Summary
La somministrazione cronica di isoproterenol tramite una pompa osmotica impiantata è stata ampiamente utilizzata per imitare l'insufficienza cardiaca avanzata nei topi. Qui, descriviamo metodi dettagliati nell'impianto chirurgico di mini-pompa per la continua somministrazione di isoproterenolo nel corso di 3 settimane, così come, valutazione ecocardiografica per la creazione del modello di successo.
Abstract
Isoproterenol (ISO), è un agonista beta-avverso non selettivo, che viene ampiamente utilizzato per indurre lesioni cardiache nei topi. Mentre il modello acuto imita la cardiomiopatia indotta dallo stress, il modello cronico, somministrato attraverso una pompa osmotica, imita l'insufficienza cardiaca avanzata negli esseri umani. Lo scopo del protocollo descritto è quello di creare il modello di insufficienza cardiaca cronica indotta dall'ISO nei topi utilizzando una mini-pompa impiantata. Questo protocollo è stato utilizzato per indurre insufficienza cardiaca in oltre 100 ceppi di topi inbred. Le tecniche sull'impianto della pompa chirurgica sono descritte in dettaglio e possono essere rilevanti per chiunque sia interessato a creare un modello di insufficienza cardiaca nei topi. Inoltre, vengono presentati i cambiamenti settimanali di rimodellamento cardiaco in base ai parametri ecocardiografici per ogni ceppo e al tempo previsto per modellare lo sviluppo. In sintesi, il metodo è semplice e riproducibile. ISO continuo somministrato tramite la mini-pompa impiantata oltre 3 o 4 settimane è sufficiente per indurre il rimodellamento cardiaco. Infine, il successo per la creazione del modello ISO può essere valutato in vivo dall'ecocardiografia seriale che dimostra ipertrofia, dilatazione ventricolare e disfunzione.
Introduction
L'insufficienza cardiaca con frazione di espulsione ridotta (HFrEF) è accompagnata da una risposta compensativa ben riconosciuta del sistema nervoso simpatico per mantenere l'omeostasi cardiovascolare1. Lo stress emodinamico e gli effetti deleteri sul cuore e sulla circolazione sono stati osservati con attivazione cronica. Questi sono diventati la pietra angolare della farmacoterapia contemporanea per l'insufficienza cardiaca e sono meccanismi importanti nella progressione dell'insufficienza cardiaca e nell'antagonismo terapeutico dei sistemi neuroormonali1.
Sono disponibili diversi modelli murini per le indagini di base sull'insufficienza cardiaca. I modelli genetici sono interessanti per esplorare terapie molecolari e studiare i percorsi di segnalazione. Tuttavia, questi modelli potrebbero non essere rilevanti per le forme comuni di insufficienza cardiaca. Altri modelli comuni includono la legatura dell'arteria discendente anteriore sinistra (LAD), la costrizione transaortica (TAC) e l'isoproterenol (ISO), ognuno con la punta a una diversa eziologia patologica2,3,4,5 ,6. La legatura dell'arteria LAD induce un infarto miocardico della parete anteriore creando così un modello specifico per la cardiomiopatia ischemica. TAC induce un sovraccarico di pressione acuta per creare un modello ipertensivo di insufficienza cardiaca. Anche se il gradiente di pressione può essere misurato, consentendo la stratificazione dell'ipertrofia, l'insorgenza acuta dell'ipertensione manca di rilevanza clinica diretta4. Entrambi i modelli LAD e TAC richiedono un alto livello di esperienza chirurgica per l'esecuzione. Il modello ISO acuto di insufficienza cardiaca imita la cardiomiopatia indotta dallo stress, nota anche come malattia di Takotsubo, caratterizzata da un marcato aumento delle catecholamine e dall'attività nel ventricolo sinistro che imita l'infarzione miocardiale acuta7, 8. Al contrario, i modelli ISO cronici di insufficienza cardiaca presentano sintomi di insufficienza cardiaca avanzata, con livelli cronicamente elevati di catecholamines1. I vantaggi del modello ISO cronico sono che fornisce una stimolazione avversa cronica che imita l'insufficienza cardiaca avanzata e che è relativamente facile da creare. Lo sperimentatore dovrebbe scegliere un modello che rituga meglio la loro patologia di interesse.
L'obiettivo generale di questo metodo è quello di indurre insufficienza cardiaca nei topi utilizzando una mini pompa impiantata che rilascia ISO continuamente per imitare l'attivazione simpatica cronica trovato nei pazienti di insufficienza cardiaca1. Il metodo è semplice e riproducibile. Anche se c'è una chiara variazione tra i ceppi di topo, ISO somministrato oltre 3 A 4 settimane a 30 mg/kg/giorno è sufficiente per indurre il rimodellamento cardiaco nella maggior parte dei topi. In particolare, ISO porta ad una fase compensativa pro-ipertrofica durante la prima settimana seguita da assottigliamento della parete, dilatazione ventricolare e diminuzione della funzione sistolica entro la settimana 2 e 32. Il successo per la creazione del modello ISO può essere valutato in vivo dall'ecocardiografia seriale che dimostra ipertrofia, dilatazione e disfunzione ventricolare, nonché l'ex vivo attraverso la valutazione istologica e molecolare del tessuto cardiaco raccolto per l'intramiocardio accumulo di lipidi, fibrosi, stress ER, apoptosi ed espressione genica9,10,11,12.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Questo protocollo aderisce alle linee guida per la cura degli animali dell'Università della California, Los Angeles (protocollo ARC #2010-075). I lettori sono invitati a rispettare il proprio protocollo approvato da IACUC, poiché la cura dei topi peri-procedura e la gestione dell'analgesia possono essere specifiche dell'istituzione.
1. Preparazione della pompa osmotica isoproterenol
NOTA: Questa procedura è stata applicata con successo su topi femmine di oltre 9 settimane che pesano 18 g da oltre 100 ceppi di topi inbred, così come, nei topi maschi in un sottoinsieme di ceppi. Non esiste un limite massimo di peso corporeo per questa procedura. Includere sempre controlli abbinati all'età, in quanto non è noto se l'età del trattamento influenzi la suscettibilità indotta dall'isoproterenol allo sviluppo dell'insufficienza cardiaca.
- Pesare e registrare il peso corporeo per ogni mouse.
- Calcolare la quantità e la concentrazione appropriate di isoproterenol per ciascun topo (vedere la tabella 1 ; File supplementare).
NOTA: Le pompe osmotiche utilizzate in questo esperimento (Tabella dei materiali) hanno un volume di serbatoio di 100 gradi centigradi e sono progettate per fornire farmaci a velocità di flusso continue per un massimo di 28 giorni. Preparare un'ulteriore 20 l di soluzione isoproterenol per pompa per tenere conto della perdita di volume nel tubo di riempimento durante il caricamento della pompa. - Pesare la quantità appropriata di isoproterenol (Tabella 1) utilizzando un equilibrio analitico e scioglierlo in 120 - L di soluzione sterile 0,9% NaCl. Pipetta vigorosamente o vortice per 1 min per soluficare completamente isoproterenol.
NOTA: Preparare le pompe osmotiche in un armadietto di biosicurezza di laboratorio. Le pompe devono essere maneggiate con guanti chirurgici. La tecnica sterile è raccomandata durante la preparazione delle pompe osmotiche e durante la procedura di impianto chirurgico. - Pesare e registrare la pompa osmotica vuota insieme al suo moderatore di flusso e quindi rimuovere il moderatore di flusso.
- Aspirate 120 L di soluzione isoproterenol in una siringa da 1,0 mL e attaccare il tubo di riempimento con punta smussata da 27 calibro fornito con le pompe osmotiche.
NOTA: Assicurarsi che la siringa e il tubo di riempimento siano privi di bolle d'aria. - Mentre si tiene la pompa in posizione eretta, inserire il tubo di riempimento attraverso l'apertura della pompa nella parte superiore fino a quando la punta del tubo di riempimento si trova vicino alla parte inferiore del serbatoio della pompa.
- Caricare la pompa osmotica spingendo lentamente lo stantuffo della siringa fino a quando la soluzione isoproterenol si riempie fino all'apertura della pompa.
- Rimuovere con attenzione il tubo di riempimento e pulire la soluzione in eccesso.
- Inserire nuovamente il moderatore del flusso per chiudere la pompa e cancellare qualsiasi soluzione in eccesso.
- Verificare che oltre il 90% del volume del serbatoio sia stato riempito ripesando la pompa osmotica.
NOTA: Le pompe di controllo vengono preparate allo stesso modo riempiendo il serbatoio della pompa con soluzione sterile 0.9% NaCl.
2. Preparazione di strumenti chirurgici
- Pulire tutti gli strumenti chirurgici, tra cui l'illuminatore a microscopio a luce o-anello in fibra ottica, 2 pinze, portaa ago, sterilizzatori di perline calde, perline di vetro e forbici (Tabella dei materiali).
- Strumenti chirurgici autoclave a 121o C per 30 min per sterilizzare gli strumenti prima dell'intervento chirurgico.
3. Impianto chirurgico a pompa osmotica Isoproterenol
- Indurre l'anestesia posizionando il topo in una camera di induzione con 3% isoflurane in 95% O2 e 5% CO2. Mantenere l'anestesia con 2% isoflurane tramite un nosecone.
- Somministrare 5 mg/kg di carprofene s.c. al collo tra le scapole per l'analgesia.
- Posizionare unguento oftalmico sugli occhi per prevenire la disidratazione corneale.
- Controllare la profondità dell'anestesia monitorando la frequenza respiratoria, il riflesso del pizzico e il colore della membrana mucosa.
- Posizionare il mouse in una posizione supina su un pad riscaldato. Rimuovere i capelli dall'addome inferiore e disinfettare la pelle con betadine o cloreraxidina.
NOTA: Per ridurre al minimo l'infezione post-operatoria, assicurarsi che il campo chirurgico sia privo di peli incidente. - Utilizzare un paio di forbici chirurgiche per tagliare un'incisione cutanea mediana lunga 1 cm. Utilizzare un paio di forbici smussate per sezionare attentamente la pelle dalle pareti peritoneali sottostanti.
NOTA: Una consegna intraperitoneale è preferibile per ospitare le dimensioni della pompa. - Tirare le pareti peritoneali lontano dall'intestino sottostante con pinze e tagliare un foro di 0,8 cm nelle pareti peritoneali utilizzando forbici chirurgiche fini.
- Inserire la pompa osmotica nella cavità peritoneale con l'estremità del moderatore del flusso.
- Chiudere la presa nelle pareti peritoneali utilizzando suture assorbibili 5.0 in modo interrotto. Utilizzare 6.0 suture non assorbibili per chiudere l'incisione cutanea in modo interrotto.
- Posizionare il mouse in un'incubatrice dedicata per mantenerlo caldo e asciutto durante il recupero. Valutare il recupero dall'anestesia monitorando il mouse ogni 30 min nelle prime due ore per il ritorno della respirazione normale e del movimento.
- Una volta che il topo si è completamente ripreso dall'anestesia, riportalo all'alloggiamento di routine. Continuare a monitorare l'animale per complicazioni giornaliere fino a 3 giorni e poi ogni 2 o 3 giorni successivi fino alla fine dell'esperimento.
NOTA: Gli animali devono essere monitorati per la prova di dolore o infezione post-operatoria, segni di perdita di peso, mancanza di mobilità, postura anormale, mancanza di sposo, e leccare o mordere l'area di incisione. - Amministrare carprofen 5mg/kg s.c. ogni 24 h per un massimo di 48 h e successivamente, se necessario.
- Somministrare 0,25 mg/mL di amoxicillina in acqua potabile per 5 giorni per prevenire le infezioni del sito chirurgico.
- Rimuovere le suture non assorbibili dopo 7-10 giorni.
4. Valutazione ecocardiografica in anestesia
NOTA: La valutazione ecocardiografica può essere eseguita ripetutamente per monitorare il rimodellamento cardiaco seriale per diverse settimane. Abbiamo eseguito misurazioni ecocardiografiche a intervalli settimanali su 3 settimane.
- Indurre l'anestesia in una camera di induzione all'1,25% all'1,5% di isoflurane. Una volta opportunamente sedato, fissare il mouse sulla piattaforma ecocardiografia con nastro adesivo che consente al mouse di continuare a ricevere l'anestesia attraverso un cono naso.
- Diminuire l'isoflurane ad un dosaggio di manutenzione di 1% per ridurre al minimo gli effetti cronotropici negativi e inotropici di sovrasedazione. Prendere nota delle frequenze respiratorie e cardiache durante lo studio e regolare il dosaggio isoflurane in base alle esigenze.
- Rimuovere i capelli al petto con una lozione depilatoria e pulire il petto privo di capelli.
- Posizionare il gel ad ultrasuoni sul petto e posizionare la sonda ad ultrasuoni per immaginare il cuore.
- In modalità B, immagine del ventricolo sinistro (LV) nella vista parasternale dell'asse lungo. Regolare la piattaforma di ecocardiografia per allineare la valvola aortica e l'apice LV nel piano del fascio a ultrasuoni.
- Inclinare la piattaforma di ecocardiografia per posizionare l'asse lungo LV a 90 gradi al fascio ad ultrasuoni e il diametro massimo LV al centro dell'immagine.
- Immagine dell'asse corto LV ruotando la sonda ad ultrasuoni di 90 gradi.
- In modalità M misura lo spessore della parete LV e le dimensioni interne.
- Riposizionare il mouse nella gabbia. Monitorare il ritorno della respirazione normale e i movimenti spontanei del corpo.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Nel nostro studio pubblicato in precedenza, abbiamo somministrato un dosaggio ISO di 30 mg/kg/d per 21 giorni attraverso la pompa osmotica attraverso 105 ceppi HMDP (Hybrid Mouse DiversityPanel) 2,13. Abbiamo valutato i risultati utilizzando l'ecocardiogramma eseguito al basale, settimana 1, 2 e 3 del trattamento ISO (Figura 1). Simile a uno studio precedente in cui gli autori hanno studiato l'impatto dell'isoproterenolo tra 23 ceppi di topo14, abbiamo osservato una sorprendente variazione tra deformazione tra i parametri ecocardiografici. Viene presentato il riepilogo delle modifiche settimanali in base ai parametri echocardiografici e il tempo previsto per lo sviluppo del modello (Figura 2 e Figura 3)2,15. Anche se sono state osservate variazioni tra i ceppi di topo, in media, lo spessore della parete del settoscopio interventricolare alla fine della diastola (IVSd) e l'accorciamento frazionario (FS) aumentano nella prima settimana, ma diminuiscono di punti temporali successivi; diametro interno ventricolare sinistro alla fine della diastola (LVIDd) e la massa ventricolare sinistra (LVM) aumentano per un periodo di 3 settimane (Figura 3). Questi risultati sono coerenti con una fase compensativa pro-ipertrofica durante la settimana 1 dell'isoproterenol seguita da assottigliamento della parete, dilatazione ventricolare e diminuzione della funzione sistolica. Il nostro studio pubblicato in precedenza ha anche dimostrato l'upregolazione di diversi sottoinsiemi genici associati all'ipertrofia ventricolare sinistra, tra cui il marcatore fibrotico Lgals3 e il marcatore di insufficienza cardiaca Nppb entro la settimana 32. Altri geni regolati in modo differenziale includono quelli coinvolti nell'angiogenesi, la glicoproteina del segnale secreto, il legame polisaccore, il citoscheletro actina, la via di segnalazione della chemiochina, la matrice extracellulare proteica e il collagene2. Questi risultati sono corroborati da risultati ecocardiografici e istologici: i cuori dei topi hanno dimostrato dimensioni della camera ventricolare sinistra visibilmente più grandi sotto ISO e una maggiore quantità di fibrosi in base al trattamento ISO rispetto al controllo salina(Figura 4).
Figura 1: Modello di insufficienza cardiaca indotto isoproterenol cronico (ISO) tramite Mini-Pompa.
Questa cifra è stata adattata con il permesso di Wang et al.2 e Chang et al.15Si prega difare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 2: Variazione delle misure ecocardiografiche della struttura e della funzione cardiaca tra i ceppi di topo HMDP (Hybrid Mouse Diversity Panel).
Le barre nere rappresentano le misure nella condizione di base in ordine di classificazione. Le barre bianche rappresentano le misurazioni dopo 3 settimane di infusione ISO continua. IVSD - spessore della parete del setto settale intervencolare; LVIDd - diametro interno ventricolare sinistro alla diastole finale; LVM - massa ventricolare sinistra; FS - accorciamento frazionario. Le barre di errore rappresentano gli errori standard dei mezzi (SEM). Questa cifra è stata adattata con il permesso di Wang et al.2 e Chang et al.15.
Figura 3: Le variazioni medie nelle misure ecocardiografiche rispetto alla linea di base in ogni punto di tempo ISO per ogni ceppo inbred classico.
Questa cifra è stata adattata con il permesso di Wang et al.2 e Chang et al.15. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 4: Cambiamenti ecocardiografici e istologici dopo l'infusione cronica di isoproterenolo.
(A) Vengono mostrate immagini di ecocardiogramma rappresentativo in modalità M da 2 topi al basale e alla settimana 3 dell'isoproterenol. Nota l'allargamento delle dimensioni interne ventricolari sinistra in entrambi i topi e nello sviluppo della fibrosi endocardiale (freccia rossa) nel #2 del mouse. (B) La macchia tricromatica del ventricolo sinistro di Masson nell'asse corto dimostra un'estesa fibrosi con trattamento isoproterenolo (barra di scala: 2 mm). Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
| Peso corporeo (g) | Dosaggio giornaliero (g/giorno) | Velocità di flusso (L/giorno) | Concentrazione (L/giorno) | Isoproterenol (mg/120 -l) |
| 20 | 600 | 2.64 | 227 | 27.3 |
| 21 | 630 | 2.64 | 239 | 28.6 |
| 22 | 660 | 2.64 | 250 | 30 |
| 23 | 690 | 2.64 | 261 | 31.4 |
| 24 | 720 | 2.64 | 273 | 32.7 |
| 25 | 750 | 2.64 | 284 | 34.1 |
| 26 | 780 | 2.64 | 295 | 35.4 |
| 27 | 810 | 2.64 | 307 | 36.8 |
| 28 | 840 | 2.64 | 318 | 38.2 |
| 29 | 870 | 2.64 | 330 | 39.5 |
| 30 | 900 | 2.64 | 341 | 40.9 |
Tabella 1: Concentrazione di Isoproterenol e preparazione per pesi corporei rappresentativi alla velocità di pompa osmotica di 30 mg/kg/giorno. Questa tabella è stata adattata con il permesso di Wang et al.2 e Chang et al.15.
File supplementare. Fare clic qui per scaricare questo file.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Abbiamo applicato questo metodo a oltre oltre 100 ceppi di topi inbred per valutare gli esiti cardiaci a causa della stimolazione beta-avversa cronica2,13. Differenze significative nella suscettibilità all'isoproterenol sono note per esistere tra i ceppi di topo e possono essere personalizzate in base alla tensione di interesse in base alle esigenze16. Ciò può essere dovuto alla variazione della funzione del recettore beta-adrenergico tra i ceppi di topo17, differenze dipendenti dalla tensionenell'attivitàdel sistema nervoso autonomo 16 , densità del recettore beta-adrenergico (beta-AR) e/o accoppiamento17 e altre differenze genetiche tra i ceppi. Basato sull'ecocardiografia seriale in vivo e sull'istologia e l'espressione genica del tessuto cardiaco ex vivo con e senza ISO, il trattamento cronico dell'isoprorenolo ha indotto differenze sorprendenti che vanno dai processi cellulari, dalla matrice extracellulare all'infiammatorio risposte2,13. Le seguenti considerazioni possono essere rilevanti per l'applicazione di questo modello di insufficienza cardiaca.
Quasi il 30% dei topi impiantati con pompa osmotica isoproterenolo è morto prima della fine del protocollo sperimentale2,13. Di questi, oltre il 90% è morto entro le prime 48 ore dopo l'impianto della pompa. Le morti sono apparse ceppo specifico, con BXA-12/PgnJ, BXD-34/TyJ, BTBRT< Inoltre, abbiamo osservato che i topi che pesavano < 20 g avevano una maggiore mortalità post-operatoria precoce (morte entro 48 h). Consentire ai topi di maturare ad almeno 9-10 settimane di età o > 20 g può ridurre al minimo la mortalità post-operatoria precoce. Pertanto, può essere importante tenere conto delle differenze specifiche di sforzo e della mortalità post-operatoria precoce durante la pianificazione di un esperimento. Non abbiamo eseguito un'autopsia per determinare la causa della morte. Quindi, non siamo in grado di determinare il tasso di guasto delle pompe osmotiche. Dei topi che sono stati sacrificati non abbiamo rilevato difetti visivi.
Isoflurane è noto per essere negativamente cronotropico e inotropico. Occorre prestare attenzione a ridurre al minimo la sedazione e l'impatto dell'isoflurane sulle misurazioni ecocardiografiche. Se lo sterno proietta un'ombra ossea e degrada le qualità dell'immagine, riposiziona il mouse per illuminare il cuore attraverso uno spazio intercostale diverso. Se la misurazione dello spessore della parete interventricolare è complicata dalla presenza della parete ventricolare destra, ri-immagine attraverso un diverso spazio intercostale per ridurre al minimo i bordi mal delineati. Misurazioni accurate sono fondamentali per analisi comparative a valle.
Esiste letteratura che documenta l'uso di minipumps osmotiche nei ratti18,19. I lettori dovrebbero notare che questo protocollo è stato utilizzato solo con i topi e che altre letteratura dovrebbero essere citate per la sperimentazione con altre specie.
Letteratura passata suggerisce che iniezioni giornaliere di isoproterenolo e somministrazione continua tramite pompe osmotiche causano simile peso ventricolare rispetto al peso corporeo20. Tuttavia, ci sono differenze nell'emodinamica. Le iniezioni giornaliere causano ipotensione immediata e tachicardia seguita da ipertensione di rimbalzo entro poche ore. La somministrazione continua provoca ipotensione immediata il giorno dell'impianto della pompa seguita dalla normalizzazione della pressione sanguigna all'ipertensione lieve entro il giorno 220. Le tendenze emodinamiche complessive imitano più da vicino gli ormoni simpatici attivati cronicamente nei pazienti con insufficienza cardiaca.
Alla settimana 1 di isoproterenol, la contrattilità è stata aumentata o supernormale. Alla settimana 2 e 3, la contrattilità era tornata alla normalità per la maggior parte delle varietà e diminuita per alcuni ceppi. Sullo sfondo dell'isoproterenolo in corso, la normale contrattilità misurata dall'accorciamento frazionario (FS) e la frazione di espulsione (EF) possono, infatti, rappresentare una riserva contrattuale compromessa. Se l'sperimentatore desidera indurre un grado più profondo di compromissione cardiaca, si può aumentare il dosaggio ISO o allungare il periodo di trattamento ISO a 4 settimane, mentre pesa il rischio di una maggiore mortalità post-operatoria. Infine, i dati che abbiamo presentato erano basati solo su topi femminili. I topi femmine hanno dimostrato una maggiore funzione contrattile post-ischemica e minore esaurimento ATP in un modello di lesioni da reperfusione di ischemia rispetto ai topi maschi21. Inoltre, in un modello ISO cronico, i topi maschi hanno dimostrato un elevato rapporto cuore-peso corporeo e ridotto i livelli totali di noradrenalina nelle ghiandole parotidi e submasillarie rispetto alle femmine22. L'utente potrebbe avere bisogno di considerare le differenze di genere nei risultati osservati quando si applica questo approccio a femmine e maschi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Acknowledgments
Gli autori riconoscono NIH K08 HL133491 per il sostegno al finanziamento.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Micro-Osmotic Pump System with Flow Moderator in Place | Alzet | Model 1004 | Includes filling tube, flow moderator and pump body |
| (-)-Isoproterenol hydrochloride | Sigma-Aldrich | 16504-1G | (-)-Isoproterenol hydrochloride is a powder that needs to be stored at -20°C. |
| 1 ml sterile syringe | VWR | BD309602 | |
| 30 W LED Fiber optic O-ring light microscope illuminator | AmScope | SKU: LED-30WR | |
| 5-0 COATED VICRYL (polyglactin 910) Suture | Ethicon | J303H | 5-0, absorbable |
| Fine Scissors - Sharp | FST | 14060-09 | |
| Glass beads | FST | 18000-46 | |
| Hot bead sterilizers | FST | 18000-50 | |
| Iris forceps | WPI | 15915 | |
| Look Sharpoint 6-0, 18" Black Nylon Monofilament Suture | LOOK | AA-2176 | 6-0, non-absorbable |
| Needle holder | WPI | 15926 | |
| Normal Saline, 0.9% NaCl | Fisher | 89167-772 |
References
- Hartupee, J., Mann, D. L. Neurohormonal activation in heart failure with reduced ejection fraction. Nature Review Cardiology. 14 (1), 30-38 (2017).
- Wang, J. J., et al. Genetic Dissection of Cardiac Remodeling in an Isoproterenol-Induced Heart Failure Mouse Model. PLoS Genetics. 12 (7), 1006038 (2016).
- Balakumar, P., Singh, A. P., Singh, M.
- Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present. Circulation: Heart Failure. 2 (2), 138-144 (2009).
- Huang, W. Y., Aramburu, J., Douglas, P. S., Izumo, S. Transgenic expression of green fluorescence protein can cause dilated cardiomyopathy. Nature Medicine. 6 (5), 482-483 (2000).
- Breckenridge, R. Heart failure and mouse models. Disease Model and Mechanism. 3 (3-4), 138-143 (2010).
- Wittstein, I. S., et al. Neurohumoral features of myocardial stunning due to sudden emotional stress. New England Journal of Medicine. 352 (6), 539-548 (2005).
- Templin, C., et al. Clinical Features and Outcomes of Takotsubo (Stress) Cardiomyopathy. New England Journal of Medicine. 373 (10), 929-938 (2015).
- Shao, Y., et al. A mouse model reveals an important role for catecholamine-induced lipotoxicity in the pathogenesis of stress-induced cardiomyopathy. European Journal of Heart Failure. 15 (1), 9-22 (2013).
- Kudej, R. K., et al. Effects of chronic beta-adrenergic receptor stimulation in mice. Journal of Molecular Cell Cardiology. 29 (10), 2735-2746 (1997).
- Zhuo, X. Z., et al. Isoproterenol instigates cardiomyocyte apoptosis and heart failure via AMPK inactivation-mediated endoplasmic reticulum stress. Apoptosis. 18 (7), 800-810 (2013).
- El-Demerdash, E., Awad, A. S., Taha, R. M., El-Hady, A. M., Sayed-Ahmed, M. M. Probucol attenuates oxidative stress and energy decline in isoproterenol-induced heart failure in rat. Pharmacology Research. 51 (4), 311-318 (2005).
- Rau, C. D., et al. Mapping genetic contributions to cardiac pathology induced by Beta-adrenergic stimulation in mice. Circulation Cardiovascular Genetics. 8 (1), 40-49 (2015).
- Berthonneche, C., et al. Cardiovascular response to beta-adrenergic blockade or activation in 23 inbred mouse strains. PLoS One. 4 (8), 6610 (2009).
- Chang, S. C., Ren, S., Rau, C. D., Wang, J. J. Isoproterenol-Induced Heart Failure Mouse Model Using Osmotic Pump Implantation. Methods Molecular Biology. 1816, 207-220 (2018).
- Shusterman, V., et al. Strain-specific patterns of autonomic nervous system activity and heart failure susceptibility in mice. American Journal of Physiology-Heart Circulation Physiology. 282 (6), 2076-2083 (2002).
- Faulx, M. D., et al. Strain-dependent beta-adrenergic receptor function influences myocardial responses to isoproterenol stimulation in mice. American Journal of Physiology-Heart Circulation Physiology. 289 (1), 30-36 (2005).
- Zhang, G. X., et al. Cardiac oxidative stress in acute and chronic isoproterenol-infused rats. Cardiovascular Research. 65 (1), 230-238 (2005).
- Boluyt, M. O., et al. Isoproterenol infusion induces alterations in expression of hypertrophy-associated genes in rat heart. American Journal of Physiology. 269 (2), Pt 2 638-647 (1995).
- Hohimer, A. R., Davis, L. E., Hatton, D. C. Repeated daily injections and osmotic pump infusion of isoproterenol cause similar increases in cardiac mass but have different effects on blood pressure. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 83 (2), 191-197 (2005).
- Cross, H. R., Murphy, E., Koch, W. J., Steenbergen, C. Male and female mice overexpressing the beta(2)-adrenergic receptor exhibit differences in ischemia/reperfusion injury: role of nitric oxide. Cardiovascular Research. 53 (2), 662-671 (2002).
- Klingman, G. I., McKay, G., Ward, A., Morse, L. Chronic isoproterenol treatment of mice: effects on catecholamines and rectal temperature. Journal of Pharmaceutical Sciences. 62 (5), 798-801 (1973).
