चिकित्सकीय रूप से, रजोनिवृत्ति महिलाओं में एस्ट्रोजन की कमी लिपिड व्यवधान और एथेरोस्क्लेरोसिस की घटनाओं को बढ़ा सकती है। हम apoE में एक डबल पृष्ठीय-पक्षीय चीरा के माध्यम से द्विपक्षीय अंडाशय उच्छेदन द्वारा एक में विवो एस्ट्रोजन की कमी मॉडल की स्थापनाकी – / माउस मॉडल रजोनिवृत्ति के बाद हृदय रोग के exogenous एस्ट्रोजन उपचार स्क्रीनिंग के लिए लागू है.
रजोनिवृत्ति उपरांत महिलाओं को रजोनिवृत्ति पूर्व महिलाओं की तुलना में हृदय रोगों के विकास का अधिक खतरा होता है। मादा चूहों ovariectomized (OVX) weaning प्रदर्शन पर बरकरार डिम्बग्रंथि समारोह के साथ महिला चूहों के साथ तुलना में aorta में atherosclerotic घावों में वृद्धि हुई. हालांकि, एथेरोस्क्लेरोसिस-प्रवण स्थिति के साथ एस्ट्रोजन की कमी वाले चूहों को शामिल करने वाले प्रयोगशाला मॉडलों की कमी है। यह घाटा महत्वपूर्ण है क्योंकि रजोनिवृत्ति महिलाओं में नैदानिक एस्ट्रोजन की कमी पूर्व मौजूदा या चल रहे लिपिड व्यवधान और atherosclerosis की घटनाओं में बढ़ सकता है. इस अध्ययन में, हम एक द्वि पृष्ठीय-पक्षीय चीरा के माध्यम से द्विपक्षीय अंडाशय उच्छेदन द्वारा एक में विवो एस्ट्रोजन की कमी माउस मॉडल की स्थापना apolipoप्रोटीन ई (apoE)में – / फिर हम हेज़लनट स्प्रेड के माध्यम से प्रशासित 17″-एस्ट्राडियोल और स्यूडोप्रोटोडिओसिन (पीपीडी) (एक फाइटोएस्ट्रोजन) के प्रभावों की तुलना करते हैं। हम पाते हैं कि हालांकि पीपीडी OVX apoE में अंतिम शरीर के वजन और प्लाज्मा टीजी को कम करने पर कुछ प्रभाव डालती है-/- चूहों, यह विरोधी atherosclerotic और हृदय-सुरक्षा क्षमता है इसके साथ तुलनीय 17″-एस्ट्राडियोल समकक्ष. पीपीडी एक फाइटोएस्ट्रोजन है जिसे एंटी-ट्यूमर गुणों को लागू करने के लिए सूचित किया गया है। इस प्रकार, प्रस्तावित विधि postmenopausal महिलाओं में पारंपरिक हार्मोन रिप्लेसमेंट थेरेपी के लिए स्थानापन्न करने के लिए peroral प्रशासन के माध्यम से phytoestrogens स्क्रीनिंग के लिए लागू है, जो संभावित हानिकारक tumorigenetic है सूचित किया गया है क्षमता. अखरोट प्रसार के माध्यम से Peroral प्रशासन noninvasive है, यह व्यापक रूप से कई रोगियों के लिए लागू प्रतिपादन. इस लेख में द्वि-पृष्ठीय-पक्षीय चीरा के माध्यम से द्विपक्षीय अंडाशय के चरण-दर-चरण प्रदर्शन शामिल हैं-/- चूहे और पेओरल 17″-एस्ट्राडियोल या हेज़लनट स्प्रेस्ट के माध्यम से फाइटोएस्ट्रोजन हार्मोन प्रतिस्थापन। प्लाज्मा लिपिड और हृदय समारोह इकोकार्डियोग्राफी का पालन का उपयोग कर विश्लेषण करती है।
महामारी विज्ञान और नैदानिक अध्ययनों से पता चला है कि रजोनिवृत्ति उपरांत महिलाओं को रजोनिवृत्ति पूर्व महिलाओं की तुलना में हृदय रोग का काफी अधिक खतरा होता है1,2. हार्मोन रिप्लेसमेंट थेरेपी (एचआरटी) हृदय रोग के सापेक्ष जोखिम को कम कर सकता है 0.37-0.793. अन्य जटिलताओं के अलावा, हृदय रोगों के कारण atherosclerosis दुनिया भर में मौत का प्रमुख कारण है4. हालांकि, एथेरोस्क्लेरोसिस प्रवण स्थिति पेश एस्ट्रोजन की कमी चूहों को शामिल प्रयोगशाला मॉडल की कमी है. इस प्रोटोकॉल रजोनिवृत्ति के बाद हृदय रोग के exogenous एस्ट्रोजन उपचार स्क्रीनिंग के लिए एक में विवो एस्ट्रोजन की कमी माउस मॉडल प्रदान करता है.
पिछले अध्ययनों से पता चलता है कि atherosclerotic कृन्तकों में OVX के आवेदन एक उच्च कोलेस्ट्रॉल आहार खिलाया पोस्टमेनोपॉज़ल महिलाओं atherosclerosis से पीड़ित नकल कर सकते हैं5,6,7,8. रजोनिवृत्ति महिलाओं में एथेरोस्क्लेरोटिक राज्य के समान एक पुनरुत्पादक और सुविधाजनक पशु मॉडल exogenous एस्ट्रोजन अनुसंधान का आधार है। यहाँ, द्विपक्षीय अंडाशय के द्वि पृष्ठीय चीरा एथेरोस्क्लेरोसिस-प्रवण एपोलिपोप्रोटीन ई नॉकआउट (एपोई-/-) चूहों9,10में लागू किया गया था। मध्य पेट या पृष्ठीय चीरा के साथ तुलना में, डबल पृष्ठीय-पक्षीय चीरा एक आसान, कम समय लेने वाली विधि है जो गंभीर पेट गुहा आसंजन और सूजन से बच सकती है। अखरोट प्रसार के माध्यम से Peroral प्रशासन (सामग्री की तालिकादेखें) noninvasive और सुविधाजनक है, यह व्यापक रूप से एक दीर्घकालिक प्रशासन मोड11के रूप में लागू प्रतिपादन. धीमी गति से जारी गोली प्रत्यारोपण भी लोकप्रिय है6. हालांकि, प्रत्यारोपण विशेष रूप से OVX के अधीन चूहों में संक्रमण की घटनाओं बढ़ सकता है. अन्य noninvasive प्रशासन मोड, इस तरह के मौखिक gavage और पानी प्रशासन के रूप में, भी कई कमियां हैं. मौखिक gavage आम तौर पर तनाव चूहों और esophageal चोट का कारण हो सकता है. पीने के पानी के माध्यम से हार्मोन प्रशासन अत्यधिक फायदेमंद है; हालांकि, एक पायसीकारक के रूप में DMSO के जोड़ने के रूप में exogenous एस्ट्रोजन पानी में अघुलनशील हैं अपरिहार्य है. यहाँ, हम लंबी अवधि के प्रशासन के लिए अखरोट प्रसार के माध्यम से peroral 17″-एस्ट्राडियोल या phytoestrogen हार्मोन प्रतिस्थापन चुना है।
हाल ही में, रजोनिवृत्ति उपरांत महिलाओं के हृदय प्रणाली पर एचआरटी के लाभकारी प्रभाव महिलाओं के स्वास्थ्य पहल (WHI) परीक्षण12में लड़ा गया है. एक तरफ, exogenous एस्ट्रोजन अकेले हृदय प्रणाली पर एक लाभदायक प्रभाव डालती है; दूसरी ओर, यह हृदय की घटनाओं के जोखिम को बढ़ाने के लिए मेटोहाइड्रॉक्सीप्रोजेस्टेरोन एसीटेट के साथ गठबंधन कर सकते हैं। अधिक गंभीरता से, एचआरटी स्तन और गर्भाशय ट्यूमर प्रगति के लिए नेतृत्व कर सकते हैं, और इस प्रभाव को स्पष्ट रूप से इसके उपयोग13,14सीमित है. अधिक रुचि ट्यूमर कोशिकाओं में माइटोटिक गतिविधि की कमी exogenous एस्ट्रोजेन के हृदय सुरक्षात्मक प्रभाव पर ध्यान केंद्रित किया गया है15,16,17. मनुष्यों और पशुओं में अनेक अध्ययनों से पता चलता है कि एस्ट्रोजेन ों के समान संरचनाओं वाले फाइटोएस्ट्रोजन हृदयसंरक्षणमें लाभकारी भूमिका निभा सकते हैं.
इस प्रकार, वर्तमान कार्य का उद्देश्य (i) एपो में एक डबल पृष्ठीय-पक्षीय चीरा के माध्यम से द्विपक्षीय अंडाशय-उच्छेदन द्वारा एक इन विवो एस्ट्रोजन की कमी माउस मॉडल का निर्माण करने के लिए कर रहे हैं– / हेज़लनट प्रसार के माध्यम से 17″-एस्ट्राडियोल और स्यूडोप्रोटोडिओसिन (पीपीडी) प्रशासित। 17 डिग्री-एस्ट्राडियोल एक प्रकार का बहिर्जात एस्ट्रोजन है जो महिला यौन हार्मोन6,11,19 सेसंबंधित है। पीपीडी, एक स्टेरॉयड saponin और Dioscorea पौधों से phytoestrogen, पहले विरोधी ट्यूमर गुण लागू करने के लिए सूचित किया गया है20.
यहाँ वर्णित पद्धति लिपिड व्यवधान और atherosclerosis रजोनिवृत्ति महिलाओं में देखा जैसा एक माउस मॉडल है. यह अच्छी तरह से प्रलेखित है कि रजोनिवृत्ति उपरांत महिलाओं में एस्ट्रोजन की कमी उत्तरोत्तर जटिल और व्यापक ?…
The authors have nothing to disclose.
यह काम चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (81202526 से J.X.), चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (81302769 से B.S.), बीजिंग नगर प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (47144226 से B.S.), चीनी Postdoctoral द्वारा समर्थित किया गया था विज्ञान फाउंडेशन (20110490325 से J.X.), और पीएच.डी. कार्यक्रम चीन के शिक्षा मंत्रालय के फाउंडेशन (20121106120031 से बी.एस.) के लिए.
17β-estradiol, >98% | Sigma-Aldrich | E8875-250MG | Estrogen |
Disposable syringes (with 25G needles) | Hunan Luzhou Huikang Development Co., Ltd | 0.5*19TWLB | Cardiac bleeding |
High-cholesterol mouse diet | Huafukang Bio-Technology | N/A | 1.25% cholesterol, 0% cholate |
High-Resolution In Vivo Micro-Imaging System | VisualSonics | Vevo®770 | Measurements of intima-media thickness and cardiac dysfunction |
2-Methyl-2-butanol | Sigma-Aldrich | 152463-250ML | Preparation of avertin |
Micro Dissecting forceps, Curved 8mm | Kanghua Medical Equipment Co., Ltd | Surgical tools | |
Micro Dissecting forceps, Straight 8mm | Kanghua Medical Equipment Co., Ltd | Surgical tools | |
Micro Dissecting Scissors, Curved/Sharp 8mm | Kanghua Medical Equipment Co., Ltd | Surgical tools | |
Micro Dissecting Scissors, Straight/Sharp 8mm | Kanghua Medical Equipment Co., Ltd | Surgical tools | |
Monofilament suture 4-0 1/2 5*12 19mm | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltd | R413 | Suture and ligation of the tissues |
Nut cream (Nutella) | Ferrero | N/A | Medium for peroral 17β-estradiol or PPD |
OptiVisor optical glass binocular magnifier | Dohegan Optical Company Inc. | N/A | Assistant of identifying the tissues during ovariectomy |
Phosphate-buffered saline at pH 7.4 | SIGMA | P3813 | Preparing 1 L saline |
Pro MultiLabel Microplate Reader | Tecan | Infinite M1000 | Plasma TC and TG determination |
Pseudoprotodioscin | Shanghai Winherb Medical S & T Development | W-0427 | CAS registry no. 102115-79-7 |
Rimadyl, 50 mg/mL | Pfizer Pharma GmbH | 462986 | Postoperative analgesia after ovariectomy |
Sesame oil | Sigma-Aldrich | S3547-1L | Dissolving the 17β-estradiol or PPD |
Solcoseryl Eye-Gel | Menarini, Solco Basle Ltd. | Eye protection during anesthesia | |
Stereo microscope | MCALON | MCL-6STV | Image of the intimal region of aorta |
Table model high speed centrifuge | SIGMA | 1-14K | Preparation of plasma |
Scissors, slight Curve (14cm) | Kanghua Medical Equipment Co., Ltd | Surgical tools | |
Scissors, straight Flat (14cm) | Kanghua Medical Equipment Co., Ltd | Surgical tools | |
Tissue forceps, serrated, slight Curve (14cm) | Kanghua Medical Equipment Co., Ltd | Surgical tools | |
Tissue forceps, serrated, straight Flat (14cm) | Kanghua Medical Equipment Co., Ltd | Surgical tools | |
Tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-5G | Preparation of avertin |
Triglycerides (TG) assay kit | Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering | A110-1 | Plasma TG determination |
Total cholesterols (TC) assay kit | Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering | A111-1 | Plasma TC determination |