita Universidad Autónoma de Puebla Not available This is the program used to assess yawn contagion in rats. See the main text for information about the way the program is used.
Data sheets The user can elaborate them Not available These forms will be used for the observer to record the frequency of yawning behaviour by viewing the video recordings. Alternatively, a notebook can be use provided you follow the suggestions given in the main text.
Desktop computer Any maker Not available Make sure the computer has a video card capable of conveniently processing the video recordings of yawning behaviour. 
Digital camcorders Any maker Not available They will be used to video record yawning behaviour of each pair of rats; there will be 2 pairs of rats per experimental session. 
Flash drive Any maker Not available Each experimental session will last 60 min, and so you will require sufficient memory to store the video recording.
Glass cages Handcrafted Not available Each cage (19 X 19 X 10 cm height) will have 24 holes (0.5 cm diameter) forming three rows in the middle of one of its sides. See the main text for more details about their construction. It is recommended to fabricate one extra cage in case one of them is accidentally broken. 
Markers Sharpie or any other maker Not available Permanent markers to number the rats. See the main text to see one way of using painting symbols on the rat's tail. 
Pencils Any maker Not available They are used by the observer to record the frequency of yawning. It is important that the observer has previously been trained to recognize yawning behaviour and operate the video player system. 
R software R Development Core Team Not available Download R at: http://cran.r-project.org/  
Rail-like wooden bars Handcrafted Not available They will be fixed in the middle of the rectangular wooden sheet  forming a track, where a second wooden sheet is placed. See the main text for additional instructions for construction.
Rectangular table Any maker Not available This is the table (approximately 2 x 1 m) where the inverted T-shaped table will be placed for performing the observation of yawning behaviour.
Sprague-Dawley male rats Any local supplier of laboratory animals Not available Nine pairs of male rats per test situation are necessary for each group, familiar and unfamiliar rats, because with this sample size the interindividual variation that might exist in yawning frequency will not severely affect the conclusions drawn from the statistical analysis performed to the data.    
Spreadsheet software Microsoft Not available Excel will be the software used to store the yawning recordings initially recorded on the data sheets. Revise the main text for instructions about the recommended way of doing the transcription.
Square filter papers Any maker Not available They are used for covering the cage's bottom.
Tripods Any maker Not available They will be used for fixing the camcorders in front of each pair of observation cages.
Wooden Inverted T-shaped table Handcrafted Not available Read the instructions in the main text to see the way of constructing it. If preferred, a different material to wood can be used. Make sure any material is as resistant as possible to the transmission of ultrasounds, which the rats might use for communication.  

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References

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Moyaho, A., Díaz-Loyo, A. P.,More

Moyaho, A., Díaz-Loyo, A. P., Juárez-Mora, O. E., Beristain-Castillo, E. A Laboratory Method to Measure Contagious Yawning in Rats. J. Vis. Exp. (148), e59289, doi:10.3791/59289 (2019).

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