Микрорентгенй компьютерной томографии эффективен в получении трехмерной информации от неповрежденных образцов человека, но имеет ограниченный успех в наблюдении мягких тканей. Использование фосхотунгстовой кислоты контрастный агент может решить эту проблему. Мы внедрили этот контрастный агент для изучения тонких фибромышечных тканей человека (орбикулярная сохранительная связка).
Ручное вскрытие и гистологическое наблюдение являются распространенными методами, используемыми для исследования тканей человека. Однако ручное вскрытие может повредить хрупкие структуры, в то время как обработка и гистологическое наблюдение предоставляют ограниченную информацию посредством поперечного сечения. Микрорентгенй компьютерной томографии (microCT) является эффективным инструментом для получения трехмерной информации без повреждения образцов. Тем не менее, он показывает ограниченную эффективность в дифференциировании мягких частей ткани. Использование контрастно-улучшающих агентов, таких как фосхотунгстовая кислота (ПТА), может решить эту проблему путем улучшения контраста мягких тканей. Мы внедрили микроКТ с PTA для исследования человеческой orbicularis сохраняя связки (ORL), которая является деликатной структурой в области орбиты. В этом методе собранные образцы фиксируются в формалине, обезвоживаются в серийных растворах этанола и окрашиваются раствором PTA. После окрашивания проводится микрокт-сканирование, 3D-реконструкция и анализ. Кожа, связки и мышцы могут быть четко визуализированы с помощью этого метода. Размер образца и продолжительность окрашивания являются существенными особенностями метода. Толщина подходящего образца составляла около 5-7 мм, выше которых процесс замедлился, а оптимальная продолжительность составляла 5-7 дней, ниже которых время от времени происходило пустое отверстие в центральной части. Для поддержания расположения и направления мелких кусочков во время резки рекомендуется шитье на одной и той же области каждой части. Кроме того, для правильной идентификации каждой части необходим предварительный анализ анатомической структуры. Parafilm может быть использован для предотвращения сушки, но следует позаботиться о предотвращении искажения образца. Наше многонаправленное наблюдение показало, что ORL состоит из многослойной сетки непрерывных пластин, а не нитевидных волокон, как сообщалось ранее. Эти результаты свидетельствуют о том, что микрокТ-сканирование с помощью ПТА полезно для изучения конкретных отсеков в сложных структурах тканей человека. Это может быть полезно в анализе раковых тканей, нервных тканей и различных органов, как сердце и печень.
Ручное вскрытие и гистологическое наблюдение обычно используются для изучения тканей человека, таких как мышцы и соединительные ткани. Тем не менее, ручное вскрытие может легко повредить деликатные структуры, и гистологическое наблюдение предоставляет ограниченную информацию о плоских поперечных поверхностях1,2. Поэтому необходимы усовершенствованные методы для более точного и эффективного изучения тканей.
Обычная компьютерная томография (КТ) обычно используется в клинической практике, но ей не хватает способности различать небольшие структуры2,3. Микрорентгеновская КТ (микроКТ) является эффективным инструментом для получения трехмерной (3D) информации о мелких структурах из образцов, не разрушая их. Тем не менее, microCT имеет ограниченное применение, потому что только плотные ткани могут быть визуализированы четко; он не может быть использован для дифференциации мягких тканей. Чтобы преодолеть это ограничение, окрашивающие агенты могут быть использованы. Контрастно-улучшающие агенты, такие как фосхотунгстовая кислота (ПТА), фосфомоллипидная кислота и йод Лугола, улучшают скорость контрастности мягких тканей при сканировании4,5. Несколько исследований, сравнивая эти агенты показывают, что PTA демонстрирует хорошую производительность и легко обрабатывать6,7,8.
Orbicularis сохраняя связки (ORL) является деликатной структурой вокруг орбиты, которые могут быть легко повреждены во время обычного наблюдения9. Мы изучили и успешно извлекли 3D-информацию об этой структуре с помощью микроКТ с PTA в качестве контрастного агента. Этот метод может быть применен к исследованиям на других человеческих тканях, таких как сердце и печень, с соответствующими изменениями10,11,12.
Мы внедрили микроКТ с препаратом ПТА при изучении мягких тканей человека. Вкратце, образцы собирают и фиксируют в формалине в течение нескольких дней, а затем обезвоживание в серийных растворах этанола. Размещение образца в раствор PTA непосредственно после фиксации формалина может при…
The authors have nothing to disclose.
Это исследование было поддержано профессорско-преподавательским составом Медицинского колледжа Университета Yonsei (6-2018-0099). Авторы благодарят людей, которые очень щедро пожертвовали свои тела в Медицинский колледж Университета Yonsei. Мы благодарны Чжун Хо Киму и Чон Хо Бангу за их техническую поддержку (сотрудники Центра обучения хирургической анатомии в Медицинском колледже Университета Енсея). Мы также благодарны Genoss Co., Ltd. за высококачественную систему микрокт-сканирования, используемую в этом исследовании.
12 Tungsto(Ⅵ)phosphoric acid n-hydrate Phosphotungstic acid |
Junsei | 84220-0410 | PTA powder |
CTvox | Bruker | ver 2.7 | 3D recon software |
Nrecon | Bruker | ver 1.7.0.4 | Reconstruction software |
Skyscan | Bruker | 1173 | MicroCT scanner |
Tconv | Bruker | ver 2.0 | File resizing software |