Summary
我们描述了用胃管进行食管导管后新生兔子的内窥管插管技术。
Abstract
新生兔子是各种病理和程序的有用动物模型。兔子的气道管理由于解剖特征复杂，在新生儿的情况下进一步复杂。在先进的气道管理的不同方法中，内窥管插管不如气管切除术具有攻击性，而且由于缺乏如此小尺寸的超高光设备，比超球性管理更可行。由于这种尺寸的动物很难进行直接的球状可视化，这种盲导模型被呈现为一种有效的替代方法，特别是对于需要长时间麻醉的实验。使用此方法，我们进行了盲管，成功率达 90%。
Introduction
兔子呼吸系统的特殊解剖使内窥管插管变得复杂。口腔是深和窄，口腔开放范围有限，舌头相对较大，使喉部的直接可视化困难，即使使用喉镜1，2。此外，新生兔子的管状体比成人小10-20倍，这更是一个具有挑战性的过程。除了这些解剖特征外，兔子还容易在操纵气道时出现喉部扩张。
文献中描述了几种管状技术，如喉镜气管管穿刺、盲管、卵母细胞管、逆行管、内窥镜管、气管切除术和超球装置通气3、4、5、6、7、8、9。所有这些技术都成功地在成年兔子中进行了：然而，关于新生兔10中先进的气道管理的出版物很少。一项研究描述了在这个年龄的动物进行气管切除术，以评估呼吸力学和肺量，虽然这是一个侵略性和不可逆转的技术11。这种内窥管插管方法已被证明是一种有效和低成本的新生儿兔子气道管理方法。
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Protocol
巴塞罗那大学机构动物护理和使用委员会（CEEA 180/19）批准了下文概述的灌进程序
1. 实验准备
- 获得以下材料：直径2毫米的聚氯乙烯（PVC）内脏管、6个法式（Fr）聚氨酯喂食管、扁平宽尖剖肢钳和无菌润滑剂（图1）。
- 在灌管和手术过程中，保持无菌状态。
2. 麻醉
- 麻醉动物与5毫克/千克西拉津和25毫克/公斤氯胺酮一起涂在肌肉内在股骨四头肌的 辽阔的横向 。阿尔法-2激动剂，如德克斯梅托米丁也可以使用，而不是西拉津。
- 允许3-5分钟的药物达到效果。
- 读取相同的剂量，直到深度麻醉实现（负踏板，苍白和角膜反射）。理想情况下，兔子将保持自发呼吸，直到灌管。
3. 内窥管插管
- 将兔子放在37°C的热毯上。 将动物置于多发性腹地，头部处于过度扩张。尽可能将头部对齐为直线和中线。放置在颈部背部区域的无菌纱布制成的四厘米卷可能有助于达到至少45°的延伸（图2）。
- 使用扁平和宽尖切动钳打开约一厘米宽的口腔。使用钝和宽端的钳子，以避免口腔创伤。
- 测量口腔和胃部区域（第一根肋骨）之间的距离。将润滑的 6 法式 （Fr） 聚氨酯胃管引入预测量标记 （图 3-4）。
- 将喂食管向左移动，并用胶带固定到手术场。
- 引入直径为 2 mm 的 PVC 内窥管，用无菌润滑剂覆盖到 3 厘米标记。
- 如果推进管子有任何困难，将其完全移动并重新攻击，直到实现平稳滑翔。喉部和表皮的创伤风险是显著的，多次灌进尝试。用胶带将管子固定到手术场（图5-6）。
- 将内脏管连接到呼吸机，设置如下：潮汐体积 - 10 mL/kg;呼吸速率：40呼吸/分钟：菲奥2 100%， 窥视 6 .
- 通过检测呼出空气中的二氧化碳（ETCO2），直接可视化管的胸腔扩张和雾化，确认管子的正确位置。通过脉搏氧化和肺培养对动物的监测也是有帮助的（图7）。
- 在实验结束时，使用标准化的安乐死协议，包括静脉注射120-240毫克/千克。重复剂量，直到呼吸停止，反射缺失和无符号实现。
注：在手术实验中，动物在通气过程中还活着，最后被安乐死。
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Representative Results
在实验室中，这项技术由具有新西兰兔子实验经验和儿科气道管理专业知识的医务人员进行。该手术由10只动物中的一名调查员进行，全球成功率达90%。此前，另一位研究人员曾练习过优化动物的位置和正确的管固定长度。这些动物都没有在食道中插管。只有一次尝试 （10%）由于动物的极小尺寸（表1）而失败。一旦实行了盲管，在大多数情况下，即使手术是由以前没有接受过兔子气道管理培训的人员进行的，在大多数情况下，第一次尝试就会取得成功。在体重等于或超过120克的动物中，我们一两次尝试成功率达到100%。
图1：实验所需的材料：解剖钳、喂食管、内脏管、无菌润滑剂。请点击这里查看此图的较大版本。
图2：动物在灌输前的位置：多萨尔退位和轻度过度扩张。请点击这里查看此图的较大版本。
图3：用解剖钳子张开嘴，请点击这里查看此图的较大版本。
图4：喂食管引入胃部。请点击这里查看此图的较大版本。
图5-6：内窥管与喂食管一起，盲目地固定在手术场，请点击这里查看此图的较大版本。
图6：固定的内脏管和喂食管。请点击这里查看这个数字的较大版本。
图7：动物与呼吸机相连，请点击这里查看此图的较大版本。
| 动物编号 | 重量 （g） | 成功 | 尝试 | 死亡 |
| 1 | 150 | + | 1 | - |
| 2 | 125 | + | 2 | - |
| 3 | 180 | + | 1 | - |
| 4 | 210 | + | 1 | - |
| 5 | 120 | + | 2 | - |
| 6 | 140 | + | 2 | - |
| 7 | 200 | + | 1 | - |
| 8 | 190 | + | 1 | - |
| 9 | 180 | + | 1 | - |
| 10 | 110 | - | 3 | + |
| 总 | 160.5 | 90% | 1.5 | 10% |
表1：动物样本特征和内窥管插管尝试。
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Discussion
兔子由于其可用性好，繁殖率高，代际时间短，易于处理，在动物实验中被广泛使用。在我们的中心，我们使用5-7天大的新西兰兔子（奥里托拉格斯丘尼库鲁斯）作为新生儿模型来研究体外手术对发育中的大脑的神经影响。因此，我们使用需要深度麻醉的程序，并且必须使用内皮插管长达一个小时。
在成年兔子中，一些气道管理技术被描述，通常是在手术环境中。当我们试图将这些技术推断为兔子套件时，出现了几个问题。兔子体重在110到210克之间，最大口腔开放范围为1厘米。这些特征使喉部的直接可视化变得困难，而且找到足够小的内窥镜材料是很复杂的。文献中描述的另一种选择是将卵母镜放在口腔中，并以此为指南引入PVC管7。在刚出生的兔子中，舌头的存在和嘴的大小都使得直接可视化小兔子变得困难。此外，没有适合新生儿的足够尺寸的超高球装置。
由于上述情况，有两个基本机制，以确保非常小的兔子的气道：气管切除术和盲目的穿管。气管切除术是一种侵入性的方法，已用于成人和新生兔子10，12。它具有直接气管可视化的优点，使程序学家能够识别腹管的确切位置。然而，除了一旦手术完成13次，动物的存活率下降外，还有机械并发症和切口区感染的高风险。内窥镜/纤维光影管是一种无需手术即可直接可视化的方法。预防喉外伤的另一种选择是使用紧身面罩，它有一些额外的缺点，如亚优通风和胃张力。
在实验室中，盲管用于管理新生兔子气道。这种方法在成年兔中被描述为一种可行的技术，成功率高6。在最初的实验中，我们试图在消化道闭塞的情况下执行这项技术。其结果是将内脏管引入食道的比率很高。然而，随着胃管在插管前的插入，90%的病例实现了成功的插管。关于内腔管的大小，我们最初尝试使用直径达14公尺的外围静脉导管，观察插入（刚度较大）和通风困难（直径太小，连接到呼吸机困难）。根据我们的经验，使用2毫米内径内脏管引入不超过3厘米的深度，是通风小兔子最有效的，如正确的气计和ETCO2值所示。虽然成年兔子的灌输通常需要将头部向表的水平表面的 90° 角过度伸展，但我们只能用温和的头部延伸来执行此过程。
执行此程序时需要考虑的重要因素之一是新生兔子气管的易碎性质。考虑到这一点，我们缓慢而小心地引入预润滑管，以避免气管穿孔。我们建议不要将管子插入超过3厘米，因为在练习尝试中发现这是最佳长度，如果程序主义者遇到任何阻力，则停止插管：在这种情况下，最好取出管子，重新开始。我们经历了一例可能气管穿孔在最小的动物群。
该技术的主要局限性是一旦引入内脏管的正确位置的检测难度。根据我们的经验，无电阻装置的推进、适当的ETCO2的检测、通风过程中管子的雾化和胸腔扩张的可视化，以及生命体征的维护，都足以证明该程序在所有情况下是否合适。在一些实验对象中，动脉气合物在通风过程中进行了，显示出足够的二氧化碳和氧气浓度。此外，虽然组织病理学分析没有进行，以前出版的文献描述了气管的粘膜损伤，在没有临床变化继发到灌肠14。
总之，我们描述的新生兔子的孵化模型是一种快速技术，它使用基本用品，并允许有效的通风。我们相信这项技术可以纳入新生儿兔子气道管理的军备库。
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Disclosures
作者没有什么可透露的。
Acknowledgments
这项工作得到了 萨卢德·卡洛斯三世研究所 [PFIS2017-0224]、西班牙社会的"贝卡 · 鲁扎"和范德比尔特医学学者方案的资助。
主办方没有参与数据的收集、分析或解释。
我们要感谢伊莎贝尔·萨拉斯在动物实验室内提供的帮助，感谢来自桑琼·德杜医院的视听技术小组的卡尔斯·费布雷加先生和杰玛·费尔南德斯-阿森西奥女士在录像和制作方面提供的技术支持。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2 mm diameter Polyvinyl Chloride (PVC) endotracheal tube | Vygon | 520.20 | |
| 6 French polyurethane feeding tube | Vygon | 310.06 | |
| Anesthesia (Ketamine and Xylazine) | |||
| Multiparameter monitor Intellivue MP5 | Phillips | ||
| Plain and wide tip dissection forceps | LensforVision | AK005 | |
| Sterile lubricant (Silkospray) | Rush | ||
| Ventilator Servo 900c | Maquet |
References
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