Summary
यह लेख चूहों में मायोकार्डियल क्रायोरियकेज के बाद कार्डियक रीमॉडेलिंग का अध्ययन करने के लिए एक मॉडल को दर्शाता है।
Abstract
पशु मॉडल का उपयोग तीव्र कोरोनरी सिंड्रोम और इसकी जटिलताओं के लिए नई चिकित्सीय रणनीतियों के विकास के लिए आवश्यक है. इस लेख में, हम एक murine cryoinjury infarct मॉडल है कि उच्च reproducibility और प्रतिकृतिता के साथ सटीक infarct आकार उत्पन्न करता है प्रदर्शित करता है. संक्षेप में, जानवर के intubation और sternotomy के बाद, दिल छाती से उठाया जाता है. एक हाथ में तरल नाइट्रोजन वितरण प्रणाली की जांच को क्रायोरिय चोट पैदा करने के लिए मायोकार्डियल दीवार पर लागू किया जाता है। बिगड़ा वेंट्रिकुलर समारोह और विद्युत चालन इकोकार्डियोग्राफी या ऑप्टिकल मानचित्रण के साथ नजर रखी जा सकती है। infarcted क्षेत्र के Transmural मायोकार्डियल remodeling कोलेजन जमाव और cardiomycytes के नुकसान की विशेषता है. अन्य मॉडलों की तुलना में (उदाहरण के लिए, लाड-लिगेशन), इस मॉडल को और अधिक वर्दी infarct आकार उत्पन्न करने के लिए एक हाथ में तरल नाइट्रोजन वितरण प्रणाली का इस्तेमाल करता है।
Introduction
तीव्र कोरोनरी सिंड्रोम (एसीएस) पश्चिमी दुनिया 1,2में मौत के प्रमुख कारण है। कोरोनरी धमनियों के तीव्र कब्जे से इस्कीमिक झरना और प्रभावित हृदय ऊतक3के परिगलन को सक्रिय किया जाता है . क्षतिग्रस्त मायोकार्डियम धीरे-धीरे गैर-संकुचनीय निशान ऊतक द्वारा प्रतिस्थापित किया जाता है, जो दिल की विफलता के रूप में नैदानिक रूप से प्रकट होता है4,5. एसीएस के उपचार में हाल ही में प्रगति के बावजूद, ACS और ACS से संबंधित दिल की विफलता की व्यापकता बढ़ रही है, और चिकित्सीय विकल्प सीमित हैं6,7. इसलिए, ACS और इसकी जटिलताओं का अध्ययन करने के लिए पशु मॉडल विकसित करना बहुत रुचि का है।
तारीख करने के लिए, सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया पशु मॉडल ACS और ACS प्रेरित मायोकार्डियल remodeling अध्ययन करने के लिए छोड़ दिया उतरते कोरोनरी धमनी (एलएडी) का लिगेशन है। एलएडी का लिगेशन एसीएस के दौरान मानव मायोकार्डियल ऊतक के समान मायोकार्डियम के तीव्र इस्कीमिया की ओर जाता है। हालांकि, असंगत infarct आकार LAD ligation के Achilles एड़ी रहते हैं. लाड की शल्यिक परिवर्तन और शारीरिक परिवर्तनशीलता के कारण असंगत अकर्मक ताक आकार मिलता है और इस प्रक्रिया की पुनरुत्पाद्यता तथा प्रतिकृतितामेंबाधा उत्पन्न होती है. इसके अलावा, लाड लिगेशन में एक उच्च अंतर-और पोस्टसर्जिकल मृत्यु दर होती है। प्रजनन क्षमता में सुधार और मृत्यु दर को कम करने के लिए हाल के प्रयासों के बावजूद11,12,जानवरों की बड़ी संख्या अभी भी ठीक से विरोधी remodeling उपचार का मूल्यांकन करने की जरूरत है.
हाल के वर्षों में एसीएस के वैकल्पिक मॉडलों का प्रस्ताव किया गया है और इसका अध्ययन किया गया है , जिनमें रेडियो आवृत्ति13, थर्मल14 या क्रायोजेनिक चोटें15,16,17,18शामिल हैं . वर्तमान क्रायोइंजरी विधियां तरल नाइट्रोजन में धातु की छड़ को पूर्व ठंडा करने के लिए विषय के हृदय ऊतक15,16को नुकसान पहुंचाती हैं। हालांकि, इस प्रक्रिया को पर्याप्त infarct आकार जनरेट करने के लिए कई बार दोहराया जा करने के लिए की आवश्यकता है। ऊतक की तुलना में उच्च चालकता और छड़ी की कम गर्मी क्षमता के कारण, जांच जल्दी गर्म हो जाती है, और ऊतक ठंडा हो जाता है (और इस प्रकार infarcted) विषमता से। इन सीमाओं को दूर करने के लिए, हम यहाँ एक cryoinfarction मॉडल एक हाथ से आयोजित तरल नाइट्रोजन वितरण प्रणाली का उपयोग वर्णन. इस मॉडल reproduible, प्रदर्शन करने के लिए आसान है और तेजी से और मज़बूती से स्थापित किया जा सकता है. कोरोनरी शरीर रचना विज्ञान से स्वतंत्र एक पुन: उत्पादन ीय ट्रांसम्योरल अफ़सर घाव उत्पन्न होता है, जो अंततः हृदय विफलता की ओर जाता है। इस विधि उपन्यास चिकित्सीय औषधीय और ऊतक इंजीनियरिंग आधारित रणनीतियों के मूल्यांकन के लिए remodeling प्रक्रिया का अध्ययन करने के लिए विशेष रूप से उपयुक्त है.
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Protocol
पशु प्रयोगशाला पशु संसाधन संस्थान द्वारा तैयार प्रयोगशाला पशु के सिद्धांतों के लिए गाइड के अनुपालन में मानवीय देखभाल प्राप्त की, और स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों द्वारा प्रकाशित. सभी पशु प्रोटोकॉल जिम्मेदार स्थानीय प्राधिकरण (कैलिफोर्निया सैन फ्रांसिस्को विश्वविद्यालय (UCSF) संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया.
1. पशु देखभाल
- लगभग 27 ग्राम वजन के 14 सप्ताह की उम्र में चूहों को प्राप्त करें (जैसे, प्रयोगशाला पशु संस्थान से)।
नोट: BALB/c चूहे इस आलेख के लिए उपयोग किए जाते हैं। - हवादार अलमारियाँ में पारंपरिक परिस्थितियों में चूहों रखें, उन्हें मानक चूहों चाउ खिला और autoclaved पानी ad libitum.
2. माउस की तैयारी
- isoflurane (3.5%) के साथ माउस anaesthetize माउस के लिए एक प्रेरण कक्ष का उपयोग करें.
- छाती और गर्दन पर एक बाल ट्रिमर का उपयोग कर बाल निकालें.
- माउस को गर्म पैड पर सुपाच्य स्थिति में रखें और मुंह और माउस की नाक को कवर करने वाले फेसमास्क के साथ संज्ञाहरण बनाए रखें।
- सजगता की अनुपस्थिति को सत्यापित करने के लिए पिछले पैर और पूंछ pinching द्वारा संज्ञाहरण की पर्याप्त गहराई के लिए जाँच करें।
- एनेल्जेसिया के लिए उपस्तीय ब्यूप्रेनर्फिन (0.03 मिलीग्राम/किग्रा) इंजेक्शन।
- पिछले और फोर अंग फैलाएं और टेप का उपयोग करके उनकी स्थिति को ठीक करें।
- पोविडोन आयोडीन के साथ, मुंडा क्षेत्र को कीटाणुरहित करें, इसके बाद 80% इथेनॉल के साथ स्क्रबिंग करें। इस चरण को दो बार दोहराएँ.
- एक छोटी कैंची का प्रयोग करने के लिए एक midline त्वचा अध्ली त्वचा को स्टर्नम के निचले तीसरे से ठोड़ी तक चीरा बनाने के लिए.
- घुमावदार संदंश का प्रयोग करें और ध्यान से श्वासनली को बेनकाब करने के लिए गर्दन के चारों ओर की मांसपेशियों को अलग करें।
- दूसरे और तीसरे उपास्थि के छल्ले के बीच एक tracheotomy प्रदर्शन करने के लिए एक माइक्रो-कैंची का प्रयोग करें।
- वेंटीलेटर को 0.5 एमएल की ज्वारीय मात्रा के साथ 110/मिनट की वेंटिलेशन आवृत्ति पर सेट करें।
- फेसमास्क निकालें और एक प्लास्टिक कैनुला (20 जी) डालें, वेंटीलेटर से जुड़े, श्वासनली में। जानवर को हवादार करें।
नोट: सुनिश्चित करें कि वेंटिलेशन कैनुला द्विपक्षीय फेफड़ों के वेंटिलेशन की पुष्टि करके बहुत गहरा नहीं डाला जाता है। - तीसरे और सातवें पसलियों के बीच अपने स्टर्नल मूल से सही पेक्टोरेलिस मांसपेशियों को अलग करने के लिए कॉटरी का उपयोग करें।
- पक्ष angled वसंत कैंची का प्रयोग करने के लिए कड़ी के रूप में संभव के रूप में बंद के रूप में चौथे से छठी पसलियों में कटौती.
- यदि रक्तस्राव दिखाई देता हैतो स्तन धमनी को काट नाश करें.
- कमी 2.5% करने के लिए isoflurane है।
- छाती गुहा में एक स्पष्ट दृश्य प्राप्त करने के लिए अंतर्निहित संयोजी ऊतक को अलग करना.
- pericardium खोलने के लिए और दिल का पर्दाफाश करने के लिए कुंद forceps का प्रयोग करें.
- पसलियों को फैलाने और छाती गुहा को खुला रखने के लिए एक मिनी गोल्डस्टीन रिट्रैक्टर का उपयोग करें।
- एक कुंद छड़ी के साथ वक्ष गुहा से दिल लिफ्ट.
- छाती खोलने को कम करने और वापस गिरने से दिल रखने के लिए आकुंचक के तनाव को कम करें।
- 10 s के लिए क्राइप्रोब (3 मिमी व्यास) को पहले से ठंडा करें।
- पूर्वकाल बाएं वेंट्रिकल दीवार पर क्राइप्रोब लागू करें और बाएं वेंट्रिकुलर क्रायो-जर्ट-इंफर्ट उत्पन्न करने के लिए 10 एस के लिए फ्रीज करें।
नोट: cryoprobe वैज्ञानिक प्रश्न और जरूरत के आधार पर अलग दिल की दीवारों के लिए लागू किया जा सकता है. - बाएं वेंट्रिकुलर दीवार से जांच को अलग करने के लिए कमरे के तापमान नमकीन के साथ क्राइप्रोब को उत्तेजित करें।
- छाती खोलने विस्तार करने के लिए रिट्रैक्टर का उपयोग करें।
- धीरे से एक कुंद छड़ी के साथ वक्ष गुहा के लिए दिल वापस.
- रिट्रैक्टर निकालें और 6-0 सीवन का उपयोग कर एक एकल गाँठ के साथ स्टर्नोटोमी कनेक्ट।
- 6-0 चल सीवन का उपयोग कर छाती गुहा बंद करो. गाँठ बांधने से पहले छाती से किसी भी शेष हवा को खाली करने के लिए 10 एमएल सिरिंज का उपयोग करें।
- पुच्छ किनारे पर त्वचा को अनुकूलित करें और सीवन (5-0) के साथ श्वासनली खोलने के बिंदु पर सीवन करें।
- सेट 1.5% करने के लिए isoflurane और पशु लाभ सहज साँस लेने तक प्रतीक्षा करें.
- श्वासनली कैथेटर निकालें और संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए पशु मुंह और नाक पर facemask फिर से लागू करें।
- एक 8-0 के साथ श्वासनली चीरा बंद करें टांका.
- अधर गर्दन की मांसपेशियों को वापस ट्रेकिया को कवर करने के लिए उनकी स्थिति में पुन: स्थिति।
- त्वचा सीवन को पूरा करें।
- 3 दिनों के लिए दर्द analgesia के लिए पीने के पानी (50 मिलीग्राम metamizole प्रति 100 एमएल) के लिए metamizole जोड़ें और पशु दैनिक की निगरानी.
नोट: इस मॉडल के लिए अवलोकन अवधि 8 सप्ताह है। analgesia आहार के बारे में अपनी संस्था के दिशा निर्देशों का पालन करने के लिए सुनिश्चित करें.
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Representative Results
क्रायोइनरी इनफैक्स्ट मॉडल एसीएस और इसकी जटिलताओं का अध्ययन करने के लिए उपयुक्त है। कम मृत्यु दर और कुशल postsurgical वसूली इस मॉडल में देखा जाता है. Cryoinjury प्रेरित मायोकार्डियल क्षति कम हृदय समारोह की ओर जाता है, बिजली uncoupling, और transmural remodeling.
इकोकार्डियोग्राफी का उपयोग विवो में बेरोक-तरह के कार्डियक फ़ंक्शन की निगरानी करने के लिए किया जा सकता है। क्रायो-घायल हृदयों में, इकोकार्डियोग्राफी दर्शाता है कि काफी कम निष्कासन अंश और आंशिक क्षेत्र परिवर्तन(चित्र 1ए-सी)। कार्यात्मक हानि 56 दिनों के अवलोकन समापन बिंदु तक 7 दिन के बाद सर्जरी से जारी है.
विस्तृत हृदय समारोह दबाव मात्रा पाश (पीवी पाश) विश्लेषण के माध्यम से आक्रामक मूल्यांकन किया जा सकता है। एक 1.2 Fr चालकता कैथेटर बाएं वेंट्रिकल में पेश किया है, और बाएं वेंट्रिकुलर दबाव बाएं वेंट्रिकुलर मात्रा के खिलाफ साजिश रची है. हेमोडायनामिक पैरामीटर जैसे स्ट्रोक की मात्रा, स्ट्रोक का काम, हृदय उत्पादन, और प्रीलोड-समायोजित अधिकतम शक्ति की गणना की जा सकती है। चित्र 1डी-एचमें दिखाया गया है के रूप में, cryoinfarction बिगड़ा बाएँ वेंट्रिकल की ओर जाता है (LV0 समारोह, जो स्ट्रोक की मात्रा में कमी के रूप में परिलक्षित होता है, स्ट्रोक काम, हृदय उत्पादन और preload समायोजित अधिकतम शक्ति.
कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी का अध्ययन करने के लिए, ऑप्टिकल मैपिंग पूर्व विवो किया जा सकता है। दिल निकाल रहे हैं, Langendorff perfusion तकनीक के साथ perfused, और एक फ्लोरोसेंट वोल्टेज संवेदनशील डाई के साथ दाग. क्राइओनिज़नदिल दिल चोट के सीमा पर विद्युत चालन की रुकावट को प्रदर्शित करता है, जो स्थानीय विद्युत असहयोग का संकेत देता है (चित्र 1i)।
मैसन की ट्राइक्रोम के साथ हिस्टोलॉजिकल दाग चोट के स्थल पर ट्रांसम्यूरल फाइब्रोटिक ऊतक गठन को दर्शाता है (चित्र 2एक)। अफ़क के आकार की गणना अफ़ास्क्ट निशान क्षेत्रया या मिडलाइन निशान लंबाई19 (चित्र 2ख) को मापने के द्वारा की जा सकती है। अल्फा-सार्कोसाइट ऐक्टिनिन (कार्डियोमायोसाइट मार्कर) और कोलेजन के खिलाफ इम्यूनोफ्लोरेसेंस ी लग रहा है- मैं चोट के स्थल पर फाइब्रोटिक रिमॉडेलिंग और कार्डियोमायोसाइट्स के नुकसान की पुष्टि करता हूं (चित्र 2ग)।
चित्र 1 : क्रायोनिशल दिल का कार्यात्मक और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल विश्लेषण। प्रतिनिधि दो आयामी इकोकार्डियोग्राफी छवियों पूर्व ऑपरेटिव (D0) लिया और बाद में ऑपरेटिव दिन 7 (D7), 28 (D28), और 56 (D56). (क)शीर्ष पैनल अंत-डायस्टोल में पराशरीय दीर्घ अक्ष दृश्य और अंत-स्टोल में नीचे पैनल को दर्शाता है। (ख, ग) निष्कासन अंश (ईएफ) और आंशिक क्षेत्र परिवर्तन (FAC) क्रायो-इंफार्क्शन के बाद कमी और समय के साथ कम बने कार्डिएक समारोह दबाव मात्रा वक्र विश्लेषण द्वारा आक्रामक मूल्यांकन किया गया था. (डी-जी) दिन 56 पोस्ट चोट स्ट्रोक की मात्रा (एसवी), स्ट्रोक काम (एसडब्ल्यू), हृदय उत्पादन (सीओ), और preload समायोजित अधिकतम शक्ति (PAMP) पूर्व ऑपरेटिव देशी जानवरों की तुलना में काफी कम थे. (ज)देशी और 56 दिनों के बाद सर्जरी जानवरों से प्रतिनिधि पीवी-लूप्स ने वक्ष वेना कैवा (टीवीसी) के बाद दबाव संकेत के आयाम में विशेषता सही बदलाव और गिरावट दिखाई। (२) देशी और क्रायोनिसेज दिल से कार्डियक ऑप्टिकल मैपिंग का आइसोक्रोन मानचित्र 14 दिन बाद सर्जरी के बाद। ऊपर और नीचे पैनलों क्रमशः शीर्ष और आधार से पुस्तक दिल दिखाते हैं। Infarct क्षेत्र डैश्ड सफेद रेखा से चिह्नित है। अंतरसमूह मतभेदों का मूल्यांकन बोनफेरोनी के पोस्ट-हॉक टेस्ट या छात्र के टी-टेस्टके साथ प्रसरण (एनोवा) के एक-तरफा विश्लेषण द्वारा किया गया था। N ] 3 जानवर. * p और 0.05 इंगित करता है। त्रुटि पट्टियाँ मानक विचलन (SD) का प्रतिनिधित्व करती हैं. ESPVR ] अंत-systolic दबाव मात्रा संबंध; EDPVR ] अंत-डायस्टोलिक दबाव मात्रा संबंध. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 2 : देशी और क्रायो घायल दिल के हिस्टोलॉजिक मूल्यांकन. (क)मैसन का ट्राइक्रोम धुंधलान से पता चलता है कि अफ़सोसित क्षेत्र में कोलेजन निक्षेप (हरा) है। बायां वेंट्रिकल का अखंड प्रतिशत (ख) क्षेत्रफल और (ग) मध्य रेखा की दूरी के रूप में मापा गया था। (घ)इम्यूनोफ्लूओर्सेंस धुंधला, असंकारक क्षेत्र में कार्डियोमायोसाइट्स के सहवर्ती हानि के साथ कोलेजन-I जमाव को दर्शाता है। एल.वी. - छोड़ दिया वेंट्रिकल; आर.वी. - सही निलय; अंत:प्रावरणी; अधिप्रावरक N ] 3 जानवर. त्रुटि पट्टियाँ SD दिखाती हैं. कृपया इस आकृति का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
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Discussion
यह लेख ACS और संबंधित औषधीय और चिकित्सीय विकल्पों की जांच करने के लिए एक माउस cryoinjury मॉडल का वर्णन करता है.
सबसे महत्वपूर्ण कदम हृदय ऊतक पर क्रायोप्रोब का अनुप्रयोग है। संपर्क अवधि को इष्टतम infarct आकार प्राप्त करने के लिए और पुन: उत्पादन योग्य परिणामों की गारंटी के लिए कसकर नियंत्रित किया जाना चाहिए। मायोकार्डियम के लंबे समय तक ठंडा oversized infarcts या वेंट्रिकुलर वेध के लिए नेतृत्व करेंगे. इसके विपरीत, छोटा ठंडा समय सीमित epicardial घावों उत्पन्न करता है और सभी निवासी कोशिकाओं को खत्म नहीं करता है. इसलिए, यह confounding हो सकता है जब पुनर्योजी सेल प्रत्यारोपण का अध्ययन.
अन्य cryoinfarction तरीकों की तुलना में20,खुले सीने दृष्टिकोण इस लेख में वर्णित लाभ है कि infarct दिल के विभिन्न पदों पर स्वतंत्र रूप से प्रेरित किया जा सकता है. इसके अलावा, इस दृष्टिकोण चिकित्सकीय सेल इंजेक्शन या पैच अनुप्रयोगों की सुविधा, के रूप में infarct सीमा दिखाई देता है, और सेल प्रत्यारोपण की साइट तदनुसार चुना जा सकता है.
इस मॉडल का एक दोष मायोकार्डियल चोट के ईटियोलॉजी है। क्रायोइनरी के परिणामस्वरूप बर्फ क्रिस्टल की पीढ़ी के कारण कोशिका मृत्यु होती है जो सीधे इस्कीमिया के बजाय कोशिका झिल्ली को बाधित करती है। इसके अलावा, चोट की दिशा आमतौर पर एपिकार्डियम आवक से होती है, जबकि इस्कीमिक इंफर्टएंडोकार्डियल से एपिकार्डियल परत तक बाहर की ओर फैलते हैं। इसलिए, इस मॉडल मायोकार्डियल इस्किमिया के pathophysiological तंत्र का अध्ययन करने के लिए या ischemia-reperfusion सेटिंग की नकल करने के लिए सीमित है।
अंत में, यहाँ वर्णित मॉडल सस्ती है, प्रदर्शन करने के लिए आसान है, तेजी से और मज़बूती से स्थापित किया जा सकता है. कार्डियोमायोसाइट नेक्रोसिस और बाद में निशान गठन समय के साथ विकसित होते हैं, जिसके परिणामस्वरूप प्रगतिशील बिगड़ा पंप समारोह और विद्युत चालकता होती है। अच्छी तरह से नियंत्रणीय infarct आकार, आकार और स्थान इस मॉडल हृदय समारोह या हृदय पुनर्जनन बहाल करने के लिए लक्ष्य प्रयोगात्मक हस्तक्षेप का मूल्यांकन करने के लिए आदर्श बनाते हैं। सफलतापूर्वक परीक्षण उपचार विकल्प आगे बड़े पशु अध्ययन में पुष्टि की जानी चाहिए.
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Disclosures
लेखकों को खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.
Acknowledgments
हम उसे तकनीकी सहायता के लिए Christiane Pahrmann धन्यवाद. D.W. मैक्स Kade फाउंडेशन द्वारा समर्थित किया गया था. टी.डी. अन्य Kr$ner Fondation (2012[EKES.04) और ड्यूश Forschungsgemeinschaft (DE2133/2-1] से अनुदान प्राप्त किया. एस एस ड्यूश Forschungsgemeinschaft (DFG) से अनुसंधान अनुदान प्राप्त किया; SCHR992/3- 1, SCHR992/4-1).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10 ml Syringe | Thermo Scientific | 03-377-23 | |
| 5-0 prolene suture | Ethicon | EH7229H | |
| 6-0 prolene suture | Ethicon | 8706H | |
| 8-0 Ethilon suture | Ethicon | 2808G | |
| Absorption Spears | Fine Science Tools | 18105-01 | |
| BALB/c | The Jackson Laboratory | Stock number 000651 | |
| Bepanthen Eye and Nose ointment | Bayer | 1578675 | Eye ointment |
| Betadine Solution | Betadine Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
| Blunt Forceps | Fine Science Tools | 18025-10 | |
| Buprenex | Reckitt Benckiser | NDC Codes: 12496-0757-1, 12496-0757-5 | Buprenorphine |
| Cryoprobe 3mm | Brymill Cryogenic Systems | Cry-AC-3 B-800 | |
| Ethanol 70% | Th. Geyer | 2270 | |
| Forceps curved | S&T | 00284 | |
| Forceps fine | Fine Science Tools | 11251-20 | |
| Forceps standard | Fine Science Tools | 11023-10 | |
| Gross Anatomy Probe | Fine Science Tools | 10088-15 | |
| Hair clipper | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| High temperature cautery kit | Bovie | 18010-00 | |
| ISOFLURANE | Henry Schein Animal Health | 029405 | |
| IV Catheter 20G | B. Braun | 603028 | |
| Mini-Goldstein Retractor | Fine Science Tools | 17002-02 | |
| NaCl 0.9% | B.Braun | PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160 | saline |
| Needle holder | Fine Science Tools | 12075-14 | |
| Needle Holder, Curved | Harvard Apparatus | 72-0146 | |
| Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
| Operating Board | Braintree Scientific | 39OP | |
| Replaceable Fine Tip | Bovie | H101 | |
| Scissors | Fine Science Tools | 14028-10 | |
| Small Animal Ventilator | Kent Scientific | RV-01 | |
| Spring Scissors - Angled to Side | Fine Science Tools | 15006-09 | |
| Surgical microscope | Leica | M651 | |
| Transpore Surgical Tape | 3M | 1527-1 | |
| Vannas Spring Scissors | Fine Science Tools | 15400-12 | |
| Vaporizer | Kent Scientific | VetFlo-1205S |
References
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